CN105660256A - 一种番茄根结线虫病的生物防治方法及其生防制剂 - Google Patents

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Abstract

一种番茄根结线虫病的生物防治方法及其生防制剂，属于番茄病害防控领域。方法为：番茄育苗时根结线虫拮抗菌定殖、番茄苗大田移栽时根结线虫拮抗菌定殖、番茄植株生长期根结线虫拮抗菌定殖。生防制剂为：番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂和番茄根结线虫拮抗生物有机肥。复合微生物菌剂由褐球固氮菌YKT41、越南伯克霍尔德氏菌P418、绿色木霉LTR-2、绿色木霉L-10和哈茨木霉T11-W五种菌剂中的两种或多种按照一定的比例复配而成。生物有机肥由5～25％的复合微生物菌剂，10～30％的蛋白渣，5～30％的褐煤，10～25％的生化黄腐酸，10～35％的生物炭，再按前述混合料质量比添加0.5％或1.5％或2.5％的碳酸钙配制得到。优点：能有效防治番茄根结线虫病菌的侵染和发病，生态环保，方法简便。

Description

一种番茄根结线虫病的生物防治方法及其生防制剂
技术领域：
本发明属于番茄病害防治领域，具体涉及一种番茄根结线虫病的生物防治方法及其生防制剂。
背景技术：
番茄根结线虫病是近年来危害以番茄为主的蔬菜的一种重要根部病害，主要由南方根结线虫(MeloidogyneincongnitaChitwood)侵染所致。该病主要发生在须根和侧根上。病部肿大成不规则形瘤状结。剖开根结有乳白色或淡黄色雌虫体。根结大小不一，一串串如糖糊芦一般。染病植株发育不良、叶片黄化、瘦弱矮小，生长不良，结果少而小，产量低，果实品质差。干旱时，得病植株易萎蔫，直至整枝枯死，损失严重。该病在温室、大棚和露地等番茄植株上都有发生，特别是在温室条件下四季连续发病，其毁苗重植事件经常发生。因此，这种病害已成为番茄生产中的严重障碍之一。该病除了能危害番茄外，还能危害茄子、黄瓜、莴苣、菜豆、芹菜、辣椒、甘蓝、大白菜等30多种蔬菜。
根结线虫以2龄幼虫或卵随病残体在土壤中越冬；线虫在病株根部生存繁殖并靠病土、病苗及灌溉水等传播。条件适宜时，2龄幼虫接触番茄根部后大多从根尖部侵入，定居在根块生长锥内。最后，线虫在病体内取食、生长发育，并能分泌出刺激物质，使植株根部细胞剧烈增生形成根结。根结线虫大多分布在30cm深的土层内，其中以5～30cm深度内的耕作层土壤中根结线虫群体数量最多。一般地势高燥、土质疏松，湿度适当，盐份低的地块最适于线虫存活。
目前，番茄根结线虫病的防治主要依靠化学农药和农业防治措施。化学农药防治往往造成环境污染并降低番茄品质和食用安全性；农业防治措施费工费时，防治效果普遍不理想。生物防治方法不仅能够有效防治番茄根结线虫病，还能有效保护生态环境，提高番茄品质和食用安全性。开发番茄根结线虫病生物防治方法前景广阔，对番茄种植农户和番茄种植产业良性发展具有重要意义。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种番茄根结线虫病的生物防治方法及其生防制剂。
本发明的番茄根结线虫病的生物防治方法包括：番茄育苗时根结线虫拮抗菌定殖、番茄苗大田移栽时根结线虫拮抗菌定殖、番茄大田生长期根结线虫拮抗菌定殖，具体为：
A.番茄育苗时根结线虫拮抗菌定殖：在番茄育苗时将根结线虫拮抗菌剂拌入育苗基质进行育苗，或者在番茄出苗后喷施根结线虫拮抗菌剂200～1000倍稀释液，每隔7～10天喷施一次，喷2～3次；番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂拌入育苗基质的量为每100kg基质中加入0.5～5kg；
B.番茄苗大田移栽时根结线虫拮抗菌定殖：在番茄苗大田移栽前塘施含番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂的生物有机肥或移栽时灌施番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂；含番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂的生物有机肥在移栽前的施用量按每株0.05～0.5kg施入塘内；番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂在番茄苗移栽时兑水稀释200～1000倍，每株灌施0.5～5.0L稀释液；
C.番茄植株生长期根结线虫拮抗菌定殖：在番茄生长期施用含番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂的生物有机肥或番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂；含番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂的有机肥在番茄植株周围开沟穴施，每株0.05～0.5kg，每个月施用一次，共2～4次；番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂稀释200～1000倍，每株灌施0.5～5.0L稀释液，每个月施用一次，共2～4次。
上述A步骤所述的番茄育苗时根结线虫拮抗菌的两种定殖方式能单独采用一种，亦能两种同时采用；
