CN105532464A - 一种何首乌防褐化诱导培养基及其配制方法 - Google Patents
一种何首乌防褐化诱导培养基及其配制方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105532464A CN105532464A CN201610011324.4A CN201610011324A CN105532464A CN 105532464 A CN105532464 A CN 105532464A CN 201610011324 A CN201610011324 A CN 201610011324A CN 105532464 A CN105532464 A CN 105532464A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- browning
- flower root
- fleece
- concentration
- medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
Abstract
本发明提供一种何首乌防褐化诱导培养基，属于何首乌组织培养技术领域，该培养基以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、活性炭、蜂蜜、琼脂粉、蔗糖，该培养基具有抑制何首乌诱导培养时产生的褐化现象，降低褐化率，提高诱导率的优点。
Description
技术领域
本发明属于何首乌组织培养技术，特别涉及一种何首乌防褐化诱导培养基，还涉及一种何首乌防褐化诱导培养基配置方法。
背景技术
何首乌，是蓼科何首乌属多年生缠绕藤本植物，块根肥厚，长椭圆形，黑褐色，其块根入药，可安神、养血、活络、消痈，是常见的中药材。
目前何首乌快速繁殖多采用组织培养，然而由于外植体上存在伤口，伤口会分泌大量酚类物质致使何首乌组织褐化死亡，造成大量浪费，影响诱导率。
发明内容
基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种何首乌防褐化诱导培养基，其以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、活性炭、蜂蜜、琼脂粉、蔗糖，该培养基具有抑制何首乌诱导培养时产生的褐化现象，降低褐化率，提高诱导率的优点。
一种何首乌防褐化诱导培养基，以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、活性炭、蜂蜜、琼脂粉、蔗糖。
6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)的浓度为1-1.5mg/L、IBA（吲哚丁酸）的浓度为0.2-0.8mg/L，活性炭的浓度为5-15g/L，蜂蜜的浓度为100-200mg/L，琼脂粉的浓度为8～11g/L，蔗糖的浓度为25～35g/L。
6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)的浓度为1.2-1.4mg/L，IBA（吲哚丁酸）的浓度为0.4-0.6mg/L，活性炭的浓度为9-11g/L，蜂蜜的浓度为140-160mg/L，琼脂粉的浓度为9～10g/L，蔗糖的浓度为28～32g/L。
何首乌防褐化诱导培养基的pH值为6.2~6.6。
何首乌防褐化诱导培养基的pH值为6.4。
蜂蜜是中华蜜蜂出产的中蜂蜜，中蜂蜜具有抗坏血酸、类黄酮及一些酶等抗氧化成分，可以抑制褐变，降低褐化率，同时中蜂蜜还具有大量的天然营养物质，可补充培养基的不足。
一种何首乌防褐化诱导培养基的配制方法，其包括以下步骤：
步骤S10溶解配制培养基，用蒸馏水溶解MS基础培养基各成分，并添加6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、活性炭、琼脂粉、蔗糖；
步骤S20灭菌，分别将步骤S10配制好的培养基和蜂蜜进行灭菌，放于无菌环境中，备用；
步骤S30培养基混合，在无菌环境中，待步骤S20灭菌后的培养基冷却到60℃时，添加步骤S20过滤灭菌的蜂蜜，混匀，冷却至凝固。
步骤S10还包括步骤S11调节pH值，使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至6.4。
步骤S20还包括步骤S21高温灭菌和S22过滤灭菌；
S21高温灭菌，将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121℃高温灭菌20~21分钟，冷却，备用；
S22过滤灭菌，在无菌环境中使用无菌水对蜂蜜进行稀释，过滤灭菌，备用。
具体实施方式
实施例一：配制何首乌防褐化诱导培养基。
根据表1所示的MS培养基配方以及表2所示的何首乌防褐化诱导培养基配方，配制本发明所述的何首乌防褐化诱导培养基。
用天平称取MS培养基中的各成分以及6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、活性炭、琼脂粉、蔗糖，置于三角瓶中，加入适量蒸馏水，搅拌溶解，并使用HCL或者KOH调节pH值至6.4，定容至900mL。将三角瓶封口，置于高压灭菌锅中，于121℃灭菌20min，然后置于超净工作台中自然冷却，备用。
按表2所示的何首乌防褐化诱导培养基配方中的蜂蜜用量，在超净工作台中称取蜂蜜，使用无菌水稀释，并过滤灭菌，备用。
在无菌环境中，待灭菌后的培养基冷却到60℃时，向培养基加入经过滤灭菌的蜂蜜，混匀，并将培养基分装至组织培养瓶中，晾凉，待其凝固后将组织培养瓶封口，备用。
表1MS培养基的成分及其用量。
表2何首乌防褐化诱导培养基的成分及其用量。
实施例二：本发明所述的何首乌防褐化诱导培养基的测试
根据表1所示的MS培养基配方以及表3所示的何首乌防褐化诱导培养基配方，参照实施例一所述的培养基制备方法，分别配制各试验组、对照组的何首乌防褐化诱导培养基。
表3何首乌防褐化诱导培养基。
选择生长健康，品质优良的何首乌，取其1.5-2.5厘米茎尖，置于超净工作台中，用质量浓度为75%的酒精浸泡30秒，用无菌水冲洗干净，再用质量浓度为0.1%的氯化汞溶液消毒5分钟，用无菌水冲洗干净，将茎尖离伤口处0.5厘米部分切除，剩下部分接种于表3所示各试验组、对照组的培养基中，黑暗培养5天，然后于光暗周期为12h光照/12h黑暗、光照强度为2000lux、温度为25±2℃的条件下进行培养。培养30天后统计茎尖愈伤组织诱导率和褐化率，结果如表4所示。
表4何首乌防褐化诱导培养基测试结果。
由表4的试验结果可知，采用本发明所述的何首乌防褐化诱导培养基，能对何首乌诱导组织培养褐化起到一定的抑制作用，能将褐化率降低至7.83%，另外从试验组1与2,、试验组5与6，试验组7与9对比可以看出蜂蜜对抑制褐化具有明显作用，但用量超过150mg/L后其抑制褐化的能力没有随着用量的添加而更加明显，所以蜂蜜的用量在150mg/L为最佳。
Claims (9)
1.一种何首乌防褐化诱导培养基，其特征在于，以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、活性炭、蜂蜜、琼脂粉、蔗糖。
2.根据权利要求1所述的一种何首乌防褐化诱导培养基，其特征在于，6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)的浓度为1-1.5mg/L、IBA（吲哚丁酸）的浓度为0.2-0.8mg/L，活性炭的浓度为5-15g/L，蜂蜜的浓度为100-200mg/L，琼脂粉的浓度为8～11g/L，蔗糖的浓度为25～35g/L。
3.根据权利要求2所述的一种何首乌防褐化诱导培养基，其特征在于，6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)的浓度为1.2-1.4mg/L，IBA（吲哚丁酸）的浓度为0.4-0.6mg/L，活性炭的浓度为9-11g/L，蜂蜜的浓度为140-160mg/L，琼脂粉的浓度为9～10g/L，蔗糖的浓度为28～32g/L。
4.根据权利要求1至3的其中之一所述的一种何首乌防褐化诱导培养基，其特征在于，所述的何首乌防褐化诱导培养基的pH值为6.2~6.6。
5.根据权利要求4的所述的一种何首乌防褐化诱导培养基，其特征在于，所述的何首乌防褐化诱导培养基的pH值为6.4。
6.根据权利要求1至3的其中之一所述的一种何首乌防褐化诱导培养基，其特征在于，所述的蜂蜜是中华蜜蜂出产的中蜂蜜。
7.一种何首乌防褐化诱导培养基的配制方法，其特征在于，其包括以下步骤：
步骤S10溶解配制培养基，用蒸馏水溶解MS基础培养基各成分，并添加6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、活性炭、琼脂粉、蔗糖；
步骤S20灭菌，分别将步骤S10配制好的培养基和蜂蜜进行灭菌，放于无菌环境中，备用；
步骤S30培养基混合，在无菌环境中，待步骤S20灭菌后的培养基冷却到60℃时，添加步骤S20过滤灭菌的蜂蜜，混匀，冷却至凝固。
8.根据权利要求7所述的一种何首乌防褐化诱导培养基的配制方法，其特征在于，所述的步骤S10还包括步骤S11调节pH值，使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至6.4。
9.根据权利要求7所述的一种何首乌防褐化诱导培养基的配制方法，其特征在于，所述的步骤S20还包括步骤S21高温灭菌和S22过滤灭菌；
S21高温灭菌，将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121℃高温灭菌20~21分钟，冷却，备用；
S22过滤灭菌，在无菌环境中对蜂蜜进行稀释，过滤灭菌，备用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610011324.4A CN105532464A (zh) | 2016-01-09 | 2016-01-09 | 一种何首乌防褐化诱导培养基及其配制方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610011324.4A CN105532464A (zh) | 2016-01-09 | 2016-01-09 | 一种何首乌防褐化诱导培养基及其配制方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105532464A true CN105532464A (zh) | 2016-05-04 |
Family
ID=55812472
