CN105462915A - 聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用 - Google Patents
聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105462915A CN105462915A CN201610056561.2A CN201610056561A CN105462915A CN 105462915 A CN105462915 A CN 105462915A CN 201610056561 A CN201610056561 A CN 201610056561A CN 105462915 A CN105462915 A CN 105462915A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- polyvinyl alcohol
- microcarrier
- microballoon
- preparation
- volumes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0068—General culture methods using substrates
- C12N5/0075—General culture methods using substrates using microcarriers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
- C08J3/12—Powdering or granulating
- C08J3/16—Powdering or granulating by coagulating dispersions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
- C08J3/24—Crosslinking, e.g. vulcanising, of macromolecules
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2329/00—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by an alcohol, ether, aldehydo, ketonic, acetal, or ketal radical; Hydrolysed polymers of esters of unsaturated alcohols with saturated carboxylic acids; Derivatives of such polymer
- C08J2329/02—Homopolymers or copolymers of unsaturated alcohols
- C08J2329/04—Polyvinyl alcohol; Partially hydrolysed homopolymers or copolymers of esters of unsaturated alcohols with saturated carboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2531/00—Microcarriers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Manufacture Of Porous Articles, And Recovery And Treatment Of Waste Products (AREA)
Abstract
本发明涉及一种聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用。它是通过反向悬浮将聚乙烯醇溶液在油相中分散成球形小液粒,通过交联剂对聚乙烯醇进行交联,经过固化、洗涤和筛分步骤得到聚乙烯醇微球;微载体的粒径为60~250μm,微载体的密度为1.02~1.07g/cm3。聚乙烯醇价格低廉,对环境友好,生物相容性好,以其制备的微载体适合哺乳动物细胞贴壁生长。本发明的微载体制备工艺更加简单,可广泛应用哺乳动物贴壁细胞发酵生产酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体等生物制品的生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用,具体为以聚乙烯醇为骨架材料的用于贴壁哺乳动物细胞培养用的微载体及其制备方法。将聚乙烯溶液乳化成微米级液滴,经适当交联、筛分得到一定粒径范围的微球,其可不经修饰直接用于贴壁哺乳动物细胞的发酵培养。聚乙烯醇价格低廉,对环境友好,生物相容性好,以其制备的微载体适合哺乳动物细胞贴壁生长。本发明的微载体可广泛应用哺乳动物贴壁细胞发酵生产酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体等生物制品,涉及的技术领域包括生物医药、酶工程、发酵工程等。