上述B步骤所述的番茄苗大田移栽时根结线虫拮抗菌的定殖，能单独采用番茄根结线虫拮抗生物有机肥或番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂进行定殖，亦能两者同时采用进行定殖；
上述C步骤所述的番茄植株生长期根结线虫拮抗菌定殖，能单独追施含番茄根结线虫拮抗菌剂的生物有机肥或番茄根结线虫拮抗菌剂，亦能两者同时追施；
所述的番茄根结线虫的生物防治方法，在番茄苗育苗时根结线虫拮抗菌定殖、番茄苗大田移栽时根结线虫拮抗菌定殖、番茄植株生长期根结线虫拮抗菌定殖三个过程能单独采用其中一部分措施，亦能全部措施一同采用。
用于本发明的番茄根结线虫病的生物防治方法中的生防制剂包括：番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂和番茄根结线虫拮抗生物有机肥；该生防制剂经由如下步骤得到：
一、将保藏在北京市海淀区中关村北一条13号、中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCCNo.1211、保藏日为2004年8月30日的褐球固氮菌(Azotobacterchroococcum)YKT41株，保藏号为CGMCCNo.1212、保藏日为2004年8月30日的越南伯克霍尔德氏菌(Burkholderiavietnamiensis)P418株，保藏号为CGMCCNo.1498、保藏日为2005年10月20日的绿色木霉(Trichodermaviride)LTR-2株；以及保藏在北京市朝阳区北辰西路1号院3号、中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCCNo.5938、保藏日为2012年3月27日的绿色木霉(Trichodermaviride)L-10株，保藏号为CGMCCNo.7938、保藏日为2013年7月19日的哈茨木霉(Trichodermaharzianum)T11-W株；五种菌种分别按常规方法进行液体或固体发酵。具体如下：
1、褐球固氮菌YKT41的液体发酵
褐球固氮菌YKT41的液体发酵按以下步骤进行：
(1)斜面菌种：采用固体无氮培养基(K2HPO40.64g、KH2PO40.16g、MgSO4.7H2O0.2g、NaCl0.2g、CaSO4.2H2O0.05g、Na2MoO40.001g、FeSO40.03g、蔗糖20g、琼脂15g、水1000ml、pH7.0-7.2)，将菌种接种在试管培养基中，28-32℃培养18-24小时。
(2)摇瓶菌种：采用液体无氮培养基(K2HPO40.64g、KH2PO40.16g、MgSO4.7H2O0.2g、NaCl0.2g、CaSO4.2H2O0.05g、Na2MoO40.001g、FeSO40.03g、蔗糖20g、水1000ml、pH7.0-7.2)，将斜面菌种的单菌落接种在液体无氮培养基中置摇床上28-32℃培养18-24小时。
(3)液体发酵：采用含蔗糖1％、玉米粉4％、黄豆饼粉1％、硫酸铵0.2％、硫酸镁0.02％、磷酸二氢钾0.1％、磷酸氢二钾0.1％(前述物料均按质量百分比添加)、pH7.0-7.2培养基，121℃灭菌20min，将摇瓶液体培养的菌种接种到发酵罐内(接种量为2-10％)，28-32℃条件下培养，每分钟通发酵罐容积1-1.5倍的气量，搅拌速度为150-250r/min，培养时间36-48小时。在接种量为10％，30℃恒温培养的情况下，32小时进入稳定期，此时可作为发酵终点，获得褐球固氮菌YKT41的孢子发酵液，留作配制复合微生物菌剂用。
2、越南伯克霍尔德氏菌P418的液体发酵
越南伯克霍尔德氏菌P418的液体发酵按以下步骤进行：
(1)斜面菌种：采用固体无氮培养基(K2HPO40.5g、MgSO4.7H2O0.2g、NaCl0.02g、CaCl20.2g、Fe-EDTA0.066g、Na2MoO40.002g、L-谷氨酸(或味精)0.05g、葡萄糖5g、琼脂15g、pH7.2-7.4)将菌种接种在试管培养基中，28-32℃培养18-24小时。
(2)摇瓶菌种：称取蛋白胨10g、酵母浸出物1g、氯化钙0.2g配制成pH7.0的液体培养基，将斜面菌种的单菌落接种在液体无氮培养基中置摇床上28-32℃培养18-24小时。
(3)液体发酵：采用含蔗糖1％、玉米粉4％、黄豆饼粉1％、硫酸铵0.2％、硫酸镁0.02％、磷酸二氢钾0.1％、磷酸氢二钾0.1％(前述物料均按质量百分比添加)、pH7.2-7.4培养基，121℃灭菌20min，将摇瓶液体培养的菌种接种到发酵罐内(接种量为2-10％)，28-32℃条件下培养，每分钟通发酵罐容积1-1.5倍的气量，搅拌速度为150-250r/min，培养时间36-48小时。在接种量为10％，30℃恒温培养的情况下，32小时进入稳定期，此时可结束发酵，获得越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液，留作配制复合微生物菌剂用。
3、绿色木霉LTR-2的固体发酵
绿色木霉LTR-2的固体发酵按以下步骤进行：
(1)斜面菌种：采用固体PDA培养基，将菌种接种在试管培养基中，28-32℃培养48-72小时。
(2)茄瓶菌种：采用液体PDA培养基，将试管菌种接种在液体茄瓶中，于摇床上28-32℃振荡培养72-96小时。
(3)液体菌种：采用种子培养基，玉米粉2％，葡萄糖0.5％，豆饼粉1％，K2HPO40.2％，KH2PO40.3％，CaCO31％，pH6.0，121℃灭菌40min，将茄瓶内的种子用无菌水洗下，接种于250L的种子罐内，28-32℃培养，通气量为发酵罐容积的0.6-1.0倍，搅拌速度为150-250r/min，培养时间36-48小时。
