CN105521492B - 一种多孔性白及胶及其制备方法和用途 - Google Patents

一种多孔性白及胶及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种多孔性白及胶，其中，所述白及胶的平均分子量为320KDa～560KDa，孔隙率可达75～98％，白及胶以白及多糖计，质量百分含量为55％～65％。本发明还提供了所述多孔性白及胶的制备方法和用途。本发明白及胶具有多孔疏松的内部结构，吸水率高，膨胀性能优良且天然无毒，性质稳定，生物相容性好，具有快速起漂、长时间漂浮和缓释三种性能，是一种优良的胃滞留漂浮型缓控释制剂辅料，对胃滞留制剂的开发和应用具有十分重要的意义，具有广阔的市场前景。

Description

一种多孔性白及胶及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及一种多孔性白及胶及其制备方法和用途，属药物领域。
背景技术
白及是一种常用中药，系兰科植物白及(Bletilla sfriata(Thunb.)Reiehb.f.)的干燥块茎，具有收敛止血，消肿生肌之功效，临床广泛应用于治疗咳血、吐血，外伤出血，疮疡肿毒，皮肤皲裂等病症。白及鳞茎中含有大量水溶性多糖，其化学成分葡萄甘露聚糖是白及胶的主要功能性成分。
白及胶是一种优良的天然食品增稠剂，同时是安全性较高的医药原料、性能卓越的药用辅料和有相当发展前景的生物医学材料。此外，白及胶还可应用于日化产品中，替代化学增稠剂，并具有减少刺激、保护皮肤、延缓衰老等功能。在医药方面，白及胶以其在水中溶解时易形成亲水凝胶这一特性，不但在临床治疗上有很好的作用，而且作为制剂辅料也有着广泛的应用，可作为膜剂、栓剂、凝胶剂的基质，固体制剂的粘合剂，液体制剂的乳化助悬剂，代血浆，血管栓塞剂等。
胃滞留漂浮型缓控释制剂是一种有效的生物给药系统，属现代药物缓释、控释技术，不但可以延长药物在胃肠道中的停留时间，缓慢持久地释放药物，改善药物的吸收，提高药物的生物利用度，而且有胃的靶向作用，对胃部疾病的治疗起到了积极的作用。胃滞留漂浮型缓控释制剂是由药物和一种或多种亲水凝胶及其他辅料制成。亲水凝胶有天然与合成两大类，常用的天然高分子材料有阿拉伯胶、明胶、果胶、壳聚糖等；合成的高分子材料有纤维素衍生物类，如甲基纤维素、羟丙基纤维素等；丙烯酸类聚合物，如聚丙烯酸、丙烯酸树脂等。
专利申请号：200810093990.2，发明名称：有协同治疗作用的眼用药物缓释载体公开了一种有协同作用的眼用药物缓释载体，该药物缓释载体是白及胶。该白及胶的平均分子量在65000-150000道尔顿，优选平均分子量99658道尔顿，白及胶以葡配甘露聚糖计，含量>85％。目前常用的白及胶产品均是低分子量的白及胶，导致白及胶的研究和应用的局限性。
目前，尚未见高分子量白及胶产品的相关报道，也未见以白及胶制备胃滞留漂浮型缓控释制剂辅料的报道。
发明内容
本发明的技术方案是提供了一种多孔性白及胶及其制备方法和用途。
本发明提供了一种多孔性白及胶，所述白及胶的平均分子量为320KDa～560KDa，孔隙率为75～98％，白及胶以白及多糖计，质量百分含量为55％～65％。
优选地，所述白及胶的分子量为460KDa，孔隙率为95％，白及胶以白及多糖计，质量百分含量为62.51％。
本发明提供了制备所述多孔性白及胶的方法，包括下述步骤：
(1)白及胶的提取：
取白及生药材，粉碎、过筛，脱脂，滤过，挥干，加50倍量水，70℃，提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，浓缩，即得粗白及胶；
(2)白及胶的纯化：
a.取粗白及胶用Sevage法脱蛋白，浓缩，醇沉，过滤，收集沉淀，沉淀加有机溶剂洗涤，挥干，即得精制白及胶；
b.取精制白及胶加水复溶，用不同浓度乙醇梯度沉淀，收集沉淀，干燥，得不同分子量段的白及胶；
(3)白及胶的干燥：取步骤b的白及胶，加水复溶，制备成白及胶溶液，取白及胶溶液进行冷冻干燥，即得本发明多孔性白及胶。