背景技术
1967年VanWezel为贴壁依赖性细胞的高产培养提出了微载体培养系统的新技术概念。经过几十年的研究改进,微载体培养技术现已广泛地应用于哺乳动物细胞的培养,已广泛用于生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体等。
基于微载体适用于贴壁依赖性细胞在其表面贴壁生长,微载体能成为迄今常用而有效的哺乳动物细胞培养载体,除了由于许多工程依赖贴壁细胞系生产的限制外,还因微载体具有以下的优点:兼具单层培养和悬浮培养的优势,且是均相培养;细胞所处环境均一;环境条件(温度、pH、CO2等)容易测量与监控;具有较高的比表面;培养操作可系统化、自动化,降低了污染发生的机会。
目前市面上销售的微载体从材料上可分为:葡聚糖微载体(比如GE的Cytodex系列)、聚苯乙烯微载体(比如Pall公司的Solohill、Corning公司的Synthemax)、明胶微载体(比如PercellBiolyticaAB公司的Cultispher)和纤维素微载体(比如Kirin公司的Cellsnow、Pharmacia公司的Cytopore)等。从表面修饰材料可分为:带正电的己二胺(比如GE的Cytodex1)、哺乳动物胶原(比如GE的Cytodex、PALL公司的Solohill)、人纤连蛋白(比如PALL公司的Solohill(ProNectinFcoated))。
发明内容
本发明的目的在于提供一种聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用。将聚乙烯醇溶液乳化成微米级液滴,经适当交联、筛分得到一定粒径范围的微球,其可不经修饰直接用于贴壁哺乳动物细胞的发酵培养。由于聚乙烯醇价格低廉,对环境友好,生物相容性好,以其制备的微载体适合哺乳动物细胞贴壁生长。本发明的微载体可广泛应用哺乳动物贴壁细胞发酵生产酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体等生物制品的生产等。
本发明提供的聚乙烯醇微载体是通过反向悬浮将聚乙烯醇溶液在油相中分散成球形小液粒,通过交联剂对聚乙烯醇进行交联,经过固化、洗涤和筛分步骤得到聚乙烯醇微球;微载体的粒径为60~250μm,微载体的密度为1.02~1.07g/cm3。
本发明中所用的聚乙烯醇的醇解度为10%~100%(优选80%~95%),粘度在10~100mPa.s(优选15~50mPa.s)在常温或加热条件下溶于水中,配制成质量分数为1%~20%(优选5%~15%)的溶液。
本发明中所用的交联剂为双醛类、双环氧类、双酸酐类和双酰氯类化合物。
本发明提供的聚乙烯醇微载体的制备方法包括如下步骤:
1)配制由烷烃、脂肪酸、酯类化物等疏水有机化物和亲水亲油平衡值(HLB值)小于7的乳化剂作为油相;pH为1~2(加入无机酸)聚乙烯醇溶液作为水相;
2)充分搅拌下,将水相缓慢加入油相中形成稳定的小液滴。
3)然后加入双醛类、双环氧类、双酸酐类或双酰氯类的交联剂,进行反应交联,固化聚乙烯醇微球。
4)待聚乙烯醇微球固化成形后,滤出微球,用5~20倍体积的热水(50~100℃)清洗3次,再用2~20倍体积的乙醇清洗3次,最后用2~20倍体积的石油醚清洗3次。
5)清洗完毕在加热或真空条件下烘干,去除残留的有机溶剂。将聚乙烯醇微载体放入纯水中,充分浸泡,最后,先用100目不锈钢筛网滤掉其中粒径过大的微球,再用180目的不锈钢筛网滤掉其中粒径过小的微球。
6)将得到的微球样品浸泡于pH=7的磷酸缓冲溶液中(如果需长时间保存也可浸泡20%的乙醇溶液中)备用。
通过以上方法制备聚乙烯醇微载体的特点:粒径为60~250μm,密度为1.02~1.06g/cm3。
本发明提供的一种聚乙烯醇微载体的制备方法包括如下步骤:
1)将200g10%的聚乙烯醇溶液加入含有2gspan-80的300mL液体石蜡中,用盐酸调pH为1~2,40-65℃下,以200-280rpm速度进行搅拌5-10min;
2)降温至40℃,以280rpm速度继续搅拌20-30min;加入50%的戊二醛3.5mL,保持温度40℃,以280rpm速度继续搅拌50-60min;升温至60℃,继续搅拌50-60min;
3)停止反应,滤出微球,用10倍体积的70±10℃热水清洗3-4次,再用5倍体积的乙醇清洗3-5次,最后用4-5倍体积的石油醚清洗2-3次。经80℃烘干后,去除残留的试剂。
4)筛分:将得到的聚乙烯醇微载体放入纯水中,充分浸泡6-8小时,先用用100目的不锈钢筛网进行筛分,去除大于100目筛孔的微载体;余下的微载体用180目不锈钢筛子对微球进行筛分,保留大于180目筛孔的微载体,即可得到所需的微载体。
本发明得到的聚乙烯醇微载体应用哺乳动物贴壁细胞发酵生产酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体等生物制品的生产。
将聚乙烯醇微球用于细胞培养前,需将其浸泡液更换为新鲜的pH为7的磷酸缓冲盐溶液,经121℃湿热灭菌30~60℃后,可直接加入培养基中用于细胞的发酵培养。
