CN104322564A - 一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物及其制备方法。本发明的木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物包括木霉厚垣孢子粉15-20重量份，润湿剂3~7重量份，分散剂3~10重量份，紫外保护剂0~3重量份，其余组分以载体补足100重量份。本发明的组合物和用本方法制备的木霉厚垣孢子制剂为生物农药，其最大的优点为生物农药，不污染环境，可以减少化学农药的使用，利于环境保护；该制剂与分生孢子制剂相比，可延长生物农药的货架期，常温保存6个月后，孢子萌发率在80%以上，高于分生孢子制剂的60%；该制剂与分生孢子制剂相比，可提高田间防效。

Description

一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物。

背景技术

木霉菌是一种具有重要经济价值的生防真菌，自1932年科学家首次发现木素木霉可以寄生于多种植物病原真菌后，经多年研究发现木霉菌对18个属的29种病原菌具有拮抗作用，成功研制出了50多种木霉制剂，其中美国的Topshield（哈茨木霉T22）和以色列的Trichodex（哈茨木霉T39）应用最为广泛。商品化的木霉制剂大多为分生孢子制剂或分生孢子和菌丝的混合制剂，由于分生孢子自身的特点造成木霉分生孢子制剂保质期短、田间防效稳定性差。厚垣孢子是木霉在逆境情况下产生的一种繁殖体，该类孢子在储存、萌发及在逆境情况下的存活能力均远远优于分生孢子，因此，为了提高木霉制剂的田间施用效果，进行木霉厚垣孢子制剂的研制非常必要。专利CN101874484A公开了一种膏状剂型的木霉菌生物农药，其是以淀粉作为载体制备的含有木霉菌丝和木霉厚垣孢子的制剂，虽然该制剂在长期保存后，其中的木霉厚垣孢子仍旧具有较高的活性，但是对于其萌发力等主要指标并未考察。专利CN103740634A则公开了一种棘孢木霉厚垣孢子的粉剂及其制备方法，其是将木霉发酵液与硅藻土混合并风干后得到仅含有木霉厚垣孢子的固态粉剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以木霉厚垣孢子为有效成分的可湿性粉剂及其制备方法，这种木霉厚垣孢子可湿性粉剂能够防治多种植物真菌病害，用本方法制备的制剂货架期长、田间防治效果好，可以减少农业病害防治过程中化学农药的应用，有利于环境保护，符合国家农药生产政策。

本发明所采用的技术方案如下：

本发明的木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物包括木霉厚垣孢子粉15-20重量份，润湿剂3~7重量份，分散剂3~10重量份，紫外保护剂0~3重量份，其余组分以载体补足100重量份；所述的木霉厚垣孢子粉为厚垣孢子浆吸附至载体并烘干后所得的粉末；所述的载体选自硅藻土、滑石粉或膨润土；所述的润湿剂选自十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠或吐温20；所述的分散剂选自亚甲基双荼磺酸钠、羧甲基纤维素、皂荚粉、木质素磺酸钠或拉开粉；所述的紫外保护剂选自黄原胶、甲基纤维素、腐殖酸、糊精、十二烷基硫酸钠或荧光素钠。

本发明的木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物中所述的载体为硅藻土，所述木霉厚垣孢子粉中载体与厚垣孢子的重量比为1:0.2~0.6。

本发明的木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物中所述的润湿剂为十二烷基硫酸钠，所述十二烷基硫酸钠的添加量为4重量份。

本发明的木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物中所述的分散剂为羧甲基纤维素，所述羧甲基纤维素的添加量为5重量份。

本发明的木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物中所述的紫外保护剂为糊精，所述糊精的添加量为1重量份。

本发明的木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物中所述的木霉厚垣孢子为木霉Tr-92的厚垣孢子，所述的木霉Tr-92保藏号为CGMCC No.6087。

本发明木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物的制备方法，其特征在于其包括下述步骤：

（1）将浓度为1×10⁸cfu/ml~1×10¹⁰cfu/ml的木霉分生孢子液按培养基体积5%~10%的接种量接种到灭菌的厚垣孢子培养基中，常规培养7天；

（2）用搅拌器在3000 r/min下搅拌1 min，将菌丝团搅碎，使厚垣孢子与菌丝体分开，再经3000 r/min离心10 min，最后得到厚垣孢子浆；

（3）厚垣孢子浆与硅藻土按（5~10）：1的比例混合后，经50℃烘干粉碎后，得厚垣孢子粉。

（4）按木霉厚垣孢子粉15-20重量份，润湿剂3~7重量份，分散剂3~10重量份，紫外保护剂0~3重量份，以硅藻土补足至100%的含量进行称取，混合均匀即得木霉厚垣孢子可湿性粉剂。

