CN105142729A - 骨生物特异性试剂 - Google Patents
骨生物特异性试剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105142729A CN105142729A CN201480007874.8A CN201480007874A CN105142729A CN 105142729 A CN105142729 A CN 105142729A CN 201480007874 A CN201480007874 A CN 201480007874A CN 105142729 A CN105142729 A CN 105142729A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bone
- biospecific reagents
- biospecific
- peptide
- contrast agent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 title claims abstract description 160
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 179
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 claims abstract description 70
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 claims abstract description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 41
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 34
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims abstract description 34
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims abstract description 24
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 124
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 56
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 claims description 52
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 45
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 claims description 31
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 30
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 claims description 25
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 25
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 21
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 20
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 20
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 claims description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 16
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- RINCXYDBBGOEEQ-UHFFFAOYSA-N succinic anhydride Chemical class O=C1CCC(=O)O1 RINCXYDBBGOEEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 claims description 13
- 210000004409 osteocyte Anatomy 0.000 claims description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 12
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 claims description 12
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 claims description 12
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 claims description 11
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 claims description 11
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 10
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 claims description 9
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 claims description 9
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 claims description 6
- 230000001582 osteoblastic effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 5
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 4
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 claims description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 4
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 4
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011630 iodine Substances 0.000 claims description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 4
- UQGNORZJBSUDEX-UHFFFAOYSA-N [B].OS(O)(=O)=O Chemical compound [B].OS(O)(=O)=O UQGNORZJBSUDEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 3
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 2
- 229910052692 Dysprosium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 2
- 239000000956 alloy Substances 0.000 claims description 2
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 claims description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 claims description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 2
- KBQHZAAAGSGFKK-UHFFFAOYSA-N dysprosium atom Chemical compound [Dy] KBQHZAAAGSGFKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 2
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 2
- 210000004406 stave cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 239000000696 magnetic material Substances 0.000 claims 1
- 239000007769 metal material Substances 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 21
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 abstract description 4
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 abstract description 4
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 abstract 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 abstract 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 abstract 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 55
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 26
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 239000007771 core particle Substances 0.000 description 12
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 12
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 12
- 108010071466 OP3-4 peptide Proteins 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000008859 change Effects 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 8
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 description 8
- -1 iron ion Chemical class 0.000 description 8
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 7
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002616 MRI contrast agent Substances 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 5
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 5
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 5
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- GFSTXYOTEVLASN-UHFFFAOYSA-K gadoteric acid Chemical compound [Gd+3].OC(=O)CN1CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC1 GFSTXYOTEVLASN-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 5
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 4
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 4
- 208000035896 Twin-reversed arterial perfusion sequence Diseases 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 229960003823 gadoteric acid Drugs 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 4
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 4
- 210000005088 multinucleated cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 108010048734 sclerotin Proteins 0.000 description 4
- 235000019832 sodium triphosphate Nutrition 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 3
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 3
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DUKURNFHYQXCJG-UHFFFAOYSA-N Lewis A pentasaccharide Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(NC(C)=O)C(OC2C(C(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)OC(CO)C2O)O)OC1CO DUKURNFHYQXCJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 3
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 125000002730 succinyl group Chemical group C(CCC(=O)*)(=O)* 0.000 description 3
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-I triphosphate(5-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 3
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010069241 Connexin 43 Proteins 0.000 description 2
- 102000001045 Connexin 43 Human genes 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 2
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101800001707 Spacer peptide Proteins 0.000 description 2
- 208000013201 Stress fracture Diseases 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 238000010523 cascade reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 238000000534 ion trap mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 229920000554 ionomer Polymers 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002122 magnetic nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229960003194 meglumine Drugs 0.000 description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 2
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002188 osteogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000010 osteolytic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 108010016184 phenylalanyl-histidyl-arginyl-arginyl-isoleucyl-lysyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 108700038288 rhodamine-phalloidin Proteins 0.000 description 2
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 description 2
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 2
- 238000011125 single therapy Methods 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- MWOGMBZGFFZBMK-LJZWMIMPSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MWOGMBZGFFZBMK-LJZWMIMPSA-N 0.000 description 1
- SXRAPDIXXYFGJG-MDAHIHQXSA-N (2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3r)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s,3r)-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-carboxybut Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CO)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 SXRAPDIXXYFGJG-MDAHIHQXSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPMGJEMWPQOACJ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[(2,4-dimethoxyphenyl)-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)methyl]phenoxy]acetic acid Chemical compound COC1=CC(OC)=CC=C1C(C=1C=CC(OCC(O)=O)=CC=1)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 UPMGJEMWPQOACJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dithiobis(6-nitrobenzoic acid) Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(C(=O)O)=CC(SSC=2C=C(C(=CC=2)[N+]([O-])=O)C(O)=O)=C1 KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1-piperidin-4-ylpyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CC(O)CN1C1CCNCC1 HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006770 Ascorbic Acid Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010005963 Bone formation increased Diseases 0.000 description 1
- 208000018083 Bone metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035126 Facies Diseases 0.000 description 1
- 229910003317 GdCl3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241001484259 Lacuna Species 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000055008 Matrilin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010072582 Matrilin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 1
- 206010029216 Nervousness Diseases 0.000 description 1
- 208000003076 Osteolysis Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N Sorbitan monooleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 206010047623 Vitamin C deficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- WERKSKAQRVDLDW-ANOHMWSOSA-N [(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO WERKSKAQRVDLDW-ANOHMWSOSA-N 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000001785 acacia senegal l. willd gum Substances 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000386 athletic effect Effects 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N beta-D-glucosamine Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 1
- 230000033558 biomineral tissue development Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 208000016738 bone Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920003123 carboxymethyl cellulose sodium Polymers 0.000 description 1
- 229940063834 carboxymethylcellulose sodium Drugs 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 201000008863 chondroblastic osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013170 computed tomography imaging Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 238000001739 density measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 206010013663 drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000009547 dual-energy X-ray absorptiometry Methods 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid Chemical compound CCS(O)(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- MEANOSLIBWSCIT-UHFFFAOYSA-K gadolinium trichloride Chemical compound Cl[Gd](Cl)Cl MEANOSLIBWSCIT-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010044046 gap 27 peptide Proteins 0.000 description 1
- 230000007661 gastrointestinal function Effects 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002962 histologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000035992 intercellular communication Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- DCYOBGZUOMKFPA-UHFFFAOYSA-N iron(2+);iron(3+);octadecacyanide Chemical compound [Fe+2].[Fe+2].[Fe+2].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] DCYOBGZUOMKFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VBMVTYDPPZVILR-UHFFFAOYSA-N iron(2+);oxygen(2-) Chemical group [O-2].[Fe+2] VBMVTYDPPZVILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000007903 liver failure Diseases 0.000 description 1
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 208000029791 lytic metastatic bone lesion Diseases 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Natural products C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- HOGDNTQCSIKEEV-UHFFFAOYSA-N n'-hydroxybutanediamide Chemical compound NC(=O)CCC(=O)NO HOGDNTQCSIKEEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940031182 nanoparticles iron oxide Drugs 0.000 description 1
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N norethisterone Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003791 organic solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000065 osmolyte Effects 0.000 description 1
- 230000004072 osteoblast differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000001009 osteoporotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005408 paramagnetism Effects 0.000 description 1
- 239000011236 particulate material Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N pibenzimol Chemical compound C1CN(C)CCN1C1=CC=C(N=C(N2)C=3C=C4NC(=NC4=CC=3)C=3C=CC(O)=CC=3)C2=C1 INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 150000003053 piperidines Chemical class 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000003918 potentiometric titration Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960003351 prussian blue Drugs 0.000 description 1
- 239000013225 prussian blue Substances 0.000 description 1
- 238000002601 radiography Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000010233 scurvy Diseases 0.000 description 1
- 150000003334 secondary amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 229950004959 sorbitan oleate Drugs 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007885 tablet disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010052768 tyrosyl-isoleucyl-glycyl-seryl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 239000004034 viscosity adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 210000000707 wrist Anatomy 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
- A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B6/00—Apparatus or devices for radiation diagnosis; Apparatus or devices for radiation diagnosis combined with radiation therapy equipment
- A61B6/02—Arrangements for diagnosis sequentially in different planes; Stereoscopic radiation diagnosis
- A61B6/03—Computed tomography [CT]
- A61B6/032—Transmission computed tomography [CT]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1793—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
- A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
- A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/04—X-ray contrast preparations
- A61K49/0409—Physical forms of mixtures of two different X-ray contrast-enhancing agents, containing at least one X-ray contrast-enhancing agent which is not a halogenated organic compound
- A61K49/0414—Particles, beads, capsules or spheres
- A61K49/0423—Nanoparticles, nanobeads, nanospheres, nanocapsules, i.e. having a size or diameter smaller than 1 micrometer
- A61K49/0428—Surface-modified nanoparticles, e.g. immuno-nanoparticles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/18—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes
- A61K49/1818—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles
- A61K49/1821—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles
- A61K49/1824—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles
- A61K49/1827—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles having a (super)(para)magnetic core, being a solid MRI-active material, e.g. magnetite, or composed of a plurality of MRI-active, organic agents, e.g. Gd-chelates, or nuclei, e.g. Eu3+, encapsulated or entrapped in the core of the coated or functionalised nanoparticle
- A61K49/1866—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles having a (super)(para)magnetic core, being a solid MRI-active material, e.g. magnetite, or composed of a plurality of MRI-active, organic agents, e.g. Gd-chelates, or nuclei, e.g. Eu3+, encapsulated or entrapped in the core of the coated or functionalised nanoparticle the nanoparticle having a (super)(para)magnetic core coated or functionalised with a peptide, e.g. protein, polyamino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/18—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes
- A61K49/1818—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles
- A61K49/1821—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles
- A61K49/1824—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles
- A61K49/1827—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles having a (super)(para)magnetic core, being a solid MRI-active material, e.g. magnetite, or composed of a plurality of MRI-active, organic agents, e.g. Gd-chelates, or nuclei, e.g. Eu3+, encapsulated or entrapped in the core of the coated or functionalised nanoparticle
- A61K49/1875—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, microcapsules, liposomes particles, e.g. uncoated or non-functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised microparticles or nanoparticles coated or functionalised nanoparticles having a (super)(para)magnetic core, being a solid MRI-active material, e.g. magnetite, or composed of a plurality of MRI-active, organic agents, e.g. Gd-chelates, or nuclei, e.g. Eu3+, encapsulated or entrapped in the core of the coated or functionalised nanoparticle coated or functionalised with an antibody
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01R—MEASURING ELECTRIC VARIABLES; MEASURING MAGNETIC VARIABLES
- G01R33/00—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables
- G01R33/20—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables involving magnetic resonance
- G01R33/44—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables involving magnetic resonance using nuclear magnetic resonance [NMR]
- G01R33/48—NMR imaging systems
- G01R33/54—Signal processing systems, e.g. using pulse sequences ; Generation or control of pulse sequences; Operator console
- G01R33/56—Image enhancement or correction, e.g. subtraction or averaging techniques, e.g. improvement of signal-to-noise ratio and resolution
- G01R33/5601—Image enhancement or correction, e.g. subtraction or averaging techniques, e.g. improvement of signal-to-noise ratio and resolution involving use of a contrast agent for contrast manipulation, e.g. a paramagnetic, super-paramagnetic, ferromagnetic or hyperpolarised contrast agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- High Energy & Nuclear Physics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Signal Processing (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Surgery (AREA)
- Theoretical Computer Science (AREA)
- Condensed Matter Physics & Semiconductors (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
Abstract
骨生物特异性试剂包括造影剂核心，该造影剂核心是磁共振成像(MRI)或计算机断层扫描(CT)可见的。造影剂核心被聚合物壳包围，而聚合物壳被骨靶向肽所官能化。在使用时，骨靶向肽将骨生物特异性试剂导向至骨。骨生物特异性试剂能够用于诊断成像技术，如MRI和CT，骨重建活动成像，检测和治疗病理性骨疾病和/或骨修复过程。本发明使用骨生物特异性试剂，扩展了骨疾病和骨病理学的诊断和/或治疗的方法。
Description
本发明涉及用于骨的生物特异性试剂，特别是骨生物特异性试剂，其包括骨特异性肽所官能化的纳米粒子、亚微米粒子、原子或分子元素。本发明特别关注将这些骨生物特异性试剂应用于诊断成像技术，如磁共振成像(MRI)和计算机断层扫描(CT)，应用于骨重塑活动的成像、检测和治疗病理性骨疾病和/或骨修复过程。本发明使用生物特异性试剂拓展了骨疾病以及骨病理学的诊断和/或治疗。
磁共振成像(MRI)和计算机断层扫描(CT)是组织成像的所选的方法。磁共振成像基于高强度磁场，产生一个净磁矢量暂时改变高度水和组织中的质子的取向。磁共振成像主要适用于韧带、肌腱及脊髓的损伤和脑部肿瘤的成像。然而，此项技术应用于骨组织成像时，并不能获得如同计算机断层扫描(CT)成像一般的细节图像。
计算机断层扫描(CT)是基于X射线衰减原理，利用检测器检测X射线衰减，并计算像素的值，然后将其转化为图像。定量计算机断层扫描(QCT)能够提供骨密度测量，相对于二维的骨密度面积能够检测三个维度的真实体积(毫克/立方厘米)。这使得操作员能够区分皮质和松质骨，并且能够准确地确定骨随时间推移的变化。因此，定量CT主要用来进行椎体松质骨密度检查，定量CT可以选择性地评估具有代谢活性和结构上十分重要的骨小梁，并且能够区分椎骨破裂，测量骨质损失。然而，定量CT非常昂贵，而且相对于双能X线吸收测定法，定量CT使得患者暴露于高剂量的电离辐射。
对于磁共振成像和计算断层扫描而言，造影剂是改善成像技术中不可缺少的，因为它们提高了图像的清晰度。目前在磁共振成像中使用的造影剂对组织没有特异性，这些造影剂是基于铁氧化物纳米颗粒或者钆。然而，虽然现在使用的造影剂能够提供良好的成像效果，对患者是安全的，但是这些造影剂是无法识别特定的组织和细胞类型。此外，目前CT所使用的造影剂，如基于碘的化合物有几个局限性，包括由于快速肾清除引起的成像时间较短，同时导致肾毒性，血管渗透。
尽管骨质疏松症的发病机制目前还不清楚，数据表明，它是由破骨细胞的骨吸收活动和成骨细胞的骨形成活动之间的不平衡所造成的。这种不平衡的细胞活动导致骨组织的渐进性弱化，最终导致形成微骨折，微骨折是在临床显著的骨折的起始点。流行病学的研究表明，这些微骨折往往在特定的解剖部位发生，包括椎体，股骨转子下(sub-throcantericfemouralbone)和手腕。尽管不平衡细胞活动在大多数骨质疏松症病例中起关键作用，其中骨质流失(即骨质疏松)的相对贡献可能有所不同，这取决于许多不同的因素，包括年龄，性别，遗传易感性骨质疏松，缺乏锻炼，药物，健康和营养。一般情况下，骨质疏松症被归类为原发性(即老年期)或继发性(即非年龄相关)。
原发性骨质疏松症可以进一步分为I型(即绝经后)或II型(即年龄相关型)。Ⅰ型骨质疏松症主要发生在50岁至70岁人群，主要是由于绝经后的雌激素损失及其对骨小梁的影响。Ⅱ型与衰老过程密切相关，通常发生在70岁及以上人群，衰老影响骨小梁和皮质骨。然而，众所周知，骨密度的变化在每个人身上都发生，与年龄无关。在正常的成长期，骨形成比骨质流失更快，直到30-35岁时达到骨质峰值(PBM)。一旦达到骨质峰值，男性和女性都开始发生骨质流失，其流失率范围在0.5-2％每年，取决于个体差异。在女性中，更年期进一步加速骨质流失率，时间段约为10年。
继发性骨质疏松症是由一种隐形的医疗疾病或生活方式(如饮酒、药物滥用或不良饮食)引起的并发症，并可能影响到所有年龄段的人。事实上，已经有报道表明年龄仅仅在几周龄的婴儿，其骨密度低于预期值，会发展为骨质疏松症。可以引起继发性骨质疏松症的医疗疾病包括激素失衡，类风湿性关节炎，肝衰竭，肾衰竭疾病，胃肠功能受损，多发性硬化症，坏血病，神经性厌食症和运动员三联症。在某些情况下，医疗疾病并不导致骨质疏松症的条件，但治疗所使用的药物能够导致骨质疏松症。一些用来进行治疗医疗疾病的药物，如皮质类固醇，一些激素和锂，与继发性骨质疏松症的发展有关。一般而言，骨质疏松症在女性比男性多发具有更多的临床显著性。
骨肉瘤是最常见的原发性肉瘤(其发生率为：0.2–3/每100000人/年)，是成骨细胞分化导致类骨质组织不良或骨生长不良，从而影响骨完整性。尽管骨肉瘤也能够发展为恶性骨肉瘤，其在恶性肿瘤中的绝对发病率低。在严格的组织学定义中，骨肉瘤病变在组织学特征上是多样化的，其预后不仅取决于这些参数，还依赖于骨肉瘤的解剖学部位。骨肉瘤的另一个特点是有产生不同数量软骨基质和纤维组织的趋势，在某些情况下，主导了实质的骨质形成。因此，形成三个亚型的分类，即成骨细胞型骨肉瘤，软骨母细胞型骨肉瘤和成纤维细胞型骨肉瘤。在骨骼系统内部，骨肉瘤通常发生在四肢骨的干骨后端，在成人中观察到，骨肉瘤最通常的是在膝关节周围，以及在轴向骨架或颅面骨周围。就骨而言，骨肉瘤可能发生在骨内(髓内或皮层内室)，骨的表面，以及骨外位点。
骨转移的特点是成骨性表型，溶骨性表型，或者同时具备成骨性和溶骨性表型。不同的恶性肿瘤表现出促骨效应和骨高亲和力，癌症最常见的转移沉积在骨中。常见的恶性肿瘤，包括乳腺癌，前列腺癌和肺癌最终转移为骨癌。因此，骨癌被广泛认为是肿瘤领域的一个重大挑战。一旦转移至骨，转移细胞增加成骨细胞的增殖和活性，包括通过释放可溶性介质或通过细胞与细胞的接触来增加核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)的表达和其释放。这将通过RANKL-核因子-κB受体活化因子配基(RANK)之间的相互作用激活破骨细胞前体的分化和成熟破骨细胞的活性。破骨细胞的骨吸收所释放的细胞因子和其他生长因子如TGF-β和胰岛素样生长因子(IGF)对肿瘤细胞是必需的，从而提高肿瘤的生长和延续的过程。骨吸收增加所留下的溶骨性病变可以通过X射线、密度扫描技术和磁共振成像进行检测。成骨细胞异常转移所增加的骨形成，在骨中表现为高密度区，可以通过X-射线和磁共振成像(MRI)观测。
健康和病变的骨之间的骨吸收活化的频率的差异大于骨吸收和形成阶段之间的差异。骨激活频率是由骨表面的所谓的多发性骨细胞单元(BMU)的量所表征。多发性骨细胞单元在骨质疏松的骨表面的含量大于正常骨表面的含量，而且其含量与骨中破骨细胞含量及骨吸收陷窝的增加相关。在系统性疾病如骨质疏松症中的骨穿刺组织学染色，可能被用来作为诊断方法，而且染色会使人们有可能观察到用于诊断和治疗的微观定位的固体颗粒材料(比如普鲁士蓝染色铁离子)。
根据上述观点，认为提供新的手段来诊断和/或治疗骨相关疾病的需求将越来越多。
因此，根据本发明的第一个方面，是提供了一种骨生物特异性试剂，其包括造影剂核心，此造影剂核心是可以被磁共振成像(MRI)或计算机断层扫描(CT)观测到；造影剂核心被一个聚合物壳所包围，这个聚合物壳起到官能化骨靶向肽的作用，其中所使用到的肽是具有骨生物学特异性的。
本发明中的骨生物特异性试剂的发明是基于设计，开发和完善一系列不同的纳米粒子，亚微米粒子和原子或分子的元素，以及它们在磁共振成像(MRI)和计算机断层扫描(CT)成像技术中的应用，这将在下面详细描述。骨生物特异性试剂包括核心，此核心包括已经被能够特异性地识别骨细胞(如成骨细胞或破骨细胞)或矿化骨细胞外基质(如羟基磷灰石)的肽官能化的常规造影剂。因此，所述肽使所述试剂对骨病理学具有特异性生物识别。如实施例1-3中所描述和图5E所示，发明人已经准备了一系列不同的骨特异性试剂，其中一定范围的不同骨靶向肽将被用于官能化聚合物壳。仔细选择用于造影剂核心的材料，形成聚合物壳的聚合物，和骨特异性的官能化肽，使得骨生物特异性试剂能够用于诊断和/或治疗各种骨相关疾病。因此，生物特异性试剂可用于骨重塑活动的成像、检测病理情况(如骨吸收或骨肿瘤)和或/骨折或手术干预后的组织修复过程。更为有利的是，发明的生物特异性试剂已经被设计为骨重建过程中必不可少的与疾病骨特异性相互作用的必要元素，同时可以精心定制用于更少入侵性早期诊断和/或治疗骨疾病的可注射材料。
优选地，造影剂形成或组成为本发明生物特异性试剂的核心，其由外层的聚合物壳包围。造影剂核心的平均直径可为5nm和30nm之间，或在10nm和20nm之间。
在使用磁共振成像或计算机断层扫描中可见的造影剂核心可以包含金属或非金属材料。造影剂核心可以包括磁性或非磁性材料。在造影剂是磁性的实施方式中，它可以包括磁共振成像造影剂。造影剂可以包括顺磁性或超顺磁性材料。例如，造影剂核心可能包括铁、镍、钴或镝，或化合物，如氧化物或合金，其中包含一种或多种的这些元素。优选地，所述造影剂包括磁铁矿(Fe3O4)。
在所述的造影剂是非磁性的实施方式中，它可能包括磁共振成像(MRI)和计算机断层扫描(CT)的造影剂。例如，造影剂核心可能包括钆、金、碘或硼硫酸。这些材料中的每一种都可以用作磁共振成像或计算机断层扫描的造影剂。优选地，所述造影剂包括钆。
骨生物特异性试剂的聚合物壳可以包含聚合物，该聚合物可以包括多肽、带电荷的蛋白质、多糖和核酸。合适的聚合物可以包括任何生物相容性的天然的或合成的聚合物，包括但不限于，壳聚糖，胶原，明胶，透明质酸，聚(乙二醇)聚(乳酸)，聚(乙醇酸)，聚(ε-己内酯)和聚(丙烯酸)。优选的用于聚合物壳的聚合物可以包括壳聚糖。壳聚糖是一种已知的线性多糖，其含有随机分布的β-(1-4)连接的D-氨基葡萄糖(去乙酰化单元)和N-乙酰-D-氨基葡萄糖(乙酰化单元)
所述聚合物壳通过物理吸附或共价键连接到造影剂核心，连接方式取决于聚合物的化学性质和造影剂核心的表面的化学性质。聚合物壳可以进一步设计衍生物以达到有效地骨靶向肽的官能化是符合需要的。例如，聚合物壳可以通过聚合物与琥珀酸酐反应进衍生。这样可以提供聚合物和骨靶向肽之间的空间，以减少空间位阻。它也可以提高所使用的聚合物(如壳聚糖)的溶解性和生理pH。琥珀酸酐又名二氢-2,5-呋喃二酮，分子式C4H4O3。可以由琥珀酸酐反应得到聚合物的衍生物的方法是本领域技术人员所知晓的，例如壳聚糖，这些将在实施例1中描述。
能够连接到的聚合物壳上的骨靶向肽的量取决于官能团的量，所使用的聚合物的类型和连接的化学性质。优选地，肽以间隔阵列布置包被在聚合物壳的外表面。聚合物壳可被一种(即相同的序列)骨靶向肽所官能化，后者将生物特异性试剂导向骨。然而，聚合物壳可被两种或两种以上(即具有不同的序列)的骨靶向肽所官能化。
例如，骨靶向肽可以将生物特异性试剂导向至骨中存在的细胞，例如成骨细胞，骨细胞，破骨细胞，骨细胞祖细胞，破骨细胞祖细胞或骨衬里细胞。优选地，骨靶向肽将生物特异性试剂导向成骨细胞和破骨细胞。具有能够模仿GAP-连接通讯(例如连接蛋白43，Cx43)的肽也可以作为骨靶向肽，GAP-连接通讯特异性于帧间和帧内的成骨细胞和破骨细胞的细胞通讯。此外，骨靶向肽可以将生物特异性试剂导至骨的骨矿物相，即羟基磷灰石。因而，包括羟基磷灰石靶向肽的生物特异性试剂可以作为一个有价值的工具，用来监测骨组织创伤或疾病进展(如骨质疏松症)过程中的形成骨组织的矿化作用。
众所周知，许多人骨疾病与骨重建循环失调有关，如佩吉特氏病，和癌症骨转移，预示了护骨素(osteoprogeterin)(OPG)和RANKL之间的不平衡。发明者由此相信RANK-RANKL-OPG途径及其相关途径可能被用于开发骨代谢疾病的治疗和诊断的具有成本效益的、生物特异性材料。
因此，骨靶向肽可以与细胞间隙连接通讯(GJIC)和RANK-RANKL-OPG三联途径相关。事实上，本发明中的生物特异性试剂对于RANK-RANKL具有特异性的事实，意味着它会在样本中识别和定位靶细胞。在骨肉瘤和骨转移等疾病中，肿瘤可以通过X射线和MRI来定位，而生物特异性试剂可以提高信号，提高分辨率，从而可以发现许多可能会被错过的更小的病灶。
骨靶向肽可以包含氨基酸序列，其通过结合RANK来模拟OPG从而减少或者防止RANKL诱导的破骨细胞分化及其活性。另外，骨靶向肽同样可以模仿类例如连接蛋白43的蛋白的功能，参与抑制破骨细胞-破骨细胞或者破骨细胞-成骨细胞间的相互作用。骨靶向肽也可用于识别成骨细胞的迁移，或者骨的骨质相(即羟基磷灰石)。因此骨靶向肽可以包含如下的氨基酸序列：
(a)SRPTEKTIFII(SEQIDNo.1)。这种肽来源于连接蛋白43模拟肽(Cx43)Gap27，可以被用来阻断破骨细胞-破骨细胞和/或破骨细胞-成骨细胞间的相互作用。在此处引用到时，这个肽被指定为Gap27p。它是一个已知的序列，并且能够抑制破骨细胞-成骨细胞接触所依赖的细胞(sell)间通信。
(b)YCLEIEFCY(SEQIDNo.2)。这种肽是基于OPG的113-122段氨基酸残基(这代表OPG肽的氨基酸序列，是来自由氨基酸113-122所识别的蛋白的片段)，能够特异性结合RANK并且抑制RANKL诱导的破骨细胞分化和活性。在此处引用到时，这个肽被指定为OP3-1。
(c)YCEIEFCYLIR(SEQIDNo.3)。这个肽也是基于OPG的113-122段氨基酸残基，能够特异性结合RANK并且抑制RANKL诱导的破骨细胞分化和活性。在此处引用到时，这个肽被指定为OP3-4。
(d)FHRRIKA(SEQIDNo.4)。这个肽能够特异性结合成骨细胞并促进成骨细胞的迁移。
(e)PSHRN(SEQIDNo.5)。这个肽还能够特异性结合成骨细胞。
(f)YIGSR(SEQIDNo.6)。这个肽能够特异性结合骨血管内皮细胞。
(g)STLPIPHEFSRE(SEQIDNo.7)。这个肽对于羟基磷灰石有高亲和力。
(h)VTKHLNQISQSY(SEQIDNo.8)。这个肽对于羟基磷灰石同样具有高亲和力。
本发明人已经发现，在一些实施方式中，优选使用连接肽或者间隔肽将骨靶向肽连接到聚合物壳上，优选地这些肽都是它们的衍生物(如与琥珀酸的衍生物)。这样的连接肽在水溶液中具有提高的溶解度，从而有利于肽和试剂的嫁接，进而提高生物配体递呈至细胞。
在一种实施方式中，可使用的合适的连接肽包括氨基酸序列K-KK)。这种肽被指定SEQIDNo.9或者在引用到时被称为G1PL。这个肽是一个极性分子，因而能够提高溶解度和可接近性。
在另一个实施方式中，连接肽可以包含氨基酸序列K(KK)-(KKKK)。这种肽被指定SEQIDNo.10或者在引用到时被称为G2PL。
在另一实施方式中，连接肽可以包含氨基酸序列K(KK)-(KKKK)-(KKKKKKKK)。这种肽被指定SEQIDNo.11或者在引用到时被称为G3PL。
因此，骨靶向肽可以包含任何SEQIDNo.9-11，或者是该片段的功能变体。例如，任何指定的SEQIDNo.1-8的肽可以结合任何SEQIDNo.9-11的肽。因此，在另一个实施方式中，骨靶向肽可以包括以下氨基酸序列，或功能性片段或它们的变体：
(i)(KKKK)-(KK)-K-YCLEIEFCY(SEQIDNo.12)。这个肽包含OP3-1肽(即SEQIDNo.2)，连接至连接肽G2PL(也就是SEQIDNo.10)。在此处引用到时，这个肽被指定为G2PL-OP3-1。
发明者还表明，骨靶向肽可以包括1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(即DOTA)。骨靶向肽可以包括钆特酸，大环结构的基于钆的MRI造影剂，包括由有机酸“DOTA”作为螯合剂。因此，在另一个实施方式中，骨靶向肽可以包括以下氨基酸序列，或功能性片段或它们的变体：
(j)DOTA-KGG-YCLEIEFCYLIR(SEQIDNo.13)。这个肽是一种新型的DOTA连接的OP3-4肽，用来螯合MRI可见的Gd3+。在此处引用到时，这个肽被指定为DOTA-OP3-4。
(k)DOTA-Gd-KGG-YCLEIEFCYLIR(SEQIDNo.14)。这个肽是一种新型的MRI可检测到的OP3-4衍生物并螯合了Gd3+。在此处引用到时，这个肽被指定为DOTA-Gd-OP3-4。
(l)DOTA-Gd-FHRRIKA(SEQIDNo.15)。这个肽是一种新型的MRI可检测成骨细胞迁移螯合了Gd3+的衍生物。在此处引用到时，这个肽被指定为DOTA-Gd-FHRRIKA。
DOTA分子是相当大的，具有较强的酸性和反应活性，所以该分子需要加入一个空间或者连接肽以避免损害骨靶向肽的效价。
正如实施例子中所描述的，骨靶向肽可以通过已知方法进行合成，比如，通过固相肽合成(SPPS)，使用传统的9-芴甲氧羰基(Fmoc)来实行保护/去保护策略。
骨靶向肽可以进行环化。环化形式的骨靶向肽在化学性质上更加稳定。另有一些报道认为环化骨靶向肽能够提高活性(见ShinJetal2008)，比如将二甲亚砜(DMSO)进行氧化形成半胱氨酸-半胱氨酸二硫键。
骨靶向肽可以通过共价键连接至骨生物特异性试剂的聚合物壳。优选地，聚合物壳都含有壳聚糖，这是一类衍生物，比如说使用琥珀酸酐产生的衍生物。在一种实施方式中，肽可以通过使用碳化二亚胺共价连接至聚合物壳，以产生发明的纳米颗粒。
生物特异性试剂可以包括生物活性化合物，其可以通过骨靶向肽被输送到骨。例如，生物活性化合物可以选自一组分子，其中包含：染料，电化学介质，蛋白质，肽，化学化合物(如药物)，遗传物质(如寡核苷酸，DNA，RNA)，小分子，抗体，酶，和其他生物活性分子。生物活性化合物可以被连接至生物特异性试剂，例如通过交联、吸附、离子相互作用或直接共价连接到聚合物覆层达到包埋的效果。
在一种实施方式中，骨生物特异性试剂可以包含纳米颗粒。在另一种实施方式中，骨生物特异性试剂可以包括亚微米粒子。纳米粒子可以基本上是球形的形状。
生物特异性试剂的平均颗粒直径可以为亚微米级别，即小于1000纳米。生物特异性试剂的平均颗粒直径可以为100～450纳米。
生物特异性试剂可以通过首先采用离子交联步骤，接着以预定的浓度溶解聚合物和交联剂，然后内部造影剂核心可以加到混合物中。该聚合物也可以溶解在含有交联剂的溶液中(例如，在连续搅拌条件下逐步滴入)。混合物可以发生反应(例如，至少30分钟)。然后将混合物离心，所得到的颗粒(即生物特异性试剂)通过合适的溶剂(如乙醇或水)收集。收集到的颗粒可以通过冷冻干燥进行储存和/或描述特征。可以加入连接肽或者间隔肽，比如在存在琥珀酸酐的条件下通过开环反应进行连接。最后，可以连接骨靶向肽，比如通过碳化二亚胺化学法。
如实施例4中所描述的，发明者已经证明本发明的生物特异性试剂能够有效地应用于磁共振成像(MRI)或计算机断层扫描(CT)成像技术，依赖于所使用的造影剂材料。
因此，根据第二方面，提供了根据第一方面的骨生物特异性试剂用于诊断。
可以理解的是，骨生物特异性试剂将在一系列不同生物成像应用中被用作生物传感器。比如生物特异性试剂作为生物标记优选用于磁共振成像(MRI)或计算机断层扫描(CT)成像技术。
因此，在第三方面，还提供了第一方面的骨生物特异性试剂用作磁共振成像(MRI)生物标记标记或者计算机断层扫描(CT)生物标记。
在第四方面，提供了包括根据第一方面的骨生物特异性试剂的生物标记。
该生物标记可用于磁共振成像(MRI)或计算机断层扫描(CT)成像。
在第五方面，提供了包括使用根据第一方面的骨生物特异性试剂的磁共振成像(MRI)或计算机断层扫描(CT)成像方法。
发明者已经证明，骨生物特异性试剂可以用于骨重塑活动的成像、骨病理情况检测(例如，骨吸收、骨肿瘤、骨质疏松等)，和/或骨折后的骨组织修复过程。此外，除了各种成像技术可以利用具有强大的骨靶向特性的骨特异性试剂，实施例5也解释了本发明的生物特异性试剂是如何有效地抑制破骨细胞及破骨细胞活性，从而可以防止骨吸收。发明者因此认为生物特异性试剂可以应用于治疗骨疾病的各种治疗应用。
因此，根据第六方面，提供了根据第一方面的骨生物特异性试剂用于治疗，且优选作为药物。
本发明的骨生物特异性试剂用于预防或治疗骨疾病特别有用。
因此，根据第七方面，根据第一方面的骨生物特异性试剂用于治疗、预防或改善骨疾病。
第八方面，提供了治疗、改善或预防骨疾病的方法，该方法包括给予需要这种治疗的被试者有效治疗剂量的根据第一方面的骨生物特异性试剂。
能够治疗的骨疾病例子包括，骨吸收、骨肿瘤的治疗，派杰氏病(Paget’s)病，类风湿关节炎，骨关节炎，骨质疏松症，骨肉瘤，骨量减少和骨转移，包括溶骨和成骨细胞的表型。
可以理解的是，本发明的骨生物特异性试剂可用于药物，而后者可用于单一治疗。另外，根据本发明的骨生物特异性试剂可以作为一种辅助手段，或者在它们之间组合使用，或者与已知骨疾病治疗方法联合使用。
本发明的生物特异性试剂可结合在组合物中，这些组合物有不同的形式，依赖于，尤其是这些组合物的使用方式。因此，例如，组合物可以是粉末形式、粉末悬浮液凝胶，片剂，胶囊，液体剂，凝胶剂，水凝胶凝胶，气溶胶，喷剂，胶束溶液，或可以给予需要治疗的人或动物的任何其他合适的形式。可以理解的是，根据本发明的药物载体对于给药者，其应当对药物载体有很好的耐受性。
含有本发明的生物特异性试剂的药物可以以多种方式使用。例如，在要求口服的情况下，生物特异性试剂可以被包含在组合物中，所述组合物例如以片剂，胶囊或者液体剂的形式被口服摄入。含有本发明的生物特异性试剂的组合物也可以通过吸入给药(如通过滴鼻)。
本发明的生物活性试剂也可并入到缓慢或延迟释放装置中。该装置可被放置于至少邻近治疗部位。这样的装置在需要长期使用本发明的生物特异性试剂进行治疗时特别有利，这通常需要频繁给药(例如至少每日注射)。
在优选的实施方式中，本发明的生物特异性试剂以及根据本发明的组合物，可以通过注射进入血液或者直接导入需要治疗的位点，也就是骨给药给被试者。注射可以是静脉注射(大丸药或注射)或皮下注射(大丸药或注射)，或皮内(大丸药或注射)或骨内注射。
应当理解的是，本发明的生物特异性试剂所需要的量是由其生物活性和生物可利用度来决定，这反过来又依赖于给药方式，生物特异性试剂的理化性质，以及生物特异性试剂是作为单药治疗或联合治疗。给药的频率也会受到生物特异性试剂在治疗被试者体内的半衰期所影响。最佳给药剂量可以由本领域的技术人员确定，而且随着特定生物特异性试剂的使用、药物组合物的强度、给药方式以及疾病诊断和治疗的推进而发生改变。其他的影响因素取决于治疗的特殊被试者差异会导致需要调整剂量，被试者因素包括受试者年龄、体重、性别、饮食和给药时间。
一般来说，每天0.01微克～0.5克/公斤体重剂量的生物特异性试剂可用于治疗、改善或预防骨疾病。
本发明的试剂可以在疾病发作期之前、之中或之后进行给予。每日剂量可以单次给药(例如，每日注射一次)。或者，生物特异性试剂可以在一天内需要给药两次或更多次。作为一个例子，试剂可以每日给药两次(或更多次，取决于治疗的骨疾病的严重程度)，每日剂量25毫克和7000毫克(即假设被试者体重为70公斤)之间。病人在早晨醒来可以接受第一次给药剂量，然后在晚上接受第二次给药剂量(如果是每日两个剂量治疗机制)，或之后以3或四小时的间隔给药。另外，缓释装置可用于向患者提供最佳剂量，而不需要进行重复剂量的给药。
已知的程序，如那些制药行业所通常采用的(例如在体内实验，临床试验等)，同样可以被用于形成特定的配方，其中包括生物特异试剂和精确的治疗机制(如每日试剂的剂量和给药频率)。
因此，在本发明的第九方面，提供了一种包括第一方面的骨生物特异性试剂以及药学上可接受的载体的药物组合物。
第十方面，本发明还提供了制备根据第九方面的组合物的制备方法，该方法包括将治疗有效剂量的第一方面的骨生物特异性试剂和药学上可接受的载体接触。
“被试者”可以是脊椎动物，哺乳动物或家畜。因此，根据本发明的组合物和药物可用于治疗任何哺乳动物，例如牲畜(如马)，宠物，或可用于其他兽医应用。然而，最优选地，被试者是人。
当给药给被试者时，生物特异性试剂的“有效治疗剂量”可以是任何剂量，是治疗骨疾病，或产生预期的效果所需药物或药剂的量。例如，所使用的试剂的治疗有效剂量可以从约0.01毫克到约800毫克。
此处的“药学上可接受的载体”是任何已知的化合物或已知的化合物组合，本领域技术人员已知这些化合物在制备药物组合物时是有用的。
在一种实施方式中，药学上可接受的载体可以是固体，药物组合物可以是粉末剂或片剂的形式。药学上可接受的固体载体可以包括一个或多个物质，该物质同时也可以作为调味剂，润滑剂，助溶剂，助悬剂，染料，填料，助流剂，压缩助剂(compressionaid)，惰性粘合剂，甜味剂，防腐剂，染料，涂料，或片剂崩解剂。载体也可能是封装材料。在粉末剂中，该载体是精细分割的固体，其与本发明的精细分割的活性剂存在混合物中。在片剂中，活性剂(如生物特异性试剂)可与适当比例的具有必要的压缩性能的载体混合，并压缩成一定形状和需要的尺寸。粉末剂和片剂优选包含高达99％胶囊或小室(cell)。合适的固体载体包括，例如磷酸钙，硬脂酸镁，滑石，糖，乳糖，糊精，淀粉，明胶，纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，低熔点蜡和离子交换树脂。在另一实施方式中，该药物载体可以是凝胶，该组合物可以采用乳膏或类似的形式。
然而，该药物载体也可能是液体，药物组合物是溶液的形式。液体载体是用于制备溶液，悬浮液，乳液，糖浆，酏剂和加压的组合物。本发明的试剂可以溶解或悬浮在药学上可接受的液体载体，如水，有机溶剂，水/有机溶剂混合物或者药学上可接受的油或脂。液体载体可以包含其他合适的药物添加剂，如溶解剂(solubiliser)，乳化剂，缓冲剂，防腐剂，甜味剂，调味剂，悬浮剂，增稠剂，着色剂(colour)，粘度调节剂，稳定剂或渗透调节剂。口服和肠胃外给药的液体载体的合适例子包括水(部分含有上述添加剂，例如纤维素衍生物，优选羧甲基纤维素钠溶液)，乙醇(包括一元醇和多元醇，如乙二醇)和它们的衍生物，和油(如分馏椰子油和花生油)。
胃肠外给药，载体也可以是油酯，如油酸乙酯和肉豆蔻酸异丙酯。无菌液体载体可以用于无菌液体形式的肠胃外给药组合物中。
无菌溶液或悬浮液的液体药物组合物可以用于，例如，肌肉内注射，鞘内注射，硬膜外注射，腹腔内注射，静脉注射，特别是皮下注射。试剂可制备成无菌固体组合物，该无菌固体组合物在给药时可以溶解或者悬浮于无菌水、盐水或其他适当的无菌注射媒介。
本发明的生物特异性试剂和药物组合物可以以无菌溶液或悬浮液的形式口服给药，所述无菌溶液或悬浮液含有其他溶质或悬浮剂(例如，足够生理盐水或葡萄糖使得溶液等渗)，胆汁盐，阿拉伯胶，明胶，山梨醇单油酸酯，聚山梨酯80(山梨醇油酸酯和其酸酐共聚环氧乙烷)以及其他类似物。本发明的生物特异性试剂，也可通过液体或者固体的组合物形式进行口服。适用于口服的组合物包括固体剂型，如丸剂，胶囊剂，颗粒剂，片剂，粉末剂，液体剂的形式，例如溶液，糖浆，酏剂，和悬浮液。用于肠胃外给药的形式包括无菌溶液、乳液和悬浮液。
在此描述的所有特征(包括伴随的权利要求书，摘要及其附图)，和/或披露的任何方法或过程的所有步骤，可以与上述任何方面以任何凡是组合，除了至少那些特征和/或者步骤是相互排斥的组合。
为更好地理解本发明，并展示相同的实施方式如何发挥效果，现在将参考附图通过举例的方式给予说明，其中：
图1显示了壳聚糖(CS)衍生反应的方案，采用琥珀酸酐形成琥珀酸衍生壳聚糖(Suc-Chi)；
图2显示了非衍生的壳聚糖(CS，A)和衍生化的壳聚糖(Suc-Chi,B)的核磁共振图谱。(B)中的垂直箭头显示，非改良的CS中的峰在改良后的CS中消失；
图3显示了与非衍生化的壳聚糖相比，琥珀酸酐衍生化壳聚糖的程度；
图4显示了琥珀酸酐衍生化后的壳聚糖，及其被含有如下氨基酸序列YCEIEFCYLIR的OP3-4肽官能化后的红外光谱(FTIR)；
图5A显示了壳聚糖珠(A和C)和根据本发明的生物特异性造影纳米粒子的一个实施方式(B和D)的动态光散射(DLS)分析(A和B)和扫描电子显微镜(SEM)(C和D)图谱。图5E是本发明的纳米颗粒的一个实施方式的示意图；
图6显示了在包含和不包含过滤过程时壳聚糖浓度对纳米颗粒尺寸的影响。(A)150分子量，(B)400分子量，(C)600分子量，(D)不同分子量Ch的浓度依赖性(n＝4)；
图7显示了DOTA-OP3-4的典型结构，即OPG模拟肽op3-4连接DOTA的结果；op3-4特异性定位表达于骨细胞表面的细胞因子，DOTA可用于螯合几种金属离子，比如用于造影剂的钆(Gd3+)。
图8是DOTA-OP3-4的装配示意图。编号箭头指示装配顺序；
图9显示DOTA-OP3-4的离子阱质谱图谱；
图10是G2PL-OP3-1的装配示意图。编号箭头指示装配顺序；
图11显示G2PL-OP3-1的离子阱质谱图谱；
图12显示了在纳米颗粒上和纳米颗粒-DOTA-Gd-OP3-4连接物上OP3-4肽的氨基酸分析；
图13显示DOTA-Gd-OP3-4连接物以及阴性对照DOTA-OP3-4连接物及磷酸盐缓冲液(PBS)的MRI图谱分析。肽溶解于PBS，浓度为0.4微克/毫升。以T1加权模式扫描，参数TE8.7，TR550；
图14显示了浓度为0.4微克/毫升的磁性纳米粒子-OP3-4连接物(mSCB)和纳米粒子-DOTA-Gd-OP3-4连接物的MRI图谱。磷酸盐缓冲液(PBS)用作阴性对照。基于钆和基于磁性珠的造影剂分别提供了典型的明、暗成像；
图15显示了肽对于rhRANKL所诱导的破骨细胞形成的影响。单核细胞在含有100μM肽的αMEM培养基中培养6天。rhRANKL的浓度为50纳克/毫升，rhM-CSF的浓度为25纳克/毫升，rhOPG的浓度为50纳克/毫升。培养3天后使用具有相同浓度和剂量的培养基更换。
图16显示了肽连接的纳米粒子对rhRANKL所诱导的破骨细胞生成的影响。单核细胞在含有(100μM)肽和珠(25微克/毫升)的αMEM培养基中培养6天。rhRANKL的浓度为50纳克/毫升，rhM-CSF的浓度为25纳克/毫升，rhOPG的浓度为50纳克/毫升。培养3天后使用相同浓度和剂量的培养基更换。
图17显示了在单层培养的单核细胞中对于rhRANKL所诱导的破骨细胞的活性的抑制作用，通过罗丹明-鬼笔环肽和Hoescht33258双染色分析F-肌动蛋白环形成作用；同时；
图18显示了在骨片上培养的细胞的扫描电镜照片(SEM)。(A)未经处理的细胞(B)仅M-CSF(C-D)M-CSF+rhRANK(E-F)吸收陷窝(G-H)细胞用OP3-4处理同时连接造影剂。
实施例
发明者有兴趣提供改进的仪器和方法，用于诊断(例如，通过磁共振成像或计算机断层扫描成像)或治疗骨相关疾病。因此，他们已经设计和开发了新型骨特异性试剂2(如纳米粒子，亚微米颗粒，和原子或分子元素)，如图5E所示，包括造影剂核心4(例如，离子氧化物或金金属核心)，造影剂核心4被聚合物6(例如，壳聚糖)包被，聚合物6本身由一个或者多个肽8或其他仅仅存在于骨的肽衍生或者官能化，肽8可以识别骨细胞(如破骨细胞，成骨细胞)，其他仅仅存在于骨的肽为例如羟基磷灰石特异性识别肽。根据精心选择的核心4的材料，形成外壳6的聚合物涂层，和连接至聚合物外壳6的骨特异性的官能化肽8，纳米粒子2等，即可用于诊断或治疗。例如，颗粒2可用于骨重建活动的成像，检测病理条件和/或组织修复过程。下面的例子说明了他们的研究结果。
例1–连接琥珀酸酐至壳聚糖
发明者已经表明，壳聚糖(CS)是一种可用于造影剂或者其他药物活性成分的涂层，能够与琥珀酸酐连接。壳聚糖琥珀酸酯结合物在本领域是已知可以作为具有生物相容性和可生物降解性的药物输送剂，该药物输送剂可用于片剂。
1.材料和方法
(1)壳聚糖(CS)衍生化
CS是通过琥珀酸酐(Suc-Chi)使用已知的开环反应衍生(Yanetal.,2006,YakugakuZasshi,126,789-793)。1％(W/V)CS溶液(溶于1％v/v醋酸)通过0.8微米的微孔膜(Millipore)过滤并然后用甲醇稀释(1：4)。琥珀酸酐(≥99％GC，SigmaAldrich)以4％(w/v)浓度溶解在5毫升丙酮中，琥珀酸酐在磁力搅拌下逐滴加入，室温搅拌下过夜。从过量的溶液中除去形成的凝胶，用甲醇双倍稀释，并用超纯水透析3天。每天更换两次超纯水，得到的沉淀物经离心收集和冻干。
(2)Suc-Chi亚微米珠的生产(即纳米颗粒)
Suc-Chi珠使用已经建立的离子凝胶法生产(Agnihotri,etal.,2004)。简要地说，三聚磷酸钠(TPP)溶液(1毫克/毫升)在磁力搅拌下逐滴加入1毫克/毫升Suc-CS溶液(如上所述)，在达到体积比为1：5时，在室温下反应45分钟。为生产磁共振成像(MRI)或CT成像的生物特异性造影剂(即本发明的纳米粒子2)，在加入到Suc-CS溶液之前，铁氧化物核心4颗粒(Fe3O4，平均直径10纳米)或金核心4颗粒(平均直径小于20纳米)通过超声波被分散在TPP溶液中。所加入的核心颗粒4的重量为所溶解的聚合物6的一半。核心颗粒4然后通过乙醇离心洗涤(消毒)，然后用超纯水离心洗涤以及用无菌PBS重构。
(3)肽合成
表1中所列的肽8及其相应的氨基酸序列被合成，然后用于官能化核心颗粒4。
表1用于造影剂生物官能化的典型肽列表
注：G1PL,G2PL和G3PL不是线性的分子，而是超枝化分子(树枝状的)。参见图10，G2PL分子(垂直)连接于OP3-1(水平)。
肽2通过固相肽合成(SPPS)方法进行合成，在以TentaGelSNH2树脂(0.1毫摩尔)和二甲基甲酰胺(DMF)为反应溶剂的条件下，使用传统的9-芴甲氧羰基(Fmoc)来实行保护/去保护策略。酸性(acidliable)Fmoc-Rink-酰胺连接剂(连接剂)首先加入到树脂中为了后续肽8的断裂。然后加入氨基酸序列C-末端的第一个氨基酸，依次通过耦合/脱保护随后的氨基酸步骤，按照肽序列合成表1所示的整个氨基酸序列。耦合反应(30分钟，2次)通过使用HBTU(O-苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基-脲-六氟-磷酸酯)来进行氨基基团活化，和N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)作为叔碱。在二甲基甲酰胺中的20％哌啶(v/v)断裂(2分钟，3次)Fmoc保护基团使得保护的氨基基团得以暴露。在所有制备中，树脂，连接剂和氨基酸分别以1:4:4的摩尔比加入。HBTU和DIPEA(二异丙基乙胺)分别以氨基酸的1倍和2倍摩尔浓度加入。每个耦合和/或脱保护步骤之后进行清洗步骤(用DMF3次)。
护骨素(Osteoprogeterin)(OPG)模拟肽，op3-1op3-4，如表1所列，是通过二甲基亚砜(DMSO)氧化形成半胱氨酸-半胱氨酸二硫键来进行环化，如文献中描述(Góngora-Benítez,etal.,2011)。OP3是OPG蛋白的一个片段。成骨细胞表面上的RANKL(有时释放为可溶性形式)与破骨细胞上的RANK相互作用，从而启动级联反应导致破骨细胞分化和活性增加。OPG(由成骨细胞释放)是RANKL的诱饵，OPG结合RANK能够抑制RANKL-RANK相互作用，从而停止级联反应。因此，OPG类似物将作为骨相关的靶细胞的受体的配体。合成完成后，需要环化的肽在氮气环境中从树脂上断裂3小时。断裂后，通过冷乙醚收集肽，离心分离并通过氮气流进行干燥。肽溶解在60毫升的氧化缓冲液(100mM磷酸二氢钠和2mM盐酸胍，5％二甲亚砜，pH7.0)，振摇12小时。然后将溶液用1MHCO2H(250微升)进行酸化，并通过LC-MS进行纯化。合并纯化组分并冻干。环化程度(二硫键的形成)通过传统的Ellman’s试剂定量自由巯基来确定。肽最终通过高效液相色谱法(HPLC)和质谱法(MS)进行鉴定。
(4)肽连接的生物特异性造影剂的生产(即纳米颗粒)
肽2通过碳二亚胺化学方法以共价连接到核心粒子4以形成本发明的纳米颗粒2。非衍生的颗粒被分散在2毫升2-(N-吗啉)乙磺酸(MES)缓冲液(0.1MMES，0.3MNaCl，pH6.5)中以获得1毫克/毫升珠浓度。然后通过添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC，4mM)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS，10mM)来活化核心粒子4的羧基基团。活化反应在室温下进行30分钟。加入β-巯基乙醇(2.8微升)使得过量的EDC失活，通过脱盐膜清洗核心粒子4。从表1中所选择的肽(例如肽OP3-4，序列YCEIEFCYLIR)以1毫克/毫升浓度溶解于MES缓冲液，随后以体积比1：1加入到核心粒子4的溶液中。在室温下磁力搅拌反应3小时进行结合反应。结合反应通过加入终浓度为5-10mM的羟胺来结束。
参照图5E，这是本发明的纳米颗粒2的一个实施方式的示意图。图显示了纳米颗粒2具有内核心4(例如，离子氧化物或金)，其被聚合物外壳6(如壳聚糖)包覆。外壳6以可以识别骨细胞的肽8或者其他的只存在于骨的肽(例如羟基磷灰石)的覆层所官能化。所得到的纳米颗粒2通过超滤离心柱纯化(截留分子量(MWCO)100000)，冻干后保存在-20℃。图1显示了CS衍生为Suc-Chi及其后续被OP3-4肽所官能化的示意图。
2.结果
CS和Suc-Chi的1H核磁共振谱图如图2所示。简要地说，谱峰信号标识如下：2.50-2.70ppm(H-Ac)是乙酰葡萄糖胺单体的乙酰基蛋白；2.50-2.75ppm(H2D)是葡萄糖胺单体的质子2；3.95-4.65ppm(H2-2)是葡萄糖胺和乙酰葡萄糖胺单体的质子2至6；4.65-4.90ppm(HOD)对应溶剂(HOD)；5.10-5.30ppm(H1-A)对应乙酰葡萄糖胺单体的质子1；5.30-5.65ppm(H1-D)对应葡萄糖胺单体质子1。相比于CS的核磁共振图谱，Suc-Chi的谱图证实琥珀酸酐成功连接到CS。这在5.00-5.70ppm范围内看到对H1(D)，H1-A和H2D解析不足或者信号丢失(见图2B，前两个箭头)和3.6-3.9ppm范围的H2D解析不足或者信号丢失。在Suc-Chi图谱中可见2.34–2.57ppm范围的新信号，该信号在CS图谱中缺失，该信号对应于琥珀酰基团的两个甲烷氢基团(–COCH2CH2COOH)，这与之前他人的报道相一致(Liang,etal.,2012,Xiangyang,etal.,2007)。
通过滴定法测定的取代度为25.5％，而通过1H核磁共振图谱测定的取代度为30.6％。尽管精确度稍低，电位滴定法可以用来测定CS和Suc-Chi中游离氨基的摩尔量。如图3所示，计算得出CS衍生化的程度(DD)为79.92％(±5.85)，Suc-Chi为54.4％(±3.7)。对于两种聚合物，重复5次滴定。这些数据表明通过与琥珀酸酐反应，CS衍生化后-NH2基团数量减少。存在的非衍生化的-NH2基团对于确保纳米颗粒2生产过程中通过TPP的CS交联很重要。
如图4所示，红外光谱结果表明壳聚糖成功衍生为Suc-Chi及其后续OP3-4成功交联。光谱波段1(3500～3200cm-1)包括伯胺和仲胺的N-H伸缩和O-H伸缩。OP3-4光谱波段1的主要贡献来自参与酰胺键的胺。波段2(1640-1580cm-1)可能对应于伯胺的N-H变形，存在四种；对于OP3-4、Suc-Chi和Suc-Chi-OP3-4，存在酰胺的N-H变形振动以及仲酰胺的羰基伸缩。波段3，(1722cm-1)，这是目前在Suc-Chi和未解析的Suc-Chi-OP3-4所存在的，可能是由于在前面所述的(波段3)酰胺键连接之外的，琥珀酰基通过酯键连接至多糖所引起的羰基的伸缩振动。Suc-Chi-OP3-4的酪氨酸和苯丙氨酸的芳香结构可以由波段4(3000cm-1)证实，这源于不饱和类的C-H伸缩。Suc-Chi-OP3-1波谱的波段5(500–540cm-1)的一个大峰，在OP3-4样品中被削弱，在Suc-Chi和SC中消失，可以归结于二硫键的存在。从1H核磁共振谱图和滴定结果，得出的结论是，琥珀酰基团成功连接至CS的胺基基团。红外光谱的结果则进一步表明了肽OP3-4成功连接至Suc-Chi。
动态光散射分析(DLS)和扫描电子显微镜(SEM)表明，纳米颗粒的平均流体力学直径(Z平均)为3664.0nm(多分散性指数，PDI为0.4)，在结合Fe3O4核心粒子4(10nm)后增加为408.3nm(PDI为0.5)，即可生成MRI可检测的纳米颗粒2，如图5A-D所示。壳聚糖分子量的变化，有无过滤步骤的浓度变化，允许纳米颗粒2的大小和分散性指数(PDI)在可控范围内调整，见图6A-D。
例2---OP3与DOTA连接
发明者然后设置实验以确定蛋白护骨素3(OP3)是否能够结合钆特酸葡甲胺(DOTA)；OP3特异性表达于骨细胞，如破骨细胞和成骨细胞；DOTA是一种螯合剂，可用作包被各种造影剂，包括钆。钆特酸葡甲胺是一种钆特酸，具有已知大环结构的基于钆的造影剂，其中包含有机酸DOTA作为螯合剂。
1.材料和方法
一种新型的DOTA-OP3-4连接蛋白采用Fmoc化学法通过固相肽合成方法进行合成，如在OP3-1和OP3-4的合成中所描述。然而在这种情况下，核心氨基酸赖氨酸首先被加入，接着将DOTA连接到由Mtt所保护的NH2基团。随后连接两个甘氨酸以形成间隔，随后进行OP3-4肽的组装。在DOTA分子和OP3-4序列之间引入赖氨酸-甘氨酸-甘氨酸间隔，被认为在肽合成和其他任何可能影响肽潜在效率的过程中，对于避免潜在空间位阻十分重要。DOTA-OP3-4的结构如图7所示。
相同的固相肽合成方法被用来合成新的衍生化的生物特异性肽，该肽含有直链端(见图8)或支链端(见图10)，可以有利于稳定肽与造影剂的结合。
2.结果
图9和图11显示了肽OP3-4的直链(图9)和支链(图11)的典型的质谱谱图。这些证明了成功合成这些肽，对于稳定结合和官能化核心粒子4十分必要。合成的肽经纯化处理后纯度达95％以上。
例3-生成生物特异性的造影剂-被连接到OP3的DOTA包被的钆
发明者接下来设置实验以确定基于钆(Gd)的造影剂是否能够通过将骨-特异性蛋白护骨素3(OP3)与DOTA包被的钆(Gd)相连接形成本发明的纳米粒子2。期望这样生成的纳米粒子2可以被用于磁共振成像和/或计算及断层扫描成像技术。
1.材料和方法
新型肽被用于制造可用于MRI和CT的生物特异性造影剂(即官能化的纳米粒子2)(见表1)。核心粒子4螯合钆的反应通过在反缓冲液中将DOTA-OP3-4和氯化钆共保温15小时进行。DOTA的部分可以作为多齿配体被金属阳离子所包围，在这种情况下络合Gd3+，以形成MRI可见的肽。复合物中DOTA配体和金属离子的配位取决于配体的构象与金属阳离子的几何倾向。对自身而言，DOTA作为八齿配体，通过四个氨基和四个羧基基团结合金属。在这项研究中，DOTA分子作为七齿隔配体发挥作用，其中一个羧基基团与肽形成共价键。然而，连接DOTA和肽的氨基酸的羧基基团提供了第八个配体并恢复了八齿配体状态，从而形成了高度稳定的配合物(Viola-Villegas,etal.,2009)。
所得到的纳米粒子2通过直接连接肽8和磁性核心粒子4(即MRI造影剂)或者金核心粒子4(即CT造影剂)而得到，其中肽8具有直链或者支链根，磁性粒子4(如氧化铁)包被有薄层聚合物6或者陶瓷。在这种情况下，聚合物6和陶瓷的聚合物羧基或羟基基团的表面官能化通过氨基酸被活化和衍生化，所述氨基酸是从表1中选择的用于共价键枝接的具有选择生物特异性的肽。
2.结果
LC-MS证实了成功螯合了Gd3+，DOTA-OP3-4肽的m/z峰值694.1被m/z峰值714.8所替代，m/z峰值714.8对应于螯合了Gd3+后的[M+3H]3+。氨基酸分析进一步证明了OP3-4成功连接至基于钆(Gd)的纳米粒子2(图12)。水解后，测定聚合物中葡萄糖胺单元数量和氨基酸数量。结合至纳米粒子2的肽8的数量通过积分峰面积计算得出。图12显示了OP3-4肽8官能化的钆(Gd)纳米粒子2水解产品的代表性的液相色谱轮廓。每微克材料中葡萄糖胺单元计算为：基于壳聚糖纳米粒子(CNB)中含量为1.92纳摩尔，钆核心粒子4(其自身)中含量为1.40纳摩尔；OP3-4肽8官能化后的钆纳米粒子2和Gd纳米粒子-DOTA-OP3-4中含量为0.27纳摩尔。
重要的是，在纳米粒子-OP3-4和纳米粒子-DOTA-Gd-OP3-4中，计算得出肽8的结合数量为4.2毫摩尔每克纳米粒子2。单个氨基酸按照反映OP3-4序列中的数量的摩尔比例进行检测。
例4，测试纳米粒子2在磁共振成像中的用途
发明者然后测试所述生物特异性肽官能化的纳米粒子2在T1和T2模式下的阳性MRI信号。通过衍生化的肽8包被钆核心4并且枝接于之前用生物活性肽官能化后的纳米粒子获得生物特异性纳米粒子2。
1.材料和方法
位于PBS缓冲液中的肽(DOTA-OP3-4和DOTA-Gd-OP3-4)溶液通过肽(DOTA-OP3-4和DOTA-Gd-OP3-4)首先溶解于最少量二甲基亚砜(DMSO)中，然后用PBS(1％DMSO)稀释至20微克/毫升的肽储液，并用0.1M盐酸调整pH至7.2制备。各种纳米粒子2(即，单独的核心粒子4，纳米粒子-OP3-4配合物，纳米粒子-DOTA-Gd-OP3-4配合物)悬浮于同样的PBS缓冲溶液。制备DOTA-Gd3+储液(20微克/毫升)和Fe3O4纳米粒子储液(10纳米，20微克/毫升)，并分别作为基于钆和基于Fe3O4的造影剂的阳性对照。
首先比较了纳米粒子-OP3-4配合物和纳米粒子-DOTA-Gd-OP3-4配合物。为此，将Whatman滤纸(圆形，直径15毫米，目录号：1441150，美国)浸泡在储液中。
在纳米粒子2和肽8的浓度影响研究中，通过对储液的一系列双稀释获得不同浓度的肽8和纳米粒子2。DOTA-Gd-OP3-4的浓度为(10，5，2.5，1.25，0.625，0.313，0.078，0.039，0.020，0.010，和0.005微克/毫升)，单独的核心粒子4的浓度为(20，10，5，2.5，1.25，0.625，0.313，0.078，0.039，0.020，和0.010微克/毫升)。分析物以每孔500微升的量加入24孔培养板。所有MRI成像使用英国布莱顿和萨塞克斯医学院临床影像科学中心的西门子AVANTO1.5T磁共振扫描仪完成。
2.结果
图13显示了阴性对照用磷酸盐缓冲液(PBS)浸润的滤膜的典型的MRI扫描图谱，阴性对照含有DOTA-OP3-4肽8，但不含有造影剂核心4，以及钆螯合的DOTA-OP3-4纳米粒子2。扫描清楚地显示，虽然阴性对照仅仅显示出噪音信号，肽8螯合钆核心4给出了一个明显的阳性信号。通过对用钆螯合DOTA-OP3-4和肽官能化磁性纳米粒子2浸润的滤膜的比较分析显示，在选定检测模式下，两种造影剂获得了预期典型的明场和暗场图像(图14)。
例5-体外测试OP3和OP4配合的纳米粒子的抑制作用
发明者接着确定纳米粒子2是否能够体外抑制破骨细胞生成和破骨细胞活性，纳米粒子2包含了DOTA包被的钆核心4配合至护骨素3或4(OP3或者OP4)肽8。
1.材料和方法
根据常规方法基于用RANK和M-CSF加标细胞方法或者成骨细胞单核细胞共培养体系中加标M-CSF方法，从健康人供体的外周血中新鲜分离单核细胞中获取破骨细胞。肽以及肽连接的纳米粒子2(即纳米粒子-OP3-4，磁性纳米粒子-OP3-4，纳米粒子-OP3-DOTA和纳米粒子-OP3-4-Gd-DOTA)按照肽浓度行动于50μM加入到细胞中，肽浓度通过氨基酸分析测定。阴性对照不添加任何测试材料，而阳性对照中加入50(纳克/毫升)的rhOPG。无论在单核细胞分化为破骨细胞之前或者之后，都可以进行加标流程。
对破骨细胞生成和破骨细胞活性的抑制作用是通过使用光学显微镜对TRAP阳性多核细胞(MNC)的计数和使用落射荧光显微镜对递呈F-肌动蛋白环的多核细胞的计数来进行定量的。通过扫描电镜观察骨切片上形成的骨吸收陷窝的数目分析可以定性评价破骨细胞活性。每3天更换一次新鲜培养基，培养基中添加各种生长因子和试验材料。
采用三种不同的方法确定破骨细胞生成和破骨细胞活性的抑制作用。这些方法是：(1)对TRAP阳性多核细胞进行计数；(2)通过Hoechst33258和罗丹明-鬼笔环肽双染色对具有肌动蛋白环(MNC-AR+)的多核细胞计数；(3)通过骨切片上培养细胞后形成的骨吸收陷窝评估来确定骨吸收程度。当细胞数量太多而无法通过显微镜计数，使用图像编辑软件(ImageJv1.44p)来识别和计数细胞。该软件允许根据破骨细胞和非破骨细胞的颜色和形状来清点细胞，破骨细胞生成的程度则用每个视野范围内的TRAP阳性细胞的百分比来表示(Labno)。
2.结果
被OP3-4肽官能化及其螯合钆衍生物的纳米粒子2对破骨细胞生成的影响研究结果如图15所示。在所有制剂中，相对于对照，修饰的肽8游离和结合纳米粒子2以及钆降低破骨细胞形成水平的显著，但是具有不同程度的疗效(图15)。
此外，与非官能化的纳米粒子相比，肽官能化的磁性纳米粒子2能够显著降低破骨细胞形成(见图16)。细胞培养中添加纳米粒子-OP3-4，纳米粒子-DOTA-OP3-4和纳米粒子-DOTA-Gd-OP3-4，TRAP阳性多核细胞数目并没有显著差异，表明了对于肽的不同修饰以及其枝接于纳米粒子2并不改变肽抑制破骨细胞生成的能力。当使用其本身时，Gd3+无论在体内还是体外都是有毒的。然而，大环类螯合剂如DOTA紧密捕集Gd3+，提高离子溶解度从而避免细胞毒性。事实上，具有许多自由羧基基团并提高了溶解度的Suc-Chi会进一步含有Gd3+和提高DOTA-Gd-OP3-4的生物相容性。
对已经分化的破骨细胞的活性的明显抑制作用如图17所示。
最后，通过扫描电镜观察已经分化的破骨细胞活性的抑制作用，发现对照细胞中存在的骨吸收陷窝消失，如图18所示。
总结
广泛提倡局部注射药物对于骨病理学(如骨质疏松症)进行诊断和治疗。发明者目前已经开发出了新型造影剂用于磁共振成像和计算机断层扫描成像，该造影剂能够识别骨细胞、成骨细胞和破骨细胞，以及矿物化的骨外基质。这些生物识别性能是通过合成新型的衍生肽获得，这些肽对于不同骨细胞和骨的矿物质相具有特异性。对于肽的衍生化的设计是为了在不影响其成像特性的前提下，有利于肽稳定结合纳米粒子造影剂或者离子组合物的造影剂。特定类型的造影剂以磁化聚合珠的形式，主要是壳聚糖纳米珠，通过包被磁性核心或者枝接钆修饰肽或者在交联介质中分散离子的方法来生成。识别骨的细胞和结构组份的这种能力一般耦合控制细胞行为的能力。能够在单核细胞分化为破骨细胞的过程中识别单核细胞，同时能够识别并抑制分化的破骨细胞的活性的生物特异性造影剂，可以与能够促进成骨细胞迁移的试剂同时获取。
总之：-
1.具有成骨细胞-和破骨细胞-特异性肽以及羟基磷灰石-特异性肽的表面官能化的亚微米颗粒，如Fe3O4纳米粒子(即MRI造影剂)和金纳米粒子(即CT造影剂)是优选的。
2.包埋在聚合物珠中的钆(即MRI造影剂)和碘或硼-硫酸(即CT造影剂)，聚合物珠被成骨细胞-和破骨细胞-特异性肽以及羟基磷灰石-特异性肽所官能化。
3.具有成骨细胞-和破骨细胞-特异性肽以及羟基磷灰石-特异性肽的钆(即MRI造影剂)和碘(即CT造影剂)复合物。
4.通过包被合成的或者天然的聚合物形成的纳米粒子，其中聚合物的形态和大小是聚合物的调节的物理化学性质确定，而且聚合物的生物识别性能和生物活性经由能够识别组织细胞的特异性肽衍生化得到。
5.通过交联(主要是离子交联)合成的和天然的聚合物(如壳聚糖)形成的纳米粒子，其中聚合物已经提前被组织特异性肽所官能化，调节交联和生物官能化使得纳米粒子稳定性和递呈生物特异性/生物活性分子的能力最优化。这些纳米粒子包括在其配方中分散的磁共振成像(MRI)和计算机断层扫描(CT)的造影剂。
在所有情况下，这些生物特异性试剂耦合造影剂的特性，具有结合的，固有的生物识别特性，能够诱导组织成像和再生生物活性。
体外成骨细胞和破骨细胞的单层培养和共培养的研究表明了骨-特异性肽对于细胞的功能。给定的成骨细胞-特异性肽(如FHRRIKA)刺激细胞过程的功能，以及OPG模拟肽抑制破骨细胞生成的功能，同样能够被当作治疗骨缺陷症的诊疗试剂(即结合治疗和诊断)。
参考文献
AgnihotriS,A,MallikarjunaN,N&AminabhaviT,M(2004).Recentadvancesonchitosan-basedmicro-andnanoparticlesindrugdelivery.JournalofControlledRelease,100,5–28.
ChaytorAT,EvansWH&GriffithTM(1997).Peptideshomologoustoextracellularloopmotifsofconnexin43reversiblyabolishrhythmiccontractileactivityinrabbitarteries.TheJournalofPhysiology,503,99-110.
ChengX,KinosakiM,TakamiM,ChoiY,ZhangH&MuraliR(2004).DisablingofReceptorActivatorofNuclearFactor-KappaB(RANK)ReceptorComplexbyNovelOsteoprotegerin-likePeptidomimeticsRestoresBoneLossinVivo.JournalofBiologicalChemistry,279,8269-8277.
Góngora-BenítezM,Tulla-PucheJ,Paradís-BasM,WerbitzkyO,GiraudM&AlbericioF(2011).OptimizedFmocsolid-phasesynthesisofthecysteine-richpeptidelinaclotide.PeptideScience,96,69-80.
IlvesaroJ,TaviP&TuukkanenJ(2001).Connexin-mimeticpeptideGap27decreasesosteoclasticactivity.BMCMusculoskeletalDisorders,2.
LabnoC.(2011).IntegratedLightMicroscopyCore:TwoWaystoCountCellswithImageJ[Online].UniversityofChicago.Available:http://digital.bsd.uchicago.edu/resources_files/cell％20counting％20automated％20and％20 manual.pdf[Accessed01/12/20112011].
LiangN,SunS,LiX,PiaoH,PiaoH,CuiF&FangL(2012).α-Tocopherolsuccinate-modifiedchitosanasamicellardeliverysystemforpaclitaxel:Preparation,characterizationandinvitro/invivoevaluations.InternationalJournalofPharmaceutics,423,480-488.
LloydA,William,JohnG,William,HeathH,StandenG,MatteoS&MeikleS,Thomas.2007.BiomaterialswithFunctionalisedSurfaces.USApatentapplication12/517,705.
MeikleST,PeruginiV,GuildfordAL&SantinM(2011).Synthesis,CharacterisationandinvitroAnti-AngiogenicPotentialofDendronVEGFBlockers.MacromolecularBioscience,11,1761-1765.
ShinJ,KimY-M,LiS-Z,LimS-K&LeeW(2008).Structure-FunctionoftheTNFReceptor-likeCysteine-richDomainofOsteoprotegerin.MoleculesandCells,25,352-357.
TaHM,NguyenG,Thi,Tuyet,JinH,Mi,ChoiJ,ParkH,KimN,HwangH-Y&KimK,Kyu(2010).Structure-BasedDevelopmentofaReceptorActivatorofNuclearFactor-kBLigand(RANKL)InhibitorPeptideandMolecularBasisforOsteoporosisProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesoftheUnitedStatesofAmerica,107,20281–20286.
Viola-VillegasN&DoyleRP(2009).Thecoordinationchemistryof1,4,7,10-tetraazacyclododecane-N,N′,N″,N′″-tetraaceticacid(H4DOTA):Structuraloverviewandanalysesonstructure–stabilityrelationships.CoordinationChemistryReviews,253,1906-1925.
XiangyangX,LingL,JianpingZ,ShiyueL,JieY,XiaojinY&JinshengR(2007).PreparationandcharacterizationofN-succinyl-N′-octylchitosanmicellesasdoxorubicincarriersforeffectiveanti-tumoractivity.ColloidsandSurfacesB:Biointerfaces,55,222-228.
YanC,ChenD,GuJ,HuH,ZhaoX&QiaoM(2006).PreparationofN-succinyl-chitosananditsphysical-chemicalpropertiesasanovelexcipient.YakugakuZasshi,126,789-793.
Claims (35)
1.一种骨生物特异性试剂，其包括磁共振成像(MRI)或计算机断层扫描(CT)可见的造影剂核心，该造影剂核心被骨-靶向肽所官能化的聚合物壳所包围，其中，肽在使用时能够将生物特异性试剂导向骨。
2.根据权利要求1所述的生物特异性试剂，其中，所述造影剂核心的平均直径为5-30nm。
3.根据权利要求1或2所述的生物特异性试剂，其中，所述造影剂核心包含金属材料。
4.根据权利要求3所述的生物特异性试剂，其中，所述造影剂核心包含磁性材料，同时是一种磁共振成像的造影剂。
5.根据权利要求3或4所述的生物特异性试剂，其中，所述造影剂核心包括铁，镍，钴或镝或化合物，如一种氧化物或合金，其包含一个或多个这些元素。
6.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述造影剂包含磁铁矿(Fe3O4)。
7.根据权利要求1-3的任何一项所述的生物特异性试剂，其中，所述造影剂核心包括非磁性材料，是MRI和CT的造影剂。
8.根据权利要求7所述的生物特异性试剂，其中，所述造影剂核心包括钆、金、碘或硼-硫酸。
9.根据权利要求8所述的生物特异性试剂，其中，所述造影剂包括钆。
10.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述骨生物特异性试剂的聚合物外壳包括多肽，带电蛋白，多糖或核酸。
11.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述聚合物壳包含具有生物相容性的天然的或者合成的聚合物，聚合物包括壳聚糖，胶原，明胶，透明质酸，聚(乙二醇)聚(乳酸)，聚(乙醇酸)，聚(ε-己内酯)和聚(丙烯酸)。
12.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述聚合物壳包含壳聚糖。
13.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述聚合物壳由琥珀酸酐衍生化。
14.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述聚合物壳被一种、两种或者两种以上的骨靶向肽所官能化，其中所述骨-靶向肽将所述生物特异性试剂导向至骨。
15.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述骨-靶向肽将所述生物特异性试剂导向至只在骨中存在的细胞，如成骨细胞，骨细胞，破骨细胞，骨细胞祖细胞，破骨细胞祖细胞或骨衬里细胞。
16.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述骨-靶向肽将所述生物特异性试剂导向至成骨细胞和破骨细胞。
17.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述骨-靶向肽将所述生物特异性试剂导向至骨的矿物质相，例如羟基磷灰石。
18.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述骨-靶向肽含有氨基酸序列，该氨基酸序列通过结合RANK模拟OPG的作用，从而减少和防止RANKL所诱导的破骨细胞分化及活性。
19.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述骨-靶向肽包含SEQIDNo.1-15。
20.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述骨-靶向肽是环化的。
21.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述骨-靶向肽通过共价键连接至骨生物特异性试剂的聚合物壳。
22.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述肽使用碳化二亚胺化学方法共价连接至所述聚合物壳。
23.根据上述任何一项权利要求所述生物特异性试剂，其中，所述生物特异性试剂包含生物活性化合物，该生物活性化合物通过所述骨-靶向肽被传递至骨。
24.根据权利要求24所述的生物特异性试剂，其中，所述生物活性化合物选自一组分子，其包括：染料，电化学介体，蛋白质，肽，化学化合物(如药物)，遗传物质(如寡核苷酸，DNA，RNA)，小分子，抗体，或酶。
25.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述生物特异性试剂的平均直径小于1000纳米。
26.根据上述任何一项权利要求所述的生物特异性试剂，其中，所述生物特异性试剂的平均直径为100～450纳米。
27.根据权利要求1-26的任何一项所述的骨生物特异性试剂在诊断中的用途。
28.根据权利要求1-26的任何一项所述的骨生物特异性试剂作为磁共振成像或计算机断层扫描成像的用途。
29.一种生物标记，其包含根据权利要求1-26中任何一项所述的骨生物特异性试剂。
30.一种磁共振成像和计算机断层扫描成像方法，其包含使用根据权利要求1-26中任何一项所述的骨生物特异性试剂。
31.根据权利要求1-26的任何一项所述的骨生物特异性试剂在治疗中的用途，优选作为药物。
32.根据权利要求1-26的任何一项所述的骨生物特异性试剂在治疗、预防或改善骨疾病中的用途。
33.根据权利要求32所述的骨生物特异性试剂，其中所述骨疾病包括骨吸收，骨肿瘤的治疗，佩吉特氏病，骨关节炎，骨质疏松症，骨肉瘤，骨量减少和骨转移，包括溶骨和成骨细胞的表型等。
34.一种药物组合物，其包括根据权利要求1-26的任何一项所述的骨生物特异性试剂和药学上可接受的载体。
35.用于制备权利要求34所述的药物组合物的方法，该方法包括根据使有效治疗剂量的权利要求1-26的任何一项所述的骨生物特异性试剂和药学上可接受的载体的接触。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB1302199.3 | 2013-02-07 | ||
| GB1302199.3A GB2510587B (en) | 2013-02-07 | 2013-02-07 | Biospecific agents for bone |
| PCT/GB2014/050265 WO2014122431A1 (en) | 2013-02-07 | 2014-01-31 | Biospecific agents for bone |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105142729A true CN105142729A (zh) | 2015-12-09 |
Family
ID=47998779
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201480007874.8A Pending CN105142729A (zh) | 2013-02-07 | 2014-01-31 | 骨生物特异性试剂 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20150367000A1 (zh) |
| EP (1) | EP2953682B1 (zh) |
| JP (2) | JP6400026B2 (zh) |
| CN (1) | CN105142729A (zh) |
| CA (1) | CA2898366C (zh) |
| ES (1) | ES2904260T3 (zh) |
| GB (1) | GB2510587B (zh) |
| HK (1) | HK1217910A1 (zh) |
| NZ (1) | NZ710436A (zh) |
| WO (1) | WO2014122431A1 (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109289119A (zh) * | 2018-09-16 | 2019-02-01 | 华北理工大学 | 一种用于脊柱康复系统的磁性纳米粒子球混合物 |
| WO2020247037A1 (en) * | 2019-06-05 | 2020-12-10 | Battelle Memorial Institute | Polymer-functionalized magnetic particle embodiments for solute separation, and devices and systems for using the same |
| CN117582485A (zh) * | 2023-11-15 | 2024-02-23 | 湛江中心人民医院 | 方格星虫三肽在制备骨质疏松药物中的应用 |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3988121A1 (en) | 2014-02-27 | 2022-04-27 | Synartro AB | Hyaluronan conjugates with pharmaceutically active substances, methods and compositions |
| JP7156665B2 (ja) * | 2017-06-13 | 2022-10-19 | 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構 | 医薬、並びにその製造方法 |
| CN108187143A (zh) * | 2018-02-09 | 2018-06-22 | 福州大学 | 一种兼具磁热效应和原位诱导成骨的多功能复合材料及其制备方法 |
| CN111558041A (zh) * | 2020-04-30 | 2020-08-21 | 浙江理工大学 | 羟基磷灰石包裹磁性载药纳米颗粒及其制备方法和在制备骨肉瘤光疗药物中的应用 |
| WO2023041639A2 (fr) * | 2021-09-15 | 2023-03-23 | Centre National De La Recherche Scientifique | Nanoparticules hybrides |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101272801A (zh) * | 2005-09-28 | 2008-09-24 | 加利福尼亚大学董事会 | 钙结合肽 |
| AU2012204100A1 (en) * | 2005-03-21 | 2012-08-02 | The Regents Of The University Of California | Functionalized magnetic nanoparticles and methods of use thereof |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CH694935A5 (de) * | 2000-07-26 | 2005-09-30 | Straumann Holding Ag | Oberflaechenmodifizierte Implantate. |
| AU2003213246A1 (en) * | 2002-02-21 | 2003-09-09 | University Of Virginia Patent Foundation | Bone targeting peptides |
| CA2554755A1 (en) * | 2004-01-28 | 2005-08-11 | Cytimmune Sciences, Inc. | Functionalized colloidal metal compositions and methods |
| CN101155549B (zh) * | 2005-03-21 | 2011-11-16 | 加利福尼亚大学董事会 | 官能化磁性纳米颗粒及其使用方法 |
| US20100028387A1 (en) * | 2007-06-12 | 2010-02-04 | Ganesan Balasundaram | Biocompatible Coated Nanostructured Titanium Surfaces |
| US8063636B2 (en) * | 2009-05-29 | 2011-11-22 | The Invention Science Fund I, Llc | Systems, devices, methods, and compositions including targeted ferromagnetic structures |
| US9316645B2 (en) * | 2011-10-07 | 2016-04-19 | Brown University | Methods, compositions and kits for imaging cells and tissues using nanoparticles and spatial frequency heterodyne imaging |
-
2013
- 2013-02-07 GB GB1302199.3A patent/GB2510587B/en active Active
-
2014
- 2014-01-31 WO PCT/GB2014/050265 patent/WO2014122431A1/en active Application Filing
- 2014-01-31 NZ NZ710436A patent/NZ710436A/en unknown
- 2014-01-31 US US14/765,508 patent/US20150367000A1/en not_active Abandoned
- 2014-01-31 EP EP14702931.8A patent/EP2953682B1/en active Active
- 2014-01-31 JP JP2015556563A patent/JP6400026B2/ja active Active
- 2014-01-31 CN CN201480007874.8A patent/CN105142729A/zh active Pending
- 2014-01-31 CA CA2898366A patent/CA2898366C/en active Active
- 2014-01-31 ES ES14702931T patent/ES2904260T3/es active Active
-
2016
- 2016-05-24 HK HK16105926.0A patent/HK1217910A1/zh unknown
-
2018
- 2018-08-17 JP JP2018153482A patent/JP6683773B2/ja active Active
-
2019
- 2019-11-25 US US16/693,780 patent/US11464878B2/en active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2012204100A1 (en) * | 2005-03-21 | 2012-08-02 | The Regents Of The University Of California | Functionalized magnetic nanoparticles and methods of use thereof |
| CN101272801A (zh) * | 2005-09-28 | 2008-09-24 | 加利福尼亚大学董事会 | 钙结合肽 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| KAZUHIRO AOKI等: ""Peotide-based delivery to bone"", 《ADVANCED DRUG DELIVERY REVIEWS》 * |
| MENG YANG等: ""Affibody modified and radiolabelled gold-iron oxide heteronanostructures for tumor PET，optical and MR imaging"", 《BIOMATERIALS》 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109289119A (zh) * | 2018-09-16 | 2019-02-01 | 华北理工大学 | 一种用于脊柱康复系统的磁性纳米粒子球混合物 |
| CN109289119B (zh) * | 2018-09-16 | 2022-05-17 | 华北理工大学 | 一种用于脊柱康复系统的磁性纳米粒子球混合物 |
| WO2020247037A1 (en) * | 2019-06-05 | 2020-12-10 | Battelle Memorial Institute | Polymer-functionalized magnetic particle embodiments for solute separation, and devices and systems for using the same |
| US11944982B2 (en) | 2019-06-05 | 2024-04-02 | Battelle Memorial Institute | Polymer-functionalized magnetic particle embodiments for solute separation, and devices and systems for using the same |
| CN117582485A (zh) * | 2023-11-15 | 2024-02-23 | 湛江中心人民医院 | 方格星虫三肽在制备骨质疏松药物中的应用 |
| CN117582485B (zh) * | 2023-11-15 | 2024-06-07 | 湛江中心人民医院 | 方格星虫三肽在制备骨质疏松药物中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2953682B1 (en) | 2021-10-13 |
| JP2018199693A (ja) | 2018-12-20 |
| JP6400026B2 (ja) | 2018-10-03 |
| US20150367000A1 (en) | 2015-12-24 |
| US20200215207A1 (en) | 2020-07-09 |
| US11464878B2 (en) | 2022-10-11 |
| NZ710436A (en) | 2020-07-31 |
| WO2014122431A1 (en) | 2014-08-14 |
| CA2898366C (en) | 2021-05-04 |
| CA2898366A1 (en) | 2014-08-14 |
| HK1217910A1 (zh) | 2017-01-27 |
| ES2904260T3 (es) | 2022-04-04 |
| JP6683773B2 (ja) | 2020-04-22 |
| EP2953682A1 (en) | 2015-12-16 |
| GB2510587A (en) | 2014-08-13 |
| JP2016509007A (ja) | 2016-03-24 |
| GB2510587B (en) | 2020-05-20 |
| GB201302199D0 (en) | 2013-03-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105142729A (zh) | 骨生物特异性试剂 | |
| Qi et al. | Self‐assembled peptide‐based nanomaterials for biomedical imaging and therapy | |
| US8945526B2 (en) | Amphiphilic substance, and drug delivery system and molecular imaging system using the same | |
| CN103687624A (zh) | 靶向的聚合缀合物和其用途 | |
| WO2011008823A9 (en) | Peptide-mediated non-covalent delivery of active agents across the blood brain barrier | |
| CN101531704A (zh) | 肽基化合物 | |
| Ringhieri et al. | Liposomes derivatized with multimeric copies of KCCYSL peptide as targeting agents for HER-2-overexpressing tumor cells | |
| CN109563128A (zh) | 恶性肿瘤靶向肽 | |
| JP2010528122A (ja) | 白金薬剤と結合されたポリマー | |
| Tao et al. | A novel biocompatible, simvastatin-loaded, bone-targeting lipid nanocarrier for treating osteoporosis more effectively | |
| Liu et al. | Engineered superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPIONs) for dual-modality imaging of intracranial glioblastoma via EGFRvIII targeting | |
| WO2018103660A1 (zh) | Vap多肽及其在制备靶向诊疗肿瘤药物中的应用 | |
| Chen et al. | Ultrasmall PtAu2 nanoclusters activate endogenous anti-inflammatory and anti-oxidative systems to prevent inflammatory osteolysis | |
| CN114641491A (zh) | 人源化抗体及其使用方法 | |
| Lin et al. | Bone-Targeting Nanoparticles of a Dendritic (Aspartic acid) 3-Functionalized PEG-PLGA Biopolymer Encapsulating Simvastatin for the Treatment of Osteoporosis in Rat Models | |
| EP3295962B1 (en) | Tetrapyrrole conjugates as mri contrast agents | |
| CN107586321B (zh) | F-18标记修饰Dimer-San A探针的制备方法 | |
| CN107427593A (zh) | 与胃泌素结合的钌和铟 | |
| WO2013111759A1 (ja) | ステルス性かつ高尿排泄性のコラーゲン様ペプチド | |
| CN109589413A (zh) | 靶向胎盘样硫酸软骨素a的多肽、靶向纳米颗粒及其制备方法和应用 | |
| CN111233975A (zh) | 可靶向整合素的多肽mn及其在制备肿瘤靶向药物中的应用 | |
| JP7156665B2 (ja) | 医薬、並びにその製造方法 | |
| CN101480494B (zh) | 一种基于人源化抗体的用于肿瘤诊断的磁共振对比剂 | |
| Pant et al. | QbD-driven development and characterization of superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPIONS) of a bone-targeting peptide for early detection of osteoporosis | |
| CN117777237A (zh) | 一种靶向bcma的多肽及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20151209 |