(4)固体菌种：采用固体培养基，按麸皮7份、稻壳1份、玉米粉2份，总含水量70％，pH6.0，121℃灭菌40min后冷却，在混合接种器内将液体菌种与固体培养基混合均匀，接种量为5-10％，接种完毕转移到固体培养室内培养。
(5)培养：培养基厚度5cm，料温控制在28-32℃，室温控制在25-32℃，空气湿度控制在95-100％，培养时间5-7天。
培养完毕将固体培养物自然风干，成品含水量控制在5-10％，得绿色木霉LTR-2固体培养物，过100目筛收集孢子粉，留作配制复合微生物菌剂用。
4、绿色木霉L-10的液体发酵
绿色木霉L-10的液体发酵按以下步骤进行：
(1)斜面菌种：采用固体PDA培养基，将工程菌株L-10接种在试管内，28℃培养72-96小时；
(2)茄瓶菌种：采用液体PDA培养基，将试管菌种接种在液体三角瓶中，置于摇床上28℃振荡培养24-48小时；
(3)液体培养：采用发酵培养基(羧甲基纤维素钠1％，玉米粉1％，葡萄糖0.5％，豆饼粉2％，磷酸氢二钾0.2％，磷酸二氢钾0.2％，碳酸钙0.5％，pH6.0)，121℃灭菌20min，将三角瓶种接种发酵罐，接种量0.2％，28℃培养，溶氧量40-50％，通气量1：0.6-0.8，搅拌速度为160r/min，培养30hr后，调整发酵参数：25℃培养，溶氧量20-30％，通气量1：0.4-0.6，搅拌速度为120r/min，添加0.1％的诱导剂甲醛，避光培养6-8小时，至厚垣孢子量达到2×109个/ml以上时，结束发酵；即获得所述绿色木霉L-10的厚垣孢子发酵液，留作配制复合微生物菌剂用。
5、哈茨木霉T11-W的固体发酵
哈茨木霉T11-W的固体发酵按以下步骤进行：
(1)斜面菌种：采用固体PDA培养基，将哈茨木霉T11-W菌种接种在试管培养基中，28℃培养48-72小时。
(2)茄瓶菌种：采用液体PDA培养基，将试管菌种接种在液体茄瓶中，于摇床上28℃振荡培养72-96小时。
(3)固体菌种：采用固体培养基，将麸皮4份、稻壳1份按体积比混合均匀，加入50-70％的水，pH6.0，121℃灭菌40min后冷却，在混合接种器内将液体菌种与固体培养基混合均匀，接种量为5-10％，接种完毕转移到固体培养室内培养。
(4)培养：培养基厚度5cm，料温控制在28-32℃，室温控制在25-32℃，空气湿度控制在95-100％，培养时间5-7天。
(5)培养完毕将固体培养物自然风干，成品含水量控制在5-10％，得哈茨木霉T11-W固体培养物，过100目筛收集孢子粉，留作配制复合微生物菌剂用。
二、将液体或固体发酵的褐球固氮菌YKT41的孢子发酵液、越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液、绿色木霉LTR-2的孢子粉、绿色木霉L-10的孢子发酵液和哈茨木霉T11-W孢子粉五种菌剂中的两种或多种菌剂配制成复合制剂，即得到有效活菌数不低于2亿/g的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂；具体如下：
a.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂1
由褐球固氮菌YKT41的孢子发酵液与越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液按体积比1～5：1～9配制而成。
b.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂2
由哈茨木霉T11-W孢子粉、绿色木霉LTR-2孢子粉、绿色木霉L-10的孢子发酵液按质量比1～3：1～3：1～8配制而成。
c.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂3
由越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液、哈茨木霉T11-W孢子粉和绿色木霉L-10的孢子发酵液按质量比1～6：1～8：1～3配制而成。
三、以复合微生物菌剂为主要功能性成分，添加蛋白渣、褐煤、生化黄腐酸、生物炭、碳酸钙配制得到有效活菌数不低于0.2亿/g，N、P、K的总养分含量不低于5％，有机质含量不低于45％，蛋白质含量不低于20％的番茄根结线虫拮抗生物有机肥；蛋白渣为玉米浆、棉籽饼粉、花生饼粉、酵母粉、蛋白胨任一种的发酵残渣晒干后得到；具体如下：
a.番茄根结线虫拮抗生物有机肥1
以5～25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂1号作为主要功能性成分，添加10～30％的蛋白渣、5～30％的褐煤、10～25％的生化黄腐酸、10～35％的生物炭，再按前述混合料添加0.5～2.5％质量比的碳酸钙配制得到；
b.番茄根结线虫拮抗生物有机肥2：
以5～25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂2号作为主要功能性成分，添加10～30％的蛋白渣、5～30％的褐煤、10～25％的生化黄腐酸、10～35％的生物炭，再按前述混合料添加0.5～2.5％质量比的碳酸钙配制得到；
c.番茄根结线虫拮抗生物有机肥3：
以5～25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂3号作为主要功能性成分，添加10～30％的蛋白渣、5～30％的褐煤、10～25％的生化黄腐酸、10～35％的生物炭，再按前述混合料添加0.5～2.5％质量比的碳酸钙配制得到；
d.上述比例均为质量百分比。
本发明的有益效果在于：能有效防治番茄根结线虫病菌的侵染和发病，生态环保，方法简便。还能明显提高番茄产质量。
具体实施方式：
下面通过实施例对本发明作进一步的详细说明。
如下实施例的番茄根结线虫病的生物防治方法的及其生防制剂同发明内容部分的描述。其中：
1、番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂由如下步骤得到：
a.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂1
由褐球固氮菌YKT41的孢子发酵液与越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液按体积比1或3或6：1或4或9配制而成。
b.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂2
由哈茨木霉T11-W孢子粉、绿色木霉LTR-2孢子粉、绿色木霉L-10的孢子发酵液按质量比1或2或3：1或2或3：1或4或8配制而成。
c.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂3
由越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液、哈茨木霉T11-W孢子粉和绿色木霉L-10的孢子发酵液按质量比1或3或6：1或4或8：1或2或3配制而成。
2、番茄根结线虫拮抗生物有机肥由如下步骤得到：
a.番茄根结线虫拮抗生物有机肥1
以5％或15％或25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂1号作为主要功能性成分，添加10％或20％或30％的蛋白渣、5％或15％或30％的褐煤、10％或15％或25％的生化黄腐酸、10％或20％或35％的生物炭，再按前述混合料质量比添加0.5％或1.5％或2.5％的碳酸钙配制得到；
b.番茄根结线虫拮抗生物有机肥2
以5％或15％或25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂2号作为主要功能性成分，添加10％或20％或30％的蛋白渣、5％或15％或30％的褐煤、10％或15％或25％的生化黄腐酸、10％或20％或35％的生物炭，再按前述混合料质量比添加0.5％或1.5％或2.5％的碳酸钙配制得到；
c.番茄根结线虫拮抗生物有机肥3
以5％或15％或25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂3号作为主要功能性成分，添加10％或20％或30％的蛋白渣、5％或15％或30％的褐煤、10％或15％或25％的生化黄腐酸、10％或20％或35％的生物炭，再按前述混合料质量比添加0.5％或1.5％或2.5％的碳酸钙配制得到；
上述步骤三中比例为质量百分比，蛋白渣为玉米浆、或棉籽饼粉、或花生饼粉、或酵母粉、或蛋白胨的发酵残渣晒干后得到。
实施例1：
在番茄出苗后，每隔7天分别喷施一次复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液，共3次，未处理的番茄作为对照，成苗后移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄出苗后分别喷施3次复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号对番茄根结线虫的相对防效在46.59～57.36％之间。
实施例2：
在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，每立方育苗基质拌入0.5kg或2.5kg或5kg复合微生物菌剂，未处理的番茄苗作为对照，成苗后移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质对番茄根结线虫的相对防效在52.45～61.95％之间。
实施例3：
在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，每立方育苗基质拌入0.5kg或2.5kg或5kg复合微生物菌剂，再在番茄出苗后，每隔7天分别喷施一次复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液，共3次，未处理的番茄苗作为对照，成苗后移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，再在番茄出苗后分别喷施3次复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号对番茄根结线虫的相对防效在57.39～69.28％之间。
实施例4：
在番茄苗移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块未处理的番茄苗作为对照，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄苗移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号对番茄根结线虫的相对防效在47.49～56.85％之间。
实施例5：
在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块未处理的番茄苗作为对照，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号对番茄根结线虫的相对防效在48.62～58.31％之间。
实施例6：
在番茄移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株，再在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块未处理的番茄苗作为对照，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号，再在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号对番茄根结线虫的相对防效在58.05～67.94％之间。
实施例7：
在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株，每个月施用一次，共3次或4次，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块未处理的番茄植株作为对照，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号3次或4次对番茄根结线虫的相对防效在56.33～69.37％之间。
实施例8：
在番茄植株大田生长期分别在番茄植株根际灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L，每个月施用一次，共3次或4次，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块未处理的番茄植株作为对照，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄植株大田生长期分别在番茄植株根际灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号3次或4次对番茄根结线虫的相对防效在57.14～72.85％之间。
实施例9：
在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株，同时分别对应灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L，每个月施用一次，共3次或4次，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块未处理的番茄植株作为对照，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄植株大田生长期在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号的同时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号3次或4次对番茄根结线虫的相对防效在64.56～76.24％之间。
实施例10：
在番茄出苗后，每隔7天分别喷施一次复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液，共2次；在番茄移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株；在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株，每个月施用一次，共3次或4次；未处理的番茄苗作为对照，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在苗期分别喷施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号，移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号，在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号3次或4次对番茄根结线虫的相对防效在67.29～78.57％之间。
实施例11：
在番茄出苗后，每隔7天分别喷施一次复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液，共2次；在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L；在番茄植株大田生长期分别在番茄植株根际灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L，每个月施用一次，共3次或4次；未处理的番茄苗作为对照，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在苗期分别喷施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号，在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号，在番茄植株大田生长期分别在番茄植株根际灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号3次或4次对番茄根结线虫的相对防效在69.47～80.19％之间。
实施例12：