本发明的有益效果为：本发明的组合物和用本方法制备的木霉厚垣孢子制剂为生物农药，其最大的优点为生物农药，不污染环境，可以减少化学农药的使用，利于环境保护；该制剂与分生孢子制剂相比，可延长生物农药的货架期，常温保存6个月后，孢子萌发率在80%以上，高于分生孢子制剂的60%；该制剂与分生孢子制剂相比，可提高田间防效。

具体实施方式

实施例1

木霉厚垣孢子粉 20重量份

十二烷基硫酸钠 4重量份

羧甲基纤维素   5重量份

糊精           1重量份

硅藻土         70重量份

本实施例的制备步骤为：

将浓度为1×10⁸cfu/ml的木霉分生孢子液按5%的接种量接种到灭菌的厚垣孢子培养基中，28℃、180rpm/min摇床培养7天。

用搅拌器在3000 r/min下搅拌1 min，将菌丝团搅碎，使厚垣孢子与菌丝体分开，再经3000 r/min离心10 min，最后得到厚垣孢子浆。

厚垣孢子浆与硅藻土按7：1的比例混合后，经50℃烘干粉碎后，得厚垣孢子粉。

称取木霉厚垣孢子粉20重量份、十二烷基硫酸钠4重量份、羧甲基纤维素5重量份、糊精1重量份、硅藻土70重量份。搅拌均匀即成木霉厚垣孢子可湿性粉剂。

实施例2

木霉厚垣孢子粉    15重量份

十二烷基苯磺酸钠  7重量份

亚甲基双荼磺酸钠  3重量份

甲基纤维素        2重量份

硅藻土            73重量份

本实施例的制备步骤为：

将浓度为1×10⁸cfu/ml的木霉分生孢子液按10%的接种量接种到灭菌的厚垣孢子培养基中，28℃、180rpm/min摇床培养7天。

用搅拌器在3000 r/min下搅拌1 min，将菌丝团搅碎，使厚垣孢子与菌丝体分开，再经3000 r/min离心10 min，最后得到厚垣孢子浆。

厚垣孢子浆与硅藻土按7：1的比例混合后，经50℃烘干粉碎后，得厚垣孢子粉。

称取木霉厚垣孢子粉15重量份、十二烷基硫酸钠7重量份、羧甲基纤维素3重量份、糊精2重量份、硅藻土73重量份。搅拌均匀即成木霉厚垣孢子可湿性粉剂。

实施例3~8

实施例3~8与实施例1的制备方法相同，其区别在于选用了不同重量份或不同种类的助剂，所有的实施例均以硅藻土补足100重量份。

表1 木霉厚垣孢子可湿性粉剂的组成

实验例1

分别检测实施例1~8所得可湿性粉剂的各项参数，其中润湿时间按照农药可湿性粉剂润湿时间测定方法GB/T 5451-2001、悬浮率按照农药可湿性粉剂悬浮率测定方法GB/T14826-2006、pH值按照GB/T 1601-1993进行测定，含水量和细度检测方法按照和GB/T 25864-2010进行。实验结果见表2，各实施例所制得的可湿性粉剂均符合联合国粮农组织农药可湿性粉剂标准，具有良好的性能。

表2 木霉厚垣孢子可湿性粉剂的各项参数

实验例2 本发明实施例1的使用效果

木霉厚垣孢子制剂的田间应用在河北省栾城县大棚黄瓜地中进行，该实验的目的是防治大棚黄瓜灰霉病的发生，将该木霉厚垣孢子制剂与同样方法制备的分生孢子制剂稀释500倍进行叶面喷施，以喷施化学农药嘧菌酯1000倍液为阳性对照，以喷施清水的为空白对照，每个处理设3次重复，每个重复为18平方米，在黄瓜开花期后开始喷施，连续喷施3次，次与次之间的间隔为10天，最后一次喷药之后10天统计灰霉病的发病情况。

调查方法：

每处理采10株，每株调查主茎全部叶片，记录每个处理黄瓜的总叶数、各级病叶数，并根据病叶分级计算病情指数和防治效果。

病叶分级标准：

 0级：叶片完好，无被害病斑；1级：叶片上有病斑，病斑面积占整个叶片面积的5%以下；3级：叶片上有病斑，病斑面积占整个叶片面积6%-25%；5级：叶片上有病斑，病斑面积占整个叶片面积26%-50%；7级：叶片上有病斑，病斑面积占整个叶片面积的51%-75%；9级：病斑面积占整个叶片面积的76%以上。

防效计算方法：

病情指数=∑（各级病叶数×相对级数值）/（总叶数×最高级值）×100

防治效果（%）=（对照区病情指数—处理区病情指数）/对照区病情指数×100

防治效果如表3所示，在河北省栾城县的黄瓜灰霉病田间防病试验表明，稀释500倍后厚垣孢子可湿性粉剂对黄瓜灰霉病有良好的防治效果，防治效果为80.79%，与阳性对照效果相当。分生孢子可湿性粉剂对黄瓜灰霉病的防治效果为66.38%，低于化学农药和厚垣孢子可湿性粉剂的防治效果，说明木霉厚垣孢子可湿性粉剂对灰霉病的防治效果要好于分生孢子可湿性粉剂。

表3木霉厚垣孢子可湿性粉剂对黄瓜灰霉病的防治效果

	病情指数（%）	防治效果（%）
			木霉厚垣孢子可湿性粉剂	8.8	80.79
木霉分生孢子可湿性粉剂	15.4	66.38
			阳性对照（嘧菌酯）	7.9	82.75
空白对照（清水）	45.8	-

Claims (7)

1.一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物，其特征在于其包括木霉厚垣孢子粉15-20重量份，润湿剂3~7重量份，分散剂3~10重量份，紫外保护剂0~3重量份，其余组分以载体补足100重量份；

所述的木霉厚垣孢子粉为厚垣孢子浆吸附至载体并烘干后所得的粉末；

所述的载体选自硅藻土、滑石粉或膨润土；

所述的润湿剂选自十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠或吐温20；

所述的分散剂选自亚甲基双荼磺酸钠、羧甲基纤维素、皂荚粉、木质素磺酸钠或拉开粉；

所述的紫外保护剂选自黄原胶、甲基纤维素、腐殖酸、糊精、十二烷基硫酸钠或荧光素钠。

2.根据权利要求1所述的一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物，其特征在于所述的载体为硅藻土，所述木霉厚垣孢子粉中载体与厚垣孢子的重量比为1:0.2~0.6。

3.根据权利要求1所述的一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物，其特征在于所述的润湿剂为十二烷基硫酸钠，所述十二烷基硫酸钠的添加量为4重量份。

4.根据权利要求1所述的一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物，其特征在于所述的分散剂为羧甲基纤维素，所述羧甲基纤维素的添加量为5重量份。

5.根据权利要求1所述的一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物，其特征在于所述的紫外保护剂为糊精，所述糊精的添加量为1重量份。

6.根据权利要求1所述的一种木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物，其特征在于所述的木霉厚垣孢子为木霉Tr-92的厚垣孢子，所述的木霉Tr-92保藏号为CGMCC No.6087。

7.权利要求1~6任意一项所述的木霉厚垣孢子可湿性粉剂组合物的制备方法，其特征在于其包括下述步骤：

（1）将浓度为1×10⁸cfu/ml~1×10¹⁰cfu/ml的木霉分生孢子液按培养基体积5%~10%的接种量接种到灭菌的厚垣孢子培养基中，常规培养7天；

（2）用搅拌器在3000 r/min下搅拌1 min，将菌丝团搅碎，使厚垣孢子与菌丝体分开，再经3000 r/min离心10 min，最后得到厚垣孢子浆；

（3）厚垣孢子浆与硅藻土按（5~10）：1的比例混合后，经50℃烘干粉碎后，得厚垣孢子粉；

（4）按木霉厚垣孢子粉15-20重量份，润湿剂3~7重量份，分散剂3~10重量份，紫外保护剂0~3重量份，以硅藻土补足至100重量份的含量进行称取，混合均匀即得木霉厚垣孢子可湿性粉剂。