CN105494446A - 一种生物复合种衣剂及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种生物复合种衣剂及应用。所述生物复合种衣剂包括解淀粉芽孢杆菌(Bacillus？amyloliquefaciens)YN2010-KC？CGMCC？No.5722发酵液、杀虫剂、杀菌剂、分散剂、成膜剂。本发明生物复合种衣剂具有防病、防虫、耐旱、促生长和增产多种功能，能减轻由传统化学种衣剂带来的病原菌抗药性和环境污染问题。可提高传统生物种衣剂的防效和在逆境条件下的稳定性。其悬浮性、分散性好，不沉淀，包衣均匀、不脱落，对操作人员和环境均安全。

Description

一种生物复合种衣剂及应用
技术领域
本发明涉及种子处理技术领域，尤其涉及以解淀粉芽孢杆菌为有效成份，另加低毒杀虫剂、杀菌剂以及相关助剂复配加工而成的一种生物复合型种衣剂，适用于玉米、水稻、小麦等禾本科作物的种子处理。
背景技术
种衣剂是采用杀虫剂、杀菌剂、除草剂、复合肥料、植物生长调节剂、微量元素与微生物等作为活性成份，以成膜剂、悬浮剂、抗冻剂、防腐剂和稳定剂等为辅助成份，经过特殊加工工艺制成的，可直接或经稀释后包裹于种子表面，形成具有一定强度和通透性保护膜的农药制剂。
20世纪30年代，英国在禾谷类作物上首次研制出种衣剂。中国于20世纪80年代开始对种衣剂与良种包衣技术进行研究，目前已有系列产品大面积推广应用于粮、棉、油各类农作物的种子。经过包衣的种子，可以防治病虫害，为种子在不良环境条件下提供保护作用，调控作物生长，提高田间出苗率，增强幼苗长势，从而达到增产的效果。
从种衣剂的类型来看，以薄膜型、现配现用型为主，丸化种衣剂较少。国外主要是研制针对某一问题如杀虫、杀菌、除草等特定种衣剂(单元型种衣剂)。我国则多以复合、多功能种衣剂为主，即通过包衣，将种子表面作为一个小药库、小肥库来处理，从而提高种衣剂的功能性，减少种子处理程序，通过一次性地简单、集中处理实现防病、杀虫、施肥等效果。我国在药肥复合种衣剂方面一直处于国际领先地位。化学种衣剂常用的杀虫剂成份主要包括克百威、丁硫克百威、吡虫啉、氟虫腈、氯氰菊酯、噻虫嗪等，常用杀菌剂成份主要有福美双、戊唑醇、烯唑醇、三唑酮、克菌丹、多菌灵、咯菌腈等。
近几年来，国内才开始生物复合型种衣剂研究。但至今没有任何研究者或生产企业做过活体生物复合型种衣剂的登记和大面积示范推广。其中主要原因是我国一直追求多功能、复合型、预制型的种衣剂，生物复合型种衣剂的活体与种衣剂中的杀虫剂、杀菌剂、助剂等不相容，真菌型的生防功能菌不能与高浓度的杀菌剂相混合，细菌型的生防菌也不能长时间地与杀真菌剂及助剂相混。长期以来，研究者未找到一种理想的防病、促生长、解磷的微生物菌株及其与化学种衣剂相容的办法。目前，还尚未见以解淀粉芽孢杆菌与化学农药制成生物复合种衣剂的报道。
发明内容
针对现有技术的需要，本发明的目的是提供一种解淀粉芽孢杆菌与化学种衣剂复合而成的新型种衣剂，具有防病、防虫、耐旱、促生长和增产的特点，适用于玉米、水稻、小麦等禾本科作物的种子处理。
为实现上述发明目的，本发明采取的技术方案如下：
1.一种生物复合种衣剂，所述生物复合种衣剂由以质量分数计的如下原料组成：解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液25～40％，杀虫剂1～5％，杀菌剂1～2％，分散剂2～3％，成膜剂0.5～2％，余量为水。
2.根据技术方案1所述的生物复合种衣剂，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液由以下方法制备得到：
(1)将解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722活化后，按5～10％接种量，将活化的所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722接种到种子培养基，在培养温度35℃、转速120rpm/min条件下，摇床培养36～48h，得到一级种子液，所述种子培养基为液体LB培养基，pH7.0～7.2；
(2)按10～12％接种量，将一级种子液转接到种子罐内的二级种子培养基，在28～37℃，转速100rpm/min，通气量为1000L/h，罐压保持在0.02～0.03MPa条件下培养36～48h，得到二级种子液；所述二级种子培养基由以质量分数计的以下成分组成：淀粉1.5～3％，麸皮粉1～2％，酵母膏0.05～0.3％，蛋白胨0.5～1％，磷矿粉1～2％，MgSO4·7H2O0.01～0.05％，CaCl20.1～0.4％，(NH4)2SO40.01～0.04％，余量为水，pH7.0～7.2；
