CN105639657A - 酶解提取枸杞叶矿质元素的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种酶解提取枸杞叶矿质元素的方法。其特点是，包括如下步骤：(1)原料：将枸杞叶烘干；(2)粉碎：将烘干后的枸杞叶粉碎；(3)筛分：将粉碎后的枸杞叶粉末过60-80目筛；(4)脱脂：向得到的粉末中加入6号轻汽油浸泡，然后搅拌，再抽滤并干燥，得到去除脂肪的枸杞叶粉末；(5)酶解：取得到的枸杞叶粉末，按照1g枸杞叶粉末/10-20mL加入去离子水，再按照130-150u/mL加入纤维素酶，搅拌1-2小时。本发明是在现有的矿质元素工艺的基础上，使用超声波与酶结合的提取方法，有效的提高矿质元素的得率，从而节约了原料，降低了生产成本。
Description
技术领域
本发明涉及一种酶解提取枸杞叶矿质元素的方法。
背景技术
枸杞(LyciumChinensemiller)是茄科多年生落叶小灌木，在医药、食品领域中具有重要的应用价值。枸杞的传统药用部位是果实即枸杞子，具有悠久的开发利用价值。除果实外，叶片、嫩茎等也具有很高的医疗保健功效。枸杞叶被称为“天精草”，性凉，味甘，具有解渴生津，养阴清火等功效。枸杞叶富含多种微量元素，其矿质元素含量甚至超过枸杞果实。矿质元素对人体有很多重要的作用，人体缺乏时，会产生疾病。钙、铁、锌都是人体必需的微量元素。铁是合成血红蛋白必不可少的物质，人体缺乏铁会导致贫血；锌的缺乏会导致发育不良、头发枯黄、注意力分散；钙能促进骨和骨质强壮，钙的缺乏主要影响骨骼的发育和结构，表现为骨质疏松症。流行病学调查表明，中国居民较易缺乏的矿质元素主要有钙、铁、锌等元素。人们主要是从食物中摄取身体所必须的一些矿质元素。
植物中矿质元素的提取方法仅限于灰化法和硝化法，提取的目的只是为了检测其含量，经过提取后这些矿质元素已经失去食用价值，这些方法对矿质元素的提取是破坏性的。
发明内容
本发明的目的是提供一种能够利用超声波和酶结合的方法非破坏性地提取枸杞叶中所含有的矿质元素，目的是使提取的矿质元素可作为营养健康补充剂或食品强化剂。
一种酶解提取枸杞叶矿质元素的方法，其特别之处在于，包括如下步骤：
(1)原料：将枸杞叶烘干；
(2)粉碎：将烘干后的枸杞叶粉碎；
(3)筛分：将粉碎后的枸杞叶粉末过60-80目筛；
(4)脱脂：向得到的粉末中加入6号轻汽油浸泡，然后搅拌，再抽滤并干燥，得到去除脂肪的枸杞叶粉末；
(5)酶解：取得到的枸杞叶粉末，按照1g枸杞叶粉末/10-20mL加入去离子水，再按照130-150u/mL加入纤维素酶，搅拌1-2小时；
(6)酸化：将酶解后的样品按照1g样品/1.5-2mL加入冰醋酸或冰醋酸溶液，搅拌0.5-1小时；
(7)超声波提取：在30-70℃，50-100MHz条件下超声波提取5-25min，取超声波处理后的上清液，将沉淀再按照前述相同条件超声波提取，取超声波处理后的上清液，将沉淀再按照前述相同条件超声波提取，取超声波处理后的上清液，最后合并三次提取的上清液；
(8)过滤：将得到的提取液抽滤，弃去滤渣；
(9)浓缩：用减压蒸馏装置对得到的提取液进行减压浓缩到原体积的1/3-1/5；
(10)干燥：将浓缩后的液体烘干即得到矿质元素提取物。
步骤(1)中烘干是指在鼓风干燥机中50-60℃烘干8-12h。
步骤(4)中控制6号轻汽油液面没过粉末1-1.5cm，控制搅拌时间1-2小时。
步骤(10)中烘干是指在50-60℃下烘干。
本发明是在现有的矿质元素工艺的基础上，使用超声波与酶结合的提取方法，有效的提高矿质元素的得率，从而节约了原料，降低了生产成本。本发明方法相对于现有的技术优点还在于：(1)提供一种高效且非破坏性的提取矿质元素的方法，利用的是在酸解和超声波提取的条件的基础上，与纤维素酶相结合，使得矿质元素从枸杞叶细胞中的溶出速率和溶出率都增加，从而达到节省原材料和时间的目的。(2)超声波提取具有高效、经济、成本低的优点，节省了因劳力带来的成本，并且一次可以同时提取多种矿质元素。(5)纤维素酶水解纤维素具有高效性，可将纤维素水解成单糖和寡糖，从而一部分被纤维素束缚的矿质元素在水解过程中被释放出来，从而提高了提取率。(6)利用酶法从植物材料中提取得到的矿质元素可以作为可食用的营养补充剂或食品添加剂用于食品加工。(6)由于此法所用的设备较为简单，只是用到了粉碎机、超声设备，真空泵和真空干燥设备，因此其运行成本较低，更适合工业化生产。综上所述，酶法是一种高效提取枸杞叶矿质元素的方法，具有耗时短、矿质元素得率高、矿质元素破坏程度小、节约原材料和运行成本低等优点，更有利于现代的工业化生产和连续性生产。
具体实施方式
本发明方法中不同条件下矿质元素提取量如下表：
实施例1：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，其中u为酶活力单位，用磁力搅拌器搅拌1.5小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸溶液(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在30℃，50MHz下超声波提取5min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣(在相同条件即30℃，50MHz下超声波提取5min)进行反复提取，超声波(在相同条件即30℃，50MHz下超声波提取5min)提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，得到钙的含量是1.522mg/g，铁的含量是0.0045mg/g，锌的含量是0.0102mg/g。
实施例2：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤；
