CN105074465B - 生物分析器件以及生物分子分析装置 - Google Patents

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Abstract

已确认在强磁场下使用1微米以下的顺磁性磁微粒时，磁微粒沿着磁束形成念珠状的聚集体，平坦的粒子层和粒子的块混杂而形成凸凹状。在用于生物分析时，该现象导致定量性的降低。通过使用将包含微小的磁微粒的溶液用润湿性高的平面基板夹持并使液厚度在上下方向尽量薄、从一个平面基板侧提供磁场吸引磁微粒的方法，能够使磁微粒以分散状态像膜那样均一地固定在基板面上，能够提高生物分子的定量性。

Description

生物分析器件以及生物分子分析装置
技术领域
本发明涉及生物分子分析器件、以及使用了该器件的生物分子分析装置。
背景技术
近年，在癌症诊断领域中，为了在早期获知癌症发病的征候，对各种癌标志物进行了研究，实用化也在推进中。癌标志物是指来自癌细胞的分泌型生物因子，随着癌的发展而增加，出现在血中、尿中。已知有例如激素、细胞因子等蛋白质、微小RNA等核酸。早期的癌中，这些癌标志物的量少，检测困难，存在表达量原本就少的癌标志物时也同样。现在，作为主流的高灵敏度的癌标志物检测方法为使用抗体的免疫测定法，已知有ELISA和称为纳米微粒检测的手法。最近，作为具有更高灵敏度的免疫测定法，开发出能以单分子检测的数码化ELISA(非专利文献1)。在对血液中的癌标志物进行检测时，受到能够从患者采集的血液量的限制，需要从其中尽量多地捕捉极微量的癌标志物进行检测。例如，在从50μl的血浆中检测时，由于早期癌中癌标志物在10-16～10-12M的浓度范围，因此需要的是对在50μl中存在3000分子左右的靶标分子进行定量的检测灵敏度。由此需要能够检测低浓度的癌标志物的超高灵敏度的检测装置。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1：Rissin DM et al,Nature Biotecnology,Jun 28(6)；p595－599(2010)
发明内容
发明要解决的课题
本发明涉及极微量的生物分子的定量方法、以及定量用器件的结构和装置构造。通常，为了高效率捕捉漂浮在溶液中的极微量的生物分子，需要提高目标生物分子和捕捉侧的分子的碰撞频度。因此，我们考察了使用1微米以下的微小的磁微粒作为捕捉侧的分子的方法。通过使用这些微小的磁微粒，可以增 大每单位粒子数的表面积，也能够提高分子运动，因此能够提高与目标生物分子的反应效率。进而，在通过荧光色素标记来进行生物分子的检测时，若磁微粒的尺寸为激发波长、发光波长的同等或以下，则能够在不妨碍荧光色素的激发和发光的状态下进行观察。因此，即使不仅捕捉了目标生物分子的磁微粒、连未实现捕捉的磁微粒全部密集地固定在平面上，也能够无损定量性地获得荧光亮点。因此，能够使全部的捕捉了生物分子的磁微粒在一定面积的基板上展开，计数生物分子数，能够对极微量的生物分子进行定量。
按照以上所述，本方式中磁微粒的粒径越小则越能够提高捕捉效率且能够固定在一定面积上的微粒数也越能够达到高密度，因此对于高灵敏度检测和高速检测更有利。但是，另一方面，小的磁微粒由于磁化率低、难以集磁，因此，在平面基板展开时，需要强磁场和更长的集磁时间。此外，已经确认了：在这样的强磁场的存在下，磁微粒沿着磁束形成念珠状的聚集体，平坦的粒子层和粒子的块混杂而形成凸凹状。该现象尤其是在磁微粒浓度高的情况下常见。当形成大的粒子块时，由于其具有超过物镜的焦点深度的高度，因此会存在部分的脱离焦点的荧光亮点，有损定量性。即使为了将脱离的荧光亮点全部拾取而赋予自动聚焦功能，也由于解析变得复杂且拍摄需要花费时间而不利于高速检测。因此，需要将高浓度的微小磁微粒以高密度均一地固定的手段。
用于解决课题的手段
使用了如下方法，即，将包含微小的磁微粒的溶液用润湿性高的平面基板夹持并使液厚度在上下方向尽量薄，从一个平面基板侧提供磁场吸引磁微粒。或者使用如下器件，即，在同样的润湿性高的2片平面基板之间制造一定厚度的间隙，使磁微粒流入其中后，从一个平面基板侧提供磁场，将磁微粒固定在基板上。
发明的效果
通过将溶液用润湿性高的平面基板夹持并使液厚度在上下方向尽量薄，能够使磁微粒以分散状态像膜那样均一地固定在基板面上，因此对于基板上的荧光色素能够容易地对焦，还能够防止磁微粒包裹荧光色素而屏蔽激发光的效应。
附图说明
图1：用于说明本实施例的一般原理的图。
图2：用于说明本实施例的器件结构和原理的图。
图3：用于说明本实施例的原理的检验方法的图。
图4：用于说明本实施例的原理的检验结果的图表。
图5：用于说明本实施例的原理的检验结果的图表。
图6：用于说明本实施例的原理的检验结果的图。
图7：用于说明本实施例的原理的检验结果的图。
图8：用于说明本实施例的器件结构的图。
图9：用于说明本实施例的抗原分子的捕捉方法和荧光标记方法的一例的图。
图10：用于说明本实施例的核酸分子的捕捉方法和荧光标记方法的一例的图。
图11：用于说明本实施例的生物分子分析装置的构造的一例的图。
具体实施方式
实施例中，对将解析对象即生物分子捕捉至磁微粒的方法、具有用于二维地示出该微粒的平滑的支撑基板的器件的结构、以及将该微粒导入、固定在支撑基板上并观察的步骤予以公开。作为支撑基板，只要是可良好地透磁的材质和厚度则没有限定，特别优选石英玻璃基板、硅基板等。此外，作为用于将溶液密封在支撑基板上的覆盖基板材，可以使用可透过可见光的无机玻璃、光学聚合物。支撑基板和覆盖基板均是润湿性越高越好，洗涤后的玻璃等更容易获得。但是，PDMS(聚二甲基硅氧烷)等疏水性聚合物也可以在利用O2等离子体、导入羧基对表面进行亲水化处理后利用。基板的润湿性在蒸馏水的接触角为10～30°左右时是充分的，为了获得更好的效果，接触角小于10°较佳。
在支撑基板的正下方设置用于将磁微粒吸引至支撑基板的磁场发生装置。磁场发生装置具有对磁场的开放/关闭或强弱进行切换的功能是理想的。磁场发生装置可以使用电磁石、可动式的永磁石、可动式的电磁石、在支撑基板和磁石之间具有可动式的磁场屏蔽板的永磁石或电磁石。使用的磁石的磁力可以根据所使用的磁微粒而区分使用。特别是粒径为300nm以下的磁微粒的固定需要强磁场，需要以0.1T以上的表面磁束密度吸引数秒钟。但是，此时所必需的磁力也根据磁微粒的粒径或铁素体含量、溶剂、磁微粒的表面修饰而变化。
以下，将在该支撑基板上具有该覆盖基板、在这些基板间具有用于封入溶液的一定的空间、进而在支撑基板侧具有磁场发生装置的结构体称为器件。该器件按照能够对支撑基板整面进行扫描的方式设置在可动台上使用。
观察按照以下步骤进行。首先，将含有捕捉了目标生物分子的磁微粒的反应液置于支撑基板上，然后打开磁场发生装置使其产生磁场，将反应液内的全部磁微粒吸引、固定在支撑基体上，再对固定在支撑基板上的磁微粒和其上结合的经荧光标记的生物分子照射激发光并进行拍摄。通过对观察到的亮点数进行计数而求出目标生物分子浓度。
实施例中，对解析对象生物分子为抗原性蛋白质(以下称为抗原)的例子予以公开。公开了一种免疫学的分析方法，其特征在于，准备作为解析对象的抗原，使前述解析对象即抗原与结合有针对抗原的抗体的磁微粒和经荧光体标记的抗体结合，对标记的荧光体进行检测。进行捕获的磁微粒的制作方法、荧光标记的方法在实施例中有详细记载。
此外，实施例中公开了将作为解析对象的生物分子二维地展开并通过磁场固定的器件、以及搭载了器件的生物分子分析装置，该生物分子分析装置的特征在于，具有用于对前述荧光体的荧光进行测定的单元。
以下参照附图对上述以及此外的本发明的新特征和效果进行说明。在此，为了使大家彻底理解本发明而对特定实施方式进行详细说明，但本发明不受在此记载的内容的限定。
实施例1
本实施例中记载本发明的原理和检验。已知如图1所示，在通常平行配置的2片平面基板101中封入有溶液102时，当以一定的速度v沿着x方向移动上侧的平面基板101时，位于基板表面附近的流体将随之具有同程度的流速v1(≒v)，而下侧的固定的平面基板101表面的溶液102的流速则随着靠近基板表面101而减少至0。这是由于所封入的溶液102和平面基板101之间产生摩擦力的缘故，润湿性越高的平面基板101对流体的运动的影响越大。因此，如图2所示，用润湿性高的平面基板201夹持溶液202使液厚度h在上下方向尽量薄，使得溶液202几乎都存在于基板表面201附近，能够使流速最高的中央部的流速v2也受到抑制。在该状态下使磁微粒203分散在溶液中后，通过磁束密度B的磁场204在一 个基板表面侧吸引磁微粒203时，虽然由于磁微粒203的移动而产生流速，但由于横向的流动受到限制，因此能够向着磁场204方向垂直地移动。此时，磁微粒203能够以分散状态像膜那样均一地固定在基板面，因此对基板上的荧光色素的对焦能够容易进行，还能防止磁微粒203包围荧光色素而屏蔽激发光的效应。
为了确认这些效果，制作了图3所示的按照在载玻片301上抬起了一条边的状态配置覆盖玻璃302的器件。通过在2片玻璃的间隙注入含有磁微粒303的溶液304、改变进行观察的x坐标的位置，可以以1个基板观察在0～150μm内改变液厚度的情况。其中，覆盖玻璃302为倾斜状态，在1个视野(430μm×330μm)内左右方向约每3μm就有厚度差异，因此将视野中心的液厚度设为液厚度h。此次，将含有直径300nm、16pM的顺磁性磁微粒303的溶液304注入2片玻璃的间隙，通过散射光观察了将磁微粒303用磁场305吸引到下方的载玻片301侧时的h＝40、60、80、100、120、140μm处的粒子的形状。以各液厚度时的亮点数、以及亮点尺寸形式，由图像获得平均亮点像素数。
图4中，将由图像获得的实测亮点数除以由所提供的磁微粒303数求得的理论亮点数后相对于液厚度作图。进而，图5中示出对平均亮点像素数和液厚度作图而得的图表。结果确认了，在h＝40～80μm情况下磁微粒303的亮点数不变，但当超过h＝100μm时，随着液厚度h增大，粒子的实测亮点数/理论亮点数之比降至0.8以下。另一方面确认了，磁微粒303直径(平均亮点像素数)随着亮点数的减少而增大。这表示随着液厚度增大，磁微粒303的聚集加剧。进而确认了，固定的形态也不同，如图6所示，h＝40μm时，粒子微细、密集地进行固定，与此相对地，图7中，h＝140μm时形成了大粒子，稀疏地进行固定。进而，此时还确认了粒子的顶点的焦点模糊、沿着z轴方向形成2～3μm左右的聚集体。确认了在h＝100μm以下时看不到这样的焦点偏移，可以将磁微粒303固定为密集且薄的层。
实施例2
使用图8来说明利用基于实施例1的结果将液厚度调整为100μm以下的器件进行生物分子计测的步骤的一个例子。器件中，固定磁微粒的支撑基板801使用了26mm×76mm、厚度为1.2mm的载玻片(松浪硝子工业)。作为覆盖材 802，使用了8mm×8mm、厚度为0.15mm的盖玻片(松浪硝子工业)。二者用氢氟酸缓冲液(HF：NH4F＝1：200)洗涤1分钟或用1N KOH洗涤60分钟，用蒸馏水确认接触角为10°以下。然后，将厚度0.05mm的聚酰亚胺带(中兴化成)切成宽度1mm后按照形成与覆盖材802同尺寸的正方形的框的方式将其贴合在支撑基板801上，在其上配置覆盖材802。由此制作用玻璃夹持了上下的7mm×7mm、高度为50μm的室。此时，室并非完全密闭，可以预先设置溶液的入口和空气的出口。由此，仅通过将溶液滴加到入口附近，如图8-(a)、(b)所示，通过毛细管现象含有磁微粒的溶液803被逐渐吸入室内并均一地扩展。因此不必施加高压来送液，也不必严格地将室密闭。但是，为了使溶液803不会由入口附近泄露至室外，理想的是在入口部分插入有机硅管、硅化接头等表面具有疏水性的送液管804来添加溶液803的方法。同样，出口侧也可以配置具有疏水性的排出管805以仅排出空气。此次使用了外径为1.0mm、内径为0.5mm的有机硅管。溶液量根据室的体积而调整。例如，此次为了使溶液充满室整面而调整为3μl左右的溶液量。例如，以正方格将300nm的磁微粒在支撑基板801上呈正方格状地铺满一层时，为1.1×107个/mm2的密度。因此，通过将3ul的300pM的磁微粒溶液803导入前述室中，可以提供一层程度的磁微粒。此外，导入溶液803时，需要预先将对器件施加的磁场806关闭，直至磁微粒均一分散至室内为止。磁场806可以利用永磁石、电磁石中任一者，更廉价且简便的方法是使永磁石吸附和脱离的方法。使用电磁石时，磁场806的开放/关闭的切换虽便利但结构较大。此次，使用了永磁石进行磁微粒的固定。永磁石利用了具有0.5特斯拉(T)的磁束密度的φ20mm×10mm的钕磁石。在室的正下方配置可将钕磁石固定的架子，从而可手动地放入取出磁石而进行磁场806的开放/关闭的切换。
以下使用图9说明试样的调制方法。在欲检测的生物分子为抗原901时，事先用带抗体902的磁微粒903进行捕捉，进而，用带有抗体902的荧光色素904进行标记。这些反应全部在常温下、反应用缓冲液(tris缓冲液(pH8.0)、50mM NaCl、0.1％Tween20)中进行。带有抗体902的磁微粒903和抗原901的反应以及荧光标记抗体902和抗原901的反应何者在先均可，也可以同时进行。抗原901可以使用所有种类的抗体，抗体902选择对抗原901特异性高的抗体为佳。例如， 此次，选择前列腺癌的肿瘤标志物PSA(前列腺特异抗原)作为抗原901。PSA抗体需要为结合至磁微粒侧的和荧光色素标记的两者。抗体902可以是多克隆抗体也可以是单克隆抗体，在为多克隆抗体时可以使用同种抗体。抗体902可根据抗原901的种类而选择合适的抗体。理想的方法是，磁微粒侧选择单克隆抗体、荧光色素侧选择多克隆抗体，先使带有单克隆抗体的磁微粒903和抗原901反应，然后使多克隆抗体反应。这是由于，若先使多克隆抗体反应，则有抗原上的结合位点被封闭的可能性。在使抗体902与磁微粒结合时，准备能够以保持抗体902的活性的状态进行结合的带有第二抗体905的磁微粒。这些磁微粒903市场上有售，可以容易获得。例如，作为顺磁性微粒903，可以利用Ademtech公司的抗小鼠IgG修饰Adembeads(φ300nm)。相对于第二抗体905修饰磁微粒混合约10倍以上的PSA抗体并孵育。然后用磁场907捕捉磁微粒903后除去溶液，用干净的缓冲液悬浮。重复该操作直至能够除去大部分未反应的抗体。作为磁微粒903，还可以使用链霉亲和素修饰的磁微粒。例如，可以利用Ademtech公司的链霉亲和素修饰Adembeads(φ100nm、φ200nm、φ300nm)。此时，使用生物素化抗体902，使抗体902结合在磁微粒903表面。
关于荧光色素，市场销售有各种种类。例如FITC、Alexa(注册商标)、CY5等被广为所知。但是，本研究中为了能够检测至少一分子的抗原901，理想的是利用亮度高、消光时间长的荧光色素。作为这样的荧光色素，可以使用例如数百分子的荧光色素结合在一个枝状的碳链上的树枝状聚合物型荧光色素、荧光聚苯乙烯珠、量子点。
本实施例中，对使用荧光聚苯乙烯珠作为荧光色素904的抗体902的荧光标记方法进行说明。荧光聚苯乙烯珠可以利用由例如Invitrogen公司销售的FluoSphere F8771(注册商标)。该珠外周包覆有链霉亲和素，可以与生物素化抗体902结合。用带有抗体902的荧光聚苯乙烯珠和带有抗体902的磁微粒夹着抗原901而进行捕捉。反应步骤是：首先在反应容器内加入抗体902和磁微粒，充分搅拌。用磁场907收集磁微粒903，将包含未反应的抗体902的上清除去，并用反应缓冲液悬浮。然后，在该溶液中装入加入了欲检测的抗原901的溶液后，充分混合并孵育1小时。此时，使反应容器上下旋转或振荡而进行搅拌，由此可加快抗原901和抗体902的反应。混合的比率是使带抗体902的磁微粒903 比抗原901过量，以此方式进行混合。具体而言，相对于设定的抗原901量加入100～10000倍量的带抗体902的磁微粒903。然后，在该反应液中加入带有荧光色素904的抗体902，再孵育数分钟。带有荧光色素904的抗体902也同样地相对于抗原901量为100～10000倍量，即过量，根据情况可以加入更多。通过分别加入过剩的量，与抗原901的碰撞频度增大，抗原901的捕捉率和荧光标记率提高。反应结束后，洗出未反应的荧光标记抗体。用反应液量的5倍左右的洗涤缓冲液将反应液稀释后，连同微量管一起插入到集磁用磁性架子中，静置2分钟。确认磁微粒已经集中到壁面后，为了不吸入上清而将上清全部除去，再加入等量的洗涤缓冲液，将磁微粒悬浮、集磁。将该操作重复实施约5～7次，除去未反应的带有荧光色素904的抗体902。最后一次除去洗涤缓冲液后，浓缩至欲导入器件的液量，将全部量注入器件。注入时，将对器件施加的磁场806关闭，以使液体均一地散布到器件内。确认全部液体都已经加入后，打开磁场806。在打开磁场806的状态下，确认磁微粒形成膜状。对于包含器件以及落射型显微镜的生物分析装置的优选结构，将在实施例4中详细说明。将器件放置在自动式台上，如图8-(c)所示，由上方的物镜807照射激发光，扫描约500个左右的视野，由此可以在几乎没有磁微粒903的包围所致的损失的状态下对荧光亮点进行观察。
实施例3
本实施例中，将欲检测的生物分子为核酸片段时的步骤示于图10。首先，用磁微粒1002捕捉作为检测对象的试样核酸片段1001，再用具有与试样核酸片段1001互补的序列1003的带有荧光色素1004的核酸片段1005进行标记。这些为基于杂交的特异性反应，在反应用缓冲液(PBS缓冲液(pH7.4)、50mM～1M NaCl、0.1％Tween20)中进行。带有核酸的磁微粒1002和试样核酸片段1001、带有荧光色素1004的核酸片段1005和试样核酸片段1001的反应何者在先均可，也可以同时进行。核酸片段可以使用单链的DNA、RNA。以微小RNA作为具体的解析对象例子来详细说明。
微小RNA为20mer左右的单链的核酸片段。检测方法为：首先使作为接头的核酸序列1003与作为试样核酸片段1001的微小RNA的3‘末端侧结合。例如，可以利用20mer的polyA序列。然后，使接头的互补序列片段1005与荧光色素 1004结合。将带有接头的互补序列片段1005的荧光色素1004和试样核酸片段1001混合并在室温下孵育1小时左右。同样地制作带有试样核酸片段1001的互补序列片段1003的磁微粒1002，与之前已经与荧光色素1004反应了的试样核酸片段1001混合，同样在室温下孵育1小时左右。
本实施例中，对使用Ademtech公司的链霉亲和素修饰Adembeads(φ100nm)作为磁微粒1003、使用量子点作为荧光色素1004的方法进行说明。量子点为直径数纳米～数十纳米的半导体微粒。与现有的荧光色素相比寿命长、亮度高，根据粒径不同而发出不同波长的荧光。量子点有多个厂家在销售，还存在用各种官能团修饰后的量子点。作为可以结合任意抗体的量子点，可以利用例如Invitrogen公司的Qdot655链霉亲和素(注册商标)，可以连接生物素化的标记核酸片段。
例如，可以利用Invitrogen公司的链霉亲和素修饰Qdot(注册商标)。对于量子点和核酸片段的结合而言，混合后孵育30分钟以上即可，反应后用50kDa截止分子量的离心柱除去未反应的核酸片段。
将如上制作的带有捕捉序列片段的磁微粒、荧光色素标记的核酸片段与调整到1～100pM浓度的微小RNA混合，充分混合后孵育6小时。此时，将反应容器上下旋转或振荡而进行搅拌，由此可加快杂交反应。混合的比率为磁微粒比目的的核酸片段过量，以此方式进行混合。具体而言，相对于设定的试样分子数加入100～10000倍量的磁微粒。
将如上处理后的反应液放置在支撑基板1006上，用磁场1007吸引，与实施例2同样观察。结果确认了各试样的总亮点数与反应的微小RNA浓度成比例。进而，通过使用φ100nm的磁微粒，虽然使用了与实施例2同数量的磁微粒但能够固定为其约9倍密度，因此能够使检测时间提高约9倍。
实施例4
本实施例中，参照图11说明生物分子分析装置的优选结构的一例。本实施例的生物分子分析装置除了用于将磁微粒以磁场吸引并保持在支撑基板1101上的器件以外，还一体化有对支撑基板1101照射光的单元、供给作为解析对象的生物分子溶液的单元和测定荧光的单元、用于开动支撑基板的单元。
更具体而言，使用了载有可动台1102的光学显微镜。可动台1102上放置有磁石架子1103，进而，其上固定有器件1104。器件上预先连接送液管1105和排出管1106。送液管1105的材料使用了有机硅管。将生物试样溶液加入器件1104内后，由磁场发生装置1107产生磁场，将磁微粒吸引并固定在支撑基板1103表面。激发光源1108根据所使用的荧光体的种类适当选择。例如，使用量子点作为荧光标记用的荧光色素时，作为光源1108使用了汞灯。此外，还可以使用532nm(YAG激光)。由激发光源1108发出的激发光通过激发光滤镜1109和透镜1110，被分色镜1111引导至物镜1112并照射到支撑基板1101上。由支撑基体1107上的带有荧光标记的分子发出的荧光沿着与激发光同轴的光路逆向行进，被物镜1112聚光后通过分色镜1111，通过成像透镜1113而成像在2维CCD相机1114的感光面上。激发光的散射光被吸收光滤镜1115除去。为了提高定量性，有必要增加观察的亮点数。为此，可以使可动台1103高速工作，通过短时间内扫描支撑基板1101整面而使亮点数增加。如上所述，通过使用将20倍的物镜1112、送液泵1116、激发光源1108及荧光检测单元、磁场发生装置1107、可动台1103组装而成的生物分子分析装置，可以用约3分钟扫描100个视野(16mm2)的面积。这相当于能够用3分钟观察铺满了一层的1.8×107个磁微粒的速度。
符号说明
101 平面基板
102 溶液
103 磁微粒
104 磁场
201 平面基板
202 溶液
203 磁微粒
204 磁场
301 载玻片
302 覆盖玻璃
303 磁微粒
304 溶液
801 支撑基板
802 覆盖材
803 溶液
804 送液管
805 排出管
806 磁场
901 抗原
902 抗体
903 磁微粒
904 荧光色素
905 第二抗体
906 平面基板
907 磁场
1001 试样核酸片段
1002 磁微粒
1003 试样的互补序列片段
1004 荧光色素
1005 接头的互补序列片段
1006 支撑基板
1007 磁场
1101 支撑基板
1102 可动台
1103 磁石架子
1104 器件
1105 送液管
1106 排出管
1107 磁场发生装置
1108 激发光源
1109 激发光滤镜
1110 透镜
1111 分色镜
1112 物镜
1113 成像透镜
1114 CCD相机
1115 吸收光滤镜
1116 送液泵

Claims (11)

1.一种生物分子分析用器件，其特征在于，具有上下被2片亲水性高的平面基板夹持的溶液槽，具备能够在一个平面基板侧进行磁力的开放关闭、或磁力的强弱的切换的磁场发生单元，通过该磁场发生单元将溶液槽内的粒径为0.02～1.0μm的顺磁性磁微粒固定在基板上，
所述平面基板间的宽度为80μm以下，且所述平面基板的表面相对于蒸馏水的接触角为30°以下。
2.根据权利要求1所述的生物分子分析用器件，其特征在于，利用由上下2片润湿性高的所述平面基板获得的毛细管现象将溶液导入溶液槽内。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的生物分子分析用器件，其特征在于，使用电磁石、可动式的永磁石、组合了可动式的磁场屏蔽物的电磁石、组合了可动式的磁场屏蔽物的永磁石中的任一种作为所述磁场发生单元。
4.根据权利要求1或权利要求2所述的生物分子分析用器件，其特征在于，溶液槽的导入口和排出口连接有疏水性表面的送液管，具有送液单元，具有流路结构。
5.根据权利要求1或权利要求2所述的生物分子分析用器件，其特征在于，所述生物分子为抗原分子，通过抗原抗体反应实施基于磁微粒的捕捉。
6.根据权利要求1或权利要求2所述的生物分子分析用器件，其特征在于，所述生物分子为核酸分子，通过杂交实施基于磁微粒的捕捉。
7.一种生物分子分析装置，是权利要求1～6中任一项所述的生物分子分析用器件、对荧光色素进行激发的单元和检测荧光的单元一体化而成的。
8.根据权利要求7所述的生物分子分析装置，其特征在于，使用玻璃、或进行了亲水化处理的光学用聚合物作为检测器侧的平面基板。
9.根据权利要求7或权利要求8所述的生物分子分析装置，其特征在于，使用落射型光学显微镜作为所述对荧光色素进行激发、检测荧光的单元。
10.根据权利要求7或权利要求8所述的生物分子分析装置，其特征在于，用荧光色素对所述生物分子进行标记并逐个分子地进行计数。
11.根据权利要求7或权利要求8所述的生物分子分析装置，其特征在于，按照在磁力关闭、或磁力弱的状态下将磁微粒溶液导入溶液槽内、然后打开磁力或使磁力增强后对荧光色素进行观察的步骤来进行生物分子分析。
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