在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，每立方育苗基质拌入0.5kg或2.5kg或5kg复合微生物菌剂；在番茄移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株；在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株，每个月施用一次，共3次或4次；未处理的番茄苗作为对照，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号，在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号3次或4次对番茄根结线虫的相对防效在66.89～79.61％之间。
实施例13：
在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，每立方育苗基质拌入0.5kg或2.5kg或5kg复合微生物菌剂；在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L；在番茄植株大田生长期分别在番茄植株根际灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L，每个月施用一次，共3次或4次；未处理的番茄苗作为对照，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号，在番茄植株大田生长期分别在番茄植株根际灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号3次或4次对番茄根结线虫的相对防效在71.86～82.48％之间。
实施例14：
在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，每立方育苗基质拌入0.5kg或2.5kg或5kg复合微生物菌剂，再在番茄出苗后，每隔7天分别喷施一次复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液，共2次；在番茄移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株，再在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L；在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号0.05kg/株或0.25kg/株或0.5kg/株，同时分别对应灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号200倍液或500倍液或1000倍液0.5L或2.5L或5.0L，每个月施用一次，共3次或4次；未处理的番茄作为对照，移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块，按常规方法进行管理。番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在番茄育苗时将复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号分别拌入育苗基质，在番茄出苗后分别喷施3次复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号，在番茄移栽前分别塘施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号，在番茄移栽时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号，在番茄植株大田生长期分别在番茄植株周围开沟穴施生物有机肥1号、生物有机肥2号和生物有机肥3号的同时分别灌施复合微生物菌剂1号、复合微生物菌剂2号和复合微生物菌剂3号3次或4次对番茄根结线虫的相对防效在75.65～84.59％之间。

Claims (3)

1.一种番茄根结线虫病的生物防治方法，其特征在于该生物防治方法包括：番茄育苗时根结线虫拮抗菌定殖、番茄大田移栽时根结线虫拮抗菌定殖、番茄大田生长期根结线虫拮抗菌定殖，具体为：
A.番茄育苗时根结线虫拮抗菌定殖：在番茄育苗时将根结线虫拮抗菌剂拌入育苗基质进行育苗，或者在番茄出苗后喷施根结线虫拮抗菌剂200～1000倍稀释液，每隔7～10天喷施一次，喷2～3次；番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂拌入育苗基质的量为每100kg基质中加入0.5～5kg；
B.番茄苗大田移栽时根结线虫拮抗菌定殖：在番茄苗大田移栽前塘施含番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂的生物有机肥和/或移栽时灌施番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂；含番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂的生物有机肥在移栽前的施用量按每株0.05～0.5kg施入塘内；番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂在番茄苗移栽时兑水稀释200～1000倍，每株灌施0.5～5.0L稀释液；