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610011324.4A Pending CN105532464A (zh) | 2016-01-09 | 2016-01-09 | 一种何首乌防褐化诱导培养基及其配制方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105532464A (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1934933A (zh) * | 2006-10-08 | 2007-03-28 | 南京林业大学 | 何首乌的组织培养快繁方法 |
| CN103262791A (zh) * | 2013-06-14 | 2013-08-28 | 重庆市中药研究院 | 一种何首乌良种选育方法 |
-
2016
- 2016-01-09 CN CN201610011324.4A patent/CN105532464A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1934933A (zh) * | 2006-10-08 | 2007-03-28 | 南京林业大学 | 何首乌的组织培养快繁方法 |
| CN103262791A (zh) * | 2013-06-14 | 2013-08-28 | 重庆市中药研究院 | 一种何首乌良种选育方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| AGNIESZKA PŁAŻEK ET AL.: "IMPROVEMENT OF MEDIUM FOR MISCANTHUS × GIGANTEUS CALLUS INDUCTION AND PLANT REGENERATION", 《ACTA BIOLOGICA CRACOVIENSIA》 * |
| 侯志强: "鲜切马铃薯褐变控制技术及机理研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 * |
| 赵云峰等: "组培条件对何首乌愈伤组织诱导及生长的影响", 《曲阜师范大学学报》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103766218A (zh) | 一种蝴蝶兰诱导培养基及蝴蝶兰无性繁殖方法 | |
| CN106613359A (zh) | 一种蛹虫草液体培养基瓶栽出菇培养方法 | |
| CN102884981A (zh) | 两面针组织培养培养基 | |
| CN105532463A (zh) | 一种提高藏红花芽增殖率的增殖培养基 | |
| CN101658162A (zh) | 一种多齿红山茶鲜切花保鲜剂及制备方法 | |
| CN102342248A (zh) | 马铃薯茎尖脱毒育种方法及双层培养基 | |
| US20240081209A1 (en) | A method of production of phytocannabinoids for use in medical treatments | |
| CN105475141A (zh) | 一种提高人参皂甙含量的人参培养基及其配制方法 | |
| CN105532464A (zh) | 一种何首乌防褐化诱导培养基及其配制方法 | |
| CN110178725A (zh) | 一种天山雪莲愈伤组织的悬浮培养方法 | |
| CN109479724A (zh) | 一种黑果枸杞花药培养获得紫色愈伤组织的方法 | |
| CN105532462A (zh) | 一种何首乌芽增殖培养基及其配制方法 | |
| CN109329059A (zh) | 一种稻草石蒜组织培养的方法 | |
| CN104255453B (zh) | 一种甜叶菊组培苗的保存方法 | |
| CN103444547A (zh) | 一种楤木悬浮细胞培养的方法 | |
| CN104170733B (zh) | 红腺忍冬无菌组培苗叶柄愈伤组织不定根诱导的方法 | |
| CN106234215A (zh) | 一种彩色夜光培养基及其制备方法和应用于微型盆景 | |
| CN105503432A (zh) | 一种提高人参移栽成活率的壮苗培养基及其配制方法 | |
| CN104521753A (zh) | 一种金花茶的快速繁殖方法 | |
| CN109479727A (zh) | 一种以百子莲叶片作为外植体诱导胚性细胞的方法 | |
| CN110393152A (zh) | 一种改良ms液体培养基及蛇足石杉无菌茎尖培养方法 | |
| CN104488714B (zh) | 一种金花茶的组培方法 | |
| CN103518624B (zh) | 一种马铃薯脱毒组培苗提纯复壮方法 | |
| CN103734004A (zh) | 凹叶厚朴芽诱导培养基的制备方法 | |
| CN103733998B (zh) | 一种雨城丹桂愈伤组织分化及增殖方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20160504 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |