CN1051388A - 人工培养巴西虫草的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种微生物方法，特别是巴西虫草的
人工培养方法，其特征是采用的菌种是虫草属真菌中
的巴西虫草，采用的寄主是家蚕(或蓖麻蚕)的蚕蛹，
用其培养出的巴西虫草菌虫体的药理成分与天然冬
虫夏草相似，对人体安全，可进行大规模的人工培养，
生产成本较低。
Description
本发明涉及一种微生物方法，特别是巴西虫草（Cordyceps brasiliensis Henn）的人工培养方法。
冬虫夏草（Cordyceps Sinensis Sacc）是虫草属真菌的一个种，为我国传统的名贵强壮滋补中药材，有很高的药用价值，临床用于降血脂、抗心律失常、治疗呼吸系统疾病及慢性肾炎等，近年来，冬虫夏草抗肿瘤作用的发现，更受到国内外的重视。
冬虫夏草原产我国四川、西藏、青海等省区海拔3000公尺雪线以上，因生态环境的限制及过度的采挖，资源逐年减少，不能满足保健药用及出口需要。
为了弥补天然冬虫夏草的不足，国内外学者均试图以人工的方法培养冬虫夏草，但难度太大，不少学者又纷纷转向人工培养菌丝体的研究，希望从中提取冬虫夏草的有效药理成份或直接以干燥菌丝体粉末入药。
近年来国内对虫草属真菌的研究进展较快，沈南英（1980，1983）报导在固体培养基上培养出子座类似物，菌种初步鉴定为头孢霉菌属（Cephalosporium）新种，后利用此种的人工培养菌丝体制成成药“宁心宝”对心血管疾病有良好的效果;史学瑶（1985）和海军医学研究所（1985）等先后对虫草进行发酵工艺研究;模拟生态环境、在土壤中繁殖寄生昆虫蝙蛹蛾，人工施菌接种培养冬虫夏草的研究正在进行，但很难大规模进行;中科院药物研究所、吉林省蚕业研究所分别报导用蛹虫草（Cordyceps militaris（Lr）Link）在固体培养基上培养出子座，吉林省蚕业研究所（1986）进一步用柞蚕做寄主，接种蛹虫草菌培养菌（子座）虫（僵虫）体成功，但是由于虫草属真菌的寄主比较专一，利用家蚕或蓖麻蚕蛹作为寄主人工培养其它虫草的菌虫体，国内外至今仍未见有成功的报导。
本发明的目的是寻找一种利用广东的虫草品种之一的巴西虫草（该种已保存于中国微生物菌种保藏管理委员会，普通微生物中心，即CGMCC，保存号为NO.0159），利用家蚕蛹或蓖麻蚕蛹作为寄主人工培养虫草菌虫体的方法。
本发明的技术方案是在广泛采集广东野生虫草菌株并进行分离、纯化、鉴定、筛选的基础上，选出巴西虫草菌种的菌株，把巴西虫草菌接种到家蚕或蓖麻蚕的蚕蛹上，使蛹体在20～22℃较干燥的条件下僵化，12～14天后再用复合维生素、蛋白栋、葡萄糖、蒸馏水按0.3∶1∶10∶1000的比例组成的复合外源性营养液包埋至浸过蛹体为度，再用蓝紫光照射诱发基原，前期保护温度为18～21℃，基原诱发后改为21～24℃保护，间隔光照，等子座长出至3～4厘米便可收获菌虫体。
本发明的巴西虫草人工培养方法由于采用了巴西虫草菌，采用家蚕蛹（或蓖麻蚕蛹）为人工寄主，（1）由于家蚕（或蓖麻蚕）是易繁易养的昆虫，因此，可以实行工厂化大批量生产，满足人们保健和药用的需要，而且成本比天然冬虫夏草大为降低;（2）培养出的巴西虫草菌虫体的外观具有中国传统中药材的形状（较接近天然冬虫夏草的形状），因而易为人们所接受;（3）培养出巴西虫草菌虫体经有效药理成份的分析测定结果，其含有的虫草酸（Cordycepic acid）和麦角甾醇（Ergost-erol）两种药理成份含量与天然冬虫夏草相似，游离氨基酸略低于冬虫夏草，但酸解氨基酸比天然冬虫夏草高，也比文献报导的香棒虫草、秦巴蛹虫草、凉山虫草等高，并含有丰富的人体必需的多种微量元素（见附表）;（4）培养出的巴西虫草菌虫体经毒性试验测定，其NIH小鼠急性毒性LD50＞43.0克/公斤体重，SD大鼠急性毒性LD50＞50.0克/公斤体重，安全性大（附急性毒性试验报告）;（5）本发明还为养蚕的综合开发利用开辟了一条新的途径;（6）以家蚕蛹培养巴西虫草菌虫体的成功，还为在实验室条件下研究虫草属真菌的生物学特性提供了新的研究素材与途径。
图1是巴西虫草人工培养方法流程图。
表1是家蚕蛹人工培养巴西虫草的麦角甾醇和甘露醇含量
表2是家蚕蛹人工培养巴西虫草的游离氨基酸含量
表3是家蚕蛹人工培养巴西虫草的酸解氨基酸含量
表4是家蚕蛹人工培养巴西虫草与几种虫草的酸解氨基酸含量的文献值比较
表5是家蚕蛹人工培养巴西虫草的微量元素含量
下面结合附图表说明本发明的实施：
如图1所示在广泛采集广东野生虫草菌株并进行分离、纯化、鉴定、筛选的基础上，选出巴西虫草菌种的菌株，在无菌条件下把它接种到家蚕（或者蓖麻蚕）的蛹体上，把接种后的蚕蛹置于20～22℃较干燥的条件下，保护约12～14天，使其充分僵化，再用复合维生素、蛋白栋、葡萄糖、蒸溜水按0.3∶1∶10∶1000的比例组成的复合外源性营养液包埋，至浸过蛹体为度，再用蓝紫光照射诱发基原，前期保护温度为18～21℃左右，通气、间隔光照，基原诱发后21～24℃保护，间隔光照，稍通气，一直到子座长出至3～4厘米，便可收获菌虫体，将菌虫体洗去表面厚垣孢子，烘干，便成巴西虫草产品。
表1家蚕蛹人工培养巴西虫草的麦角甾醇和甘露含量
| 项 目 | 人工巴西虫草 | 天然冬虫夏草 |
| 麦角甾醇％ | 1.4 | 1.3 |
| 甘露醇％ | 4.22 | 7.46 |
表4 家蚕蛹人工培养巴西虫草与几种虫草的酸解氨基酸含量 的文献值比较（％）
| 冬虫夏虫 | 香棒虫草 | 亚香棒虫草 | 秦巴蛹虫草 | 凉山虫草 | 冬虫夏草人工菌丝体 | 人工培养巴西虫草 | 僵化蚕蛹 |
| 17.19 | 30.85 | ||||||
| 20.36 | 21.80 | ||||||
| 19.94 | 25.41 | ||||||
| 20.86 | 40.16 | ||||||
| 39.22 | 34.21 | ||||||
| 18.44 | 13.32 | ||||||
| 18.83 | 32.89 | ||||||
| 22.75 | 22.27 | ||||||
| 24.31 | 45.55 | 60.94 |
Claims (2)
1、利用虫草属真菌培养虫草菌虫体的方法，其特征在于所用的菌种是属虫草属真菌中的巴西虫草(Cordyceps brasiliensis Henn)巳保存CGMCC，保存号为NO.0159；采用的寄主是家蚕蛹(或蓖麻蚕蛹)，即把巴西虫草菌种接种到家蚕(或蓖麻蚕)的蚕蛹中，把接种后的蚕蛹置于20～22℃较干燥的条件下僵化12～14天后，用复合外源性营养液包埋再用蓝紫光照射诱发基源，前期保护温度为18～21℃，基源诱发后改为21～24℃保护，等子座长出至3～4厘米便可收获菌虫体；
2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于外源复合性营养液是由复合维生素、蛋白栋、葡萄糖、蒸溜水按0.3∶1∶10∶1000的比例组成。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 90109380 CN1051388A (zh) | 1990-11-19 | 1990-11-19 | 人工培养巴西虫草的方法 |
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|---|---|---|---|
| CN 90109380 CN1051388A (zh) | 1990-11-19 | 1990-11-19 | 人工培养巴西虫草的方法 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1051388A true CN1051388A (zh) | 1991-05-15 |
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|---|---|---|---|
| CN 90109380 Pending CN1051388A (zh) | 1990-11-19 | 1990-11-19 | 人工培养巴西虫草的方法 |
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| CN (1) | CN1051388A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105638244A (zh) * | 2016-01-21 | 2016-06-08 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 一种蚕虫草的培育方法 |
| CN109042067A (zh) * | 2018-09-28 | 2018-12-21 | 广西罗塞塔生物工程有限公司 | 一种蓖麻蚕蚕虫草人工栽培方法 |
-
1990
- 1990-11-19 CN CN 90109380 patent/CN1051388A/zh active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105638244A (zh) * | 2016-01-21 | 2016-06-08 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 一种蚕虫草的培育方法 |
| CN105638244B (zh) * | 2016-01-21 | 2018-06-29 | 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 | 一种蚕虫草的培育方法 |
| CN109042067A (zh) * | 2018-09-28 | 2018-12-21 | 广西罗塞塔生物工程有限公司 | 一种蓖麻蚕蚕虫草人工栽培方法 |
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