其中，步骤(1)所述脱脂的步骤如下：
白及粉中按料液比1:5加入95％v/v乙醇，60℃回流提取2次，每次1-2h，滤过，再按料液比1:5加入石油醚60～90℃回流提取2h；
步骤(2)所述醇沉的步骤如下：
取脱蛋白后的浓缩液，加入95％v/v乙醇，慢加快搅，至沉淀不再增加，4℃冷藏12h，过滤，沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥干；
步骤b所述乙醇梯度沉淀的步骤如下：
取精制白及胶加水复溶，分次加入乙醇使醇体积浓度分别达到40％、60％、80％，每次所得醇沉液于4℃放置4h，3000r/min离心分离，收集沉淀，干燥。
其中，步骤(3)所述白及胶溶液的浓度为1～30mg/mL，冷冻干燥的预冻温度为-4℃～-60℃，预冻时间为2～8h，冷冻干燥真空度为10～30Pa，干燥时间为5～8h。
优选地，所述白及胶溶液的浓度为15mg/mL，预冻温度为-60℃，预冻时间为3h，冷冻干燥真空度为20Pa，干燥时间为6h。
本发明提供了所述多孔性白及胶在制备胃滞留漂浮型缓控释制剂中的用途。
本发明还提供了一种胃滞留漂浮型缓控释制剂，它含有所述的多孔性白及胶。
其中，所述的制剂为片剂、微丸剂、微球剂、颗粒剂或胶囊剂。
本发明白及胶具有多孔疏松的内部结构，孔隙率可达75～98％，其吸水率高，膨胀性能优良且天然无毒，性质稳定，生物相容性好，具有快速起漂、长时间漂浮和缓释三种性能，是一种优良的胃滞留漂浮型缓控释制剂辅料，对胃滞留制剂的开发和应用具有十分重要的意义。本发明白及胶的平均分子量为320KDa～560KDa，是一种高分子量的白及胶，为白及胶的研究和应用提供了新的选择，具有广阔的市场前景。
附图说明
图1对照品检测波长测定
图2葡萄糖质量与吸光度的线性关系
图3料液比对白及多糖得率关系
图4料液比对白及多糖得率
图5时间比对白及多糖得率
图6不同干燥工艺制得的白及多糖样品
图7不同浓度样品冷冻干燥后的样品
图8不同浓度白及多糖冷冻干燥样品的SEM图；
图中，A：1mg/mL冷冻干燥多糖样品；B：2mg/mL冷冻干燥多糖样品C：4mg/mL冷冻干燥多糖样品；D：8mg/mL冷冻干燥多糖样品；E：10mg/mL冷冻干燥多糖样品；F：20mg/mL冷冻干燥多糖样品；G：30mg/mL冷冻干燥多糖样品
图9白及胃漂浮片A、B起漂时间
图10白及胃漂浮片A、B持漂时间
图11白及胃漂浮片A、B吸水率
图12白及胃漂浮片A、B径向膨胀率
图13白及胃漂浮片A、B轴向膨胀率
图14白及胃漂浮片A、B体积膨胀率
以下通过具体实施方式对本发明作进一步的详细描述，但并不限制本发明，本领域技术人员根据本发明作出的各种改变和替换，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。
具体实施方式
实施例1本发明多孔性白及胶的制备
(1)白及胶的提取：
取白及生药材，粉碎、过筛，白及粉中按料液比1:5加入95％v/v乙醇，60℃回流提取2次，每次2h，滤过，再按料液比1:5加入石油醚，60～90℃回流提取1次，每次2h进行脱脂，滤过，挥干，加50倍量水，70℃，提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，浓缩，即得粗白及胶；
(2)白及胶的纯化：
a.取粗白及胶用Sevage法脱蛋白，浓缩，加入95％v/v乙醇，慢加快搅，至沉淀不再增加，4℃冷藏12h，过滤，沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥干，即得精制白及胶；
b.取精制白及胶加水复溶，分次加入乙醇使醇体积浓度分别达到40％、60％、80％，边加边搅，每次所得醇沉液于4℃放置4h，3000r/min离心分离，收集沉淀，干燥，得不同分子量段的白及胶；
(3)白及胶的干燥：取步骤b的白及胶，加水复溶，制备成浓度为15mg/mL的白及胶溶液，将白及胶溶液将样品置于-60℃预冻3h，预冻结束后立即放入冻干机中进行真空冻干，冷冻干燥真空度为20Pa，冷冻干燥6h。
