CN105418715B - 二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，首先将胆汁皂化，稀盐酸调节pH为3～4，得到黑色膏状物；将黑色膏状物脱油脂并脱色后用稀盐酸调节pH为3～4再过滤，将滤渣干燥，得到胆汁酸粗品，粉碎，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为1.5％～2.5％，在27～29MPa、58～62℃条件下搅拌萃取0.5～1h，然后降温减压至常温常压，收集析出物，用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品。本发明结合了二氧化碳超临界萃取技术，简化了提取步骤，可以利用胆汁制备含量＞98％的鹅去氧胆酸精品，且鹅去氧胆酸精品收率提高，达到2.5％左右。

Description

二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法
技术领域
本发明的实施方式涉及中药领域，更具体地，本发明的实施方式涉及一种二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法。
背景技术
现目前，除了从熊胆汁中制备鹅去氧胆酸(CDCA)外，行业内也致力于开发新的胆汁源制备鹅去氧胆酸，并且已经成功的从鹅胆汁、鸡胆汁、鸭胆汁和猪胆汁等家禽家畜胆汁中提取或制备鹅去氧胆酸。
专利CN201110354130.1公开了一种酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法，以甲醇、浓硫酸、氢氧化钠进行酯化，以乙酸酐进行酰化，利用石油醚萃取，通过乙醇、石油醚实现一次结晶、二次结晶，利用氢氧化钠水解酸化，得到鹅去氧胆酸粗品；然后进行纯化，方法是利用乙酸乙酯和活性炭进行结晶，干燥得到鹅去氧胆酸。
专利CN201310160479.0公开了一种从鹅胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，具体是先用氢氧化钠将鹅胆汁皂化，然后加入氯化钙得到总胆酸钙盐，用水搅拌总胆酸钙盐，离心收集上清液，用盐酸调pH获得沉淀即为鹅去氧胆酸粗品；然后进行纯化，方法是用氢氧化钠水溶液溶解鹅去氧胆酸用大孔树脂层析，乙醇溶液洗脱，氢氧化钠溶液洗脱，洗脱液用盐酸调节pH后离心即得鹅去氧胆酸。
上述第一种方法能够获得纯度98％以上的鹅去氧胆酸，但制备鹅去氧胆酸粗品的前期制备步骤和后期纯化步骤的提纯操作比较繁琐，产率低；上述第二种方法虽然比第一种方法简单，但是纯度相对降低，为95％左右，且鹅去氧胆酸收率仅达1.21％。
专利CN201010577847.8公开了一种从禽胆汁中提取鹅去氧胆酸的工艺，向禽胆汁加入烧碱后煮沸水解，水解液中加入有机溶剂和二氧化碳组成的膨胀溶剂，加压搅拌酯化并萃取出鹅去氧胆酸粗品；然后进行纯化，方法是加入钙盐析出胆酸盐，胆酸盐用水洗涤后加盐酸调节pH使鹅去氧胆酸析出，沉淀用氨水中和后真空干燥，再用10％～20％甲醇与80％～90％二氧化碳组成的膨胀溶剂，或者用2.0％～20％氯仿与80％～98％二氧化碳组成的膨胀溶剂，在2～15MPa加压萃取，降压至0.1～1.5MPa析出，即得鹅去氧胆酸。该方法用较少的溶剂分离纯化鹅去氧胆酸，但操作较繁琐，且纯度和收率还有待提高。
发明内容
本发明克服了现有技术的不足，提供一种二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，以期望可以提高鹅去氧胆酸的纯度和收率，同时简化纯化方法，降低溶剂用量。
为解决上述的技术问题，本发明的一种实施方式采用以下技术方案：
一种二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，包括以下步骤：
(1)制备胆汁酸粗品
首先将胆汁皂化，稀盐酸调节pH为3～4，得到黑色膏状物；将黑色膏状物脱油脂并脱色后用稀盐酸调节pH为3～4再过滤，所得滤渣在60℃以下干燥，得到胆汁酸粗品；
(2)制备鹅去氧胆酸精品
将所述胆汁酸粗品粉碎，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，所述二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为1.5％～2.5％，在27～29MPa、58～62℃条件下搅拌萃取0.5～1h，然后降温减压至常温常压，收集析出物，用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品。
进一步的技术方案是：二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法包括以下步骤：
(1)制备胆汁酸粗品
首先将胆汁皂化，稀盐酸调节pH为3～4，得到黑色膏状物；将黑色膏状物脱油脂并脱色后用稀盐酸调节pH为3～4再过滤，所得滤渣在55～60℃干燥，得到胆汁酸粗品；
(2)制备鹅去氧胆酸精品
