CN105125664B - 一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用 - Google Patents
一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105125664B CN105125664B CN201510606404.XA CN201510606404A CN105125664B CN 105125664 B CN105125664 B CN 105125664B CN 201510606404 A CN201510606404 A CN 201510606404A CN 105125664 B CN105125664 B CN 105125664B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- blackberry
- blueberry
- anthocyanidin
- microwave
- extracting solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Abstract
本发明公开了一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用，提取方法包括以下步骤：将冷冻黑莓解冻，匀浆，得黑莓浆备用；加入水或任意浓度的乙醇，采用微波辅助萃取，得提取液；提取液离心，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。本发明采用微波辅助萃取的方法，综合考虑了多个因素对提取率及抗氧化活性的影响，所得提取工艺科学合理、操作简单、成本低廉、易于工业化大生产。本发明方法不仅提高了提取效率，而且黑莓花青素得率达到2.18mg/g左右，具有提取设备简单、操作方便、成本低、效率高、得率高等特点；所采用的溶剂安全环保；所得提取物可用于药品、化妆品或保健品中。
Description
技术领域
本发明涉及一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用，属于植物提取技术领域。
背景技术
黑莓(Blackberry)，蔷薇科(Rosaceae)悬钩子属(Rubus)灌木，主要原产于新旧大陆北温带，北美东部和太平洋沿岸尤为丰富，在不列颠群岛和西欧为常见萌生林和绿篱植物,品种较多栽培范围广泛，资源较为丰富。因新鲜黑莓不但有甘美的滋味，并且含有大量的维生素、氨基酸、矿物元素、微量元素、无机盐类、果胶、黄酮、有机酸、酚类、粗蛋白及糖类等多种营养成分，又具有食用和医疗保健的作用，而被广大人群所喜爱。黑莓具有镇静安神、养颜益智、乌发明目、生津止渴、延年祛斑和降压消渴的功效。随着现代医学对黑莓进行药理、药效毒理测试的研究，发现黑莓具有促进造血细胞的生长，提高动物体内微波的活性，抗诱变，抗菌，抗病毒，抗辐射，抑制肿瘤及有害物质的生成，增强免疫力、抗寒功能及耐劳能力，抗氧化，延缓细胞衰老，防止血管硬化，调节血糖和血脂，护肝等功效。
花青素是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属类黄酮化合物，具有较为广泛的生物活性，参与机体代谢，具有调节机体免疫力，延缓细胞衰老，防止血管硬化，防衰老，调节血糖，抗菌，抗病毒，抗辐射，抑制肿瘤，抗氧化，护肝等生物活性,其中抗氧化活性是其最主要的生物活性。
传统的黑莓花青素提取方法主要有回流提取法、超声波辅助提取法、热乙醇提取法、碱提取法和酸提取法，总体上呈现提取效率低、提取率低、工艺复杂或污染环境等诸多缺陷，不适合工业化大生产。
因此，研发一种黑莓花青素的提取方法，以提高提取效率和提取率，简化工艺，减少污染，显得尤为必要。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用，该方法工艺简单，能够提高黑莓花青素的提取效率，实现高的提取率，其提取物可应用于药品、化妆品或保健品中。
为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：
一种黑莓花青素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)加入水或任意浓度的乙醇，采用微波辅助萃取，得提取液；
(3)提取液离心，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
进一步地，提取方法包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按5～25mL/1g黑莓浆的比例加入水或任意浓度的乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率100～700w，微波处理时间1～9min，得提取液；
(3)提取液离心，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
更进一步地，提取方法包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按25mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为52％的乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率469w，微波处理时间4min，得提取液；
(3)提取液离心，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
前述提取方法中，提取液离心为提取液在3500r/min条件下离心3～8分钟。
优选地，前述提取方法中，提取液离心为提取液在3500r/min条件下离心5分钟。
上述黑莓花青素的提取方法提取得到的黑莓花青素提取物。
前述黑莓花青素提取物在制备抗氧化的药物或保健品中的应用。
前述黑莓花青素提取物在化妆品中的应用。
为了确保本发明黑莓花青素提取方法科学、合理，发明人进行了相应的实验研究和筛选，才得以确定本发明的技术方案。具体实验内容如下：
1.仪器与试药
1.1仪器
锥形瓶、具塞试管、移液管、量筒、烧杯、试剂瓶、容量瓶、离心管、电子天平、台秤、旋转蒸发仪、搅拌机、离心机、水浴锅、冰柜、酶标仪、微波炉、紫外分光光度计等。
1.2试药
黑莓、乙醇、水、过硫酸钾、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)。
2.方法与结果
2.1黑莓花青素提取工艺
2.1.1工艺流程
原料→匀浆→加适量乙醇→微波→离心→收集上清液→黑莓花青素提取物
2.1.2操作过程
黑莓预处理过程：将黑莓进行匀浆，备用。
微波过程：将黑莓浆置于容器中，按5～25mL/1g黑莓浆的比例加入水或任意浓度的乙醇，采用微波辅助萃取，保持微波功率在100～700w，微波时间为1～9分钟，得提取液。
收集过程：将提取液在3500r/min条件下离心3～8分钟，收集上清液，得黑莓花青素提取物。
2.1.3 ABTS溶液的配制
ABTS·+溶液：7mmol/L ABTS溶液和2.5mmol/L过硫酸钾溶液等体积混合置于室温避光处反应16小时，即得ABTS自由基溶液。
2.2用盐酸甲醇法测定黑莓花青素含量
2.2.1操作流程
取黑莓花青素提取物→配制成适当浓度的溶液→取一定体积的黑莓花青素溶液于具塞试管中→加5mL的1％的盐酸甲醇溶液→沸乙醇浴5分钟→冷却至室温→用紫外分光光度计测530nm波长处的吸光度→计算黑莓花青素提取率。
2.2.2黑莓花青素提取率的计算
黑莓花青素提取率(mg/g)＝提取物中花青素质量/黑莓质量
2.3用ABTS和DPPH自由基测定花青素抗氧化活性
2.3.1操作流程
ABTS：取黑莓花青素提取物→配制成适当浓度的溶液→取50μL的黑莓花青素溶液于试管中→加1mL的ABTS·+溶液→室温避光处反应20min→用紫外分光光度计测734nm波长处的吸光度→计算黑莓花青素清除自由基能力。
DPPH：取黑莓花青素提取物→配制成适当浓度的溶液→取0.5mL的黑莓花青素溶液于具塞试管中→加0.5mL的0.2mmol/L DPPH溶液→室温避光处反应40min→用紫外分光光度计测517nm波长处的吸光度→计算黑莓花青素当量抗氧化能力。
2.3.2黑莓花青素当量抗氧化能力的计算
黑莓花青素当量抗氧化能力＝TEAC样/C样(TEAC样表示样品在标曲中等价的Trolox浓度，单位为μM；C样表示样品浓度，单位为mg·mL-1。)
2.4提取工艺的单因素考察
2.4.1微波功率的考察
取预处理过的黑莓于容器中，按10mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为50％的乙醇，放入微波炉分别保持功率在100、250、400、550、700w，微波5分钟后在3500r/min条件下离心5分钟，取上清液得黑莓花青素提取物，再用盐酸甲醇法显色，用紫外分光光度计测定吸光度，微波功率对黑莓花青素提取效果的影响见图1。
由图1可知，微波功率在400w左右时，黑莓花青素提取效果较好。
2.4.2乙醇浓度的考察
取预处理过的黑莓于容器中，按10mL/1g黑莓浆的比例加入乙醇，保持微波功率在400w，其中加入乙醇的浓度分别为0％(即水)、20％、40％、60％、80％、100％，微波5分钟后在3500r/min条件下离心5分钟，取上清液得黑莓花青素提取物，再用盐酸甲醇法显色，用紫外分光光度计测定吸光度，乙醇浓度对黑莓花青素提取效果的影响见图2。
由图2可知，乙醇的浓度为40％左右时，黑莓花青素提取效果较好。
2.4.3乙醇用量的考察
取预处理过的黑莓于容器中，分别按5mL/1g黑莓浆、10mL/1g黑莓浆、15mL/1g黑莓浆、20mL/1g黑莓浆、25mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为40％乙醇，保持微波功率在400w，微波5分钟后在3500r/min条件下离心5分钟，取上清液得黑莓花青素提取物，再用盐酸甲醇法显色，用紫外分光光度计测定吸光度，乙醇用量对黑莓花青素提取效果的影响见图3。
由图3可知，乙醇用量为20mL/1g黑莓浆左右时，黑莓花青素提取效果较好。
2.4.4微波时间的考察
取预处理过的黑莓于容器中，按20mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为40％乙醇，保持微波功率在400w，微波1、3、5、7、9分钟后在3500r/min条件下离心5分钟，取上清液得黑莓花青素提取物，再用盐酸甲醇法显色，用紫外分光光度计测定吸光度，微波时间对黑莓花青素提取效果的影响见图4。
由图4可知，微波时间在3分钟左右时，黑莓花青素提取效果较好。
2.5黑莓花青素提取工艺的响应面设计实验
2.5.1因素与水平
影响黑莓花青素提取工艺的主要因素有微波功率(X1,w)、乙醇的浓度(X2,％)、乙醇的用量(X3,mL/1g黑莓浆)、微波时间(X4,min)4个因素，本实验采用四因素三水平的BBD响应曲面设计法(见表1)，以吸光度(A)为指标，对其工艺的水平参数进行优选,所选因素水平及响应曲面设计试验结果见表2～表5。
表1响应面实验设计因素水平表
2.5.2实验方法
按响应面设计1-29号条件进行实验，用紫外分光光度计测其吸光度。
2.5.3响应面设计试验结果分析
表2响应面试验设计表
表3黑莓花青素含量的方差分析
表4黑莓花青素ABTS的方差分析
表5黑莓花青素DPPH的方差分析
模拟回归方程：
通过响应面设计、图5～图16及其方差分析，这四个影响因素均对黑莓花青素提取率及其抗氧化活性有较为明显的影响。最佳提取条件为：微波功率为469w、乙醇的浓度为52％、乙醇的用量为25mL/1g黑莓浆、微波时间为4min。
本发明的有益之处在于：本发明黑莓花青素的提取方法采用微波辅助萃取的方法，综合考虑了提取过程中微波功率、乙醇的浓度、乙醇的用量以及微波时间等多个因素对黑莓花青素提取率及其抗氧化活性的影响，对各项工艺参数进行了优化，最终所得提取工艺科学合理、操作简单、成本低廉、易于工业化大生产。本发明方法不仅提高了提取效率，而且黑莓花青素得率达到2.18mg/g左右，DPPH·的清除率达到27.18μMTEAC·g-1，ABTS·+的清除率达到32.18μMTEAC·g-1，分别是传统乙醇浸提法的1.20倍、1.60倍、1.54倍，具有提取设备简单、操作方便、成本低、效率高、得率高等特点。本方法所采用的溶剂安全环保，避免了传统方法中采用氯仿、甲醇、酸、碱等溶剂对环境造成的污染，同时节省了成本。本发明方法提取得到的黑莓花青素提取物可用于药品、化妆品或保健品中，其应用的范围广、效果好。
附图说明
图1是采用本发明提取方式黑莓花青素提取率和抗氧化活性随微波功率的变化曲线图；
图2是采用本发明提取方式黑莓花青素提取率和抗氧化活性随乙醇浓度的变化曲线图；
图3是采用本发明提取方式黑莓花青素提取率和抗氧化活性随乙醇用量的变化曲线图；
图4是采用本发明提取方式黑莓花青素提取率和抗氧化活性随微波时间的变化曲线图；
图5是乙醇的浓度和微波功率对黑莓花青素提取率交互影响的响应面3D图；
图6是乙醇的用量和微波功率对黑莓花青素提取率交互影响的响应面3D图；
图7是微波功率和微波时间对黑莓花青素提取率交互影响的响应面3D图；
图8是乙醇的用量和乙醇的浓度对黑莓花青素提取率交互影响的响应面3D图；
图9是乙醇的浓度和微波时间对黑莓花青素提取率交互影响的响应面3D图；
图10是乙醇的用量和微波时间对黑莓花青素提取率交互影响的响应面3D图；
图11是乙醇的浓度和微波功率对黑莓花青素提取率交互影响的等高线图；
图12是乙醇的用量和微波功率对黑莓花青素提取率交互影响的等高线图；
图13是微波时间和微波功率对黑莓花青素提取率交互影响的等高线图；
图14是乙醇的用量和乙醇的浓度对黑莓花青素提取率交互影响的等高线图；
图15是微波时间和乙醇的浓度对黑莓花青素提取率交互影响的等高线图；
图16是微波时间和乙醇的用量对黑莓花青素提取率交互影响的等高线图。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步的介绍。
实施例1
一种黑莓花青素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按5mL/1g黑莓浆的比例加入无水乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率700w，微波处理时间9min，得提取液；
(3)提取液在3500r/min条件下离心3分钟，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
实施例2
一种黑莓花青素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按25mL/1g黑莓浆的比例加入水，采用微波辅助萃取，微波功率100w，微波处理时间1min，得提取液；
(3)提取液在3500r/min条件下离心8分钟，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
实施例3
一种黑莓花青素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按25mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为52％乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率469w，微波处理时间4min，得提取液；
(3)提取液在3500r/min条件下离心5分钟，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
实施例4
一种黑莓花青素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按10mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为30％乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率230w，微波处理时间5min，得提取液；
(3)提取液在3500r/min条件下离心4分钟，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
实施例5
一种黑莓花青素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按15mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为45％乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率640w，微波处理时间7min，得提取液；
(3)提取液在3500r/min条件下离心7分钟，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
实施例6
一种黑莓花青素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按20mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为75％乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率550w，微波处理时间6min，得提取液；
(3)提取液离心，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
实施例7
一种黑莓花青素的提取方法，包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按22mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为95％乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率350w，微波处理时间8min，得提取液；
(3)提取液离心，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
上述实施例的提取方法提取得到的黑莓花青素提取物可以直接使用或者进一步纯化后使用，可将其制成抗氧化药品或保健品，也可用于化妆品中。
Claims (6)
1.一种黑莓花青素的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按5～25mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为20％～60％的乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率250～550w，微波处理时间1～5min，得提取液；
(3)提取液在3500r/min条件下离心3～8分钟，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
2.根据权利要求1所述的黑莓花青素的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)将黑莓进行匀浆，得黑莓浆备用；
(2)按25mL/1g黑莓浆的比例加入浓度为52％的乙醇，采用微波辅助萃取，微波功率469w，微波处理时间4min，得提取液；
(3)提取液在3500r/min条件下离心3～8分钟，收集上清液，即得黑莓花青素提取物。
3.根据权利要求2所述的黑莓花青素的提取方法，其特征在于：所述提取液离心为提取液在3500r/min条件下离心5分钟。
4.如权利要求1～3任一项所述的黑莓花青素的提取方法提取得到的黑莓花青素提取物。
5.如权利要求4所述的黑莓花青素提取物在制备抗氧化的药物或保健品中的应用。
6.如权利要求4所述的黑莓花青素提取物在化妆品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510606404.XA CN105125664B (zh) | 2015-09-22 | 2015-09-22 | 一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510606404.XA CN105125664B (zh) | 2015-09-22 | 2015-09-22 | 一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105125664A CN105125664A (zh) | 2015-12-09 |
| CN105125664B true CN105125664B (zh) | 2019-01-08 |
Family
ID=54711482
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510606404.XA Expired - Fee Related CN105125664B (zh) | 2015-09-22 | 2015-09-22 | 一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105125664B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6618961B2 (ja) * | 2017-08-09 | 2019-12-11 | 有限会社オービット | 活性阻害剤、活性阻害剤を含む美白剤、活性阻害剤の製造方法および飲食物の製造方法 |
| CN111067052A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-04-28 | 贵州师范大学 | 一种黑莓精粉制备方法及产品 |
| CN116686922A (zh) * | 2023-05-31 | 2023-09-05 | 江苏悠维有机食品有限公司 | 一种含有黑莓浆果的组合物及其制备方法和应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101278727A (zh) * | 2008-01-02 | 2008-10-08 | 南京必优康生物技术有限公司 | 黑莓色素的制备方法 |
| CN102174606A (zh) * | 2011-03-07 | 2011-09-07 | 江苏省农业科学院 | 一种黑莓汁生产副产物中黑莓籽油与花青素联合提取方法 |
-
2015
- 2015-09-22 CN CN201510606404.XA patent/CN105125664B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101278727A (zh) * | 2008-01-02 | 2008-10-08 | 南京必优康生物技术有限公司 | 黑莓色素的制备方法 |
| CN102174606A (zh) * | 2011-03-07 | 2011-09-07 | 江苏省农业科学院 | 一种黑莓汁生产副产物中黑莓籽油与花青素联合提取方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 花青素分离纯化及其组分鉴定研究进展;王秋霜等;《食品工业科技》;20130331(第3期);358-360，364 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105125664A (zh) | 2015-12-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Xu et al. | Effect of different light transmittance paper bags on fruit quality and antioxidant capacity in loquat | |
| Abugri et al. | Bioactive and nutritive compounds in Sorghum bicolor (Guinea corn) red leaves and their health implication | |
| CN106580778A (zh) | 澳洲坚果青皮提取物及以其为活性成分的化妆品及其制备方法 | |
| CN105125664B (zh) | 一种黑莓花青素的提取方法及其产品和应用 | |
| Suica-Bunghez et al. | Antioxidant activity and phytochemical compounds of snake fruit (Salacca Zalacca) | |
| Kim et al. | Optimisation of microwave‐assisted extraction for functional properties of Vitis coignetiae extract by response surface methodology | |
| CN103585497A (zh) | 一种竹叶中多酚的提取和检测方法 | |
| CN103149165A (zh) | 橙色大白菜类胡萝卜素提取与测定方法 | |
| CN105379571A (zh) | 一种促进玫瑰茄花萼中花青素积累的方法 | |
| CN104586905A (zh) | 从金葵花瓣中提取总黄酮的研究 | |
| CN105885469A (zh) | 超声波-微波协同辅助酸化乙醇提取蓝靛果花色苷工艺 | |
| KR101820318B1 (ko) | 기능성이 향상되고 위생적인 고춧가루의 제조방법 | |
| CN105503681A (zh) | 高纯度枸杞玉米黄质棕榈酸酯的制备方法 | |
| Suh et al. | Thermal kinetics on antiradical capacity of mulberry fruit extract | |
| TWI414350B (zh) | 自雙子葉植物胎座中萃取植物生物素及其機能性成份之方法 | |
| Nicolescu et al. | Influence of extraction method on chemical composition from red grapes skin extract | |
| CN109452643A (zh) | 一种抗氧化桑葚花青素口服液及其制备方法 | |
| CN104628878A (zh) | 一种树头菜多糖提取纯化方法及其用途 | |
| CN106822084A (zh) | 含有竹花青素的保健品以及竹花青素的提取和测定方法 | |
| Prabhu et al. | Isolation and purification of lutein from Indian spinach Basella alba | |
| Xuehua et al. | Comparison of Total Flavonoids Content in Different Bamboo Shoots and Different Parts | |
| CN104306501A (zh) | 柑橘皮总黄酮的微波辅助提取方法 | |
| CN109984963A (zh) | 一种松花粉-姜黄抗氧化护肤品的制备方法 | |
| Qin et al. | Ultrasonic-assisted extraction flavonoids and ability to scavenge 1, 1-diphenyl 2-picrylhydrazyl (DPPH) radicals from medlar (a Miller) leaves and fruits | |
| CN107319481A (zh) | 一种以鸭骨架副产物为原料制备香精液的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20190108 Termination date: 20210922 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |