CN105315204A

CN105315204A - 7-氨基-1,4-二氢异喹啉-3(2h)-酮衍生物及其合成方法和用途

Info

Publication number: CN105315204A
Application number: CN201410315653.9A
Authority: CN
Inventors: 蒋玉仁; 赵雄杰; 邓友超; 王宗成; 汪金连
Original assignee: Central South University
Current assignee: Central South University
Priority date: 2014-07-04
Filing date: 2014-07-04
Publication date: 2016-02-10
Anticipated expiration: 2034-07-04
Also published as: CN105315204B

Abstract

7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物及其合成方法和用途，本发明属药物技术领域，涉及通式(I)为：X为(CH₂)_n-1CO，n＝1-10；或NH(CH₂)_n-2CO，n＝2-10；或NHCO(CH₂)_n-3CO，n＝3-10；Y为CO(CH₂)_n-1，n＝1-10；或CO(CH₂)_n-2NH，n＝2-10；或CO(CH₂)_n-3CONH，n＝3-10；R₁，R₂，R₃，R₄，R₅，R₆，R₇，R₈，R₉，R₁₀为不同取代基的7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮的化合物及其合成方法在医学上的应用。本发明公开了这些化合物结构和合成方法及体外乙酰胆碱酯酶抑制活性，可进一步开发成为治疗阿尔兹海默症的新药。

Description

7-氨基-1,4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物及其合成方法和用途

技术领域

本发明属药物技术领域，涉及一类结构新颖的7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物以及其合成方法和在医学上的应用。

背景技术

阿尔兹海默症(Alzheimer’sdisease，AD)又称早老性痴呆症，目前已成为老年人群最为常见的痴呆类型，在解剖与临床事件中所占的比例达到50％-56％，也是目前在世界范围内导致老年人死亡的一大重要原因。阿尔兹海默症是一种神经退行性疾病，目前已超过3.5亿人口罹患该病，并在确诊后3到9年的时间内会发生死亡。年龄增长是导致患病最主要的因素，65岁以上的老年人每增长5岁，其发病率增大一倍，85岁以上的老年人发病率高达1/3。

目前，基于不同角度，关于AD的发病机制提出了很多假说，其中包括胆碱能假说、β-样淀粉蛋白沉积说、自由基损伤假说、Tau蛋白过度磷酸化假说、Ca²⁺离子失衡假说、基因错义突变假说、雌激素水平下降假说和炎症反应假说等。由于AD病人的突触间隙乙酰胆碱的浓度下降较为明显，胆碱能神经系统异常导致80％AD病人胆碱能系统神经受损，因而乙酰胆碱酯酶抑制剂得到较好的发展。目前成功上市了乙酰胆碱酯酶抑制剂有包括他克林(tacrine，)、多奈哌齐(donepezil，)、利伐斯的明(rivastigmine，)、加兰他敏(galanthamine，)和石杉碱甲(huperzineA，)。乙酰胆碱酯酶抑制剂主要用于治疗轻、中度AD，其中多奈哌齐还能治疗重度AD。但由于上述乙酰胆碱酯酶只能减轻AD症状，且持续单一用药会带来疗效下降及副作用增加的后果，所以进一步发现和开发新型高效的乙酰胆碱酯酶抑制剂对阿尔兹海默症的治疗具有意义。

2006年，美国专利US2006/0135557中公开了一种异喹啉-1，3，4-三酮类化合物及其合成方法和在医学上的应用，对含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)具有抑制活性，能延缓细胞的凋亡，可开发为用于神经性退行性疾病的治疗，特别是作为治疗阿尔兹海默症、中风及局部缺血性损伤的药物，但该类化合物对Caspase抑制活性低，其IC₅₀值在80mM以上，另外也未公开这类化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。2006年，中国专利CN101356159A公开了异喹啉-1，3(2H，4H)-二酮类、1-硫代-1，4-二氢-2H-异喹啉-3-酮类和1，4-二氢-3(2H)-异喹啉酮类化合物以及其制备方法和在医学上的应用，对激酶具有抑制活性，可以开发为治疗癌症的药物，但也未公开这类化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。2011年，中国专利CN101550103B公开了一种1，2，3，4-四氢异喹啉化合物及其盐、其制备方法和在医学上的应用，该类化合物对乙酰胆碱酯酶具有抑制活性，可进一步研制开发为治疗阿尔茨海默症的新型药物，但该类化合物的活性不太高，对乙酰胆碱酯酶抑制的IC₅₀值在7.5nM以上。