实施例2本发明多孔性白及胶的制备
(1)白及胶的提取：
取白及生药材，粉碎、过筛，白及粉中按料液比1:5加入95％v/v乙醇，60℃回流提取2次，每次2h，滤过，再按料液比1:5加入石油醚，60～90℃回流提取1次，每次2h进行脱脂，滤过，挥干，加50倍量水，70℃，提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，浓缩，即得粗白及胶；
(2)白及胶的纯化：
a.取粗白及胶用Sevage法脱蛋白，浓缩，加入95％v/v乙醇，慢加快搅，至沉淀不再增加，4℃冷藏12h，过滤，沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥干，即得精制白及胶；
b.取精制白及胶加水复溶，分次加入乙醇使醇体积浓度分别达到40％、60％、80％，边加边搅，每次所得醇沉液于4℃放置4h，3000r/min离心分离，收集沉淀，干燥，得不同分子量段的白及胶；
(3)白及胶的干燥：取步骤b的白及胶，加水复溶，制备成浓度为1mg/mL的白及胶溶液，将白及胶溶液置于-4℃预冻8h(缓冻)，预冻结束后立即放入冻干机中进行真空冻干，冷冻干燥真空度为10Pa，冷冻干燥5h。
实施例3本发明多孔性白及胶的制备
(1)白及胶的提取：
取白及生药材，粉碎、过筛，白及粉中按料液比1:5加入95％v/v乙醇，60℃回流提取2次，每次2h，滤过，再按料液比1:5加入石油醚，60～90℃回流提取1次，每次2h进行脱脂，滤过，挥干，加50倍量水，70℃，提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，浓缩，即得粗白及胶；
(2)白及胶的纯化：
a.取粗白及胶用Sevage法脱蛋白，浓缩，加入95％v/v乙醇，慢加快搅，至沉淀不再增加，4℃冷藏12h，过滤，沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥干，即得精制白及胶；
b.取精制白及胶加水复溶，分次加入乙醇使醇体积浓度分别达到40％、60％、80％，边加边搅，每次所得醇沉液于4℃放置4h，3000r/min离心分离，收集沉淀，干燥，得不同分子量段的白及胶；
(3)白及胶的干燥：取步骤b的白及胶，加水复溶，制备成浓度为30mg/mL的白及胶溶液，将白及胶溶液置于-60℃预冻2h(急冻)，预冻结束后立即放入冻干机中进行真空冻干，冷冻干燥真空度为30Pa，冷冻干燥8h。
以下通过具体实验证明本发明的有益效果。
实验例1白及胶的提取工艺筛选
(1)白及多糖相对分子质量的测定方法
采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)对白及多糖进行相对分子质量测定。色谱柱：TSK－gel G4000PWXL(7.8mm×300mm)，流动相:纯水，柱温30℃，流速:0.5mL/min，进样量20μL，示差折光检测器。先将葡聚糖系列对照品按相对分子质量(5、50、150、410kDa及Glc)由小到大依次进样，样品进样，测定保留时间以lgMw(分子质量对数)对tR(保留时间)绘制标准曲线，得线性回归方程，计算测定结果，测得白及多糖平均分子量为320KDa～560KDa。
(2)白及胶多糖含量的测定
供试品溶液的制备：
将脱酯后的白及粉末1g，置于100ml锥形瓶中，加入一定量的水，在一定温度下搅拌提取一定时间，提取液1500r/min离心10min，取上清液1ml，稀释100倍，制备得到白及多糖供试品溶液。
对照品溶液的制备：
精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖10.55mg，置10mL容量瓶中，加水溶解稀释至刻度，摇匀，再精密量取1mL置于10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得，每1mL含无水葡萄糖105.5μg。
5％苯酚试剂的配置：
称取重蒸后的苯酚5.2359g，置100ml量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得。
检测波长的选择：
取对照品溶液1ml置于具塞试管中，冰水浴中加入5％苯酚-硫酸试剂1ml，沸水浴10min，冷却至室温，于波长400～600nm范围内扫描，490nm处有最大吸收，故选490nm为检测波长，见图1。
标准曲线的制作：
采用硫酸-苯酚法进行测定，精密量取对照品溶液0.0mL、0.6mL、0.8mL、1mL、1.2mL、1.4mL、1.6mL、1.8mL分别置具塞试管中，稀释至2ml，分别加5％苯酚溶液1mL，混匀，迅速加入硫酸5mL，摇匀，冷水浴10min冷却后，以第一份为空白，在490nm的波长处测定吸收度(酶标仪)，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，y＝34.133x-0.0636(R2＝0.9991)，表明葡萄糖在63.3μg～189.9μg范围内与吸光度有良好的线性关系，见图2。
白及胶多糖含量的测定：
取多糖样品溶液于1ml溶于10ml试管中，加水至2.0mL，先后加1.0mL5％苯酚和浓硫酸5.0mL，摇匀，置沸水中水浴10min，取出冰浴10min后放置至室温，在490nm处测吸光度，测定并计算白及多糖质量百分含量为55％～65％。
(3)白及胶孔隙率的测定方法
孔隙率指散粒状材料表观体积中材料内部的孔隙占总体积的比例。
因本品在冷水中溶解极为缓慢，故采用浸泡介质法测定孔隙率。首先利用游标卡尺测量样品的半径r和高度h(由此可算出试样的总体积)，称出干燥试样在空气中的重量m1，然后浸入蒸馏水中使其饱和填满孔隙。试样浸泡一定时间内充分饱和后，将试样去除，轻轻擦去试样表面的介质，再用电子秤称出试样此时在空气中的总质量m2，由下公式计算孔隙率，孔隙率为75～98％。
(4)提取工艺单因素考查
本试验采用热水搅拌提取的方法，考查温度(40、50、60、70、80℃)，搅拌时间(30、60、90、120、150min)及料液比(1∶20、1:30、1:40、1:50、1:60g/ml)对白及多糖提取率的影响进行研究。
a.料液比对多糖提取率的影响：
准确称取1.0g脱脂后的白及干粉于100ml的锥形瓶中，固定提取时间为2h，提取温度为60℃，分别按料液比(1∶20、1:30、1:40、1:50、1:60g/ml)加入不同体积的蒸馏水，1试3份，考查料液比对白及多糖得率的影响，结果见图3。
由图可知，溶剂用量增大，白及多糖的提取率越高，这是因为溶剂的量增加可以提高白及粉与水溶液间的多糖浓度差，有利于多糖向水提液中扩散，从而提高多糖的提取率，但是，当料液比达到一定后，提取率增幅较小，继续增加溶剂会使提取过程更加繁琐，不易浓缩。因此，最佳料液比选择1∶50(g/ml)。
b.提取温度对多糖提取率的影响：
准确称取1.0g脱脂后的白及干粉于100ml的锥形瓶中，固定提取时间为2h，按料液比为1∶40g/ml加入蒸馏水，分别在温度为40、50、60、70、80、90℃下提取，1试3份，考查温度对白及多糖得率的影响，结果见图4。
由图可知，随着温度的升高，白及多糖的提取率增加，当温度从50℃增加到70℃时，多糖提取率增加幅度最大；温度高于80℃时，提取率增幅趋缓。这是由于温度的升高，分子运动加剧，多糖从白及叶细胞中的溶出速率增加；但是温度过高，使得溶剂挥发加快，影响多糖的提取，且长时间高温浸提可能会影响多糖活性。因此，最佳提取温度选择70℃。
c.提取时间对多糖提取率的影响：
准确称取1.0g脱脂后的白及干粉于100ml的锥形瓶中，固定提取温度为80℃，料液比为1∶40g/ml加入蒸馏水，分别在时间为1h、1.5h、2h、2.5h、3h下提取，1试3份，考查时间对白及多糖得率的影响，结果见图5。
由图可知，随着浸提时间的延长，多糖的提取率逐渐增大。当提取时间由提取1.5h增加到2h，提取率大幅度提高；但当浸提时间大于2.5h时，提取率增加幅度较小，这是由于白及药粉中的可溶性多糖扩散到水溶液中的速度与二者中的多糖浓度差成正比，当水提液中多糖的浓度与白及细胞中浓度趋于平衡时，多糖的溶出较少。因此，最佳提取时间选择2h。
实验例2精制白及胶的常温挥干、真空减压干燥以及冷冻干燥比较
1精制白及胶的常温挥干、真空减压干燥以及冷冻干燥的制备工艺、成膜性能及物理性能比较如下表1。
表1精制白及胶的常温挥干、真空减压干燥以及冷冻干燥比较
2精制白及胶的常温挥干、真空减压干燥以及冷冻干燥样品，见图6、图7。
实验例3多孔性白及胶的性能测定
1多孔性结构
本发明采用冷冻干燥的方法制备多孔性白及胶，考查4mg/mL、8mg/mL、10mg/mL、15mg/mL、20mg/mL、25mg/mL、30mg/mL不同浓度白及胶溶液冷冻干燥后呈现出不同的疏松结构，见图8。
图中显示：经过冷冻干燥的样品均呈现疏松多孔形状，但随着浓度的不同，A到B毛絮状结构明显增多；B到C絮状结构变为带状结构；C到D带状结构变为片状结构；D到E片状结构增多，几乎形成薄膜；E到F片状结构增多连接成薄膜且出现明显的网孔结构，且网孔较大；F到G薄膜增厚，且网孔变多变小。
结果表明，本发明制备的多孔性白及胶均具有定向的微管结构，孔隙上下连通，孔的大小不同，形状多类似菱形或扁圆，宽度在50μm～100μm之间，长度在100μm～600μm之间，通过增加白及多糖胶溶液的浓度可以使微管排列规则，同时微管的密度也随之增加，孔隙率可高达98％，但浓度达到一定后，微管密度减小，出现板状结构，孔隙率降低，孔径减小，材料的吸水性随着孔径的减小而降低。
2硬度和疏松度性能测定
通过美国FTC公司的TMS-Pro专业级物性分析仪测定精制白及胶，白及多糖及其不同浓度冻干样品的各种理化性能进行测定。样品浓度梯度分别为1mg/mL、4mg/mL、8mg/mL、10mg/mL、15mg/mL、20mg/mL、25mg/mL、30mg/mL，同时将不同浓度的样品置于同样大小的培养皿中，通过冷冻干燥，形成冻干样品，厚度约5mm。
结果显示，随着多糖浓度的增大，冻干的疏松度逐渐降低，硬度迅速增大，浓度为1～10mg/mL时，样品的硬度值低于0.1N，冻干样品更疏松，但硬度不够，易塌陷且冻干效率低，易出现溏心；15～20mg/mL时，样品的硬度迅速增大，冻干样品较为蓬松；浓度达到25mg/mL以上时，白及胶冻干样品的硬度值显著增大，蓬松度随之减小，且高浓度样品粘度也增大，冻干效率低。
3凝胶性能测定
在测定不同浓度液体性能时，溶液浓度为1-20mg/mL的凝胶测试中发现，随着浓度的增大，白及胶的溶液不论是强度还是粘附性都在增大，但是增大趋势很小，尤其是浓度1-8mg/mL溶液强度、粘附性方面几乎无差别，所以将白及胶浓度设定为10mg/mL、15mg/mL、20mg/mL、25mg/mL、30mg/mL。
在测定白及胶的溶液性能时发现，当浓度大于15mg/mL时，溶液的强度显著增大，相应的粘附性也随着增大。浓度15mg/mL与20mg/mL的溶液在强度与粘附性方面都很接近，在数值上，溶液强度均在0.1N左右，粘附力在0.03N左右。溶液浓度10-15mg/mL的溶液凝胶强度数值相同，粘附力差异也相对较小，故15～20mg/mL时，溶液强度和粘附力适中。
4胃漂浮性能测定
4.1白及胃漂浮片的制备
取冻干白及胶样品及挥干白及胶样品粉末适量，过80目筛，在50℃恒温干燥。在干燥后的物料中加入1％的十八醇混匀，用TDP-5单冲压片机压片，调节片重和控制硬度，即得白及胃漂浮片A(冻干样品)和白及胃漂浮片B(挥干样品)。
制得的白及胃漂浮片A，片重0.18g，硬度0.280Kg/cm2；白及胃漂浮片B，片重0.22g，硬度0.229Kg/cm2。直径、厚度均为10mm、2mm。
4.2起漂时间及持续漂浮时间测定
采用2010年版中国药典二部附录X C溶出度测定法第二法“浆法”装置，转速是50r/min，介质是脱气的0.1mol/L盐酸溶液900mL，温度是(37±0.5)℃。投入白及胃漂浮片A、B各6片，立即计时，记录白及胃漂浮片A、B上浮到液面所需的时间(起漂时间t1)和再次下沉所需的时间(持续漂浮时间t2)，取平均值，见表2、图9、图10。
