CN105399737B - 噁唑烷酮类化合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了式VI所示的噁唑烷酮类化合物或其药学上可接受的盐、水合物或晶型。本发明还提供了化合物的制备方法。当前化药领域中，多数改变结构的化合物的活性会变好，但是毒性也会明显增强，无法作为药物使用。本发明所提供的化合物与现有的化合物相比，不仅能够有很好的抗耐药性和抗菌活性，令人意想不到的是，本发明的化合物安全性也更好，更有利于患者的用药安全和治疗。

Description

噁唑烷酮类化合物及其用途

技术领域

本发明涉及噁唑烷酮类化合物。

背景技术

抗生素的发现和应用是人类在20世纪医药领域最伟大的成就之一，堪称人类同疾病斗争史上的一场革命。自此，医药领域进入了细菌所致疾病大大减少的黄金时代。然而时至今日，由于抗生素的广泛使用甚至滥用，细菌的耐药性问题日益严重，人类正在逐步临近“后抗生素时代”，抗生素的疗效正逐渐降低。临床上已发现许多新的耐药株，其中耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)、耐万古霉素的肠球菌(VRE)、耐青霉素的肺炎链球菌(PRSP)等已严重危及临床治疗，其相关治疗药物的品种数量较少。

噁唑烷酮类化合物利奈唑胺已于2000年在美国上市，临床主要用于获得性肺炎、软组织感染等，也可用于外科感染性疾病的治疗，对骨骼、肺部、脑脊液等的渗透性和组织浓度的药动学特征良好。国内外对噁唑烷酮类药物的开发属于热点领域。但是现有的噁唑烷酮类化合物存在耐药性强或者合成困难，合成成本高等等问题，亟需要一种。

发明内容

本发明的目的在于提供噁唑烷酮类化合物及其用途。

本发明提供了式VI所示的噁唑烷酮类化合物或其药学上可接受的盐、水合物或晶型：

其中，R₁为

R₂～R₄独立选自H或C₁～C₈烷基；

R₅～R₈独立选自H、F、Cl、Br或C₁～C₈烷基；

R₉、R₁₀、R₁₁独立选自H、C₁～C₈烷基、

R₁₇为H或C₁～C₈烷基；

R₁₈～R₂₉独立选自H或C₁～C₈烷基；

v＝1～2，x＝0～2，y＝0～2，z＝0～2。

其中，当v＝1，x＝y＝z＝0，R₂₂、R₂₃均为H时，所述噁唑烷酮类化合物的结构如式I所示：

其中，R₅～R₈独立选自H、F、Cl、Br或C₁～C₈烷基；

R₉、R₁₀、R₁₁独立地为H、取代的苯基、且R₉、R₁₀、R₁₁至少有一个不为H；

所述的取代苯基上的取代基分别独立地为H、卤素、C₁～C₄烷氧基、C₁～C₄烷基或C₁～C₄硫烷基；

R₁₇为H或C₁～C₄烷基；

R₂₆～R₂₉独立地为H、C₁～C₄烷基、卤素或羧基。

进一步地，所述噁唑烷酮类化合物，R₅～R₈独立选自H、F、Cl、Br或C₁～C₄烷基；

R₉、R₁₀、R₁₁独立地为H、取代的苯基、且R₉、R₁₀、R₁₁至少有一个不为H；

所述的取代苯基上的取代基分别独立地为H、卤素、C₁～C₄烷氧基、C₁～C₄烷基或C₁～C₄硫烷基；

R₁₇为H或C₁～C₄烷基；

R₂₆～R₂₉独立地为H、C₁～C₄烷基、卤素或羧基。

更进一步地，R₅～R₈独立选自H、F、Cl、Br或C₁～C₄烷基；

R₉、R₁₀、R₁₁独立地为H、取代的苯基、且R₉、R₁₀、R₁₁至少有一个不为H；

所述的取代苯基上的取代基分别独立地为H、F、Cl、Br、C₁～C₄烷氧基、C₁～C₄烷基或C₁～C₄硫烷基；

R₁₇为H或C₁～C₄烷基；

R₂₆～R₂₉独立地为H、C₁～C₄烷基、卤素或羧基。

更进一步地，R₅～R₈独立选自H、F、Cl或Br；

R₉、R₁₀、R₁₁独立地为H、取代的苯基、且R₉、R₁₀、R₁₁至少有一个不为H；

所述的取代苯基上的取代基分别独立地为H、F、Cl、Br、C₁～C₄烷氧基、C₁～C₄烷基或C₁～C₄硫烷基；

R₁₇为H或C₁～C₄烷基；

R₂₆～R₂₉独立地为H、F、Cl、Br或羧基。

更进一步地，R₅～R₈独立选自H、F或Cl；

R₉、R₁₀、R₁₁独立地为H、取代的苯基、且R₉、R₁₀、R₁₁至少有一个不为H；

所述的取代苯基上的取代基分别独立地为H、F、Cl、Br、C₁～C₄烷氧基、C₁～C₄烷基或C₁～C₄硫烷基；

R₁₇为C₁～C₄烷基；

R₂₆～R₂₉独立地为H、C₁～C₄烷基、F、Cl、Br或羧基。

更进一步地，R₅～R₈独立选自H或F；

R₉、R₁₀、R₁₁独立地为H、取代的苯基、且R₉、R₁₀、R₁₁至少有一个不为H；

所述的取代苯基为单取代或双取代，其取代基分别独立地为H、F、Cl、Br、C₁～C₄烷氧基、C₁～C₄烷基或C₁～C₄硫烷基，；R₁₇为C₁～C₄烷基；

R₂₆～R₂₉独立地为H、C₁～C₄烷基、F、Cl、Br或羧基。

更进一步地，R₅～R₈独立选自H或F；

R₉、R₁₀、R₁₁独立地为H、取代的苯基、且R₉、R₁₀、R₁₁至少有一个不为H；

所述的取代苯基为单取代或双取代，其取代基分别独立地为H、Cl、Br、C₁～C₄烷氧基、C₁～C₄烷基或C₁～C₄硫烷基；

R₁₇为C₁～C₄烷基；

R₂₆～R₂₉独立地为H、F、Cl、Br或羧基。

优选地，所述化合物选自如下之一：

更优选地，所述化合物选自如下之一：

所述药学上可接受的盐选自所述化合物的盐酸盐、氢溴酸盐、氢氟酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苦味酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、天冬氨酸盐或谷氨酸盐。

本发明还提供了上述噁唑烷酮类化合物在制备抗革兰氏阳性菌的药物中的用途。

进一步地，所述革兰氏阳性菌为链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌或屎肠球菌。

进一步地，所述革兰氏阳性菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

当前化药领域中，多数改变结构的化合物的活性会变好，但是毒性也会明显增强，无法作为药物使用。本发明所提供的化合物与现有的化合物相比，不仅能够有很好的抗耐药性和抗菌活性，令人意想不到的是，本发明的化合物安全性也更好，更有利于患者的用药安全和治疗。

本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。

除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物联合给药。

本发明的一种实施方式中，还包括了同位素标记的上述化合物或其药学上可接受的盐，所述同位素标记化合物是指与本文中所列化合物相同，但是其中的一个或多个原子被另一个原子取代，该原子的原子质量或质量数不同于自然界中常见的原子质量或质量数。可以引入化合物中的同位素包括氢、碳、氮、氧、硫，即2H，3H、13C、14C、15N、17O、18O、35S。含有上述同位素和/或其它原子同位素的化合物及其立体异构体，以及该化合物、立体异构体的可药用的盐均应包含在本发明范围之内。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换或变更。

以下通过具体实施例的形式，对本发明的上述内容再做进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例1 关键中间体7的合成路线

试剂和反应条件：(a)BnNH₂，DIEA，CH₃CN，reflux，93.7％；(b)Fe，NH₄C1，EtOH/H₂O，6O℃，87％；(c)氯甲酸苄酯，K₂CO₃，DCM，0℃-r.t.，85％；(d)(S)-1-乙酰胺-3-氯丙烷-2-基乙酸酯，tBuOLi，MeOH，AcOH，THF，-5℃-r.t.，79％，(e)Pd/C，H₂，EtOH，r.t.92％，(f)NaNO₂，HCl，SnCl₂，0-r.t.，75％.

N-苄基-2-氟-4-硝基苯胺(2)

室温下将3，4-二氟硝基苯(34.5ml，314.3mmol)和苄胺(44.6ml，408.6mmol)溶解于乙腈(600ml)，搅拌下加入二异丙基乙基胺(82.3ml，471.5mmol).将反应液加热至回流，5小时后冷却至室温。过滤，滤饼用乙腈洗涤后丢弃，滤液用旋转蒸发仪除去溶剂。所得固体用乙醇重结晶，得到72.5g黄色固体，即为2，收率为93.7％.¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.93(m，2H)，7.36(m，5H)，6.63(t，J＝8.4Hz，1H)，4.41(s，2H)，4.07(broad s，3H).

N-苄基-2-氟苯-1，4-二胺(3)

将化合物2(2.25mmol)溶于EtOH/H₂O(v/v＝20/10mL)溶液中，搅拌下加入NH₄Cl(9.01mmol).反应液加热到60℃后，开始加入铁粉(6.76mmol)，15分钟内加完。在此温度下，反应液继续搅拌4小时。冷却至室温后，过滤取出铁泥等固体，滤饼用乙醇洗涤。母液除溶剂后，加入二氯甲烷和水进行分液。二氯甲烷层用无水硫酸钠干燥后去除溶剂后得到目标化合物3，收率86％。产物未经进一步纯化，直接用于下一步反应。

(4)

将化合物3(217.3mmol)溶于二氯甲烷，加入K₂CO₃(434.6mmol).溶液冷却至0℃后搅拌20分钟，缓慢滴加氯甲酸苄酯(652mmol)，1小时内滴加完成。让反应体系自然升至室温，搅拌过夜。往反应体系中加入水，有机层用无水Na₂SO₄干燥后，浓缩去除溶剂。残留物柱层析(用1％MeOH/CH₂Cl₂作洗脱剂)得白色固体，即为化合物4(80g，76.2％)。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ6.73-7.36(m，19H)，5.16(m，4H)，4.74(d，J＝2.4Hz，1H).

(S)-苄基4-(5-(乙酰胺甲基)-2-氧代-3-恶唑烷基)-2-氟苯基(苄基)碳酸酯(5)

N₂氛围下，将化合物4(165.1mmol)和t-BuOLi(495.3mmol)溶于干燥的四氢呋喃(300ml)中，搅拌下冷却至-5℃，15分钟后，一次性加入甲醇。0-5℃下继续加班15分钟，加入(S)-1-乙酰氨基-3-氯丙烷-2-基乙酸酯的四氢呋喃溶液(80mL).17小时后，加入冰乙酸。然后用二氯甲烷稀释，水洗有机层。有机层浓缩后用柱层析纯化，得到白色固体，即为化合物5(37.8g，51.1％).¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.47(d，J＝11.6Hz，1H)，7.27(m，10H)，7.00(dd，J＝8Hz，J＝24.4Hz，2H)，6.17(s，H)，5.19(d，J＝7.6Hz，2H)，4.81-4.71(m，3H)，3.98(t，J＝8.8Hz，1H)，3.73-3.55(m，3H)，2.00(s，1H).

(S)-N-((3-(4-氨基-3-氟苯基)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(6)

化合物5(37g)溶于乙醇中，加10％Pd/C(7g)，室温常压下用H₂加氢还原，搅拌过夜。反应体系过滤后，滤液蒸干的白色固体，即为化合物6(19g，94.5％).¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.25(t，J＝5.6Hz，1H)，7.31(dd，J＝2Hz，J＝13.2Hz，1H)，6.91(dd，J＝1.6Hz，J＝8.4Hz，1H)，6.76(t，J＝10Hz，1H)，5.04(s，2H)，4.66(m，1H)，4.01(t，J＝8.8Hz，1H)，3.64(dd，J＝6.4Hz，J＝12.8Hz，1H)，3.40-3.36(m，2H)，1.83(s，1H).

(S)-N-((3-(3-氟-4-肼苯基)-2-氧代-5-恶唑烷)甲基)乙酰胺(7)

搅拌下将化合物6(3g)溶于甲醇(6ml)，依次加入水(12ml)、浓盐酸(3ml)和亚硝酸钠水溶液。1分钟内加完。将反应体系冷却至-5℃，搅拌15分钟。剧烈搅拌下加入SnCl₂·2H₂O溶液(37％HCl)，5分钟加完。反应体系继续搅拌2小时，用10％氢氧化钠调节pH 7-8。悬浊液用二氯甲烷萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，真空浓缩后用乙醇重结晶得白色固体，即化合物7(2.2g，70％).¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ8.25(t，J＝6Hz，1H)，7.35(dd，J＝2.4Hz，J＝14Hz，1H)，7.14(t，J＝8.8Hz，1H)，7.07(dd，J＝2Hz，J＝9.2Hz，1H)，6.57(s，1H)，4.67(m，1H)，4.01(m，3H)，3.67(dd，J＝6.8Hz，J＝9.2Hz，1H)，3.39(t，J＝5.2Hz，2H)，1.83(s，3H).

实施例2 4-取代-吡唑苯基恶唑烷酮的合成路线

试剂和反应条件：(a)水合肼，EtOH，回流，5h；(b)3，4，5-三氟硝基苯，DMSO，K₂CO₃，r.t.，过夜；(c)2，3，4-三氟硝基，DIEA，NMP；(d)水合肼，EtOH，回流，8h；(e)2-(2-吡啶基)丙二醛，p-TsOH，EtOH，回流，5h；(f)Fe，NH₄Cl，EtOH，H₂O，60℃，4h；(g)Cbz-Cl，K₂CO₃，DCM，过夜；(h)tBuOLi，(S)-1-乙酰氨基-3-氯丙烷-2-基乙酸酯，MeOH，DCM，回流，8h.

2-(1H吡唑-4-基)吡啶(8)

搅拌下缓慢的将水合肼(1.3mL，26.82mmol)滴加到2-吡啶基丙二醛(2g，13.41mmol)的乙醇溶液(20mL).混合液加热至回流，5小时后浓缩至干燥。用乙醇重结晶得到棕色化合物8(1.7g，86％).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.59(d，J＝4.8Hz，1H)，8.15(s，2H)，7.69(t，J＝7.7Hz，1H)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H)，7.18-7.11(m，1H).

(4-硝基苯基)肼(9)

室温下4-氟硝基苯(3g，21.26mmol)溶于乙醇(30mL)，搅拌下缓慢滴加水合肼(2.1mL，42.52mmol)。加热回流8小时后冷却至室温。过滤，滤饼真空干燥得到目标产物9(2.4g，75％).¹H NMR(400MHz，DMSO)δ7.99(d，J＝8.8Hz，2H)，6.79(d，J＝8.5Hz，2H)，4.48(s，3H)，3.40(s，1H).

2-(1-(2，6-二氟-4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)吡啶(10a)

室温下，化合物8(410mg，2.82mmol)溶于DMSO(4mL)中，搅拌下加入K₂CO₃(588mg，4.26mmol)。搅拌3分钟后，加入3，4，5-三氟硝基苯(500mg，2.82mmol)。反应混合物搅拌过夜。用DCM/H₂O体系分液。有机层干燥后，真空浓缩，残留物用柱层析纯化得到目标化合物10a(613mg，72％).

2-(1-(2，3-二氟-4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-yl)吡啶(10b)

化合物8(500mg，3.44mmol)溶于NMP(10mL)中，冷至0℃，搅拌下依次加入DIEA(1.2mL，7.2mmol)、2，3，4-三氟硝基苯(357.7μL，3.13mmol)。室温搅拌过夜。反应结束后，交反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取。有机层干燥后真空浓缩，残留物用柱层析干燥得到目标化合物10b(387mg，41％).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.61(d，J＝4.8Hz，1H)，8.35(d，J＝2.4Hz，1H)，8.25(s，1H)，7.81(ddd，J＝9.0，4.5，1.9Hz，1H)，7.72(t，J＝7.3Hz，1H)，7.55(d，J＝7.9Hz，1H)，7.40(dd，J＝16.3，8.7Hz，1H)，7.19(dd，J＝7.4，5.0Hz，1H).

2-(1-(4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)吡啶(10c)

化合物9(500mg，3.27mmol)溶于EtOH(10mL)，搅拌，依次加入2-吡啶丙二醛(487mg，3.26mmol)和p-TsOH(0.33mmol)。加热回流5小时，冷至室温。过滤，得到的固体用乙醇洗涤，真空干燥得到目标化合物10c(756mg，87％).1HNMR(400MHz，DMSO)δ9.34(s，1H)，8.60(d，J＝4.2Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.40(d，J＝8.8Hz，2H)，8.21(d，J＝8.8Hz，2H)，7.90-7.81(m，2H)，7.30(t，J＝5.0Hz，1H).

合成化合物11的步骤(通法D)

化合物10(2.25mmol)溶于EtOH/H₂O(v/v＝20/10mL)中，搅拌，加入NH₄Cl(9.01mmol).加热至60℃，15分钟内加入Fe粉(6.76mmol)。此温度下继续搅拌4小时，反应结束后过滤除去固体，乙醇充分洗涤。滤液真空浓缩，用DCM/H₂O分液。有机层用无水硫酸钠干燥，真空浓缩后得到目标化合物11(60-72％).

合成化合物12的步骤(通法E)

化合物11(1.18mmol)溶于DCM(10mL)中，加班，加入K₂CO₃(2.36mmol).冷至0℃，搅拌5分钟，滴加氯甲酸苄酯(2.56mmol)。让反应体系自然升至室温，搅拌过夜。反应结束后，分别用水、饱和食盐水洗涤二氯甲烷层。分液得有机层，用无水硫酸钠干燥后，真空除溶剂后用乙醇重结晶得到目标化合物12(66-78％).

3，5-二氟-4-(4-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基碳酸苄酯(12a)

采用通法E，以化合物11a为起始原料，目标化合物12a为白色固体，收率71％。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ9.45(s，1H)，8.65(d，J＝5.4Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.26(s，1H)，7.93(d，J＝7.8Hz，1H)，7.59(d，J＝12.5Hz，2H)，7.44-7.28(m，8H)，5.20(s，2H).

2，3-二氟-4-(4-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基碳酸苄酯(12b)

采用通法E，以化合物11b为起始原料，目标化合物12b为白色固体，收率66％。¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ8.67(d，J＝2.9Hz，1H)，8.64-8.60(m，2H)，8.38(d，J＝2.1Hz，1H)，8.34-8.27(m，3H)，7.95(dd，J＝9.2，1.5Hz，1H)，7.73(t，J＝7.7Hz，2H)，7.55(t，J＝8.5Hz，2H)，7.19(t，J＝6.9Hz，2H)，2.61(s，2H).

4-(4-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基碳酸苄酯(12c)

采用通法E，以化合物11c为起始原料，目标化合物12c为白色固体，收率为78％.¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ8.59(d，J＝4.8Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.15(s，1H)，7.72(m，3H)，7.56-7.49(m，3H)，7.43-7.35(m，5H)，7.15(dd，J＝4.8Hz，J＝6.4Hz，1H)，5.22(s，2H).

实施例3 化合物13的合成步骤(通法F)

化合物12(2.19mmol)和t-BuOLi(10.95mmol)悬于DCM(20ml)中，N₂保护，室温下搅拌15分钟，加入MeOH(8.76mmol).再搅拌15分钟后，加入(S)-1-乙酰胺-3-氯丙烷-2-基乙酸酯(8.76mmol)。家人回流8小时，冷至室温，用DCM/H₂O体系分液。有机层干燥后浓缩，残留物用柱层析纯化得到目标化合物13。

(S)-N-((3-(3，5-二氟-4-(4-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-基苯基)-2-氧代5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(13a)

采用通法F，以化合物12a为起始原料，目标化合物13a为白色固体，收率47％。¹HNMR(400MHz，DMSO)δ9.08(s，1H)，8.57(d，J＝4.7Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.27(t，J＝6.0Hz，1H)，7.96(d，J＝9.0Hz，2H)，7.83(q，J＝7.8Hz，2H)，7.70(d，J＝9.0Hz，2H)，7.25(t，J＝5.4Hz，1H)，4.76(td，J＝11.4，5.5Hz，1H)，4.19(t，J＝8.9Hz，1H)，3.81(dd，J＝8.8，6.6Hz，1H)，3.45(t，J＝5.4Hz，2H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ169.98，154.12，150.97，149.40，139.17，136.91，136.79，135.08，125.89，124.91，121.61，119.80，118.91，71.59，47.27，41.41，22.43.HRMS：Q-TOF：414.1372.

(S)-N-((3-(2，3-二氟-4-(4-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-基苯)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(13b)

采用通法F，以化合物12b为起始原料，目标化合物13b为白色固体，

收率49％。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ8.67(s，1H)，8.56(d，J＝4.3Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.26(s，1H)，7.86-7.73(m，2H)，7.59(d，J＝10.6Hz，2H)，7.27-7.23(m，1H)，4.85-4.68(m，1H)，4.19(t，J＝9.0Hz，1H)，3.87-3.76(m，1H)，3.45(t，J＝5.3Hz，2H)，1.85(s，3H).¹³CNMR(100MHz，DMSO)δ170.03，158.21，155.73，153.85，150.71，149.47，140.23，139.72，136.97，131.90，124.29，121.73，119.85，112.55，101.73，71.96，47.26，41.31，22.41.HRMS：Q-TOF：414.1377

(S)-N-((2-氧代-3-(4-(4-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(13c)

采用通法F，以化合物12c为起始原料，目标化合物13c为白色固体，收率39％。.¹HNMR(400MHz，DMSO)δ8.68(s，1H)，8.57(d，J＝4.3Hz，1H)，8.41(s，1H)，8.18(s，1H)，7.86-7.66(m，3H)，7.55(d，J＝4.9Hz，1H)，7.26(t，J＝5.7Hz，1H)，4.60(d，J＝5.4Hz，1H)，3.72(t，J＝8.5Hz，1H)，3.39(t，J＝7.2Hz，1H)，3.31(d，J＝7.5Hz，2H)，1.81(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ169.87，154.78，150.58，149.46，140.12，136.98，131.57，130.72，130.69，126.75，124.55，124.19，121.81，119.95，117.59，72.80，49.54，41.44，22.36.HRMS：Q-TOF：400.1386

实施例4 4-取代吡唑苯基恶唑烷酮类化合物的合成路线

试剂及反应条件：(a)HOBT，EDCI，NH₄Cl，4-甲基吗啉，DMF，60℃，过夜；(b)HOBT，EDCI，甲胺烟酸盐，4-甲基吗啉，DMF，60℃，过夜；(c)HOBT，EDCI，吗啉，4-甲基吗啉，DMF，60℃，过夜；(d)MeI，K₂CO₃，DMF，60℃；(e)conc.HCl，7，EtOH，回流，4h.

6-(1，3-二氧代丙烷-2-基)尼古酰胺(14)

6-(1，3-氧代丙烷-2-基)尼古酸(100mg，0.518mmol)溶于DMF(4mL)中，室温搅拌下加入HOBT(101mg，0.745mmol)，EDCI(143mg，0.745mmol)，NH₄Cl(166mg，3.11mmol)和4-甲基吗啉(81μL，0.745mmol)。加热至60℃搅拌过夜。TLC显示反应结束后，将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取。有机层干燥后真空浓缩。残留物用柱层析纯化，得到目标化合物14(46mg，47％).¹H NMR(400MHz，DMSO)δ15.98(s，1H)，9.32(s，2H)，8.91-8.80(m，2H)，8.55(d，J＝9.2Hz，1H)，8.25(s，1H)，7.74(s，1H).

6-(1，3-二氧代丙烷-2-基)-N-甲基尼古酰胺(15)

6-(1，3-氧代丙烷-2-基)尼古酸(100mg，0.518mmol)溶于DMF(4mL)中，室温搅拌下加入HOBT(101mg，0.745mmol)，EDCI(143mg，0.745mmol)，盐酸甲胺(210mg，3.11mmol)和4-甲基吗啉(425μL，7.44mmol)。加热至60℃搅拌过夜。TLC显示反应结束后，将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取。有机层干燥后真空浓缩。残留物用柱层析纯化，得到目标化合物15(69mg，65％).¹H NMR(400MHz，DMSO)δ15.96(s，1H)，9.32(s，2H)，8.87(d，J＝9.1Hz，2H)，8.75(s，1H)，8.50(d，J＝9.1Hz，1H)，2.81(d，J＝4.1Hz，3H).

2-(5-(吗啉-4-羰基)吡啶-2-基)丙二醛(16)

6-(1，3-氧代丙烷-2-基)尼古酸(200mg，1.04mmol)溶于DMF(4mL)中，室温搅拌下加入HOBT(203mg，1.5mmol)，EDCI(288mg，1.5mmol)，吗啉(541μL，6.21mmol)和4-甲基吗啉(507μL，4.62mmol)。加热至60℃搅拌过夜。TLC显示反应结束后，将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取。有机层干燥后真空浓缩。残留物用柱层析纯化，得到目标化合物16(166mg，61％).¹H NMR(400MHz，DMSO)δ16.01(s，1H)，9.31(s，2H)，8.87(d，J＝8.9Hz，1H)，8.57(s，1H)，8.22(d，J＝8.8Hz，1H)，3.61(br s，4H)，3.52(br s，4H).

6-(1，3-二氧代丙烷-2-基)尼古酸甲酯(17)

6-(1，3-氧代丙烷-2-基)尼古酸(150mg，0.777mmol)溶于DMF(4mL)中，搅拌，室温下加入K₂CO₃(160mg，1.16mmol)后滴加MeI(73μL，1.16mmol)。加热至60℃搅拌过夜。TLC显示反应结束后，将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取。有机层干燥后真空浓缩。残留物用柱层析纯化，得到目标化合物17(84mg，52％).¹H NMR(400MHz，DMSO)δ15.96(s，1H)，9.27(s，2H)，8.98(s，1H)，8.89(d，J＝9.2Hz，1H)，8.51(d，J＝9.0Hz，1H)，3.89(s，3H).

(S)-6-(1-(4-(5-(乙酰胺甲基)-2-氧代-3-恶唑烷基)-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)尼古酰胺(18a)

按通法C，起始原料为化合物14，反应完后过滤得到白色固体18a，收率75％。¹HNMR(400MHz，DMSO)δ9.03(s，1H)，8.88(s，1H)，8.47(s，1H)，8.29(d，J＝6.8Hz，2H)，8.18(s，1H)，7.97(d，J＝8.4Hz，1H)，7.88(t，J＝9.0Hz，1H)，7.79(d，J＝14.0Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，4.84-4.71(m，1H)，4.20(t，J＝8.8Hz，1H)，3.88-3.76(m，1H)，3.45(t，J＝5.4Hz，2H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.03，165.15，154.59，153.97，152.13，139.99，139.10，139.00，138.45，131.28，127.83，125.27，122.46，120.53，114.11，106.24，71.80，47.24，41.35，22.42.HRMS：Q-TOF：439.1525.

(S)-6-(1-(4-(5-(乙酰胺甲基)-2-氧代-3-恶唑烷基)-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-N-甲基尼古酰胺(18b)

按通法C，起始原料的化合物为15，过滤得到白色固体18b，收率为73％。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ8.98(s，1H)，8.82(s，1H)，8.59(d，J＝4.2Hz，1H)，8.43(s，1H)，8.26(t，J＝5.4Hz，1H)，8.20(d，J＝8.3Hz，1H)，7.89(dd，J＝21.5，8.6Hz，2H)，7.77(d，J＝13.9Hz，1H)，7.50(d，J＝9.0Hz，1H)，4.83-4.74(m，1H)，4.19(t，J＝9.0Hz，1H)，3.85-3.76(m，1H)，3.45(t，J＝5.1Hz，2H)，2.82(d，J＝3.8Hz，3H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.02，164.92，154.57，153.98，152.85，152.12，148.46，139.57，138.85，135.58，130.27，127.43，125.21，124.05，122.74，119.21，114.06，106.24，71.81，47.22，41.36，26.12，22.41.HRMS：Q-TOF：453.1687.

(S)-N-((3-(3-氟-4-(4-(5-(吗啉-4-羰基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)-2-氧代-5-恶唑烷基甲基))乙酰胺(18c)

按通法C，起始原料为化合物16，过滤得白色固体18c，收率为68％。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ8.81(s，1H)，8.62(s，1H)，8.41(s，1H)，8.26(t，J＝5.5Hz，1H)，7.93-7.83(m，3H)，7.77(d，J＝13.9Hz，1H)，7.50(d，J＝9.1Hz，1H)，4.83-4.75(m，1H)，4.19(t，J＝9.0Hz，1H)，3.86-3.78(m，1H)，3.63(s，6H)，3.45(t，J＝5.2Hz，4H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.00，166.91，154.56，153.98，152.10，151.72，147.95，139.45，138.83，135.97，130.10，128.89，125.18，124.08，122.86，119.31，114.07，106.25，71.81，66.02，47.23，41.36，22.41.HRMS：Q-TOF：531.1766.

(S)6-(1-(4-(5-(乙酰胺甲基)-2-氧代-3-恶唑烷基)-2-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)尼古酸甲酯(18d)

按通法C，起始原料为化合物17，过滤后得到白色固体目标化合物18d，收率为72％。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ9.07(s，1H)，8.89(s，1H)，8.46(s，1H)，8.28(dd，J＝16.8，7.1Hz，2H)，7.98(d，J＝8.3Hz，1H)，7.88(t，J＝8.9Hz，1H)，7.78(d，J＝13.9Hz，1H)，7.51(d，J＝9.1Hz，1H)，4.82-4.74(m，1H)，4.19(t，J＝8.9Hz，1H)，3.90(s，3H)，3.86-3.77(m，1H)，3.45(t，J＝5.4Hz，2H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.02，165.09，154.69，153.97，152.14，150.28，139.78，138.93，137.63，130.72，125.23，123.79，123.00，122.73，119.58，114.05，106.22，71.80，52.25，47.22，41.36，22.41.HRMS：Q-TOF：476.1343.

实施例5 4-取代-吡唑苯基恶唑烷酮类化合的合成路线

试剂及反应条件：(a)mCPBA，DCM，K₂CO₃，r.t.，18h；(b)TMSCN，二甲氨基甲酰氯，DCM，r.t.，48h.(20)

化合物19(200mg，0.506mmol)溶于DCM(4mL)中，室温搅拌下加入mCPBA(175mg，1.01mmol)。反应液搅拌18小时，倒入水中，有机层用饱和食盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥，真空蒸除溶剂。残余物溶于二氯甲烷中，然后加入碳酸钾(279mg，2.02mmol)。混合物加热回流4小时。过滤去除固体，母液用旋转蒸发仪蒸馏除去溶剂，得到目标化合物20，为白色固体(148mg，71％yield).¹H NMR(400MHz，DMSO)δ9.34(s，1H)，8.71(d，J＝15.6Hz，1H)，8.35(d，J＝6.6Hz，1H)，8.29(t，J＝5.2Hz，1H)，8.12(d，J＝8.0Hz，1H)，7.89(t，J＝8.9Hz，1H)，7.78(d，J＝14.0Hz，1H)，7.51(d，J＝9.0Hz，1H)，7.42(t，J＝7.8Hz，1H)，7.31(t，J＝7.0Hz，1H)，4.86-4.65(m，1H)，4.19(t，J＝8.9Hz，1H)，3.92-3.74(m，1H)，3.45(t，J＝5.1Hz，2H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.01，153.97，152.03，140.76，140.41，140.06，138.85，131.92，131.84，125.13，123.80，123.31，122.65，115.40，114.14，106.26，71.80，47.22，41.35，22.42.HRMS：Q-TOF：450.0980.

(S)-N-((3-(4-(4-(6-氰基吡啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)-3-氟苯基)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(21)

化合物20(100mg，0.243mmol)溶于DCM(3mL)中，搅拌下一次性加入TMSCN(64μL，0.486mmol)。继续搅拌10分钟后，加入二甲氨基甲酰氯。反应液室温下搅拌48小时，倒入水中，分液得有机层。有机层干燥后除有机溶剂，逐层析纯化得产品21(47mg，46％).¹H NMR(400MHz，DMSO)δ8.87(s，1H)，8.43(s，1H)，8.26(t，J＝5.6Hz，1H)，8.17(d，J＝8.1Hz，1H)，8.08(t，J＝7.9Hz，1H)，7.87(t，J＝7.4Hz，2H)，7.78(d，J＝14.0Hz，1H)，7.51(d，J＝9.3Hz，1H)，4.85-4.76(m，1H)，4.19(t，J＝9.0Hz，1H)，3.87-3.74(m，1H)，3.45(t，J＝5.3Hz，2H)，1.85(s，3H).HRMS：Q-TOF：443.1243.

实施例6 4-取代吡唑苯基恶唑烷酮类化合物的合成路线

试剂和反应条件(a)2-甲基喹啉，福尔马林，130℃，7h；(b)Py.SO₃，DMSO，Et₃N，DCM，0℃-r.t.，2h；(c)7，37％HCl，EtOH，reflux 4h；(d)DMF，POCl₃，2-甲基吡嗪，0℃，1h，60℃，过夜.

2-(2-喹啉基)丙烷-1，3-二醇(22)

二甲基喹啉(2g，13.87mmol)和福尔马林(4.1mL，55.49mmol)的溶液在130℃封管搅拌7小时。过量的福尔马林蒸馏除去，残余物用柱层析纯化得化合物22(1.27g，45％).¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ8.16(d，J＝8.4Hz，1H)，8.03(d，J＝8.5Hz，1H)，7.81(d，J＝8.1Hz，1H)，7.72(t，J＝7.7Hz，1H)，7.54(t，J＝7.5Hz，1H)，7.38(d，J＝8.4Hz，1H)，4.28(dd，J＝11.1，4.8Hz，2H)，4.21-4.12(m，2H)，3.98(s，2H)，3.24(p，J＝4.5Hz，1H).

2-(2-喹啉基)丙二醛(23)

化合物22(200mg，0.985mmol)溶于DMSO(10mL)和DCM(2mL)中，搅拌下一次性加入Et₃N(800mg，7.88mmol)。冷至0℃，分次加入吡啶三氧化硫(1.1g，6.9mmol)。搅拌2小时后，反应体系倒入水中，用二氯甲烷萃取。有机层干燥，浓缩，残余物用柱层析纯化，得到化合物23(78mg，40％).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.49(s，2H)，9.06(d，J＝9.3Hz，1H)，8.29(d，J＝9.3Hz，1H)，7.88-7.73(m，3H)，7.58(t，J＝7.2Hz，1H).

(E)-3-(二甲氨基)-2-(2-吡嗪基)丙烯醛(25)

将DMF(7mL)置于三口瓶中，搅拌，冷却至0℃后，缓慢滴加POCl₃(5g，32.61mmol)，加毕后继续搅拌30分钟。再滴加2-甲基吡嗪(993μL，10.87mmol)。之后将反应液升温至60℃，搅拌过夜。反应结束后，乙醇和碳酸钾水溶液，调节pH 7-8.用DCM萃取.得到的有机层干燥，浓缩，残留物用甲苯重结晶得到化合物25(938mg，49％).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.20(s，1H)，8.77(s，1H)，8.57(s，1H)，8.38(s，1H)，7.06(s，1H)，3.26(s，3H)，2.66(s，3H).

(S)-N-((3-(3-氟-4-(4-(2-喹啉基)-1H-吡唑1-基)苯基)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(24a)

按通法C，以化合物23为起始原料，过滤得白色固体，为化合物24a，收率64.5％yield。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ8.98(s，1H)，8.57(s，1H)，8.45(d，J＝8.3Hz，1H)，8.27(t，J＝5.2Hz，1H)，8.08-8.01(m，2H)，7.98(d，J＝8.1Hz，1H)，7.92(t，J＝8.8Hz，1H)，7.79(dd，J＝14.6，8.1Hz，2H)，7.58(t，J＝7.3Hz，1H)，7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，4.83-4.75(m，1H)，4.21(t，J＝8.8Hz，1H)，3.91-3.77(m，1H)，3.46(t，J＝5.0Hz，2H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.02，154.60，154.00，152.16，150.68，139.95，138.82，130.84，130.20，127.96，126.70，126.07，125.26，122.85，119.26，114.07，106.26，71.83，47.24，41.36，22.44.HRMS：Q-TOF：446.1630.

(S)-N-((3-(3-氟-4-(4-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(24b)

按通法C，以化合物25为起始原料，过滤得灰色固体，为化合物24b，收率57.6％。¹HNMR(400MHz，DMSO)δ9.14(s，1H)，8.89(s，1H)，8.62(s，1H)，8.49(d，J＝2.4Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.27(t，J＝5.6Hz，1H)，7.88(t，J＝8.8Hz，1H)，7.78(dd，J＝14，1.8Hz，1H)，7.51(d，J＝9.2Hz，1H)，4.79(m，1H)，4.20(t，J＝9.0Hz，1H)，3.81(t，J＝6.6Hz，1H)，3.45(t，J＝5.4Hz，2H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.01，154.60，153.97，152.15，146.79，144.27，142.34，141.74，139.32，130.19，125.26，122.74，121.48，114.03，106.21，71.81，47.22，41.36，22.41.HRMS：Q-TOF：397.1423.

(S)-N-((3-(3-氟-4-(4-(2-喹啉基)-1H-吡唑-1-基)苯基)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(24c)

按通法C，起始原料为2-(2-喹啉基)丙二醛，过滤得白色固体，为化合物24c收率，70％。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ9.47(s，1H)，9.11(s，1H)，8.63(s，1H)，8.27(s，1H)，8.12-8.04(m，2H)，7.92(t，J＝8.9Hz，1H)，7.83(dd，J＝22.1，9.8Hz，3H)，7.53(d，J＝8.6Hz，1H)，4.82-4.76(m，1H)，4.21(t，J＝8.9Hz，1H)，3.88-3.78(m，1H)，3.46(t，J＝5.2Hz，2H)，1.85(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.02，154.68，153.99，152.22，146.40，144.09，141.58，140.66，139.94，131.18，130.52，129.12，128.91，128.54，125.37，122.59，121.93，114.07，105.97，71.82，47.23，41.36，22.42.HRMS：Q-TOF：447.1586.

(S)-N-((3-(3-氟-4-(4-(2-硝基苯基)-1H-吡唑-1-基(苯基)-2-氧代5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(24d)

按通法C，以2-(2-硝基苯基)丙二醛，过滤得白色固体，为化合物24d，收率为68％。¹H NMR(400MHz，DMSO)δ8.42(s，1H)，8.25(t，J＝5.5Hz，1H)，7.95(d，J＝8.8Hz，2H)，7.85(t，J＝8.9Hz，1H)，7.75(m，3H)，7.58(m，1H)，7.50(d，J＝8.7Hz，1H)，4.83-4.72(m，1H)，4.19(t，J＝9.0Hz，1H)，3.87-3.74(m，1H)，3.45(t，J＝5.1Hz，2H)，1.84(s，3H).

¹³C NMR(101MHz，DMSO)δ170.00，154.50，153.98，152.05，148.32，139.67，138.83，132.67，131.22，130.05，128.38，125.17，123.88，122.71，118.28，114.08，106.24，71.81，47.22，41.35，22.41.HRMS：Q-TOF：440.1371.

实施例7 4-取代吡唑苯基恶唑烷酮类化合物的合成路线

试剂及反应条件：(a)吡啶-2-乙腈，DMF-DMA，reflux，12h；(b)水合肼，EtOH，回流，28h；(c)NaNO₂，HCl，CuCl，or HB_r，CuB_r，or HBF₄，H₂O，3h；(d)K₂CO₃，DMSO，4h；(e)Fe，NH₄Cl，EtOH，H₂O，60℃；(f)Cbz-Cl，K₂CO₃，DCM，过夜；(g)tBuOLi，(S)-1-乙酰胺-3-氯丙烷2-基乙酸酯，DCM，reflux，8h.

(E)-3-(二甲氨基)-2-(2-吡啶基)丙烯腈(25)

将2-吡啶乙腈(5g，42.3mmol mmol)溶于DMF-DMA(8.44mL 63.5mmol)中，加热回流约12小时。过量的DMF-DMA用旋转蒸发仪除去。残余物柱层析纯化得化合物25(5.3g，72％).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.34(d，J＝4.4Hz，1H)，8.06(s，1H)，7.58(t，J＝7.7Hz，1H)，7.39(d，J＝8.1Hz，1H)，6.98-6.91(m，1H)，3.31(s，6H).

4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-3-胺(26)

将化合物25(1.2g，6.9mmol)溶于乙醇(20mL)中，搅拌下滴加水合肼(0.67mL，13.9mmol)，加毕后加热回流28小时，蒸去溶剂，残余物用石油醚研磨，析出固体，过滤干燥得化合物26(1.05g，46％).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ11.78(br s，1H)，8.43(d，J＝4.8Hz，1H)，7.91(br s，1H)，7.66(t，J＝7.6Hz，1H)，7.55(d，J＝8Hz，1H)，7.00(t，J＝5.6Hz，1H)，5.96(br s，2H).

2-(3-氟-1H-吡唑-4-基)吡啶(27a)

化合物26(300mg，1.87mmol)加入盐酸水溶液中37％HCl(1mL)/H₂O(2mL)，搅拌不溶，冷至-5℃，搅拌下滴加NaNO₂(154mg，2.24mmol)水(1mL)溶液，2分钟滴加完成。30分钟后，用淀粉碘化钾试纸检验至弱阳性时为重氮化结束。搅拌下迅速加入冷却的氟硼酸溶液(0.59mL，3.74mmol)。反应体系控制在0℃以下。搅拌持续4小时。过滤去除固体，滤液用二氯甲烷萃取。有机层干燥，浓缩，得到化合27a(95mg，31％).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.81(s，1H)，8.64(d，J＝4.6Hz，1H)，8.36(s，1H)，8.02(d，J＝8.0Hz，1H)，7.84(t，J＝7.7Hz，1H)，7.32-7.24(m，1H).

2-(3-氯-1H-吡唑-4-基)吡啶(27b)

化合物26(300mg，1.87mmol)加入稀盐酸溶液中37％HCl(1mL)/H₂O(5mL)，搅拌，不溶，冷至-5℃，搅拌下滴加NaNO₂(154mg，2.24mmol)水(1mL)溶液，2分钟滴加完成。冷至室温后，冰浴冷却下用饱和碳酸钾调节pH为7-8后，用二氯甲烷萃取。有机层干燥，浓缩得化合物27b(85mg，25.4％).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.82(s，1H)，8.67(d，J＝4.6Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.00(d，J＝8.0Hz，1H)，7.39(t，J＝7.7Hz，1H)，7.23(m，1H).

2-(3-bromo-1H-pyrazol-4-yl)pyridine(27c)

化合物26(300mg，1.87mmol)加入氢溴酸溶液中37％HBr(1mL)/H₂O(5mL)，搅拌不溶，冷至-5℃，搅拌下滴加NaNO₂(155mg，2.25mmol)水(1mL)溶液，2分钟滴加完成。30分钟后，用淀粉碘化钾试纸检验至弱阳性时为重氮化结束。重氮化过程中，剧烈搅拌下，将CuBr(150.6mg，1.05mmol)溶于37％HBr(0.21mL)溶液中，反应体系维持在60℃。将已重氮化好的混合物加入该搅拌和加热中的CuBr体系，3分钟内加毕。继续搅拌4小时。冷至室温后，冰浴冷却下用饱和碳酸钾调节pH为7-8后，用二氯甲烷萃取。有机层干燥，浓缩得化合物27c(110mg，26％).¹H NMR(400MHz，DMSO)δ13.56(s，1H)，8.62(t，J＝17.2Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.03-7.75(m，2H)，7.34(dd，J＝8.5，3.9Hz，1H).

化合物28的合成步骤(通法G)

化合物27(0.446mmol)溶于DMSO(4mL)中，室温搅拌下一次性加入K₂CO₃(0.67mmol)，加毕后再搅拌3分钟，接着加入1，2-二氟-4-硝基苯(0.446mmol)。室温搅拌反应体系5小时，用CM/H₂O分液。有机层干燥、浓缩，残余物用柱层析纯化得化合物28.

2-(3-氟-1-(2-氟-4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)吡啶(28a)

按通法G，以化合物27a为原料得化合物28a，收率82％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.75(s，1H)，8.69-8.63(m，1H)，8.26(t，J＝8.2Hz，1H)，8.19(d，J＝9.8Hz，2H)，7.97(d，J＝8.0Hz，1H)，7.79(t，J＝7.8Hz，1H)，7.27(d，J＝7.0Hz，1H).

2-(3-氯-1-(2-氟-4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)吡啶(28b)

按通法G，以化合物27b为起始原料得到28b，收率为86％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.86(s，1H)，8.68(s，1H)，8.26(t，J＝8.2Hz，1H)，8.19(d，J＝9.8Hz，2H)，8.02(s，1H)，7.85(s，1H)，7.31(s，1H).

2-(3-溴-1-(2-氟-4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)吡啶(28c)

按通法G，以化合物27c为起始原料得化合物28c，收率为89％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.74(s，1H)，8.67(s，1H)，8.28(t，J＝8.1Hz，1H)，8.19(d，J＝10.3Hz，2H)，8.04(d，J＝8.0Hz，1H)，7.83(t，J＝7.7Hz，1H)，7.35-7.28(m，1H).

3-氟-4-(3-氟-4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-1-基)苯胺(29a)

按通法D，以化合物28a为原料，得到油状化合物37a，粗产品收率为85％。

4-(3-氯-4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-1-基)-3-氟苯胺(29b)

按通法D，以化合物28b为起始原料，得油状化合物37b，粗产品收率为89％.

4-(3-溴-4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-1-基)-3-氟苯胺(29c)

按通法D，以化合物28c为起始原料，得油状化合物37c，粗产品收率为91％。

3-氟-4-(3-氟-4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-1-基)苯基碳酸苄酯(30a)

按通法E，以化合物29a为原料，粗产品用乙醇重结晶后得到化合物30a，收率67％。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.63(d，J＝4.4Hz，1H)，8.52(s，1H)，7.96(d，J＝8.0Hz，1H)，7.77(t，J＝8.4Hz，2H)，7.63(d，J＝13.4Hz，1H)，7.38(dd，J＝16.6，8.4Hz，5H)，7.24-7.19(m，1H)，7.08(d，J＝8.7Hz，1H)，6.98(s，1H)，5.22(s，2H).

4-(3-氯-4-(2-吡啶基)-1H吡唑-1-基)-3-氟苯基碳酸苄酯(30b)

按通法E，以化合物29b为起始原料，粗产品用乙醇重结晶后得到化合物30b(71％).

4-(3-溴-4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-1-基)-3-氟苯基碳酸苄酯(30c)

按通法E，以化合物29c为起始原料，粗产品用乙醇重结晶后得到化合物30c，收率为70％。

(S)-N-((3-(3-氟-4-(3-氟-4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-1-基)苯基)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(31a)

按通法F，以化合物30a为起始原料得白色固体31a，收率为36.5％。¹HNMR(400MHz，DMSO)δ8.68(s，1H)，8.65(d，J＝4.6Hz，1H)，8.26(t，J＝5.2Hz，1H)，7.92(s，2H)，7.85(t，J＝8.8Hz，1H)，7.77(d，J＝13.8Hz，1H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，7.35(d，J＝5.5Hz，1H)，4.77(d，J＝6.2Hz，1H)，4.19(t，J＝9.1Hz，1H)，3.84-3.78(m，1H)，3.44(t，J＝5.0Hz，2H)，1.84(s，3H).

(S)-N-((3-(4-(3-氯-4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-1-基)-3-氟苯)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(31b)

按通法F，以化合物30b为起始原料，得白色固体31b。

(S)-N-((3-(4-(3-溴-4-(2-吡啶基)-1H-吡唑-1-基)-3-氟苯基)-2-氧代-5-恶唑烷基)甲基)乙酰胺(31c)

按通法F，以化合物30c为起始原料，得白色固体31c，收率为26.1％.¹H NMR(400MHz，DMSO)δ8.73(s，1H)，8.65(d，J＝4.4Hz，1H)，8.26(s，1H)，7.89(s，2H)，7.85(t，J＝9.0Hz，1H)，7.77(d，J＝13.8Hz，1H)，7.50(d，J＝8.8Hz，1H)，7.35(s，1H)，4.82-4.76(m，1H)，4.19(t，J＝8.9Hz，1H)，3.85-3.78(m，1H)，3.44(t，J＝5.6Hz，2H)，1.84(s，3H).¹³C NMR(100MHz，DMSO)δ170.00，154.85，153.97，152.39，149.69，149.13，139.26，137.84，137.02，133.21，125.46，122.34，120.80，120.34，114.04，106.20，71.83，47.22，41.34，22.42.HRMS：Q-TOF：474.0578.

对比例1

按照CN 201210197568.8专利申请中公开的方法制备其中的化合物13f，本专利将其命名为SKLB1623，其中标红的原料就是这条路线的关键中间体，价格昂贵且合成难度大，SKLB1623作为药物原料，工业大生产存在一定缺陷。

以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。

试验例1

1.研究目的

评价新型抗耐药金葡菌化合物13a-c、18a-d、20、21、24a-d和31a-c对革兰氏阳性菌的体外抗菌活性。

2.实验菌株

标准株：化脓性链球菌ATCC19615

临床分离株34株，其中金葡菌MRSA 8株、金葡菌MSSA 3株、表葡菌2株、链球菌属2株、粪肠球菌2株、屎肠球菌1株、大肠埃希菌ESBLs+3株、肺炎克雷伯菌ESBL_s一2株、肺炎克雷伯菌ESBLs+3株和铜绿假单胞菌8株

3.培养基和孵育条件

菌株在MHA培养基，37℃孵育16-20h。

4.最低抑菌浓度(MIC)测定

采用CLSI推荐的微量稀释法，抗菌药物测定浓度范围64-0.25ug/ml。测定抗菌药物对化脓性链球菌最低抑菌浓度。

表1 4-或5-取代吡唑苯基恶唑烷酮类化合物的体外抗菌活性

化合物18b，18d，24b，24c的抗菌谱与化合物SKLB 1623以及对照药物利奈唑胺一样，均为抗G+菌化合物，属于窄谱抗菌素。其中，18b，18d，24b，24c抑菌范围在0.5-1ug/ml，SKLB1623和linezolid MIC范围是1-2ug/ml，与之相比，新化合物抗菌活性略强。

试验例2细胞水平毒性检测：

体外毒性实验：通过MTT方法检测SKLB1623对于人胚胎肾细胞293以及正常肝细胞L02的体外抑制率。

方法：

1.接种细胞：收集对数生长期细胞，调整细胞悬液浓度，以每孔1000一10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200μl.

2.培养细胞：同一般培养条件，培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。给予不同浓度的SKLB1623。

3.呈色：在24、48、72小时，每孔加含20μl MTT溶液(5mg/ml)的培养液200μl，继续培养1-4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加1501DMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。

4.比色：选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。需计算抑制率时，抑制率＝(对照-给药)/对照×100％。

5.实验结果：

表2 化合物于HEK-293细胞毒性(MTT assay)(72h)

表3 化合物于L02细胞毒性(MTT assay)(72h)

MTT重复实验表明，化合物18b，18d，24b，24c在50umol时对于293细胞24h，48h，72h均无显著体外抑制作用。与之相比，利奈唑胺体外50umol时72小时抑制率为40％。

此外，化合物18b，18d，24b，24c在50umol 24h、48h、72h对于lo2细胞无抑制。利奈唑胺体外50umol时72小时抑制率为60％。

以上结果提示，化合物18b，18d，24b，24c与利奈唑胺相比，具有更高的安全性。

综上所述，本发明所提供的化合物与现有的化合物比较能够有很好的抗耐药性和抗菌活性，多数改变结构的化合物的活性变好，但是毒性明显增强，无法用于药物使用，但是本发明的化合物不但疗效好，安全性也更好，这是具有创造性的改进。

Claims (4)

1.下式所示的噁唑烷酮类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于：所述化合物选自如下之一：

2.权利要求1所述噁唑烷酮类化合物在制备抗革兰氏阳性菌的药物中的用途。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述革兰氏阳性菌为链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌或屎肠球菌。

4.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述革兰氏阳性菌为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。