本发明提供了一系列7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物，具有三段式芳香结构，结构新颖，对乙酰胆碱酯酶的抑制活性高，IC₅₀值达到pM级，可进一步开发为治疗阿尔茨海默症的新型高效药物。

发明内容

本发明的目的是提供一系列具有良好的乙酰胆碱酯酶抑制活性的新型7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物，可作为治疗阿尔茨海默症的药物，具体涉及一类三段式芳香结构的7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮类衍生物。

本发明的另一目的为提供上述具有二段式芳香结构特点的7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮类衍生物的制备方法。

本发明合成了具有通式(I)的化合物。

X为(CH₂)_n-1CO，n＝1-10；或NH(CH₂)_n-2CO，n＝2-10；或NHCO(CH₂)_n-3CO，n＝3-10；

Y为CO(CH₂)_n-1，n＝1-10；或CO(CH₂)_n-2NH，n＝2-10；或CO(CH₂)_n-3CONH，n＝3-10；

R₁，R₂，R₃，R₄，R₅，R₆，R₇，R₈，R₉，R₁₀为各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、CN、NO₂、CF₃、OCF₃、SCF₃、OH、SH、NH₂、COOR、R、OR、SR、NHR、NR₂、OCOR、SCOR、NHCOR，其中R为C_1-6的直链烷基、支链烷基或脂环烷基或苯基。

式(I)中的各类基团可以用生物电子等排体或者同系列基团进行替换。

本发明的新型7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物的制备方法，其特征是采用茚为原料，经过氧甲酸氧化并水解、硝化、肟化、贝克曼重排及硝基还原得到7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮，再与酰氯(II)反应得到相应的N-酰基化合物，最后内酰胺结构的N原子再与对应酰氯(III)反应得到相应的产物。

所述的酰氯(II)具有通式(II)的结构：

式(II)中，X为(CH₂)_n-1CO，n＝1-10；或NH(CH₂)_n-2CO，n＝2-10；或NHCO(CH₂)_n-3CO，n＝3-10；

R₁，R₂，R₃，R₄，R₅为各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、CN、NO₂、CF₃、OCF₃、SCF₃、OH、SH、NH₂、COOR、R、OR、SR、NHR、NRR、OCOR、SCOR、NHCOR，其中R为C_1-6的直链烷基、支链烷基或脂环烷基或苯基。

所述的酰氯(III)具有通式(III)的结构：

式(III)中Y为CO(CH₂)_n-1，n＝1-10；或CO(CH₂)_n-2NH，n＝2-10；或CO(CH₂)_n-3CONH，n＝3-10；

R₆，R₇，R₈，R₉，R₁₀为各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、CN、NO₂、CF₃、OCF₃、SCF₃、OH、SH、NH₂、COOR、R、OR、SR、NHR、NRR、OCOR、SCOR、NHCOR，其中R为C_1-6的直链烷基、支链烷基或脂环烷基或苯基。

具体反应步骤为：

本发明所涉及的新型化合物通过体外乙酰胆碱酯酶抑制活性实验的药效学研究，结果显示所述化合物具有良好的乙酰胆碱酯酶抑制活性，可进一步研制开发成为治疗阿尔兹海默症的新型药物。

具体实施方法

以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。

实施例1

2-N-苯甲酰基-7-N-苯甲酰基氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₁)的制备

(1)2-茚酮的制备(IV)

在配有温度计和恒压滴液漏斗的250ml三颈瓶中加入140ml88％甲酸及28ml30％过氧化氢，水浴温度控制为35-40℃。精确量取26ml90％茚经滴液漏斗往瓶中缓慢滴加，边滴加边搅拌，在2小时后滴加完毕，用10ml甲酸洗涤滴液漏斗，并在35℃条件下继续搅拌20分钟。随后在25℃条件下搅拌7小时。反应结束后，反应体系中的多余的甲酸经旋转蒸发仪蒸发(35mmHg/35-40℃)。旋转蒸发后的余液冷却后会有白色固体析出，下步使用之前可以稍微加热使其液化，便于加液。在500ml三颈瓶上装上蒸馏装置，瓶中加入300ml7％硫酸(V/V)，加热至沸腾后慢慢加入上述余液，边加边蒸，适时加入水，保证水蒸气蒸馏，水量维持在240-280ml左右。馏液为乳白色液体，经冷却有白色针状晶体析出。蒸馏反应所需时间大约为6小时。收集的馏液在10℃下的温度下冷却12小时，随后过滤得白色晶体。真空常温干燥12小时，得15g产品，产率56.2％，熔点为57-58℃。

(2)5-硝基-2-茚酮的制备(V)

在250ml单颈瓶中加入5.6g2-茚酮和40ml三氯甲烷，量取13ml95％发烟硝酸，将两者置于低温浴槽降温至-20℃以下。往冷却好了的2-茚酮溶液中缓慢加入冷却的发烟硝酸，反应体系始终保持剧烈搅拌，滴加过程持续40分钟，滴加完毕后使用TLC跟踪(展开剂：三氯甲烷∶甲醇＝100∶1，产物R_f＝0.64，2-茚酮的R_f＝0.79)。继续在-20℃下反应20分钟后原料反应完全。用60ml10％氢氧化钠冰水混合溶液淬灭反应。反应体系在分液漏斗中呈现两层，上层经三氯甲烷(3×30ml)萃取后，合并有机相，并经饱和食盐水水洗至中性。有机相中有机溶剂经旋转蒸发仪蒸发得黄色固体。使用乙酸乙酯与环己烷重结晶。得到的溶液经冷却得到红褐色晶体，过滤得3.8g5-硝基-2-茚酮，产率49.5％，熔点为141-143℃。

(3)5-硝基-2-茚酮肟的制备(VI)

于室温下，用20ml吡啶溶解4g5-硝基-2-茚酮，溶液颜色呈黑褐色。往体系中加入2.16g羟胺、1.6ml水和5ml无水乙醇。反应体系在室温下搅拌3小时，待反应结束后往体系中加入过量的水，并继续搅拌30分钟。反应得到的悬浮溶液经过滤得到砖红色滤饼。用水多次洗涤滤饼至颜色不再变浅。滤饼经60％乙醇水溶液重结晶，并干燥得3.2g5-硝基-2-茚酮肟，产率72.7％，熔点为171-173℃。

(4)7-硝基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮的制备(VII)

称量2.8g50℃真空干燥过夜后的5-硝基-2-茚酮肟晶体溶于80ml无水三氯甲烷中，反应体系置于低温反应釜中降温至-20℃。在剧烈搅拌的条件下，往已降温的体系中缓慢加入3.07g五氯化磷，控制体系内的温度低于-18℃，加完后保持该温度搅拌20分钟。随后将反应装置转移至室温条件下反应2小时。反应结束时，用80ml0-5℃的水停止反应，并用冷却的10％氢氧化钠溶液调节pH值约等于7。反应体系分层，上层水相用三氯甲烷(3×30ml)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(2×80ml)。有机相用无水硫酸镁干燥并用活性炭过夜脱色。经乙酸乙酯洗脱柱层析，得到890mg黄褐色胶粘状7-硝基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮，产率31.8％。

(5)7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮的制备(VIII)

往配有机械搅拌装置、温度计和回流冷凝管100ml三颈瓶中加入5g还原铁粉、0.9ml冰乙酸和15ml水，加热至沸腾并保持10分钟。随后将三颈瓶冷却至室温，往其中加入800mg6-硝基-1，2，3，4-四氢异喹啉-2-酮的乙醇溶液(20ml)。反应在65℃水浴条件下避光回流3小时。将温热的7ml10％碳酸钠溶液倒于反应体系中使反应停止。反应体系趁热过滤，滤液中加入少量的锌粉保持还原氛围，并经旋转蒸发得固体。旋干所得混合物经多次无水乙醇带水，并最后使用无水三氯甲烷带水处理，得665mg7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮，产率98.5％。

(6)7-N-苯甲酰基氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮的制备(IX₁)

600mgVIII用60ml无水三氯甲烷，并加入400mg无水碳酸钾，于0℃下搅拌。待体系温度稳定在0℃后，往体系中滴加溶有0.4ml苯甲酰氯的10ml三氯甲烷溶液。维持反应4小时。反应的淬灭使用等体积26％氨水洗涤，上层氨水相用三氯甲烷(2×40ml)萃取，合并三氯甲烷相，饱和食盐水水洗至中性。有机相用无水硫酸镁充分干燥。经过滤后有机溶剂经旋转蒸发除去，得到940mg化合物IX₁，产率95.4％。

(7)2-N-苯甲酰基-7-N-苯甲酰基氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮的制备(I₁)

于室温条件下，取70mgIX₁用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经恒压滴液漏斗滴加至反应体系中。反应体系升温至100℃反应2小时。反应结束后，过滤掉生成的三乙胺盐酸盐。滤液经减压蒸馏蒸除溶剂二噁烷，并用20ml三氯甲烷溶解残留物。用等体积26％氨水洗涤有机相，上层氨水相用三氯甲烷萃取(2×10ml)，合并有机相。有机相经干燥、过滤后，旋转蒸发掉三氯甲烷，残留物经柱层析过柱，用1∶1乙酸乙酯/环己烷洗脱，得到80mg黄色粉末产物，产率为82.2％，熔点为183-190℃。

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ7.91(d，J＝8.1，2H，Ar-H)，7.81(s，1H，CO-NH-Ar)，7.69-7.26(m，11H，Ar-H)，4.98(d，J＝9.6Hz，2H，Ar-CH₂-N)，3.79(d，J＝13.5Hz，2H，Ar-CH₂-CO).

实施例2

2-N-(3’-氯苯甲酰基)-7-N-苯甲酰基氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₂)的制备

于室温条件下，取70mgIX₁用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间氯苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到40mg粘稠状黄色产物，产率为39.5％。

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.93(d，J＝4.6Hz，3H，Ar-H)，7.86-7.68(s，1H，CO-NH-Ar)，7.63-7.24(m，9H，Ar-H)，4.97(d，J＝10.3Hz，2H，Ar-CH₂-N)，3.79(d，J＝14.5Hz，2H，Ar-CH₂-CO)

实施例3

2-N-(3’-甲基苯甲酰基)-7-N-苯甲酰基氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₃)的制备

于室温条件下，取70mgIX₁用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间甲基苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到40mg粘稠状黄褐色产物，产率为39.6％。

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.95-7.84(m，2H，Ar-H)，7.79(s，1H，CO-NH-Ar)，7.79-7.49(m，4H，Ar-H)，7.45-7.29(m，4H，Ar-H)，7.16(d，J＝7.5Hz，2H，Ar-H)，4.96(d，J＝8.7Hz，2H，Ar-CH₂-N)，3.78(d，J＝14.1Hz，2H，Ar-CH₂-CO)，2.42(s，3H，Ar-CH₃).

实施例4

2-N-(2’-邻甲氧基苯甲酰基)-7-N-苯甲酰基氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₄)的制备

于室温条件下，取70mgIX₁用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml邻甲氧基苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到80mg粘稠状黄褐色产物，产率为76.0％。

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.94-7.87(m，2H，Ar-H)，7.71(s，1H，CO-NH-Ar)，7.66-7.48(m，3H，Ar-H)，7.45-7.32(m，3H，Ar-H)，7.06-6.96(m，2H，Ar-H)，6.85(d，J＝8.3Hz，1H，Ar-H)，5.02(d，J＝13.6Hz，lH，Ar-CH₂-N)，3.76(d，J＝12Hz1H，Ar-CH₂-CO)，3.66(s，3H，Ar-O-CH₃).

实施例5

2-N-苯甲酰基-7-N-(3’-氯苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₅)的制备

(1)7-N-(3’-氯苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(IX₂)的制备

600mgVIII用60ml无水三氯甲烷溶解，并加入400mg无水碳酸钾，于0℃下搅拌。待体系温度稳定在0℃后，往体系中滴加溶有0.4ml间氯苯甲酰氯的10ml三氯甲烷溶液。按IX₁制备方法得到950mg化合物IX₂，产率85.4％。

(2)2-N-苯甲酰基-7-N-(3’-氯苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₅)的制备

于室温条件下，取70mgIX₂用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到80mg黄色粉末状产物，产率为84.9％，熔点为179-180℃。

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ7.85(s，1H，Ar-H)7.62(s，1H，CO-NH-Ar)，7.62-7.34(m，12H，Ar-H)，4.98(d，J＝4.9Hz，2H，Ar-CH₂-N)，3.66(d，J＝5.2Hz，2H，Ar-CH₂-CO).

