CN105307668B - 包含环孢菌素的眼用纳米乳剂组合物和制备其的方法 - Google Patents

包含环孢菌素的眼用纳米乳剂组合物和制备其的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105307668B
CN105307668B CN201480029194.6A CN201480029194A CN105307668B CN 105307668 B CN105307668 B CN 105307668B CN 201480029194 A CN201480029194 A CN 201480029194A CN 105307668 B CN105307668 B CN 105307668B
Authority
CN
China
Prior art keywords
composition
amount
cyclosporin
eye
emulsifier
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201480029194.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105307668A (zh
Inventor
李俊晔
慎允宰
柳尚录
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Taejoon Pharm Co Ltd
Original Assignee
Taejoon Pharm Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Taejoon Pharm Co Ltd filed Critical Taejoon Pharm Co Ltd
Publication of CN105307668A publication Critical patent/CN105307668A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105307668B publication Critical patent/CN105307668B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
    • A61K38/13—Cyclosporins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/44—Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/113—Multiple emulsions, e.g. oil-in-water-in-oil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及眼用纳米乳剂组合物和通过混合环孢菌素、非水性溶剂、乳化剂和水性溶剂来制备其的方法以及使用其预防或治疗干眼综合征的方法，所述方法增加作为活性成分的环孢菌素的溶解度并改善所述眼用组合物的稳定性。本发明的眼用纳米乳剂组合物特征在于平均粒度为200nm或更小，优选100nm或更小，并且具有非常窄的颗粒分布。因此，灭菌过滤是可行的，改善了稳定性并在异物感和视觉障碍的临床改善中具有优异的效果，并因此本公开的眼用纳米乳剂组合物可有效用作眼用组合物。

Description

包含环孢菌素的眼用纳米乳剂组合物和制备其的方法
技术领域
本公开涉及眼用纳米乳剂组合物和制备其的方法(其通过混合环孢菌素、非水性溶剂、乳化剂和水性溶剂来增加作为活性成分的环孢菌素的溶解度并改善所述眼用组合物的稳定性)以及使用其预防或治疗眼部疾病的方法。
背景技术
免疫抑制药物是用于通过防止或抑制异常免疫反应性的免疫抑制疗法的药物。目前免疫抑制药物用作多种疾病(包括器官和组织移植后的移植排斥；炎性肠病，例如溃疡性结肠炎或克罗恩氏病；类风湿性关节炎；贝赫切特综合征；炎性或变应性皮肤病，例如银屑病或特应性皮炎；炎性或变应性呼吸性疾病，例如慢性阻塞性肺疾病或哮喘；系统性红斑狼疮；硬皮病；干燥综合征(Sjogren syndrome)和干眼综合征等)的治疗剂。
干燥综合征是外分泌腺的慢性炎性疾病，并且具体地，其特征在于通过破坏唾液腺和泪腺的正常组织来减少唾液和泪液的产生。尚未完全揭示干燥综合征的病因，但是遗传因素例如家族史、病毒、细胞因子和自身免疫抗体被报道为干燥综合征的病因。目前，免疫抑制药物环孢菌素用于治疗干燥综合征，并且当症状严重时，连同环孢菌素使用非甾族化合物抗炎药物或甾族化合物。
干眼综合征或免疫干燥性角结膜炎(KCS)患者通常抱怨眼内酸痛、干燥、异物感和剧痛感。此外，由于眼容易疲劳而不易睁开眼，因此当闭上眼时会感到舒适，并且当睁开眼时感到症状是严重的。外观上眼轻微充血，并且当症状严重时患者抱怨头痛。该干眼综合征由于泪液产生不足和过度蒸发、泪液组分失衡或眼部炎症或眼内上皮细胞损伤引起的泪液缺乏造成。在现有药物中，暂时改善干燥和异物感的干眼综合征补充剂(例如人工泪液)以及作为通过对干眼的免疫抑制效应来增加泪液分泌的治疗剂的环孢菌素是代表性的。
环孢菌素是由11个氨基酸组成的多肽，并且通过抑制T细胞的增殖和分化表现出强大的免疫抑制活性。美国专利No.4,839,342公开了环孢菌素的免疫抑制活性，并公开环孢菌素是治疗免疫干燥性角结膜炎(KCS)的有效药物。
除了环孢菌素之外，西罗莫司、他克莫司及其衍生物作为眼用制剂是已知的。
环孢菌素具有环状结构，其包含7个N-甲基化氨基酸和4个非-N-甲基化氨基酸，并且根据构成氨基酸基团的结构有环孢菌素A、环孢菌素B、环孢菌素C、环孢菌素D和环孢菌素G等，并且实际上，对环孢菌素A的研究最为广泛，与其他环孢菌素相比，更多地揭示了环孢菌素A的药理活性和临床病例。环孢菌素的分子内引力较强，并且与水分子相互作用相对较难，因此环孢菌素是难以溶于水的水溶性较差的药物。已知环孢菌素的水溶解度为约20μg/ml至30μg/ml，并且非常难以制备具有如此低的水溶解度的环孢菌素的水溶性药物组合物。
目前作为环孢菌素眼用组合物销售的RestasisTM是乳白色不透明乳剂，并且其缺点为当将其向眼给药时，诱发灼热感，伴有结膜充血、瘙痒、视力模糊和异物感。因此，设计包含作为活性成分的水溶性差的环孢菌素的乳剂型眼用制剂的目的在于稳定地改善环孢菌素的水溶解度，并通过改善刺激、异物感、灼热感、酸痛、充血、视力模糊和瘙痒来最小化眼部给药的令人不适的症状。
现有的眼用乳剂通常在单一组合物中包含2种或更多种不混溶成分，并因此通常在组合物中形成2个分离的相。
在热力学上，乳剂处于不稳定状态，并且倾向于通过以下途径分离为多个相，例如絮凝、沉降、乳状液分层、奥斯特瓦尔德熟化和聚并等。对其中其粒度减小至纳米尺寸的纳米乳剂积极进行研究，以解决乳剂的不稳定性。就制备方法而言，通过使用高速搅拌器型或高速剪切型设备，例如在制备乳剂时向组合物传递较大的物理力的高压匀浆器或微流化器(microfluidizer)来制备已知乳剂(如RestasisTM)。如在韩国专利公开No.10-2008-0030828中所公开的，该制备方法需要较大的制造设备和庞大的开支，并且由于通过制备时传递至乳剂的能量导致大的升温而难以适用于热敏感成分。此外，通过该方法制备的环孢菌素乳剂由于不同的油滴尺寸而快速絮凝，并因此加速乳状液分层过程并影响长期稳定性。此外，由于分散相中的粒度分布相对较宽，难以保证各制备批次的品质一致。
[现有技术文献]
[专利文献]
美国专利No.5,660,858
国际公开No.WO1995/31211
韩国专利No.10-1008189
发明概述
技术问题