将所述胆汁酸粗品粉碎，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，所述二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2％，在28MPa、60℃条件下搅拌萃取1h，然后降温减压至常温常压，收集析出物，用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品。
上述二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述胆汁是指从鸡或猪体内提取出来无异味、无霉变的胆汁。
上述二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述将黑色膏状物脱油脂并脱色的方法是用甲醇溶解黑色膏状物，用石油醚脱去油脂，接着浓缩甲醇层，用氢氧化钠溶液溶解浓缩物，然后加入双氧水脱色。
上述二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述皂化是指将胆汁与氢氧化钠按照质量比100:35密闭升温至120℃，搅拌反应12h，然后降至室温。
上述二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述干燥是指将胆汁酸粗品真空干燥至干燥失重≤3％。
上述二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述粉碎得到的胆汁酸粉末粗品过200目筛网。
下面对本发明的技术方案进行进一步的说明。
本发明先利用胆汁制备胆汁酸粗品，然后将其制成粉末，再利用二氧化碳超临界萃取技术萃取鹅去氧胆酸，当压力为27～29Mpa，温度为58～62℃时，鹅去氧胆酸在以含摩尔百分含量为1.5％～2.5％的高极性有机溶剂丙酮作为夹带剂的超临界二氧化碳中溶解度较大，尤其当压力为28Mpa，温度为60℃时，既使鹅去氧胆酸在含2％丙酮的超临界二氧化碳中溶解度达到50g/L，又使该条件下的胆酸、猪去氧胆酸几乎不溶解；利用它们溶解度的差异来萃取分离，可以获得含量＞93％的鹅去氧胆酸，继续利用氯仿结晶精制，即可获得含量＞98％的鹅去氧胆酸精品，且产率高。
与现有技术相比，本发明的有益效果之一是：本发明结合了二氧化碳超临界萃取技术，简化了提取步骤，可以利用胆汁制备含量＞98％的鹅去氧胆酸精品，且鹅去氧胆酸精品收率提高，达到2.5％左右。
附图说明
图1为本发明实施例1胆汁酸粗品的高效液相色谱图。
图2为本发明实施例1鹅去氧胆酸粗品经二氧化碳超临界萃取所得产物的高效液相色谱图。
图3为本发明实施例1鹅去氧胆酸精品的高效液相色谱图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
将1000g鸡胆汁投入皂化反应釜，加入350g氢氧化钠，密闭升温至120℃，搅拌反应12h，然后静置降至室温，用稀盐酸调pH为3，得到黑色膏状物201g，高效液相色谱分析其鹅去氧胆酸含量为13.1％。向黑色膏状物中加入600mL甲醇，加热至50℃，搅拌至完全溶解，继续加入600mL石油醚，搅拌30min，静置分层，虹吸分去石油醚层，石油醚层中为油脂，再重复两次石油醚去油脂步骤。石油醚层经浓缩后回收石油醚，浓缩物为油脂，丢弃。70℃下真空浓缩甲醇层，加入500mL浓度为3％的氢氧化钠溶液，50℃下搅拌溶解，然后加入20mL双氧水，搅拌脱色5h，降至室温，稀盐酸调pH至3，过滤，滤渣在60℃下真空干燥至干燥失重≤3％，粉碎，过200目筛网，得到40.2g胆汁酸粗品，高效液相色谱图如图1，经分析，其鹅去氧胆酸含量为63.8％。
取40g胆汁酸粗品，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2％，在28MPa、60℃条件下萃取1h，然后于分离釜中降温减压至常温常压，收集析出物27.3g，高效液相色谱图如图2，经分析，其鹅去氧胆酸含量为93.4％。析出物用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品24.1g，高效液相色谱图如图3，经分析，其鹅去氧胆酸含量为98.3％。1000g鸡胆汁的鹅去氧胆酸收率为2.45％
实施例2
将1000g猪胆汁投入皂化反应釜，加入350g氢氧化钠，密闭升温至120℃，搅拌反应12h，然后静置降至室温，用稀盐酸调pH为3，过滤，滤渣在60℃下真空干燥至干燥失重≤3％，粉碎，过200目筛网，得到165.8g胆汁酸粗品，其鹅去氧胆酸含量为18.6％。
取160g胆汁酸粗品，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2％，在28MPa、60℃条件下萃取1h，然后于分离釜中降温减压至常温常压，收集析出物31.7g，其鹅去氧胆酸含量为93.0％。析出物用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品28.5g，其鹅去氧胆酸含量为98.1％。1000g猪胆汁的鹅去氧胆酸收率为2.95％。
