CN105334286A - 一种治疗风寒感冒药物的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种治疗风寒感冒药物的质量控制方法，本发明药物由柴胡、前胡、川芎、枳壳、羌活、独活、茯苓、桔梗、党参、甘草等十二味中药组成，具有发汗解表，散风祛湿的功效。本发明对处方中的川芎、枳壳、独活、甘草、薄荷进行定性鉴别，该方法具有较好的专属性、重现性及耐用性；对柚皮苷、新橙皮苷以及白花前胡甲素和白花前胡乙素进行定量分析，此法具有分离度高、分析时间短且操作简单的特点，能有效的提高生产效率，节约能源。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种组方药的质量控制。
背景技术
一种治疗风寒感冒的药物，由柴胡、前胡、川芎、枳壳、羌活、独活、茯苓、桔梗、党参、甘草、生姜、薄荷十二味中药组成，用于治疗因受凉、淋雨、气候突变等原因而引起的全身或呼吸道局部防御功能降低所致感冒，多发于秋冬季。其症状为浑身酸痛、鼻塞流涕、咳嗽有痰。
目前针对上述治疗风寒感冒药物的质量控制方法暂无相关报道。构建一种治疗风寒感冒药物的质量控制方法，为治疗风寒感冒药物提供了安全有效的质控方法，为药品的生产和临床应用提供了有效保障。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗风寒感冒药物的质量控制方法，用于该药物生产中的质量控制，具体方法包括鉴别和含量测定。
1.鉴别
（1）川芎的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，加甲醇20~50ml，超声处理10~30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10~20ml溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材0.5~1g，加甲醇20ml，超声10~30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。吸取上述溶液各2~5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-乙酸乙酯-冰醋酸（7~9:1~3:0.1）为展开剂，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（2）枳壳的薄层鉴别
取所述药物2~5g,加乙醇10~50ml，超声处理10~30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加70%乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取枳壳对照药材0.5~1g，同法制成对照药材溶液。再取柚皮苷对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述三种溶液各2~5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-氨试液（1~3:1~3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，在紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（3）独活的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，加乙醚30~50ml超声处理15~30min，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取独活对照药材0.5~1g，起同法制成对照药材溶液。以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯（7~9:3）为展开剂，展开，取出，晾干置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（4）甘草的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，加乙醚30~50ml，加热回流0.5~1小时，滤过，弃去滤液，残渣加甲醇30~50ml，加热回流0.5~1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，加水20ml洗涤1次，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1~2ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材，同法制成对照药材溶液。分别吸取上述溶液各2~5μl，点于同一硅胶G薄层板上。以三氯甲烷-丙酮-乙酸乙酯-甲醇（10:1~5:1~5:1）为展开剂，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（5）薄荷的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，置250ml烧瓶中，加水50~100ml，照挥发油测定方法试验，自测定器上端加水使充满刻度部分，并溢入烧瓶时为止，加乙酸乙酯1~2ml，连续回流，保持微沸0.5~1小时，放冷，将测定器中的液体放出，收集乙酸乙酯液，作为供试品溶液。另取薄荷对照药材0.5~1g，同法制成对照药材溶液。以甲苯-乙酸乙酯（19:1~3）为展开剂，吸取上述溶液各2~5μl；点于硅胶G薄层板上。喷5%香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.柚皮苷、新橙皮苷含量测定
（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(20~50:50~80)(用磷酸调pH=3)为流动相，检测波长为283nm，理论板数按柚皮苷对照品、新橙皮苷峰计算应不低于6000。
（2）对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品、新橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每lml含柚皮苷和新橙皮苷各80μg的溶液，即得。
（3）供试品溶液的制备：取本发明药物0.5～3g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇30~50ml，称定重量，超声处理10~30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5~10ml，置25ml量瓶中，加甲醇置刻度，摇匀，即得。
（4）测定法：精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5～20μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
3.白花前胡甲素和白花前胡乙素含量测定
（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1%磷酸水(40~57:43~60)为流动相，检测波长为321nm，理论板数按白花前胡甲素和白花前胡乙素峰计算应不低于6000。