C.番茄植株生长期根结线虫拮抗菌定殖：在番茄生长期施用含番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂的生物有机肥和/或番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂；含番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂的有机肥在番茄植株周围开沟穴施，每株0.05～0.5kg，每个月施用一次，共2～4次；番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂稀释200～1000倍，每株灌施0.5～5.0L稀释液，每个月施用一次，共2～4次。
2.权利要求1所述的番茄根结线虫病的生物防治方法，其特征在于：
权利要求1-A步骤所述的番茄育苗时根结线虫拮抗菌的两种定殖方式能单独采用一种，亦能两种同时采用；
权利要求1-B步骤所述的烟苗大田移栽时根结线虫拮抗菌的定殖，能单独采用番茄根结线虫拮抗生物有机肥或番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂进行定殖，亦能两者同时采用进行定殖；
权利要求1-C步骤所述的番茄植株生长期根结线虫拮抗菌定殖，能单独追施含番茄根结线虫拮抗菌剂的生物有机肥或番茄根结线虫拮抗菌剂，亦能两者同时追施；
权利要求1所述的番茄根结线虫的生物防治方法，所述的番茄苗育苗时根结线虫拮抗菌定殖、烟苗大田移栽时根结线虫拮抗菌定殖、番茄植株生长期根结线虫拮抗菌定殖三个过程能单独采用其中一部分措施，亦能全部措施一同采用。
3.用于权利要求1和2所述的番茄根结线虫病的生物防治方法中的生防制剂，其特征在于该生防制剂包括：番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂和番茄根结线虫拮抗生物有机肥；该生防制剂经由如下步骤得到：
(1)将保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏号为CGMCCNo.1211、保藏日为2004年8月30日的褐球固氮菌YKT41，保藏号为CGMCCNo.1212、保藏日为2004年8月30日的越南伯克霍尔德氏菌P418，保藏号为CGMCCNo.1498、保藏日为2005年的绿色木霉LTR-2，保藏号为CGMCCNo.5938、保藏日为2012年3月27日的绿色木霉L-10，保藏号为CGMCCNo.7938、保藏日为2013年7月19日的哈茨木霉T11-W五种菌种分别按常规方法进行液体或固体发酵；
(2)将液体或固体发酵的褐球固氮菌YKT41的孢子发酵液、越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液、绿色木霉LTR-2的孢子粉、绿色木霉L-10的孢子发酵液和哈茨木霉T11-W孢子粉五种菌剂中的两种或多种菌剂配制成复合制剂，即得到有效活菌数不低于2亿/g的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂；具体如下：
a.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂1
由褐球固氮菌YKT41的孢子发酵液与越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液按体积比1～5：1～9配制而成；
b.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂2
由哈茨木霉T11-W孢子粉、绿色木霉LTR-2孢子粉、绿色木霉L-10的孢子发酵液按质量比1～3：1～3：1～8配制而成；
c.番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂3
由越南伯克霍尔德氏菌P418的孢子发酵液、哈茨木霉T11-W孢子粉和绿色木霉L-10的孢子发酵液按质量比1～6：1～8：1～3配制而成；
(3)以复合微生物菌剂为主要功能性成分，添加蛋白渣、褐煤、生化黄腐酸、生物炭、碳酸钙配制得到有效活菌数不低于0.2亿/g，N、P、K的总养分含量不低于5％，有机质含量不低于45％，蛋白质含量不低于20％的番茄根结线虫拮抗生物有机肥；蛋白渣为玉米浆、棉籽饼粉、花生饼粉、酵母粉、蛋白胨任一种的发酵残渣晒干后得到；具体如下：
a.番茄根结线虫拮抗生物有机肥1
以5～25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂1号作为主要功能性成分，添加10～30％的蛋白渣、5～30％的褐煤、10～25％的生化黄腐酸、10～35％的生物炭，再按前述混合料添加0.5～2.5％质量比的碳酸钙配制得到；
b.番茄根结线虫拮抗生物有机肥2
以5～25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂2号作为主要功能性成分，添加10～30％的蛋白渣、5～30％的褐煤、10～25％的生化黄腐酸、10～35％的生物炭，再按前述混合料添加0.5～2.5％质量比的碳酸钙配制得到；
c.番茄根结线虫拮抗生物有机肥3
以5～25％的番茄根结线虫拮抗复合微生物菌剂3号作为主要功能性成分，添加10～30％的蛋白渣、5～30％的褐煤、10～25％的生化黄腐酸、10～35％的生物炭，再按前述混合料添加0.5～2.5％质量比的碳酸钙配制得到；
d.上述比例均为质量百分比。
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