实施例3
将1000g鸡胆汁投入皂化反应釜，加入350g氢氧化钠，密闭升温至120℃，搅拌反应12h，然后静置降至室温，用稀盐酸调pH为4，得到黑色膏状物200g。向黑色膏状物中加入600mL甲醇，加热至50℃，搅拌至完全溶解，继续加入600mL石油醚，搅拌30min，静置分层，虹吸分去石油醚层，石油醚层中为油脂，再重复两次石油醚去油脂步骤。石油醚层经浓缩后回收石油醚，浓缩物为油脂，丢弃。65℃下真空浓缩甲醇层，加入500mL浓度为3％的氢氧化钠溶液，50℃下搅拌溶解，然后加入20mL双氧水，搅拌脱色5h，降至室温，稀盐酸调pH至4，过滤，滤渣在55℃下真空干燥至干燥失重≤3％，粉碎，过200目筛网，得到39.8g胆汁酸粗品，其鹅去氧胆酸含量为63.7％。
取30g胆汁酸粗品，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2％，在28MPa、60℃条件下萃取1h，然后于分离釜中降温减压至常温常压，收集析出物20.2g，其鹅去氧胆酸含量为93.2％。析出物用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品18.0g，其鹅去氧胆酸含量为98.3％。1000g鸡胆汁的鹅去氧胆酸收率为2.39％。
尽管这里参照本发明的解释性实施例对本发明进行了描述，但是，应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，这些修改和实施方式将落在本申请公开的原则范围和精神之内。更具体地说，在本申请公开的范围内，可以对主题组合布局的组成部件和/或布局进行多种变型和改进。除了对组成部件和/或布局进行的变型和改进外，对于本领域技术人员来说，其他的用途也将是明显的。

Claims (7)

1.一种二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)制备胆汁酸粗品
首先将胆汁皂化，稀盐酸调节pH为3～4，得到黑色膏状物；将黑色膏状物脱油脂并脱色后用稀盐酸调节pH为3～4再过滤，所得滤渣在60℃以下干燥，得到胆汁酸粗品；
(2)制备鹅去氧胆酸精品
将所述胆汁酸粗品粉碎，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，所述二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为1.5％～2.5％，在27～29MPa、58～62℃条件下搅拌萃取0.5～1h，然后降温减压至常温常压，收集析出物，用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品。
2.根据权利要求1所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)制备胆汁酸粗品
首先将胆汁皂化，稀盐酸调节pH为3～4，得到黑色膏状物；将黑色膏状物脱油脂并脱色后用稀盐酸调节pH为3～4再过滤，所得滤渣在55～60℃干燥，得到胆汁酸粗品；
(2)制备鹅去氧胆酸精品
将所述胆汁酸粗品粉碎，投入二氧化碳超临界萃取釜中，通入夹带丙酮的二氧化碳气体，所述二氧化碳气体中丙酮的摩尔百分含量为2％，在28MPa、60℃条件搅拌萃取1h，然后降温减压至常温常压，收集析出物，用氯仿结晶精制，得到鹅去氧胆酸精品。
3.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述胆汁是指从鸡或猪体内提取出来无异味、无霉变的胆汁。
4.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述将黑色膏状物脱油脂并脱色的方法是用甲醇溶解黑色膏状物，用石油醚脱去油脂，接着浓缩甲醇层，用氢氧化钠溶液溶解浓缩物，然后加入双氧水脱色。
5.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述皂化是指将胆汁与氢氧化钠按照质量比100:35密闭升温至120℃，搅拌反应12h，然后降至室温。
6.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述干燥是指将胆汁酸粗品真空干燥至干燥失重≤3％。
7.根据权利要求1或2所述的二氧化碳超临界萃取法提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于所述粉碎得到的胆汁酸粉末粗品过200目筛网。
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CN102485740A (zh) * 2010-12-01 2012-06-06 大兴安岭海德生物工程有限公司 一种从禽胆汁中提取鹅去氧胆酸的工艺
CN103044512A (zh) * 2012-12-19 2013-04-17 四川大熊生物技术有限公司 鹅去氧胆酸粗品的精制方法
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