CN105010402A

CN105010402A - 一种悬浮型生物种衣剂、它的制备方法与用途

Info

Publication number: CN105010402A
Application number: CN201510387680.1A
Authority: CN
Inventors: 李丽艳; 苏海榆; 高小佳; 范腾飞; 徐志文
Original assignee: LEADING BIO-AGRICULTURAL Co Ltd
Current assignee: LEADING BIO-AGRICULTURAL Co Ltd
Priority date: 2015-07-06
Filing date: 2015-07-06
Publication date: 2015-11-04
Anticipated expiration: 2035-07-06
Also published as: CN105010402B

Abstract

本发明涉及一种悬浮型生物种衣剂及其制备方法与它的用途，它由分散剂、成膜剂、防冻剂、着色剂、防腐剂、杀虫剂、防病型休眠体细胞微生物浓缩物与有机硅消泡剂组成。与现有化学种衣剂相比，本发明悬浮型生物种衣剂稳定性好，成膜时间短，不影响种子发芽率，防虫防病效果显著，增产效果好，对玉米苗期病害根腐病防效达到85-96％，对地下害虫地老虎、蝼蛄防效达到20-88.9％，增产效果达到10-30％。

Description

一种悬浮型生物种衣剂、它的制备方法与用途

【技术领域】

本发明属于生物农药防治技术领域。更具体地，本发明涉及一种悬浮型生物种衣剂，还涉及所述悬浮型生物种衣剂的制备方法，涉及所述悬浮型生物种衣剂的用途。

【背景技术】

大田作物种子苗期土传病害和地下虫害是一类非常严重的植物病虫害，其发生率呈逐年上升的趋势，导致粮食作物产量损失严重，给农业经济造成了巨大损失。剧毒、高残留农药的播前拌种一直是多年来防治种子苗期病虫害的主要方法，但是单一化学农药长期使用，使得病虫害抗性增加，防效降低；同时还会导致环境受到污染，土壤或粮食残留农药严重，甚至发生人畜中毒事件，直接影响到粮食的产量和品质的提高。高效、低毒、无残留种衣剂的研发已经成为亟待解决的问题。

种衣技术是在传统浸种、拌种基础上发展起来的一项国际上应用比较普遍的种子处理技术，是种子质量的标准化、种子加工的现代化与苗期田间病虫害综合防治的有机结合。种衣剂通常由活性成分与非活性成分组成。活性成分主要包括杀虫剂、杀菌剂、激素、肥料或有益微生物及其代谢产物等，是种衣剂中直接发挥作用的有效成分。非活性成分就是与之相配套的助剂，其中包括成膜剂、分散剂、增稠剂、防冻剂、悬浮剂、着色剂、消泡剂、防腐剂等，非活性成分的组成直接影响种衣剂的质量及包衣效果。生物型种衣剂是利用拮抗微生物的代谢物或拮抗菌通过发酵、剂型加工制成的种子包衣剂。生物型种衣剂具有低毒甚至无毒的性质，能够从根本上克服化学种衣剂的多种弊病，以其安全绿色、无残留、对人畜无害和对环境无污染等特点备受人们的广泛关注，因而世界各地的人们都在探索如何用有益的微生物制剂代替化学农药来制成生物型种衣剂。

CN 101759491A公开了一种枯草芽孢杆菌悬浮种衣剂及其制备方法和用途。它的组成如下：10％～30％枯草芽孢杆菌水悬液、60％～80％混合成膜剂、2.5％～5％营养剂、1％～5％增稠剂、3％～8％防冻剂、0.1％～0.5％防腐剂、0.5％～1.5％着色剂，其余为水；它能够有效防治植物土传病害、提高产量，特别是对大豆根腐病、大豆立枯病等大豆土传病害防治作用显著；该生物种衣剂只能单一防治土传病害的，并未涉及到杀虫效果。

CN103651466A公开了一种防治玉米苗期病虫害的悬浮种衣剂。它的组成如下：3.0％～20.0％氯虫苯甲酰胺、4.0％～12.0％福美双、1.0％～4.0％戊唑醇、2.0％～4.5％润湿分散剂(农乳34和HY-2复配)、0.1％～0.5％增稠剂、0.1％～4.0％成膜剂、3.0％～5.0％防冻剂、0.1％～3.0％着色剂，0.1％～1.0％消泡剂，余量为水。它对玉米苗期病害虫害黑穗病、瘤黑粉病、茎基腐病以及地老虎、二点委夜蛾、蛴螬等防效显著；该种衣剂对玉米具有杀虫防病双重功效，但是为化学成分的种衣剂，并未涉及到生物成分。

生物种衣剂是生物农药的重要组成部分，其活性成分是能够控制植物病原菌的天然产物、微生物活体或其代谢产物，主要包括微生物型(活体微生物和农用抗生素等)、植物源型、以微生物代谢产物先导合成的剂型、遗传工程菌株等。研究已经证明，生物种衣剂包衣能够增强种子活力、提高秧苗素质、促进植株生长、提高产量、改善作物品质、提高作物抗性。此外，相对于化学种衣剂，生物种衣剂具有安全、无残留、无污染等优点，近年来得到了各国广泛关注。但是，报道的多为防病的生物种衣剂，兼具杀虫防病两种功效的生物种衣剂还未见详细报道。

为了解决这个技术缺陷，本发明人在总结现有技术的基础上，通过大量实验研究，终于完成了本发明。

【发明内容】

[要解决的技术问题]

本发明的目的是提供一种悬浮型生物种衣剂。

本发明的另一个目的是提供所述悬浮型生物种衣剂的制备方法。

本发明的另一个目的是提供所述悬浮型生物种衣剂的用途。

[技术方案]

本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明涉及一种悬浮型生物种衣剂。

所述的悬浮型生物种衣剂含有下述组分：以重量份计，

所述的防病型休眠体细胞微生物浓缩物是一种或多种选自含有枯草芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、哈茨木霉、白僵菌或淡紫拟青霉的微生物浓缩物；所述微生物浓缩物的芽孢型菌体含量是5000亿个/克以上；所述微生物浓缩物的真菌型菌体含量是100亿个/克以上。

根据本发明的一种优选实施方式，所述的杀虫剂是一种或多种选自甲维盐、阿维菌素或多杀菌素的杀虫剂。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的分散剂是一种或多种选自萘磺酸盐、木质素磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚或辛基酚聚氧乙烯醚的分散剂。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的成膜剂是一种或多种选自羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、聚乙烯醇或聚酯酸乙烯酯的成膜剂。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的增稠剂是一种或多种选自黄原胶、硅酸铝镁、羟乙基纤维素或膨润土的增稠剂。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的防冻剂是一种或多种选自乙二醇、丙二醇或甘油的防冻剂。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的着色剂选自玫瑰精或酸性大红。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的防腐剂是一种或多种选自苯甲酸钠、山梨酸钾或多聚甲醛的防腐剂。

本发明涉及一种悬浮型生物种衣剂的制备方法。

所述制备方法的步骤如下：

将3～10重量份分散剂、5～15重量份成膜剂、0.1-1.0重量份增稠剂、0.1～0.5重量份防冻剂、0.1～0.5重量份着色剂、0.1～0.5重量份防腐剂、0～30重量份杀虫剂、1～10重量份防病型休眠体细胞微生物浓缩物与0.1～1.0重量份有机硅消泡剂加入反应釜中，然后用蒸馏水补足至100重量份，充分搅拌均匀，接着使用高速剪切分散乳化机机械剪切10-12min，再使用砂磨机设备进行砂磨2-3个循环，得到所述的悬浮型生物种衣剂。

本发明还涉及本发明悬浮型生物种衣剂或本发明制备方法得到的悬浮型生物种衣剂在防治大田作物种子苗期病害及地下虫害中的用途。

下面将更详细地描述本发明。

本发明涉及一种悬浮型生物种衣剂。

所述的悬浮型生物种衣剂含有下述组分：以重量份计，

所述的防病型休眠体细胞微生物浓缩物是一种或多种选自含有枯草芽孢杆菌、多粘类芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、哈茨木霉、白僵菌或淡紫拟青霉的微生物浓缩物；所述微生物浓缩物的芽孢型菌体含量是5000亿个/克以上；所述微生物浓缩物的真菌型菌体含量是100亿个/克以上。

本发明使用的枯草芽孢杆菌例如是ACCC10625、ACCC10118或GIM1.181芽孢型菌株；它们都是目前市场上获得的枯草芽孢杆菌，例如由中国农业微生物菌种保藏管理中心、广东省微生物菌种保藏中心或中国普通微生物菌种保藏管理中心获得。

含有枯草芽孢杆菌的微生物浓缩物制备步骤如下：首先将保存于甘油管中的枯草芽孢杆菌在NB固体培养基(5g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、5g/L氯化钠、pH 7.0-7.2，20g/L琼脂粉)平板中在温度30℃下活化培养48小时，然后挑取平板上一环菌苔，转接种到NB液体培养基(5g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、5g/L氯化钠、pH 7.0-7.2)中，在温度30℃与转速180rpm条件下培养16－20h(对数生长期)，再按照接种量5％转接种到发酵培养基(3-5g/L豆粉、5-10g/L蔗糖、3-7g/L淀粉、5-10g/L葡萄糖、2-5g/L蛋白胨、2-5g/L CaCO₃,0.3-0.5g/L K₂HPO₄,、0.3-0.5g/L KH₂PO₄、pH 7.0～7.2)中，在温度30℃与转速180rpm的条件下培养约48小时直至产孢率≥80％，枯草芽孢杆菌菌含量≥150亿/ml时停止进行培养。

然后，将得到的发酵液使用碟片式离心机以转速7000rpm进行离心分离，得到一种浓缩液，它再经喷雾干燥(进风口温度190℃、出风口温度90℃)得到所述的枯草芽孢杆菌菌粉，采用常规检测方法检测，枯草芽孢杆菌含量≥5000亿/g。

本发明使用的多粘类芽孢杆菌例如是ACCC02239、ACCC01892、1.541芽孢型菌株；它们都是目前市场上获得的多粘类芽孢杆菌，例如由中国农业微生物菌种保藏管理中心、中国普通微生物菌种保藏中心获得。

含有多粘类芽孢杆菌的微生物浓缩物制备步骤如下：首先将保存于甘油管中的多粘类芽孢杆菌在NB固体培养基(5g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、5g/L氯化钠、pH 7.0-7.2，20g/L琼脂粉)平板中在温度28℃下活化培养24-48小时，从该平板上挑取一环菌苔，然后接种到NB液体培养基(5g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、5g/L氯化钠、pH 7.0-7.2)中，在温度28℃与转速180rpm的条件下培养18-24h(对数生长期)，再按照接种量8％转接种到发酵培养基(10-30g/L豆粉、5-10g/L蔗糖、5-10g/L淀粉、5-10g/L蛋白胨、1-5g/L CaCO₃,0.3-0.5g/L K₂HPO₄、0.3-0.7g/LKH₂PO₄、0.01-0.02g/L MnSO₄、2-4g/L氯化钠、0.1-0.4g/L硫酸镁、pH 7.0～7.2)中，在温度28℃与转速180rpm的条件下培养48-56小时直至产孢率≥80％，多粘类芽孢杆菌菌体含量≥150亿/ml时停止培养。

接着，将得到的发酵液使用碟片式离心机在转速7000rpm的条件下进行离心分离，得到一种浓缩液，它再经喷雾干燥(进风口温度190℃、出风口温度90℃)得到所述的多粘芽孢杆菌菌粉，采用常规检测方法检测，多粘类芽孢杆菌含量≥5000亿/g。

本发明使用的解淀粉芽孢杆菌例如是ACCC01855、ACCC04274或GIM1.430芽孢型菌株；它们都是目前市场上获得的解淀粉芽孢杆菌，例如由中国农业微生物菌种保藏管理中心、广东省微生物菌种保藏中心或中国普通微生物菌种保藏管理中心获得。

含有解淀粉芽孢杆菌的微生物浓缩物制备步骤如下：首先将保存于甘油管中的解淀粉芽孢杆菌置于NB固体培养基(5g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、5g/L氯化钠、pH 7.0-7.2，20g/L琼脂粉)平板中，在温度28℃的条件下活化培养24-48小时，从该平板上挑取一环菌苔，然后转接种到NB液体培养基(牛肉膏5g/L、蛋白胨10g/L、氯化钠5g/L、pH 7.0-7.2)中，在温度28℃与转速180rpm条件下培养20-24h(对数生长期)，再按照接种量6％转接种到发酵培养基(5-8g/L玉米浆、5-10g/L蔗糖、10-15g/L淀粉、3-7g/L蛋白胨、2-5g/L CaCO₃、0.3-0.6g/L K₂HPO4、0.3-0.7g/LKH₂PO4、2-4g/L氯化钠、0.2-0.4g/L硫酸镁、2-5g/L牛肉膏、pH 7.0～7.2)中，在温度35℃与转速200rpm的条件下培养约35-46小时直至产孢率≥80％，解淀粉芽孢杆菌含量≥150亿/ml时停止培养。

然后将得到的发酵液使用碟片式离心机在转速7000rpm的条件下离心分离得到一种浓缩液，再采用喷雾干燥(进风口温度190℃、出风口温度90℃)得到所述的解淀粉芽孢杆菌菌粉，采用常规检测方法检测，解淀粉芽孢杆菌含量≥5000亿/g。

本发明使用的地衣芽孢杆菌例如是ACCC02002、ACCC01468、或GIM1.542芽孢型菌株；它们都是目前市场上获得的地衣芽孢杆菌，例如由中国农业微生物菌种保藏管理中心、广东省微生物菌种保藏中心或中国普通微生物菌种保藏管理中心获得。

含有地衣芽孢杆菌的微生物浓缩物制备步骤如下：首先将保存于甘油管中的地衣芽孢杆菌在NB固体培养基(3g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、5g/L氯化钠、pH 7.0-7.2，20g/L琼脂粉)平板中在温度28℃的条件下活化培养24-48小时，从该平板上挑取一环菌苔，然后转接种到NB液体培养基(5g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、5g/L氯化钠、pH 7.0-7.2)中，在温度32℃与转速180rpm的条件下培养20-24h(对数生长期)，再按照接种量5％转接种到发酵培养基(5-10g/L玉米浆、5-10g/L葡萄糖、2-8g/L淀粉、2-7g/L蛋白胨、2-5g/L CaCl₂、0.3-0.8g/L K₂HPO₄、0.3-0.8g/LNaH₂PO₄、2-5g/L氯化钠、0.2-0.8g/L硫酸镁、2-4g/L硫酸铵、2-5g/L酵母膏、pH 7.0～7.2)中，在温度32℃与转速200rpm的条件下培养约48小时直至产孢率≥80％，地衣芽孢杆菌含量≥150亿/ml时停止培养。

然后将得到的发酵液使用碟片式离心机在转速7000rpm条件下离心分离得到一种浓缩液，再采用喷雾干燥(进风口温度190℃、出风口温度90℃)得到所述的地衣芽孢杆菌菌粉，采用常规检测方法检测，地衣芽孢杆菌含量≥5000亿/g。

本发明使用的哈茨木霉菌例如是ACCC30371、ACCC32428或GIM3.442真菌型菌株；它们都是目前市场上获得的哈茨木霉菌株，例如由中国农业微生物菌种保藏管理中心、广东省微生物菌种保藏中心或中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏单位获得。

含有哈茨木霉菌的微生物浓缩物制备步骤如下：将哈茨木霉菌株接种于PDA固体培养基(200g马铃薯；20g/L葡萄糖；15～20g/L琼脂)平板上在温度26℃下培养72h，用灭菌蒸馏水洗涤，再制成哈茨木霉菌孢子液(1×10⁶个/mL)，按照接种量9％接种到固体发酵培养基(5-20％麸皮、0.5-1.5％蔗糖、0.5-1.5％蛋白栋、0.01-0.05％磷酸二氢钾、40-50％水)，在温度26℃的条件下发酵7-9d，得到一种固体培养物，它采用低温(20-40℃)干燥粉碎，使用旋风分离器收集孢子粉，采用常规检测方法检测，该孢子粉的哈茨木霉菌含量≥100亿/g。

本发明使用的白僵菌例如是ACCC30112、ACCC30749或GIM3.428真菌型菌株；它们都是目前市场上获得的白僵菌，例如由中国农业微生物菌种保藏管理中心、广东省微生物菌种保藏中心或中国普通微生物菌种保藏管理中心获得。

含有白僵菌的微生物浓缩物制备步骤如下：将白僵菌菌株接种于PDA固体培养基(200g/L马铃薯、20g/L葡萄糖、15～20g/L琼脂)平板上在温度26℃的条件下培养72h，用灭菌蒸馏水洗涤，再制成孢子液(1×10⁶个/mL)，按照接种量5％接种到固体发酵培养基(5-10％麸皮、10-15％玉米粉、0.5-2％葡萄糖、0.2-2％硝酸铵、0.01-0.05％磷酸二氢钾、0.01-0.05％磷酸氢二钾、40-50％水，pH6.2)中，在温度28℃下发酵7-9d，得到一种固体培养物，培养物经低温(20-40℃)干燥粉碎，收集旋风分离器中的孢子粉，经检测孢子粉的白僵菌含量≥100亿/g。

本发明使用的淡紫拟青霉菌例如是ACCC30673、ACCC31532、3.5376；它们都是目前市场上获得的淡紫拟青霉菌，例如由中国农业微生物菌种保藏管理中心、中国普通微生物菌种保藏管理中心获得。

含有淡紫拟青霉的微生物浓缩物制备步骤如下：将淡紫拟青霉菌株接种于PDA固体培养基(马铃薯200g；葡萄糖20g；琼脂15～20g)平板上，在温度28℃的条件下培养72h，然后用灭菌蒸馏水洗涤，再制成孢子液(1xlo⁶个/mL)，按照接种量5％接种到固体发酵培养基(5-10％麸皮、5-10％甘蔗粉、1-5％玉米粉、0.5-2％葡萄糖、0.2-1％硝酸铵、0.01-0.03％磷酸二氢钾、0.01-0.03％磷酸氢二钾、40-50％水，pH6.2)中，在温度28℃的条件下发酵7-9d，得到一种固体培养物，它经低温(20-40℃)干燥粉碎，收集旋风分离器中的孢子粉，经检测孢子粉的淡紫拟青霉菌含量≥100亿/g。

在本发明悬浮型生物种衣剂中，其它组分在所述的含量范围内时，如果防病型休眠体细胞微生物浓缩物的含量小于1重量份，则会造成制剂防病效果很差；如果其含量大于10重量份，则会造成制剂产品成本过大；因此，防病型休眠体细胞微生物浓缩物的含量为1-10重量份是合适的。

本发明使用的杀虫剂是一种或多种选自甲维盐、阿维菌素或多杀菌素的杀虫剂。这些杀虫剂都是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由上海悦联化工有限公司以商品名捷纵阿维菌素销售的阿维菌素。

在本发明悬浮型生物种衣剂中，其它组分在所述的含量范围内时，如果其杀虫剂含量大于30重量份，则会造成制剂稳定性不合格；因此，杀虫剂的含量为0-30重量份是合适的。

根据本发明，所述的分散剂应该理解是一种能够有助于降低本发明悬浮型生物种衣剂与水的界面张力，增加分散介质粘度的化学物质。

本发明使用的分散剂是一种或多种选自萘磺酸盐、木质素磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚或辛基酚聚氧乙烯醚的分散剂。这些分散剂都是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由江苏省海安石油化工厂公司以商品名脂肪醇聚氧乙烯醚MOA-3销售的脂肪醇聚氧乙烯醚，由江苏省海安石油化工厂公司以商品名辛基酚聚氧乙烯醚OP-15销售的辛基酚聚氧乙烯醚。

在本发明中，在本发明悬浮型生物种衣剂中，其它组分在所述的含量范围内时，如果分散剂的含量小于3重量份，则会造成制剂贮存稳定性不合格以及悬浮率不合格；如果其含量大于10重量份，则会造成制剂贮存稳定性不合格；因此，分散剂的含量为3-10重量份是恰当的。

根据本发明，所述的成膜剂应该理解是一种能够使本发明悬浮型生物种衣剂牢固地附着在种子表面、不脱落不粘连的聚合物。

本发明使用的成膜剂是一种或多种选自羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、聚乙烯醇或聚酯酸乙烯酯的成膜剂。这些成膜剂都是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由济南骐源化工有限公司以商品名聚乙酸乙烯酯PVAC乳液销售的聚酯酸乙烯酯。

在本发明悬浮型生物种衣剂中，其它组分在所述的含量范围内时，如果成膜剂的含量小于5重量份，则会造成制剂贮存稳定性不合格；如果其含量大于15重量份，则会造成制剂贮存稳定性不合格；因此，成膜剂的含量为5-15重量份是合适的。

根据本发明，所述的增稠剂应该理解是一种能够提高本发明悬浮型生物种衣剂组分粘稠度，改变其物理性状，有效阻止其制剂颗粒沉降的化学物质。

本发明使用的增稠剂是一种或多种选自黄原胶、硅酸铝镁、羟乙基纤维素或膨润土的增稠剂。这些增稠剂都是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由广州博峰化工科技有限公司以商品名硅酸铝镁增稠剂销售的硅酸铝镁。

在本发明悬浮型生物种衣剂中，其它组分在所述的含量范围内时，如果增稠剂的含量小于0.1重量份，则会造成制剂贮存稳定性不合格；如果其含量大于1.0重量份，则会造成出料困难；因此，增稠剂的含量为0.1-1.0重量份是合适的。

根据本发明，所述的防冻剂应该理解是一种能够在低温下防止本发明悬浮型生物种衣剂中水分冻结的物质。

本发明使用的防冻剂是一种或多种选自乙二醇、丙二醇或甘油的防冻剂，这些防冻剂都是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品。

在本发明悬浮型生物种衣剂中，其它组分在所述的含量范围内时，如果防冻剂的含量小于0.1重量份，则会造成制剂贮存稳定性不合格；如果其含量大于0.5重量份，则会增加制剂成本；因此，防冻剂的含量为0.1-0.5重量份是合适的。

根据本发明，所述的着色剂应该理解是一种能够使本发明悬浮型生物种衣剂具有不同颜色的化学物质。

本发明使用的着色剂选自玫瑰精或酸性大红，这些着色剂都是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由河南宏佳化工产品有限公司公司以商品名酸性大红GR销售的酸性大红。

根据本发明，所述的防腐剂应该理解是一种能够抑制本发明悬浮型生物种衣剂一些组分腐败，延长保存时间，延长该产品保质期的药剂。

本发明使用的防腐剂是一种或多种选自苯甲酸钠、山梨酸钾或多聚甲醛的防腐剂，这些防腐剂都是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由济宁恒泰化工有限公司以商品名多聚甲醛销售的多聚甲醛。

在本发明悬浮型生物种衣剂中，其它组分在所述的含量范围内时，如果防腐剂的含量小于0.1重量份，则会造成制剂防腐效果差，影响制剂贮存；如果其含量大于0.5重量份，则会影响产品中微生物的保存，增加成本；因此，防腐剂的含量为0.1-0.5重量份是适宜的。

在本发明中，所述的有机硅消泡剂是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由北京中欧亚环保科技有限公司以商品名有机硅消泡剂销售的有机硅消泡剂。

在本发明悬浮型生物种衣剂中，其它组分在所述的含量范围内时，如果有机硅消泡剂的含量小于0.1重量份，则会造成制剂中含有大量气泡；如果其含量大于1.0重量份，则会造成制剂贮存稳定性不合格；因此，有机硅消泡剂的含量为0.1-1.0重量份是适宜的。

优选地，本发明的悬浮型生物种衣剂含有下述组分：以重量份计，

更优选地，本发明的悬浮型生物种衣剂含有下述组分：以重量份计，

本发明涉及一种悬浮型生物种衣剂的制备方法。

所述制备方法的步骤如下：

其中，分散剂、成膜剂、防冻剂、着色剂、防腐剂、杀虫剂、防病型休眠体细胞微生物浓缩物与有机硅消泡剂已在前面作了描述，在此不再赘述。

本发明使用的高速剪切分散乳化机是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由上海铭施机电设备有限公司以商品名均质乳化机MSE-LF销售的高速剪切分散乳化机。

本发明使用的砂磨机设备是本技术领域通常使用的在目前市场上销售的产品，例如由常州市高博机械有限公司公司以商品名实验室卧式砂磨机销售的砂磨机设备。

采用下述方法测定了本发明悬浮型生物种衣剂的性能：

根据国标GB/T 17768-1999中规定的方法测定成膜时间，以s表示；

根据国标GB/T 17768-1999中规定的方法测定包衣均匀度；

根据国标GB/T 17768-1999中规定的方法测定包衣脱落率，以％表示：

根据国标GB/T 17768-1999中规定的方法测定贮存稳定性。

根据国标GB/T 3543.1～3543.7进行发芽试验。测定并按照下式计算出发芽率，以％表示：

发芽率(％)＝发芽数/播种数×100

根据《玉米病虫害田间手册:病虫害鉴别与抗性鉴定》的方法调查并按照下式计算出防虫效果，以％表示：

被害率(％)＝有虫单位数/调查单位总数×100

根据《玉米病虫害田间手册:病虫害鉴别与抗性鉴定》的方法调查并按照下式计算出防病效果，以％表示：

发病株率(％)＝发病株/调查总株数×100

根据NY/T 497-2002附录B测定并按照下式计算出增产率，以％表示：

增产率(％)＝(试验区产量-对照区产量)/对照区产量×100

所述大田作物种子苗期病害例如是玉米根腐病、大豆立枯病等；所述的地下虫害例如是地老虎、蛴螬、蝼蛄等。

采用常规种子包衣方法，将本发明的悬浮型生物种衣剂与大豆、玉米或其它大田作物种子按照重量比1:50进行包衣，得到本发明的悬浮型生物种衣剂，它可以有效防治多种大田作物种子苗期病害和地下害虫。

[有益效果]

本发明的有益效果是：本发明的杀虫防病悬浮型生物种衣剂的生产成本低廉、制作工艺简单，施用方便，存储时间长，高效低毒，对坏境无污染，既在防治大田作物苗期病害玉米根腐病、花生白绢病、大豆立枯病；地老虎、蛴螬、蝼蛄等方面有显著效果，又减少了化学农药的使用。

【具体实施方式】

通过下述实施例将能够更好地理解本发明。

实施例1：本发明悬浮型生物种衣剂的制备

该实施例的实施步骤如下：

将5重量份萘磺酸盐分散剂、12重量份羧甲基纤维素钠成膜剂、0.2重量份黄原胶增稠剂、0.1重量份乙二醇防冻剂、0.2重量份玫瑰精着色剂、0.1重量份苯甲酸钠防腐剂、0重量份杀虫剂、2重量份含有由中国农业微生物菌种保藏管理中心获得的枯草芽孢杆菌ACCC10625的防病型休眠体细胞微生物浓缩物，该菌体含量为5000亿/g、0.2重量份有机硅消泡剂加入反应釜中，然后用蒸馏水补足至100重量份，充分搅拌均匀，接着使用由上海铭施机电设备有限公司以商品名均质乳化机MSE-LF销售的高速剪切分散乳化机机械剪切12min，再使用由常州市高博机械有限公司公司以商品名实验室卧式砂磨机销售的砂磨机设备进行砂磨2个循环，得到所述的悬浮型生物种衣剂。

根据本说明书描述的方法，测定本实施例制备的悬浮型生物种衣剂相关性能，其结果列于表1中。同时选用目前市场上销售的防治玉米病虫害的化学悬浮种衣剂(A)与化学悬浮种衣剂(B)以及用清水处理玉米种子(CK)也进行了同样测定，其结果也列于表1中。

实施例2：本发明悬浮型生物种衣剂的制备

该实施例的实施步骤如下：

将7重量份木质素磺酸钠分散剂、15重量份海藻酸钠成膜剂、0.8重量份硅酸铝镁增稠剂、0.5重量份丙二醇防冻剂、0.4重量份酸性大红着色剂、0.5重量份山梨酸钾防腐剂、30重量份甲维盐杀虫剂、8重量份含有由中国普通微生物菌种保藏中心获得的多粘类芽孢杆菌CGMCC1.541的防病型休眠体细胞微生物浓缩物，该浓缩物的菌体含量为5000亿/g、0.8重量份有机硅消泡剂加入反应釜中，然后用蒸馏水补足至100重量份，充分搅拌均匀，接着使用由上海铭施机电设备有限公司以商品名均质乳化机MSE-LF销售的高速剪切分散乳化机机械剪切10min，再使用由常州市高博机械有限公司公司以商品名实验室卧式砂磨机销售的砂磨机设备进行砂磨3个循环，得到所述的悬浮型生物种衣剂。

实施例3：本发明悬浮型生物种衣剂的制备

该实施例的实施步骤如下：

将3重量份十二烷基苯磺酸钠分散剂、5重量份聚乙烯醇成膜剂、0.1重量份羟乙基纤维素增稠剂、0.1重量份甘油防冻剂、0.1重量份酸性大红着色剂、0.2重量份多聚甲醛防腐剂、4重量份多杀菌素杀虫剂、1重量份含有由广东省微生物菌种保藏中心获得的解淀粉芽孢杆菌GIM1.430的防病型休眠体细胞微生物浓缩物，该浓缩物的菌体含量为5000亿/g与0.1重量份有机硅消泡剂加入反应釜中，然后用蒸馏水补足至100重量份，充分搅拌均匀，接着使用由上海铭施机电设备有限公司以商品名均质乳化机MSE-LF销售的高速剪切分散乳化机机械剪切10min，再使用由常州市高博机械有限公司公司以商品名实验室卧式砂磨机销售的砂磨机设备进行砂磨2个循环，得到所述的悬浮型生物种衣剂。

实施例4：本发明悬浮型生物种衣剂的制备

该实施例的实施步骤如下：

将4重量份脂肪醇聚氧乙烯醚分散剂、8重量份聚酯酸乙烯酯成膜剂、1.0重量份膨润土增稠剂、0.4重量份乙二醇防冻剂、0.5重量份玫瑰精着色剂、0.5重量份苯甲酸钠防腐剂、25重量份多杀菌素杀虫剂、10重量份含有由中国农业微生物菌种保藏管理中心获得的地衣芽孢杆菌ACCC01468的防病型休眠体细胞微生物浓缩物，该浓缩物的菌体含量为5000亿/g、0.3重量份有机硅消泡剂加入反应釜中，然后用蒸馏水补足至100重量份，充分搅拌均匀，接着使用由上海铭施机电设备有限公司以商品名均质乳化机MSE-LF销售的高速剪切分散乳化机机械剪切12min，再使用由常州市高博机械有限公司公司以商品名实验室卧式砂磨机销售的砂磨机设备进行砂磨3个循环，得到所述的悬浮型生物种衣剂。

实施例5：本发明悬浮型生物种衣剂的制备

该实施例的实施步骤如下：

将8重量份辛基酚聚氧乙烯醚分散剂、11重量份羧甲基纤维素钠成膜剂、0.4重量份黄原胶增稠剂、0.4重量份丙二醇防冻剂、0.4重量份玫瑰精着色剂、0.4重量份苯甲酸钠防腐剂、8重量份甲维盐杀虫剂、3重量份含有由广东省微生物菌种保藏中心获得的白僵菌GIM3.428的防病型休眠体细胞微生物浓缩物，该浓缩物的菌体含量为100亿/g、0.6重量份有机硅消泡剂加入反应釜中，然后用蒸馏水补足至100重量份，充分搅拌均匀，接着使用由上海铭施机电设备有限公司以商品名均质乳化机MSE-LF销售的高速剪切分散乳化机机械剪切10min，再使用由常州市高博机械有限公司公司以商品名实验室卧式砂磨机销售的砂磨机设备进行砂磨2个循环，得到所述的悬浮型生物种衣剂。

实施例6：本发明悬浮型生物种衣剂的制备

该实施例的实施步骤如下：

将10重量份木质素磺酸钠分散剂、7重量份羧甲基纤维素钠成膜剂、0.6重量份羟乙基纤维素增稠剂、0.2重量份丙二醇防冻剂、0.1重量份玫瑰精着色剂、0.2重量份山梨酸钾防腐剂、18重量份甲维盐杀虫剂、6重量份含有由中国农业微生物菌种保藏管理中心获得的淡紫拟青霉ACCC30673的防病型休眠体细胞微生物浓缩物，该浓缩物的菌体含量为100亿/g、1.0重量份有机硅消泡剂加入反应釜中，然后用蒸馏水补足至100重量份，充分搅拌均匀，接着使用由上海铭施机电设备有限公司以商品名均质乳化机MSE-LF销售的高速剪切分散乳化机机械剪切12min，再使用由常州市高博机械有限公司公司以商品名实验室卧式砂磨机销售的砂磨机设备进行砂磨3个循环，得到所述的悬浮型生物种衣剂。

表1：本发明悬浮型生物种衣剂性能测定结果

试验实施例1：本发明悬浮型生物种衣剂应用试验

试验材料：本发明实施例1悬浮型生物种衣剂、市售化学悬浮种衣剂(A)与化学悬浮种衣剂(B)、玉米种子

试验地点：河北省秦皇岛市昌黎县。

试验方法：种植玉米为夏玉米，上季种植作物是冬小麦。将本发明实施例1悬浮型生物种衣剂、市售化学悬浮种衣剂(A)与化学悬浮种衣剂(B)分别以1:50的重量比对玉米进行包衣，对照采用清水处理玉米种子(CK)，按照常规方式播种在土里。观察经过不同方式处理之后玉米的出苗情况及发病情况。

试验结果

防效试验调查的靶标害虫为地老虎、蝼蛄，本发明实施例1悬浮型生物种衣剂包衣处理后相对防效达到20％；调查病害为玉米根腐病和茎腐病，本发明实施例1悬浮型生物种衣剂包衣过的种子玉米根腐病和茎腐病发病率分别为0和0.4％，未处理玉米种子的发病率分别为5.2和9.7％。另外，本发明实施例1悬浮型生物种衣剂处理后的玉米种子，植株长势健壮，根茎发达，能够明显降低病虫害的发生率。

试验结果分析与结论

本发明实施例1悬浮型生物种衣剂稳定性好，成膜时间短180秒，对种子发芽率无影响；由于未添加杀虫成分，因而防病效果显著、杀虫效果一般，对玉米苗期病害根腐病有很好的防治效果。

试验实施例2：本发明悬浮型生物种衣剂应用试验

试验材料：本发明实施例2悬浮型生物种衣剂、市售化学悬浮种衣剂(A)与化学悬浮种衣剂(B)、玉米种子

试验地点：河北省秦皇岛市抚宁县

试验方法：种植玉米为夏玉米，上季种植作物是冬小麦。将本发明实施例2悬浮型生物种衣剂、市售化学悬浮种衣剂(A)与化学悬浮种衣剂(B)分别以1:50的重量比对玉米进行包衣，对照是用清水处理玉米种子(CK)，按照常规方式播种在土里。观察经过不同方式处理之后玉米的出苗、发病和杀虫情况。

试验结果：

防效试验调查的靶标害虫为地老虎、蝼蛄，本发明实施例2悬浮型生物种衣剂包衣处理后相对防效达到88.9％；调查病害为玉米根腐病和茎腐病，本发明实施例2悬浮型生物种衣剂包衣过的种子玉米根腐病和茎腐病发病率分别为0和0.4％，未处理玉米种子的发病率分别为6.2和9.7％。另外，本发明实施例2悬浮型生物种衣剂处理后的玉米种子，植株长势健壮，根茎发达，能够明显降低病虫害的发生率，增产效果达到20％。

试验结果分析与结论

本发明实施例2悬浮型生物种衣剂稳定性好，成膜时间短180秒，对种子发芽率无影响；防病效果显著、杀虫效果明显，对玉米苗期病害根腐病有很好的防治效果，增产效果达到20％。

试验实施例1-2的试验结果清楚表明，与现有化学种衣剂相比，本发明悬浮型生物种衣剂稳定性好，成膜时间短，对种子发芽率无影响；防虫防病效果显著，对玉米苗期病害根腐病防效达到85-96％，对地下害虫地老虎、蝼蛄防效达到20-88.9％，增产效果好，增产效果达到10-30％。

Claims

1.一种悬浮型生物种衣剂，其特征在于它含有下述组分：以重量份计，

防病型休眠体细胞微生物浓缩物1～10份；

2.根据权利要求1所述的悬浮型生物种衣剂，其特征在于所述的杀虫剂是一种或多种选自甲维盐、阿维菌素或多杀菌素的杀虫剂。

3.根据权利要求1所述的悬浮型生物种衣剂，其特征在于所述的分散剂是一种或多种选自萘磺酸盐、木质素磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚或辛基酚聚氧乙烯醚的分散剂。

4.根据权利要求1所述的悬浮型生物种衣剂，其特征在于所述的成膜剂是一种或多种选自羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、聚乙烯醇或聚酯酸乙烯酯的成膜剂。

5.根据权利要求1所述的悬浮型生物种衣剂，其特征在于所述的增稠剂是一种或多种选自黄原胶、硅酸铝镁、羟乙基纤维素或膨润土的增稠剂。

6.根据权利要求1所述的悬浮型生物种衣剂，其特征在于所述的防冻剂是一种或多种选自乙二醇、丙二醇或甘油的防冻剂。

7.根据权利要求1所述的悬浮型生物种衣剂，其特征在于所述的着色剂选自玫瑰精或酸性大红。

8.根据权利要求1所述的悬浮型生物种衣剂，其特征在于所述的防腐剂是一种或多种选自苯甲酸钠、苯甲酸钠、山梨酸钾或多聚甲醛的防腐剂。

9.一种悬浮型生物种衣剂的制备方法，其特征在于所述制备方法的步骤如下：

将3～10重量份分散剂、5～15重量份成膜剂、0.1-1.0重量份增稠剂、0.1～0.5重量份防冻剂、0.1～0.5重量份着色剂、0.1～0.5重量份防腐剂、0～30重量份杀虫剂、1～10重量份防病型休眠体细胞微生物浓缩物与0.1～1.0重量份有机硅消泡剂加入反应釜中，然后用蒸馏水补足至100重量份，充分搅拌均匀，接着使用高速剪切分散乳化机机械剪切10-12，再使用砂磨机设备进行砂磨2-3个循环，得到所述的悬浮型生物种衣剂。

10.根据权利要求1-8所述的悬浮型生物种衣剂或根据权利要求9所述制备方法得到的悬浮型生物种衣剂在防治大田作物种子苗期病害及地下虫害中的用途。