CN105233274A - 一种包含肉苁蓉和酵素的口服组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种可口服的含有肉苁蓉和酵素的组合物,该组合物具有改善肠胃、促进吸收的功能,对肠胃功能失调、吸收能力弱的老年人尤其适用,同时该组合物具有提高人体免疫力、抗疲劳、抗衰老的功效。
Description
技术领域
本发明涉及口服组合物及其制备工艺,特别是涉及一种含有肉苁蓉和酵素的组合物及其制备工艺。
背景技术
酵素又称为“酶”,是生物本身自然生成的物质,酵素是具有生物催化功能的生物大分子,即生物催化剂。它能够加快生化反应的速度,但是不改变反应的方向和产物。也就是说,酵素只能用于加速各类生化反应的速度,但并不是生化反应本身。它存在于所有活的动植物体内,是维持机体正常功能、消化食物、修复组织等生命活动的一种必需物质。
酵素在营养保健、临床医学、美容护理、减肥瘦身、养生保健、亚健康调理等领域的研究与利用已经浮出水面,目前生产酵素的原料基质主要以谷物、蔬菜、水果、食用菌为主,对于中药酵素的研究较少。
然而,发酵法一直是中药炮制的方法之一,它借助微生物的作用、改变原有药性、提高疗效、降低毒副作用,扩大适应症。微生物在生长过程中产生的各种酶,将药物的成分分解转化为新的活性成分或将毒性成分分解而减低药物的毒副作用。用现代生物工程技术与传统的中药制剂方法相结合,将生物发酵技术应用到中药研制中,使药物可吸收有效大分子变成小分子更易被人体吸收,更易到达靶器官发挥作用。不仅如此,应用生物发酵工艺生产的中药制剂中,不仅含有中药本身的生理活性物质,而且还富含菌种和基质在发酵制备过程中产生的多种维生物、丰富的氨基酸及多种有益的微量元素,这些营养成分组合合理,极易被机体吸收和利用,达到药食同源的目的。
肉苁蓉载于《神农本草经》,列为上品,具有补肾阳、益精血、润肠通便等功效。《中国药典》收载的肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉和管花肉苁蓉干燥带鳞叶的肉质茎。肉苁蓉主要含有苯乙醇苷、环烯醚萜苷、木脂素及甾醇等化学成分,其中苯乙醇总苷是肉苁蓉中的主要活性成分,具有壮阳、抗氧化、抗衰老、提高免疫力、增强记忆力等多种功能。
现有技术存在将肉苁蓉制备为营养、保健食品的报道:
CN1483450A“营养保健食品及其制法”公开了一种含有肉苁蓉的营养保健食品,其中将肉苁蓉与部分其它原料混合,加入乙醇浸泡、提取,然后经干燥、粉碎等工序压制成片。
CN102813753A公开了一种组合物,其含有肉苁蓉、以及含有菊花和牛磺酸、叶黄素、β胡萝卜素或盐藻素、番茄红素或虾青素或葡萄籽其中的一种或几种;所用苁蓉包括苁蓉原生料、苁蓉提取物,其生理上可接受的盐及其衍生物。
CN103960668A“一种锁阳肉苁蓉组合物及其制备方法”公开了一种含有肉苁蓉的组合物,其采用粒径在1-150微米的肉苁蓉粉末。
CN102919850A公开了一种用于营养和药品的组合物,其含有苁蓉,所用苁蓉为苁蓉原生料、苁蓉提取物,其生理上可接受的盐及其衍生物。
但将肉苁蓉与酵素组合制备的组合物及其制备工艺在现有技术中还没有研究。
发明内容
本发明提供一种可口服的含有肉苁蓉和酵素的组合物,该组合物具有改善肠胃、促进吸收的功能,对肠胃功能失调、吸收能力弱的老年人尤其适用,同时该组合物具有提高人体免疫力、抗疲劳、抗衰老的功效。
用于本发明的肉苁蓉有草苁蓉、盐生苁蓉、沙苁蓉、荒漠肉苁蓉、管花肉苁蓉。挑选新鲜肉苁蓉肉质茎,或采用置于工业冷藏库保鲜的新鲜肉苁蓉肉质茎,或采用工业冷冻库冷藏的速冻肉苁蓉肉质茎,或选用精选的肉苁蓉肉质茎及碎料作为原料;将原料清洗后打浆,干燥获得肉苁蓉粉;或是将原料进行干燥,将干品粉碎后获得肉苁蓉粉或肉苁蓉颗粒;或将原料用适宜的溶剂进行提取获得浸膏,根据需要将浸膏进一步干燥为浸膏粉。
用于本发明的酵素可选自肉苁蓉酵素、锁阳酵素、其它中草药酵素、食品酵素等的一种或多种。所述其他中草药酵素选自天然中草药经微生物发酵技术酿制的酵素,进一步选自当归、党参、黄芪、枸杞、芦荟、冬虫夏草、人参、桂圆、薄荷、决明子、山楂、灵芝等一种或多种中草药酵素;所述食品酵素包括但不限于谷物类酵素、水果类酵素、蔬菜类酵素、坚果类酵素、食用菌酵素以及海底机物酵素等一种或多种。用于本发明的谷物包含但不限于小麦、大米、玉米、小米、豆类;所述蔬菜包含但不限于叶类、根茎类、果实类,如黄瓜、香瓜、西瓜、苦瓜、野菜、椰菜、萝卜、白菜、豆芽、莴苣、芹菜等;所述水果包含但不限于橘子、番茄、柠檬、葡萄、各类梨、苹果、木瓜、杨桃、草莓等;所述坚果包含但不限于核桃、花生、榛子、松籽等。所述食用菌包含但不限于各类蘑菇;所述海底植物包含但不限于海带、紫菜等。
用于本发明的酵素在制备过程中没有损失或破坏原料营养成分,显著提高了所述组合物的药用及营养保健价值。
本发明的组合物可进一步包括药学可接受的辅料,根据剂型的需要可选择填充剂、润滑剂、乳化剂、稳定剂、助悬剂、粘合剂、增稠剂、矫味剂等。
本发明的组合物可制备为药品、保健品以及食品添加剂,所述药品和/或保健品的剂型选自硬胶囊、软胶囊、微胶囊、颗粒剂、片剂、粉剂、口服液、膏剂以及丸剂如蜜丸。所述片剂可以为单层片、双层片或多层片;所述单层片是组合物的原料混匀后压片而成;所述双层片是指肉苁蓉与酵素分别在上下或左右两层片中;所述多层片是指肉苁蓉和酵素分别在不同的层中,以层夹的方式压制而成。作为食品添加剂,可以添加在食品或饮品中,所述食品和/或饮品包括肉类、五谷杂粮、酱类、罐头,蜂蜜、奶制品、面粉、鸡蛋、食用油、水果、调料、双岐因子、食用无机盐、饮料、袋泡茶、冷饮制品、刨冰制品、酒及酒精饮料、牛奶、豆浆、奶茶等。所述糖选自白砂糖、蔗糖、果糖、葡萄糖、红糖中的一种或几种。所述双岐因子选自以下组成中的一种或几种:功能性低聚糖类,包括乳果低聚糖、果糖低聚糖、低聚木糖、异麦芽低聚糖、大豆低聚糖、低聚甘露糖、水苏糖、低聚果糖、大豆低聚糖、低聚乳糖、棉籽糖、帕拉金糖、低聚龙胆糖、聚葡萄糖、野芝麻四糖、壳聚糖、低聚葡萄糖、低聚焦糖和低聚木糖等;蛋白水解产物及一些蛋白质类物质,包括胃粘膜蛋白水解产物,酪蛋白水解物等;多糖类物质,包括云芝多糖的水提取物,胡萝卜素中的含氮多糖等。作为食品添加剂,其以膏剂、颗粒剂、粉剂或液体制剂的形式存在。