本发明以聚乙烯醇为原料制备的微载体不需用表面修饰,可直接用于哺乳动物细胞的发酵培养,制备工艺更加简单。聚乙烯醇是一种高分子有机化合物,对人体无毒、无副作用,具有良好的生物相容性。聚乙烯醇在医疗领域具有广泛使用,可以制成水凝胶,制造软性接触眼镜;可以制成口腔膜,贴于患处,治疗细菌感染;还可以制成医用海绵,用于手术中吸液、吸血。聚乙烯醇可通过石油乙烯法、天然气乙炔法和电石乙炔法等成熟方法进行,生产方便,易于获取,价格低廉。另外聚乙烯醇不同于其它乙烯基聚合物(比如聚苯乙烯),其可被细菌作为碳源利用,可降解,是一种环境友好的材料。以聚乙烯醇为基质形成的微载体可不用具有神经毒性的己二胺修饰,更加环保;也不需要用哺乳动物源材料胶原或纤维蛋白修饰,避免生产过程引入哺乳动物源材料所带来的生物安全性风险。
实验证明,哺乳动物贴壁细胞能在上述制备的以聚乙烯醇为骨架材料的微载体上进行良好的贴附,适合于哺乳动物细胞的大规模发酵生产。
附图说明
图1为聚乙烯醇微球照片(×100)。
图2为湿热灭菌30min后显微镜下观察(×100)。
图3为湿热灭菌60min后显微镜下观察(×100)。
图4为vero细胞在聚乙烯醇微载体上的贴壁效果(×200)。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步详细阐述本发明。实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件以及手册中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件;所用的通用设备、材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实施例1聚乙烯醇微载体的制备
制备过程:
反应体系:油相:300mL液体石蜡,2gspan-80;水相:200g10%聚乙烯醇(聚乙烯醇原料原料的粘度为17mPa.s),2.0mL2M盐酸。
②反应制备过程:将油相加入1L三口瓶,以200rpm速度进行搅拌;加入水相,以280rpm速度进行搅拌,65℃搅拌10min;降温至40℃,以280rpm速度继续搅拌30min;加入50%的戊二醛3.5mL,保持温度40℃,以280rpm速度继续搅拌60min;升温至60℃,继续搅拌60min;停止反应,滤出微球。
洗涤过程:称量微球的重量,用10倍体积的70±10℃热水清洗3次,再用5倍体积的乙醇清洗3次,最后用5倍体积的石油醚清洗3次。经80℃烘干后,去除残留的试剂。
筛分:将聚乙烯醇微载体放入纯水中,充分浸泡并不断搅拌。先用用100目的不锈钢筛网进行筛分,去除大于100目筛孔的微载体。余下的微载体用180目不锈钢筛子对微球进行筛分,保留大于180目筛孔的微载体,即可得到所需的微载体。将得到的微球样品浸泡于pH=7的磷酸缓冲溶液中备用。微载体的产率约为40%,产率=微载体量/投入的聚乙烯醇干重。
实施例2聚乙烯醇微载体的粒径分度的测量
微载体半径越小,其比表面积就越大,所能粘附的贴壁细胞就越多,但细胞本身也有一定大小,半径过小也并不利细胞的贴附生长,因此大多数微载体的半径分布都在60~250μm范围内。我们对其所制的微载体的半径也进行了测量,测量方法如下:将实施例1得到的微载体在pH=7.0的磷酸缓冲溶液中浸泡10min(以下同),取少量微载体悬液滴于载玻片上,置于普通光学显微镜下进行观察,利用显微镜配备的成像系统进行拍照(见图1,表明按照实施例1制备出的微载体形态均匀,粒径分布在60~250μm范围内),通过分析软件对微载体的半径分布进行测量,结果见表1。从结果分析来看,微截载体半径分布在60~250μm范围内。
表1聚乙烯醇微载体半径分布情况
半径范围 | 60~100 μm | 100~150 μm | 150~200 μm | 200~250 μm |
所占比例 | 15.2% | 34.7% | 43.1% | 7.0% |
实施例3微载体密度的测定
微载体在实际过程需要悬浮在培养基中,因此其密度应范围在一定范围内,过低微载体会漂浮于液面,过低会沉降于底部。目前已上市的大部分微载体的密度在1.02~1.05g/cm3范围内。
在20℃条件下,将1g微球分散在100mL不同浓度的氯化钠溶液,搅拌,静置5min,当90%以上微载体悬浮在液面时,认定其达到上述悬浮要求的最低氯化钠浓度为微球的密度,结果见表2。从结果来看,聚乙烯醇微载体密度在1.038g/cm3左右。
表2聚乙烯醇微载体密度测量
氯化钠浓度 | 3.0% | 3.5% | 4.0% | 4.5% | 5.0% | 5.5% | 6.0% |
相应的氯化钠溶液密度(g/cm3) | 1.020 | 1.024 | 1.027 | 1.030 | 1.034 | 1.038 | 1.041 |
微球悬浮情况 | 沉于底部 | 沉于底部 | 沉于底部 | 约10%上浮 | 约50%上浮 | 大于90%上浮 | 大于90%上浮 |
实施例4湿热灭菌对微载体的影响