（2）对照品溶液的制备：取白花前胡甲素和白花前胡乙素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每lml含白花前胡甲素25μg和白花前胡乙素4μg的溶液，即得。
（3）供试品溶液的制备：取本发明药物0.5～3g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇10~50ml，称定重量，超声处理10~30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
（4）测定法：精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5～20μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
有益效果：
本发明治疗风寒感冒药物的质量控制方法，对处方中的川芎、枳壳、独活、甘草、薄荷进行定性鉴别，该方法具有较好的专属性、重现性及耐用性；对柚皮苷、新橙皮苷以及白花前胡甲素和白花前胡乙素进行定量分析，此法具有分离度高、分析时间短且操作简单的特点，能有效的提高生产效率，节约能源。同时采用二极管阵列检测器，考察方法的专属性；采用不同仪器及不同色谱柱考察方法的耐用性。此方法专属性强，重现性好，结果准确。这种治疗风寒感冒药物的质量控制方法的定性、定量检测，为这种治疗风寒感冒药物的药物提供了安全有效的质控方法，为药品的生产和临床应用提供了有效保障。
附图说明
图1为本发明川芎薄层鉴别色谱图（紫外365nm）；
图2为本发明枳壳薄层鉴别色谱图（紫外365nm）；
图3为本发明独活薄层鉴别色谱图（紫外365nm）；
图4为本发明甘草薄层鉴别色谱图（日光）；
图5为本发明薄荷薄层鉴别色谱图（日光）；
图6为本发明柚皮苷对照品溶液高效液相色谱图；
图7为本发明新橙皮苷对照品溶液高效液相色谱图；
图8为本发明柚皮苷及新橙皮苷供试品溶液高效液相色谱图；
图9为本发明柚皮苷及新橙皮苷阴性样品溶液高效液相色谱图；
图10为本发明白花前胡甲素及白花前胡乙素对照品溶液高效液相色谱图；
图11为本发明白花前胡甲素及白花前胡乙素供试品溶液高效液相色谱图；
图12为本发明白花前胡甲素及白花前胡乙素阴性样品溶液高效液相色谱图。
具体实施方式：以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
具体实施方式
发明药物：以一种治疗风寒感冒药物及其制备方法实施例
中颗粒剂的制备方法制成颗粒剂。
1.鉴别
（1）川芎的薄层鉴别
取本品4g，研细，加甲醇20ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材1g，加甲醇10ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-乙酸乙酯-冰醋酸（9:1:0.1）为展开剂，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点。
（2）枳壳的薄层鉴别
取本品2g,加乙醇50ml，超声处理15分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加70%乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取枳壳对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取柚皮苷对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-氨试液（3:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，在紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点。
（3）独活的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，加乙醚30~50ml超声处理15~30min，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取独活对照药材0.5~1g，起同法制成对照药材溶液。以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯（7~9:3）为展开剂，展开，取出，晾干置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（4）甘草的薄层鉴别
取本品2g，研细，加乙醚30ml，加热回流1小时，滤过，弃去滤液，残渣加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，加水20ml洗涤1次，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材，同法制成对照药材溶液。分别吸取上述溶液各2μl，点于同一硅胶G薄层板上。以三氯甲烷-丙酮-乙酸乙酯-甲醇（10:1:5:1）为展开剂，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点。
（5）薄荷的薄层鉴别
取本品4g，研细，置250ml烧瓶中，加水100ml，照挥发油测定方法试验，自测定器上端加水使充满刻度部分，并溢入烧瓶时为止，加乙酸乙酯1ml，连续回流，保持微沸1小时，放冷，将测定器中的液体放出，收集乙酸乙酯液，作为供试品溶液。另取薄荷对照药材1g，同法制成对照药材溶液。以甲苯-乙酸乙酯（19:1）为展开剂，分别吸取上述溶液各5μl；点于硅胶G薄层板上。喷5%香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.柚皮苷、新橙皮苷含量测定
（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(20:80)(用磷酸调pH=3)为流动相，检测波长为283nm，理论板数按柚皮苷对照品、新橙皮苷峰计算应不低于6000。
（2）对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品、新橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每lml含柚皮苷和新橙皮苷各80μg的溶液，即得。
（3）供试品溶液的制备：取本发明药物0.1～3g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇30ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减轻的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，加甲醇置刻度，摇匀，即得。
（4）测定法：精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5～20μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。结果分别见附图6~9。
2.白花前胡甲素和白花前胡乙素含量测定
（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1%磷酸水(57:43)为流动相，检测波长为321nm，理论板数按白花前胡甲素和白花前胡乙素峰计算应不低于6000。
（2）对照品溶液的制备：取白花前胡甲素和白花前胡乙素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每lml含白花前胡甲素25μg和白花前胡乙素4μg的溶液，即得。