本公开的发明人证实，在对可改善作为活性成分的环孢菌素的溶解度的眼用纳米乳剂进行研究时，在通过适当地混合纳米乳剂的成分来制备眼用纳米乳剂的情况下，当眼部给药纳米乳剂的最终产品时，环孢菌素的溶解度增加，形成的平均粒度为1nm至100nm，并且形成的最大粒度为220nm或更小，并且可改善渗透率和功效，并且可有效地改善物理化学稳定性、刺激性、视力模糊和异物感，并因此完成了本公开。
因此，本公开提供眼用纳米乳剂组合物，其包含：环孢菌素；一种或多种选自植物油、C14-C20脂肪酸酯和甘油的C6-C12脂肪酸酯的非水性溶剂；一种或多种亲水性乳化剂；一种或多种疏水性乳化剂；和水性溶剂。
本公开还提供平均粒度为1nm至100nm的眼用纳米乳剂组合物，其包含：量为基于所述组合物的总量的0.02w/v％至0.3w/v％的环孢菌素；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至2.5w/v％的一种或多种选自植物油、C14-C20脂肪酸酯和甘油的C6-C12脂肪酸酯的非水性溶剂；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至5.0w/v％的一种或多种选自聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧化乙烯脂肪酸酯的亲水性乳化剂；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至5.0w/v％的一种或多种选自山梨糖醇酐脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、二甘醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇和脂肪酸丙二醇酯的疏水性乳化剂；和水性溶剂。
本公开还提供眼用纳米乳剂组合物，其包含：量为基于所述组合物的总量的0.02w/v％至0.3w/v％的环孢菌素；量为所述环孢菌素的量的8倍或更多倍至基于所述组合物的总量的2.5w/v％或更少的蓖麻油；一种或多种选自聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧化乙烯脂肪酸酯的亲水性乳化剂；一种或多种选自山梨糖醇酐脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、 二甘醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇和脂肪酸丙二醇酯的疏水性乳化剂；和水性溶剂。
本公开还提供制备平均粒度为1nm至100nm的眼用纳米乳剂组合物的方法，其包括：通过搅拌量为基于所述组合物的总量的0.02w/v％至0.3w/v％的环孢菌素；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至2.5w/v％的一种或多种选自植物油、C14-C20脂肪酸酯和甘油的C6-C12脂肪酸酯的非水性溶剂；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至5.0w/v％的一种或多种选自聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧化乙烯脂肪酸酯的亲水性乳化剂；一种或多种选自山梨糖醇酐脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、二甘醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇和脂肪酸丙二醇酯的疏水性乳化剂；和水性溶剂来制备混合物组合物。
本公开还提供预防或治疗眼部疾病的方法，其包括将本公开的眼用纳米乳剂组合物向患者给药。
问题的解决方案
本公开提供眼用纳米乳剂组合物，其包含环孢菌素、非水性溶剂、乳化剂和水性溶剂，更具体地，本公开提供眼用纳米乳剂组合物，其包含：环孢菌素；一种或多种选自植物油、C14-C20脂肪酸酯和甘油的C6-C12脂肪酸酯的非水性溶剂；一种或多种亲水性乳化剂；一种或多种疏水性乳化剂；和水性溶剂。
可通过适当地混合上述成分来制备本公开的眼用纳米乳剂组合物，并且由于其形成平均粒度(球状体)为200nm或更小或在1nm至100nm的范围内并且粒度分布较窄，灭菌过滤是可行的，增加了环孢菌素的溶解度并改善了稳定性。
“环孢菌素”是所述眼用纳米乳剂组合物的活性成分，并且可包括环孢菌素A、环孢菌素A衍生物、环孢菌素B、环孢菌素C、环孢菌素D或其混合物等，并且优选地，环孢菌素可以为环孢菌素A或其衍生物。
就本公开的目的而言，环孢菌素可以治疗有效量包含以改善干眼综合征，并且可以基于总眼用纳米乳剂组合物的0.001w/v％至1.0w/v％、0.01w/v％至1.0w/v％并优选0.02w/v％至0.3w/v％包含。
关于眼用制剂的制备，已公开了组合物，其中使用表面活性剂例如聚氧 乙烯蓖麻油和聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯等来防止在给药滴眼剂后环孢菌素在眼中的沉淀，但是还已知其缺点为当使用该组合物时，眼用组合物会以乳白色不透明乳剂的状态存在，并因此在给药的初始阶段诱导视力模糊。因此，通过适当地选择非水性溶剂、亲水性乳化剂和疏水性乳化剂来制备所述眼用纳米乳剂组合物以解决上述问题。
“非水性溶剂”可以为选自植物油、C14-C20脂肪酸酯和C6-C12脂肪酸酯的甘油酯等中的至少一种。具体地，所述植物油可以是蓖麻油、椰子油、肉桂油、玉米油、橄榄油、棉籽油和大豆油；所述C14-C20脂肪酸酯可以是月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、α-亚麻酸、γ-亚麻酸、二十碳五烯酸、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯；甘油的C6-C12脂肪酸酯可以是脂肪酸酯的甘油酯，如labrafac PG和labrafac亲脂性WL 1349等，辛酸-癸酸甘油三酯(如miglyol 812)、辛酸-癸酸-亚油酸甘油三酯(如miglyol 818)。此外，优选地，一种或多种非水性溶剂可选自蓖麻油、miglyol 812、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、labrafacPG和labrafac亲脂性WL 1349。最优选地，非水性溶剂是蓖麻油，并且其以蓖麻油的产品名商购得到(由日本ITHO oil chem.制造)。与其他油相比，蓖麻油降低眼表面的泪液蒸发并具有优异的铺展性，因此蓖麻油可用于治疗干眼综合征，如泪腺的睑板腺功能障碍等。然而，包含非水性溶剂(例如蓖麻油等)的眼用组合物可诱导疼痛(包括眼部刺激)和视觉障碍。因此，对于本公开，期望以可使环孢菌素适当溶解并使不良反应最小化的最小浓度使用非水性溶剂(即蓖麻油等)。通过以最小浓度使用非水性溶剂，也可使用于稳定油相的乳化剂的量最小化，因此可用于提供比市场上的环孢菌素乳剂更安全的眼用纳米乳剂组合物。非水性溶剂的量可为基于所述组合物的总量的0.01w/v％至10.0w/v％、0.1w/v％至5.0w/v％，并且优选0.1w/v％至2.5w/v％。此外，在非水性溶剂为蓖麻油的情况下，蓖麻油的量可为作为活性成分的环孢菌素的量的8倍或更多倍至基于所述组合物的总量的2.5w/v％或更少。当蓖麻油(即非水性溶剂)的量为环孢菌素的量的8倍或更多倍至基于所述组合物的总量的2.5w/v％或更少时，形成最稳定的纳米乳剂组合物，因此该量是制备本公开的稳定纳米乳剂组合物所期望的。
本公开的纳米乳剂组合物包含一种或多种有助于使非水性溶剂在水性溶剂中乳化的乳化剂。根据非水性溶剂所需的亲水-亲油平衡(在下文中为HLB) 值，优选地根据蓖麻油所需的HLB值，通过考虑各个乳化剂的HLB值来选择一种或多种乳化剂。一种或多种乳化剂可选自其中HLB值为至少8，具体为10或更大的亲水性乳化剂，以及选自其中HLB值小于8，具体为6或更小的疏水性乳化剂。
