CN105399858A - 一种药用级玻璃酸钠的精制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种药用级玻璃酸钠的精制方法，具体包括如下步骤：(1)将玻璃酸钠粗品溶解在蒸馏水中制成浓度为2.0g/L～6.0g/L的玻璃酸钠水溶液；(2)采用孔径为0.20～0.50μm的微孔滤膜对所述玻璃酸钠水溶液进行加压过滤；控制压力范围为0.05MPa～0.15MPa，滤液备用；(3)将所述滤液搅拌倒入相当于其体积1～3倍的有机溶剂中，搅拌滴加氯化钠饱和溶液，直至有白色絮状物出现，静置盐析后弃去上层清液，沉降物再用所述有机溶剂洗涤至少1遍后，真空干燥后即得。本发明工艺简单，精制后玻璃酸钠符合国家药用辅料标准。利用本发明工艺可以实现玻璃酸钠大批量精制生产，解决了玻璃酸钠精制过程中过滤时间长，结晶困难，产品收率低的缺点。

Description

一种药用级玻璃酸钠的精制方法

技术领域

本发明涉及一种药用辅料玻璃酸钠的制备方法，具体涉及一种玻璃酸钠的精制方法，制备成药用级玻璃酸钠。

背景技术

透明质酸(Hyaluronicacid，HA)及其衍生物在过去20年已成为医学领域上重要的治疗手段之一。透明质酸HA衍生物产品现已广泛应用于药物缓释基质、抗凝抗栓复合材料、软组织填充材料、防疤美容材料、组织工程支架等医用生物材料。玻璃酸钠，又名透明质酸钠，作为透明质酸的钠盐，是一种使用范围广泛的药用辅料，其结构式为：

1934年美国Meyer和Palmer首先从牛眼玻璃体中分离出HA。上世纪80年代初，以美国为首的发达国家主要从鸡冠中提取药用级HA。丹麦Novozyme公司在上世纪80年代末首创利用微生物发酵法生产HA获得成功。从此，透明质酸的产量大幅提升，成本不断下降，从而为其今后用途扩大奠定了基础。

国外厂商现已开发出以透明质酸为主要成分的“人工关节滑液”，目前该玻璃酸钠注射液作为一种治疗骨关节炎的药物已进入中国市场。此外，随着近视人群的增加，由于佩戴隐形眼镜及长期面对电脑、手机屏幕造成的干眼症患者，玻璃酸钠滴眼液为他们带来了治愈的希望。近期，透明质酸抗肿瘤的医疗新用途不断被挖掘。在我国拥有13亿人口的巨大市场背景下，其市场前景预期看好。

我国国内企业用发酵法生产透明质酸始于上世纪80年代末至90年代初，时间并不比北欧的丹麦晚多少。目前我国有十家药用玻璃酸钠生产企业，其中山东博士伦福瑞达制药有限公司作为全国最大的药用玻璃酸钠生产商，产品占据市场一半左右的份额。玻璃酸钠在医药领域的使用范围不断拓展，造成其产品需求量不断增加。如何解决大量生产厂家在玻璃酸钠精制过程中存在的过滤时间长，结晶困难，产品收率低的缺点，是目前市场关注的焦点。

发明内容

本发明旨在提供一种有效的精制方法，将食品级玻璃酸钠精制成药用级玻璃酸钠。同时解决玻璃酸钠精制过程中过滤时间长，结晶困难，产品收率低的缺点。

本发明提供的技术方法，包括以下步骤：

(1)将玻璃酸钠粗品溶解在蒸馏水中制成浓度为2.0g/L～6.0g/L的玻璃酸钠水溶液；

(2)采用孔径为0.20～0.50μm的微孔滤膜对所述玻璃酸钠水溶液进行加压过滤；控制压力范围为0.05MPa～0.15MPa，滤液备用；

(3)将所述滤液搅拌倒入相当于其体积1～3倍的有机溶剂中，搅拌滴加氯化钠饱和溶液，直至有白色絮状物出现，静置盐析后弃去上层清液，沉降物再用所述有机溶剂洗涤至少1遍后，真空干燥后即得。

