CN105152362A - 一种养殖水体底部环境改良剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种养殖水体底部环境改良剂的制备方法：将消毒灭菌后的高吸水性树脂投入浓度为10⁸～10⁹cfu/g粪肠球菌发酵液中；浸泡2～4小时，让发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附；所述高吸水性树脂每100～300克对应粪肠球菌发酵液2000ml～3000ml。当发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附后，在无菌条件下分装成500克或1000克罐装，最后装箱入库。利用本方法制得的改良剂克服了目前市场上面使用的底改产品不能沉入池塘底部，不能够在池塘底部全面改善底部环境的缺点，防止水体二次污染，为水产养殖生物营造一个良好的底质环境。

Description

一种养殖水体底部环境改良剂的制备方法

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域。涉及一种南美白对虾养殖水体拉网式生物底质改良剂的制备方法，特别是作用全面的、拉网式的养殖水体底部环境改良。

背景技术

南美白对虾的特点是生长速度快、适应性强、肉质细嫩、加工出肉率高、离水存活时间长及抗病力强，所以在我国养殖面积发展迅猛，仅广西沿海的养殖水面就近2万公顷。但近年来，随着集约化、高密度养殖方式的普及推广，对虾养殖水环境日趋恶化，养殖水体的pH、化学需氧量(COD)、总无机氮(TIN)、等指标严重超标，南美白对虾长期处于应激状态，其生理机能降低，出现中毒症或激活传染性病原。导致目前高密度养殖区域各种传染病暴发流行，病原微生物种类和数量上升，虾病害频发，造成南美白对虾养成率大幅度下降。严重影响了水产养殖业的持续、健康、稳步发展。

南美白对虾养殖水体环境的调控是南美白对虾可持续健康发展的关键所在。其一：水质是水体环境质量的直观表现，一些可溶性物质、气体影响了水质。其二：底质是水体环境质量的根本。所以说水质和底质的优劣决定了养殖水体的环境质量。

在当前追求高产量和高效益的养殖情况下，大量投饵残剩的饵料、过度肥水积聚的肥料、水产动物的代谢产物、因消毒或治疗而带入的难降解物质(如重金属等)大量积聚在水体底部，过量消耗水体底部本已不多的溶解氧，使底质长期处于一个还原性的厌氧环境，生物种群以厌氧微生物为主。长期的缺氧环境使得水体底部病源微生物滋生，有机物分解不彻底，底质发酵造成氨氮、硫化氢、亚硝酸盐、甲烷等有毒有害成分大量产生，给水体底质带来了空前的生态压力。尤其在高温季节成为热源，严重影响了底栖性水产动物南美白对虾的生存。水体底质恶化不仅是造成整个养殖水体水质恶化的重要原因,同时也是造成疾病频发和池塘生产性能下降的罪魁祸首,因此底质好坏直接关系到养殖的成败,要实现健康养殖就必须从改善底质开始。

目前在水体底质改良剂中有五大类型的底质改良剂

1、吸附型：如沸石粉、麦饭石、活性炭等，只是简单的物理吸附水中的氨氮，亚硝酸、有机质等的有害物质，对有害物质本身的特性并没有改变，只是暂且隔断了有机物释放毒素，并没有对有机物进行消化分解。2、絮凝型：以聚合铝、硫酸铝、明矾等絮凝剂为代表的，用后水体会分层，中上部水体会变得澄清，底层会有大量云雾状的絮凝胶状物，在生产上使用后也会加重底层缺氧。沉降到池底加重了底臭。3、离子交换型：像以含EDTA或以硫代硫酸钠为主的产品，用于降低水中或底层氨氮重金属的阳性有害物质，或用于含溴氯碘化合物、高锰酸钾等阳性氧化物中毒时解毒用，效果较为理想，但对水中或底层带负电荷的酸性有害物质则效果很差。4、活菌降解型：以枯草芽抱杆菌、纳豆芽抱杆菌、光合细菌等菌类的生物底质改良剂，通过生物菌的分解作用分解底层有机物，缺点是底层处于缺氧状态，分解能力强的芽抱杆菌等的存活率不高，而且极有可能加速池塘底部的缺氧。5、化学降解型：以各种卤素类、碱性金属盐类等氧化剂以及一些表面活性剂类为主的，这一类型的底质改良剂均为化学降解型。所有这些处理方式都是通过颗粒形式或者粉剂形式使用的，粉剂主要在水体中发挥作用，很难到达底部，对底质的改良作用有限。颗粒形式虽然能够达到底部，但到达底部后相对固定在一个较小面积的底部，虽然对底部能够起到一定的改良作用，只是局部的有所改善，不能够全面的对养殖底质进行全面的改进。因此开发一种全面改善养殖水体底质的拉网式的安全、有效的底质改良剂非常有必要。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于克服上述不足之处，特别提供一种作用全面的、拉网式的养殖水体底部环境改良剂。其利用高吸水树脂颗粒，吸附经过发酵的厌氧性粪肠球菌液体，利用高吸水聚合物能够沉降到水体底部，并且在水体中能够来回游动的机理，在养殖水体的底部与水体交换释放出吸附在高吸水树脂颗粒中的粪肠球菌，让粪肠球菌直接在水体底部厌氧环境中发挥分解底部有机质的作用。修复底质生态环境，防止水体二次污染，为水产养殖生物营造一个良好的底质环境。

技术方案：本发明提供了一种养殖水体底部环境改良剂的制备方法：将消毒灭菌后的高吸水性树脂投入浓度为10⁷～10¹⁰cfu/g粪肠球菌发酵液中；浸泡2～4小时，让发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附；所述高吸水性树脂每100～300克对应粪肠球菌发酵液2000ml～3000ml。当发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附后，在无菌条件下分装成500克或1000克罐装，最后装箱入库。进一步优选，所述粪肠球菌发酵液的浓度为10⁸～10⁹cfu/g。

具体的，上述制备方法中所述的粪肠球菌发酵液通过以下方法得到：从粪肠球菌标准菌株的单一菌落中，挑菌接种到粪肠球菌培养基中，30～35℃条件下，培养10～12h后，再以3～5％的体积比接种粪肠球菌培养基，进行发酵，30～35℃条件下，培养24～48h，制得发酵液。

本发明采用粪肠球菌作为养殖水体底质改良剂具有以下优势：1.不耗氧，粪肠球菌在溶解氧高或低的条件下都能很好生长，也可在分子氧存在下进行厌氧生活。在池塘养殖水体中，中下层水尤其是底部的溶解氧一般较低，病原菌容易滋生，如在其中投入粪肠球菌使其成为优势菌，可抑制病原菌的繁殖。业内形象地称为“不耗氧的芽孢杆菌”。2.全天候使用常见有益微生物在阴雨天、低溶氧等恶劣环境下不宜使用，而粪肠球菌晴雨天均可使用。3.生长繁殖快，粪肠球菌进入水体后能迅速复活，快速生长繁殖，19min即可分裂一次，短时间能形成优势种群。4.产L-乳酸，利于吸收，粪肠球菌分泌的乳酸为L型乳酸，也称为自然乳酸或生理乳酸，能完全被水生动物吸收利用。

粪肠球菌培养基为：胰蛋白胨10g/L,酵母粉10g/L,葡萄糖10g/L,无水氯化钙0.04g/L,七水合硫酸镁0.0192g/L,磷酸氢二钾0.04g/L,磷酸二氢钾0.04g/L,磷酸氢钠0.4g/L,氯化钠0.08g/L,土豆汁50g/L,碳酸钙1g/L,乙酸钠10g/L,碳酸铵2g/L,乙酸铵1g/L,半胱氨酸盐酸盐0.5g/L。所述的粪肠球菌培养基pH值为9。115℃灭菌20min，冷却备用

高吸水树脂颗粒是一种典型的功能高分子材料。它能吸收其自身重量数百倍、甚至上千倍的水，并具有很强的保水能力，所以它又被称为超强吸水剂或高保水剂。从化学结构上来讲，高吸水性树脂是具有许多亲水基团的低交联度或部分结晶的高分子聚合物。高吸水聚合物用途广泛，应用前景非常广阔。目前其主要用途仍然是卫生用品，约占市场总量的70％左右。由于高吸水树脂吸水能力很大，并具有优异的保水性能，所以作为土壤保水剂在农业、林业方面应用范围很广。

本发明创造性的采用的高吸水树脂颗粒主要作为载体吸附高浓度的粪肠球菌，利用他在水体中的沉降性，能够把有益菌粪肠球菌带到养殖水体的底层，通过其游动性，在底层全面释放所吸附的粪肠球菌。具体的，本发明所述的高吸水性树脂为圆形颗粒，吸水前大小1.5mm-3.0mm。该树脂吸蒸馏水倍率130-170倍，吸生理盐水倍率20-25倍以上，pH值6.5-7.5、保水率(20g/cm²)≥97％，

本发明还提供了上述制备方法得到的水体底部环境改良剂。尤其是作用南美白对虾全面的、拉网式的养殖水体底部环境改良剂时，效果最为明显。

有益效果：本发明利用高吸水树脂颗粒，吸附经过发酵的厌氧性粪肠球菌液体，利用高吸水聚合物能够沉降到水体底部，并且在水体中能够来回游动的机理，在养殖水体的底部与水体交换释放出吸附在高吸水树脂颗粒中的粪肠球菌，利用粪肠球菌厌氧性和繁殖迅速的特点，让粪肠球菌直接在水体底部厌氧环境中发挥作用，分解底部有机质。修复底质生态环境，克服了目前市场上面使用的底改产品不能沉入池塘底部，不能够在池塘底部全面改善底部环境的缺点，防止水体二次污染，为水产养殖生物营造一个良好的底质环境。

具体实施方式：

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1:

(1)菌种复苏:从粪肠球菌标准菌株的单一菌落中，挑菌接种到粪肠球菌培养基中，35℃条件下，培养12小时。

(2)增菌:再以4％的体积比接种到粪肠球菌培养基中，35℃条件下，进行发酵，培养28h，至菌悬液菌的浓度达到10⁸fu/g；制得粪肠球菌发酵液；

其中，所述的粪肠球菌培养基，其配制方法如下:胰蛋白胨10g/L,酵母粉10g/L,葡萄糖10g/L,无水氯化钙0.04g/L,七水合硫酸镁0.0192g/L,磷酸氢二钾0.04g/L,磷酸二氢钾0.04g/L,磷酸氢钠0.4g/L,氯化钠0.08g/L,土豆汁50g/L,碳酸钙1g/L,乙酸钠10g/L,碳酸铵2g/L,乙酸铵1g/L,半胱氨酸盐酸盐0.5g/L,pH值为9,115℃灭菌20min，冷却备用)

(3)在灭菌操作间将消毒灭菌后的高吸水性树脂200克投入浓度为10⁸cfu/g粪肠球菌发酵液中2000毫升中；浸泡3小时，让发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附后，在无菌条件下分装成500克或1000克罐装，最后装箱入库。

实施例2:

(1)菌种复苏:从粪肠球菌标准菌株的单一菌落中，挑菌接种到粪肠球菌培养基中，35℃条件下，培养12小时。

(2)增菌:再以4％的体积比接种到粪肠球菌培养基中，35℃条件下，进行发酵，培养28h，至菌悬液菌的浓度达到10⁸fu/g；制得粪肠球菌发酵液；

其中，所述的粪肠球菌培养基，其配制方法如下:胰蛋白胨10g/L,酵母粉10g/L,葡萄糖10g/L,无水氯化钙0.04g/L,七水合硫酸镁0.0192g/L,磷酸氢二钾0.04g/L,磷酸二氢钾0.04g/L,磷酸氢钠0.4g/L,氯化钠0.08g/L,土豆汁50g/L,碳酸钙1g/L,乙酸钠10g/L,碳酸铵2g/L,乙酸铵1g/L,半胱氨酸盐酸盐0.5g/L,pH值为9,115℃灭菌20min，冷却备用)

(3)在灭菌操作间将消毒灭菌后的高吸水性树脂200克投入浓度为10⁸cfu/g粪肠球菌发酵液中3000毫升中；浸泡4小时，让发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附后，在无菌条件下分装成500克或1000克罐装，最后装箱入库。

实施例3:

(1)菌种复苏:从粪肠球菌标准菌株的单一菌落中，挑菌接种到粪肠球菌培养基中，35℃条件下，培养12小时。

(2)增菌:再以4％的体积比接种到粪肠球菌培养基中，35℃条件下，进行发酵，培养48h，至菌悬液菌的浓度达到10⁹fu/g；制得粪肠球菌发酵液；

其中，所述的粪肠球菌培养基，其配制方法如下:胰蛋白胨10g/L,酵母粉10g/L,葡萄糖10g/L,无水氯化钙0.04g/L,七水合硫酸镁0.0192g/L,磷酸氢二钾0.04g/L,磷酸二氢钾0.04g/L,磷酸氢钠0.4g/L,氯化钠0.08g/L,土豆汁50g/L,碳酸钙1g/L,乙酸钠10g/L,碳酸铵2g/L,乙酸铵1g/L,半胱氨酸盐酸盐0.5g/L,pH值为9,115℃灭菌20min，冷却备用)

(3)在灭菌操作间将消毒灭菌后的高吸水性树脂200克投入浓度为10⁹cfu/g粪肠球菌发酵液中2000毫升中；浸泡3.5小时，让发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附后，在无菌条件下分装成500克或1000克罐装，最后装箱入库。

实施例4:

(1)菌种复苏:从粪肠球菌标准菌株的单一菌落中，挑菌接种到粪肠球菌培养基中，35℃条件下，培养12小时。

(2)增菌:再以4％的体积比接种到粪肠球菌培养基中，35℃条件下，进行发酵，培养48h，至菌悬液菌的浓度达到10⁹fu/g；制得粪肠球菌发酵液；

其中，所述的粪肠球菌培养基，其配制方法如下:胰蛋白胨10g/L,酵母粉10g/L,葡萄糖10g/L,无水氯化钙0.04g/L,七水合硫酸镁0.0192g/L,磷酸氢二钾0.04g/L,磷酸二氢钾0.04g/L,磷酸氢钠0.4g/L,氯化钠0.08g/L,土豆汁50g/L,碳酸钙1g/L,乙酸钠10g/L,碳酸铵2g/L,乙酸铵1g/L,半胱氨酸盐酸盐0.5g/L,pH值为9,115℃灭菌20min，冷却备用)

(3)在灭菌操作间将消毒灭菌后的高吸水性树脂200克投入浓度为10⁹cfu/g粪肠球菌发酵液中3000毫升中；浸泡4小时，让发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附后，在无菌条件下分装成500克或1000克罐装，最后装箱入库。

本发明的使用效果如下:

在江苏如东一南美白对虾养殖池塘使用，面积5亩，夏季高温(7一8月)时池塘水质过浓，水色不好，水质中氨氮、亚硝酸盐、硫化氢等超标，底质发黑发臭，影响南美白对虾的生长，虾的“转塘”现象和病害严重。在一晴天上午10点将上述配方的底质改良剂用于养殖池中用量为150g/亩·米水深。用后一天水色大为好转，透明度增大，底质臭味消失，水体中氨氮、亚硝酸盐和硫化氢含量降至正常水平，虾类活动恢复正常。

在江苏如东小棚虾养殖池塘，面积为0.7亩，因大量投饲饵料，导致池塘水质过浓，水色不好，水质氨氮、亚硝酸盐、硫化氢等超标。在一晴天上午8:30将上述配方的底质改良剂用于养殖池中，用量为250g/棚(0.7亩/棚)。用后半天池塘的水色即大为好转，透明度增大，底质臭味消失，水体中氨氮、亚硝酸盐和硫化氢含量降至正常水平，虾活动恢复正常。

Claims (8)

1.一种养殖水体底部环境改良剂的制备方法，其特征在于：将消毒灭菌后的高吸水性树脂投入浓度为10⁷～10¹⁰cfu/g粪肠球菌发酵液中；浸泡2～4小时，让发酵液充分被高吸水性树脂完全吸附；所述高吸水性树脂每100～300克对应粪肠球菌发酵液2000ml～3000ml。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述粪肠球菌发酵液的浓度为10⁸-10⁹cfu/g。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的粪肠球菌发酵液通过以下方法得到：从粪肠球菌标准菌株的单一菌落中，挑菌接种到粪肠球菌培养基中，30～35℃条件下，培养10～12h后，再以3～5％的体积比接种到粪肠球菌培养基，进行发酵，30～35℃条件下，培养24～48h，制得发酵液。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于粪肠球菌培养基为：胰蛋白胨10g/L,酵母粉10g/L,葡萄糖10g/L,无水氯化钙0.04g/L,七水合硫酸镁0.0192g/L,磷酸氢二钾0.04g/L,磷酸二氢钾0.04g/L,磷酸氢钠0.4g/L,氯化钠0.08g/L,土豆汁50g/L,碳酸钙1g/L,乙酸钠10g/L,碳酸铵2g/L,乙酸铵1g/L,半胱氨酸盐酸盐0.5g/L。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在与所述的粪肠球菌培养基pH值为9。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的高吸水性树脂吸水前大小1.5mm-3.0mm；吸蒸馏水倍率130-170倍，吸生理盐水倍率20-25倍以上；pH值6.5-7.5；保水率(20g/cm²)≥97％。

7.如权利要求1所述的制备方法得到的水体底部环境改良剂。

8.如权利要求7所述的水体底部环境改良剂，其特征在于作用南美白对虾全面的、拉网式的养殖水体底部环境改良。