CN105560309A - 金花葵籽油在制备抗衰老药品、保健品及护肤品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明首次采用金花葵籽油制备抗衰老的产品，如药品、保健品及护肤品。含有金花葵籽油的药品、保健品及护肤品具有显著的抗自由基效果，能够活化人体肌肤表层细胞，减少皱纹出现、延缓衰老，并能有效改善脏腑虚损，提高人体器官组织活性，另外还有改善脑血管循环和提高免疫力等效果。

Description

金花葵籽油在制备抗衰老药品、保健品及护肤品中的应用

技术领域

本发明属于天然产物应用领域，具体涉及金花葵籽油在制备抗衰老药品、保健品及护肤品中的应用。

背景技术

金花葵之所以被人们誉为植物大熊猫，生命中的救心草，是因为“金花葵”植物中含有多种生物活性物质，主要成分为天然黄酮类化合物、不饱和脂肪酸（亚油酸和亚麻酸）维生素E、多不饱和脂肪酸、高聚糖胶、膳食纤维、微量元素硒、锌、钙及多种不皂化物等。天然黄酮类化合物和亚油酸是人体必需但又不能自行合成，必须靠饮食摄入的一类对人体具有保健作用的营养物质。金花葵种子富含总黄酮，其中稀有黄酮单体金丝桃苷占总黄酮量的50%以上。（1）生物黄酮对心脑血管缺血的保护作用：金花葵总黄酮对人体急性心肌缺血、缺氧损伤具有保护作用；金花葵总黄酮可以降低急性心肌梗塞的梗塞面积，对心肌损伤有一定保护作用。（2）生物黄酮的降脂作用：黄酮能够显著抑制血清中胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白的升高，降低血清游离脂肪酸水平，进一步降低血脂水平。（3）镇痛作用：黄酮有显著中枢镇痛作用，其作用效价强度约为吗啡的1/20，且无依赖性。（4）生物黄酮可改善心脑血管微循环及抗疲劳，对原发性高血压有显著的治疗作用。（5）金花葵味甘、无毒，具有通淋、清热之功效。现代药理学发现，金花葵具有消炎、利尿、减少血小板聚集的作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种关于金花葵籽油在制备抗衰老的产品中的应用，含有金花葵籽油的药品、保健品及护肤品具有显著的抗自由基效果，能够活化人体肌肤表层细胞、减少皱纹出现、延缓衰老。

本发明提供一种关于金花葵籽油的新的应用方法，利用金花葵籽油制备抗衰老药品和保健品。

本发明提供另外一种关于金花葵籽油的新的应用方法，利用金花葵籽油制备抗衰老护肤品。

一种含有金花葵籽油的抗衰老软胶囊的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、取金花葵籽原材料，干燥后送入粉碎机中，将金花葵籽粉碎后投入萃取釜，对系统进行加热，当温度达到50℃时对系统进行加压，压力达到20MPa后，调节CO₂流量为0.1m3/h，开始进行循环萃取，保持恒温恒压1h后，调节CO₂流量为0.18m3/h，再保持恒温恒压3h，然后出料，得到金花葵籽油，备用；

步骤二、按照制备软胶囊的常规过程用明胶、甘油和水制备软胶囊壳，软胶囊壳制备完成后将金花葵籽油进行胶囊填充压制，然后进行硬化成型、洗擦干燥，即完成软胶囊的制备。

作为本发明一种含有金花葵籽油的抗衰老软胶囊的制备方法的进一步优化，步骤一所述的金花葵籽原材料干燥方法为在恒温干燥箱中于50-80℃条件下干燥6-12h。

作为本发明一种含有金花葵籽油的抗衰老软胶囊的制备方法的进一步优化，将步骤一得到的金花葵籽油置于分子蒸馏器内，在真空度为1mbar、温度为60-75℃条件下进行纯化分离后再进行胶囊填充。

与现有技术相比，本发明至少具有下述优点及有益效果：

本发明首次采用金花葵籽油制备抗衰老的产品。含有金花葵籽油的药品、保健品及护肤品具有显著的抗自由基效果，能够活化人体肌肤表层细胞，减少皱纹出现、延缓衰老，并能有效改善脏腑虚损，提高人体器官组织活性，另外还有改善脑血管循环和提高免疫力等效果。

附图说明

图1为金花葵籽油对衰老模型小鼠脾脏组织形态的影响对比图；

图2为金花葵籽油对衰老模型小鼠胸腺组织形态的影响对比图；

图3为金花葵籽油对衰老模型小鼠大脑皮质组织形态的影响对比图；

图4为金花葵籽油对衰老模型小鼠大脑海马区组织形态的影响对比图。

具体实施方式

为使本发明的内容更明显易懂，以下结合具体实施例，对本发明进行详细描述。

一种含有金花葵籽油的抗衰老软胶囊的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、取金花葵籽原材料，干燥后送入粉碎机中，将金花葵籽粉碎后投入萃取釜，对系统进行加热，当温度达到50℃时对系统进行加压，压力达到20MPa后，调节CO₂流量为0.1m3/h，开始进行循环萃取，保持恒温恒压1h后，调节CO₂流量为0.18m3/h，再保持恒温恒压3h，然后出料，得到金花葵籽油，备用；

步骤二、按照制备软胶囊的常规过程用明胶、甘油和水制备软胶囊壳，软胶囊壳制备完成后将金花葵籽油进行胶囊填充压制，然后进行硬化成型、洗擦干燥，即完成软胶囊的制备。

为了使本发明具有更好的实施效果，步骤一所述的金花葵籽原材料干燥方法为在恒温干燥箱中于50-80℃条件下干燥6-12h。将步骤一得到的金花葵籽油置于分子蒸馏器内，在真空度为1mbar、温度为60-75℃条件下进行纯化分离后再进行胶囊填充。

本发明在填充前，也可以在金花葵籽油混合加入其它籽油，以促进软胶囊抗衰老效果，比如玫瑰花精油、牡丹花精油等，三者的重量比按照1:1:1进行，效果会更加显著。

应用研究数据

金花葵籽油对D-半乳糖所致小鼠衰老模型的影响

1实验材料

1.1实验动物

昆明种小鼠，雌雄各半性，20～23ｇ，山东省实验动物中心提供，合格证号：NO.0023554。饲养在河南中医学院实验动物中心，饲料为消毒饲料，垫料为消毒垫料，均由河南省实验动物中心提供。饮水为消毒蒸馏水。饲养条件：温度20～25℃，相对湿度40％～60％，自然光照，每笼10只，常规饲养，隔天更换垫料。

1.2实验药物和试剂

金花葵籽油，汝州市银地实业有限公司提供，批号20150401；复方吡拉西

坦脑蛋白水解物片（脑康灵），弘美制药（中国）有限公司，批号20140602；天然维生素E软胶囊，海南养生堂药业有限公司，批号20140306；D-半乳糖，上海华硕精细化学品有限公司，批号20121012；氯化钠注射液，河南科伦药业有限公司，批号C114092201-2；甲醛，中国莱阳市双双化工有限公司，批号20140519；水合氯醛，天津市光复精细化工研究所，批号20150606；小鼠过氧化氢脂质/乳过氧化物酶（LPO）ELISA检测试剂盒，Biocalvin，批号CK-E93890M；小鼠甘油三酯（TG）ELISA检测试剂盒，Biocalvin，批号：CK-E91733M；小鼠总胆固醇（TC）ELISA检测试剂盒，Biocalvin，批号CK-E91839Ml；小鼠过氧化氢酶（CAT）ELISA检测试剂盒，Biocalvin，批号CK-E92636m；小鼠超氧化物歧化酶（SOD）ELISA检测试剂盒，Biocalvin，批号CK-E20348M；小鼠还原型谷胱甘肽（GSH）ELISA检测试剂盒，Biocalvin，批号CK-E20064M。

1.3实验仪器

FA(N)/JA(N)系列电子天平，上海民桥精密仪器有限公司；HWS12型电热恒温水浴锅，上海一恒科学仪器有限公司；KDC-160HR高速冷冻离心机，科大创新股份有限公司中佳分公司；680型酶标仪，美国BIO-RAD公司；可调式移液器，上海雷勃分析仪器有限公司。

实验方法

取18～21g左右的小鼠84只，雌雄各半，随机分为7组（雌雄分笼饲养），空白组、模型组、维生素E组、康脑灵组和大、中、小剂量金花葵籽油组，每组12只。模型组及各给药组每日颈背部皮下注射5%D-半乳糖生理盐水液0.5mL／20g（1.25g/kg），空白对照组注射同剂量的生理盐水0.5mL/20g，每4天称计体重一次，根据体重调整注射剂量，连续给D-半乳糖40天。从第11天开始，分别灌服维生素E（0.06g/kg；0.1ml/10g，相当于临床剂量的15倍，临用前用0.5%CMC溶液配成3mg/ml浓度的维生素E混悬液），脑康灵（0.810g/kg；0.1ml/10g，相当于临床剂量的15倍,临用前用0.5%CMC溶液配成81mg/ml浓度的脑康灵混悬液），金花葵籽油大、中、小剂量（0.76g/kg，0.38g/kg，0.19g/kg；0.1ml/10g）；空白对照组和模型组灌胃同体积的生理盐水自由取食，每日灌胃给药1次，连续给药30天，每4天称体重一次，根据体重调整用药量。于末次给药后2h（禁食不禁水12h），小鼠称重后眼眶取血，EP管内加入肝素抗凝剂制备全血，按照试剂盒说明书测定全血中CAT、GSH、SOD含量，部分全血离心，分离得到血浆，按照试剂盒说明书测定血浆中LPO含量，不加肝素抗凝剂的血经离心，分离得到血清，按照试剂盒说明书测定测定血清中TC、TG含量；然后脱颈椎处死小鼠，断头，迅速取出全脑，称重，分离左右脑，左脑于10%甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片，HE染色，于光镜下观察各组脑组织的形态变化，右脑用来匀浆制备脑匀浆液，按照试剂盒说明书测定脑匀浆中LPO含量，另取胸腺、脾脏称重于10%甲醛溶液中固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察各组胸腺、脾脏组织的形态变化。

统计学处理方法

数据分析用SPSS17.0医用统计包进行数据资料的统计学处理，计量资料用平均数±标准差（±s）表示，各组间比较采用单因素方差分析，方差检验齐者用LSD法，方差不齐者用Games-Howell法检验，等级资料采用Ridit检验。

实验结果

4.1对衰老模型小鼠体内LPO水平的影响

表1金花葵籽油对衰老模型小鼠肝匀浆、血浆中LPO水平的影响（±s）

*表示与模型组相比p<0.05;**表示与模型组相比p<0.01

由上表可看出，与空白组相比，模型组肝匀浆中LPO含量明显升高（P<0.05）,血浆中LPO含量显著升高（P<0.01），说明造衰老模型成功；与模型组相比，中剂量金花葵籽油组可以明显降低肝匀浆中LPO含量（P<0.05），大、中剂量金花葵籽油组可显著降低血浆中LPO含量（P<0.01）；维生素E组、脑康灵组以及小剂量金花葵籽油组均可以显著降低肝匀浆、血浆中LPO含量（P<0.01），大剂量金花葵籽油组可以显著降低血浆中LPO含量（P<0.01）。

4.2对衰老模型小鼠血CAT、GSH、SOD水平的影响

表2金花葵籽油对衰老模型小鼠全血CAT、GSH、SOD水平的影响（±s）

*表示与模型组相比p<0.05;**表示与模型组相比p<0.01

从上表可看出，与空白组相比，模型组小鼠全血CAT、GSH含量均明显降低（P<0.05），SOD含量显著降低（P<0.01），说明造衰老模型成功；与模型组相比，维生素E组可以显著升高全血CAT、SOD含量（P<0.01），并明显升高全血中GSH的含量（P<0.05）；大剂量金花葵籽油组可以显著升高全血中CAT、GSH含量（P<0.01），并明显升高全血中SOD含量（P<0.05）；中剂量金花葵籽油组显著提高了全血中CAT、SOD含量（P<0.01）；小剂量金花葵籽油组可明显升高了全血GSH含量（P<0.05）。

4.3对衰老模型小鼠血清中TC、TG水平的影响

表3金花葵籽油对衰老模型小鼠血清中TC、TG水平的影响（±s）

*表示与模型组相比p<0.05;**表示与模型组相比p<0.01

从上表可看出，与空白组相比，模型组小鼠血清中TC、TG均明显升高（P<0.05），说明造衰老模型成功；与模型组相比，维生素E组小鼠血清中TG含量有明显降低（P<0.05），大、中、小剂量金花葵籽油组和脑康灵组可使小鼠血清中TC、TG含量显著降低（P<0.01）。

4.4对衰老模型小鼠脾脏组织的影响

表4植物油类对衰老模型小鼠脾脏组织的影响（±s）

*表示与模型组相比p<0.05;**表示与模型组相比p<0.01

从上表可看出，与空白组相比，模型组小鼠脾脏指数、脾小结厚度显著降低（P<0.01），说明造衰老模型成功；与模型组相比，大剂量金花葵籽油组和维生素E组可明显提高脾脏指数（P<0.05），并显著提高脾小结厚度（P<0.01）；中剂量金花葵籽油组可以显著提高脾脏指数和脾小结厚度（P<0.01）；小剂量金花葵籽油组可以显著提高脾小结厚度（P<0.01）。

各组脾脏组织光镜观察结果：空白组脾脏红髓和白髓分界清晰，脾小结正常，淋巴细胞正常，见图1-1；模型组脾小结变小，淋巴细胞正常但稀疏，见图1-2；维生素E组脾脏红髓和白髓分界清晰，脾小结、淋巴细胞未见明显的病理改变，见图1-3；脑康灵组脾脏红髓和白髓分界清晰，脾小结、淋巴细胞未见明显的病理改变，见图1-4；大剂量金花葵籽油组脾脏红髓和白髓分界清晰，脾小结、淋巴细胞未见明显的病理改变，见图1-5；中剂量金花葵籽油脾脏红髓和白髓分界清晰，脾小结、淋巴细胞未见明显的病理改变，见图1-6；小剂量金花葵籽油脾脏红髓和白髓分界清晰，脾小结、淋巴细胞均基本正常，见图1-7。

4.5对衰老模型小鼠胸腺组织的影响

表5金花葵籽油对衰老模型小鼠胸腺组织的影响（±s）

从上表可看出，与空白组相比，模型组小鼠胸腺指数、胸腺皮质厚度显著降低（P<0.01），说明造衰老模型成功；与模型组相比，金花葵籽油大剂量组可以显著升高胸腺皮质厚度（P<0.01），维生素E组和金花葵籽油小剂量组均可以明显提高胸腺指数（P<0.05）,并显著升高胸腺皮质厚度（P<0.01），脑康灵组和金花葵籽油中剂量组可以显著升高胸腺指数和胸腺皮质厚度（P<0.01）。

各组胸腺组织光镜观察结果：空白组胸腺小叶边界清楚，髓质皮质分界清晰，淋巴细胞密集正常，排列密集，见图2-1；模型组胸腺小叶边界不清，皮质变薄，淋巴细胞正常但排列稀疏，见图2-2；维生素E组胸腺小叶边界清楚，髓质皮质分界清晰，淋巴细胞密集未见明显病理改变，见图2-3；脑康灵组胸腺小叶边界清楚，髓质皮质分界清晰，淋巴细胞密集未见明显病理改变，见图2-4；大剂量金花葵籽油组胸腺小叶边界清楚，髓质皮质分界清晰，淋巴细胞密集未见明显的病理改变，见图2-5；中剂量金花葵籽油组胸腺小叶边界清楚，髓质皮质分界清晰，淋巴细胞密集未见明显的病理改变，见图2-6；小剂量金花葵籽油组胸腺小叶边界清楚，髓质皮质分界清晰，淋巴细胞密集未见明显的病理改变，见图2-7。

4.6对衰老模型小鼠脑组织的影响

（1）对衰老模型小鼠脑指数及脑匀浆LPO水平的影响

表6金花葵籽油对衰老模型小鼠脑指数及生化指标的影响（±s）

*表示与模型组相比p<0.05;**表示与模型组相比p<0.01

由上表可看出，与空白组相比，模型组脑指数明显降低（P<0.05）,脑匀浆中LPO含量显著升高（P<0.01），说明造衰老模型成功；与模型组相比，中、小剂量金花葵籽油组和维生素E组可显著降低脑匀浆中LPO含量（P<0.01）；大剂量金花葵籽油组和脑康灵组可显著升高脑指数（P<0.01），显著降低脑匀浆中LPO含量（P<0.01）。

（2）对衰老模型小鼠脑组织形态的影响

表7金花葵籽油对衰老模型小鼠脑组织病理变化的影响

“-”大脑皮质神经细胞丰富，排列整齐，着色正常；海马区椎体细胞排列紧密，细胞核圆而大，核仁清晰；“+”大脑皮层神经细胞丰富，排列整齐，着色变浅，神经细胞固缩变小；海马区椎体细胞排列紧密，规则，神经元细胞核圆而大，核仁清晰；“++”大脑皮层细胞数量有所减少，排列整齐，着色变浅，神经细胞固缩变圆，胞浆出现空泡；海马区椎体细胞排列整齐，神经细胞体积轻微变小，出现核固缩现象；“+++”大脑皮质神经细胞数量显著减少，排列疏松，着色变浅，残存神经细胞固缩变圆，胞浆内出现空泡改变；海马区锥体细胞层数减少，神经元细胞密度下降，排列稀疏、不规则,细胞体积变小,可见核固缩现象。

各组脑组织组织形态观察：正常对照组小鼠大脑皮质神经细胞丰富，排列整齐，着色正常，见图3-1；海马区锥体细胞排列紧密,细胞核圆而大,核仁清晰，见图4-1。模型组小鼠大脑皮质神经细胞数量明显减少，排列疏松，着色变浅，残存神经细胞固缩变圆，胞浆内出现空泡改变，见图3-2；海马区锥体细胞层数减少,神经元细胞密度下降，排列稀疏、不规则,细胞体积变小,可见核固缩现象，见图4-2。维生素E组小鼠大脑皮层细胞以及海马区神经细胞均有所改善；大脑皮层神经细胞数量有所增多，细胞核变大，排列整齐，着色相比模型组有所加深，见图3-3；海马区椎体细胞排列紧密，规则，神经元细胞核圆而大，核仁清晰，见图4-3。脑康灵组小鼠大脑皮层神经细胞以及海马区神经细胞均有明显改善；大脑皮层神经细胞数量明显增多，细胞核变大，而且排列比较整齐，见图3-4；海马区椎体细胞增多，排列紧密，规则，神经元细胞核大而圆，核仁清晰，见图4-4。大剂量金花葵籽油组小鼠大脑皮层神经细胞显著增多，神经细胞细胞核有所增大，胞浆减少，着色加深，见图3-5；海马区椎体细胞明显增多，排列整齐，神经细胞细胞核增大，胞浆较少，见图4-5。中剂量金花葵籽油组小鼠大脑皮层神经细胞有所增加，神经细胞核变大，胞浆减少，着色加深，见图3-6；海马区椎体细胞数目增多，排列整齐，神经细胞核变大，见图4-6。小剂量金花葵籽油组小鼠大脑皮层细胞数量增加，着色加深，见图3-7；海马区椎体细胞核变大，数目未见明显增长，见图4-7。

结论

采用D-半乳糖造小鼠亚急性衰老模型成功；大、中、小剂量金花葵籽油组均可以提高衰老模型小鼠胸腺、脾脏脏器指数，降低脑匀浆、肝匀浆及血浆中LPO含量，升高全血中CAT、GSH、SOD含量，降低血清中TC、TG含量，并有效改善脑、胸腺及脾脏相关的病理变化。

Claims (5)

1.金花葵籽油在制备抗衰老药品和保健品中的应用。

2.金花葵籽油在制备抗衰老护肤品中的应用。

3.一种含有金花葵籽油的抗衰老软胶囊的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、取金花葵籽原材料，干燥后送入粉碎机中，将金花葵籽粉碎后投入萃取釜，对系统进行加热，当温度达到50℃时对系统进行加压，压力达到20MPa后，调节CO₂流量为0.1m3/h，开始进行循环萃取，保持恒温恒压1h后，调节CO₂流量为0.18m3/h，再保持恒温恒压3h，然后出料，得到金花葵籽油，备用；

步骤二、按照制备软胶囊的常规过程用明胶、甘油和水制备软胶囊壳，软胶囊壳制备完成后将金花葵籽油进行胶囊填充压制，然后进行硬化成型、洗擦干燥，即完成软胶囊的制备。

4.如权利要求3所述的一种含有金花葵籽油的抗衰老软胶囊的制备方法，其特征在于：步骤一所述的金花葵籽原材料干燥方法为在恒温干燥箱中于50-80℃条件下干燥6-12h。

5.如权利要求3所述的一种含有金花葵籽油的抗衰老软胶囊的制备方法，其特征在于：将步骤一得到的金花葵籽油置于分子蒸馏器内，在真空度为1mbar、温度为60-75℃条件下进行纯化分离后再进行胶囊填充。