本发明通过先将玻璃酸钠粗品制成适宜浓度的水溶液，后以微孔滤膜对其进行加压过滤，最后再通过盐析处理完成玻璃酸钠的精制，该方法能够有效去除粗品中的有色物质、蛋白质及热源物质，制得药用级玻璃酸钠，且分子量符合药典要求。

优选地，所述玻璃酸钠水溶液中玻璃酸钠的浓度为4.0g/L，以更有利于后续精制。

优选地，所述微孔滤膜的孔径为0.45μm。

本发明通过对微孔滤膜的孔径进行合理限定以保证过滤效果，确保过滤速度。孔径过大，不利于有色物质、蛋白质及热源物质的去除；孔径过小，会严重阻碍过滤速度。其中，具体微孔滤膜型号可由本领域技术人员在已知产品中进行选择，如天津津腾实验设备有限公司的0.45μm微孔滤膜，材质为水系PES聚醚砜。

本发明所述的方法，步骤(2)中进行加压过滤，适度的压力控制能够提高过滤速度，节省过滤时间。优选地，控制所述压力为0.10MPa。

优选地，所述有机溶剂为乙醇和/或丙酮，其中，更优选为乙醇。采用上述有机溶剂能够有效溶解玻璃酸钠粗品，形成有利于盐析的溶液体系，确保有色物质、蛋白质及热源物质的完全溶解。

优选地，所述有机溶剂的用量相当于滤液2倍体积。

本发明中，所述“加压过滤”的时间优选为20-40min，更优选30min；所述“静置盐析”的时间优选40分钟～2小时，更优选1小时。

本发明所述的氯化钠饱和溶液可市售购得，优选地，所述氯化钠饱和溶液由36克氯化钠置于100ml的容量瓶中定容至刻度获得(或等比例放大配制形成)。

优选地，所述玻璃酸钠粗品为食品级玻璃酸钠。所述食品级玻璃酸钠是指通过生化提取或生物发酵获得的可用于食品及化妆品的玻璃酸钠，可市售购得，其分子量>1×10⁶，纯度普遍在90％左右(不超过95％)，热源物质含量约0.01EU/mg，蛋白质含量低于0.1％(0.1％左右)，具体选择为本领域技术人员所理解，如购自日照美邦达生物科技有限公司。

作为本发明的一个优选实施方式，本发明所述的精制方法包括如下步骤：

(1)将玻璃酸钠粗品溶解在蒸馏水中制成浓度为4.0g/L的玻璃酸钠水溶液；

(2)采用孔径为0.45μm的微孔滤膜对所述玻璃酸钠水溶液进行加压过滤；控制压力范围为0.1MPa，滤液备用；

(3)将所述滤液搅拌倒入相当于其体积2倍的有机溶剂中，搅拌滴加氯化钠饱和溶液，直至有白色絮状物出现，静置盐析后弃去上层清液，沉降物再用所述有机溶剂洗涤2遍后，真空干燥后即得。

本发明同时请求保护上述方法制得的药用级玻璃酸钠，所述药用级玻璃酸钠热源物质含量(EU/mg)<0.005，蛋白质(％)<0.05，分子量>1×10⁶，纯度≥99％(较粗品有显著提升)，符合药典要求。

本发明工艺简单，精制后玻璃酸钠符合国家药用辅料标准。利用本发明工艺可以实现玻璃酸钠大批量精制生产，解决了玻璃酸钠精制过程中过滤时间长，结晶困难，产品收率低的缺点。在批量化生产的前提下，产物收率普遍高于80％，分子量>1×10⁶；此外，依据本发明所述精制方法，每千克药用级玻璃酸钠的生产成本仅2300元左右。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

其中，玻璃酸钠粗品购自日照美邦达生物科技有限公司(分子量>1×10⁶)，纯度≥90％，热源物质含量(EU/mg)<0.01，蛋白质(％)<0.1。

实施例1

本实施例公开了一种药用级玻璃酸钠的精制方法，具体为：取食品级玻璃酸钠淡黄色粗品2g溶于500ml蒸馏水中，搅拌均匀，在0.10MPa操作压力下选择0.45μm孔径的微孔滤膜过滤，30min后过滤完毕。将滤液搅拌倒入1000ml的乙醇中，搅拌快速滴加氯化钠饱和溶液(通过36克氯化钠置于100ml的容量瓶中定容至刻度获得)，直至有白色絮状物出现，静置1h盐析。将上述玻璃酸钠溶液离心分离后，弃去上层清液，沉降物再用少量无水乙醇洗涤2遍后，真空干燥得成品。获得白色纤维状固体玻璃酸钠1.8g，产品收率90％，纯度≥99％，热源物质含量(EU/mg)<0.005，蛋白质(％)<0.05，分子量>1×10⁶。

实施例2

本实施例公开了一种药用级玻璃酸钠的精制方法，具体为：取食品级玻璃酸钠淡黄色粗品1g溶于500ml蒸馏水中，搅拌均匀，在0.05MPa操作压力下选择0.45μm孔径的微孔滤膜过滤，30min后过滤完毕。将滤液搅拌倒入1500ml的乙醇中，搅拌快速滴加氯化钠饱和溶液，直至有白色絮状物出现，静置1h盐析。将上述玻璃酸钠溶液离心分离后，弃去上层清液，沉降物再用少量无水乙醇洗涤2遍后，真空干燥得成品。获得白色纤维状固体玻璃酸钠0.84g，产品收率84％，纯度≥99％，热源物质含量(EU/mg)<0.005，蛋白质(％)<0.05，分子量>1×10⁶。

实施例3

本实施例公开了一种药用级玻璃酸钠的精制方法，具体为：取食品级玻璃酸钠淡黄色粗品3g溶于500ml蒸馏水中，搅拌均匀，在0.15MPa操作压力下选择0.45μm孔径的微孔滤膜过滤，30min后过滤完毕。将滤液搅拌倒入750ml的丙酮中，搅拌快速滴加氯化钠饱和溶液，直至有白色絮状物出现，静置1h盐析。将上述玻璃酸钠溶液离心分离后，弃去上层清液，沉降物再用少量丙酮洗涤2遍后，真空干燥得成品。获得白色纤维状固体玻璃酸钠2.6g，产品收率86.7％，纯度≥99％，热源物质含量(EU/mg)<0.005，蛋白质(％)<0.05，分子量>1×10⁶。

结果表明：本发明所述的玻璃酸钠的精制方法，产品收率高，过滤时间短，产品质量可以达到药用级标准。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，如：改变溶剂用量、有机溶剂种类，以及调节盐析时用量配比等，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种药用级玻璃酸钠的精制方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将玻璃酸钠粗品溶解在蒸馏水中制成浓度为2.0g/L～6.0g/L的玻璃酸钠水溶液；

(2)采用孔径为0.20～0.50μm的微孔滤膜对所述玻璃酸钠水溶液进行加压过滤；控制压力范围为0.05MPa～0.15MPa，滤液备用；

(3)将所述滤液搅拌倒入相当于其体积1～3倍的有机溶剂中，搅拌滴加氯化钠饱和溶液，直至有白色絮状物出现，静置盐析后弃去上层清液，沉降物再用所述有机溶剂洗涤至少1遍后，真空干燥后即得。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述玻璃酸钠水溶液中玻璃酸钠的浓度为4.0g/L。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述微孔滤膜的孔径为0.45μm。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述压力为0.10MPa。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述有机溶剂为乙醇和/或丙酮。

6.根据权利要求1或5所述的方法，其特征在于：所述有机溶剂的用量相当于所述滤液2倍体积。

7.根据权利要求1或5所述的方法，其特征在于：所述氯化钠饱和溶液由36克氯化钠置于100ml的容量瓶中定容至刻度获得。

8.根据权利要求1或5所述的方法，其特征在于：所述玻璃酸钠粗品为食品级玻璃酸钠。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)将玻璃酸钠粗品溶解在蒸馏水中制成浓度为4.0g/L的玻璃酸钠水溶液；

(2)采用孔径为0.45μm的微孔滤膜对所述玻璃酸钠水溶液进行加压过滤；控制压力范围为0.1MPa，滤液备用；

(3)将所述滤液搅拌倒入相当于其体积2倍的有机溶剂中，搅拌滴加氯化钠饱和溶液，直至有白色絮状物出现，静置盐析后弃去上层清液，沉降物再用所述有机溶剂洗涤2遍后，真空干燥后即得。

10.权利要求1-9任一项方法所制得的药用级玻璃酸钠。