本公开的乳化剂可以是亲水性乳化剂、疏水性乳化剂或其混合物。
所述亲水性乳化剂可以是脂肪酸、酯、醚、酸或其随机组合。例如，聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧化乙烯脂肪酸酯、脂肪酸聚乙二醇甘油酯、辛酰己酰聚氧甘油酯、泊洛沙姆、泰洛沙泊和维生素E TPGS(D-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)等可用作亲水性乳化剂但不限于上述。优选地，一种或多种亲水性乳化剂可选自聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧化乙烯脂肪酸酯，并且还优选地，亲水性乳化剂可以为聚氧化乙烯(polyoxyl)35蓖麻油或聚氧化乙烯山梨聚糖单油酸酯(并且两者在市场上以Cremophor ELTM或ELPTM(BASF)和聚山梨酯80(NOF公司)的产品名销售)。亲水性乳化剂的量可为基于所述组合物的总量的0.01w/v％至10.0w/v％、0.01w/v％至7.0w/v％，并且最优选0.1w/v％至5.0w/v％。在所述非水性溶剂为蓖麻油的情况下，一种或多种亲水性乳化剂可选自聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧化乙烯脂肪酸酯，并且当亲水性乳化剂为聚氧化乙烯氢化蓖麻油时，期望聚氧化乙烯氢化蓖麻油的量为蓖麻油(即非水性溶剂)的量的至少1.6倍或更多倍至基于所述组合物的总量的5.0w/v％或更少。此外，当所述非水性溶剂为蓖麻油并且所述亲水性乳化剂为聚氧化乙烯氢化蓖麻油时，期望亲水性乳化剂的量为环孢菌素(即活性成分)的量的至少12.8倍至基于所述组合物的总量的5.0w/v％。可用上述含量容易地制备平均粒度为1nm至100nm的稳定纳米乳剂，并且由于亲水性乳化剂以基于所述组合物的总量的5.0w/v％或更少包含，其通过眼部滴注表现出最佳感觉。
所述疏水性乳化剂可以是离子或非离子的，优选非离子的。山梨糖醇酐脂肪酸酯、二甘醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇、脂肪酸丙二醇酯、甘油脂肪酸酯、氧基-烷二醇、卵磷脂和高级脂肪醇(即C16和更大的)可用作疏水性乳化剂，并且优选地，一种或多种疏水性乳化剂可选自山梨糖醇酐脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、二甘醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇和脂肪酸丙二醇酯。具体地，优选的疏水性乳化剂是聚乙二醇(PEG)、丙二醇、山梨糖醇酐脂肪酸酯和二甘醇单乙基醚，并且这些分别以以下商品名在市场上销售：超精制(Super Refined)PEG 300TM、超精制PEG 400TM、超精制PEG 600TM(Croda)、丙二醇(Merck)、Span 20、Span 80(Croda)和Transcutol P(Gattefosse)。所述疏水性乳化剂的量可为基于所述组合物的总量的0.01w/v％至7.0w/v％，并且优选地，其可为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至5.0w/v％。此外，所述疏水性乳化剂可为聚乙二醇、丙二醇和二甘醇单乙基醚，并且这些物质的量可为基于所述组合物的总量的至少0.1w/v％或更大，并且其优选以亲水性乳化剂(优选聚氧化乙烯氢化蓖麻油)的量的3倍或更少倍包含。此外，在该情况下，最优选不超过基于所述组合物的总量的5.0w/v％。最优选所述疏水性乳化剂以基于所述组合物的总量的至少0.1w/v％或更多包含来制备稳定的纳米乳剂组合物，并且优选所述疏水性乳化剂以所述亲水性乳化剂的量3倍或更少倍包含，优选地，聚氧化乙烯氢化蓖麻油为基于所述组合物的总量的5.0w/v％或更少，从而通过眼部滴注实现优异的感觉。
本公开的水性溶剂是用于制备眼用制剂的适当成分，并且其可以为无菌纯化水、盐水溶液和注射用水。
因此，本公开可提供平均粒度为1nm或更大至100nm或更小的眼用纳米乳剂组合物，其包含：量为基于所述组合物的总量的0.02w/v％至0.3w/v％的环孢菌素；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至2.5w/v％的一种或多种选自植物油、C14-C20脂肪酸酯和甘油的C6-C12脂肪酸酯的非水性溶剂；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至5.0w/v％的一种或多种选自聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧化乙烯脂肪酸酯的亲水性乳化剂；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至5.0w/v％的一种或多种选自山梨糖醇酐脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、二甘醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇和脂肪酸丙二醇酯的疏水性乳化剂；和水性溶剂。
本公开的非水性溶剂可以为选自蓖麻油、labrafac、miglyol 812、油酸乙酯和肉豆蔻酸异丙酯中的至少一种，并且优选地，所述非水性溶剂是蓖麻油。
此外，所述亲水性乳化剂可优选地为聚氧化乙烯氢化蓖麻油或聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯，并且所述疏水性乳化剂可以为选自聚乙二醇、丙二醇和二甘醇单乙基醚中的至少一种。
此外，本公开在所述眼用纳米乳剂组合物中还可包含稳定剂。用另外包含的稳定剂可更加改善本公开的眼用纳米乳剂组合物的物理化学稳定性。稳定剂可通过在水性溶剂中经由水合形成特定的键结构来使纳米乳剂的油滴网格化来提供粘度，并且可在物理上起到稳定纳米乳剂的作用。稳定剂可包括纤维素系化合物，其包括羧甲基纤维素(CMC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)和羟乙基纤维素(HEC)等；聚乙烯基系化合物，其包括聚乙烯醇(PVA)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等；丙烯酸系化合物，其包括卡波姆等；胶系化合物，其包括结冷胶(gellan gum)和黄原胶等；多糖，其包括透明质酸(HA)、透明质酸钠、海藻酸钠和葡聚糖等；或其任意组合。此外，所述稳定剂可为选自羧甲基纤维素、黄原胶、透明质酸(HA)和透明质酸钠中的至少一种。
因此，本公开的组合物可包含环孢菌素、非水性溶剂、亲水性乳化剂、疏水性乳化剂、稳定剂和水性溶剂。
此外，本公开的组合物可为眼用纳米乳剂组合物，其包含：环孢菌素；一种或多种选自植物油、C14-C20脂肪酸酯和甘油的C6-C12脂肪酸酯的非水性溶剂；一种或多种亲水性乳化剂；一种或多种疏水性乳化剂；选自以下的稳定剂：纤维素系化合物，其包括羧甲基纤维素(CMC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)和羟乙基纤维素(HEC)等；聚乙烯基系化合物，其包括聚乙烯醇(PVA)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等；丙烯酸系化合物，其包括卡波姆等；胶系化合物，其包括结冷胶和黄原胶等；多糖，其包括透明质酸(HA)、透明质酸钠、海藻酸钠和葡聚糖等；或其混合物；和水性溶剂。