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在30℃，50MHz下超声波提取10min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.543mg/g，铁的含量是0.0049mg/g，锌的含量是0.0104mg/g。
实施例3：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1-2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在30℃，50MHz下超声波提取15min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.511mg/g，铁的含量是0.0051mg/g，锌的含量是0.0107mg/g。
实施例4：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1-2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在30℃，50MHz下超声波提取20min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.504mg/g，铁的含量是0.0055mg/g，锌的含量是0.0107mg/g。
实施例5：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在30℃，50MHz下超声波提取25min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.534mg/g，铁的含量是0.0056mg/g，锌的含量是0.0106mg/g。
实施例6：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1.5小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，80MHz下超声波提取5min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.538mg/g，铁的含量是0.0054mg/g，锌的含量是0.0115mg/g。
实施例7：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，80MHz下超声波提取10min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.571mg/g，铁的含量是0.0062mg/g，锌的含量是0.0119mg/g。
实施例8：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，80MHz下超声波提取15min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.563mg/g，铁的含量是0.0060mg/g，锌的含量是0.0115mg/g。
实施例9：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，80MHz下超声波提取20min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.556mg/g，铁的含量是0.0057mg/g，锌的含量是0.0116mg/g。
实施例10：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，80MHz下超声波提取25min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.560mg/g，铁的含量是0.0056mg/g，锌的含量是0.0115mg/g。
实施例11：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，100MHz下超声波提取5min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.558mg/g，铁的含量是0.0059mg/g，锌的含量是0.0112mg/g。
实施例12：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1.5小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，100MHz下超声波提取10min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.565mg/g，铁的含量是0.0055mg/g，锌的含量是0.0114mg/g。
实施例13：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，100MHz下超声波提取15min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.561mg/g，铁的含量是1.0058mg/g，锌的含量是0.0116mg/g。
实施例14：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，100MHz下超声波提取20min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.564mg/g，铁的含量是0.0059mg/g，锌的含量是0.0115mg/g。
实施例15：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1-2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在50℃，100MHz下超声波提取25min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.563mg/g，铁的含量是0.0057mg/g，锌的含量是0.0117mg/g。
