CN105524223A - 一种用于固定化酶载体的多孔ps-dvb微球制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种用于固定化酶载体的多孔PS-DVB微球制备方法,属于酶载体材料制备领域。提供一种表面疏水,粒径可控的用于固定化酶载体的多孔PS-DVB微球制备方法。所述方法采用分散聚合法制备了粒径为2μm的聚苯乙烯种子,再通过二步种子溶胀法制备出多孔PS-DVB微球。采用该方法制备的多孔微球呈单分散性,具有多孔结构,粒径约为5μm,随着S/DVB的比例增加,微球比表面积增大,可达21.4m2/g,平均孔径在14.3~18.4之间,孔径往分布显示分布最广的孔径约为30~40nm,红外图谱显示多孔微球表面主要为苯环基团,呈疏水性,该多孔PS-DVB微球在固定化酶领域有潜在的应用。
Description
技术领域
本发明属于酶载体材料制备领域。
背景技术
固定化酶由于克服了游离酶溶于水.不稳定和利用后分离凼难的缺点,使酶在工业上得到了更广泛和更有效的利用。固定化酶的性能很大~部分取决于固定化酶载体的选择。目前,用于固定化酶的载体有壳聚糖,甲壳素,纤维素,凝胶材料,磁性微粒,有机合成聚合物等。其中有机聚合物载体依旧是酶固定化载体的主要研究内容。特别是多孔聚合物微球由于其比表面积比较大,微球周围的孔隙可以装载较多的酶,引起了人们更多的关注。然而控制合适的孔径大小对固定化酶至关重要。太小的微孔会导致扩散限制和引起生物分子损伤,而过大的孔,则比表面积下降,负载酶量低。
发明内容
本发明的目的是提供一种表面疏水,粒径可控的用于固定化酶载体的多孔PS-DVB微球制备方法。
本发明通过以下技术方案予以实现:一种用于固定化酶载体的多孔PS-DVB微球制备方法,包括聚苯乙烯种球制备和多孔微球制备两步骤;
所述聚苯乙烯(PS)种球制备步骤为,将1.75g的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)分散于100ml无水乙醇/乙二醇甲醚(体积比为1:1)混合体系后,加入到250ml的三口烧瓶中,磁力搅拌,通氮,冷凝回流,升温至70℃,预热20min,用筒形滴液漏斗将溶有lwt%偶氮二异丁腈(AIBN)的苯乙烯单体15ml加入到三口烧瓶中.反应10h,所获种球经离心分离,乙醇多次冼涤,自然风干后备用;
所述多孔微球制备步骤为,该制备步骤分四步在500ml的四口烧瓶中进行,第一步为种球的活化,将0.3ml氯代十二烷(CD)与25ml十二烷基硫酸钠(SDS,0.25wt%)超声乳化后(粒径小于0.5μm),加入到含有0.2g聚苯乙烯种子的25mlSDS(0.25wt%)超声分散液中,在35℃下溶胀10h,搅拌速度为120r/min,第二步为种球的溶胀,用上述超声乳化方法将总体积为6ml的苯乙烯/二乙烯基苯/甲苯、0.1g过氧化苯甲酰(BPO)与145mlSDS(0.25wt%)乳化后,滴加入种球活化液中,滴加时间为1h,在35℃下继续溶胀10h,搅拌速度为120r/min,第三步为聚合,向体系中通氮气30min,补加50ml(5wt%)的PVA溶液和0.05gCuCl2,将四口烧瓶放入已预热80℃的浴中反应10h,第四步为致孔剂的提取,产物溶液用乙醇和水反复洗涤,用二氯甲烷萃取24h提取线性苯乙烯和甲苯,得到多孔PS—DVB微球。
本发明具有如下有益效果:
采用该方法可以制备出粒径为2μm的聚苯乙烯种子,再通过二步种子溶胀法制备出PS/DVB的单分散多孔PS-DVB微球,SEM照片显示多孔微球呈单分散性,具有多孔结构,粒径约为5μm,BET比表面积测试随着S/DVB的比例增加,微球比表面积增大,可达21.4m2/g,平均孔径在14.3~18.4之间,孔径往分布显示分布最广的孔径约为30~40nm,红外图谱显示多孔微球表面主要为苯环基团,表明呈疏水性,该多孔PS-DVB微球在固定化酶领域有潜在的应用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