稳定剂的量可为基于所述组合物的总量的0.001w/v％至10.0w/v％、0.01w/v％至5.0w/v％，并优选0.01w/v％至2.0w/v％。
此外，本公开的眼用纳米乳剂组合物还可包含pH调节剂、等渗剂、防腐剂和缓冲剂等。
所述pH调节剂可以为氢氧化钠和盐酸等，并且可经由本领域已知的方法通过添加所需量用于获得适当的pH值。
所述等渗剂可为选自甘油、甘露醇、山梨醇、氯化钠、氯化钾、硼酸和硼砂中的至少一种，并且等渗剂的量可为基于所述组合物的总量的0.01w/v％至10.0w/v％，并且可以0.1w/v％至3.0w/v％使用。
本公开的防腐剂可以为季铵化合物，其包括苯扎氯铵、苄索氯铵、西他 氯铵和聚季铵(polyquaternium)-1(例如)等；胍系化合物，其包括PHMB和氯己定等；三氯叔丁醇；汞系防腐剂，其包括硫柳汞、醋酸苯汞和硝酸苯汞等；和氧化性防腐剂，其包括稳定化的氧氯复合物(例如)和对羟基苯甲酸烷基(例如对羟基苯甲酸甲基(PM))等。
本公开的缓冲剂可以是用于滴眼剂的任何缓冲剂而没有任何限制。有乙酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂(例如磷酸钠或其水合物和磷酸二氢钠或其水合物)和硼酸盐缓冲剂(如硼酸或其盐)等但并不限于这些。缓冲剂的量可由本领域技术人员适当地选择，并且其可以基于所述组合物的总量的0.001w/v％至10w/v％，优选0.01w/v％至5.0w/v％，并且更优选0.1w/v％至2.0w/v％加入。
此外，优选本公开的眼用纳米乳剂组合物的粒度为220nm或更小，并且组合物的粒度可为0nm至220nm和0.3nm至220nm。
此外，本公开提供眼用纳米乳剂组合物，其包含：量为基于所述组合物的总量的0.02w/v％至0.3w/v％的环孢菌素；以所述环孢菌素的量的8倍或更多倍至基于所述组合物的总量的2.5w/v％或更少包含的蓖麻油；一种或多种选自聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧化乙烯脂肪酸酯的亲水性乳化剂；一种或多种选自山梨糖醇酐脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、二甘醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇和脂肪酸丙二醇酯的疏水性乳化剂；和水性溶剂。
所述亲水性乳化剂可为聚氧化乙烯氢化蓖麻油，并且可以所述蓖麻油的量的1.6倍或更多倍至基于所述组合物的总量的5w/v％或更少包含。
此外，所述疏水性乳化剂是选自聚乙二醇、丙二醇和二甘醇单乙基醚中的至少一种，并且可以基于所述组合物的总量的0.1w/v％至所述亲水性乳化剂的量的3倍或更少倍包含。
此外，本公开提供眼用纳米乳剂组合物：其中所述亲水性乳化剂是聚氧化乙烯氢化蓖麻油并且以所述环孢菌素的量的12.8倍或更多倍至基于所述组合物的总量的5w/v％或更少包含；并且所述疏水性乳化剂是选自聚乙二醇、丙二醇和二甘醇单乙基醚中的至少一种，并且以基于所述组合物的总量的0.1w/v％至5w/v％包含。
此外，本公开提供预防或治疗眼部疾病的方法，其包括将眼用纳米乳剂 组合物向患者眼中给药。
所述眼部疾病可为内在疾病或由于外部损伤或配戴硬性隐形眼镜的外在疾病，并且优选地，所述眼部疾病可为干燥综合征或干眼综合征，并且更优选地，所述眼部疾病可为干眼综合征。
此外，本公开提供制备平均粒度为1nm至100nm的眼用纳米乳剂组合物的方法，其包括：通过搅拌环孢菌素、非水性溶剂、亲水性乳化剂、疏水性乳化剂和水性溶剂来制备混合物。
具体地，本公开提供制备平均粒度为1nm至100nm的眼用纳米乳剂组合物的方法，其包括：通过将环孢菌素(即活性成分)溶解于非水性溶剂中，向溶解的组合物中添加亲水性乳化剂、疏水性乳化剂和水性溶剂并搅拌其来制备混合物。
更具体地，本公开提供制备平均粒度为1nm至100nm的眼用纳米乳剂组合物的方法，其包括：通过搅拌量为基于所述组合物的总量的0.02w/v％至0.3w/v％的环孢菌素；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至2.5w/v％的一种或多种选自植物油、C14-C20脂肪酸酯和甘油的C6-C12脂肪酸酯的非水性溶剂；量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至5.0w/v％的一种或多种选自聚氧化乙烯氢化蓖麻油、聚氧化乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯和聚氧化乙烯脂肪酸酯的亲水性乳化剂；一种或多种选自山梨糖醇酐脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、二甘醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇和脂肪酸丙二醇酯的疏水性乳化剂；和水性溶剂来制备混合物。
在所述混合物的上述制备中，所述制备方法还可包括将稳定剂或等渗剂另外溶解于水性溶剂中，将其与制备的混合物一起搅拌并控制其pH范围。
根据本公开的制备方法，可由于成分被充分混合而形成平均粒度为1nm至100nm的纳米乳剂；由于制备了最大粒度为220nm或更小的眼用纳米乳剂组合物，所以通过使用0.22μm滤器的常见灭菌过滤是可行的，而无需使用现有高速搅拌器型或高速剪切型设备(如高压匀浆器或微流化器)；并且制备所述粒度为220nm或更小的眼用纳米乳剂组合物的成本较低。
通过本公开制备的纳米乳剂组合物具有优异的效果，如轻微的刺激、异物感和视力模糊等，并且在评价药物释放的纤维素膜释放测定中，以适当的速率释放环孢菌素A(即活性成分)。
由于当使用所述纳米乳剂组合物作为用于眼部给药的眼用组合物时，患者的不良刺激和异物感被改善并在干眼综合征治疗中表现出高的治疗效果，并且所述纳米乳剂组合物会增加泪液分泌和泪膜的保留时间，所以通过本公开制备的纳米乳剂组合物可有效地用于治疗干眼综合征。此外，期望在给药纳米乳剂组合物后，眼部组织中环孢菌素A残留物的量较高。
有益效果
本公开的眼用纳米乳剂组合物的平均粒度为200nm或更小，优选100nm或更小，并且粒度分布特征较窄。因此，由于灭菌过滤是可行的，改善了稳定性并且异物感和视力模糊的改善效果在临床上是优异的，所以本公开的眼用纳米乳剂组合物可有效地用于眼用组合物。
附图说明
图1示出实施例33的眼用纳米乳剂组合物和RestasisTM滴眼剂的确证的粒度分布。
图2示出通过Turbiscan稳定性指数(TSI)确证的实施例62和实施例63的眼用纳米乳剂组合物、乳剂和混悬剂的分布稳定性。
图3是示出通过测试滴入眼中的感觉来测量的实施例62和RestasisTM(其为对照药物)的灼热感和异物感的平均值的图。
具体实施方案
下文会参照所附的实施例更充分地描述本公开。然而，以下实施例旨在解释本发明，并且本发明不受限于以下实施例。
实验实施例1.根据非水性溶剂的类型和含量变化制备纳米乳剂并测量其平均粒度
用不同量的蓖麻油、labrafac亲脂性WL 1349或miglyol 812制备纳米乳剂组合物，然后测量其平均粒度。制备纳米乳剂组合物的具体方法如下。在600rpm至800rpm和70℃下，通过使用搅拌器(Super-NuovaTM Multi-place，Thermo Scientific)使环孢菌素A与非水性溶剂以下表1所示的量混合并完全溶解。通过向上述制备的混合溶液中添加表1所示含量的亲水性和疏水性乳化剂并通过将其搅拌以充分混合来制备油相。在室温下冷却制备的溶液，并将油相置入水性溶剂以洗涤油相数次，然后在400-500rpm和室温下通过使用搅拌器(Super-NuovaTM Multi-place，Thermo Scientific)对其进行搅拌。在搅拌30 分钟或更久后，添加水性溶剂直至最终体积为100mL。通过自纳米乳化药物递送系统(Self Nano-Emulsifying Drug Delivery system，SNEDDS)使纳米乳剂自发形成稳定的均相。通过使用Zetasizer(英国Malvern Instruments，其为测量粒度的设备)测量通过上述方法制备的眼用纳米乳剂的粒度，并且所制备的纳米乳剂组合物的组成和所测量的平均粒度(nm)示出于下表1中。