实施例16：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在70℃，100MHz下超声波提取5min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.549mg/g，铁的含量是0.0054mg/g，锌的含量是0.0112mg/g。
实施例17：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在70℃，100MHz下超声波提取10min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.547mg/g，铁的含量是0.0055mg/g，锌的含量是0.0117mg/g。
实施例18：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在70℃，100MHz下超声波提取15min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.551mg/g，铁的含量是0.0055mg/g，锌的含量是0.0122mg/g。
实施例19：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌1.5小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在70℃，100MHz下超声波提取20min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
7.将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.558mg/g，铁的含量是0.0057mg/g，锌的含量是0.0111mg/g。
实施例20：
1.将枸杞叶洗净、在50-60℃下烘干8-12h、磨碎并过60-80目筛。
2.准确称取1g过筛的粉末于烧杯中，加入适量的6号轻汽油6mL搅拌20min后抽滤。
3.将滤饼移入烧杯中加入10mL的去离子水，滴入两滴纤维素酶(130-150u/ml)，用磁力搅拌器搅拌2小时。
4.加入2mL体积比为1:1冰醋酸(冰醋酸体积浓度50％)，用磁力搅拌器搅拌半个小时。
5.在70℃，100MHz下超声波提取25min，取提取后的上清液，对提取后的滤渣进行反复提取，超声波提取三次，将三次超声波提取后的上清液合并后进行抽滤，合并滤液并用去离子水定容到50mL。
6.在定容好的滤液中加入200mL无水乙醇，静置2h充分沉淀，离心得到上清液，将上清液旋蒸到原来体积的1/5。
将浓缩后的液体烘干，钙的含量是1.559mg/g，铁的含量是0.0057mg/g，锌的含量是0.0113mg/g。
Claims (4)
1.一种酶解提取枸杞叶矿质元素的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)原料：将枸杞叶烘干；
(2)粉碎：将烘干后的枸杞叶粉碎；
(3)筛分：将粉碎后的枸杞叶粉末过60-80目筛；
(4)脱脂：向得到的粉末中加入6号轻汽油浸泡，然后搅拌，再抽滤并干燥，得到去除脂肪的枸杞叶粉末；
(5)酶解：取得到的枸杞叶粉末，按照1g枸杞叶粉末/10-20mL加入去离子水，再按照130-150u/mL加入纤维素酶，搅拌1-2小时；
(6)酸化：将酶解后的样品按照1g样品/1.5-2mL加入冰醋酸或冰醋酸溶液，搅拌0.5-1小时；
(7)超声波提取：在30-70℃，50-100MHz条件下超声波提取5-25min，取超声波处理后的上清液，将沉淀再按照前述相同条件超声波提取，取超声波处理后的上清液，将沉淀再按照前述相同条件超声波提取，取超声波处理后的上清液，最后合并三次提取的上清液；
(8)过滤：将得到的提取液抽滤，弃去滤渣；
(9)浓缩：用减压蒸馏装置对得到的提取液进行减压浓缩到原体积的1/3-1/5；
(10)干燥：将浓缩后的液体烘干即得到矿质元素提取物。
2.如权利要求1所述的酶解提取枸杞叶矿质元素的方法，其特征在于：步骤(1)中烘干是指在鼓风干燥机中50-60℃烘干8-12h。
3.如权利要求1所述的酶解提取枸杞叶矿质元素的方法，其特征在于：步骤(4)中控制6号轻汽油液面没过粉末1-1.5cm，控制搅拌时间0.1-2小时。
4.如权利要求1所述的酶解提取枸杞叶矿质元素的方法，其特征在于：步骤(10)中烘干是指在50-60℃下烘干。
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| CN106616330A (zh) * | 2017-02-03 | 2017-05-10 | 宁夏林业研究院股份有限公司 | 一种通过添加枸杞叶提取物改良面条品质的方法 |
| CN106666319A (zh) * | 2017-02-03 | 2017-05-17 | 宁夏林业研究院股份有限公司 | 一种枸杞叶提取物泡腾冲剂及其制备方法 |
| CN106723049A (zh) * | 2017-02-03 | 2017-05-31 | 宁夏林业研究院股份有限公司 | 一种高温高压提取枸杞叶矿质元素的方法 |
Citations (2)
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| CN104839738A (zh) * | 2015-04-27 | 2015-08-19 | 宁夏森淼种业生物工程有限公司 | 一种超声波法高效提取枸杞叶矿质元素的方法 |
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