本发明组合物中肉苁蓉与酵素的含量为有效剂量,可根据品质、口感和患者的需要做适宜性调整。
肉苁蓉酵素的制备:
用于本发明的肉苁蓉酵素是以肉苁蓉为核心基质,通过现代生物发酵技术而制得。
用于制备本发明肉苁蓉酵素的原料主要是肉苁蓉,进一步可含有谷物、蔬菜、水果、坚果、食用菌、草本(其他中药材)以及海底植物等。
用于本发明肉苁蓉酵素的肉苁蓉是指新鲜的肉苁蓉、干燥的肉苁蓉或经过各种炮制方法炮制的肉苁蓉饮片,所述肉苁蓉选自肉苁蓉、管花肉苁蓉、盐生肉苁蓉、沙苁蓉和/或草苁蓉。其中新鲜的肉苁蓉在净选后切成适宜大小的片状、条状或粒状用于发酵处理,或打磨成浆液用于发酵处理。对于干燥肉苁蓉或肉苁蓉饮片可经浸泡后制备成适宜大小的片状、条状或粒状用于发酵处理,或打磨成浆液用于发酵处理,或不经浸泡直接磨成粉末进行发酵处理。
用于本发明的所述谷物包含但不限于小麦、大米、玉米、小米、豆类;所述蔬菜包含但不限于叶类、根茎类、果实类,如黄瓜、香瓜、西瓜、苦瓜、野菜、椰菜、萝卜、白菜、豆芽、莴苣、芹菜等;所述水果包含但不限于橘子、番茄、柠檬、葡萄、各类梨、苹果、木瓜、杨桃、草莓等。所述坚果包含但不限于核桃、花生、榛子、松籽等。所述食用菌包含但不限于各类蘑菇。所述草本包含但不限于枸杞、人参、芦荟、冬虫夏草、灵芝等。所述海底植物包含但不限于海带、紫菜等。上述材料以浆液或粉末的形式使用。
用于本发明的发酵方式有液体发酵方法和固体发酵方法。
液体发酵方法:
将发酵菌种接种于含有液体培养基的发酵基质后在一定条件下发酵。
用于本发明的液体发酵菌种包括但不限于酵母菌、乳酸菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、双岐杆菌、米曲霉、蜜环菌、虫草菌、灵芝菌、朱红菌等一种或多种能够用于食物或药物发酵的菌种。
用于本发明液体发酵的培养基是用于食物或药物常见的培养基如包括但不限于麦芽汁培养基、水果浆液培养基、谷物水溶液培养基等。所述培养基中可以加入糖类、氮源和无机盐。所述糖类包括但不限于白糖、红糖、低聚糖类、糖醇类、冰糖、蜂蜜等。作为优选,所述糖类的加入量为原料总重量的0-8%。所述氮源包括但不限于酵母粉、蛋白胨、黄豆饼粉、玉米浆、鱼粉、蚕蛹粉、麸皮等。作为优选,所述氮源的加入量为原料总重量的0-10%。所述无机盐包括但不限于硫酸铵、氯化锰、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾等。作为优选,所述无机盐的加入量为原料总重量的0-3%。优选地,在发酵过程中,根据菌种的不同分阶段植入培养基。
用于本发明液体发酵的方法包括如下步骤:
(1)对原材料进行杀菌处理,此处的杀菌处理包括低温杀菌、射线杀菌、化学杀菌等不破坏原材料品质的杀菌处理方法;
(2)制备培养基:采用本领域常规方法制备各种液体发酵培养基,包括但不限于麦芽汁培养基、水果浆液培养基、谷物水溶液培养基。
作为优选,所述麦芽汁培养基是将麦芽经过筛选、清洗、干燥,制得的干麦芽经糖化、糊化、过滤等工序而成。作为优选,所述麦芽为大麦麦芽或小麦麦芽。作为优选,所述干燥为晒干或烘干。作为优选,所述糖化采用酸法、酶法或酸酶结合法糖化。
作为优选,所述水果浆液培养基是取水果可食用部分,经清洗、打浆(加水或不加水)、过滤制得。
作为优选,所述谷物水溶液培养基是将谷物去杂、清洗、研磨后,加水煮沸、过滤而得。
作为优选,所述培养基在使用前需经灭菌处理。
作为优选,所述麦芽汁培养基适于仅以中药材为发酵基质;当发酵基质中含有水果时可以以水果浆液作为培养基;如果发酵基质中含有谷物类物质时可以以谷物的水溶液作为培养基。这种原则仅做一般性指导,当发酵基质中碳水化合物和水含量足够用于发酵菌生长时,则可以使用发酵基质作为培养基。
(3)制备发酵基质:在灭菌培养基中,加入肉苁蓉原料,优选加入打磨成浆液的肉苁蓉原料。作为优选,所述肉苁蓉原料的加入量为培养基的0.5-8%(w/v)或0.5-5%(v/v)。进一步优选加入其他中药材粉末,更进一步优选加入谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物等其中的一种或多种。其他中药材或谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物可以粉末形式依据常规用量加入,一般为0-10%(w/v)。
(4)菌种植入并发酵:将选择的菌种进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。作为优选,所述菌种为厌氧菌种、奸氧菌种或厌氧与好氧菌种兼用。所述厌氧、好氧菌种的植入量为发酵基质5-16%(w/w),或8-12%(w/w)、或10%(w/w)。作为优选,所述扩大培养包括固体斜面培养、摇瓶培养和/或种子罐培养。作为优选,所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖2-4%、蛋白胨1-3%、豆粉1-2%、琼脂2-4%、硫酸镁0.05-0.08%、磷酸二氢钾0.2-0.3%、氯化钠0.1-0.3%。作为优选,所述摇瓶培养的培养基包括葡萄糖2-3%,蛋白胨1-4%,豆粉0.5-2%,麸皮0.5-2%,硫酸镁0.01-0.1%,磷酸二氢钾0.1-0.4%、磷酸氢二钾0.1-0.2%。作为优选,所述摇瓶的转速为200转/min。作为优选,所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.5%-1.5%、蛋白胨1%-2%、玉米浆0.5%-1.0%、磷酸二氢钾0.03%-0.05%、硫酸锌0.02%-0.07%、氯化镁0.04%-0.08%,其余为水。
作为优选,当选择厌氧菌种时,在厌氧条件下于25-40℃密封静置培养15-40天,或发酵温度为28-35℃、30-32℃或31℃,发酵时间为21-35天、25-28天或27天。
进一步优选,当选择好氧菌种时,在通气条件下于22-35℃发酵7-30天,或发酵温度为25-30℃或28℃,发酵时间为14-25天或18-22天或20天。所通气体为无菌空气,通气量为2.5-5.0L/min。
更进一步优选,所述发酵分阶段进行,第一阶段为好氧发酵,选择好氧菌种,发酵温度为22-35℃,无菌空气通气量为2.5-5.0L/min,好氧发酵时间为7-30天;第二阶段转为厌氧发酵,选择厌氧菌种,关闭通气,控制发酵温度为25-40℃,厌氧发酵时间为15-40天。
(5)抽取发酵后的液体,经过滤后得到肉苁蓉酵素。
固体发酵方法:
将发酵菌种接种于含有固体培养基的发酵基质后在一定条件下发酵。
用于本发明的固体发酵菌种包括但不限于酵母菌、乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、芽孢杆菌、双岐杆菌、米曲霉、蜜环菌、虫草菌、灵芝菌、朱红菌等一种或多种能够用于食物或药物发酵的菌种。
用于本发明固体发酵的培养基是用于食物或药物常见的培养基如包括但不限于麦芽汁固体培养基、水果培养基、谷物培养基等。所述培养基中可以加入糖类、氮源和无机盐。所述糖类包括但不限于白糖、红糖、低聚糖类、糖醇类、冰糖、蜂蜜等。作为优选,所述糖类的加入量为原料总重量的0.8%。所述氮源包括但不限于酵母粉、蛋白胨、黄豆饼粉、玉米浆、鱼粉、蚕蛹粉、麸皮等。作为优选,所述氮源的加入量为原料总重量的0-10%。所述无机盐包括但不限于硫酸铵、氯化锰、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾等。作为优选,所述无机盐的加入量为原料总重量的0-3%。优选地,在发酵过程中,根据菌种的不同分阶段植入培养基。
用于本发明固体发酵的方法包括如下步骤:
(1)对原材料进行杀菌处理,此处的杀菌处理包括低温杀菌、射线杀菌、化学杀菌等不破坏原材料品质的杀菌处理方法;
(2)制备培养基:采用本领域常规方法制备各种液体发酵培养基,包括但不限于麦芽汁固体培养基、水果培养基、谷物培养基。
作为优选,所述麦芽汁固体培养基是将麦芽经过筛选、清洗、干燥,制得的干麦芽经糖化、糊化、过滤等工序,最后加入琼脂制成。作为优选,所述麦芽为大麦麦芽或小麦麦芽。作为优选,所述干燥为晒干或烘干。作为优选,所述糖化采用酸法、酶法或酸酶结合法糖化。作为优选,所述琼脂的加入量为1-5%(g/100mL),或2-4%(g/100mL)、或3%(g/100mL)。
作为优选,所述水果培养基是取水果可食用部分,经清洗、打浆(加水或不加水)、过滤、浓缩,最后加入琼脂制得。作为优选,所述浓缩至浆液中固含量为3-15%(g/100mL)、或5-10%(g/100mL)、或8%(g/100mL)。作为优选,所述琼脂的加入量为1-5%(g/100mL),或2-4%(g/100mL)、或3%(g/100mL)。
作为优选,所述谷物培养基是将谷物去杂、清洗、研磨后,加水煮沸、过滤,加入琼脂而得。作为优选,所述琼脂的加入量为1-5%(g/100mL),或2-4%(g/100mL)、或3%(g/100mL)。
作为优选,所述培养基在使用前需经灭菌处理。
作为优选,所述麦芽汁固体培养基适于仅以中药材为发酵基质;当发酵基质中含有水果时可以选择水果培养基;如果发酵基质中含有谷物类物质时可以选择谷物培养基。这种原则仅做一般性指导,当发酵基质中碳水化合物和水含量足够用于发酵菌生长时,则可以使用发酵基质作为培养基。
(3)制备发酵基质:在灭菌培养基中,加入肉苁蓉原料,优选加入切成适宜大小的片状、条状或粒状的肉苁蓉原料。作为优选,所述肉苁蓉原料的加入量为培养基的0.5-8%(w/w)、或1.5%(w/w)、或2.5%(w/w)。进一步优选加入其他中药材粉末,更进一步优选加入谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物等其中的一种或多种。其他中药材或谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物可以粉末形式依据常规用量加入,一般为0-10%(w/w)。
(4)菌种植入并发酵:将选择的菌种进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。作为优选,所述菌种为厌氧菌种、好氧菌种或厌氧与好氧菌种兼用。所述厌氧、好氧菌种的植入量为发酵基质5-16%(w/w),或8-12%(w/w)、或10%(w/w)。作为优选,所述扩大培养包括固体斜面培养、摇瓶培养和/或种子罐培养。作为优选,所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖2-4%、蛋白胨1-3%、豆粉1-2%、琼脂2-4%、硫酸镁0.05-0.08%、磷酸二氢钾0.2-0.3%、氯化钠0.1-0.3%。作为优选,所述摇瓶培养的培养基包括葡萄糖2-3%,蛋白胨1-4%,豆粉0.5-2%,麸皮0.5-2%,硫酸镁0.01-0.1%,磷酸二氢钾0.1-0.4%、磷酸氢二钾0.1-0.2%。作为优选,所述摇瓶的转速为200转/min。作为优选,所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.5%-1.5%、蛋白胨1%-2%、玉米浆0.5%-1.0%、磷酸二氢钾0.03%-0.05%、硫酸锌0.02%-0.07%、氯化镁0.04%-0.08%,其余为水。
作为优选,当选择厌氧菌种时,在厌氧条件下于25-40℃密封静置培养15-40天,或发酵温度为28-35℃、30-32℃或31℃,发酵时间为21-35天、25-28天或27天。
进一步优选,当选择好氧菌种时,在通气条件下于22-35℃发酵7-30天,或发酵温度为25-30℃或28℃,发酵时间为14-25天或18-22天或20天。所通气体为无菌空气,通气量为2.5-5.0L/min。
更进一步优选,所述发酵分阶段进行,第一阶段为好氧发酵,选择好氧菌种,发酵温度为22-35℃,无菌空气通气量为2.5-5.0L/min,好氧发酵时间为7-30天;第二阶段转为厌氧发酵,选择厌氧菌种,关闭通气,控制发酵温度为25-40℃,厌氧发酵时间为15-40天。
(5)收集培养基,制备本发明肉苁蓉酵素。
锁阳酵素的制备
本发明以锁阳为核心基质,通过现代生物发酵技术,提供一种锁阳酵素。
用于制备本发明锁阳酵素的原料主要是锁阳,进一步含有谷物、蔬菜、水果、坚果、食用菌、草木(其他中药材)以及海底植物等。
用于本发明的锁阳是指新鲜的锁阳、干燥的锁阳或经过各种炮制方法炮制的锁阳饮片。其中新鲜的锁阳在净选后切成适宜大小的片状、条状或粒状用于发酵处理,或打磨成浆液用于发酵处理。对于干燥锁阳或锁阳饮片可经浸泡后制备成适宜大小的片状、条状或粒状用于发酵处理,或打靡成浆液用于发酵处理,或不经浸泡直接磨成粉末进行发酵处理。
用于本发明的所述谷物包含但不限于小麦、大米、玉米、小米、豆类;所述蔬菜包含但不限于叶类、根茎类、果实类,如黄瓜、香瓜、西瓜、苦瓜、野菜、椰菜、萝卜、白菜、豆芽、莴苣、芹菜等;所述水果包含但不限于橘子、番茄、柠檬、葡萄、各类梨、苹果、木瓜、杨桃、草莓等。所述坚果包含但不限于核桃、花生、榛子、松籽等。所述食用菌包含但不限于各类蘑菇。所述草本包含但不限于枸杞、人参、芦荟、冬虫夏草、灵芝等。所述海底植物包含但不限于海带、紫菜等。上述材料以浆液或粉末的形式使用。
用于本发明的发酵方式有液体发酵方法和固体发酵方法。
液体发酵方法:
将发酵菌种接种于含有液体培养基的发酵基质后在一定条件下发酵。
用于本发明的液体发酵菌种包括但不限于酵母菌、乳酸菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳相菌、枯草芽孢杆菌、双岐杆菌、米曲霉、蜜环菌、虫草菌、灵芝菌、朱红菌等一种或多种能够用于食物或药物发酵的菌种。
用于本发明液体发酵的培养基是用于食物或药物常见的培养基如包括但不限于麦芽汁培养基、水果浆液培养基、谷物水溶液培养基等。所述培养基中可以加入糖类、氮源和无机盐。所述糖类包括但不限于白糖、红糖、低聚糖类、糖醇类、冰糖、蜂蜜等。作为优选,所述糖类的加入量为原料总重量的0-8%。所述氮源包括但不限于酵母粉、蛋白胨、黄豆饼粉、玉米浆、鱼粉、蚕蛹粉、麸皮等。作为优选,所述氮源的加入量为原料总重量的0-10%。所述无机盐包括但不限于硫酸铵、氯化锰、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾等。作为优选,所述无机盐的加入量为原料总重量的0-3%。优选地,在发酵过程中,根据菌种的不同分阶段植入培养基。
用于本发明液体发酵的方法包括如下步骤:
(1)对原材料进行杀菌处理,此处的杀菌处理包括低温杀菌、射线杀菌、化学杀菌等不破坏原材料品质的杀菌处理方法;
(2)制备培养基:采用本领域常规方法制备各种液体发酵培养基,包括但不限于麦芽汁培养基、水果浆液培养基、谷物水溶液培养基。
作为优选,所述麦芽汁培养基是将麦芽经过筛选、清洗、干燥,制得的干麦芽经糖化、糊化、过滤等工序而成。作为优选,所述麦芽为大麦麦芽或小麦麦芽。作为优选,所述干燥为晒干或烘干。作为优选,所述糖化采用酸法、酶法或酸酶结合法糖化。
作为优选,所述水果浆液培养基是取水果可食用部分,经清洗、打浆(加水或不加水)、过滤制得。
作为优选,所述谷物水溶液培养基是将谷物去杂、清洗、研磨后,加水煮沸、过滤而得。
作为优选,所述培养基在使用前需经灭菌处理。
作为优选,所述麦芽汁培养基适于仅以中药材为发酵基质;当发酵基质中含有水果时可以以水果浆液作为培养基;如果发酵基质中含有谷物类物质时可以以谷物的水溶液作为培养基。这种原则仅做一般性指导,当发酵基质中碳水化合物和水含量足够用于发酵菌生长时,则可以使用发酵基质作为培养基。
(3)制备发酵基质:在灭菌培养基中,加入锁阳原料,优选加入研磨成浆液的锁阳原料。作为优选,所述锁阳原料的加入量为培养基的0.3-8%(w/v,v/v)、或1-5%(w/w,v/v)、或2.5%(w/w,v/v)。进步优选加入其他中药材粉末,更进一步优选加入谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物等其中的一种或多种。其他中药材或谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物可以粉末形式依据常规用量加入,一般为0-10%(w/v)。
(4)菌种植入并发酵:将选择的菌种进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。作为优选,所述菌种为厌氧菌种、好氧菌种或厌氧与好氧菌种兼用。所述厌氧、好氧菌种的植入量为发酵基质5-16%(w/w),或8-12%(w/w)、或10%(w/w)。作为优选,所述扩大培养包括固体斜面培养、摇瓶培养和/或种子罐培养。作为优选,所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖2-4%、蛋白胨1-3%、豆粉1-2%、琼脂2-4%、硫酸镁0.05-0.08%、磷酸二氢钾0.2-0.3%、氯化钠0.1-0.3%。作为优选,所述摇瓶培养的培养基包括葡萄糖2-3%,蛋白胨1-4%,豆粉0.5-2%,麸皮0.5-2%,硫酸镁0.01-0.1%,磷酸二氢钾0.1-0.4%、磷酸氢二钾0.1-0.2%。作为优选,所述摇瓶的转速为200转/min。作为优选,所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.5%-1.5%、蛋白胨1%-2%、玉米浆0.5%-1.0%、磷酸二氢钾0.03%-0.05%、硫酸锌0.02%-0.07%、氯化镁0.04%-0.08%,其余为水。
作为优选,当选择厌氧菌种时,在厌氧条件下于25-40℃密封静置培养15-40天,或发酵温度为28-35℃、30-32℃或31℃,发酵时间为21-35天、25-28天或27天。
进一步优选,当选择好氧菌种时,在通气条件下于22-35℃发酵7-30天,或发酵温度为25-30℃或28℃,发酵时间为14-25天或18-22天或20天。所通气体为无菌空气,通气量为2.5-5.0L/min。
更进一步优选,所述发酵分阶段进行,第一阶段为好氧发酵,选择好氧菌种,发酵温度为22-35℃,无菌空气通气量为2.5-5.0L/min,好氧发酵时间为7-30天;第二阶段转为厌氧发酵,选择厌氧菌种,关闭通气,控制发酵温度为25-40℃,厌氧发酵时间为15-40天。
(5)抽取发酵后的液体,经过滤后得到锁阳酵素。
固体发酵方法:
将发酵菌种接种于含有固体培养基的发酵基质后在一定条件下发酵。
用于本发明的固体发酵菌种包括但不限于酵母菌、乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、芽孢杆菌、双岐杆菌、米曲霉、蜜环菌、虫草菌、灵芝菌、朱红菌等一种或多种能够用于食物或药物发酵的菌种。
用于本发明固体发酵的培养基是用于食物或药物常见的培养基如包括但不限于麦芽汁固体培养基、水果培养基、谷物培养基等。所述培养基中可以加入糖类、氮源和无机盐。所述糖类包括但不限于白糖、红糖、低聚糖类、糖醇类、冰糖、蜂蜜等。作为优选,所述糖类的加入量为原料总重量的0-8%。所述氮源包括但不限于酵母粉、蛋白胨、黄豆饼粉、玉米浆、鱼粉、蚕蛹粉、麸皮等。作为优选,所述氮源的加入量为原料总重量的0-10%。所述无机盐包括但不限于硫酸铵、氯化锰、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾等。作为优选,所述无机盐的加入量为原料总重量的0-3%。优选地,在发酵过程中,根据菌种的不同分阶段植入培养基。
用于本发明固体发酵的方法包括如下步骤:
(1)对原材料进行杀菌处理,此处的杀菌处理包括低温杀菌、射线杀菌、化学杀菌等不破坏原材料品质的杀菌处理方法:
(2)制备培养基:采用本领域常规方法制备各种液体发酵培养基,包括但不限于麦芽汁固体培养基、水果培养基、谷物培养基。
作为优选,所述麦芽汁固体培养基是将麦芽经过筛选、清洗、干燥,制得的干麦芽经糖化、糊化、过滤等工序,最后加入琼脂制成。作为优选,所述麦芽为大麦麦芽或小麦麦芽。作为优选,所述干燥为晒干或烘干。作为优选,所述糖化采用酸法、酶法或酸酶结合法糖化。作为优选,所述琼脂的加入量为1-5%(g/100mL),或2-4%(g/100mL)、或3%(g/100mL)。
作为优选,所述水果培养基是取水果可食用部分,经清洗、打浆(加水或不加水)、过滤、浓缩,最后加入琼脂制得。作为优选,所述浓缩至浆液中固含量为3-15%(g/100mL)、或5-10%(g/100mL)、或8%(g/100mL)。作为优选,所述琼脂的加入量为1-5%(g/100mL),或2-4%(g/100mL)、或3%(g/100mL)。
作为优选,所述谷物培养基是将谷物去杂、清洗、研磨后,加水煮沸、过滤,加入琼脂而得。作为优选,所述琼脂的加入量为1-5%(g/100mL),或2-4%(g/100mL)、或3%(g/100mL)。
作为优选,所述培养基在使用前需经灭菌处理。
作为优选,所述麦芽汁固体培养基适于仅以中药材为发酵基质;当发酵基质中含有水果时可以选择水果培养基;如果发酵基质中含有谷物类物质时可以选择谷物培养基。这种原则仅做一般性指导,当发酵基质中碳水化合物和水含量足够用于发酵菌生长时,则可以使用发酵基质作为培养基。
(3)制备发酵基质:在灭菌培养基中,加入锁阳原料,优选加入切成适宜大小的片状、条状或粒状的锁阳原料。作为优选,所述锁阳原料的加入量为培养基的0.3-8%(w/w)、或1.5%(w/w)、或2.5%(w/w)。进一步优选加入其他中药材粉末,更进一步优选加入谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物等其中的一种或多种。其他中药材或谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物可以粉末形式依据常规用量加入,一般为0-10%(w/w)。
(4)菌种植入并发酵:将选择的菌种进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。作为优选,所述菌种为厌氧菌种、好氧菌种或厌氧与好氧菌种兼用。所述厌氧、好氧菌种的植入量为发酵基质5-16%(w/w),或8-12%(w/w)、或10%(w/w)。作为优选,所述扩大培养包括固体斜面培养、摇瓶培养和/或种子罐培养。作为优选,所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖2-4%、蛋白胨1-3%、豆粉1-2%、琼脂2-4%、硫酸镁0.05-0.08%、磷酸二氢钾0.2-0.3%、氯化钠0.1-0.3%。作为优选,所述摇瓶培养的培养基包括葡萄糖2-3%,蛋白胨1-4%,豆粉0.5-2%,麸皮0.5-2%,硫酸镁0.01-0.1%,磷酸二氢钾0.1-0.4%、磷酸氢二钾0.1-0.2%。作为优选,所述摇瓶的转速为200转/min。作为优选,所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.5%-1.5%、蛋白胨1%-2%、玉米浆0.5%-1.0%、磷酸二氢钾0.03%-0.05%、硫酸锌0.02%-0.07%、氯化镁0.04%-0.08%,其余为水。
作为优选,当选择厌氧菌种时,在厌氧条件下于25-40℃密封静置培养15-40天,或发酵温度为28-35℃、30-32℃或31℃,发酵时间为21-35天、25-28天或27天。
进一步优选,当选择好氧菌种时,在通气条件下于22-35℃发酵7-30天,或发酵温度为25-30℃或28℃,发酵时间为14-25天或18-22天或20天。所通气体为无菌空气,通气量为2.5-5.0L/min。
更进一步优选,所述发酵分阶段进行,第一阶段为好氧发酵,选择好氧菌种,发酵温度为22-35℃,无菌空气通气量为2.5-5.0L/min,好氧发酵时间为7-30天;第二阶段转为厌氧发酵,选择厌氧菌种,关闭通气,控制发酵温度为25-40℃,厌氧发酵时间为15-40天。
(5)收集培养基,获得本发明锁阳酵素。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
(1)本发明的肉苁蓉与酵素组合,进一步加强了肉苁蓉的功效,使得肉苁蓉的吸收率显著增加,而且其抗疲劳、抗衰老以及增强免疫力方面效果显著高于肉苁蓉本身。
(2)本发明的制备工艺简单,制备过程可控,得到的酵素产品质量稳定,可常温保存,适于规模化生产,具有良好的市场前景;
具体实施方式
肉苁蓉酵素的制备实施例:
实施例1
(1)取新鲜的肉苁蓉净选后打磨成浆液,低温杀菌处理。
(2)麦芽汁培养基的制备:将大麦麦芽经过筛选、清洗、自然晒干,制得干麦芽经酸法糖化、糊化,过滤等工序而成;并加入3%的葡萄糖,灭菌。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌麦芽汁培养基中,加入步骤(1)所得的肉苁蓉浆液,所述肉苁蓉浆液的加入量为培养基的3%(v/v)。
(4)菌种植入并发酵:选择乳酸菌为发酵菌种,经固体斜面培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖4%、蛋白胨1%、豆粉2%、琼脂4%、硫酸镁0.06%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.1%。所述乳酸菌的植入量为发酵基质8%(w/w)。所述发酵是在厌氧条件下于30℃密封静置发酵40天。
(5)抽取发酵后的液体,经过滤后得到肉苁蓉酵素。
实施例2
(1)取新鲜的肉苁蓉净选后打磨成浆液,射线杀菌处理。
(2)苹果果浆培养基的制备:将苹果去皮、去核后,经清洗、打浆、过滤制得,并灭菌。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌的苹果果浆培养基中,加入步骤(1)所得的肉苁蓉浆液,所述肉苁蓉浆液的加入量为培养基的2%(v/v)。
(4)菌种植入并发酵:选择保加利亚乳杆菌为发酵菌种,经固体斜而培养和种子罐培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖4%、蛋白胨1%、豆粉2%、琼脂4%、硫酸镁0.06%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.1%。所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.8%、蛋白胨2%、玉米浆0.5%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸锌0.05%、氯化镁0.06%,其余为水。所述保加利亚乳杆菌的植入量为发酵基质10%(w/w)。所述发酵是在厌氧条件下于28℃密封静置发酵25天。
(5)抽取发酵后的液体,经过滤后得到肉苁蓉酵素。
实施例3
(1)取新鲜的肉苁蓉净选后打磨成浆液,化学杀菌处理。
(2)谷物水溶液培养基的制备:将玉米去杂、清洗、研磨后,加水煮沸、过滤后,加入5%的葡萄糖,灭菌而得。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌的谷物水溶液培养基中,加入步骤(1)所得的肉苁蓉浆液,所述肉苁蓉浆液的加入量为培养基的5%(v/v)。
(4)菌种植入并发酵:选择嗜酸乳杆菌为发酵菌种,经摇瓶培养和种子罐培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述摇瓶培养的培养基组成包括葡萄糖2%,蛋白胨2%,豆粉1%,麸皮2%,硫酸镁0.1%,磷酸二氢钾0.1%、磷酸氢二钾0.2%。所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.5%、蛋白胨1%、玉米浆0.5%、磷酸二氢钾0.03%、硫酸锌0.03%、氯化镁0.05%,其余为水。所述嗜酸乳杆菌的植入量为发酵基质12%(w/w)。所述发酵是在厌氧条件下于32℃密封静置发酵28天。
(5)抽取发酵后的液体,经过滤后得到肉苁蓉酵素。
实施例4
(1)取干燥的肉苁蓉切成薄片、粉碎,低温杀菌处理。
(2)麦芽汁固体培养基的制备:将小麦麦芽经过筛选、清洗、烘干,制得干麦芽经酶法糖化、糊化、过滤等工序,最后加入3%(g/100mL)的琼脂制成;并加入3%的葡萄糖,灭菌处理。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌麦芽汁固体培养基中,加入步骤(1)所得的肉苁蓉原料,所述肉苁蓉原料的加入量为培养基的2.5%(w/w)。
(4)菌种植入并发酵:选择枯草芽孢杆菌为发酵菌种,经固体斜面培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖2%、蛋白胨2%、豆粉2%、琼脂3%、硫酸镁0.06%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.1%。所述枯草芽孢杆菌的植入量为发酵基质10%(w/w)。所述发酵是在通气条件下于25℃发酵18天,所通气体为无菌空气,通气量为5.0L/min。
(5)收集培养基,制备本发明肉苁蓉酵素。
实施例5
(1)取干燥的肉苁蓉切成条状、粉碎,射线杀菌处理。
(2)水果培养基的制备:取杨桃去核、去皮后,经清洗、打浆、过滤,浓缩至浆液中固含量为3%(g/100mL),加入2%(g/100mL)的琼脂制得;后灭菌处理。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌水果培养基中,加入步骤(1)所得的肉苁蓉原料,所述肉苁蓉原料的加入量为培养基的3%(w/w)。
(4)菌种植入并发酵:选择酵母菌为发酵菌种,经摇瓶培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述摇瓶培养的培养基组成包括葡萄糖3%,蛋白胨4%,豆粉0.5%,麸皮0.5%,硫酸镁0.1%,磷酸二氢钾0.4%、磷酸氢二钾0.15%。所述摇瓶的转速为200转/min。所述酵母菌的植入量为发酵基质9%(w/w)。所述发酵是在通气条件下于30℃发酵21天,所通气体为无菌空气,通气量为3.0L/min。
(5)收集培养基,制备本发明肉苁蓉酵素。
实施例6
(1)取干燥的肉苁蓉切成粒状、粉碎,化学杀菌处理。
(2)谷物培养基的制备:将小米去杂、清洗、研磨后,加水煮沸、过滤,加入3%(g/100mL)琼脂而得;后加入3%的葡萄糖,灭菌处理。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌谷物培养基中,加入步骤(1)所得的肉苁蓉原料,所述肉苁蓉原料的加入量为培养基的2.5%(w/w)。
(4)菌种植入并发酵:选择米曲霉为发酵菌种,经摇瓶培养和种子罐培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述摇瓶培养的培养基组成包括葡萄糖2%,蛋白胨3%,豆粉1%,麸皮1%,硫酸镁0.01%,磷酸二氢钾0.4%、磷酸氢二钾0.2%。所述摇瓶的转速为200转/min。所述种子罐培养的培养基为牛肉膏1.5%、蛋白胨1.5%、玉米浆1.0%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸锌0.02%、氯化镁0.04%,其余为水。所述酵母菌的植入量为发酵基质10%(w/w)。所述发酵是在通气条件下于35℃发酵20天,所通气体为无菌空气,通气量为2.5L/min。
(5)收集培养基,制备本发明肉苁蓉酵素。
实施例7
本发明实施例1-6所得肉苁蓉酵素参照标准分析,总砷≤0.2mg/L;铅≤0.05mg/L;铜≤5mg/L。经感官品评的分析结果可知,本发明实施例1-6制备得到口感良好、液体澄清透亮的肉苁蓉酵素。
锁阳酵素的制备实施例:
实施例8
(1)取新鲜的锁阳净选后打磨成浆液,低温杀菌处理。
(2)麦芽汁培养基的制备:将大麦麦芽经过筛选、清洗、自然晒干,制得干麦芽经酸法糖化、糊化、过滤等工序而成;并加入3%的葡萄糖,灭菌。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌麦芽汁培养基中,加入步骤(1)所得的锁阳浆液,所述锁阳浆液的加入量为培养基的3%(v/v)。
(4)菌种植入并发酵:选择乳酸菌为发酵菌种,经固体斜面培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖3%、蛋白胨2%、豆粉1%、琼脂3%、硫酸镁0.1%、磷酸二氢钾0.1%、氯化钠0.5%。所述乳酸菌的植入量为发酵基质8%(w/w)。所述发酵是在厌氧条件下于30℃密封静置发酵40天。
(5)抽取发酵后的液体,经过滤后得到锁阳酵素。
实施例9
(1)取新鲜的锁阳净选后打磨成浆液,射线杀菌处理。
(2)苹果果浆培养基的制备:将苹果去皮、去核后,经清洗、打浆、过滤制得,并灭菌。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌的苹果果浆培养基中,加入步骤(1)所得的锁阳浆液,所述锁阳浆液的加入量为培养基的2%(v/v)。
(4)菌种植入并发酵:选择保加利亚乳杆菌为发酵菌种,经固体斜面培养和种子罐培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖3%、蛋白胨1%、豆粉1%、琼脂2%、硫酸镁0.06%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.1%。所述种子罐培养的培养基为牛肉膏1%、蛋白胨3%、玉米浆1%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸锌0.05%、氯化镁0.06%,其余为水。所述保加利亚乳杆菌的植入量为发酵基质10%(w/w)。所述发酵是在厌氧条件下于28℃密封静置发酵25天。
(5)抽取发酵后的液体,经过滤后得到锁阳酵素。
实施例10
(1)取新鲜的锁阳净选后打磨成浆液,化学杀菌处理。
(2)谷物水溶液培养基的制备:将玉米去杂、清洗、研磨后,加水煮沸、过滤后,加入5%的葡萄糖,灭菌而得。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌的谷物水溶液培养基中,加入步骤(1)所得的锁阳浆液,所述锁阳浆液的加入量为培养基的5%(v/v)。
(4)菌种植入并发酵:选择嗜酸乳杆菌为发酵菌种,经摇瓶培养和种子罐培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述摇瓶培养的培养基组成包括葡萄糖2%,蛋白胨3%,豆粉2%,麸皮1%,硫酸镁0.5%,磷酸二氢钾0.2%、磷酸氢二钾0.2%。所述种子罐培养的培养基为牛肉膏1%、蛋白胨2%、玉米浆1%、磷酸二氢钾0.05%、硫酸锌0.03%、氯化镁0.05%,其余为水。所述嗜酸乳杆菌的植入量为发酵基质12%(w/w)。所述发酵是在厌氧条件下于32℃密封静置发酵28天。
(5)抽取发酵后的液体,经过滤后得到锁阳酵素。
实施例11
(1)取干燥的锁阳切成薄片、粉碎,低温杀菌处理。
(2)麦芽汁固体培养基的制备:将小麦麦芽经过筛选、清洗、烘干,制得干麦芽经酶法糖化、糊化、过滤等工序,最后加入3%(g/100mL)的琼脂制成;并加入6%的葡萄糖,灭菌处理。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌麦芽汁固体培养基中,加入步骤(1)所得的锁阳原料,所述锁阳原料的加入量为培养基的2.5%(w/w)。
(4)菌种植入并发酵:选择枯草芽孢杆菌为发酵菌种,经固体斜面培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述固体斜面培养的培养基组成包括葡萄糖4%、蛋白胨2%、豆粉1%、琼脂2%、硫酸镁0.06%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.1%。所述枯草芽孢杆菌的植入量为发酵基质10%(w/w)。所述发酵是在通气条件下于25℃发酵18天,所通气体为无菌空气,通气量为5.0L/min。
(5)收集培养基,制备本发明锁阳酵素。
实施例12
(1)取干燥的锁阳切成条状、粉碎,射线杀菌处理。
(2)水果培养基的制备:取杨桃去核、去皮后,经清洗、打浆、过滤,浓缩至浆液中固含量为3%(g/100mL),加入2%(g/100mL)的琼脂制得;后灭菌处理。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌水果培养基中,加入步骤(1)所得的锁阳原料,所述锁阳原料的加入量为培养基的3%(w/w)。
(4)菌种植入并发酵:选择酵母菌为发酵菌种,经摇瓶培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述摇瓶培养的培养基组成包括葡萄糖3%,蛋白胨4%,豆粉0.5%,麸皮0.5%,硫酸镁0.1%,磷酸二氢钾0.4%、磷酸氢二钾0.15%。所述摇瓶的转速为200转/min。所述酵母菌的植入量为发酵基质9%(w/w)。所述发酵是在通气条件下于30℃发酵21天,所通气体为无菌空气,通气量为4.0L/min。
(5)收集培养基,制备本发明锁阳酵素。
实施例13
(1)取干燥的锁阳切成粒状、粉碎,化学杀菌处理。
(2)谷物培养基的制备:将小米去杂、清洗、研磨后,加水煮沸、过滤,加入3%(g/100mL)琼脂而得;后加入8%的葡萄糖,灭菌处理。
(3)制备发酵基质:在上述灭菌谷物培养基中,加入步骤(1)所得的锁阳原料,所述锁阳原料的加入量为培养基的2.5%(w/w)。
(4)菌种植入并发酵:选择米曲霉为发酵菌种,经摇瓶培养和种子罐培养进行扩大培养后,植入所述发酵基质中进行发酵。所述摇瓶培养的培养基组成包括葡萄糖2%,蛋白胨3%,豆粉1%,麸皮1%,硫酸镁0.01%,磷酸二氢钾0.4%、磷酸氢二钾0.2%。所述摇瓶的转速为150转/min。所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.5%、蛋白胨2%、玉米浆1.0%、磷酸二氢钾0.03%、硫酸锌0.02%、氯化镁0.04%,其余为水。所述酵母菌的植入量为发酵基质10%(w/w)。所述发酵是在通气条件下于35℃发酵20天,所通气体为无菌空气,通气量为2.5L/min。
(5)收集培养基,制备本发明锁阳酵素。
实施例14
本发明实施例8-13所得锁阳酵素参照标准分析,总砷≤0.2mg/L、铅≤0.05mg/L、铜≤5mg/L、总菌落≤100cfu/mL。
本发明组合物制备例:
实施例15混合片
称取本发明肉苁蓉粉250克,实施例1制备的肉苁蓉酵素250g、混匀,加蒸馏水适量制成软材,挤压过一号筛(12目)制颗粒,60℃干燥,用一号筛整粒,加入硬脂酸镁3.5克拌匀,压片。共制得1000片。
实施例16双层片
称取本发明肉苁蓉粉250克,加适量辅料、混匀、加入适量的粘合剂制粒,干燥,整粒,加入适量的助流剂混匀备用;称取实施例8制备的锁阳酵素250g、加适量粘合剂制成颗粒,干燥,整粒后加入适量的助流剂混匀备用,将两种颗粒加入高速压片中,以肉苁蓉为片芯,以锁阳为外层,压成双层片,制得1000片。
实施例17多层片
称取本发明肉苁蓉粉250克,加适量辅料、混匀、加入适量的粘合剂制粒,干燥,整粒,加入适量的助流剂混匀获得第一片剂层的终掺合物;称取实施例8制备的锁阳酵素250g、加适量粘合剂制成颗粒,干燥,整粒后加入适量的助流剂混匀获得第二片剂层的终掺合物;称取实施例1制备的肉苁蓉酵素250g,加适量粘合剂制成颗粒,干燥,整粒后加入适量的助流剂混匀获得第三片剂层的终掺合物;压缩各第一、第二及第三片剂层掺合物以形成片剂层,及压缩独立的片剂层以形成多层片剂,制得1000片。
实施例17:口服液
配方以10万支计单位:kg
制备:吐温-80、聚乙二醇400混合均匀,加入肉苁蓉浸膏和肉苁蓉酵素,搅拌使溶解,加入苯甲酸钠、纽甜、柠檬香精、适量纯化水,搅拌使溶解,以柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液调节pH5.5,过滤除杂,最后加入所有纯化水,分装后灭菌,10Ml/支,共10万支肉苁蓉酵素口服液。
实施例18:风味牛奶
称取肉苁蓉粉30g,本发明实施例1制备的肉苁蓉酵素30g、白砂糖50g、鲜牛奶2L置于调配罐中,高速搅拌5-10分钟、混匀,打入真空罐在-0.6巴的压力下脱气,杀菌灌装即得。
实施例19:本发明组合物对人体免疫力的提高
当地医院中医门诊采集免疫力低下的患者125例,随机分为3组,第一组40例为对照组服用V1片剂,第二组43例服用本发明实施例15中不含肉苁蓉酵素的片剂,第三组42例服用实施例15制备的混合片,第一组和第二组每天给药三次,第二组每次6片,第三组每次3片,一个月后,第二组和第三组患者自述的免疫力明显较第一组有显著提高,第三组又显著优于第二组的效果。
实施例20:本发明组合物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数的影响
实验药材:本发明实施例15中不含肉苁蓉酵素的片剂和实施例15制备的混合片。
实验动物:昆明种小鼠120只,雌雄各半,分开饲养,每只体重20-25g,购自包头医科大学动物饲养中心。
实验方法:
动物的分组:120只小鼠按性别、体重随机分为A、B、C、D四组,每组30只,其中A为空白对照组,B为模型组,C为肉从蓉粉片剂组,C为混合片剂组。
免疫力低下小鼠模型的建立:用注射环磷酰胺制作免疫力低下的模型。除正常对照组外,各组小鼠均予腹腔注射CY50mg/kg,连续2d,制作免疫低下模型,A组代以等量白开水,四组小鼠自由进食进水,于相同环境条件下饲养。当B、C、D三组小鼠出现:萎靡不振、少动,食量减少,毛发失去光泽,喜堆,竖毛现象明显等症状时,即已证明造模成功。
给药:从第3天开始,C、D两组小鼠每天下午灌药糊,C组50g/kg/天,D组25g/kg/天,A、B两组代以等体积的温开水,连续10天,其余实验条件相同。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数的测定:10天后,A、B、C、D四组小鼠每只腹腔注射2%鸡红细胞悬液0.5ml,30分钟后断髓处死,用腹腔渗透液涂片,甲醛固定,GiensaWright液染色,油镜下观察100个巨噬细胞,计算吞噬细胞百分率和吞噬指数。
结果:
Cy可使小鼠腹腔吞噬细胞百分率和吞噬指数显著减少(p<0.01),表面Cy可明显抑制巨噬细胞吞噬功能,证明造模成功。药物组C、D组吞噬百分率和吞噬指数显著大于模型组即B组(p<0.01),D组显著高于C组接近于空白对照组,说明肉苁蓉能够有效提高Cy小鼠腹腔吞噬细胞百分率和吞噬指数,而肉苁蓉与肉苁蓉酵素组效果更为显著,对Cy小鼠免疫系统有显著的保护作用。
表1:各组对小鼠腹腔巨噬细胞乔噬百分率和吞噬指数的影响
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (7)
1.一种肉苁蓉酵素组合物,其含有肉苁蓉和酵素。
2.如权利要求1所述的组合物,其中所述肉苁蓉选自草苁蓉、盐生苁蓉、沙苁蓉、荒漠肉苁蓉、管花肉苁蓉的一种或多种。
3.如权利要求2所述的组合物,其中所述肉苁蓉选自肉苁蓉粉、肉苁蓉颗粒或肉苁蓉浸膏。
4.如权利要求1所述的组合物,其中所述酵素选自肉苁蓉酵素、锁阳酵素、其它中草药酵素、食品酵素等的一种或多种。
5.如权利要求1所述的组合物,所述组合物可制备为药品、保健品以及食品添加剂。
6.如权利要求5所述的组合物,所述药品和/或保健品的剂型选自硬胶囊、软胶囊、微胶囊、颗粒剂、片剂、粉剂、口服液、膏剂以及丸剂。
7.如权利要求6所述的组合物,所述片剂单层片、双层片或多层片。
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