细胞发酵是一个无菌过程,所用材料(包括微载体)应保持无菌状态。微载体常用的灭菌方法就是湿热灭菌,我们也对聚乙烯醇微载体是否适合于湿热灭菌进行了测试。将制备好的聚乙烯醇微球在121℃条件下湿热灭菌30min和60min,结果见图2和图3,如图所示从形态学观察上来看,湿热灭菌对微载体并没有影响。
实施例5非洲绿猴肾细胞(Vero)在微载体上贴附效果
将聚乙烯醇微载体在pH=7.0的磷酸缓冲溶液中溶胀10min后,经121℃湿热灭菌30min后用于实验。将100μL微载体悬液加入到24孔细胞培养板的细胞培养孔中,然后加入DMEM(含10%胎牛血清)的培养基,最后加入Vero细胞悬液,其中细胞悬液的浓度为1×106个/mL。将细胞培养板置于37℃,5%CO2的细胞的培养箱中进行培养,48h后观察其生长情况,结果见图4。如图所示,Vero细胞与微载体共培养48h后其不仅在微载体表面进行有效地贴附,并能正常地分裂生长。
Claims (8)
1.一种聚乙烯醇微载体,其特征在于它是通过反向悬浮将聚乙烯醇溶液在油相中分散成球形小液粒,通过交联剂对聚乙烯醇进行交联,经过固化、洗涤和筛分步骤得到聚乙烯醇微球;微载体的粒径为60~250μm,微载体的密度为1.02~1.07g/cm3。
2.按照权利要求1所述的聚乙烯醇微载体,其特征在于所述的聚乙烯醇的醇解度为10%~100%,粘度在10~100mPa.s。
3.按照权利要求1所述的聚乙烯醇微载体,其特征在于所述的聚乙烯醇溶液的质量分数为1%~20%。
4.按照权利要求1所述的聚乙烯醇微载体,其特征在于所述的交联剂为戊二醛。
5.一种权利要求1所述的聚乙烯醇微载体的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
1)配制由疏水有机化物烷烃、脂肪酸或酯类化物与亲水亲油平衡值(HLB值)小于7的乳化剂作为油相;pH为1~2的聚乙烯醇溶液作为水相;
2)充分搅拌下,将水相缓慢加入油相中形成稳定的小液滴;
3)然后加入双醛类、双环氧类、双酸酐类或双酰氯类的交联剂,进行反应交联,固化聚乙烯醇微球;
4)待聚乙烯醇微球固化成形后,滤出微球,用5~20倍体积的50~100℃水清洗3次,再用2~20倍体积的乙醇清洗3次,最后用2~20倍体积的石油醚清洗3次;
5)清洗完毕在加热或真空条件下烘干,去除残留的有机溶剂;将聚乙烯醇微球放入纯水中,充分浸泡,先用100目不锈钢筛网滤掉其中粒径过大的微球,再用180目的不锈钢筛网滤掉其中粒径过小的微球;
6)将得到的微球样品浸泡于pH=7的磷酸缓冲溶液中或20%的乙醇溶液中,备用。
6.按照权利要求5所述的方法,其特征在于所述的油相为液体石蜡和span-80组成。
7.一种聚乙烯醇微载体的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
1)将200g10%的聚乙烯醇溶液加入含有2gspan-80的300mL液体石蜡中,用盐酸调pH为1~2,40-65℃下,以200-280rpm速度进行搅拌5-10min;
2)降温至40℃,以280rpm速度继续搅拌20-30min;加入50%的戊二醛3.5mL,保持温度40℃,以280rpm速度继续搅拌50-60min;升温至60℃,继续搅拌50-60min;
3)停止反应,滤出微球,用10倍体积的70±10℃热水清洗3-4次,再用5倍体积的乙醇清洗3-5次,最后用4-5倍体积的石油醚清洗2-3次;经80℃烘干后,去除残留的试剂;
4)筛分:将得到的聚乙烯醇微载体放入纯水中清洗,先用用100目的不锈钢筛网进行筛分,去除大于100目筛孔的微载体;余下的微载体用180目不锈钢筛子对微球进行筛分,保留大于180目筛孔的微载体,即可;
5)将得到的微球样品浸泡于pH=7的磷酸缓冲溶液中备用。
8.权利要求1-4任一所述的聚乙烯醇微载体在哺乳动物贴壁细胞发酵生产酶、生长因子、疫苗和单克隆抗体生物制品生产中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610056561.2A CN105462915B (zh) | 2016-01-28 | 2016-01-28 | 聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610056561.2A CN105462915B (zh) | 2016-01-28 | 2016-01-28 | 聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105462915A true CN105462915A (zh) | 2016-04-06 |
CN105462915B CN105462915B (zh) | 2018-10-16 |
Family
ID=55601077
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610056561.2A Active CN105462915B (zh) | 2016-01-28 | 2016-01-28 | 聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105462915B (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2020155514A1 (zh) * | 2019-01-28 | 2020-08-06 | 北京华龛生物科技有限公司 | 一种细胞载体颗粒聚集体及其制备方法 |
CN113952520A (zh) * | 2021-10-18 | 2022-01-21 | 上海玮沐医疗科技有限公司 | 一种含有聚己内酯的聚乙烯醇微球及其制备方法 |
CN114159554A (zh) * | 2021-11-22 | 2022-03-11 | 广州优理氏生物科技有限公司 | 一种纤连蛋白-聚乙烯醇微球的制备方法及其应用 |
CN115501378A (zh) * | 2022-09-23 | 2022-12-23 | 江南大学 | 一种改性聚乙烯醇栓塞微球及其制备方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101012082A (zh) * | 2007-01-24 | 2007-08-08 | 大连理工大学 | 一种利用聚乙烯醇纳米微球动态膜作为过滤介质的生物反应器 |
CN101798138A (zh) * | 2010-03-10 | 2010-08-11 | 大连理工大学 | 一种亲水抗生物污染的聚乙烯醇纳米微球制备方法 |
CN102964612A (zh) * | 2012-08-30 | 2013-03-13 | 北京爱美客生物科技有限公司 | 聚乙烯醇-硼砂微球及其制备方法 |
CN103536973A (zh) * | 2013-10-25 | 2014-01-29 | 北京大学 | 一种聚乙烯醇磁性微粒及其制备方法和用途 |
CN104017131A (zh) * | 2014-05-30 | 2014-09-03 | 北京石大万嘉新材料科技有限公司 | 聚合物微凝胶驱油剂及其制备方法和应用 |
-
2016
- 2016-01-28 CN CN201610056561.2A patent/CN105462915B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101012082A (zh) * | 2007-01-24 | 2007-08-08 | 大连理工大学 | 一种利用聚乙烯醇纳米微球动态膜作为过滤介质的生物反应器 |
CN101798138A (zh) * | 2010-03-10 | 2010-08-11 | 大连理工大学 | 一种亲水抗生物污染的聚乙烯醇纳米微球制备方法 |
CN102964612A (zh) * | 2012-08-30 | 2013-03-13 | 北京爱美客生物科技有限公司 | 聚乙烯醇-硼砂微球及其制备方法 |
CN103536973A (zh) * | 2013-10-25 | 2014-01-29 | 北京大学 | 一种聚乙烯醇磁性微粒及其制备方法和用途 |
CN104017131A (zh) * | 2014-05-30 | 2014-09-03 | 北京石大万嘉新材料科技有限公司 | 聚合物微凝胶驱油剂及其制备方法和应用 |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2020155514A1 (zh) * | 2019-01-28 | 2020-08-06 | 北京华龛生物科技有限公司 | 一种细胞载体颗粒聚集体及其制备方法 |
CN113952520A (zh) * | 2021-10-18 | 2022-01-21 | 上海玮沐医疗科技有限公司 | 一种含有聚己内酯的聚乙烯醇微球及其制备方法 |
CN113952520B (zh) * | 2021-10-18 | 2022-09-02 | 上海玮沐医疗科技有限公司 | 一种含有聚己内酯的聚乙烯醇微球及其制备方法 |
CN114159554A (zh) * | 2021-11-22 | 2022-03-11 | 广州优理氏生物科技有限公司 | 一种纤连蛋白-聚乙烯醇微球的制备方法及其应用 |
CN115501378A (zh) * | 2022-09-23 | 2022-12-23 | 江南大学 | 一种改性聚乙烯醇栓塞微球及其制备方法 |
CN115501378B (zh) * | 2022-09-23 | 2023-08-22 | 江南大学 | 一种改性聚乙烯醇栓塞微球及其制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN105462915B (zh) | 2018-10-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Nilsson et al. | Preparation of immobilized animal cells | |
Semler et al. | Mechanochemical manipulation of hepatocyte aggregation can selectively induce or repress liver‐specific function | |
EP0058689B1 (en) | Cell culture medium, improved process of growing animal cells, method of producing microcarriers and microcarriers | |
CN105462915A (zh) | 聚乙烯醇微载体及其制备方法与应用 | |
Galateanu et al. | Layer-shaped alginate hydrogels enhance the biological performance of human adipose-derived stem cells | |
US4024020A (en) | Method of cell culture on polyacrylonitrile surface | |
CN103403149A (zh) | 细胞载体、相关联的制造方法和使用它培养细胞的方法 | |
CN109593704A (zh) | 一种三维微载体细胞吸附培养的方法 | |
JP2016523086A (ja) | 細胞培養物品およびその方法 | |
Blüml | Microcarrier cell culture technology | |
Nilsson | Microcarrier cell culture | |
CN111375361B (zh) | 一种用于大规模干细胞培养的纳米海藻糖3d微胶囊 | |
WO2005014774A1 (ja) | 動物細胞の培養担体と、該培養担体を用いた動物細胞の培養方法および移植方法 | |
CN110669729A (zh) | 一种制备间充质干细胞外泌体的方法 | |
CN111334469A (zh) | Pbmc体外3d甲基纤维素琼脂糖水凝胶培养基及其制备方法 | |
Nguyen et al. | Tissue regeneration of human mesenchymal stem cells on porous gelatin micro-carriers by long-term dynamic in vitro culture | |
KR101721514B1 (ko) | 아가로스, 탈세포화된 세포외기질 및 콜라겐을 포함하는 3차원 세포 배양용 세포 지지체 | |
CN103275923B (zh) | 一种细胞培养用gf微载体及其制备方法 | |
Hanga et al. | Expansion of human mesenchymal stem/stromal cells on temporary liquid microcarriers | |
Li et al. | Preparation of microcarriers based on zein and their application in cell culture | |
CN108486034A (zh) | 耐高温温敏型细胞培养介质材料及其制备方法 | |
CN105749270A (zh) | 轮状病毒疫苗及其制备方法 | |
CN113846016A (zh) | 一种高通量多孔阵列芯片、装置、制备方法及应用 | |
Chen et al. | Preparation of porous GelMA microcarriers by microfluidic technology for Stem-Cell culture | |
CN111175112A (zh) | 一种改良的微载体活细胞荧光染色方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
CB02 | Change of applicant information |
Address after: Beikong science and technology building, No. 10 Beijing 102200 Changping District science and Technology Park floating Stephen White Road 4 416B room Applicant after: Limited by Share Ltd technology development Address before: Beikong science and technology building, No. 10 Beijing 102200 Changping District science and Technology Park floating Stephen White Road 4 416B room Applicant before: Beijing Aimeike Biotechnology Co., Ltd. |
|
COR | Change of bibliographic data | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |