CN1054205C - 多项液体质量控制猪血清及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种多项液体质量控制猪血清及其制备方法。它选用新鲜猪血为原料,经分离、冰冻、调整成份,加入乙二醇作为稳定剂。本发明的产品含有质控血清所需的多项成份,克服了冻干猪血清分装和复溶时的误差,更适用于医学检验的需要。
Description
本发明所属技术领域为医学检验质量控制,具体地说是多项液体质量控制猪血清及制备方法。
目前国内医学检验上所使用的质量控制血清绝大多数是冻干猪血清。该血清存在着不可避免的冻干前分装误差和使用时复溶误差。对某些酶类保存不够稳定,而且还存在着生产设备昂贵,工艺复杂等缺点。同时目前所使用的冻干猪血清的成份仅十余项,远远不能满足医学检验发展的需要。
本发明的目的是为社会提供多项液体质控猪血清来取代目前的冻干血清。
本发明的技术方案是,用来源广泛,酶类含量较高的猪血为原料,加入各种所需成份。用分析纯乙二醇作稳定剂和防腐剂制成符合质控要求的多项液体质控猪血清。
具体工艺为:
1、采集猪血;
2、分离血清;
3、分析血清中各质控成份含量;
4、调整各分析成份配成质控血清;
5、过滤、分装、贴标签。
配制好的多项液体质量控制猪血清含有下列成份及含量:
葡萄糖1-30mmol/L 尿酸氮2-40mmol/L
肌酐50-1000μmol/L 尿酸50-2000μmol/L
总胆红素5-3000μmoI/L 胆固醇2-60mmol/L
钙1-5mmol/L 磷0.5-3mmol/L
镁0.3-5mmol/L 氯50-150mmol/L
钾2-10mmol/L 钠50-200mmol/L
二氧化碳10-50mmol/L 甘油三酯0.2-5mmol/L
谷草转氨酶20-1000u/l 谷丙转氨酶20-1000u/l
乳酸脱氢酶50-1500u/l 羟丁酸脱氢酶50-1500u/l
肌酸激酶50-1500u/l 淀粉酶50-2000u/l
碱性磷酸酶30-1000u/l γ-谷氨酰转肽酶20-1000u/l
白蛋白20-80g/l 总蛋白20-100g/l
直接胆红素1-50umol/L 铁50μmol/L
胆汁酸3-50umol/L 免疫球蛋白G4-40g/l
免疫球蛋白A0.3-6g/l 免疫球蛋白M0.2-5g/l
补体C30.1-3g/l 补体C40.02-1g/l
载脂蛋白A10.5-5g/l 载脂蛋白B0.5-5g/l
高密度脂蛋白胆固醇0.5-13mmol/L 锂1-5mmol/L
茶碱50-500μmol/L
本发明的优点是:
1、与目前使用的冻干血清相比,没有分装和复溶的误差。
2、由于血清中含有稳定剂,血清中各种分析成份稳定、尤其是易于发生变化的酶类。
3、生产工艺简单、不需要昂贵的专用设备。
实施例:
以配制中值多项液体质量控制猪血清为例:
1、采集猪血:在屠宰场收集无污染的新鲜猪血5000毫升,待自然凝固后运回实验室。
2、分离血清:收集已凝固猪血上清液,经离心机分离,弃掉有型成份,将分离好的血清留出检测标本后置-30℃低温冰箱24小时,取出室温熔化,反复冻溶两次。
3、分析血清中各质控成份含量:按常规分析方法测定血清中各质控成份的含量。
4、调节各分析成份配成多项液体质量控制血清:按照质控血清要求,在原血清各成分的基础上,加入相应物质,使之达到要求浓度,加入质控血清总量三分之一的稳定剂一乙二醇(分析纯),制成符合要求的质控血清。
加入步骤如下:
1、酶类的加入:
猪血清中酶类含量很高,一般不需要另加酶类成份,只有在配制高值质控血清时才需加入酶类成份。可自行制备各种酶,粗提后便可加入,不必纯化。其中,谷草转氨酶和谷丙转氨酶可从猪心中提取;淀粉酶加入人唾液最简便;肌酸激酶可从肌肉中提取;碱性磷酸酶可从人胎盘中提取;γ-谷氨酰转肽酶可从猪肾中提取,上述提取技术均为公知技术。
2、蛋白的加入:
从多余的猪血清中,用硫酸氨盐析法分别提取白蛋白和球蛋白,加入到质控血清中。
3、其他成份的加入:
将酶类和蛋白调整后的血清重新测量体积,将多余的部分用含丙酰酸70g/L的聚丙烯酰胺干胶吸掉。根据测定出其他成份的含量,计算出需加入的量,逐一加入到血清中。其中:
a、胆红素的加入方法:将称重后的胆红素粉未倒入带玻璃塞的试管内,加0.1MNaOH5.5毫升振荡溶解,立即与血清混合。然后倒入总血清中。
b、尿酸的加入方法:将称重后的尿酸加入预温60℃的10毫升水中,加1MNaOH0.7ml,边加边猛摇,并将此溶解液立即加入总血清中。
4、乙二醇的加入:
在上述1升血清中加入0.5升分析纯乙二醇,混均,便获得1.5升质控血清。
5、过滤、分装、贴标签:
将配好的质控血清用0.2μm的滤膜器过滤,然后分装在10毫升的棕色小瓶中,每支装3毫升,贴好标签。
配制好的中值多项液体质量控制猪血清含有下列成份及含量:
葡萄糖5.6mmol/L 尿酸氮6.0mmol/L
肌酐110μmol/L 尿酸400μmol/L
总胆红素3.4μmoI/L 胆固醇6.0mmol/L
钙2.5mmol/L 磷1.5mmol/L
镁1.0mmol/L 氯105mmol/L
钾5.0mmol/L 钠140mmol/L
二氧化碳28mmol/L 甘油三酯0.54mmol/L
谷草转氨酶132u/l 谷丙转氨酶52u/l
乳酸脱氢酶750u/l 羟丁酸脱氢酶552u/l
肌酸激酶373u/l 淀粉酶832u/l
碱性磷酸酶56u/l γ-谷氨酰转肽酶30u/l
白蛋白45g/l 总蛋白70g/l
直接胆红素6umol/L 铁25umol/L
胆汁酸10umol/L 免疫球蛋白G8g/l
免疫球蛋白A1g/l 免疫球蛋白M1g/l
补体C31g/l 补体C40.2g/l
载脂蛋白A11.5g/l 载脂蛋白B1.0g/l
高密度脂蛋白胆固醇1.5mmol/L 锂2.0mmol/L
茶碱110μmol/L
Claims (4)
1、一种多项液体质量控制猪血清,其特征为:含有乙二醇,还含有下列成份及含量:
葡萄糖1-30mmol/L 尿酸氮2-40mmol/L
肌酐50-1000μmol/L 尿酸50-2000μmol/L
总胆红素5-3000μmol/L 胆固醇2-60mmol/L
钙1-5mmol/L 磷0.5-3mmol/L
镁0.3-5mmol/L 氯50-150mmol/L
钾2-10mmol/L 钠50-200mmol/L
二氧化碳10-50mmol/L 甘油三酯0.2-5mmol/L
谷草转氨酶20-1000u/l 谷丙转氨酶20-1000u/l
乳酸脱氢酶50-1500u/l 羟丁酸脱氢酶50-1500u/l
肌酸激酶50-1500u/l 淀粉酶50-2000u/l
碱性磷酸酶30-1000u/l γ-谷氨酰转肽酶20-1000u/l
白蛋白20-80g/l 总蛋白20-100g/l
直接胆红素1-50umol/L 铁50μmol/L
胆汁酸3-50umol/L 免疫球蛋白G4-40g/l
免疫球蛋白A0.3-6g/l 免疫球蛋白M0.2-5g/l
补体C30.1-3g/l 补体C40.02-1g/l
载脂蛋白A10.5-5g/l 载脂蛋白B0.5-5g/l
高密度脂蛋白胆固醇0.5-13mmol/L锂1-5mmol/L
茶碱50-500μmol/L。
2、如权利要求1所述的一种多项液体质量控制猪血清,其特征为乙二醇的含量为质控血清体积总量的三分之一。
3、如权利要求1所述的一种多项液体质量控制猪血清,其特征为中值多项液体质量控制血清各成份的含量为:
葡萄糖5.6mmol/L 尿酸氮6.0mmol/L
肌酐110μmol/L 尿酸400μmol/L
总胆红素34μmol/L 胆固醇6.0mmol/L
钙2.5mmol/L 磷1.5mmol/L
镁1.5mmol/L 氯105mmol/L
钾5.0mmol/L 钠140mmol/L
二氧化碳28mmol/L 甘油三酯0.54mmol/L
谷草转氨酶132u/l 谷丙转氨酶52u/l
乳酸脱氢酶750u/l 羟丁酸脱氢酶552u/l
肌酸激酶373u/l 淀粉酶832u/l
碱性磷酸酶56u/l γ-谷氨酰转肽酶30u/l
白蛋白45g/l 总蛋白70g/l
直接胆红素6μmol/L 铁25μmol/L
胆汁酸10μmol/L 免疫球蛋白G8g/l
免疫球蛋白A1g/l 免疫球蛋白M1g/l
补体C31g/l 补体C40.2g/l
载脂蛋白A11.5g/l 载脂蛋白B1.0g/l
高密度脂蛋白胆固醇1.5mmol/L 锂2.0mmol/L
茶碱110μmol/L。
4、一种制备如权利要求1所述的多项液体质量控制猪血清的方法,包括采集猪血、沉淀、分离、冰冻、溶解,其特征为在配制中需加入乙二醇和各种质控成份。
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CN 95117435 CN1054205C (zh) | 1995-11-09 | 1995-11-09 | 多项液体质量控制猪血清及制备方法 |
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CN 95117435 Expired - Fee Related CN1054205C (zh) | 1995-11-09 | 1995-11-09 | 多项液体质量控制猪血清及制备方法 |
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