表2白及胃漂浮片A、B起漂时间及持续漂浮时间测定结果
由表中数据可知，白及胃漂浮片A在3min内起漂，且可以维持漂浮状态8h以上。但白及胃漂浮片B在10min以上才起漂，维持漂浮状态长达3h以下。
4.3吸水率测定
用溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录X C第一法)装置，以900ml0.1mol/L盐酸为溶剂，转速100r/min。试验开始时,预先将转篮浸入溶剂中约5分钟，取出，用滤纸吸干，称重，作为转篮的初始重量(Ws)，然后将精密称重的白及胃漂浮片A、B待测片(Wo)分别置于同一转篮中开始试验，分别于一定时间(1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0)取出，用滤纸吸干转篮上的水，精密称重(Wt)，重复三次，计算平均值。按下式计算增重百分比：
I＝(Wt-Ws-Wo)/Wo*100％
以吸水增重百分比(I)对时间(t)作图，绘制白及胃漂浮片A、B吸水增重曲线，见表3、图11。
表3白及胃漂浮片A、B吸水率测定结果
经测定，白及胃漂浮片A吸水快，且吸水率在300％以上，而白及胃漂浮片B相对较慢，吸水率在200％以上。
4.4膨胀性能测定
对吸水后的白及胃漂浮片A、B测定其直径φo和厚度Ho后，分别放入转篮中，按一定时间(1.0,2.0，4.0,6.0)从篮中取出，置于盖玻片上，用显微测距仪观察并分别测定径向、轴向凝胶层厚度φt和Ht，重复三次，计算平均值。分别按下式计算径向、轴向溶胀百分比：
径向Q＝(φt-φo)/φo
轴向A＝(Ht-Ho)/Ho
将待测片剂看成是一个规则的圆柱体来看，根据径向φt和轴向Ht凝胶层厚度中和计算制剂体积，按下式计算体积变化百分比:
S＝(Vt-Vo)/Vo*100％
由此可得白及胃漂浮片A、B的径向、轴向以及体积溶胀百分比与时间的关系曲线，见表4、图12-14。
表4白及胃漂浮片A、B膨胀性能测定结果
由图表可知，片剂的轴向溶胀程度大于径向，白及缓释片A径向溶胀百分比可达30％以上，溶胀轴向百分比可达300％以上。白及缓释片B径向溶胀百分比在20％以上，轴向溶胀百分比在200％以上。
4.5降解性能测定
按照中国药典2010年版2部附录X C溶出度测定法桨法的装置经稍微改进后进行，转速为100r·min-1，温度(37±0.5)℃，介质分别为人工胃液的PBS缓冲液250mL。向介质中加入白及胃漂浮片A、B，进行降解实验。在人工胃液中的降解实验中，分别在规定的时间点0，0.25，0.5，1，2，4，6，8，10，12h分别观察两者降解情况，结果表明片B在4h内均裂解成碎片，部分发生溶解，6h溶解完全；片A在8h内充分膨胀但基本保持片剂形态，未发生明显降解。
综上，本发明白及胶具有多孔疏松的内部结构，孔隙率可达75～98％，其吸水率高，膨胀性能优良且天然无毒，性质稳定，生物相容性好，具有快速起漂、长时间漂浮和缓释三种性能，是一种优良的胃滞留漂浮型缓控释制剂辅料，对胃滞留制剂的开发和应用具有十分重要的意义。本发明白及胶的平均分子量为320KDa～560KDa，是一种高分子量的白及胶，为白及胶的研究和应用提供了新的选择，具有广阔的市场前景。

Claims (12)

1.一种多孔性白及胶，其特征在于：所述白及胶的平均分子量为320KDa ~560KDa，孔隙率为75~98%，白及胶以白及多糖计，质量百分含量为55%~65%；所述孔隙为定向的微管结构；
所述多孔性白及胶是按照如下方法制备：
（1）白及胶的提取：
取白及生药材，粉碎、过筛，脱脂，滤过，挥干，加50倍量水，70℃，提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，浓缩，即得粗白及胶；
（2）白及胶的纯化：
a.取粗白及胶用Sevage法脱蛋白，浓缩，醇沉，过滤，收集沉淀，沉淀加有机溶剂洗涤，挥干，即得精制白及胶；
b.取精制白及胶加水复溶，用不同浓度乙醇梯度沉淀，收集沉淀，干燥，得不同分子量段的白及胶；
（3）白及胶的干燥：取步骤b的白及胶，加水复溶，制备成白及胶溶液，取白及胶溶液进行冷冻干燥，即得多孔性白及胶。
2.根据权利要求1所述的多孔性白及胶，其特征在于：所述白及胶的分子量为460KDa，孔隙率为95%，白及胶以白及多糖计，质量百分含量为62.51%。
3.根据权利要求1所述的多孔性白及胶，其特征在于：
步骤（1）所述脱脂的步骤如下：白及粉中按料液比1:5加入 95%v/v乙醇，60℃回流提取2次，每次1-2h，滤过，再按料液比1:5加入石油醚60~90℃回流提取2h；
步骤（2）所述醇沉的步骤如下：
取脱蛋白后的浓缩液，加入95%v/v乙醇，慢加快搅，至沉淀不再增加，4℃冷藏12h，过滤，沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥干；
步骤b所述乙醇梯度沉淀的步骤如下：
取精制白及胶加水复溶，分次加入乙醇使醇体积浓度分别达到40%、60%、80%，每次所得醇沉液于4℃放置4h，3000 r/min离心分离，收集沉淀，干燥。
4.根据权利要求2所述的多孔性白及胶，其特征在于：步骤（3）所述白及胶溶液的浓度为1～30mg/mL，所述冷冻干燥的预冻温度为-4℃～-60℃，预冻时间为2～8h，冷冻干燥真空度为10～30 Pa，干燥时间为5～8h。
5.根据权利要求4所述多孔性白及胶，其特征在于：所述白及胶溶液的浓度为15mg/mL，所述预冻温度为-60℃，预冻时间为3h，冷冻干燥真空度为20 Pa，干燥时间为6h。
6.制备权利要求1或2所述的多孔性白及胶的方法，其特征在于：包括下述步骤：
（1）白及胶的提取：
取白及生药材，粉碎、过筛，脱脂，滤过，挥干，加50倍量水，70℃，提取2次，每次2h，过滤，合并滤液，浓缩，即得粗白及胶；
（2）白及胶的纯化：
a.取粗白及胶用Sevage法脱蛋白，浓缩，醇沉，过滤，收集沉淀，沉淀加有机溶剂洗涤，挥干，即得精制白及胶；
b.取精制白及胶加水复溶，用不同浓度乙醇梯度沉淀，收集沉淀，干燥，得不同分子量段的白及胶；
（3）白及胶的干燥：取步骤b的白及胶，加水复溶，制备成白及胶溶液，取白及胶溶液进行冷冻干燥，即得多孔性白及胶。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：
步骤（1）所述脱脂的步骤如下：
白及粉中按料液比1:5加入 95%v/v乙醇，60℃回流提取2次，每次1-2h，滤过，再按料液比1:5加入石油醚60~90℃回流提取2h；
步骤（2）所述醇沉的步骤如下：
取脱蛋白后的浓缩液，加入95%v/v乙醇，慢加快搅，至沉淀不再增加，4℃冷藏12h，过滤，沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥干；
步骤b所述乙醇梯度沉淀的步骤如下：
取精制白及胶加水复溶，分次加入乙醇使醇体积浓度分别达到40%、60%、80%，每次所得醇沉液于4℃放置4h，3000 r/min离心分离，收集沉淀，干燥。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）所述白及胶溶液的浓度为1～30mg/mL，所述冷冻干燥的预冻温度为-4℃～-60℃，预冻时间为2～8h，冷冻干燥真空度为10～30 Pa，干燥时间为5～8h。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：所述白及胶溶液的浓度为15mg/mL，所述预冻温度为-60℃，预冻时间为3h，冷冻干燥真空度为20 Pa，干燥时间为6h。
10.权利要求1~5任意一项所述的多孔性白及胶在制备胃滞留漂浮型缓控释制剂中的用途。
11.一种胃滞留漂浮型缓控释制剂，其特征在于：它含有权利要求1或2所述的多孔性白及胶。
12.根据权利要求11所述的缓控释制剂，其特征在于：所述的制剂为片剂、微丸剂、微球剂、颗粒剂或胶囊剂。
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