（3）供试品溶液的制备：取本发明药物0.1～3g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
（4）测定法：精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5～20μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。结果分别见附图10~12。
Claims (1)
1.一种治疗风寒感冒药物的质量控制方法，包括以下步骤：
（1）鉴别
①川芎的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，加甲醇20~50ml，超声处理10~30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10~20ml溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取川芎对照药材0.5~1g，加甲醇20ml，超声10~30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，吸取上述溶液各2~5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-乙酸乙酯-冰醋酸（7~9:1~3:0.1）为展开剂，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
②枳壳的薄层鉴别
取所述药物2~5g,加乙醇10~50ml，超声处理10~30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加70%乙醇lml使溶解，作为供试品溶液，另取枳壳对照药材0.5~1g，同法制成对照药材溶液，再取柚皮苷对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述三种溶液各2~5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-氨试液（1~3:1~3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，在紫外光(365nm)下检视；
供试品色谱中，在与对照品色谱及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
③独活的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，加乙醚30~50ml超声处理15~30min，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液，另取独活对照药材0.5~1g，起同法制成对照药材溶液，以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯（7~9:3）为展开剂，展开，取出，晾干置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
④甘草的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，加乙醚30~50ml，加热回流0.5~1小时，滤过，弃去滤液，残渣加甲醇30~50ml，加热回流0.5~1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，加水20ml洗涤1次，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1~2ml使溶解，作为供试品溶液，另取甘草对照药材，同法制成对照药材溶液，分别吸取上述溶液各2~5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-乙酸乙酯-甲醇（10:1~5:1~5:1）为展开剂，以10%硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
⑤薄荷的薄层鉴别
取所述药物2~5g，研细，置250ml烧瓶中，加水50~100ml，照挥发油测定方法试验，自测定器上端加水使充满刻度部分，并溢入烧瓶时为止，加乙酸乙酯1~2ml，连续回流，保持微沸0.5~1小时，放冷，将测定器中的液体放出，收集乙酸乙酯液，作为供试品溶液，另取薄荷对照药材0.5~1g，同法制成对照药材溶液；
以甲苯-乙酸乙酯（19:1~3）为展开剂，吸取上述溶液各2~5μl，点于硅胶G薄层板上，喷5%香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
（2）柚皮苷、新橙皮苷含量测定
①色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(20~50:50~80)(用磷酸调pH=3)为流动相，检测波长为283nm，理论板数按柚皮苷对照品、新橙皮苷峰计算应不低于6000；
②对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品、新橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每lml含柚皮苷和新橙皮苷各80μg的溶液，即得；
③供试品溶液的制备：取本发明药物0.5～3g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇30~50ml，称定重量，超声处理10~30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5~10ml，置25ml量瓶中，加甲醇置刻度，摇匀，即得；
④测定法：精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5～20μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得；
（3）白花前胡甲素和白花前胡乙素含量测定
①色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.1%磷酸水(40~57:43~60)为流动相，检测波长为321nm，理论板数按白花前胡甲素和白花前胡乙素峰计算应不低于6000；
②对照品溶液的制备：取白花前胡甲素和白花前胡乙素对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每lml含白花前胡甲素25μg和白花前胡乙素4μg的溶液，即得；
③供试品溶液的制备：取本发明药物0.5～3g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇10~50ml，称定重量，超声处理10~30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；
④测定法：精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5～20μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
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