实施例6

2-N-(3’-氯苯甲酰基)-7-N-(3’-氯苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₆)的制备

于室温条件下，取70mgIX₂用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间氯苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到50mg粘稠状黄褐色产物，产率为48.9％。

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ8.09(s，1H，Ar-H)，7.82(s，1H，CO-NH-Ar)，7.59-7.51(m，4H，Ar-H)，7.49-7.44(m，2H，Ar-H)，7.41(dd，J＝7.7，1.4Hz，2H，Ar-H)，7.38-7.30(m，2H，Ar-H)，4.96(d，J＝2.6Hz，2H，Ar-CH₂-N)，3.78(d，J＝7.7Hz，2H，Ar-CH₂-CO).

实施例7

2-N-(3’-甲基苯甲酰基)-7-N-(3’-氯苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₇)的制备

于室温条件下，取70mgIX₂用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间甲基苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到60mg黄色粉末状产物，产率为61.5％，熔点为160-168℃。

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.95(s，1H，Ar-H)，7.89(s，1H，CO-NH-Ar)，7.78(m，2H，Ar-H)，7.56(td，J＝8.1，2.0Hz，2H，Ar-H)，7.51-7.43(m，2H，Ar-H)，7.40(s，1H，Ar-H)，7.39-7.28(m，3H，Ar-H)，4.96(d，J＝6.5Hz，2H，Ar-CH₂-N)，3.78(d，J＝12.1Hz，2H，Ar-CH₂-CO)，2.38(s，3H，Ar-CH₃).

实施例8

2-N-(2’-邻甲氧基苯甲酰基)-7-N-(3’-氯苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₈)的制备

于室温条件下，取70mgIX₂用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml邻甲氧基苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到50mg片状晶体产物，产率为49.4％，熔点为85-90℃。

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ7.98(d，J＝11.7Hz，1H，Ar-H)，7.89(s，1H，CO-NH-Ar)，7.80-7.67(m，2H，Ar-H)，7.61(d，J＝2.0Hz，1H，Ar-H)7.59-7.52(m，1H，Ar-H)，7.49-7.33(m，4H，Ar-H)，7.01(t，J＝7.5Hz，1H，Ar-H)，6.85(d，J＝8.3Hz，1H，Ar-H)，5.07(d，J＝3.8Hz，2H，Ar-CH₂-N))，3.74(d，J＝12.3Hz，2H，Ar-CH₂-CO)，3.66(s，3H，Ar-O-CH₃).

实施例9

2-N-(3’-氯苯甲酰基)-7-N-(3’-甲基苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₉)的制备

(1)7-N-(3’-甲基苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(IX₃)的制备

600mgVIII用60ml无水三氯甲烷溶解，并加入400mg无水碳酸钾，于0℃下搅拌。待体系温度稳定在0℃后，往体系中滴加溶有0.4ml间甲基苯甲酰氯的10ml三氯甲烷溶液。按IX₁制备方法得到980mg化合物IX₃，产率94.5％。

(2)2-N-苯甲酰基-7-N-(3’-氯苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₉)的制备

于室温条件下，取70mg化合物IX₃用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间氯苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到20mg粘稠状黄色产物，产率为19.1％。

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ8.04-7.76(m，2H，Ar-H)，7.71(s，1H，CO-NH-Ar)，7.63-7.51(m，3H，Ar-H)，7.47(dd，J＝9.9，5.2Hz，2H，Ar-H)，7.45-7.38(m，2H，Ar-H)，7.38-7.31(m，2H，Ar-H)，4.97(d，J＝6.6Hz，2H，Ar-CH₂-N)，3.78(d，J＝10.4Hz，2H，Ar-CH₂-CO)，2.46(s，3H，Ar-CH₃).

实施例10

2-N-(3’-甲基苯甲酰基)-7-N-(3’-甲基苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₁₀)的制备

于室温条件下，取上述70mg化合物IX₃用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间甲基苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到20mg粘稠状黄色产物，产率为20.1％。

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ8.01-7.84(m，2H，Ar-H)，7.79(s，1H，CO-NH-Ar)，7.76-7.64(m，3H，Ar-H)，7.57(dd，J＝8.2，2.0Hz，1H，Ar-H)，7.52-7.38(m，3H，Ar-H)，7.39-7.29(m，2H，Ar-H)，4.96(d，J＝6.6Hz，2H，Ar-CH₂-N)，3.78(d，J＝11.3Hz，2H，Ar-CH₂-CO)，2.47(s，3H，Ar-CH₃)，2.39(s，3H，Ar-CH₃).

实施例11

2-N-苯甲酰基-7-N-(2’-邻甲氧基苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₁₁)的制备

(1)7-N-(3’-甲基苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(IX₄)的制备

600mgVIII用60ml无水三氯甲烷溶解，并加入400mg无水碳酸钾，于0℃下搅拌。待体系温度稳定在0℃后，往体系中滴加溶有0.4ml邻甲氧基苯甲酰氯的10ml三氯甲烷溶液。按IX₁制备方法得到900mg化合物IX₄，产率82.1％。

(2)2-N-苯甲酰基-7-N-(3’-氯苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₁₁)的制备

于室温条件下，取70mgIX₄用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到30mg粘稠状黄色产物，产率为31.7％。

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ9.92(s，1H，CO-NH-Ar)，8.37-8.26(m，1H，Ar-H)，7.89-7.77(m，1H，Ar-H)，7.67-7.46(m，6H，Ar-H)，7.42(d，J＝7.8Hz，2H，Ar-H)，7.22-7.14(m，1H，Ar-H)，7.07(t，J＝8.9Hz，1H，Ar-H)，4.98(d，J＝12.6Hz，2H，Ar-CH₂-N)，4.12(s，3H，Ar-O-CH₃)，3.79(d，J＝15.8Hz，2H，Ar-CH₂-CO).

实施例12

2-N-(3’-氯苯甲酰基)-7-N-(2’-邻甲氧基苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₁₂)的制备

于室温条件下，取70mgIX₄用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间氯苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到40mg粘稠状黄色产物，产率为38.9％。

¹HNMR(500MHz，CDCl₃)δ9.93(s，1H，CO-NH-Ar)，8.35-8.28(m，1H，Ar-H)，7.84(dd，J＝7.5，1.7Hz，1H，Ar-H)，7.63-7.44(m，4H，Ar-H)，7.44-7.38(m，2H，Ar-H)，7.36-7.30(m，1H，Ar-H)，7.18(ddd，J＝9.5，2.3，1.4Hz，1H，Ar-H)，7.08(d，J＝8.4Hz，1H，Ar-H)，4.97(d，J＝15.7Hz，2H，Ar-CH₂-N)，4.13(s，3H，Ar-O-CH3)，3.82(d，J＝14.7Hz，2H，Ar-CH₂-CO)

实施例13

2-N-(3’-甲基苯甲酰基)-7-N-(2’-邻甲氧基苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₁₃)的制备

于室温条件下，取70mgIX₄用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间甲基苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到21mg黄色粉末状产物，产率为21.4％，熔点为150-154℃。

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ9.92(s，1H，CO-NH-Ar)，8.32(dd，J＝7.8，1.7Hz，1H，Ar-H)，7.92-7.77(m，2H，Ar-H)，7.66-7.49(m，2H，Ar-H)，7.40(d，J＝7.6Hz，1H，Ar-H)，7.38-7.29(m，3H，Ar-H)，7.24-7.14(m，1H，Ar-H)，7.08(d，J＝8.3Hz，1H，Ar-H)，4.97(d，J＝12.6Hz，2H，Ar-CH₂-N)，4.13(s，3H，Ar-O-CH3)，3.78(d，J＝15.6Hz，2H，Ar-CH₂-CO)，2.38(s，3H，Ar-CH₃).

实施例14

2-N-(2’-邻甲氧基苯甲酰基)-7-N-(2’-邻甲氧基苯甲酰基)氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮(I₁₄)的制备

于室温条件下，取70mgIX₄用10ml二噁烷溶解，并加入0.1ml三乙胺作为缚酸剂。将0.1ml间甲基苯甲酰氯溶于10ml二噁烷中，并经滴液漏斗滴加至反应体系中。按I₁制备方法，得到20mg粘稠状黄色产物，产率为19.7％。

¹HNMR(400MHz，CDCl₃)δ9.92(s，1H，CO-NH-Ar)，8.33(dd，J＝7.8，1.8Hz，1H，Ar-H)，7.88-7.30(m，5H，Ar-H)，7.27-6.82(m，5H，Ar-H)，5.08(d，J＝10.9Hz，2H，Ar-CH₂-N)，4.12(s，3H，Ar-O-CH3)，3.84(s，3H，Ar-O-CH₃)，3.72(d，J＝4.2Hz，2H，Ar-CH₂-CO).

化合物活性测试结果

乙酰胆碱酯酶抑制活性的测试方法是采用常规方法Ellman法(EllmanGL，CourtneyKD，FeatherstoneRM.Biochemicalpharmacology，1961，7：88.)。Ellman法主要依据的原理如下：乙酰胆碱酯酶可以水解硫代乙酰胆碱生成硫代胆碱与乙酸。硫代胆碱可以与5，5-二巯基-双(2-硝基苯甲酸)(dithiobisnitrobenzoate，巯基显色剂)反应生成对称三硝基苯(TNB，Sym-Trinitrobenzene)黄色化合物。可以依据生成的对称三硝基苯颜色的深浅来比色定量硫代胆碱，从而反映出乙酰胆碱酶活力。测试乙酰胆碱酯酶抑制活性所采用的T-CHE测试盒(50T/24样)从南京建成生物工程研究所购买，果蝇乙酰胆碱酯酶酶源(220U/g)从山东京蓬生物药物有限公司购买，阳性对照物盐酸多奈哌齐(M＝415.95)从大连美仑生物技术有限公司购买。纯酶经生理盐水稀释得到酶活力为0.375U/ml的纯酶稀释液，采用棱光722s可见分光光度计测定各管的光密度值。

测定步骤：用微量移液枪精确移取50μl已知浓度的待测化合物溶液与50μl纯酶稀释液，并混匀，置于37℃的恒温水浴槽中精确反应20分钟；然后加入500μl显色剂与500μl的底物，混匀，并在37℃的水浴槽中精确反应6分钟；再于室温条件下采用棱光722s可见分光光度计测定其412nm波长处的光密度值，与不加待测化合物的空白管比较计算得出的降低百分数即为酶抑制率。选择化合物的5个浓度测定其酶抑制率，并以该化合物摩尔浓度的负对数与酶抑制率进行线性回归，求得50％抑制时的摩尔浓度即为该化合物的IC₅₀值，以盐酸多奈哌齐为阳性对照。

本发明中化合物的乙酰胆碱酯酶抑制活性结果如下表(以盐酸多奈哌齐为阳性对照，单位：pM)。

Claims

1.7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物，其特征是具有通式(I)的结构。

R₁，R₂，R₃，R₄，R₅，R₆，R₇，R₈，R₉，R₁₀为各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、CN、NO₂、CF₃、OCF₃、SCF₃、OH、SH、NH₂、COOR、R、OR、SR、NHR、NRR、OCOR、SCOR、NHCOR，其中R和R为C_1-6的直链烷基、支链烷基或脂环基或苯基。

2.根据权利要求1所述的7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物，其特征是具有下述结构的化合物I₁～I₁₄。

3.权利要求1-15任一项所述的化合物用作乙酰胆碱酯酶抑制剂。

4.权利要求1-15任一项所述的化合物用作治疗阿尔兹海默症的药物。

5.根据权利要求1所述的7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮衍生物的制备方法，其特征是采用茚为原料，经过氧甲酸氧化并水解、硝化、肟化、贝克曼重排及硝基还原得到7-氨基-1，4-二氢异喹啉-3(2H)-酮，再与酰氯得到相应的N-酰基化合物，最后内酰胺结构的N原子再与对应酰氯反应得到相应的化合物。

其中：X为(CH₂)_n-1CO，n＝1-10；或NH(CH₂)_n-2CO，n＝2-10；或NHCO(CH₂)_n-3CO，n＝3-10；

R₁，R₂，R₃，R₄，R₅，R₆，R₇，R₈，R₉，R₁₀为各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、CN、NO₂、CF₃、OCF₃、SCF₃、OH、SH、NH₂、COOR、R、OR、SR、NHR、NRR、OCOR、SCOR、NHCOR，其中R和R为C_1-6的直链烷基或支链烷基或脂环基或苯基。

反应步骤为：