表明所有实施例1-15的纳米乳剂组合物的粒度最大为220nm或更小，特别地如上表1所示，确证平均粒度均为100nm或更小并制备了透明的纳米乳剂组合物。当最大粒度为220nm或更小时，可测定包含作为活性成分的环孢菌素的纳米乳剂具有合适的粒度，因此确证根据本公开的组分可制备具有非常小的平均粒度的眼用纳米乳剂组合物。特别地，尽管与其他非水性溶剂(即labrafac和miglyol 812)相比，实施例1-3包含0.42w/v％、0.25w/v％和0.84w/v％的相对少量的蓖麻油并因此包含低含量的乳化剂，但上述实施例在形成纳米乳剂中展现出优异的效果(其中平均粒度为41.05nm、31.04nm和35.29nm)。在考虑到非水性溶剂在向眼中给药后可引起刺激时，蓖麻油的优点在于其可最小化由眼用组合物中油组分引起的刺激，因此确证蓖麻油是眼用纳米乳剂组合物的优选非水性溶剂之一。
实验实施例2.根据乳化剂的类型和变化的量制备纳米乳剂并测量其平均粒度
实施例16-36的纳米乳剂组合物通过实验实施例1中所说明的相同方法通过使用蓖麻油作为非水性溶剂，并变化蓖麻油的量以及乳化剂的类型和量来制备。所制备的纳米乳剂组合物的组成和量示出于下表2中。
如表2中所示，确证在实施例16-34中，纳米乳剂组合物的平均粒度为100nm或更小，并且其粒度分布非常窄。因此确证在将环孢菌素、蓖麻油、亲水性乳化剂、疏水性乳化剂和水性溶剂以上述组成混合时，可制备具有100nm或更小的平均粒度和窄粒度分布的眼用纳米乳剂组合物。
在表2中，实施例35和实施例36是通过仅使用亲水性乳化剂而不使用疏水性乳化剂制备的组合物，并因此形成具有宽粒度分布的不透明乳剂，并且特别地，确证实施例36具有非常不适合的粒度分布，因为其粒度分布宽达17.02-382.5nm。因此，确证所述亲水性乳化剂和所述疏水性乳化剂的结合是制备具有合适的粒度和颗粒分布的纳米乳剂是优选的。
具有合适的粒度分布对于制备眼用组合物是重要的，因此将通过本公开的方法制备的实施例33的粒度分布与市售可得的RestasisTM滴眼剂的粒度分布进行比较。
比较结果示出于图1中。
如图1中所示，本公开的组合物(实施例33)具有8.721-43.82nm的非常窄的粒度分布，而RestasisTM滴眼剂的粒度分布非常宽至21.04-712.4nm。
即，确证以下二者：与RestasisTM滴眼剂相比，本公开的纳米乳剂组合物可形成用于制备眼用组合物的更合适组合物，并且由于本公开的纳米乳剂组合物的最大粒度为220nm或更小，所以通过使用0.22μm滤器进行灭菌过滤是可行的。
实验实施例3.纳米乳剂组合物的成分的最优含量
确证纳米乳剂的形成依赖于各成分的量的变化，以测定适用于制备本公开的环孢菌素眼用纳米乳剂组合物的非水性溶剂、亲水性乳化剂和疏水性乳化剂的相对量。
3.1非水性溶剂的含量
通过使用实验实施例1中说明的相同方法，采用固定含量的环孢菌素、亲水性乳化剂和疏水性乳化剂以及2.5w/v％、3.0w/v％和3.5w/v％的变化量的蓖麻油来制备组合物，并且确证纳米乳剂的形成。
结果示出于下表3中。
[表3]
如表3中所示，在包含基于所述组合物的总量的2.5w/v％的蓖麻油时，确证形成了粒度为45.75nm的优异纳米乳剂，但当将蓖麻油的量增加至3.0w/v％时，粒度增加，并且当将蓖麻油的量增加至达到3.5w/v％时，不能测量粒度。即，确证蓖麻油(即非水性溶剂)优选以环孢菌素(即活性成分)的8倍或更多倍包含以制备本公开的纳米乳剂组合物，并且在包含达到5w/v％的亲水性表面活性剂的组合物中，蓖麻油的最大量优选为2.5w/v％或更少。
3.2乳化剂的量
亲水性乳化剂和疏水性乳化剂是形成纳米乳剂的必要成分，但是当其包含过量时，通过眼部滴注其导致感觉下降，并且当其包含不足时，不能形成纳米乳剂，因而选择适量的亲水性乳化剂和疏水性乳化剂是重要的。因此，通过比较试验确证制备本公开的眼用纳米乳剂组合物所需的亲水性乳化剂和疏水性乳化剂的量。蓖麻油(即非水性溶剂)的量设定为环孢菌素的量的8倍或更多倍，并且制备在与实验实施例1相同的条件下进行，其指定Cremophor ELP作为亲水性乳化剂和PEG 400作为疏水性乳化剂。各含量和由此的纳米乳剂形成的结果示出于下表4中。
[表4]
如表4中所示，在包含蓖麻油的量的1.6倍或更多倍的Cremophor ELP(即亲水性乳化剂)或包含亲水性乳化剂的量的最大3倍或更少倍的PEG 400(即疏水性乳化剂)的各个组分中，形成平均粒度为100nm或更小的纳米乳剂，但是确证在其中Cremophor ELP的量少于蓖麻油的量的1.6倍并且PEG 400 (即疏水性乳化剂)的量超过Cremophor ELP(即亲水性乳化剂)的量的3倍的组分中，纳米乳剂的形成相对困难。此外，在包含少于基于所述组合物的总量的0.1w/v％的疏水性乳化剂时，形成纳米乳剂，但因较低的稳定性而不能维持其相。当亲水性乳化剂和疏水性乳化剂的各个量超过基于所述组合物的总量的5w/v％时，由眼部滴注引起的令人不快的感觉变得更糟，并因此确证最优选包含的亲水性乳化剂为蓖麻油(即非水性溶剂)量的最少1.6倍至基于所述组合物的总量的5w/v％或更少，并且包含的疏水性乳化剂为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至亲水性乳化剂的量的3倍或更少倍和基于所述组合物的总量的5w/v％或更少，以制备通过眼部滴注具有优异感觉和稳定性的纳米乳剂组合物。
实验实施例4.添加稳定剂的纳米乳剂组合物
如实验实施例1-3中所确证，可仅通过添加环孢菌素、非水性溶剂、亲水性乳化剂和疏水性乳化剂来制备平均粒度为100nm或更小的纳米乳剂组合物。此外，由于在制备眼用纳米乳剂组合物后粒度的稳定维持是重要的，可选择性地添加稳定剂来制备眼用纳米乳剂组合物以改善稳定性。因此，确证在添加稳定剂时是否可以维持纳米乳剂的粒度及其稳定性。
4.1添加稳定剂的纳米乳剂组合物的制备及其平均粒度
具体地，根据下表5所示的含量制备纳米乳剂组合物。在水性溶剂中将稳定剂和等渗剂进行水合，并通过使用NaOH和HCl将其pH调节至7.2。通过使用与实验实施例1相同的方法来制备油相，其中将表5所示含量的环孢菌素、非水性溶剂和乳化剂完全溶解，将其放入水性溶剂，并在400-500rpm和室温的条件下通过搅拌器(Super-NuovaTM Multi-place，Thermo Scientific)将其进行搅拌。如实验实施例1，通过自纳米乳化药物递送系统(SNEDDS)形成单相。以与实验实施例1相同的方式测量所制备的纳米乳剂组合物的粒度。纳米乳剂的各平均粒度示出于下表5中。
[表5]
如表5中所示，即使添加稳定剂，也形成平均粒度为100nm或更小的纳米乳剂组合物，并且可以确证所制备的组合物的粒度分布较窄。因此，确证即使另外包含稳定剂，也可维持本公开的优选粒度和粒度分布。
4.2纳米乳剂组合物的热稳定性评价
通过使用与实验实施例4(1)相同的方法用下表6所示的相同含量来制备纳米乳剂组合物。为了评价纳米乳剂组合物的物理化学稳定性，在70±2℃的高温下储存纳米乳剂组合物2周，分析环孢菌素的量和纳米乳剂组合物的平均粒度。在下表7所示的分析条件下，通过色谱法(ACQUITY超高压液相色谱法(UPLC)系统(Waters Asia Ltd.，396AlexandraRoad#04-06BP Tower，新加坡119954))测量环孢菌素的量。