具体实施例:本发明所述制备过程包括聚苯乙烯种球制备和多孔微球制备两步骤;
所述聚苯乙烯(PS)种球制备步骤为,将1.75g的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)分散于100ml无水乙醇/乙二醇甲醚(体积比为1:1)混合体系后,加入到250ml的三口烧瓶中,磁力搅拌,通氮,冷凝回流,升温至70℃,预热20min,用筒形滴液漏斗将溶有lwt%偶氮二异丁腈(AIBN)的苯乙烯单体15ml加入到三口烧瓶中.反应10h,所获种球经离心分离,乙醇多次冼涤,自然风干后备用;
所述多孔微球制备步骤为,该制备步骤分四步在500ml的四口烧瓶中进行,第一步为种球的活化,将0.3ml氯代十二烷(CD)与25ml十二烷基硫酸钠(SDS,0.25wt%)超声乳化后(粒径小于0.5μm),加入到含有0.2g聚苯乙烯种子的25mlSDS(0.25wt%)超声分散液中,在35℃下溶胀10h,搅拌速度为120r/min,第二步为种球的溶胀,用上述超声乳化方法将总体积为6ml的苯乙烯/二乙烯基苯/甲苯、0.1g过氧化苯甲酰(BPO)与145mlSDS(0.25wt%)乳化后,滴加入种球活化液中,滴加时间为1h,在35℃下继续溶胀10h,搅拌速度为120r/min,第三步为聚合,向体系中通氮气30min,补加50ml(5wt%)的PVA溶液和0.05gCuCl2,将四口烧瓶放入已预热80℃的浴中反应10h,第四步为致孔剂的提取,产物溶液用乙醇和水反复洗涤,用二氯甲烷萃取24h提取线性苯乙烯和甲苯,得到多孔PS—DVB微球。
采用该方法可以制备出粒径为2μm的聚苯乙烯种子,再通过二步种子溶胀法制备出PS/DVB的单分散多孔PS-DVB微球,SEM照片显示多孔微球呈单分散性,具有多孔结构,粒径约为5μm,BET比表面积测试随着S/DVB的比例增加,微球比表面积增大,可达21.4m2/g,平均孔径在14.3~18.4之间,孔径往分布显示分布最广的孔径约为30~40nm,红外图谱显示多孔微球表面主要为苯环基团,表明呈疏水性,该多孔PS-DVB微球在固定化酶领域有潜在的应用。
以上内容是结合具体的实施方式对本发明所做的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (1)
1.一种用于固定化酶载体的多孔PS-DVB微球制备方法,其特征在于:包括聚苯乙烯种球制备和多孔微球制备两步骤;
(1)所述聚苯乙烯(PS)种球制备步骤为,将1.75g的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)分散于100ml无水乙醇/乙二醇甲醚(体积比为1:1)混合体系后,加入到250ml的三口烧瓶中,磁力搅拌,通氮,冷凝回流,升温至70℃,预热20min,用筒形滴液漏斗将溶有lwt%偶氮二异丁腈(AIBN)的苯乙烯单体15ml加入到三口烧瓶中.反应10h,所获种球经离心分离,乙醇多次冼涤,自然风干后备用;
(2)所述多孔微球制备步骤为,该制备步骤分四步在500ml的四口烧瓶中进行,第一步为种球的活化,将0.3ml氯代十二烷(CD)与25ml十二烷基硫酸钠(SDS,0.25wt%)超声乳化后,加入到含有0.2g聚苯乙烯种子的25mlSDS(0.25wt%)超声分散液中,在35℃下溶胀10h,搅拌速度为120r/min,第二步为种球的溶胀,用上述超声乳化方法将总体积为6ml的苯乙烯/二乙烯基苯/甲苯、0.1g过氧化苯甲酰(BPO)与145mlSDS(0.25wt%)乳化后,滴加入种球活化液中,滴加时间为1h,在35℃下继续溶胀10h,搅拌速度为120r/min,第三步为聚合,向体系中通氮气30min,补加50ml(5wt%)的PVA溶液和0.05gCuCl2,将四口烧瓶放入已预热80℃的浴中反应10h,第四步为致孔剂的提取,产物溶液用乙醇和水反复洗涤,用二氯甲烷萃取24h提取线性苯乙烯和甲苯,得到多孔PS-DVB微球。
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