CN105130878B - 一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，包括粗提步骤：称量桑叶粉50千克加粗提溶剂400千克于搅拌加热回流反应釜中回流提取5小时，所述粗提溶剂为乙醇︰异丙醇︰去离子水为1︰（0.8～1.2）︰（0.6～0.8）；然后趁热用板框压滤机过滤，用50度温水5千克洗滤2遍；然后再经交换树脂层析纯化，异丙醇进行萃取，减压蒸馏异丙醇相，得产品并回收异丙醇。本发明所述的一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，采用乙醇、异丙醇和水的混合溶剂，使蛋白质沉淀，减少糖、酮溶解，再配合离子交换和异丙醇精提，可以获得收率和含量均较高的脱氧野尻霉素产品。

Description

一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法
技术领域
本发明涉及一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，属于脱氧野尻霉素的提取方法技术领域。
背景技术
桑叶是桑科植物的叶子，是桑树地上部分的主要产物，每年可以采摘多次。我国古代就发现了桑的药用与保健功效：《本草纲目》中记载桑叶乃阳明之药，汁煎代茗，能止消渴，明目长发；《本草经》中记有桑叶味苦、甘、寒，甘所以益血，寒所以凉血，甘寒相合，故下气而益阴，又能明目而止渴，有补益之功。近代研究发现，桑叶多种生理活性物质，如维生素、微量元素、氨基酸、生物碱、黄酮类化合物和多糖等，具有多种生理功能，如降血糖、降血压、抗衰老、抗病毒等。近年来的研究发现，桑叶中含它所特有的一种生物碱——脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin，DNJ），能显著抑制a一葡萄糖苷酶活性，有效阻止淀粉分解为葡萄糖，使得进入血液的葡萄糖减少，从而起到降血糖作用；这对预防和辅助治疗糖尿病有积极作用，对于开发桑叶保健食品具有重要意义。
桑叶中脱氧野尻霉素的提取工艺主要包括干燥、破碎、粗提、纯化和精提等步骤。现有技术中，桑叶中脱氧野尻霉素的粗提主要采用的溶剂有：亲水溶剂，包括水、低级醇、低级醇水溶液及低级醇或水混合液（中国专利文献CN 101654428 B）；0～95%乙醇水溶液或氯仿、丙酮、乙酸乙酯、甲醇等有机溶剂或它们的组合（中国专利文献CN 1267113 C）；亲水溶剂，包括甲醇、乙醇、乙腈和丙酮（中国专利文献CN 100556892 C）；其中在实际应用中较为成熟和广泛地，还是采用温水或乙醇作为溶剂进行粗提。由此可知，实际上对于脱氧野尻霉素的粗提溶剂的研究并不深入，只是停留在亲水溶剂的大范围内，通常采用温水或乙醇作为溶剂只是鉴于其易得和低成本性的考虑，实际上并非是提取效率较高的溶剂。
发明内容
本发明正是针对现有技术存在的不足，提供一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，能够提高粗提步骤中脱氧野尻霉素的收率和含量，满足实际生产要求。
为解决上述问题，本发明所采取的技术方案如下：
一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，包括粗提步骤：粗提步骤中采用的粗提溶剂为乙醇、异丙醇和去离子水的混合物，且其体积比为1︰（0.8～1.2）︰（0.63～0.77）。
作为上述技术方案的具体优选，粗提溶剂中乙醇、异丙醇和去离子水的体积比为1︰0.9︰0.7。
作为上述技术方案的具体优选，粗提步骤中粗提溶剂的用量为桑叶粉重量的7～9倍。
作为上述技术方案的具体优选，包括粗提步骤：称量桑叶粉加粗提溶剂于搅拌加热回流反应釜中回流提取5小时，所述粗提溶剂为乙醇︰异丙醇︰去离子水为1︰（0.8～1.2）︰（0.6～0.8），且所述粗提溶剂的质量为桑叶粉的8倍；然后趁热用板框压滤机过滤，用40～60度温水洗滤。
作为上述技术方案的具体优选，还包括纯化步骤：收集粗提滤液，取粗提滤液并加入盐酸调节pH为2～4，减压浓缩至原体积的15～30%，过滤后滤液过717阴离子交换树脂层析，用去离子水洗脱，收集洗脱液后再减压浓缩，再过001X7阳离子交换树脂层析，先用去离子水洗至流出液为无色，再用0.2～0.8 mol/L氨水进行洗脱，收集pH为9～12段的流出液，减压浓缩。
作为上述技术方案的具体优选，还包括精提步骤：将纯化步骤中的最终浓缩液用等体积的异丙醇进行萃取，保留异丙醇相；然后减压蒸馏异丙醇相，得产品并回收异丙醇。
本发明与现有技术相比较，本发明的实施效果如下：
本发明所述的一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，采用乙醇、异丙醇和水的混合溶剂，使蛋白质沉淀，减少糖、酮溶解，再配合离子交换和异丙醇精提，可以获得收率和含量均较高的脱氧野尻霉素产品。
具体实施方式
下面将结合具体的实施例来说明本发明的内容。
具体实施例1
本发明所述的一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，包括以下步骤：
步骤一、干燥：将新鲜桑叶除去杂质，置于阴凉处风干；然后通过热风对桑叶进行干燥，直到桑叶含水量小于5%。
步骤二、破碎：使用粉碎机对干燥后的桑叶进行初破碎；然后使用超微粉碎机械对初破碎的桑叶进行超微粉碎，用超微粉分离收集装置收集80目以下的桑叶微粉末。
步骤三、粗提：称量桑叶粉50千克加粗提溶剂400千克于搅拌加热回流反应釜中回流提取5小时，所述粗提溶剂为乙醇︰异丙醇︰去离子水为1︰0.9︰0.7（本发明中除另外注明外，液体比例均为体积比）；然后趁热用板框压滤机过滤，用50度温水5千克洗滤2遍。
步骤四、纯化：收集粗提滤液，取500升粗提滤液并加入0.5 mol/L盐酸调节pH为2～4，减压浓缩至100升，过滤，将滤液直接进行717阴离子交换树脂层析，用去离子水洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至100升，再过001X7阳离子交换树脂层析，先用去离子水洗至流出液为无色，再用0.5 mol/L氨水进行洗脱，收集pH为9～12段的流出液，减压浓缩至100升。
步骤五、精提：将上述100升洗脱液用100升异丙醇进行萃取，保留异丙醇相；然后减压蒸馏异丙醇相，得产品并回收异丙醇。
具体实施例2
脱氧野尻霉素的分析检测方法为：采用HPLC-PAD检测法，通过高效液相色谱进行分离，通过脉冲安培检测器进行检测，专一地检测脱氧野尻霉素。具体优选的色谱分析条件为：色谱柱：Diamonsic C18柱（4.60 mm×250 mm，5 μm）；流动相：乙睛-0.10%醋酸（1︰1）；流速：1.0 mL/min；柱温：室温；进样量：10 uL。外标法计算含量；每次分析结束后，用流动相洗柱16分钟，以洗去杂质，再用流动相进行10分钟的柱平衡。
相对于现有技术中通过衍生法将脱氧野尻霉素素制备成有紫外吸收的衍生物，然后再用紫外检测器检测的检测分析方法，大大缩短了样品前处理的作业量和时间，从而具有检测分析效率高的显著优点；而且由于简化了样品前处理过程，能够显著地降低系统误差从而提高方法的整体精准度。
根据上述分析检测方法，具体实施例1中每50千克桑叶粉中可以制得产品308克，其中脱氧野尻霉素的含量为20.9%。
具体实施例3～6
为了了解粗提步骤中，粗提溶剂的用量对桑叶中提取脱氧野尻霉素的收率和含量的影响，进行了以下试验，除粗提溶剂的用量有所变化外，其余试验方法和步骤与具体实施例1相同：
粗提溶剂 50千克桑叶粉制得产品 脱氧野尻霉素含量
具体实施例3 300千克 185克 22.8%
具体实施例4 350千克 244克 21.6%
具体实施例5 450千克 281克 20.5%
具体实施例6 500千克 253克 16.2%
根据上述实验数据可知，随着粗提溶剂用量的增加，50千克桑叶粉制得产品的量先增加后有所下降，而产品中脱氧野尻霉素的含量则逐渐下降，因此选择粗提溶剂用量为桑叶粉重量的7～9倍较为适宜，粗提溶剂用量为桑叶粉重量的8倍时最佳。
具体实施例7～14
为了了解粗提步骤中，粗提溶剂的种类对桑叶中提取脱氧野尻霉素的收率和含量的影响，进行了以下试验，除粗提溶剂中去离子水的比例有所变化外，其余试验方法和步骤与具体实施例1相同（表中所述收率为50千克桑叶粉制得产品，表中所述含量为脱氧野尻霉素含量）：
粗提溶剂 收率 含量
对照实施例7 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.9︰0 206克 15.4%
对照实施例8 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.9︰0.2 246克 17.6%
对照实施例9 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.9︰0.4 315克 16.3%
对照实施例10 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.9︰0.5 309克 17.3%
对照实施例11 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.9︰0.6 311克 19.3%
对照实施例12 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.9︰0.8 297克 19.9%
对照实施例13 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.9︰0.9 268克 17.4%
对照实施例14 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.9︰1 256克 15.5%
根据上述实验数据可知，由于去离子水含量的逐渐增多，使得异丙醇和乙醇含量均下降，乙醇含量的下降使得杂质减少同时收率下降，异丙醇含量的下降使得杂质增多同时收率上升，从上述综合效果来看，粗提溶剂中乙醇︰异丙醇︰去离子水的比例在1︰0.9︰（0.6～0.8）范围内较为适宜；需要指出的是：上述试验是在已知乙醇︰异丙醇︰去离子水的比例最优为1︰0.9︰0.7的前提下，考察去离子水比例为0.7时相较于其它值的优越性，在未知乙醇︰异丙醇︰去离子水的最优比例的情况下，本领域技术人员并不存在技术启示去进行上述特定性（即乙醇和异丙醇的比例限定为1︰0.9）试验。
具体实施例15～20
为了了解粗提步骤中，粗提溶剂的种类对桑叶中提取脱氧野尻霉素的收率和含量的影响，进行了以下试验，除粗提溶剂中异丙醇的比例有所变化外，其余试验方法和步骤与具体实施例1相同（表中所述收率为50千克桑叶粉制得产品，表中所述含量为脱氧野尻霉素含量）：
粗提溶剂 收率 含量
对照实施例15 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0︰0.7 367克 10.4%
对照实施例16 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.4︰0.7 330克 14.6%
对照实施例17 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.7︰0.7 311克 17.8%
对照实施例18 乙醇︰异丙醇︰水=1︰0.8︰0.7 309克 19.3%
对照实施例19 乙醇︰异丙醇︰水=1︰1.2︰0.7 269克 21.3%
对照实施例20 乙醇︰异丙醇︰水=1︰1.3︰0.7 227克 22.9%
根据上述实验数据可知，由于异丙醇含量的逐渐增多，使得乙醇含量下降，乙醇含量的下降使得杂质减少同时收率下降，异丙醇含量的上升使得杂质减少同时收率下降，从上述综合效果来看，粗提溶剂中乙醇︰异丙醇︰去离子水的比例在1︰（0.8～1.2）︰0.7范围内较为适宜；需要指出的是：上述试验是在已知乙醇︰异丙醇︰去离子水的比例最优为1︰0.9︰0.7的前提下，考察去异丙醇比例为0.9时相较于其它值的优越性，在未知乙醇︰异丙醇︰去离子水的最优比例的情况下，本领域技术人员并不存在技术启示去进行上述特定性（即乙醇和去离子水的比例限定为1︰0.7）试验。
以上内容是结合具体的实施例对本发明所作的详细说明，不能认定本发明具体实施仅限于这些说明。对于本发明所属技术领域的技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明保护的范围。

Claims (3)

1.一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，其特征是，包括粗提步骤：称量桑叶粉加粗提溶剂于搅拌加热回流反应釜中回流提取5小时，所述粗提溶剂为乙醇︰异丙醇︰去离子水为1︰（0.8～1.2）︰（0.6～0.8），且所述粗提溶剂的质量为桑叶粉的8倍；然后趁热用板框压滤机过滤，用40～60度温水洗滤；
还包括纯化步骤：收集粗提滤液，取粗提滤液并加入盐酸调节pH为2～4，减压浓缩至原体积的15～30%，过滤后滤液过717阴离子交换树脂层析，用去离子水洗脱，收集洗脱液后再减压浓缩，再过001X7阳离子交换树脂层析，先用去离子水洗至流出液为无色，再用0.2～0.8 mol/L氨水进行洗脱，收集pH为9～12段的流出液，减压浓缩。
2.如权利要求1所述的一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，其特征是，粗提溶剂中乙醇、异丙醇和去离子水的体积比为1︰0.9︰0.7。
3.如权利要求1所述的一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，其特征是，还包括精提步骤：将纯化步骤中的最终浓缩液用等体积的异丙醇进行萃取，保留异丙醇相；然后减压蒸馏异丙醇相，得产品并回收异丙醇。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN109298128A (zh) * 2018-11-02 2019-02-01 山东石大胜华化工集团股份有限公司 碳酸丙烯酯合成用催化剂含量检测方法及装置

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1742803A (zh) * 2005-08-11 2006-03-08 原爱红 一种具有降血糖作用的中药提取物及其制备方法
CN101020655A (zh) * 2007-03-15 2007-08-22 浙江大学 一种从桑叶中提取1－脱氧野尻霉素的方法
CN101209284A (zh) * 2007-12-24 2008-07-02 天津大学 从桑叶中连续提取生物碱、黄酮和多糖活性成分的方法
CN101654428A (zh) * 2009-09-11 2010-02-24 成都市金医生科技健康产业有限公司 天然产物中提取分离高纯1-脱氧野尻霉素的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1742803A (zh) * 2005-08-11 2006-03-08 原爱红 一种具有降血糖作用的中药提取物及其制备方法
CN101020655A (zh) * 2007-03-15 2007-08-22 浙江大学 一种从桑叶中提取1－脱氧野尻霉素的方法
CN101209284A (zh) * 2007-12-24 2008-07-02 天津大学 从桑叶中连续提取生物碱、黄酮和多糖活性成分的方法
CN101654428A (zh) * 2009-09-11 2010-02-24 成都市金医生科技健康产业有限公司 天然产物中提取分离高纯1-脱氧野尻霉素的方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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1-脱氧野尻霉素提取精制工艺的研究;刘韦鋆等;《中华中医药学刊》;20091031;第27卷(第10期);第2080页 *

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