[表7]
UPLC的分析条件
柱 UPLC柱1HSS T3.8μm2.1×100mm
UV检测器的波长 210nm
柱温度 75℃
样品温度 25℃
流速 0.250ml/min
注射体积 5μl
运行时间 20min
流动相 乙腈(ACN)∶水＝68∶32
在高温下储存2周的纳米乳剂组合物中环孢菌素的含量(％)和平均粒度(nm)的测量结果示出于下表8中。
如表8中所示，实施例45-61中环孢菌素的含量均适用于测定标准(90％至110％)，并且在70±2℃的高温下甚至2周后维持100nm或更小的初始平均粒度。实施例45、实施例51和实施例57(其中未添加稳定剂)中环孢菌素的含量均等于或大于90％，并确证粒度维持为100nm或更小，但是在其余的实施例(其中添加稳定剂)中，确证环孢菌素含量的降低速率和尺寸变化非常低。因此，确证本公开的纳米乳剂组合物可在高温下维持其物理化学稳定性，并且特别地，当添加稳定剂时可进一步改善物理化学稳定性。
实验实施例5.纳米乳剂组合物的稳定性评价
5.1纳米乳剂组合物的长期稳定性评价
为了用作眼用组合物，应当保证在加速储存条件(40±2℃，25％RH或更小)下的长期物理化学稳定性，所述加速储存条件是在室温(25±2℃，40±5％RH)和24至36个月下的长期物理化学稳定性测试前，作为用于核准的6个月短期稳定性数据可确证样品稳定性的条件。因此，在室温和加速储存条件下存储实施例45-61的纳米乳剂组合物6个月，并在第0、3和6个月测量环孢菌素的含量和纳米乳剂组合物的粒度。测量环孢菌素含量和粒度的方法等同于实验实施例3。
上述的结果示出于下表9和表10中。
如表9和表10中所示，确证在表9的室温条件下和表10的加速条件下，实施例45-61的纳米乳剂组合物由于长期中含量和粒度的变化较小而非常稳定。
5.2纳米乳剂组合物的分布稳定性评价
为了评价与乳剂和混悬剂相比纳米乳剂组合物的长期稳定性，通过使用Turbiscan(Turbiscan Ageing Station，Formulaction，France)根据制造商的手册进行分散稳定性测试。用于测试的纳米乳剂组合物、乳剂和混悬剂的组成示出于下表11中，并通过使用与实验实施例4(1)相同的方法制备纳米乳剂组合物。乳剂的制备方法如下：将表11的稳定剂和等渗剂在水性溶剂中水合，并通过使用NaOH和HCl将其pH调节至7.2。通过与实验实施例1相同的方法将表11所示含量的环孢菌素、非水性溶剂和乳化剂完全溶解来制备油相。将所制备的油相置入水性溶剂中，并在400-500rpm和室温下通过使用搅拌器(Super-NuovaTM Multi-place，Thermo Scientific)将其进行搅拌。通过使用高速搅拌器(Homomixer T-Basic 25，IKATM)在9000-17500rpm的速率范围下，将其进行乳化，并且通过气泡移除过程和冷却至室温的过程制备乳剂。通过以下方法制备该实施例的混悬剂：将表11的稳定剂和等渗剂在水性溶剂中水合，并通过使用NaOH和HCl将其pH调节至7.2。将表11所示含量的环孢菌素和乳化剂置入水性溶剂中，并通过使用搅拌器(Super-NuovaTM Multi-place，Thermo Scientific)在400-500rpm和室温下搅拌10分钟。通过使用高速搅拌器(Homomixer T-Basic 25，IKATM)在9000-13500rpm的速率范围下，将其进行分散，并且通过气泡移除过程和冷却至室温的过程制备混悬剂。
[表11]
当使用Turbiscan时，可测量某些温度下分散稳定性根据时间的变化，并因此根据制造商的手册在50℃下测量分散稳定性。具体而言，摇动纳米乳剂组合物、乳剂和混悬剂，并将其分别注入Turbiscan，将其在50℃的温度下静置48小时，根据获得的Turbiscan稳定性指数(TSI，通过Turbiscan测量)，观察各个样品的变化模式。
实施例62和实施例63的TSI结果示出于图2。
如图2中所示，48小时后，纳米乳剂组合物的TSI值为9.2(实施例62)和10.6(实施例63)。与在相同条件下测量的乳剂(即62.4)和混悬剂(即93.8)相比，这些TSI值非常低。因此，确证所制备的纳米乳剂组合物的稳定性显著优于现有乳剂或混悬剂。
实验实施例6.纳米乳剂组合物的体外药物释放试验
为了确证所制备的纳米乳剂组合物是否以适当的速率释放环孢菌素A(即活性成分)，进行评价药物释放的体外纤维素膜释放测定。用于该测定的纳米乳剂组合物的组成与实验实施例5(2)中的实施例62和实施例63相同，并且通过与实验实施例4(1)相同的方法制备。市售可得的RestasisTM用作对照药物。
具体而言，将膜(100kDa纤维素酯膜)切为适当尺寸，并浸泡在介质溶液(70％MeOH+30％平衡盐溶液(BSS))中超过1小时。将所制备的介质在相同尺寸烧杯中分配100ml，并将相同形状和尺寸的磁棒放置在各个烧杯中。将膜的相对端折叠并用密封棒密封，并将纳米乳剂组合物和对照药物分别放入膜内，并将包含药物的膜插入烧杯内的相同的高度，同时使膜完全浸没在烧杯中但不接触磁棒。在150rpm的相同速率下进行相同时间的搅拌。在适当的时间间隔获得样品，并以与实验实施例4(2)相同的方式通过UPLC 进行含量测试来测量环孢菌素的量。
作为药物释放测试的结果，确证实施例62和实施例63的纳米乳剂组合物在从测试开始约5小时后通常维持恒定的药物浓度，并达到稳态浓度(Css)。因此，药物释放测试的终点设置在测试开始后6小时。在5小时后，通过测量确证实施例62的药物浓度为52.0％，并且其在6小时(即终点)后显示为54.2％。这些药物浓度与对照药物(即RestasisTM)的浓度55.3％(5小时)和56.3％(6小时)非常相似，并因此确证所制备的纳米乳剂组合物是用于滴眼剂的合适组合物。
实验实施例7.纳米乳剂组合物的眼部刺激评价
通过使用实施例62的组合物(所制备的纳米乳剂组合物中)通过眼部滴注测试感觉来进行眼部刺激评价。将30μl的实施例62的纳米乳剂组合物给药至40位健康成人的双眼，根据下表12的量表在10分钟后对滴入每个人眼中的灼热感和异物感评价和评分。RestasisTM用作对照药物。
[表12]
结果示出于表13和图3。
[表13]
如表13和图3中所示，实施例62的眼用纳米乳剂表现出平均评分1.1的灼热感和平均评分0.8的异物感，其低于对照药物RestasisTM(即1.7的灼热感和1.1的异物感)。换言之，确证与现有的RestasisTM相比，所述眼用纳米乳剂为表现出更加改善的眼部滴注感觉的组合物。
工业实用性
本公开的眼用纳米乳剂特征在于平均粒度为200nm或更小，优选100nm或更小并具有较窄的颗粒分布，并因此灭菌过滤是可行的，可改善稳定性并在异物感和视觉障碍的临床改善中具有优异的效果。因此，本公开的眼用纳米乳剂组合物可有效用作眼用组合物。

Claims (6)

1.平均粒度为1nm至100nm的眼用纳米乳剂组合物，其包含：
量为基于所述组合物的总量的0.02w/v％至0.3w/v％的环孢菌素；
量为所述环孢菌素的量的8倍至基于所述组合物的总量的2.5w/v％的蓖麻油；
亲水性乳化剂，所述亲水性乳化剂是聚氧化乙烯35蓖麻油，其中所述亲水性乳化剂的量为所述蓖麻油的量的1.6倍至基于所述组合物的总量的5.0w/v％；
一种或多种选自二甘醇单乙基醚、聚乙二醇和丙二醇的疏水性乳化剂，其中所述疏水性乳化剂的量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至基于所述亲水性乳化剂的量的3倍；和
水性溶剂。
2.平均粒度为1nm至100nm的眼用纳米乳剂组合物，其包含：
量为基于所述组合物的总量的0.02w/v％至0.3w/v％的环孢菌素；
量为所述环孢菌素的量的8倍至基于所述组合物的总量的2.5w/v％的蓖麻油；
