CN105284619B - 多花指甲兰组织培养快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种多花指甲兰组织培养快繁方法，包括如下步骤：(1)取多花指甲兰果实作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到无菌试管苗；(3)将所述无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽。采用本发明所述的培养方法得到的多花指甲兰丛生芽增殖系数达到8‑10倍，甚至更多，能够在短时间内提供健壮的多花指甲兰优质种苗，有效解决多花指甲兰的规模化育苗问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种多花指甲兰组织培养的繁殖方法。更具体地说，本发明涉及一种多花指甲兰组织培养快速繁殖方法。
背景技术
多花指甲兰(Aerides rosea Lodd.ex Lindl.et Paxt.)为兰科的附生兰，其总状花序-30cm密生许多花，花白色而带紫色斑点十分艳丽，是园艺上重点观赏植物。自然条件下只有老死时才能从中下部长出1-2个小苗，种子繁殖由于胚发育不完全，自然条件不很难萌发。加之人工采挖的压力，生存环境的恶化，野生资源日益减少，多花指甲兰以被列入国家重点保护野生植物。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种多花指甲兰组织培养快繁方法，能够快速有效地提高多花指甲兰种苗的繁殖速度和质量，实现多花指甲兰优质种苗的工厂化育苗，以满足生产上的需要。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
(1)培育无菌试管苗
将经过预处理的多花指甲兰果实切开，取出种子接种到第一MS培养基中，培养温度23-27℃，光照强度1300-1600lux，光照时间8-10小时/天，培养时间55-65天，得无菌试管苗，其中，第一MS培养基的初始pH值为5.5-6.0，其包含：MS、0.4-0.6mg/L的6-苄基腺嘌呤、1.8-2.2mg/L的萘乙酸、1.8-2.2g/L的活性炭、25-35g/L的蔗糖以及4-6g/L的琼脂；
(2)无菌试管苗快速繁殖培养
将步骤(1)中得到的无菌试管苗置于第二MS培养基中，培养温度23-27℃，光照强度1400-1600lux，光照时间为8-10小时/天，培养时间55-65天,得试管苗丛生芽，其中第二MS培养基的初始pH值为5.8，其包含：MS、0.5-2.0mg/L的噻苯隆、0.2-1.5mg/L的2,4二氯苯氧乙酸、1.8-2.2mg/L的聚乙烯吡咯烷酮、25-35g/L的蔗糖和4-6g/L的琼脂。
优选的是，所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述步骤(1)中的预处理包括：选取多花指甲兰果实，用体积分数为1-3％的洗洁精水溶液浸泡4-6min，并用流水冲洗15-30min，再用氯化汞消毒10-15min，无菌水冲洗3-5次，除去表面水分，得到处理后的多花指甲兰果实，其中每100ml氯化汞加入2-3滴吐温-20。
优选的是，所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述预处理中，除去表面水分，具体为采用消毒滤纸除去表面水分。
优选的是，所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述活性炭为AC活性炭。
优选的是，所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。
优选的是，所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述预处理中，在除去表面水分后，还包括：将除去水分后的多花指甲兰果实用波长为200nm的紫外线照射处理10min。
优选的是，所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，萘乙酸的浓度为2.0mg/L。
优选的是，所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述步骤(1)中，取出种子接种到第一MS培养基中，具体为：
步骤A、向组培瓶底部由下至上依次铺设厚度为1mm的火山泥层、厚度为2mm的海底泥层以及厚度为1mm的火山泥层形成的层状结构，在所述海底泥层表面覆盖一层防水透气膜，再向组培瓶中投入第一MS培养基，此处的组培瓶为圆柱状的口径较大的组培瓶；
步骤B、在所述第一MS培养基表面放置水平设置的网板，按压所述网板至接触所述火山泥层，所述网板的网格均为边长为8mm的正方形，所述网板表面均匀涂覆厚度为1mm的聚丙烯酰胺层，并在聚丙烯酰胺层表面覆盖一层滤布，所述网板高度略低于所述第一MS培养基的深度，以使得所述网板淹没在所述第一MS培养基内；
步骤C、在所述网板的每个网格靠近中间的位置，竖直设置一个直径为2mm的管体，使其卡设在所述层状结构上，其中，所述管体的高度高于所述第一MS培养基的深度，所述管体位于所述第一MS培养基的部分均匀间隔开设多个直径为0.8mm的通孔；
步骤D、向所述第一MS培养基中均匀投放种子。
本发明至少包括以下有益效果：
(1)采用生物技术对多花指甲兰进行组织培养快速繁殖，能够在短时间内培育出大量适合栽培种植的多花指甲兰幼苗，保障多花指甲兰种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。
(2)采用本发明所述的培养方法得到的多花指甲兰丛生芽增殖系数达到8-10倍，丛生芽健壮，接种到生根培养基后容易生根。
(3)本发明所采用的培养基选用新型高效的细胞分裂素-噻苯隆，其可以高效促进细胞分裂，用于组织培养，可以更好的促进植物的芽分化，对人畜低毒；而且培养基中还添加了2,4-二氯苯氧乙酸，其作为一种生长素类似物，具有很好的调节植物生长的作用。
(4)本发明在培养基中架设网板，并在网板上涂覆聚丙烯酰胺层，聚丙烯酰胺具有很好的保水作用，刚开始可以吸收培养基的水分进行保存，随着培养的进行，培养基中的水分逐渐减少，聚丙烯酰胺将释放其之前吸收的水分，为后期种子的发育提供更好的条件，而且在网格中间卡设一管体，管体开设多个通孔，每隔一段时间，可以往管体内输送空气，即为培养基内输送空气，提高培养基内的含氧量，为种子发芽的提高条件；并在组培瓶底部铺设海底泥和火山泥，其中含有大量的矿物元素，亦有利于种子发芽。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
<实施例1>
一种多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
(1)培育无菌试管苗
将经过预处理的多花指甲兰果实切开，取出种子接种到第一MS培养基中，培养温度23℃，光照强度1300lux，光照时间8小时/天，培养时间55天，得无菌试管苗，其中，第一MS培养基的初始pH值为5.5，其包含：MS、0.4mg/L的6-苄基腺嘌呤、1.8mg/L的萘乙酸、1.8g/L的活性炭、25g/L的蔗糖以及4g/L的琼脂；
(2)无菌试管苗快速繁殖培养
将步骤(1)中得到的无菌试管苗置于第二MS培养基中，培养温度23-27℃，光照强度1400lux，光照时间为8小时/天，培养时间55天,得试管苗丛生芽，其中第二MS培养基的初始pH值为5.8，其包含：MS、0.5mg/L的噻苯隆、0.2mg/L的2,4二氯苯氧乙酸、1.8mg/L的聚乙烯吡咯烷酮、25-35g/L的蔗糖和4-6g/L的琼脂。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述步骤(1)中的预处理包括：选取多花指甲兰果实，用体积分数为1％的洗洁精水溶液浸泡4min，并用流水冲洗15min，再用氯化汞消毒10min，无菌水冲洗3次，除去表面水分，得到处理后的多花指甲兰果实，其中每100ml氯化汞加入2滴吐温-20。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述预处理中，除去表面水分，具体为采用消毒滤纸除去表面水分。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述活性炭为AC活性炭。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述预处理中，在除去表面水分后，还包括：将除去水分后的多花指甲兰果实用波长为200nm的紫外线照射处理10min。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述步骤(1)中，取出种子接种到第一MS培养基中，具体为：
步骤A、向组培瓶底部由下至上依次铺设厚度为1mm的火山泥层、厚度为2mm的海底泥层以及厚度为1mm的火山泥层形成的层状结构，在所述海底泥层表面覆盖一层防水透气膜，再向组培瓶中投入第一MS培养基；
步骤B、在所述第一MS培养基表面放置水平设置的网板，按压所述网板至接触所述火山泥层，所述网板的网格均为边长为8mm的正方形，所述网板表面均匀涂覆厚度为1mm的聚丙烯酰胺层，并在聚丙烯酰胺层表面覆盖一层滤布，所述网板高度略低于所述第一MS培养基的深度，以使得所述网板淹没在所述第一MS培养基内；
步骤C、在所述网板的每个网格靠近中间的位置，竖直设置一个直径为2mm的管体，使其卡设在所述层状结构上，其中，所述管体的高度高于所述第一MS培养基的深度，所述管体位于所述第一MS培养基的部分均匀间隔开设多个直径为0.8mm的通孔；
步骤D、向所述第一MS培养基中均匀投放种子。
丛生芽增殖系数为10.5。
<实施例2>
一种多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
(1)培育无菌试管苗
将经过预处理的多花指甲兰果实切开，取出种子接种到第一MS培养基中，培养温度25℃，光照强度1400lux，光照时间9小时/天，培养时间60天，得无菌试管苗，其中，第一MS培养基的初始pH值为5.8，其包含：MS、0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤、2.0mg/L的萘乙酸、2.0g/L的活性炭、30g/L的蔗糖以及5g/L的琼脂；
(2)无菌试管苗快速繁殖培养
将步骤(1)中得到的无菌试管苗置于第二MS培养基中，培养温度25℃，光照强度1500lux，光照时间为9小时/天，培养时间60天,得试管苗丛生芽，其中第二MS培养基的初始pH值为5.8，其包含：MS、1.5mg/L的噻苯隆、1.0mg/L的2,4二氯苯氧乙酸、2.0mg/L的聚乙烯吡咯烷酮、30g/L的蔗糖和5g/L的琼脂。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述步骤(1)中的预处理包括：选取多花指甲兰果实，用体积分数为2％的洗洁精水溶液浸泡5min，并用流水冲洗24min，再用氯化汞消毒13min，无菌水冲洗4次，除去表面水分，得到处理后的多花指甲兰果实，其中每100ml氯化汞加入2.5滴吐温-20。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述预处理中，除去表面水分，具体为采用消毒滤纸除去表面水分。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述活性炭为AC活性炭。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述预处理中，在除去表面水分后，还包括：将除去水分后的多花指甲兰果实用波长为200nm的紫外线照射处理10min。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述步骤(1)中，取出种子接种到第一MS培养基中，具体为：
步骤A、向组培瓶底部由下至上依次铺设厚度为1mm的火山泥层、厚度为2mm的海底泥层以及厚度为1mm的火山泥层形成的层状结构，在所述海底泥层表面覆盖一层防水透气膜，再向组培瓶中投入第一MS培养基；
步骤B、在所述第一MS培养基表面放置水平设置的网板，按压所述网板至接触所述火山泥层，所述网板的网格均为边长为8mm的正方形，所述网板表面均匀涂覆厚度为1mm的聚丙烯酰胺层，并在聚丙烯酰胺层表面覆盖一层滤布，所述网板高度略低于所述第一MS培养基的深度，以使得所述网板淹没在所述第一MS培养基内；
步骤C、在所述网板的每个网格靠近中间的位置，竖直设置一个直径为2mm的管体，使其卡设在所述层状结构上，其中，所述管体的高度高于所述第一MS培养基的深度，所述管体位于所述第一MS培养基的部分均匀间隔开设多个直径为0.8mm的通孔；
步骤D、向所述第一MS培养基中均匀投放种子。
丛生芽增殖系数为12.9。
<实施例3>
一种多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：
(1)培育无菌试管苗
将经过预处理的多花指甲兰果实切开，取出种子接种到第一MS培养基中，培养温度27℃，光照强度1600lux，光照时间10小时/天，培养时间65天，得无菌试管苗，其中，第一MS培养基的初始pH值为6.0，其包含：MS、0.6mg/L的6-苄基腺嘌呤、2.2mg/L的萘乙酸、2.2g/L的活性炭、35g/L的蔗糖以及6g/L的琼脂；
(2)无菌试管苗快速繁殖培养
将步骤(1)中得到的无菌试管苗置于第二MS培养基中，培养温度27℃，光照强度1600lux，光照时间为10小时/天，培养时间65天,得试管苗丛生芽，其中第二MS培养基的初始pH值为5.8，其包含：MS、2.0mg/L的噻苯隆、1.5mg/L的2,4二氯苯氧乙酸、2.2mg/L的聚乙烯吡咯烷酮、35g/L的蔗糖和6g/L的琼脂。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述步骤(1)中的预处理包括：选取多花指甲兰果实，用体积分数为3％的洗洁精水溶液浸泡6min，并用流水冲洗30min，再用氯化汞消毒15min，无菌水冲洗5次，除去表面水分，得到处理后的多花指甲兰果实，其中每100ml氯化汞加入3滴吐温-20。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述预处理中，除去表面水分，具体为采用消毒滤纸除去表面水分。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述活性炭为AC活性炭。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述预处理中，在除去表面水分后，还包括：将除去水分后的多花指甲兰果实用波长为200nm的紫外线照射处理10min。
所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，所述步骤(1)中，取出种子接种到第一MS培养基中，具体为：
步骤A、向组培瓶底部由下至上依次铺设厚度为1mm的火山泥层、厚度为2mm的海底泥层以及厚度为1mm的火山泥层形成的层状结构，在所述海底泥层表面覆盖一层防水透气膜，再向组培瓶中投入第一MS培养基；
步骤B、在所述第一MS培养基表面放置水平设置的网板，按压所述网板至接触所述火山泥层，所述网板的网格均为边长为8mm的正方形，所述网板表面均匀涂覆厚度为1mm的聚丙烯酰胺层，并在聚丙烯酰胺层表面覆盖一层滤布，所述网板高度略低于所述第一MS培养基的深度，以使得所述网板淹没在所述第一MS培养基内；
步骤C、在所述网板的每个网格靠近中间的位置，竖直设置一个直径为2mm的管体，使其卡设在所述层状结构上，其中，所述管体的高度高于所述第一MS培养基的深度，所述管体位于所述第一MS培养基的部分均匀间隔开设多个直径为0.8mm的通孔；
步骤D、向所述第一MS培养基中均匀投放种子。
丛生芽增殖系数为12.1。
<实施例4>
本发明所述的多花指甲兰组织培养繁育方法的一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取多花指甲的果实作为外植体，依次用2v/v％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1v/v％升汞消毒10-15min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体萌发获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体在超净台内用无菌解剖刀切开果实，取出种子接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加了0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2.0mg/L的萘乙酸NAA、2.0g/L活性炭AC、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加了0.5mg/L的噻苯隆TDZ、0.5mg/L2,4二氯苯氧乙酸、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。丛生芽增殖系数为8.6。
<实施例5>
本发明所述的多花指甲兰组织培养繁育方法的又一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取多花指甲的果实作为外植体，依次用2v/v％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1v/v％升汞消毒10-15min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体萌发获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体在超净台内用无菌解剖刀切开果实，取出种子接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加了0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2.0mg/L的萘乙酸NAA、2.0g/L活性炭AC、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加了0.5mg/L的噻苯隆TDZ、1.0mg/L2,4二氯苯氧乙酸、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。丛生芽增殖系数为9.0。
<实施例6>
本发明所述的多花指甲兰组织培养繁育方法的再一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取多花指甲的果实作为外植体，依次用2v/v％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1v/v％升汞消毒10-15min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体萌发获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体在超净台内用无菌解剖刀切开果实，取出种子接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加了0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2.0mg/L的萘乙酸NAA、2.0g/L活性炭AC、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加了1.5mg/L的噻苯隆TDZ、1.0mg/L2,4二氯苯氧乙酸、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。丛生芽增殖系数为11.2。
<实施例7>
本发明所述的多花指甲兰组织培养繁育方法的再一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取多花指甲的果实作为外植体，依次用2v/v％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1v/v％升汞消毒10-15min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体萌发获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体在超净台内用无菌解剖刀切开果实，取出种子接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加了0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2.0mg/L的萘乙酸NAA、2.0g/L活性炭AC、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加了2.0mg/L的噻苯隆TDZ、1.0mg/L2,4二氯苯氧乙酸、2.0mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。丛生芽增殖系数为9.7。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于此。
Claims (6)
1.一种多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)培育无菌试管苗
将经过预处理的多花指甲兰果实切开，取出种子接种到第一MS培养基中，培养温度23-27℃，光照强度1300-1600lux，光照时间8-10小时/天，培养时间55-65天，得无菌试管苗，其中，第一MS培养基的初始pH值为5.5-6.0，其包含：MS、0.4-0.6mg/L的6-苄基腺嘌呤、1.8-2.2mg/L的萘乙酸、1.8-2.2g/L的活性炭、25-35g/L的蔗糖以及4-6g/L的琼脂；
(2)无菌试管苗快速繁殖培养
将步骤(1)中得到的无菌试管苗置于第二MS培养基中，培养温度23-27℃，光照强度1400-1600lux，光照时间为8-10小时/天，培养时间55-65天,得试管苗丛生芽，其中第二MS培养基的初始pH值为5.8，其包含：MS、0.5-2.0mg/L的噻苯隆、0.2-1.5mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸、1.8-2.2mg/L的聚乙烯吡咯烷酮、25-35g/L的蔗糖和4-6g/L的琼脂；
其中，所述步骤(1)中，取出种子接种到第一MS培养基中，具体步骤为：
步骤A、向组培瓶底部由下至上依次铺设厚度为1mm的火山泥层、厚度为2mm的海底泥层以及厚度为1mm的火山泥层形成的层状结构，在所述海底泥层表面覆盖一层防水透气膜，再向组培瓶中投入第一MS培养基；
步骤B、在所述第一MS培养基表面放置水平设置的网板，按压所述网板至接触所述火山泥层，所述网板的网格均为边长为8mm的正方形，所述网板表面均匀涂覆厚度为1mm的聚丙烯酰胺层，并在聚丙烯酰胺层表面覆盖一层滤布，所述网板高度略低于所述第一MS培养基的深度，以使得所述网板淹没在所述第一MS培养基内；
步骤C、在所述网板的每个网格靠近中间的位置，竖直设置一个直径为2mm的管体，使其卡设在所述层状结构上，其中，所述管体的高度高于所述第一MS培养基的深度，所述管体位于所述第一MS培养基的部分均匀间隔开设多个直径为0.8mm的通孔；
步骤D、向所述第一MS培养基中均匀投放种子。
2.如权利要求1所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述步骤(1)中的预处理包括：选取多花指甲兰果实，用体积分数为1-3％的洗洁精水溶液浸泡4-6min，并用流水冲洗15-30min，再用氯化汞消毒10-15min，无菌水冲洗3-5次，除去表面水分，得到处理后的多花指甲兰果实，其中每100ml氯化汞加入2-3滴吐温-20。
3.如权利要求2所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述预处理中，除去表面水分，具体为采用消毒滤纸除去表面水分。
4.如权利要求2所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述无菌水为经高压灭菌的蒸馏水。
5.如权利要求2所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述预处理中，在除去表面水分后，还包括：将除去水分后的多花指甲兰果实用波长为200nm的紫外线照射处理10min。
6.如权利要求1所述的多花指甲兰组织培养快速繁殖方法，其特征在于，萘乙酸的浓度为2.0mg/L。
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