(3)按10～12％接种量，将二级种子液接种到发酵罐内的发酵培养基，在28～37℃，转速100rpm/min，通气量为10000L/h、罐压保持在0.02～0.03MPa条件下培养48～72h，培养后的发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的有效活菌数≧1×108cfu/ml时，该发酵液即为所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液；所述发酵培养基与步骤(2)所述二级种子培养基相同。
3.根据技术方案1或2所述的生物复合种衣剂，所述杀虫剂为吡虫啉原药、克百威原药中的一种或两种，所述杀虫剂为吡虫啉原药和克百威原药两种时，吡虫啉原药：克百威原药的重量比为1：1；
所述杀菌剂为福美双原药、戊唑醇原药的一种或两种，所述杀菌剂为福美双原药和戊唑醇原药时，福美双原药：戊唑醇原药的重量比为1：1；
所述分散剂为农乳602、NNO的一种或两种，分散剂为农乳602和NNO时，农乳602：NNO的重量比为1：1；
所述成膜剂是黄原胶、羧甲基纤维素钠、壳聚糖、淀粉的一种或任意两种以上，成膜剂为黄原胶、羧甲基纤维素钠、壳聚糖、淀粉中任意两种以上时，各原料为等量。
4.技术方案1或2或3所述的生物复合种衣剂的制备方法，按所述复合种衣剂中各原料计量分别称取各原料，先将水加热至50℃，将成膜剂搅拌加入水中，完全溶解成成膜溶剂后，再加入杀虫剂、杀菌剂和分散剂混合均匀，于砂磨机中碾磨4h制备成悬浮剂，最后加入解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液，混匀即为生物复合种衣剂。
5.技术方案1或2或3所述的生物复合种衣剂在玉米种子包衣上的应用。
6.根据技术方案5所述的生物复合种衣剂在玉米种子包衣上的应用，其特征在于：所述生物复合种衣剂与玉米种子的重量比为1：70～1：85。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1、本发明生物复合种衣剂具有防病、防虫、耐旱、促生长和增产多功能。
2、本发明生物复合种衣剂能减轻由传统化学种衣剂带来的病原菌抗药性和环境污染问题。
3、本发明生物复合种衣剂可提高传统生物种衣剂的防效和在逆境条件下的稳定性。
4、本发明生物复合种衣剂悬浮性、分散性好、不沉淀，包衣均匀、不脱落；可随加工随包装，不必晾晒，易于操作；毒性低、对操作人员和环境均很安全。
本发明所述的解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliquefaciensYN2010-KC于2012年1月12日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称：CGMCC)，保藏号为CGMCCNo.5722，并于2012年1月12日检测为存活。该普通微生物中心地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编:100101。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明提供的一种复合种衣剂进行详细说明。以下实施例并不对本发明构成限制，本领域技术人员在此基础上改进工艺参数，改变具体的辅料类型等替换和改动，依旧属于本发明的保护范围。以下实施例无特殊说明为常规方法。
实施例1解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KC的获得、鉴定和保藏
1、本发明解淀粉芽孢杆菌YN2010-KC的获得
1.1材料
采自云南农业大学后山农场玉米根际周围的土壤。
1.2培养基制备
将LB固体培养基和PSA培养基(马铃薯蔗糖琼脂培养基)融化，分别倒入灭菌培养皿，冷却，制成LB和PSA平板。
1.3分离培养
采用稀释平皿分离法和平板划线分离，将分离纯化所得的一菌株命名为YN2010-KC。
2、解淀粉芽孢杆菌YN2010-KC的鉴定
2.1、形态学鉴定
取菌株YN2010-KC在LB培养基上培养，37℃培养36小时，进行形态观察鉴定，菌体为杆状、端圆，周生鞭毛、具运动性，产生椭圆形芽孢；在LB和PSA平板上菌落圆形、淡茶褐色、菌落中央颜色略深、隆起、表面干燥有褶皱。与《常见细菌系统鉴定手册》(东秀珠等编著，科学出版社，2001年)中描述的芽孢杆菌属形态特征基本一致，判断菌株YN2010-KC属于芽孢杆菌(Bacillusspp.)。
2.2、生理生化鉴定
菌株革兰氏染色、芽孢染色、淀粉水解、葡萄糖利用、柠檬酸盐利用、V-P反应、接触酶反应、硝酸盐还原、明胶液化等均呈阳性。
3、解淀粉芽孢杆菌YN2010-KC的保藏
经上述鉴定表明所分离获得的菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)，其代号为YN2010-KC，所述的解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliquefaciensYN2010-KC于2012年1月12日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称：CGMCC)，保藏号为CGMCCNo.5722，并于2012年1月12日检测为存活。该普通微生物中心地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编:100101。
实施例2：本发明生物复合种衣剂1号的制备
本发明生物复合种衣剂1号配方：以质量分数计，解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液30％，所述发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的有效活菌数为1×108cfu/ml，吡虫啉原药1％，戊唑醇原药2％，农乳6022％，黄原胶0.5％，余量为水。
本发明生物复合种衣剂1号的制备：按配方计量，将水加热至50℃，将黄原胶0.5％搅拌加入，完全溶解成成膜溶剂，再加入吡虫啉原药1％、戊唑醇原药2％和农乳6022％混合均匀，于砂磨机中碾磨4h制备成悬浮剂，最后加入解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液30％，充分混匀而成；所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液通过以下方法制备得到：
(1)一级种子液制备
将-80℃保存的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722接种在液体LB培养基上，35℃培养24h，得活化的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722，按10％接种量，将活化的所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722接种到种子培养基，在培养温度35℃、转速120rpm/min条件下，摇床培养36h，得到一级种子液，所述种子培养基为液体LB培养基，pH7.0～7.2；
(2)按10％接种量，将一级种子液转接到种子罐内的二级种子培养基，在35℃，转速100rpm/min，通气量为1000L/h，罐压保持在0.02～0.03MPa条件下培养36～48h，得到二级种子液；所述二级种子培养基由以质量分数计的以下成分组成：淀粉2％，麸皮粉1％，酵母膏0.3％，蛋白胨0.5％，磷矿粉1％，MgSO4·7H2O0.02％，CaCl20.25％，(NH4)2SO40.03％，余量为水，pH7.0～7.2；所述二级种子培养基于121℃灭菌30min，待降温至30℃，接入一级种子液。
(3)按10％接种量，将二级种子液接种到发酵罐内的发酵培养基，在35℃，转速100rpm/min，通气量为10000L/h、罐压保持在0.02～0.03MPa条件下培养48～72h，培养后的发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的有效活菌数为1×108cfu/ml时，该发酵液即为所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液，所述发酵培养基与步骤(2)所述二级种子培养基相同。
实施例3本发明生物复合种衣剂2号的制备
本发明生物复合种衣剂2号配方：以质量分数计，解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液30％，所述发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的有效活菌数为1×108cfu/ml，克百威原药3％，福美双原药2％，NNO2％，黄原胶0.5％，羧甲基纤维素钠0.5％，余量为水。
本发明生物复合种衣剂2号的制备：按配方计量，将水加热至50℃，将黄原胶0.5％和羧甲基纤维素钠0.5％搅拌加入，完全溶解成成膜溶剂，再加入克百威原药3％，福美双原药2％和NNO2％混合均匀，于砂磨机中碾磨4h制备成悬浮剂，最后加入解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液30％，充分混匀而成；所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液的获得与实施例2相同。
实施例4：本发明生物复合种衣剂3号的制备
本发明生物复合种衣剂3号的配方：以质量分数计，解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液40％，所述发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的有效活菌数为1×108cfu/ml，吡虫啉原药3％、福美双原药2％、戊唑醇原药2％、农乳6022％等混合均匀，黄原胶0.5％，淀粉2％，余量为水。
本发明生物复合种衣剂3号的制备：按配方计量，将水加热至50℃，将黄原胶0.5％、淀粉2％搅拌加入，完全溶解成成膜溶剂，再加入吡虫啉原药3％、福美双原药2％、戊唑醇原药2％、农乳6022％混合均匀，于砂磨机中碾磨4h制备成悬浮剂，最后加入所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液40％，充分混匀而成，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液的获得与实施例2相同。
实施例5本发明生物复合种衣剂4号的制备
本发明生物复合种衣剂4号配方：以质量分数计，解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液40％，所述发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的有效活菌数为1×108cfu/ml，吡虫啉原药2.5％，克百威原药2.5％，福美双原药1％，戊唑醇原药1％，农乳6022％，黄原胶0.5％，余量为水。
本发明生物复合种衣剂4号的制备：按配方计量，将水加热至50℃，将黄原胶0.5％搅拌加入，完全溶解成成膜溶剂，再加入吡虫啉原药2.5％、克百威原药42.5％、福美双原药1％、戊唑醇原药1％、农乳6022％混合均匀,于砂磨机中碾磨4h制备成悬浮剂，最后加入所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液40％，充分混匀而成；所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液的获得与实施例2相同。
实施例6本发明生物复合种衣剂1号对玉米的增产效果
将生物复合种衣剂1号与玉米种子按生物复合种衣剂：种子的重量比分别为1：60、1：70、1：80的比例包衣，对照用裸种，按常规方式播种。实验在云南省昭通市昭阳区永丰镇三甲村进行。在收获时实测产量，测试本发明生物复合种衣剂1号增产效果。
(1)实验材料：供试玉米品种为昭阳6号。
(2)试验时间：2013年4月22日播种，5月2日出苗，5月16日定苗。
(3)实验设计：采用随机区组排列，3次重复，小区面积27平方米(长5米，宽5.4米)每个处理小区播种6行，每行20塘(株)，共计120塘(株)，每塘下种2粒。采用玉米套种马铃薯二套二种植，地膜覆盖，打扎下种两粒实直播，单株定苗，施足底肥，浇足出苗水，幅宽1.8米，玉米小行距0.4米，株距0.25米，每亩密度2963株。
(4)实验结果：在收获时测产量，所有种衣剂及浓度处理均有增产作用，其中以种衣剂1号药种比1：80增产为优，详见表1。
表1实施例6不同种衣剂处理后玉米产量
表1表明：本发明生物复合种衣剂可促进玉米增产，增产效果显著，其中生物复合种衣剂1号按生物复合种衣剂：种子的重量比为1：70或1：80的增产达到4.56～4.97％。
实施例7本发明生物复合种衣剂1号和2号田间应用实例，观察玉米各个生育期的效应
将生物复合种衣剂1号和生物复合种衣剂2号分别按生物复合种衣剂：玉米种子为1：80的药种重量比包衣，对照为2％戊唑醇悬浮剂并按2％戊唑醇悬浮剂：玉米种子为1：80的药种重量比包衣，各药种比1：80包衣的玉米种子和玉米裸种，按常规方式播种。实验在云南省昭通市昭阳区靖安镇洪家营村进行。观察生物复合种衣剂各个生育期的玉米效应。
(1)实验材料：供试玉米品种为昭阳6号。
(2)试验时间：2013年4月22日播种，5月2日出苗，5月16日定苗。
(3)实验设计：采用随机区组排列，3次重复或4次重复，小区面积：20m2(5mX4m)，随机区组排列，四周保护行4行，小区间不设走道，重复间设50cm走道，采用玉米套种马铃薯二套二种植，200cm一个复合条带，玉米距马铃薯60cm，玉米行距40cm，株距25cm。每亩播种玉米2667株。
(4)实验结果：本发明各种衣剂处理间差异不明显，出苗率都达88％以上，但生物复合种衣剂1号和2号处理的玉米出苗率分别比对照2％戊唑醇悬浮剂种衣剂处理增加4.10％、2.90％，分别比裸种的出苗率增加6.42％和5.18％，详见表2。
表2实施例7不同种衣剂处理玉米播种后14天的出苗率
各种衣剂处理的苗高均有所提高，特别是生物复合种衣剂1号和2号，在出苗后4天调查，其苗高分别较裸种处理增高12.61％和11.99％，分别较2％戊唑醇悬浮剂作为种衣剂增高11.58％、11.05％，在出苗后29天调查，其苗高分别较裸种处理增高21.37％和19.59％，分别较2％戊唑醇悬浮剂作为种衣剂增高17.39％、15.67％，表明出有明显地促进玉米生长的作用(表3)。
表3实施例7不同种衣剂处理玉米的苗高情况
随着玉米植株增高，各处理促生长作用明显减缓。但在收获时，本发明生物复合种衣剂处理明显有增加玉米植株生长量的作用(表4)，其中本发明生物复合种衣剂1号和2号显著能较裸种提高玉米株高15.00cm和12.75cm，分别增高5.30％和4.50％，显著较2％戊唑醇悬浮剂处理提高玉米株高11.00cm和8.75cm，分别增高3.83％和3.05％，。
表4实施例7不同种衣剂处理玉米的株高情况
本发明生物复合种衣剂除能提高玉米生长速度、植株生物量外，还能显著地提高玉米的经济学产量。本发明生物复合种衣剂1号和2号处理的玉米亩产量达554.25kg和558.00kg，显著较裸种处理的亩产500.09kg亩增产54.16kg和57.91kg，分别增产10.85％和11.60％；显著较2％戊唑醇悬浮剂处理亩增产23kg和26.75kg，分别增产4.33％和5.04％(表5)。
表5实施例7不同种衣剂处理玉米的产量情况
实施例8本发明生物复合种衣剂1号、2号和3号田间应用实例
将本发明生物复合种衣剂与玉米种子按1：80的药种重量比包衣，对照为裸种，按常规方式播种。实验在云南省昭通市昭阳区旧圃镇后海村进行。观察复合种衣剂的增产效果
(1)实验材料：供试玉米品种为昭阳6号
(2)试验时间：2014年5月1日播种，5月14日出苗。
(3)实验设计：采用随机区组排列，小区面积30平方米，重复3次，并于出苗后10天，40天对各处理的植株型高进行逐株测量，于收获期称玉米籽粒鲜重。
(4)实验结果：3个种衣剂均能提高产量，其中2号种衣剂产量最高，高达740.70kg/亩，比裸种增产21.05％。种衣剂1号和2号还能促进玉米植株生长，提高生长速度10％左右(表6)。
表6实施例8本发明生物复合种衣剂提高玉米产量效果
实施例9：本发明生物复合种衣剂1号和4号田间防病、增产实例
将本发明生物复合种衣剂1号、4号均分别与玉米种子按1：70、1：85、1：100的药种重量比包衣，对照用裸种，按常规方式播种。所有处理的在播种前均拌玉米丝黑穗病菌(从上述中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心购买)接种。实验在云南省昭通市昭阳区旧圃镇后海村进行。观察本发明生物复合种衣剂的防病及增产效果。
(1)实验材料：供试玉米品种为昭阳6号
(2)试验时间：2014年5月1日播种，5月14日出苗。播种前精细整理土地；播种时，按照试验方案规格播种，灌足出苗水，施足基肥，亩施农家肥1000kg、普钙50kg、复合肥30kg。6月15日追尿素20kg/亩，7月10日亩追尿素30kg。适时开展中耕除草(两次)和田间浇灌水工作。
(3)实验设计：试验采用随机区组排列，4次重复。小区长5米，宽4米，小区面积20平方米。小区间没设走道，重复间设0.70米宽走道，四周保护行3.2米(即种4行玉米)。净种玉米，实施地膜覆盖，南北行向，宽窄行种植，1.6米下线，宽行1.20米，窄行0.40米。塘播，塘距0.50米，每塘播种两粒，每个小区播5行，每行播10塘，每小区播50塘共100粒，每亩播种1667塘。
(4)实验结果：不同种衣剂试验包衣玉米种子试验，在5月高温干旱、6-7月份低温阴雨影响和涝灾天气条件下，给试验带来一定的影响。从试验数据看出，玉米品种昭阳6号各分别拌种种植后，与裸种相比，在出苗率、小苗高度、产量(表7)均有明显促进效果。所有种衣剂处理苗型高、株高、穗位高均显著地高于裸种对照，且明显增产，增产幅度在2.10％-6.90％，其中生物复合种衣剂4号(药种重量比1:85)增产达6.90％。
本发明各种衣剂处理对玉米丝黑穗病防效达86％以上。
表7实施例9生物复合种衣剂处理昭阳6号的增产作用
以上实施例表明：本发明生物复合种衣剂，能显著的促进玉米植株生长，提高玉米产量，防治玉米丝黑穗病，抗旱、防虫，出苗率都达88％以上，出苗率比对照2％戊唑醇悬浮剂种衣剂处理提高2.90～4.10％、，比裸种的出苗率提高5.18～6.42％，较裸种增高玉米植株4.50％～5.30％，较2％戊唑醇悬浮剂处理增高玉米株高3.05％～3.83％。玉米产量达534.60kg/亩～740.70kg/亩，较裸种处理增产2.10％～21.05％；较2％戊唑醇悬浮剂处理增产4.33～5.04％，对玉米丝黑穗病防效达86％以上。

Claims (6)

1.一种生物复合种衣剂，其特征在于：所述生物复合种衣剂由以质量分数计的如下原料组成：解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液25～40％，杀虫剂1-5％，杀菌剂1～2％，分散剂2～3％，成膜剂0.5～2％，余量为水。
2.根据权利要求1所述的生物复合种衣剂，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液由以下方法制备得到：
(1)将解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722活化后，按5～10％接种量，将活化的所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722接种到种子培养基，在培养温度35℃、转速120rpm/min条件下，摇床培养36～48h，得到一级种子液，所述种子培养基为液体LB培养基，pH7.0～7.2；
(2)按10～12％接种量，将一级种子液转接到种子罐内的二级种子培养基，在28～37℃，转速100rpm/min，通气量为1000L/h，罐压保持在0.02～0.03MPa条件下培养36～48h，得到二级种子液；所述二级种子培养基由以质量分数计的以下成分组成：淀粉1.5～3％，麸皮粉1～2％，酵母膏0.05～0.3％，蛋白胨0.5～1％，磷矿粉1～2％，MgSO4·7H2O0.01～0.05％，CaCl20.1～0.4％，(NH4)2SO40.01～0.04％，余量为水，pH7.0～7.2；
(3)按10～12％接种量，将二级种子液接种到发酵罐内的发酵培养基，在28～37℃，转速100rpm/min，通气量为10000L/h、罐压保持在0.02～0.03MPa条件下培养48～72h，培养后的发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的有效活菌数≧1×108cfu/ml时，该发酵液即为所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液，所述发酵培养基与步骤(2)所述二级种子培养基相同。
3.根据权利要求1或2所述的生物复合种衣剂，其特征在于：
所述杀虫剂为吡虫啉原药、克百威原药中的一种或两种，所述杀虫剂为吡虫啉原药和克百威原药两种时，吡虫啉原药：克百威原药的重量比为1：1；
所述杀菌剂为福美双原药、戊唑醇原药的一种或两种，所述杀菌剂为福美双原药和戊唑醇原药时，福美双原药：戊唑醇原药的重量比为1：1；
所述分散剂为农乳602、NNO的一种或两种，分散剂为农乳602和NNO时，农乳602：NNO的重量比为1：1；
所述成膜剂是黄原胶、羧甲基纤维素钠、壳聚糖、淀粉的一种或任意两种以上，成膜剂为黄原胶、羧甲基纤维素钠、壳聚糖、淀粉中任意两种以上时，各原料为等量。
4.权利要求1或2或3所述的生物复合种衣剂的制备方法，其特征在于：按所述复合种衣剂中各原料计量分别称取各原料，先将水加热至50℃，将成膜剂搅拌加入水中，完全溶解成成膜溶剂后，再加入杀虫剂、杀菌剂和分散剂混合均匀，于砂磨机中碾磨4h制备成悬浮剂，最后加入解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722发酵液，混匀即为生物复合种衣剂。
5.权利要求1或2或3所述的生物复合种衣剂在玉米种子包衣上的应用。
6.根据权利要求5所述的生物复合种衣剂在玉米种子包衣上的应用，其特征在于：所述生物复合种衣剂与玉米种子的重量比为1：70～1：85。
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