亲水性乳化剂，所述亲水性乳化剂是聚氧化乙烯35蓖麻油，其中所述亲水性乳化剂的量为所述蓖麻油的量的1.6倍至基于所述组合物的总量的5.0w/v％；
一种或多种选自二甘醇单乙基醚、聚乙二醇和丙二醇的疏水性乳化剂，其中所述疏水性乳化剂的量为基于所述组合物的总量的0.1w/v％至基于所述组合物的总量的5.0w/v％；和
水性溶剂。
3.权利要求1或2的眼用纳米乳剂组合物，其中所述疏水性乳化剂是所述聚乙二醇或所述丙二醇。
4.权利要求3的眼用纳米乳剂组合物，其中所述眼用纳米乳剂组合物还包含量为基于所述组合物的总量的0.01w/v％至2.0w/v％的一种或多种选自以下的稳定剂：羧甲基纤维素(CMC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟乙基纤维素(HEC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、卡波姆、结冷胶、黄原胶、透明质酸(HA)、透明质酸钠、海藻酸钠和葡聚糖。
5.权利要求4的眼用纳米乳剂组合物，其中所述疏水性乳化剂是聚乙二醇和丙二醇；并且
所述稳定剂是选自羧甲基纤维素(CMC)、黄原胶、透明质酸(HA)和透明质酸钠中的至少一种。
6.权利要求1或2的眼用纳米乳剂组合物，其中所述眼用纳米乳剂组合物的最大粒度等于或小于220nm。
CN201480029194.6A 2013-05-20 2014-05-20 包含环孢菌素的眼用纳米乳剂组合物和制备其的方法 Active CN105307668B (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20130056561 2013-05-20
KR10-2013-0056561 2013-05-20
KR20140029939A KR101492447B1 (ko) 2013-05-20 2014-03-13 사이클로스포린을 함유하는 나노에멀젼 점안 조성물 및 그의 제조 방법
KR10-2014-0029939 2014-03-13
PCT/KR2014/004489 WO2014189251A1 (ko) 2013-05-20 2014-05-20 사이클로스포린을 함유하는 나노에멀젼 점안 조성물 및 그의 제조 방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105307668A CN105307668A (zh) 2016-02-03
CN105307668B true CN105307668B (zh) 2019-10-01

Family

ID=52456659

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480029194.6A Active CN105307668B (zh) 2013-05-20 2014-05-20 包含环孢菌素的眼用纳米乳剂组合物和制备其的方法

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20160101050A1 (zh)
EP (1) EP3000474B1 (zh)
JP (1) JP6392858B2 (zh)
KR (4) KR101492447B1 (zh)
CN (1) CN105307668B (zh)
CA (1) CA2912180A1 (zh)
ES (1) ES2713326T3 (zh)
PH (1) PH12015502587B1 (zh)
PL (1) PL3000474T3 (zh)
RU (1) RU2683271C2 (zh)
SG (1) SG11201509447YA (zh)
WO (1) WO2014189251A1 (zh)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101587412B1 (ko) * 2014-10-17 2016-01-21 주식회사 휴온스 사이클로스포린 및 트레할로스를 포함하는 안과용 조성물
US20200237859A1 (en) 2019-01-25 2020-07-30 Newport Research, Inc. Aqueous suspensions of cyclosporin
US11324800B2 (en) 2015-01-15 2022-05-10 Wellspring Ophthalmics, Inc. Aqueous suspensions of cyclosporin
KR20170120161A (ko) * 2015-03-05 2017-10-30 알러간, 인코포레이티드 안과용 약물 전달을 위한 자가-유화 약물 전달 시스템(sedds)
CN106692052B (zh) * 2015-11-13 2021-03-26 天津金耀集团有限公司 一种环孢素眼用乳剂组合物
EP3187172A1 (en) * 2016-01-04 2017-07-05 Spherium Biomed S.L. Cyclosporine a topical compositions
KR101939880B1 (ko) * 2016-06-29 2019-01-18 서울대학교산학협력단 암병변 선택적 표지를 위한 수화젤 기반 나노 에멀전 및 이의 제조 방법
JOP20170147B1 (ar) * 2016-07-07 2021-08-17 Salvat Lab Sa تركيبة عينية تشتمل على زيت الخروع ودهون ثلاثية متوسطة السلسلة
JP7044714B2 (ja) 2016-11-17 2022-03-30 千寿製薬株式会社 乳剤点眼液
WO2019002362A1 (en) * 2017-06-28 2019-01-03 Spherium Biomed, S.L. TOPICAL COMPOSITIONS OF CYCLOSPORIN A
US11583497B2 (en) * 2017-11-14 2023-02-21 The Schepens Eye Research Institute, Inc. Nano-emulsion of CBFß-RUNX1 inhibitor for ocular drug delivery
KR102146704B1 (ko) 2018-04-13 2020-08-21 가천대학교 산학협력단 사이클로스포린 A (CsA) 경피 및 피내 약물전달용 마이크로구조체
CN110496096A (zh) * 2018-05-17 2019-11-26 何浩明 可溶性微针眼贴及其制备方法
CN109010270B (zh) * 2018-09-03 2021-07-30 辅必成（上海）医药科技有限公司 一种阳离子材料制备的眼用乳
US10933111B2 (en) * 2019-01-08 2021-03-02 Boston Biotechnology US CORP Treating dry eye disorders
CN114245737A (zh) * 2019-06-11 2022-03-25 司斐股份有限公司 微乳剂组合物
CN110237233B (zh) * 2019-07-30 2021-01-15 沈阳兴齐眼药股份有限公司 一种含有环孢素的眼用药物组合物、其制备方法及用途
MX2019010618A (es) 2019-09-06 2021-11-30 Sophia Holdings S A De C V Composicion farmacéutica oftálmica, procesos de preparación y usos de las mismas.
CA3149270A1 (en) 2019-09-09 2021-03-18 Taejoon Pharmaceutical Co., Ltd. Nanoemulsion ophthalmic composition comprising cyclosporine and menthol, and preparation method thereof
KR20210087294A (ko) 2020-01-02 2021-07-12 주식회사 엘지에너지솔루션 배터리 관리 장치 및 방법
MX2021003369A (es) * 2021-03-22 2022-09-23 Laboratorios Grin S A De C V Lágrima ocular triple.
KR102650566B1 (ko) * 2021-12-03 2024-03-26 인제대학교 산학협력단 황반변성 치료를 위한 안과용 나노이멀젼 조성물 및 이의 제조방법
WO2023139907A1 (ja) * 2022-01-24 2023-07-27 株式会社Moresco 防腐効果を付与したナノエマルジョン

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101244256A (zh) * 2007-02-16 2008-08-20 中国科学院上海药物研究所 一种环孢菌素a眼用微/亚微乳原位凝胶制剂及其制备方法
WO2012091278A2 (ko) * 2010-12-28 2012-07-05 한림제약(주) 나노에멀젼 형태의 안과용 조성물

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4839342A (en) 1987-09-03 1989-06-13 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Method of increasing tear production by topical administration of cyclosporin
US5474979A (en) 1994-05-17 1995-12-12 Allergan, Inc. Nonirritating emulsions for sensitive tissue
US5660858A (en) 1996-04-03 1997-08-26 Research Triangle Pharmaceuticals Cyclosporin emulsions
US7732404B2 (en) * 1999-12-30 2010-06-08 Dexcel Ltd Pro-nanodispersion for the delivery of cyclosporin
US7501393B2 (en) * 2005-07-27 2009-03-10 Allergan, Inc. Pharmaceutical compositions comprising cyclosporins
KR101132611B1 (ko) 2006-10-02 2012-04-06 엘지전자 주식회사 이동통신단말기의 메시지 다운로드 방법, 메시지 포워딩방법, 및 이를 수행하기 위한 이동통신단말기
US20100305046A1 (en) * 2009-06-02 2010-12-02 Abbott Medical Optics Inc. Stable cyclosporine containing ophthalmic emulsion for treating dry eyes
KR101008189B1 (ko) 2010-07-29 2011-01-17 에스씨바이오팜 주식회사 안구건조증 치료용 사이클로스포린 함유 안과용 나노에멀젼 조성물
KR101063776B1 (ko) * 2011-03-16 2011-09-08 양은태 인젝션 타입 속경화 케미컬 앵커 조성물

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101244256A (zh) * 2007-02-16 2008-08-20 中国科学院上海药物研究所 一种环孢菌素a眼用微/亚微乳原位凝胶制剂及其制备方法
WO2012091278A2 (ko) * 2010-12-28 2012-07-05 한림제약(주) 나노에멀젼 형태의 안과용 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
CA2912180A1 (en) 2014-11-27
ES2713326T3 (es) 2019-05-21
JP2016519162A (ja) 2016-06-30
CN105307668A (zh) 2016-02-03
EP3000474A1 (en) 2016-03-30
RU2015154403A (ru) 2017-06-22
SG11201509447YA (en) 2016-02-26
KR20200087108A (ko) 2020-07-20
KR102133381B1 (ko) 2020-07-21
JP6392858B2 (ja) 2018-09-19
RU2683271C2 (ru) 2019-03-27
EP3000474A4 (en) 2017-01-18
WO2014189251A1 (ko) 2014-11-27
PH12015502587A1 (en) 2016-02-29
KR101492447B1 (ko) 2015-02-23
KR102058519B1 (ko) 2019-12-23
PL3000474T3 (pl) 2019-07-31
KR20150014530A (ko) 2015-02-06
US20160101050A1 (en) 2016-04-14
EP3000474B1 (en) 2018-11-28
PH12015502587B1 (en) 2016-02-29
KR20140136371A (ko) 2014-11-28
KR102204221B1 (ko) 2021-01-18
KR20200000395A (ko) 2020-01-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105307668B (zh) 包含环孢菌素的眼用纳米乳剂组合物和制备其的方法
Hegde et al. Microemulsion: new insights into the ocular drug delivery
Yu et al. Improving the topical ocular pharmacokinetics of lyophilized cyclosporine A-loaded micelles: formulation, in vitro and in vivo studies
Gawin-Mikołajewicz et al. Ophthalmic nanoemulsions: From composition to technological processes and quality control
JP2021107402A (ja) 眼科用薬物送達のための自己乳化薬物送達システム（ｓｅｄｄｓ）
Youshia et al. Design of cationic nanostructured heterolipid matrices for ocular delivery of methazolamide
JP5986296B2 (ja) シクロスポリン含有の無刺激性ナノエマルジョン目薬組成物
Wu et al. Ophthalmic delivery of brinzolamide by liquid crystalline nanoparticles: in vitro and in vivo evaluation
KR101890503B1 (ko) 안구 장애의 치료를 위한 막-부착성 자가-조립된 시스템
WO2020103958A1 (zh) 纳米晶滴眼剂、其制备方法及其应用
Mehrandish et al. A review on ocular novel drug delivery systems of antifungal drugs: functional evaluation and comparison of conventional and novel dosage forms
Mahboobian et al. Formulation development and evaluation of the therapeutic efficacy of brinzolamide containing nanoemulsions
Luo et al. Sorafenib-loaded nanostructured lipid carriers for topical ocular therapy of corneal neovascularization: development, in-vitro and in vivo study
CN103142462B (zh) 布林佐胺眼用制剂及其制备方法和用途
KR101008189B1 (ko) 안구건조증 치료용 사이클로스포린 함유 안과용 나노에멀젼 조성물
KR102273481B1 (ko) 사이클로스포린 및 멘톨 함유 나노 에멀젼 점안 조성물 및 그의 제조 방법
KR20150000405A (ko) 난용성 의약품의 수중유적형 에멀젼 조성물 및 이의 제조방법
Vikash et al. Formulation and evaluation of ocular self-nanoemulsifying drug delivery system of brimonidine tartrate
Liang et al. The effect of charges on the corneal penetration of solid lipid nanoparticles loaded Econazole after topical administration in rabbits
Agrahari et al. Ocular Suspension and Nanosuspension Products: Formulation Development Considerations
Rahman et al. Characterization and safety assessment of oil‐in‐water nanosized emulsions
Chaudhary et al. Role of nanoemulsion as drugs delivery systems in opthalmology: A Comprehensive review
Patel et al. Formulation development and optimization of phasetransition w/o microemulsion in situ gelling system for ocular delivery of timolol maleate in the treatment of glaucoma
WO2023103835A1 (zh) 一种酪氨酸激酶抑制剂眼用制剂及其制备方法和用途
JP2006089386A (ja) ステロイドまたはステロイド誘導体を含有する懸濁性医薬組成物

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant