CN105311064A - 一种紫蘑菇提取物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种紫蘑菇提取物及其应用，所述紫蘑菇提取物具有很好的美白和抗衰老功效，可用于化妆品、保健食品和医药领域，尤其是可应用于化妆品中。

Description

一种紫蘑菇提取物及其应用

技术领域

本发明属于天然产物化学领域，尤其涉及一种紫蘑菇提取物及其应用。

背景技术

美白、抗衰老化妆品一直以来都是女性的追求和向往，也是美容界研究的永恒话题。近年来随着社会经济的发展和科学技术的进步，人们对化妆品的需求亦随之提高。

人类皮肤的颜色与皮肤中存在的色素种类和数量有关，黑素对皮肤颜色影响最大。黑素在表皮基底部的黑素细胞中形成。其过程为黑素细胞中的酪氨酸在酪氨酸酶的作用下生成多巴、多巴醌最终形成黑素。黑素转移至基底细胞中，随着表皮细胞的移行被带到表皮全层，最后随角化细胞的脱落而脱失。酪氨酸酶是黑素生成的关键酶，它控制着黑素的形成过程，其活性程度对色素的沉积起主要作用。

衰老又称老化，是生物生命活动进程中的必经阶段，是在正常状况下生物体发生机体功能性和器质性衰老的渐进过程。皮肤衰老主要有两种类型，一种是自然老化，一种是光老化。皮肤衰老是内源性因素和外源性因素共同作用的结果。其内源性因素主要由遗传基因和自由基对细胞的损伤等共同作用形成，外源性因素主要由太阳辐射产生的光老化，还包括化学品的危害和不良生活习惯等。皮肤衰老学说主要有遗传基因说、自由基说、神经内分泌功能减退说和交联学说、体细胞突变学说、蛋白质合成差误成灾说等。

传统的皮肤美白、抗衰老剂，往往采用化学性物质，这些化学物质虽然有快速达到美白、抗衰老之功效，但对皮肤有毒副作用，长期使用会引起接触性皮炎或引起永久脱色等不良作用。因此，天然产物在化妆品中的应用越来越得到人们的青睐。

紫蘑菇(Agaricusrubellus(Gill).Sacc.)，隶属于担子菌门(Basidiomycota)、伞菌目(Agaricales)、丝膜菌科(Cortinariaceae)、丝膜菌属(Cortinarius)，该属可列举的种主要包含紫红丝膜菌(Cortinariusrufo-olivaceus(Pers.)Fr.)、蓝丝膜菌(C.caerulescens)、白丝膜菌(C.albidus)和血红丝膜菌(C.cinnabarinus)等，本发明中，作为丝膜菌科、丝膜菌属的紫蘑菇(Agaricusrubellus(Gill).Sacc.)作为优选菌种进行研究。紫蘑菇，生长在内蒙古阿拉善盟贺兰山的原始森林中，其营养丰富，口感纯正，气味醇香，富含蛋白质、多种氨基酸、菌糖、脂肪、维生素及人体所需的钾、铁、钙、磷、镁等多种微量元素，它的部分营养成分，竟比大名鼎鼎的灵芝还高，被誉为″阿拉善山珍″。

目前紫蘑菇主要应用于食用、药用和色素应用上，具有一定的抗肿瘤、药理作用和保健作用。紫蘑菇目前的开发层次低，开发领域窄，资源并未得到充分利用，其药用价值及其它应用价值缺乏深入和全面的研究。目前未见有关于紫蘑菇提取物的美白、抗衰老的功效报道。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种紫蘑菇提取物及其应用，旨在将紫蘑菇提取物应用于皮肤外用剂中，以起到美容护肤的作用。

本发明的目的是这样实现的：

一种紫蘑菇提取物，通过将紫蘑菇粉碎后，加入有机溶剂提取，过滤，将滤液除去溶剂，用大孔树脂吸附，用有机溶剂洗脱后获得。

所述有机溶剂是指含有羟基或羰基等极性基团的有机溶剂，例如：甲酰胺、二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、四甲基乙二胺、三乙胺、三丁胺、乙酸、三氟乙酸、乙腈、甲酸甲酯、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、二甲亚砜、丙酮、甲乙酮、二氧六环、吡啶、四氢呋喃、甲醇、乙醇、三氯甲烷、丙三醇、丙二醇、丙烯二醇、异丙醇、正丁醇和乙醚等，中的一种或几种，其中优选乙醇水溶液。

在以乙醇水溶液为有机溶剂时，乙醇的浓度选用30-80％。

根据试验可知，紫蘑菇提取物在美白和抗衰老方面具有很好的功效，可以作为活性成分添加到化妆品配方中，这里所指的活性成分在某些情况下可以提供一种或一种以上的功效。

本发明中所述的活性成分还可以为泛醇、甘草酸二钾、尿囊素、烟酰胺、抗坏血酸磷酸酯钠、三色堇提取物、透明质酸钠、生育酚乙酸酯、十一碳烯酰基苯并氨酸等。此外，此类描述是为了便于理解，并不是使成分限于具体指出的应用或者所列出的应用。

紫蘑菇提取物可应用于皮肤外用剂、保健食品和医药，尤其是可应用于化妆品中，根据制剂的不同类型添加不同的用量。

所述皮肤外用剂组合物是通常用于皮肤外部的所有成分的统称概念，例如可以是化妆料组合物或药学组合物。所述化妆料组合物中可以是基础化妆料、面部妆容化妆料、身体用化妆料、头发护理用化妆料等，对其剂型无特殊限制，根据不同目的可合理选择。

所述化妆料组合物中根据剂型和目的的不同还含有不同的化妆品学层面允许的介质或基质赋形剂。

可以用于本发明皮肤外用剂组合物的化妆品、皮肤病学或药学上可接受的赋形剂可以为水相、油相、凝胶、水包蜡型乳液、水包油型乳液或油包水型乳液的形式。水相为一种或多种水溶性或分散性组分的混合物，其在室温下可以为液体、半固体或固体。赋形剂包括或可以为在水或水-醇赋形剂中的混悬液、分散液或溶液的形式，其可以含有增稠剂或凝胶剂。本领域技术人员可以基于本领域技术人员掌握的知识选择合适的产品形式，其中包含的组分。

所述的组合物可以包括水相，该水相可以含有水或水与至少一种亲水性有机溶剂的混合物，所述的亲水性有机溶剂诸如醇，尤其是含有2-5个碳原子的直链或支链低级一元醇，如乙醇或丙醇；多元醇，如丙二醇、山梨醇、甘油、泛醇或聚乙二醇及其混合物。

当发明的组合物为乳液形式时，该组合物还可以任选包含表面活性剂。

所述的组合物还可以包含成膜聚合物，如聚氨基甲酸酯、聚丙烯酸均聚物或共聚物、聚酯、基于烃的树脂和/或硅氧烷树脂。可以将聚合物溶于或分散于化妆品可接受的赋形剂中并且任选与增塑剂合并。

本发明的组合物还可以包含油相，所述的油相含有在室温(25℃)下为液体的油溶性或油分散性组分和/或在室温下为油状或蜡状的物质，如蜡、半固体、树胶及其混合物。该油相还可以含有有机溶剂。

通常在室温下为液体，合适的油性物质包括：来源于动物的基于烃的油，如全氢化角鲨烯；基于烃的植物油，如液体的C_4-10脂肪酸的甘油三酯类，例如庚酸或辛酸甘油三酯类，或油，例如向日葵油、玉米油、大豆油、葡萄籽油、蓖麻油、鳄梨油、辛酸/癸酸甘油三酯类、霍霍巴油；矿物或合成来源的直链或支链烃类，例如液体石蜡及其衍生物、凡士林；合成酯类和醚类，特别是脂肪醇的酯类，例如肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸2-乙基己酯、硬脂酸2-辛基十二烷基酯、异硬脂酸异硬脂醇酯；羟基化酯类，例如乳酸异硬脂醇酯、羟基硬脂酸辛酯、羟基硬脂酸辛酯、羟基硬脂酸辛基十二烷基酯、脂肪醇的庚酸酯类、辛酸酯类和癸酸脂类；多元醇酯类，例如丙二醇二辛酸酯、新戊二醇二庚酸酯、二甘醇二异壬酸酯和季戊四醇酯类；含有C_12-26的脂肪醇类，例如辛基十二烷醇、2-丁基辛醇、2-己基癸醇、2-十一烷基十五烷醇、油醇；基于部分烃的氟油和/或氟硅油，硅油，在室温下为液体或半固体的挥发性或非挥发性的直链或环状聚甲基硅氧烷，例如环状聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷，其任选包含苯基，例如苯基三甲基硅氧烷、硅氧烷及其混合物。

本发明的组合物可以进一步包含常用于化妆品领域中的任何组分。这些组分包括防腐剂、水相增稠剂(提取物生物聚合物、合成聚合物)和脂肪相增稠剂、芳香剂、亲水性和亲脂性活性剂及其混合物。

本发明的组合物还可以包含另外的颗粒相，所述的颗粒相可以为化妆品组合物中使用的颜料和/或珠光剂和/或填充剂。

颜料可以存在于组合物中，合适的无机颜料包括氧化钛、氧化锆和氧化铈以及氧化锌、氧化铁和铁蓝；合适的有机颜料包括钡、锶、钙和铝色淀和碳黑。

珠光剂可以存在于组合物中，合适的珠光剂包括涂覆了氧化钛、氧化铁或天然颜料的云母。

填充剂可以存在于组合物中，合适的填充剂包括滑石粉、二氧化硅、硬脂酸锌、云母、高岭土、尼龙粉末、聚乙烯粉末、特氟龙、淀粉、一氮化硼、共聚物微球，例如硅氧烷树脂微珠。

本发明组合物的油相可以包含一种或多种蜡、树胶或其混合物。蜡包括基于烃的蜡、氟蜡和/或硅氧烷蜡，并且可以来源于植物、矿物、动物和/或合成来源。合适的蜡包括蜂蜡、巴西棕榈蜡、小烛树蜡、石蜡、微晶蜡、地蜡；合成蜡包括聚乙烯蜡、含有C_16-45的硅氧烷蜡。树胶一般为聚二甲基硅氧烷或羧甲基纤维素钠或提取物类，并且半固体物质一般为基于烃的化合物，如羊毛脂及其衍生物。

可以将本发明的组合物配制成任何合适的产品形式。这类产品形式包括，但不限于气溶胶型喷雾剂、霜剂、乳液、固体、液体、分散体、泡沫、凝胶、化妆水、摩丝、软膏、粉剂、贴剂、润发油、溶液、手按泵型喷雾剂、棒状物、面膜和湿纸巾。可以将本发明的组合物通过本领域众所周知的各种方法便利地用于制备或作为化妆品、皮肤病学或药物局部施用产品。

本发明的皮肤外用剂组合物可以包括一种或多种下列成分：抗过敏剂、抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂、着色剂去色素剂、润肤剂、乳化剂、表皮脱落剂、成膜剂、香料、保湿剂、昆虫驱避剂、润滑剂、药物活性剂、增湿剂、耐光剂、防腐剂、护肤剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、维生素或其任意组合。

附图说明

图1是抑制斑马鱼黑色素产生实验的空白对照图；

图2是本发明提供的紫蘑菇30％乙醇提取部位抑制斑马鱼黑色素产生实验的效果图；

图3是本发明提供的紫蘑菇70％乙醇提取部位抑制斑马鱼黑色素产生实验的效果图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1紫蘑菇提取物的制备

25.0g紫蘑菇，粉碎后，加入500ml50％v/v乙醇，超声提取2小时，过滤后将滤液旋蒸除去乙醇和水，得到6.0g紫蘑菇粗提物，过大孔树脂，依次用30％、70％乙醇洗脱，分别收集洗脱液，减压脱除溶剂，得30％乙醇提取部位0.86g、70％乙醇提取部位0.34g。

实施例2紫蘑菇提取物的自由基清除作用研究

取上述制备的紫蘑菇粗提物、紫蘑菇30％乙醇提取部位、70％乙醇提取部位适量，分别用去离子水配制成水溶液，移取2mL于10mL具塞试管中，加人2mLDPPH乙醇溶液(2*10^-4mol/L)，充分混匀，室温静置，30分钟后用分光光度计测定517nm波长的吸光度A₅₁₇(以乙醇为参比)；同时测定2mLDPPH溶液与2mL乙醇混合后的吸光度A_c，以及2mL提取液与2mL乙醇溶液混合后的吸光度A₀。平行测定三次，取平均值，根据以下公式计算自由基清除率。

自由基清除率＝(1-(A₅₁₇-A₀)/A_c)*100％。

计算结果如表1所示。

表1

由表1可见，紫蘑菇粗提物、30％乙醇提取部位和70％乙醇提取部位均具有很强的清除自由基的能力，具有一定的抗衰老功效，其中30％乙醇提取部位清除自由基效果最佳，其样品IC₅₀＝0.046mg/ml。

实施例3紫蘑菇提取物的酪氨酸酶抑制作用研究

试验方法：取上述制备的紫蘑菇30％乙醇提取部位、70％乙醇提取部位分别配置成5mg/ml浓度的水溶液，测定其对酪氨酸酶活性的抑制作用，以测定其美白活性。测定步骤为：设立样品管，样品对照管，阳性对照，阴性对照。在样品管和样品对照管中各加入1ml不同浓度的样品溶液，阳性和阴性对照管以磷酸缓冲液代替。在样品管和阳性对照管中加入0.5ml酪氨酸酶溶液(酶活单位125u/ml)，样品对照和阴性对照管以0.5ml磷酸缓冲液(pH＝6.8)代替，振摇所有试管，使样品和酪氨酸酶充分混匀，37℃水槽孵育10分钟。加入2ml的0.03wt％酪氨酸溶液，反应10分钟，即刻在475nm处测定吸光度。

抑制率I(％)＝[1-(T-T₀)/(C-C₀)]×100％

式中：T₀：样品溶剂对照；

T：样品对照；

C：阳性对照；

C₀：阳性对照溶剂对照。

试验结果如表2所示：

表2

由表2中可以看出，紫蘑菇的70％乙醇部位具有一定的美白功效。

实施例4紫蘑菇提取物抑制斑马鱼黑色素产生实验

取上述制备的紫蘑菇30％乙醇提取部位和70％乙醇提取部位，用去离子水配制成10mg/L溶液，用于斑马鱼美白测试，斑马鱼的饲养与胚胎的收集，成年斑马鱼饲养于实验室循环水养殖系统中，28.5℃，光/暗周期为14/10小时，饲养用水经循环系统过滤并充分曝气，pH值保持8.0左右，每天喂食丰年虫三次，每周喂食6天。选择形态正常，个体较大和健康的性成熟斑马鱼，在孵化系统按雌雄比1：2进行配对饲养于15L10-15条玻璃水族箱中。在产卵前一天晚上22：00熄灯，次日早上8：00系统自动开灯，在光照刺激下开始产卵，收集胚胎。将收集的胚胎充分的清洗去除脏物后，在显微镜下挑选出健康发育正常的胚胎建立筛选化妆品美白活性物的斑马鱼模型：以96孔板作为试验容器，分别加入紫蘑菇30％乙醇提取部位和紫蘑菇70％乙醇提取部位溶液，同时设置空白对照组，按1个胚胎/孔随机分配到96孔板中。每天更换待测30％乙醇提取部位和紫蘑菇70％乙醇提取部位溶液暴露液并搅拌，以确保活性成分分布均匀。基于表型的色素沉着评估，观察活性物对斑马鱼的黑色素抑制效果，检测到的结果如表3所示。

表3

由表3中可以看出，紫蘑菇菌活性部位具有一定的抑制斑马鱼黑色素形成的作用，可用于美白皮肤外用剂。

实施例5含有紫蘑菇提取物的皮肤外用剂

取实施例1中得到的紫蘑菇提取物，用于皮肤外用剂的制备。所述皮肤外用剂优选为化妆品组合物，例如化妆水、精华液、乳霜等。所述紫蘑菇提取物在皮肤外用剂中的重量百分比是0.0001-1，优选0.01-1。以下是紫蘑菇提取物在皮肤外用剂中的具体应用的实施例。以下各表中″-″表示无添加。

实施例6含有紫蘑菇提取物的化妆水

取紫蘑菇提取物，用于制备具有抗衰老、美白作用的化妆水，所述化妆水含有的组分如表4所示：

表4

实施例7含有紫蘑菇提取物的精华液

取紫蘑菇提取物，用于制备具有抗衰老、美白作用的精华液，所述精华液含有的组分如表5所示：

表5

实施例8含有紫蘑菇提取物的乳液/霜

取紫蘑菇提取物，用于制备具有抗衰老、美白作用的乳液/霜，所述乳液/霜含有的组分如表6所示：

表6

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (11)

1.一种紫蘑菇提取物，其特征在于，通过将紫蘑菇粉碎后，加入有机溶剂提取，过滤，将滤液除去溶剂，用大孔树脂吸附后，以有机溶剂洗脱后得紫蘑菇提取物。

2.如权利要求1所述的紫蘑菇提取物，其特征在于，所述有机溶剂为乙醇。

3.如权利要求2所述的紫蘑菇提取物，其特征在于，通过将紫蘑菇粉碎后，加入50%乙醇，超声提取2小时，过滤，将滤液除去溶剂，用大孔树脂吸附后，依次用30%、70%乙醇洗脱，将洗脱液减压脱除溶剂后获得。

4.如权利要求1-3任一所述的紫蘑菇提取物具有抗衰老作用。

5.如权利要求1-3任一所述的紫蘑菇提取物具有美白作用。

6.如权利要求1-3任一所述的紫蘑菇提取物具有抑制酪氨酸酶活性。

7.一种含有紫蘑菇提取物作为有效成分的皮肤外用剂组合物。

8.如权利要求7所述的皮肤外用剂组合物，其特征在于，所述紫蘑菇提取物通过将紫蘑菇粉碎后，加入有机溶剂提取，过滤，将滤液除去溶剂，用大孔树脂吸附后，以有机溶剂洗脱后获得。

9.如权利要求8所述的皮肤外用剂组合物，其特征在于，所述紫蘑菇提取物通过将紫蘑菇粉碎后，加入50%乙醇，超声提取2小时，过滤，将滤液除去溶剂，用大孔树脂吸附后，依次用30%、70%乙醇洗脱，将洗脱液减压脱除溶剂后获得。

10.如权利要求8或9所述的皮肤外用剂组合物，其特征在于，所述紫蘑菇提取物在皮肤外用剂组合物中的重量百分比是0.0001-1。

11.如权利要求10所述的皮肤外用剂组合物，其特征在于，所述紫蘑菇提取物在皮肤外用剂组合物中的重量百分比是0.01-1。