CN105051032B - 抗体‑连接子‑药物偶联物、其制法及包含其的抗癌药物组合物 - Google Patents

抗体‑连接子‑药物偶联物、其制法及包含其的抗癌药物组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN105051032B
CN105051032B CN201480003980.9A CN201480003980A CN105051032B CN 105051032 B CN105051032 B CN 105051032B CN 201480003980 A CN201480003980 A CN 201480003980A CN 105051032 B CN105051032 B CN 105051032B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
antibody
connexon
preparation example
formula
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201480003980.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105051032A (zh
Inventor
朴永浚
郑镇姣
崔英美
李玟燮
金娟贞
金炅硕
崔俊宪
李进瑞
赵银珠
宋贤南
朴星俊
李钟侠
马休·相烨·李
李仁淑
金俊雨
洪承绪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Match Imec Inter Uni Micro Electr
Original Assignee
Match Imec Inter Uni Micro Electr
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from KR1020130017585A external-priority patent/KR101597100B1/ko
Application filed by Match Imec Inter Uni Micro Electr filed Critical Match Imec Inter Uni Micro Electr
Publication of CN105051032A publication Critical patent/CN105051032A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105051032B publication Critical patent/CN105051032B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6817—Toxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6817—Toxins
    • A61K47/6829—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxins or Pseudomonas exotoxin A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6855—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from breast cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
    • C07D207/416—2,5-Pyrrolidine-diones with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to other ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明涉及一种抗体‑连接子‑药物偶联物，其中，抗体和细胞毒性药物通过酶可剪切的肽连接子相偶联，该酶可剪切的肽连接子能够与抗体的赖氨酸残基直接结合，本发明还涉及一种用于该抗体‑连接子‑药物偶联物的制备方法，以及包含该抗体‑连接子‑药物偶联物作为活性成分的抗癌药物组合物。

Description

抗体-连接子-药物偶联物、其制法及包含其的抗癌药物组 合物
技术领域
本发明涉及抗体-连接子-药物偶联物、用于制备该抗体-连接子-药物偶联物的方法以及包含该抗体-连接子-药物偶联物作为活性成分的抗癌药物组合物。更具体地，本发明涉及抗体-连接子-药物偶联物、制备该抗体-连接子-药物偶联物的方法以及包含抗体-连接子-药物偶联物作为活性成分的抗癌药物组合物，其中，抗体和细胞毒性药物经由酶可剪切的肽连接子相连接，该酶可剪切的肽连接子能够与抗体的赖氨酸残基直接结合。
背景技术
抗体是与抗原特异性结合的免疫性蛋白。目前，已经开发了用作抗癌剂或用于癌症治疗的多种单克隆抗体。然而，尽管能够抑制癌细胞的生长并且因此抑制癌症扩散，但是几乎所有抗体在癌症治疗中都具有非常有限的应用(Sharkey等人.,Adv.Drug Del.Rev.,2008,1407-1420)。作为克服该限制的抗体治疗剂的替代物，已出现了抗体与药物相连接的抗体-药物偶联物(antibody-drug-conjugate:ADC)(Chari,Acc.Chem.Res.,41(2008),98-107)。本文中使用的术语“ADC”是指包含与单克隆抗体(monoclonal antibody:mAb)偶联的细胞毒性药物或毒素的高效生物药物，该单克隆抗体(mAb)能够允许细胞毒性药物或毒素被选择性地递送至靶向肿瘤细胞(内化)。给药至患者后，ADC通过抗体部分结合至靶向细胞并被内化至细胞，其中，细胞毒性药物或毒素部分与偶联物相分离，并且发挥出其疗效(Hamblett等人.,Clin.Cancer Res.,10:7063-7070,October 15,1999)。
对于ADC的制备，通常使用合适形式的连接子来连接抗体和细胞毒性药物。其中，代表性的连接子是腙、二硫化物和肽。从根本上来讲，ADC的有效性至少需要所有三种组分(mAb、连接子和细胞毒性药物)的特定功能水平(Chari,Acc.Chem.Res.,41(2008),98-107)。
US专利6,214,345公开了一种ADC，其中，细胞毒性药物(诸如阿霉素、紫杉酚等)经由酶可剪切的肽连接子与抗体相连接，其中，该酶可剪切的肽连接子能够被溶酶体蛋白酶组织蛋白酶剪切。此外，US专利7,964,566公开了一种ADC，其中，细胞毒性药物(诸如MeVal-Val-Dil-Dap-去甲麻黄碱(MMAE)和MeVal-Val-Dil-Dap-Phe(MMAF))通过酶可剪切的肽与抗体相附接。
根据使用酶可剪切的肽连接子制备ADC的常规方法，通过在还原剂(诸如二硫苏糖醇(dithiolthreitol:DTT))的存在下，将抗体中的二硫键还原成巯基，并且使连接子与该抗体的巯基相结合来实现连接子和抗体之间的附接。但是，利用还原剂来断开抗体的分子内二硫键必定会引起抗体本身的结构改变，这会不利地影响抗体对抗原的亲和力。此外，该还原可能会导致抗体发生部分降解，使得最终的ADC难以纯化。进一步地，当分子内二硫键被还原成巯基时，抗体容易聚集在一起，从而降低ADC的最终产率。
可通过用于巯基加成的试剂(诸如2-亚氨基噻吩盐酸盐(Traut's试剂))与抗体的赖氨酸残基反应代替将抗体的分子内二硫键还原成巯基来实现硫醇化。在该情况下，附接至抗体的硫醇化试剂的数目显示出从零至小于10的较宽分布。因此，连接子不能覆盖所有产生的巯基，导致在同一抗体中连接的巯基和未连接的巯基同时存在。由于存在未与连接子相连接的巯基且这种巯基是不需要的，并且由于存在剩余的硫醇化试剂，所以该常规方法制备的ADC在尤其是体内药代动力学特性的性能上较差。
发明内容
技术问题
在不改变抗体结构的情况下，通过广泛深入地研究ADC的发展，发现采用能够与抗体的赖氨酸残基直接结合的酶可剪切的肽连接子的ADC能够克服在常规ADC中所遇到的问题，从而得到了本发明。
因此，本发明的一个目的是提供一种抗体-连接子-药物偶联物，其中，抗体与细胞毒性药物经由酶可剪切的肽连接子相偶联，所述酶可剪切的肽连接子能够与所述抗体的赖氨酸残基直接结合。
另一目的是提供一种以高产率制备抗体-连接子-药物偶联物的方法。
又一目的是提供一种抗癌剂组合物，该抗癌剂组合物包含所述抗体-连接子-药物偶联物作为活性成分。
技术方案
根据本发明的一个方面，本发明提出了由化学式I、化学式I-1、化学式I-2、化学式I-3或化学式I-4所表示的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐：
[化学式I]
其中，
Ab代表抗体；
L代表连接子；
D代表药物；以及
n为1至5的整数；
[化学式I-1]
其中，
Ab代表抗体；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1为氢原子、羟基、C1-C4烷氧基或氧代基(＝O)；
R2为氢原子或C1-C4烷基；
R3为氢原子、羟基、C1-C4烷氧基、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
R4为芳基；以及
n为1至5的整数；
[化学式I-2]
其中，
Ab代表抗体；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2、R3和R4各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
Ar代表芳基；
Z为氮原子或氧原子；
当Z为氮原子时，R5为氢原子或C1-C4烷基；当Z为氧原子时，不存在R5；
R6为氢原子、羟基、C1-C4烷氧基或氧代基(＝O)；以及
n为1至5的整数；
[化学式I-3]
其中，
Ab代表抗体；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2、R3和R4各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R5为氢原子、羟基、C1-C4烷氧基、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar代表芳基；
Y为氮原子或氧原子；
当Y为氮原子时，R6为氢原子或C1-C4烷基；当Y为氧原子时，不存在R6；以及
n为1至5的整数；
[化学式I-4]
其中，
Ab代表抗体；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2、R3、R4、R7和R8各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R5为氢原子、羟基、C1-C4烷氧基、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar代表芳基；
Y为氮原子或氧原子；
当Y为氮原子时，R6为氢原子或C1-C4烷基；当Y为氧原子时，不存在R6；以及
n为1至5的整数。
本文中使用的术语“C1-C8烷基”是指包含1至8个碳原子的直链的或支链的烃基，包括但不限于，例如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基和正辛基。
本文中使用的术语“C3-C6环烷基”是指包含3至6个碳原子的环烃基，包括但不限于，例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
本文中使用的术语“C1-C4烷氧基”是指包含1至4个碳原子的直链或支链的烷氧基，包括但不限于，例如甲氧基、乙氧基和正丙氧基。
本文中使用的术语“C1-C4烷基”是指包含1至4个碳原子的直链的或支链的烃基，包括但不限于，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。
本文中使用的术语“芳基”用于涵盖所有的芳香基、杂芳香基及其部分还原的衍生物。“芳香基”是指5至15元的单环或稠环，而“杂芳香基”是指含有至少一个杂原子，诸如氧原子、硫原子或氮原子的芳香基。芳基的代实例包括但并不限于：苯基、萘基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吲哚基、喹啉基、咪唑啉基、噁唑基、噻唑基和四氢化萘基。
C1-C8烷基、C3-C6环烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基以及芳基上的一个或多个氢原子可被C1-C4烷基、C2-C4烯基、C2-C4炔基、C3-C10环烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4硫代烷氧基、芳基、酰基、羟基、硫代基、卤素、氨基、烷氧羰基、羧基、氨基甲酰基、氰基或硝基等取代。
本文中使用的术语“抗体”用于涵盖尽可能广泛的抗体，包括：完整的单克隆抗体或多克隆抗体；由两种或更多种不同的完整抗体构成的多特异性抗体(例如双特异性抗体)以及显示出预期生物活性的抗体片段。抗体为免疫系统产生的蛋白质，能够识别并结合至特异性抗原。就结构而言，抗体为由四条多肽链(两条重链和两条轻链)组成的Y-型分子，每条链都具有可变区和稳定区。在抗体的“Y”的每个顶端处的可变区与靶向抗原相结合并相互作用。可变区含有识别并结合在其特异性抗原上的抗原表位的互补决定区(CDR)，而在“Y”的尾部的稳定区被免疫系统识别并与免疫系统发生相互作用。通常来讲，靶向抗原具有被抗原上的CDR识别的多个抗原决定簇(被称为抗原表位)。与不同抗原表位特异性结合的各个抗体具有不同的结构。因此，一种抗原可被对应其抗原表位的一种或多种抗体识别。
在本发明的一个示例性实施方式中，抗体可为能够与癌细胞抗原免疫特异性结合的抗体。对癌细胞抗原免疫特异性的抗体是可商购的，或者是通过本领域已知的方法，诸如重组表达技术来制备。通过GenBank数据库或文件可得到用于编码对癌细胞抗原免疫特异性的抗体的核苷酸序列。可用于癌症治疗的抗体的实例包括：赫塞汀(Herceptin)(Genentech销售的曲妥珠单抗)，其为用于治疗转移性乳腺癌的人源抗-HER2抗体；Rituxan(Genentech销售的利妥昔单抗)，其为用于治疗非霍奇金淋巴瘤的嵌合的抗-CD20；Erbitux(ImClone Systems销售的西妥昔单抗)，其用于治疗表皮生长因子阳性癌症(例如头部和颈部癌症)的嵌合抗-EGFR抗体；以及Vitaxin(MedImmune Inc.)，其为用于治疗恶性肿瘤的人源抗-整合素αvβ3抗体，但并不限于此。
在本发明的抗体-连接子-药物偶联物中，连接子-药物部分与抗体部分的赖氨酸残基直接结合。因此，本发明的抗体-连接子-药物偶联物并不经历由于分子内二硫键的还原以及硫醇化试剂的残余而带来的不需要的抗体蛋白修饰，而允许抗体部分的最小异常破碎或聚集。本发明的抗体-连接子-药物偶联物具有90％或更高比例，优选92％或更高比例，更优选97％或更高，并且进一步更优选98％或更高比例的正常抗体结构。
在本发明的优选实施方式中，抗体-连接子-药物偶联物可由下式来表示：
i)化学式I-1，
其中，
Ab为与癌细胞抗原免疫特异性结合的抗体；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1为氢原子、羟基或C1-C4烷氧基；
R2为氢原子或C1-C4烷基；
R3为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；以及
R4为未取代的苯基，或者为被选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子中的至少一种取代基所取代的苯基；
ii)化学式I-2，
其中，
Ab为与癌细胞抗原免疫特异性结合的抗体；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2和R4各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
Ar为未取代的苯基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子所组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基；
Z为氮原子；
R5为氢原子或C1-C4烷基；以及
R6为氢原子、羟基或C1-C4烷氧基；
iii)化学式I-3，
其中，
Ab为与癌细胞抗原免疫特异性结合的抗体；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2和R4各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
R5为氢原子、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子所组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；以及
当Y为氮原子时，R6为氢原子或C1-C4烷基；当Y为氧原子时，不存在R6，或
iv)化学式I-4
其中，
Ab为与癌细胞抗原免疫特异性结合的抗体；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2、R4、R7和R8各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
R5为氢原子、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子所组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；以及
当Y为氮原子时，R6为氢原子或C1-C4烷基；当Y为氧原子时，不存在R6。
在本发明更优选的示例性实施方式中，所述抗体-连接子-药物偶联物由下式来表示：
i)化学式I-1，
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
X为甲基、正丙基、正戊基、正辛基或环丙基；
R1为氢原子、羟基或甲氧基；
R2为氢原子或甲基；
R3为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；以及
R4为未取代的苯基，或者为被选自由甲基、甲氧基和卤素原子所组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基；
ii)化学式I-2，
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
X为甲基、正丙基、正戊基、正辛基或环丙基；
R1、R2和R3各自为甲基；
R4为氢原子或甲基；
Ar为未取代的苯基，或者为被选自由甲基、甲氧基和卤素原子所组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基；
Z为氮原子；
R5为氢原子或甲基；以及
R6为氢原子、羟基或甲氧基；
iii)化学式I-3，
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
X为甲基、正丙基、正戊基、正辛基或环丙基；
R1、R2和R3各自为甲基；
R4为氢原子或甲基；
R5为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由甲基、甲氧基和卤素原子所组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；以及
当Y为氮原子时，R6为氢原子或甲基；当Y为氧原子时，不存在R6；
iv)化学式I-4
其中，
Ab为曲妥珠单抗,
X为甲基、正丙基、正戊基、正辛基或环丙基；
R1、R2和R3各自为甲基；
R4、R7和R8各自为氢原子或甲基；
R5为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由甲基、甲氧基和卤素原子所组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；以及
当Y为氮原子时，R6为氢原子或甲基；当Y为氧原子时，不存在R6。
本文中使用的术语“药学上可接受的盐”用于涵盖所有的非毒性有机盐和无机盐。实例包括但并不限于，例如，盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、乙酸盐、苯磺酸盐和柠檬酸盐。
本发明的代表性抗体-连接子-药物偶联物如下所示：
以及
其中，n为1至5的整数。
根据本发明的另一方面，本发明提出了一种用于制备由化学式I-1、化学式I-1、化学式I-2、化学式I-3或化学式I-4所表示的抗体-连接子-药物偶联物的方法，所述方法包括以下步骤：
(i)使下列化学式II-1的化合物分别与下列化学式III-1、化学式III-2和化学式III-3的海兔毒素10衍生物发生缩合反应以相应地产生下列化学式IV-1、化学式IV-2和化学式IV-3的化合物，或使下列化学式II-2的化合物与下列化学式III-4的海兔毒素10衍生物发生缩合反应以产生下列化学式IV-4的化合物；
(ii)使下列化学式IV-1、化学式IV-2、化学式IV-3和化学式IV-4的化合物分别与下列化学式V的化合物发生加成反应以相应地产生下列化学式VI-1、化学式VI-2、化学式VI-3和化学式VI-4的化合物；
(iii)使下列化学式VI-1、化学式IV-2、化学式IV-3和化学式IV-4的化合物分别与N-羟基琥珀酰亚胺发生缩合反应以相应地产生下列化学式VII-1、化学式VII-2、化学式VII-3和化学式VII-4的化合物；以及
(iv)使下列化学式VII-1、化学式VII-2、化学式VII-3和化学式VII-4的化合物与抗体发生反应：
[化学式II-1]
[化学式II-2]
其中，R7和R8分别与化学式I-4中的限定相同。
[化学式III-1]
其中，R1、R2、R3和R4分别与化学式I-1中的限定相同。
[化学式III-2]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar和Z分别与化学式I-2中的限定相同。
[化学式III-3]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar和Y分别与化学式I-3中的限定相同。[化学式III-4]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar和Y分别与化学式I-4中的限定相同。[化学式IV-1]
其中，R1、R2、R3和R4分别与化学式I-1中的限定相同。
[化学式IV-2]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar和Z分别与化学式I-2中的限定相同。
[化学式IV-3]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar和Y分别与化学式I-3中的限定相同。
[化学式IV-4]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、Ar和Y分别与化学式I-4中的限定相同。[化学式V]
其中，X与化学式I-1、化学式I-2、化学式I-3或化学式I-4中的限定相同。
[化学式VI-1]
其中，R1、R2、R3、R4和X分别与化学式I-1中的限定相同
[化学式VI-2]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar、X和Z分别与化学式I-2中的限定相同。
[化学式VI-3]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar、X和Y分别与化学式I-3中的限定相同。
[化学式VI-4]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、Ar、X和Y分别与化学式I-4中的限定相同。[化学式VII-1]
其中，R1、R2、R3、R4和X分别与化学式I-1中的限定相同。
[化学式VII-2]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar、X和Z分别与化学式I-2中的限定相同。
[化学式VII-3]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、Ar、X和Y分别与化学式I-3中的限定相同。
[化学式VII-4]
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、Ar、X和Y分别与化学式I-4中的限定相同。
以下，将参照反应历程I-1至反应历程I-4来详细描述制备化学式I-1至化学式I-4的抗体-连接子-药物偶联物的方法。在反应历程I-1至反应历程I-4中示出的方法是示例性说明，并且可根据需要来改变单元操作顺序、反应试剂和反应条件。
[反应历程I-1]
[反应历程I-2]
[反应历程I-3]
[反应历程I-4]
在步骤(i)中，化学式II-1的化合物分别与化学式III-1、化学式III-2和化学式III-3的海兔毒素10衍生物发生缩合反应以相应地产生化学式IV-1、化学式IV-2和化学式IV-3的化合物，或者化学式II-2的化合物与下列化学式III-4的海兔毒素10衍生物发生缩合反应以产生化学式IV-4的化合物。
缩合反应可在缩合剂的存在下进行。在该反应中，可使用的缩合剂的实例包括羟基苯并三唑(HOBt)、羟基氮杂苯并三唑(HOAt)和羟基琥珀酰亚胺(HOSu)，但并不限于此。
对于缩合反应，需要时，可将缩合剂与诸如吡啶或二异丙基乙胺的有机碱一起使用。
对于反应溶剂，可选自二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMA)、二甲基亚砜(DMSO)或N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。优选地，将缩合反应的温度设定在20℃至25℃的范围内。
在步骤(ii)中，化学式IV-1、化学式IV-2、化学式IV-3或化学式IV-4的化合物与化学式V的化合物进行加成反应以产生化学式VI-1、化学式VI-2、化学式VI-3或化学式VI-4的化合物。
对于该加成反应，可使用二甲基亚砜(DMSO)、乙腈(MeCN)或二甲基甲酰胺(DMF)作为溶剂，同时将反应温度设定在20℃和25℃之间。
在步骤(iii)中，化学式VI-1、化学式IV-2、化学式IV-3或化学式IV-4的化合物与N-羟基琥珀酰亚胺发生缩合反应以活化化学式VI-1、化学式IV-2、化学式IV-3或化学式IV-4的化合物中的羧酸。
该缩合反应可在缩合剂的存在下进行。缩合剂的非限制说明性的实例包括二环己基碳二亚胺(DCC)和(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)。
对于该缩合反应的溶剂，可使用二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMA)或二氯甲烷(DCM)，同时优选地将反应温度设定在20℃和25℃之间。
在步骤(iv)中，化学式VII-1、化学式VII-2、化学式VII-3或化学式VII-4的化合物与抗体发生反应以得到最终产物化学式I-1、化学式I-2、化学式I-3或化学式VI-4的抗体-连接子-药物偶联物。
对于该反应，可使用pH为6.0至8.0的磷酸盐缓冲液作为溶剂。由于化学式VII-1、化学式VII-2、化学式VII-3和化学式VII-4所表示的连接子-细胞毒性药物在磷酸盐缓冲液中的溶解度依据细胞毒性药物的种类而变化，所以如果需要，可使用诸如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、二甲基乙酰胺(DMA)和/或乙腈(MeCN)与磷酸盐缓冲液的混合物。就该点而言，有机溶剂优选地占该混合溶剂的50％或更低。
基于抗体，化学式VII-1、化学式VII-2、化学式VII-3和化学式VII-4的化合物优选以3至25当量的量使用。在本文中，所得的抗体-连接子-药物偶联物具有约1至5的DAR(药物-抗体比)，即连接至一个抗体分子的药物的数目。
化学式II-1或化学式II-2的化合物为本领域已知的酶可剪切的肽连接子，并且可利用US专利6,214,345中所述的方法来容易地制备。
此外，化学式III-1、化学式III-2、化学式III-3或化学式III-4的海兔毒素10衍生物为细胞毒性药物，并且可利用本申请人在2012年9月20日提交的同时待审的韩国专利申请10-2012-0104710或美国专利5,599,902中所述的方法来合成，在此，上述两个专利通过引用而整体并入本申请。
例如，化学式III-1、化学式III-2、化学式III-3和化学式III-4的海兔毒素10衍生物可分别根据以下示出的反应历程II-1至反应历程II-4来合成。
[反应历程II-1]
[反应历程II-2]
[反应历程II-3]
[反应历程II-4]
本发明的抗体-连接子-药物偶联物呈现出优异的抗肿瘤活性(测试例4和测试例6)。
因此，根据本发明的进一步方面，涉及一种尤其用于治疗乳腺癌的抗癌组合物，该抗癌组合物包含化学式I-1至化学式I-4之一的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
根据本发明的抗癌组合物可通过口服(例如，咽下或吸入)或肠道外给药(例如，注射、沉积、植入、栓剂)。对于注射，可通过静脉内、皮下、肌肉内或腹膜内来进行给药。根据给药途径，本发明的抗癌组合物可被配制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、细粒剂、粉剂、舌下片剂、栓剂、糊剂、注射剂、乳剂、悬浮液、糖浆、喷雾等。当本发明的抗癌组合物被制成多种制剂时，可使用每种制剂常规的药学可接受的载体。药学上可接受的载体的实例包括：赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、防腐剂、抗氧化剂、等渗剂、缓冲剂、包衣剂、甜味剂、增溶剂、基质、分散剂、湿润剂、助悬剂、稳定剂、着色剂等。
在根据本发明的抗癌组合物中，尽管本发明的化合物或其药学上可接受的盐的含量根据制剂而发生变动，但是其范围为约0.01wt％至95wt％。
本发明的抗癌组合物的有效剂量取决于多种因素，这些因素包括哺乳动物(包括人)受试者的种类、体重、性别和疾病严重性。通常来讲，根据本发明的化合物可以以0.01至50mg/kg体重的日常剂量经由口服途径给药，并且以0.01至10mg/kg体重的日常剂量经由肠道外途径给药。根据医师或药剂师的医嘱，该化合物每天可以以单剂量或多剂量给药。
有益效果
如上所述，本发明的连接子-药物部分与抗体部分的赖氨酸残基直接结合的抗体-连接子-药物偶联物并不需要进行不必要的修饰，并且能够在确保体内稳定性的同时，选择性地有效递送细胞毒性药物。甚至单剂量的本发明的抗体-连接子-药物偶联物也能够有效地治疗癌症，尤其是乳腺癌。此外，利用本发明的方法能够以高产率制备所述抗体-连接子-药物偶联物。
附图说明
图1为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-6)和抗体-连接子-药物偶联物(I-8)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图2为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-10)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图3为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-11)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图4为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-16)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图5为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-18)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图6为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-19)和抗体-连接子-药物偶联物(I-21)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图7为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-20)和抗体-连接子-药物偶联物(I-22)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图8为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-23)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图9为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-24)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图10为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-25)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图11示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-26)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图12示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-32)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图13示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-33)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图14示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-34)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图15为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-35)和抗体-连接子-药物偶联物(I-36)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图16为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-37)和抗体-连接子-药物偶联物(I-38)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图17为示出了根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-39)和抗体-连接子-药物偶联物(I-40)针对BT-474细胞的体外抗增殖活性的剂量反应曲线；
图18为在根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-6)、抗体-连接子-药物偶联物(I-10)和抗体-连接子-药物偶联物(I-11)注射至癌症诱导的动物模型之后，各自的肿瘤体积相对于时间绘制的曲线；
图19为示出了在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-6)抗体-连接子-药物偶联物(I-10)和抗体-连接子-药物偶联物(I-11)注射至癌症诱导的动物模型后第56天的相应肿瘤重量曲线；
图20为在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-16)注射至癌症诱导的动物模型之后，肿瘤体积相对于时间绘制的曲线；
图21为示出了在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-16)注射至癌症诱导的动物模型后第28天的肿瘤重量曲线；
图22为在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-23)注射至癌症诱导的动物模型之后，肿瘤体积相对于时间绘制的曲线；
图23为示出了在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-23)注射至癌症诱导的动物模型后第28天的肿瘤重量曲线；
图24为在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-25)注射至癌症诱导的动物模型之后，肿瘤体积相对于时间绘制的曲线；
图25为示出了在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-25)注射至癌症诱导的动物模型后第28天的肿瘤重量曲线；
图26为在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-26)注射至癌症诱导的动物模型之后，肿瘤体积相对于时间绘制的曲线；
图27为示出了在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-26)注射至癌症诱导的动物模型后第28天的肿瘤重量曲线；
图28为在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-34)注射至癌症诱导的动物模型之后，肿瘤体积相对于时间绘制的曲线；
图29为示出了在将根据本发明的抗体-连接子-药物偶联物(I-34)注射至癌症诱导的动物模型后第28天的肿瘤重量曲线。
具体实施方式
通过下列示出的用于说明但并不用于限制本发明的实施例，能够更好地理解本发明。
制备例1：化学式II-1和化学式II-2的化合物制备
制备例1-1：化合物(II-1)的制备
在氩气气流下，将6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-N-((S)-1-(((S)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)己酰胺(5.0g，8.7mmol，Dubowchik等人.,Bioconjugate Chem.,2002,13(4),pp 855-869)溶解在60mL无水二甲基甲酰胺中，加入N,N-二异丙基乙胺(3.0mL，17.4mmol)，并冷却至0℃。立即将二(4-硝基苯基)碳酸酯(7.94g，26.1mmol)加入至该混合物，随后在室温下搅拌15小时。在反应完全后，在真空下对反应混合物进行浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以获得浅黄色固体形式的标题化合物(3.65g，57％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.83(d,J＝6.8Hz,3H),0.86(d,J＝6.8Hz,3H),1.09(t,J＝7.2Hz,1H),1.19(m,2H),1.34-1.76(m,7H),1.96(m,1H),2.15(m,2H),2.99(m,2H),3.37(m,2H),4.19(t,J＝7.8Hz,1H),4.39(m,1H),5.24(s,2H),5.41(s,2H),5.97(brt,J＝5.6Hz,1H),7.00(s,2H),7.41(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(d,J＝7.2Hz,2H),7.65(d,J＝8.4Hz,2H),7.80(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(d,J＝7.2Hz,1H),8.31(d,J＝7.2Hz,2H),10.05(brs,1H)
制备例1-2：化合物(II-3)的制备
在氩气气流下，将6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-N-((S)-1-(((S)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)己酰胺(5.0g，8.7mmol，Dubowchik等人.,Bioconjugate Chem.,2002,13(4),pp 855-869)溶解在60mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入N,N-二异丙基乙胺(3.0mL，17.4mmol)，并随后冷却至0℃。立即将二(4-硝基苯基)碳酸酯(7.94g，26.1mmol)加入至该混合物，随后在室温下搅拌15小时。在反应完全后，在高真空下对反应混合物进行浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以获得浅黄色固体形式的4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己氨基)-3-甲基丁氨基)-5-脲基戊氨基)苄基(4-硝基苯基)碳酸酯(3.65g，57％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.83(d,J＝6.8Hz,3H),0.86(d,J＝6.8Hz,3H),1.09(t,J＝7.2Hz,1H),1.19(m,2H),1.34-1.76(m,7H),1.96(m,1H),2.15(m,2H),2.99(m,2H),3.37(m,2H),4.19(t,J＝7.8Hz,1H),4.39(m,1H),5.24(s,2H),5.41(s,2H),5.97(brt,J＝5.6Hz,1H),7.00(s,2H),7.41(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(d,J＝7.2Hz,2H),7.65(d,J＝8.4Hz,2H),7.80(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(d,J＝7.2Hz,1H),8.31(d,J＝7.2Hz,2H),10.05(brs,1H)
在氩气气流下，将4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己氨基)-3-甲基丁氨基)-5-脲基戊氨基)苄基(4-硝基苯基)碳酸酯(3.65g，4.95mmol)和叔丁基(2-氨乙基)(甲基)氨基甲酸酯(0.86g，4.95mmol)一起溶解在90mL无水二甲基甲酰胺中，并在20℃至25℃下搅拌2小时。在反应完全后，在高真空下对反应混合物进行充分浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以获得化合物(II-3)的氨基被保护的衍生物(3.8g，99％)。
LC-MS m/z:773.5[M+H]+
将2mL三氟乙酸逐滴加入至化合物(II-3)的氨基被保护的衍生物(146mg，0.186mmol)在5mL二氯甲烷的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌2小时。在反应完全后，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且随后通过加入5mL甲苯两次来完全移除三氟乙酸以得到标题化合物的浓缩的TFA盐。
制备例1-3：化合物(II-4)的制备
在氩气气流下，将4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己氨基)-3-甲基丁氨基)-5-脲基戊氨基)苄基(4-硝基苯基)碳酸酯(6.8g，9.22mmol)和叔丁基甲基(2-(甲氨基)乙基)氨基甲酸酯(1.82g，9.68mmol)一起溶解在150mL无水二甲基甲酰胺中，并且在20℃至25℃下搅拌19小时。在反应完全后，在高真空下对反应混合物进行充分浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以获得化合物(II-4)的氨基被保护的衍生物(5.14g，71％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.78-0.8(d,3H),0.8-0.83(d,3H),1.09-1.99(m,10H),1.33(s,9H),1.92(m,1H),2.07-2.19(m,2H),2.66-2.73(d,3H),2.8-2.81(m,3H),2.9-3.0(m,2H),3.37(m,2H),4.15(t,1H),4.34(m,1H),4.94(s,2H),5.38(s,2H),5.94(brt,1H),6.96(s,2H),7.23(d,2H),7.55(d,2H),7.77(d,1H),8.04(d,1H),9.95(brs,1H)
LC-MS m/z:787.5[M+H]+
除了使用化合物(II-4)的氨基被保护的衍生物之外，重复制备例1-2中相同的过程来得到标题化合物的浓缩的TFA盐。
制备例1-4：化合物(II-5)的制备
在氩气气流下，将4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己氨基)-3-甲基丁氨基)-5-脲基戊氨基)苄基(4-硝基苯基)碳酸酯(6.8g，9.22mmol)和叔丁基(2-氨乙基)氨基甲酸酯(1.63g，10.14mmol)一起溶解在80mL无水二甲基甲酰胺中，并在20℃至25℃下搅拌15小时。在反应完全后，在高真空下对反应混合物进行充分浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以获得化合物(II-5)的氨基被保护的衍生物(4.13g，59％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.78-0.8(d,3H),0.8-0.83(d,3H),1.09-1.99(m,10H),1.33(s,9H),1.92(m,1H),2.07-2.19(m,2H),2.9-3.0(m,2H),3.37(m,2H),4.15(t,1H),4.34(m,1H),4.94(s,2H),5.38(s,2H),5.94(brt,1H),6.76(m,1H),6.96(s,2H),7.15(m,1H),7.23(d,2H),7.55(d,2H),7.77(d,1H),8.04(d,1H),9.95(brs,1H)
LC-MS m/z:759.5[M+H]+
除了使用化合物(II-5)的氨基被保护的衍生物之外，重复制备例1-2中相同的过程来得到标题化合物的浓缩的TFA盐。
制备例1-5：化合物(II-6)的制备
在氩气气流下，将4-((S)-2-((S)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)己氨基)-3-甲基丁氨基)-5-脲基戊氨基)苄基(4-硝基苯基)碳酸酯(0.74g，1mmol)和叔丁基(2-(甲氨基)乙基)氨基甲酸酯(0.25g，1.4mmol)一起溶解在30mL无水二甲基甲酰胺中，并且在20℃至25℃下搅拌15小时。在反应完全后，在高真空下对反应混合物进行充分浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以获得化合物(II-6)的氨基被保护的衍生物(0.36g，48％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.79(d,3H),0.82(d,3H),1.13-1.7(m,10H),1.32-1.39(d,9H),1.89-1.93(m,1H),2.07-2.17(m,2H),2.79-2.82(d,2H),2.89-3.02(m,5H),3.14(d,1H),3.2(m,1H),4.15(t,1H),4.34(m,1H),4.9-4.94(d,2H),5.37(s,2H),5.941(brt,1H),6.81-6.85(m,1H),7.24(d,2H),7.54(d,2H),7.76(d,1H),8.04(d,1H),9.95(brs,1H)
LC-MS m/z:773.5[M+H]+
除了使用化合物(II-6)的氨基被保护的衍生物之外，重复制备例1-2中相同的过程来得到标题化合物的浓缩的TFA盐。
制备例2：化学式III-1、化学式III-2、化学式III-3和化学式III-4的化合物的制备
制备例2-1：化合物(III-5)的制备
在氩气气流下，将(2R,3R)-3-((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(0.63g，2.2mmol)溶解在10mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入2-(2,6-二氟代苯基)乙胺(0.38g，2.4mmol)。将温度冷却至0℃之后，将苯并三氮唑-1-基-氧基-三(二甲氨基)磷鎓六氟磷酸盐(0.97g，2.2mmol)和二异丙基乙胺(1.0mL，6.6mmol)依次加入至反应混合物中。在室温下持续搅拌15小时。在反应完全后，在高真空下对所得到的反应混合物进行浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到(R)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2,6-二氟代苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.60g，64％)。
将1mL三氟乙酸加入至该化合物(0.6g，1.4mmol)在10mL二氯甲烷的溶液中，随后在室温下搅拌3小时。在反应完全后，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且通过加入10mL二氯甲烷两次来完全移除剩余的三氟乙酸以得到(2R,3R)-N-(2,6-二氟代苯乙基)-3-甲氧基-2-甲基-3-((R)-吡咯烷-2-基)丙酰胺的三氟乙酸盐。
将该浓缩物(TFA盐)和(5S,8S,11S,12R)-11-((S)-仲丁基)-5,8-二异丙基-12-甲氧基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-1-甲基-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十四烷-14-酸(0.77g，1.4mmol)一起溶解在10mL二甲基甲酰胺，并且在0℃下依次加入氰基磷酸二乙酯(DEPC)(0.23mL，1.54mmol)和三乙胺(1.17mL，8.4mmol)之后，在室温下搅拌15小时。在反应完全后，移除溶剂，并且将剩余物溶解在50mL乙酸乙酯中，并且用30mL去离子水进行洗涤。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以获得化合物(III-5)的N-末端氨基被保护的衍生物(0.96g，80％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.75-1.06(m,17H),1.18-1.38(m,5H),1.71-2.15(m,7H),2.21-2.52(m,4H),2.87-2.91(m,4H),2.99(s,3H),3.10(s,3H),3.38(s,3H),3.43-3.51(m,3H),3.82(m,1H),4.09-4.15(m,4H),4.69(m,1H),5.12-5.23(m,2H),6.50-6.60(m,2H),6.82-6.87(m,2H),7.13-7.17(m,1H),7.30-7.34(m,5H)
将化合物(III-5)的N-末端氨基被保护的衍生物(0.96g，1.1mmol)溶解在18mL叔丁醇和2mL水的混合物中，并且在氢气气氛中，在10％的钯碳(0.1g)存在下搅拌3小时。在反应完全后，将反应混合物通过硅藻土进行过滤，并用甲醇洗涤数次。随后，在真空下移除溶剂以得到标题化合物(0.79g，99％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.78-0.98(m,16H),1.06(m,1H),1.16-1.27(m,4H),1.38(m,1H),1.65-1.76(m,6H),1.89-2.02(m,4H),2.31-2.38(m,5H),2.71-2.75(m,1H),2.88-2.89(m,2H),3.00(s,3H),3.29(s,3H),3.41-3.48(m,3H),3.79-3.82(m,1H),4.08-4.15(m,2H),4.72-4.86(m,2H),6.56(m,1H),6.79-6.85(m,2H),7.10-7.15(m,1H),7.16-7.22(m,1H),7.55(d,1H)
制备例2-2：化合物(III-6)的制备
除了使用2-氨基苯乙酮来替代2-(2,6-二氟代苯基)乙胺之外，重复制备例2-1中相同的过程来得到化合物(III-6)的N-末端氨基被保护的衍生物：2.36g(81％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.71-1.04(m,17H),1.31-1.32(m,4H),1.77-1.81(m,2H),1.92-2.04(m,4H),2.17-2.61(m,4H),2.89-2.95(m,3H),2.99(s,3H),3.30(s,3H),3.46(m,3H),3.43-3.52(m,1H),3.99-4.01(m,1H),4.09-4.15(m,1H),4.24(m,1H),4.69-4.76(m,6H),5.09-5.23(m,2H),6.46-6.49(m,1H),7.12(m,1H),7.26-7.34(m,5H),7.50(t,J＝7.6Hz,2H),7.62(t,J＝7.2Hz,1H),7.97(d,J＝7.6Hz,2H)
除了使用化合物(III-6)的氨基被保护的衍生物之外，重复制备例2-1中相同的过程来得到标题化合物：1.89g(96％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.81-0.85(m,3H),0.92-1.14(m,13H),1.25-1.43(m,5H),1.46-1.89(m,6H),1.92-2.22(m,5H),2.33(s,3H),2.45-2.54(m,2H),2.74(d,J＝4.8Hz,1H),3.02(s,3H),3.32(s,3H),3.43(d,J＝9.2Hz,3H),3.52-3.84(m,2H),3.92-4.06(m,2H),4.75-4.80(m,2H),4.94-5.23(m,1H),6.76-6.94(m,1H),7.34-7.43(m,4H),7.60(m,1H)
制备例2-3：化合物(III-7)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸和2-氨基-1-(2-氟代-4-甲氧基苯基)乙酮来分别替代(2R,3R)-3-((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸和2-(2,6-二氟代苯基)乙胺之外，重复制备例2-1中相同的过程来得到标题化合物：0.18g(89％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.80-0.84(m,3H),0.88-1.03(m,17H),1.32(d,J＝7.2Hz,3H),1.35-1.39(m,2H),1.98-2.10(m,4H),2.35(s,3H),2.36-2.51(m,3H),2.74(m,1H),3.02(m,3H),3.29(s,3H),3.34(s,3H),3.45(s,3H),3.46-3.56(m,1H),3.87(s,3H),3.99(dd,J＝7.6Hz,2.8Hz,1H),4.10-4.15(m,1H),4.25-4.28(m,1H),4.58-4.64(m,2H),4.73-4.78(m,1H),6.67(m,1H),6.78(qd,J＝10.4Hz,2.8Hz,1H),7.95(m,1H)
制备例2-4：化合物(III-8)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸和(S)-2-氨基-1-(4-氟代苯基)丙-1-酮来分别替代(2R,3R)-3-((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸和2-(2,6-二氟代苯基)乙胺之外，重复制备例2-1中相同的过程来得到标题化合物：0.45g(100％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.71-1.03(m,20H),1.22(d,3H),1.33-1.37(m,4H),1.40-1.44(m,3H),1.60-1.81(m,4H),1.98(m,2H),2.26(m,2H),2.90(s,3H),3.21(s,3H),3.32(s,3H),3.43(s,3H),4.06-4.15(m,2H),4.22-4.27(m,2H),4.64-4.69(m,2H),5.09-5.13(m,2H),5.23-5.30(m,2H),5.50(m,1H),7.18(t,2H),8.01-8.05(m,2H)
制备例2-5：化合物(III-9)的制备
除了使用(R,E)-2-氨基-1-(3-甲氧基苯基)丙-1-酮肟来替代2-(2,6-二氟代苯基)乙胺之外，重复制备例2-1中相同的过程来得到标题化合物：0.17g(94％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-0.98(m,20H),1.01(m,4H),1.19-1.27(m,4H),1.79-1.83(m,2H),2.21-2.43(m,4H),2.77(m,2H),3.00(m,2H),3.29(s,6H),3.42(s,3H),3.99-4.14(m,3H),4.15-4.37(m,3H),4.70(m,1H),5.21-5.23(m,2H),5.36(m,1H),7.03(m,1H),7.15(m,2H),7.49(m,1H)
制备例2-6：化合物(III-10)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S,4S)-1-(叔丁氧羰基)-4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸来替代(2R,3R)-3-((S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸之外，重复制备例2-1中相同的过程来得到得到化合物(III-10)的N-末端氨基和羟基被保护的粗衍生物：1.0g(100％)。
将1.0M四丁基氟化铵(3.1mL，3.1mmol)加入至该化合物(1.0g，1.02mmol)在10mL二甲基甲酰胺中的溶液中，随后搅拌5小时。在反应完全后，移除溶剂，并且将剩余物溶解在50mL乙酸乙酯中，并用饱和碳酸氢钠溶液和盐水进行洗涤。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到化合物(III-10)的N-末端氨基被保护的衍生物(0.75g，84％)。
ES-MS m/z:874[M+H]+
除了使用化合物(III-10)的N-末端氨基被保护的衍生物之外，重复制备例2-1中相同的过程来得到标题化合物：0.64g(100％)。
ES-MS m/z:740[M+H]+
制备例2-7：化合物(III-11)的制备
在氩气气流下，将(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(0.70g,2.2mmol)溶解在10mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入(2R)-1-叠氮基-1-(4-氟代苯基)丙-2-胺HCl(0.47g，2.4mmol)。将温度冷却至0℃之后，将苯并三氮唑-1-基-氧基-三(二甲氨基)磷鎓六氟磷酸盐(0.97g，2.2mmol)和二异丙基乙胺(1.0mL，6.6mmol)依次加入至反应混合物中。在室温下持续搅拌15小时。在反应完全后，在高真空下对所得到的反应混合物进行浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到(2S,4R)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-(((2R)-1-叠氮基-1-(4-氟代苯基)丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-甲氧基吡咯烷-1-羧酸酯(0.61g，56％)。
LC-MS m/z:494.2[M+]+,516.3[M+Na]+
将7mL三氟乙酸加入至该化合物(0.61g，1.23mmol)在10mL二氯甲烷的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌3小时。当反应完全时，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且在通过加入5mL甲苯两次来完全移除剩余的三氟乙酸之后，再进行进一步的反应。
将该浓缩物(TFA盐)和(3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N,3-二甲基丁氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酸(0.53g，1.23mmol)一起溶解在5mL二甲基甲酰胺，并且在0℃下依次加入氰基磷酸二乙酯(DEPC)(0.20mL，1.35mmol)和三乙胺(1.56mL，11.09mmol)之后，在室温下搅拌16小时。当反应完全时，移除溶剂，并且将剩余物溶解在20mL乙酸乙酯中，并用1M亚硫酸氢钾、水、饱和碳酸氢钠溶液以及盐水进行萃取。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并在真空下浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到化合物(III-11)的N-末端氨基被保护的衍生物(0.25g，25％)。
LC-MS m/z:779.6[M+H]+
将化合物(III-11)的N-末端氨基被保护的衍生物(0.25g，0.31mmol)溶解在10mL甲醇的混合物中，并且在氢气气氛中，在10％的钯碳(0.1g)存在下搅拌16小时。在反应完全后，将反应混合物通过硅藻土进行过滤，并用甲醇洗涤数次。随后，在真空下移除溶剂以得到白色固体形式的标题化合物(97mg，41％)。
LC-MS m/z:753[M+]+,775[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.72(t,3H),0.77-1.02(m,17H),1.01(d,3H),1.15(d,3H),1.32(m,1H),1.78(brd 2H),1.85-2.12(m,4H),2.18(S,6H),2.32-2.50(m,4H),3.30(s,3H),3.38(s,6H),3.48(m,1H),4.00-4.15(m,4H),4.32(m,2H),4.85(m,2H),6.60(s,1H),6.88(s,1H),6.99-7.06(m,2H),7.22-7.32(m,2H)
制备例2-8：化合物(III-12)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(92mg，0.32mmol)和(2R)-1-叠氮基-1-苯基丙-2-胺HCl(68mg，0.32mmol)来分别替代(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸和(2R)-1-叠氮基-1-(4-氟代苯基)丙-2-胺HCl之外，重复制备例2-7中相同的过程来得到标题化合物(44mg，50％)。
MALDI-TOF MS m/z:731.6[M+H]+，753.5[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.81(t,3H),0.88-1.07(m,17H),1.18(d,3H),1.21(d,3H),1.47(m,1H),1.74(brd,2H),1.87-2.17(m,3H),2.24(S,6H),2.25-2.47(m,4H),3.04(s,3H),3.28-3.34(m,1H),3.31(s,3H),3.38(s,3H),3.45(m,1H),3.79(d,1H),3.82(m,1H),4.05-4.12(m,4H),4.24(m,2H),4.75(m,2H),6.73(s,1H),6.95(d,1H),7.24-7.35(m,5H)
制备例2-9：化合物(III-13)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(0.80g，2.8mmol)替代(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸并且使用(2R)-1-叠氮基-1-(4-氟代苯基)丙-2-胺HCl(0.64g，2.8mmol)之外，重复制备例2-7中相同的过程来得到标题化合物(0.5g，79％)。
LC-MS m/z:749.47[M+H]+,771.44[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.82(t,3H),0.91-1.1(m,17H),1.16(d,3H),1.20(d,3H),1.35(m,1H),1.78(brd,2H),1.87-2.10(m,4H),2.24(S,6H),2.28-2.48(m,4H),3.03(s,3H),3.28-3.34(m,1H),3.31(s,3H),3.38(s,3H),3.48(m,1H),3.82(d,1H),4.03-4.10(m,4H),4.22(m,2H),4.77(m,2H),6.56(d,1H),6.86(s,1H),6.99-7.07(m,2H),7.23-7.35(m,2H)
制备例2-10：化合物(III-14)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-羟基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(340mg，1.12mmol)替代(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸并且使用(2R)-1-叠氮基-1-(4-氟代苯基)丙-2-胺HCl(258mg，1.12mmol)之外，重复制备例2-7中相同的过程来得到标题化合物(350mg，71％)。
LC-MS m/z:765.46[M+]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.80(t,3H),0.90-1.09(m,17H),1.11(d,3H),1.25(d,3H),1.32(m,1H),1.78(brd,2H),2.04-2.09(m,3H),2.23(S,6H),2.35-2.50(m,4H),3.03(s,3H),3.32(s,3H),3.38(m,1H),3.47(s,3H),3.54-3.56(m,2H),3.90(m,1H),4.0-4.32(m,6H),4.75(m,2H),6.53(s,1H),6.76(d,1H),6.99-7.04(m,2H),7.32-7.35(m,2H)
制备例2-11：化合物(III-15)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(0.17g，0.58mmol)和(2R)-1-苯二酰亚氨基-1-(4-甲氧基苯基)丙-2-胺HCl(0.2g，0.58mmol)来分别替代(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸和(2R)-1-叠氮基-1-(4-氟代苯基)丙-2-胺HCl之外，重复制备例2-7中相同的过程来得到化合物(III-15)的氨基被保护的衍生物(0.34g，94％)。
LC-MS m/z:891.62[M]+
将1mL水合肼加入至化合物(III-15)的氨基被保护的衍生物(0.34g，0.38mmol)在10mL乙醇的溶液中，随后在室温下搅拌16小时。在反应完全后，在真空下移除溶剂。通过硅胶柱色谱法对剩余物进行纯化以得到白色固体形式的标题化合物(0.11g，38％)。
LC-MS m/z:761.56[M+]+,783.60[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.80(m,3H),0.88-1.07(m,18H),1.19(d,3H),1.15(m,1H),1.22(m,1H),1.25(d,3H),1.70-1.90(m,4H),2.07(S,6H),2.26(s,3H),2.28-2.48(m,4H),3.06(s,3H),3.32(s,3H),3.38(m,1H),3.43(s,3H),3.50(m,1H),3.76(m,1H),3.80(s,3H),3.78(d,1H),3.90-4.25(m,4H),4.54(m,2H),6.89(d,2H),7.35(d,2H)
制备例2-12：化合物(III-16)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-羟基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(0.36g，1.17mmol)和(2R)-1-苯二酰亚氨基-1-(4-甲氧基苯基)丙-2-胺HCl(0.41g,1.17mmol)来分别替代(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸和(2R)-1-叠氮基-1-(4-氟代苯基)丙-2-胺HCl之外，重复制备例2-7中相同的过程来得到化合物(III-16)的氨基被保护的衍生物(0.59g，74％)。
LC-MS m/z:907.54[M]+
除了使用化合物(III-16)的氨基被保护的衍生物(0.59g，0.65mmol)之外，重复制备例2-11中相同的过程来得到白色固体形式的标题化合物(0.19g，38％)。
LC-MS m/z:777.42[M+]+,799.39[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-0.859(m,3H),0.86-1.06(m,17H),1.13(d,3H),1.24-1.40(m,6H),1.62-1.84(m,2H),1.97-2.41(m,3H),2.20-2.32(m,7H),2.36-2.54(m,4H),3.06(s,3H),3.31(s,3H),3.46(t,1H)3.50(s,3H),3.56(brs,1H),3.62(m,1H),3.67(m,1H),3.72-3.77(m,1H),3.80(s,3H),3.97-4.28(m,4H),4.30(m,1H),4.68(m,1H),4.72-4.83(m,1H),6.89(d,2H),7.33(d,2H)
制备例2-13：化合物(III-17)的制备
除了使用(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-羟基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(1.43g，4.7mmol)和2-苯二酰亚氨基-2-(对甲苯基)乙胺HCl(1.65g，5.2mmol)来分别替代(2R,3R)-3-((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-甲氧基吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸和(2R)-1-叠氮基-1-(4-氟代苯基)丙-2-胺HCl之外，重复制备例2-7中相同的过程来得到化合物(III-17)的氨基被保护的衍生物(2.35g，78％)。
LC-MS m/z:878[M+1]+
除了使用化合物(III-17)的氨基被保护的衍生物(2.08g，2.37mmol)之外，重复制备例2-11中相同的过程来得到白色固体形式的标题化合物(1.7g，94％)。
LC-MS m/z:748[M+1]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-0.84(m,3H),0.91-1.03(m,19H),1.24-1.29(m,4H),1.29-1.40(m,1H),1.90-2.14(m,4H),2.25(s,6H),2.32(s,3H),2.38-2.48(m,3H),3.03(s,3H),3.14(brd,1H),3.24-3.30(m,1H),3.32(s,3H),3.38-3.43(m,1H),3.48(s,3H),3.54-3.62(m,3H),4.04-4.18(m,3H),4.24-4.34(m,2H),4.77-4.90(m,2H),6.37(m,1H),7.14-7.28(m,4H)
制备例2-14：化合物(III-18)的制备
在氩气气流下，将(2R,3R)-3-((2S,4S)-1-(叔丁氧羰基)-4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酸(0.92g，2.2mmol)溶解在10mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入2-(2,6-二氟代苯基)乙胺(0.38g，2.4mmol)。将温度冷却至0℃之后，将苯并三氮唑-1-基-氧基-三(二甲氨基)磷鎓六氟磷酸盐(0.97g，2.2mmol)和二异丙基乙胺(1.0mL，6.6mmol)依次加入至反应混合物中。在室温下持续搅拌15小时。在反应完全后，在高真空下对所得到的反应混合物进行浓缩，并通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到(2S,4S)-叔丁基-4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)-2-((1R,2R)-3-((2,6-二氟代苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.87g，70.9％)。
将7mL三氟乙酸加入至该化合物(0.87g，1.56mmol)在10mL二氯甲烷的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌3小时。当反应完全时，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且在通过加入5mL甲苯两次来完全移除剩余的三氟乙酸之后，再进行进一步的反应。
将该浓缩物(TFA盐)和(3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N,3-二甲基丁氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酸(0.67g，1.56mmol)一起溶解在5mL二甲基甲酰胺，随后在室温下依次加入氰基磷酸二乙酯(DEPC)(0.26mL，1.56mmol)和三乙胺(1.09mL，7.82mmol)之后，在室温下搅拌16小时。在反应完全后，移除溶剂，并且将剩余物溶解在20mL乙酸乙酯中，并用1M亚硫酸氢钾、水、饱和碳酸氢钠溶液以及盐水进行萃取。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯:己烷＝2:1→乙酸乙酯)对浓缩物进行纯化以得到化合物(III-18)的羟基被保护的衍生物(1.14g，84％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.04(s,6H),0.81-1.06(m,19H),1.19(m,3H),1.46(m,2H),1.65(m,2H),1.97-2.17(m,3H),2.44-2.46(m,3H),2.71-2.80(m,3H),2.81-2.89(m,1H),2.91-2.94(m,2H),2.71-2.80(m,3H),3.04(s,3H),3.26-3.33(m,2H),3.37(s,3H),3.74(m,2H),4.28-4.31(m,2H),4.75-4.82(m,2H),6.18(m,1H),6.84-6.89(m,2H),7.15-7.19(m,1H),7.58(d,1H)
搅拌化合物(III-18)的羟基被保护的衍生物(1.14g，1.31mmol)和1.0M四丁基氟化铵(4.9mL，4.09mmol)在95m四氢呋喃中的溶液5小时，随后用饱和水性氯化铵溶液来终止反应。用450mL乙酸乙酯和300mL水进行萃取之后，进行真空浓缩。通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇＝9:1)来对浓缩物进行纯化以得到标题化合物(0.45g，45％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-1.05(m,19H),1.26(m,3H),1.45(m,2H),1.66(m,2H),1.97-2.17(m,3H),2.44-2.46(m,3H),2.71-2.80(m,3H),2.81-2.89(m,1H),2.91-2.94(m,2H),2.71-2.80(m,3H),3.04(s,3H),3.26-3.33(m,2H),3.37(s,3H),3.74(m,2H),4.28-4.31(m,2H),4.75-4.82(m,2H),6.18(m,1H),6.84-6.89(m,2H),7.15-7.19(m,1H),7.58(d,1H)
LC-MS m/z:754[M+]+
制备例2-15：化合物(III-19)的制备
除了使用通过(S)-2-氨基-1-(4-氟代苯基)丙-1-酮替代2-(2,6-二氟代苯基)乙胺而得到的(2S,4S)-叔丁基-4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-(4-氟代苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.44g，0.78mmol)之外，重复制备例2-14中相同的过程来得到标题化合物：0.34g(58％)。
LC-MS m/z:764[M+]+
制备例2-16：化合物(III-20)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-4-叠氮基-2-((1R,2R)-3-((2,6-二氟代苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.33g，0.71mmol)替代(2S,4S)-叔丁基-4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)-2-((1R,2R)-3-((2,6-二氟代苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-14中相同的过程来得到化合物(III-20)的氨基被保护的衍生物(0.42g，76％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-1.07(m,15H),1.20(d,2H),1.99-2.11(m,4H),2.18-2.28(m,5H),2.33-2.45(m,4H),2.90-3.27(m,6H),3.32-3.42(m,6H),3.47-3.54(m,2H),3.75-3.78(m,1H),3.85-3.98(m,2H),4.19-4.21(m,1H),4.39-4.44(m,1H),4.46-4.80(m,1H),4.87-4.90(m,1H),6.17(m,1H),6.84-6.95(m,2H),7.14-7.26(m,1H)
将化合物(III-20)的N-末端氨基被保护的衍生物(0.24g，0.31mmol)溶解在10mL甲醇中，并且在氢气气氛中，在10％的钯碳(15mg)存在下搅拌14小时。在反应完全后，通过硅藻土对反应混合物进行过滤，并用甲醇洗涤数次。随后，在真空下移除溶剂以得到标题化合物(0.23g，99％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-1.03(m,14H),1.21-1.22(m,5H),2.06-2.45(m,6H),2.89-3.02(m,4H),3.30-3.44(m,5H),3.47-3.52(m,2H),3.67-3.69(m,1H),3.71-4.39(m,3H),4.78-4.80(m,1H),6.17(m,1H),6.84-6.95(m,2H),7.14-7.26(m,1H)
LC-MS m/z:753[M+]+,775[M+Na]+
制备例2-17：化合物(III-21)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-4-(苄基(甲基)氨基)-2-((1R,2R)-3-((2,6-二氟代苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.13g，0.24mmol)来替代(2S,4S)-叔丁基-4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)-2-((1R,2R)-3-((2,6-二氟代苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-14中相同的过程以得到化合物(III-21)的氨基被保护的衍生物(0.13g，64％)。
LC-MS m/z:857.5[M+]+
将化合物(III-21)的N-末端氨基被保护的衍生物(0.13g，0.15mmol)溶解在10mL甲醇中，并且在氢气气压(55psi)中，在10％的氢氧化钯(66mg)存在下搅拌12小时。在反应完全后，通过硅藻土对反应混合物进行过滤，并用甲醇洗涤数次。随后，在真空下移除溶剂以得到标题化合物(115mg，100％)。
LC-MS m/z:767.6[M+]+,789.4[M+Na]+
制备例2-18：化合物(III-22)的制备
将10mL三氟乙酸滴加至(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯(1.28g，2.73mmol)在30mL二氯甲烷的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌3小时。当反应完全时，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且在通过加入5mL甲苯两次来完全移除三氟乙酸之后，再进行进一步的反应。
将10mL三氟乙酸逐滴加入至(3R,4S,5S)-叔丁基-4-((S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N,3-二甲基丁氨基)-3-甲氧基-5-庚酸甲酯(1.33g，2.73mmol)在30mL二氯甲烷的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌3小时。当反应完全时，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且在通过加入5mL甲苯两次来完全移除三氟乙酸之后，再进行进一步的反应。
将上述两种浓缩物(TFA盐)溶解在60mL二氯甲烷中，并且随后在0℃下依次加入氰基磷酸二乙酯(DEPC)(0.52mL，3.28mmol)和三乙胺(3.8mL，27.32mmol)之后，在室温下搅拌16小时。在反应完全后，移除溶剂，并且将剩余物溶解在50mL乙酸乙酯中，并用1M亚硫酸氢钾、水、饱和碳酸氢钠溶液以及盐水进行萃取。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯:己烷＝2:1→乙酸乙酯)对浓缩物进行纯化以得到标题化合物(1.3g，60％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.780.88(m,3H),0.91-1.07(m,17H),1.31-1.37(m,5H),1.99-2.11(m,3H),2.28(s,6H),2.43-2.62(m,6H),3.06(s,3H),3.11-3.16(m,2H),3.34(s,3H),3.56(s,3H),3.57-3.65(m,2H),3.97(s,3H),4.08-4.09(brs,1H),4.18-4.2(d,1H),4.3(brs,1H),4.39-4.42(d,2H),4.7-4.72(t,2H),4.76-4.8(m,2H),4.85-4.91(brs,1H),7.03-7.1(m,1H),7.69-7.78(m,2H)
LC-MS m/z:780.8[M+H]+,802.8[M+Na]+
制备例2-19：化合物(III-23)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(2,4-二甲基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯来替代(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-18中相同的过程来得到标题化合物(3.2g，89％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-0.85(m,3H),0.91-1.13(m,14H),1.15-1.19(m,3H),1.35-1.38(m,5H),2.00-2.10(m,3H),2.18-2.24(m,3H),2.37(s,3H),2.39-2.48(m,1H),2.53(s,3H),2.55-2.62(m,1H),2.87(s,6H),2.89(s,1H),3.02(s,3H),3.07-3.17(m,2H),3.32(s,3H),3.52(s,3H),3.51-3.61(m,2H),4.11-4.12(brs,1H),4.16-4.18(d,1H),4.30(m,1H),4.37-4.4(d,1H),4.64-4.66(t,2H),4.69-4.74(m,2H),6.90(t,1H),7.09-7.11(m,2H),7.66-7.68(d,2H)
LC-MS m/z:760.6[M+H]+,782.6[M+Na]+
制备例2-20：化合物(III-24)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-4-羟基-2-((1R,2R)-1-甲氧基-3-((2-(6-甲氧基萘-2-基)-2-氧代乙基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯来替代(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-18中相同的过程来得到标题化合物(0.17g，67.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.75-0.82(m,3H),0.85-1.07(m,17H),1.26-1.40(m,5H),1.98-2.10(m,6H),2.39-2.48(m,3H),2.58-2.64(m,1H),3.01(s,3H),3.34(s,3H),3.52-3.73(m,2H),3.57(s,3H),4.12(brs,1H),4.19-4.21(d,1H),4.25-4.31(brs,1H),4.41-4.44(d,1H),4.75-4.83(m,2H),4.87-4.94(m,3H),6.91-6.94(t,2H),7.17(s,1H),7.22-7.24(d,1H),7.78-7.92(m,2H),7.96-7.98(d,1H),8.42(s,1H)
LC-MS m/z:812.7[M+H]+,834.7[M+Na]+
制备例2-21：化合物(III-25)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-4-叠氮基-2((1R,2R)-3-((2-(3,4-二甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.39g，0.77mmol)来替代(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-18中相同的过程来得到化合物(III-25)的氨基被保护的衍生物(0.56g，89％)。
LC-MS m/z:817.5[M+H]+,839.5[M+Na]+
除了使用化合物(III-25)的氨基被保护的衍生物之外，重复制备例2-16中相同的过程来得到标题化合物(0.38g，69％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-0.82(t,3H),0.88-1.02(m,17H),1.23-1.28(m,1H),1.31-1.34(m,3H),1.96-2.12(m,2H),2.25-2.28(m,6H),2.36-2.52(m,2H),2.56-2.65(m,1H),2.98-3.03(m,3H),3.25-3.33(m,5H),3.47-3.49(m,1H),3.51-3.57(m,3H),3.72-3.73(m,1H),3.83-3.96(d,6H),4.09-4.16(m,2H),4.18-4.24(m,2H),4.25-4.36(m,1H),4.68-4.69(m,1H),4.74-4.88m,2H),4.82-4.88(m,1H),6.91-6.93(d,1H),7.50(s,1H),7.60-7.63(d,1H)
制备例2-22：化合物(III-26)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-4-叠氮基-2-((1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-((2-(萘-2-基)-2-氧代乙基)氨基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.40g，0.81mmol)来替代(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-18中相同的过程来得到化合物(III-26)的氨基被保护的衍生物(0.60g，92％)。
LC-MS m/z:807.5[M+H]+,829.5[M+Na]+
除了使用化合物(III-26)的氨基被保护的衍生物之外，重复制备例2-16中相同的过程来得到标题化合物(0.28g，48％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.78-0.82(t,3H),0.87-1.01(m,17H),1.22-1.28(m,1H),1.33-1.34(m,3H),1.80-2.12(m,2H),2.24-2.28(m,6H),2.38-2.50(m,2H),2.58-2.68(m,1H),2.95-3.05(m,3H),3.06-3.13(m,1H),3.20-3.23(m,1H),3.28-3.40(m,3H),3.43-3.45(m,1H),3.48-3.59(m,3H),3.60-3.67(m,1H),3.72-3.75(m,1H),4.04-4.17(m,2H),2.20-2.30(m,1H),4.32-4.36(m,1H),4.73-4.81(m,2H),4.85-4.86(m,1H),4.96-5.02(m,1H),7.57-7.65(m,2H),7.88-8.01(m,4H),8.51(s,1H)
制备例2-23：化合物(III-27)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-4-叠氮基-2-((1R,2R)-1-甲氧基-3-((2-(3-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.30g，0.63mmol)来替代(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-18中相同的过程来得到化合物(III-27)的氨基被保护的衍生物(0.50g，100％)。
LC-MS m/z:787.4[M+H]+,809.5[M+Na]+
除了使用化合物(III-27)的氨基被保护的衍生物之外，重复制备例2-16中相同的过程来得到标题化合物(0.23g，48％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.78-0.82(t,3H),0.88-1.02(m,17H),1.25-1.29(m,3H),2.07-2.09(m,2H),2.18-2.31(m,6H),2.33-2.40(m,2H),2.52-2.64(m,1H),2.92-3.08(m,3H),3.20-3.25(m,1H),3.28-3.33(m,3H),3.38-3.40(m,1H),3.48-3.76(m,1H),3.78-3.88(m,3H),4.06-4.16(m,2H),4.19-4.28(m,1H),4.29-4.39(m,1H),4.70-4.71(m,1H),4.74-4.81(m,2H),4.88-4.95(m,1H),6.96-6.99(d,1H),7.38-7.42(t,1H),7.47(s,1H),7.53-7.55(d,1H)
制备例2-24：化合物(III-28)的制备
将7mL三氟乙酸滴加至(2S,4S)-叔丁基-4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-(4-氟代苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.87g，1.56mmol)在10mL二氯甲烷的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌3小时。当反应完全时，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且在通过加入5mL甲苯两次来完全移除三氟乙酸之后，再进行后续反应。
将该浓缩物(TFA盐)和(3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N,3-二甲基丁氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酸(0.67g，1.56mmol)一起溶解在5mL二甲基甲酰胺，并且在0℃下依次加入氰基磷酸二乙酯(DEPC)(0.26mL，1.56mmol)和三乙胺(1.09mL，7.82mmol)之后，在室温下搅拌16小时。在反应完全后，移除溶剂，并且将剩余物溶解在20mL乙酸乙酯中，并用1M亚硫酸氢钾、水、饱和碳酸氢钠溶液以及盐水进行萃取。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯:己烷＝2:1→乙酸乙酯)对浓缩物进行纯化以得到化合物的羟基被保护的衍生物(1.14g，84％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.04(s,6H),0.81-1.06(m,19H),1.19(m,3H),1.46(m,2H),1.65(m,2H),1.97-2.17(m,3H),2.44-2.46(m,3H),2.71-2.80(m,3H),2.81-2.89(m,1H),2.91-2.94(m,2H),2.71-2.80(m,3H)3.04(s,3H),3.26-3.33(m,2H),3.37(s,3H),3.74(m,2H),4.28-4.31(m,2H),4.75-4.82(m,2H),6.18(m,1H),6.84-6.89(m,2H),7.15-7.19(m,1H),7.58(d,1H)
搅拌化合物的羟基被保护的衍生物(1.14g，1.31mmol)和1.0M四丁基氟化铵(4.9mL，4.09mmol)在95m四氢呋喃中的溶液5小时，随后用饱和水性氯化铵溶液来终止反应。在用450mL乙酸乙酯和300mL水来进行萃取之后，进行真空浓缩。通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷:甲醇＝9:1)来对浓缩物进行纯化以得到(S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N-((3R,4S,5S)-1-((2S,4S)-2-((1R,2R)-3-(((S)-1-(4-氟代苯基)-1-氧代丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-N,3-二甲基丁酰胺(0.45g，45％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-1.05(m,19H),1.26(m,3H),1.45(m,2H),1.66(m,2H),1.97-2.17(m,3H),2.44-2.46(m,3H),2.71-2.80(m,3H),2.81-2.89(m,1H),2.91-2.94(m,2H),2.71-2.80(m,3H),3.04(s,3H),3.26-3.33(m,2H),3.37(s,3H),3.74(m,2H),4.28-4.31(m,2H),4.75-4.82(m,2H),6.18(m,1H),6.84-6.89(m,2H),7.15-7.19(m,1H),7.58(d,1H)
LC-MS m/z:754[M+H]+
将该化合物(0.45g，0.59mmol)在20mL二氯甲烷中的溶液冷却至-50℃至-60℃，并且加入吡啶(0.29ml，3.54mmol)。将对硝基苯基氯甲酸酯(0.71g，3.54mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液在20min内缓慢地滴加至反应混合物，随后在-50℃至-60℃下，搅拌3小时。当反应完全时，将20mL二氯甲烷进一步加入至反应混合物中，随后用0.5M亚硫酸氢钾溶液对该反应混合物进行萃取。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到标题化合物(0.4g，74％)。
LC-MS m/z:929.6[M+H]+
制备例2-25：化合物(III-29)的制备
将10mL三氟乙酸滴加至(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯(1.28g，2.73mmol)在30mL二氯甲烷中的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌3小时。当反应完全时，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且在通过加入10mL甲苯两次来完全移除三氟乙酸之后，再进行进一步的反应。
将10mL三氟乙酸滴加至(3R,4S,5S)-叔丁基-4-((S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N,3-二甲基丁氨基)-3-甲氧基-5-庚酸甲酯(1.33g，2.73mmol)在30mL二氯甲烷中的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌3小时。当反应完全时，通过真空浓缩移除反应溶剂，并且在通过加入10mL甲苯两次来完全移除三氟乙酸之后，再进行后续反应。
将这两种浓缩物(TFA盐)溶解在60mL二氯甲烷中，并且在0℃下依次加入氰基磷酸二乙酯(DEPC)(0.52mL，3.28mmol)和三乙胺(3.8mL，27.32mmol)之后，在室温下搅拌16小时。在反应完全后，移除溶剂，并且将剩余物溶解在50mL乙酸乙酯中，并用1M亚硫酸氢钾、水、饱和碳酸氢钠溶液以及盐水进行萃取。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯:己烷＝2:1→乙酸乙酯)对浓缩物进行纯化以得到(S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N-((3R,4S,5S)-1-((2S,4S)-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-N,3-二甲基丁酰胺(1.3g，60％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.78-0.88(m,3H),0.91-1.07(m,17H),1.31-1.37(m,5H),1.99-2.11(m,3H),2.28(s,6H),2.43-2.62(m,6H),3.06(s,3H),3.11-3.16(m,2H),3.34(s,3H),3.56(s,3H),3.57-3.65(m,2H),3.97(s,3H),4.08-4.09(brs,1H),4.18-4.2(d,1H),4.3(brs,1H),4.39-4.42(d,2H),4.7-4.72(t,2H),4.76-4.8(m,2H),4.85-4.91(brs,1H),7.03-7.1(m,1H),7.69-7.78(m,2H)
LC-MS m/z:780.8[M+H]+,802.8[M+Na]+
将该化合物(1.27g，1.63mmol)在20mL二氯甲烷中的溶液冷却至-50℃至-60℃，并且加入吡啶(1.3ml，16.28mmol)。将对硝基苯基氯甲酸酯(16.28g，3.3mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液在20min内缓慢地滴加至反应混合物，随后在-50℃至-60℃下，搅拌3小时。当反应完全时，将20mL二氯甲烷进一步加入至反应混合物中，随后用0.5M亚硫酸氢钾溶液对该反应混合物进行萃取。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到标题化合物(0.8g，54％)。
LC-MS m/z:945.7[M+H]+,967.7[M+Na]+
制备例2-26：化合物(III-30)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(2,4-二甲基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯来替代(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-25中相同的过程以得到(S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N-((3R,4S,5S)-1-((2S,4S)-2-((1R,2R)-3-((2-(2,4-二甲基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-N,3-二甲基丁酰胺(3.2g，89％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.790.85(m,3H),0.91-1.13(m,14H),1.15-1.19(m,3H),1.35-1.38(m,5H),2.00-2.10(m,3H),2.18-2.24(m,3H),2.37(s,3H),2.39-2.48(m,1H),2.53(s,3H),2.55-2.62(m,1H),2.87(s,6H),2.89(s,1H),3.02(s,3H),3.07-3.17(m,2H),3.32(s,3H),3.52(s,3H),3.51-3.61(m,2H),4.11-4.12(brs,1H),4.16-4.18(d,1H),4.30(m,1H),4.37-4.4(d,1H),4.64-4.66(t,2H),4.69-4.74(m,2H),6.90(t,1H),7.09-7.11(m,2H),7.66-7.68(d,2H)
LC-MS m/z:760.6[M+H]+,782.6[M+Na]+
除了使用该化合物之外，重复制备例2-25中相同的过程来得到标题化合物(1.6g，43％)。
LC-MS m/z:925.6[M+H]+,947.6[M+Na]+
制备例2-27：化合物(III-31)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-4-羟基-2-((1R,2R)-1-甲氧基-3-((2-(6-甲氧基萘-2-基)-2-氧代乙基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯来替代(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-25中相同的过程以得到(S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N-((3R,4S,5S)-1-((2S,4S)-4-羟基-2-((1R,2R)-1-甲氧基-3-((2-(6-甲氧基萘-2-基)-2-氧代乙基)氨基)-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-N,3-二甲基丁酰胺(0.17g，67.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.75-0.82(m,3H),0.85-1.07(m,17H),1.26-1.40(m,5H),1.98-2.10(m,6H),2.39-2.48(m,3H),2.58-2.64(m,1H),3.01(s,3H),3.34(s,3H),3.52-3.73(m,2H),3.57(s,3H),4.12(brs,1H),4.19-4.21(d,1H),4.25-4.31(brs,1H),4.41-4.44(d,1H),4.75-4.83(m,2H),4.87-4.94(m,3H),6.91-6.94(t,2H),7.17(s,1H),7.22-7.24(d,1H),7.78-7.92(m,2H),7.96-7.98(d,1H),8.42(s,1H)
LC-MS m/z:812.7[M+H]+,834.7[M+Na]+
除了使用该化合物之外，重复制备例2-25中相同的过程来得到标题化合物(0.15g，87％)。
LC-MS m/z:977.9[M+H]+,999.9[M+Na]+
制备例2-28：化合物(III-32)的制备
除了使用(2S,4S)-叔丁基-4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)-2-((1R,2R)-3-((2,6-二氟代苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-羧酸酯(0.87g，70.9％)来替代(2S,4S)-叔丁基-2-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-羧酸酯之外，重复制备例2-24中相同的过程来得到(2S)-N-((3R,4S)-1-((2S,4S)-2-((1R,2R)-3-((2,6-二氟代苯乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)-4-羟基吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N,3-二甲基丁酰胺(0.45g，45％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.79-1.05(m,19H),1.26(m,3H),1.45(m,2H),1.66(m,2H),1.97-2.17(m,3H),2.44-2.46(m,3H),2.71-2.80(m,3H),2.81-2.89(m,1H),2.91-2.94(m,2H),2.71-2.80(m,3H),3.04(s,3H),3.26-3.33(m,2H),3.37(s,3H),3.74(m,2H),4.28-4.31(m,2H),4.75-4.82(m,2H),6.18(m,1H),6.84-6.89(m,2H),7.15-7.19(m,1H),7.58(d,1H)
LC-MS m/z:754[M+]+
除了使用该化合物之外，重复制备例2-24中相同的过程来得到标题化合物(0.46g，83％)。
LC-MS m/z:920.1[M+H]+
制备例3：化学式IV-1、化学式IV-2、化学式IV-3和化学式IV-4的化合物的制备
制备例3-1：化合物(IV-5)的制备
在氩气气流下，将在制备例1-1中制备的化合物(II-1)(0.37g，0.50mmol)加入至在制备例2-1中制备的化合物(III-5)(0.36g，0.50mmol)在14mL无水二甲基甲酰胺的溶液中。将反应混合物冷却至0℃，并且在依次加入HOBt(81mg，0.60mmol)和3.5mL无水吡啶之后，在室温下搅拌15小时。在反应完全后，进行真空浓缩，并且通过硅胶柱色谱法对剩余物进行纯化以得到乳白色固体形式的标题化合物(0.49g，74％)。
MALDI-TOF MS m/z:1345.6[M+Na]+,1361.6[M+K]+
制备例3-2：化合物(IV-6)的制备
除了使用在制备例2-2中制备的化合物(III-6)(0.35g，0.50mmol)来替代在制备例2-1中制备的化合物(III-5)之外，重复制备例3-1中相同的过程来得到标题化合物(0.42g，72％)。
MALDI-TOF MS m/z:1322.8[M+Na]+,1339.0[M+K]+
制备例3-3：化合物(IV-7)的制备
除了使用在制备例2-3中制备的化合物(III-7)(79mg，0.10mmol)来替代在制备例2-1中制备的化合物(III-5)之外，重复制备例3-1中相同的过程来得到标题化合物(97mg，78％)。
MALDI-TOF MS m/z:1400.3[M+Na]+
制备例3-4：化合物(IV-8)的制备
除了使用在制备例2-4中得到的化合物(III-8)(104mg，0.14mmol)来替代在制备例2-1中得到的化合物(III-5)之外，重复制备例3-1中相同的过程来得到标题化合物(86mg，48％)。
MALDI-TOF MS m/z:1386.9[M+Na]+,1402.9[M+K]+
制备例3-5：化合物(IV-9)的制备
除了使用在制备例2-5中得到的化合物(III-9)(65mg，0.085mmol)来替代在制备例2-1中得到的化合物(III-5)之外，重复制备例3-1中相同的过程来得到标题化合物(43mg，41％)。
MALDI-TOF MS m/z:1381.6[M+Na]+
制备例3-6：化合物(IV-10)的制备
除了使用在制备例2-6中得到的化合物(III-10)(82mg，0.11mmol)来替代在制备例2-1中得到的化合物(III-5)之外，重复制备例3-1中相同的过程来得到标题化合物(89mg，66％)。
MALDI-TOF MS m/z:1360.0[M+Na]+,1377.2[M+K]+
制备例3-7：化合物(IV-11)的制备
在氩气气流下，将在制备例2-7中得到的化合物(III-11)(89mg，0.116mmol)溶解在8mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入在制备例1-1中所得到的化合物(II-1)(78mg，0.106mmol)。将反应混合物冷却至0℃，并且在依次加入HOBt(17mg，0.128mmol)和2.0mL无水吡啶之后，在室温下搅拌17小时。在反应完全后，进行真空浓缩，并且通过硅胶柱色谱法对剩余物进行纯化以得到标题化合物(106mg，73％)。
LC-MS m/z:1377.8[M+]+,1400.8[M+Na]+
制备例3-8：化合物(IV-12)的制备
除了使用在制备例2-8中得到的化合物(III-12)(17mg，0.023mmol)来替代在制备例2-7中得到的化合物(III-11)之外，重复制备例3-7中相同的过程来得到标题化合物(26mg，93％)。
MALDI-TOF MS m/z:1351.3[M+Na]+,1367.7[M+K]+
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.81-0.91(m,6H),0.91-1.03(m,21H),1.63(d,2H),1.22(d,1H),1.28(m,2H),1.32(m,1H),1.50-1.63(m,6H),1.68(m,2H),1.82-1.90(m,2H),1.95(s,3H),1.98(m,4H),2.23-2.28(m,3H),2.34(brd,1H),2.40(s,6H),2.58-2.70(m,1H),2.80-2.85(m,1H),2.91-2.98(m,1H),3.12(s,3H),3.15-3.27(m,2H),3.26-3.33(m,8H,OCH3),3.34(d,2H),3.42-3.48(m,5H,OCH3),3.52(m,1H),3.7-3.96(m,2H),3.96-4.08(m,2H),4.15(d,1H),4.18(m,1H),4.44-4.54(m,2H),4.66(d,1H),4.54-5.10(m,5H),6.76(m,1H),7.02-7.12(m,2H),7.23-7.28(m,2H),7.30-7.38(m,2H),7.51-7.58(m,2H)
制备例3-9：化合物(IV-13)的制备
除了使用在制备例2-9中得到的化合物(III-13)(478mg，0.638mmol)来替代在制备例2-7中得到的化合物(III-11)之外，重复制备例3-7中相同的过程来得到标题化合物(347mg，40％)。
LC-MS m/z:1347[M+]+
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.76-0.90(m,6H),0.90-1.12(m,18H),1.16(m,4H),1.19(m,3H),1.28(m,3H),1.28(m,3H),1.40(m,2H),1.50-1.66(m,9H),1.66-1.80(m,2H),1.93(s,3H),2.0-2.14(m,4H),2.26(m,3H),2.38(d,6H),2.44(m,1H),2.50-2.65(m,1H),2.77(m,2H),3.10-3.24(m,6H),3.25-3.36(m,7H,OCH3),3.45(t,3H),3.58(m,1H),3.66(m,1H),3.82(m,1H),4.06(m,1H),4.14(m,2H),4.26(m,1H),4.36(m,1H),4.48(m,2H),4.63(m,1H),4.69(m,3H),6.78(s,2H),6.97(m,1H),7.08(m,1H),7.25(m,2H),7.34(m,2H),7.54(m,2H)
制备例3-10：化合物(IV-14)的制备
除了使用在制备例2-10中得到的化合物(III-14)(0.39g，0.51mmol)来替代在制备例2-7中得到的化合物(III-11)之外，重复制备例3-7中相同的过程来得到标题化合物(453mg，65％)。
LC-MS m/z:1364[M+1]+
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.81-0.91(m,6H),0.91-1.03(m,21H),1.13(d,2H),1.22(d,1H),1.28(m,2H),1.32(m,1H),1.50-1.63(m,6H),1.68(m,2H),1.82-1.90(m,2H),1.95(s,3H),1.98(m,4H),2.23-2.28(m,3H),2.34(brd,1H),2.40(s,6H),2.58-2.70(m,1H),2.80-2.85(m,1H),2.91-2.98(m,1H),3.12(s,3H),3.15-3.27(m,2H),3.27-3.33(m,8H,OCH3),3.34(d,2H),3.42-3.48(m,5H,OCH3),3.52(m,1H),3.7-3.96(m,2H),3.96-4.08(m,2H),4.15(d,1H),4.18(m,1H),4.44-4.54(m,2H),4.66(d,1H),4.74-5.10(m,5H),6.76(m,1H),7.02-7.12(m,2H),7.23-7.28(m,2H),7.30-7.38(m,2H),7.51-7.58(m,2H)
制备例3-11：化合物(IV-15)的制备
除了使用在制备例2-11中得到的化合物(III-15)(110mg，0.144mmol)来替代在制备例2-7中得到的化合物(III-11)之外，重复制备例3-7中相同的过程来得到标题化合物(82mg，42％)。
LC-MS m/z:1360[M+1]+
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.81-0.91(m,6H),0.92-1.05(m,19H),1.3-1.2(m,3H),1.22(d,1H),1.28(m,2H),1.32(m,1H),1.50-1.63(m,6H),1.68(m,2H),1.82-1.90(m,2H),1.95(s,3H),1.98(m,3H),2.23-2.28(m,3H),2.37(d,6H),2.61(m,1H),2.78(m,1H),3.12(s,3H),3.16-3.24(m,2H),3.26-3.32(m,15H,OCH3),3.32-3.28(m,5H,OCH3),3.42-3.50(m,1H),3.74(d,3H),3.86(m,1H),3.96-4.08(m,2H),4.14(d,1H),4.18-4.10(m,1H),4.42-4.52(m,2H),4.64-5.10(m,5H),6.76(d,2H),6.87(m,2H),7.24(m,4H),7.55(m,2H)
制备例3-12：化合物(IV-16)的制备
除了使用在制备例2-12中得到的化合物(III-16)(179mg，0.23mmol)来替代在制备例2-7中得到的化合物(III-11)之外，重复制备例3-7中相同的过程来得到标题化合物(268mg，85％)。
LC-MS m/z:1375[M+1]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.71-0.80(m,5H),0.80-0.98(m,18H),0.98-1.10(m,4H),1.18(m,2H),1.50(m,6H),1.55-1.75(m,4H),1.81-2.00(m,8H),2.05-2.30(m,5H),2.26(d,6H),2.40-2.61(m,1H),2.65-2.80(m,2H),2.90-3.08(m,6H),3.15(d,3H),3.30(d,3H),3.42(s,2H),3.67(s,3H),3.70(s,3H),3.15-3.43(m,3H),3.85-4.05(m,4H),4.18(brt,2H),4.38(m,2H),4.52(t,1H),4.56-4.80(m,3H),4.88(d,1H),5.01(m,2H),5.10(d,1H),6.00(m,1H),6.84-8.20(m,10H),10.0(d,1H)
制备例3-13：化合物(IV-17)的制备
除了使用在制备例2-13中得到的化合物(III-17)(327mg，0.431mmol)来替代在制备例2-7中得到的化合物(III-11)之外，重复制备例3-7中相同的过程来得到标题化合物(440mg，75％)。
LC-MS m/z:1346[M+1]+
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.81-1.02(m,23H),1.13-1.20(m,3H),1.25-1.32(m,2H),1.40(m,1H),1.50-1.63(m,6H),1.72-1.78(m,2H),1.82-1.98(m,3H),1.96(s,3H),2.00-2.09(m,4H),2.15-2.30(m,5H),2.34-2.42(d,6H),2.40-2.60(m,3H),2.75(m,1H),2.98(m,1H),3.05(m,3H),3.16-3.24(m,2H),3.26-3.35(m,8H,OCH3),3.38-3.48(m,6H,OCH3),3.52-3.60(m,1H),3.65-3.80(m,1H),3.90-4.16(m,5H),4.48(m,1H),4.63-5.10(m,8H),6.76(s,2H),7.09-7.28(m,6H),7.53(m,2H)
制备例3-14：化合物(IV-18)的制备
在氩气气流下，将在制备例2-14中得到的化合物(III-18)(0.36g，0.48mmol)溶解在10mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入在制备例1-1中所得到的化合物(II-1)(0.32g，0.43mmol)。将反应混合物冷却至0℃，并且在依次加入HOBt(70mg，0.52mmol)和2.5mL无水吡啶之后，在室温下搅拌15小时。在反应完全后，进行真空浓缩，并且通过硅胶柱色谱法对剩余物进行纯化以得到乳白色固体形式的标题化合物(0.29g，51％)。
LC-MS m/z:1353[M+]+,1375[M+Na]+
制备例3-15：化合物(IV-19)的制备
除了使用在制备例2-15中得到的化合物(III-19)(0.34g，0.45mmol)来替代在制备例2-14中得到的化合物(III-18)之外，重复制备例3-14中相同的过程来得到标题化合物(0.28g，45％)。
LC-MS m/z:1362.8[M+]+,1384.8[M+Na]+
制备例3-16：化合物(IV-20)的制备
除了使用在制备例2-16中得到的化合物(III-20)(91mg，0.12mmol)来替代在制备例2-14中得到的化合物(III-18)之外，重复制备例3-14中相同的过程来得到标题化合物(122mg，82％)。
LC-MS m/z:1352[M+]+
制备例3-17：化合物(IV-21)的制备
除了使用在制备例2-17中得到的化合物(III-21)(110mg，0.14mmol)来替代在制备例2-14中得到的化合物(III-18)之外，重复制备例3-14中相同的过程来得到标题化合物(153mg，86％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.70-0.77(m,5H),0.81-0.97(m,17H),1.02-1.07(m,3H),1.16-1.29(m,8H),1.34-1.40(m,1H),1.48-1.51(m,6H),1.54-1.63(m,1H),1.63-1.79(m,2H),1.91-1.97(m,5H),2.03-2.30(m,7H),2.35-2.44(m,1H),2.59-2.61(m,1H),2.61-2.69(m,1H),2.70-2.84(m,4H),3.07-3.12(m,1H),3.12-3.24(m,3H),3.26-3.40(m,3H),3.40-3.48(m,1H),3.62-4.03(m,4H),4.03-4.25(m,3H),4.25-4.68(m,4H),4.88-5.09(s,2H),5.35-5.47(s,2H),5.85-6.03(t,1H),6.85-7.10(s,2H),7.14-7.40(m,2H),7.56-7.66(m,1H),7.74-7.83(d,1H),7.90-8.22(m,3H),10.00(brs,1H)
LC-MS m/z:1366[M+]+
制备例3-18：化合物(IV-22)的制备
将在制备例2-18中得到的化合物(III-22)(1.27g，1.63mmol)在20mL二氯甲烷中的溶液冷却至-50℃至-60℃，并且加入吡啶(1.3mL，16.28mmol)。将对硝基苯基氯甲酸酯(16.28g，3.3mmol)在10mL二氯甲烷中的溶液在20min内缓慢地滴加至反应混合物，随后在-50℃至-60℃下，搅拌3小时。当反应完全时，将20mL二氯甲烷进一步加入至反应混合物中，随后用0.5M亚硫酸氢钾溶液对该反应混合物进行萃取。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到(3S,5S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-(二甲氨基)-3-甲基丁氨基)-N,3-二甲基丁氨基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)-5-((1R,2R)-3-((2-(3-氟代-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-3-基(4-硝基苯基)碳酸酯(0.8g，54％)。
LC-MS m/z:945.7[M+H]+,967.7[M+Na]+
在氩气气流下，将该化合物(0.3g，0.32mmol)与叔丁基-((S)-1-(((S)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸酯(0.3g，0.64mmol)一起溶解在10mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入4-甲氨基吡啶(0.039g，0.32mmol)。将反应混合物在20℃至25℃下搅拌19小时。在反应完全后，在高真空下对反应混合物进行浓缩以使浓缩完全，并且通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到氨基被保护的衍生物(0.1g，25％)。
LC-MS m/z:1285.5[M+H]+
将2mL三氟乙酸加入至该氨基被保护的化合物(0.18g，0.14mmol)在8mL二氯甲烷中的溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌3小时。当反应完全时，通过加入5mL甲苯两次来完全移除三氟乙酸之后，再进行进一步的反应。
将该浓缩物(TFA盐)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基-6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1-吡咯-1-基)己酸酯一起溶解在10mL二甲基甲酰胺中，并且在室温下加入三乙胺(0.1mL，0.7mmol)之后，在室温下搅拌18小时。在反应完全后，在高真空下对反应混合物进行浓缩以使浓缩完全，并且通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到标题化合物(0.14g，71％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.70-0.78(m,6H),0.81-0.92(m,13H),1.16-1.24(23H),1.46-1.51(m,4H),1.84-1.97(m,3H),3.06-3.17(m,12H),3.30-3.38(m,15H),3.84-3.93(m,3H),4.08-4.85(m,8H),4.86-5.04(m,1H),5.10(s,2H),5.40(s,2H),6.03(t,1H),7.00(s,1H),7.15-7.35(m,2H),7.53-7.55(d,1H),7.77-7.98(m,2H),8.10-8.12(d,1H),8.19-8.48(m,1H),9.44-9.49(brs,1H),10.03(s,1H)
LC-MS m/z:1378.7[M+H]+
制备例3-19：化合物(IV-23)的制备
除了使用在制备例2-19中得到的化合物(III-23)(0.8g，0.865mmol)来替代在制备例2-18中得到的化合物(III-22)之外，重复制备例3-18中相同的过程来得到标题化合物(0.22g，69％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.73-0.75(m,4H),0.81-0.92(m,11H),1.16-1.19(23H),1.46-1.50(m,4H),1.54-1.73(m,2H),1.90-1.97(m,2H),2.08-2.25(m,4H),2.28-2.38(m,4H),2.94-2.99(m,4H),3.07-3.17(m,11H),3.33-3.38(m,12H),3.95-4.05(m,1H),4.12-4.27(m,3H),4.51-4.67(m,1H),4.87-4.95(m,1H),5.11(s,2H),5.43(s,2H),6.00(t,1H),7.00(s,1H),7.07-7.15(m,1H),7.22-7.24(d,1H),7.32-7.35(m,H),7.53-7.56(d,1H),7.61-7.62(d,1H),7.81-7.84(d,1H),8.07-8.13(m,1H),8.28-8.50(m,1H),9.26(brs,1H),9.91(s,1H),10.06(s,1H)
LC-MS m/z:1380.4[M+H]+
制备例3-20：化合物(IV-24)的制备
除了使用在制备例2-20中得到的化合物(III-24)(0.44g，0.45mmol)来替代在制备例2-18中得到的化合物(III-22)之外，重复制备例3-18中相同的过程来得到标题化合物(0.16g，64％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.48-0.50(d,1H),0.58-0.59(d,1H),0.68-0.77(m,4H),0.81-0.92(m,14H),1.16-1.23(20H),1.46-1.51(m,4H),1.81-1.88(m,3H),3.06-3.13(m,12H),3.35-3.38(m,15H),3.84-3.92(m,4H),4.08-5.00(m,8H),5.13(s,2H),5.44(s,2H),6.01-6.03(t,1H),7.00(s,1H),7.22-7.28(m,1H),7.33-7.36(m,2H),7.39-7.42(d,1H),7.60-7.65(d,2H),7.82-7.84(d,1H),7.89-7.93(m,2H),8.00-8.03(d,1H),8.11-8.13(d,1H),8.27-8.53(m,1H),8.64(s,1H),9.38(brs,1H),10.06(s,1H)
LC-MS m/z:1410.5[M+H]+
制备例3-21：化合物(IV-25)的制备
除了使用在制备例2-21中得到的化合物(III-25)(0.37g，0.47mmol)来替代在制备例2-18中得到的化合物(III-22)之外，重复制备例3-18中相同的过程来得到标题化合物(0.47g，72％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.57-0.78(m,8H),0.78-0.98(m,15H),1.04-1.28(m,6H),1.28-1.39(m,1H),1.39-1.54(m,5H),1.54-1.63(m,1H),1.63-1.84(m,3H),1.84-2.03(m,3H),2.03-2.25(m,7H),2.25-2.40(m,2H),2.53-2.69(m,3H),2.69-2.83(m,1H),2.85-3.06(m,5H),3.09-3.21(m,3H),3.26-3.42(m,3H),3.44-3.52(m,1H),3.74-3.88(m,6H),3.88-4.05(m,3H),4.07-4.16(m,1H),4.16-4.23(m,1H),4.23-4.34(m,1H),4.34-4.48(m,2H),4.48-4.57(m,1H),4.58-4.73(m,2H),4.97(s,2H),5.42(s,2H),5.93-6.04(t,1H),6.98-7.04(s,1H),7.04-7.12(d,1H),7.25-7.36(m,1H),7.42-7.48(s,1H),7.48-7.57(m,1H),7.57-7.64(d,1H),7.64-7.72(m,1H),7.77-7.86(m,1H),8.01-8.16(m,1H),10.01(brs,1H),10.56(brs,1H)
LC-MS m/z:1389.6[M+]+,1412.6[M+Na]+
制备例3-22：化合物(IV-26)的制备
除了使用在制备例2-22中得到的化合物(III-26)(0.28g，0.36mmol)来替代在制备例2-18中得到的化合物(III-22)之外，重复制备例3-18中相同的过程来得到标题化合物(0.24g，48％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.66-0.78(m,5H),0.78-1.06(m,19H),1.07-1.29(m,6H),1.29-1.38(m,1H),1.38-1.53(m,5H),1.53-1.63(m,1H),1.63-1.85(m,2H),1.85-2.02(m,3H),2.02-2.14(m,3H),2.14-2.27(m,6H),2.27-2.41(m,2H),2.56-2.60(m,3H),2.61-2.83(m,1H),2.86-3.08(m,5H),2.08-3.20(m,3H),3.20-3.27(m,1H),3.27-3.40(m,3H),3.45-3.63(m,1H),3.64-3.88(m,1H),3.88-4.06(m,2H),4.06-4.26(m,2H),4.28-4.46(m,1H),4.46-4.74(m,2H),4.74-4.91(m,1H),4.97(s,2H),5.43(s,2H),5.88-6.10(t,1H),7.01(s,1H),7.12-7.38(m,2H),7.38-7.72(m,4H),7.72-7.92(m,2H),7.92-8.22(m,3H),8.25-8.63(m,2H),8.73(s,1H),10.06(brs,1H),10.59(brs,1H)
LC-MS m/z:1379.6[M+]+,1402.5[M+Na]+
制备例3-23：化合物(IV-27)的制备
除了使用在制备例2-23中得到的化合物(III-27)(0.24g，0.32mmol)来替代在制备例2-18中得到的化合物(III-22)之外，重复制备例3-18中相同的过程来得到标题化合物(0.28g，64％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.59-0.78(m,6H),0.78-0.97(m,15H),0.97-1.06(m,2H),1.06-1.28(m,6H),1.28-1.39(m,1H),1.39-1.54(m,5H),1.54-1.64(m,1H),1.64-1.84(m,3H),1.84-2.02(m,3H),2.05-2.29(m,8H),2.30-2.42(m,2H),2.55-2.60(m,3H),2.60-2.83(m,1H),2.86-3.06(m,5H),3.06-3.21(m,6H),3.21-3.32(m,3H),3.36-3.44(m,1H),3.44-3.52(m,1H),3.65-3.74(m,1H),3.74-3.87(m,2H),3.89-4.05(m,2H),4.15-4.25(m,1H),4.31-4.73(m,4H),4.96(s,2H),5.43(s,2H),5.92-6.06(t,1H),6.71-6.83(m,1H),6.83-6.94(m,1H),6.97-7.04(m,1H),7.16-7.35(m,2H),7.38-7.67(m,3H),7.75-7.88(d,1H),8.00-8.17(m,2H),10.01(brs,1H),10.55(brs,1H)
LC-MS m/z:1361.6[M+]+,1384.5[M+Na]+
制备例3-24：化合物(IV-28)的制备
在氩气气流下，将在制备例1-2中得到的化合物(II-3)的TFA盐(0.88mg，0.11mmol)溶解在5mL无水二甲基甲酰胺中，并加入二异丙基乙胺(0.18mL，1.03mmol)。在氩气气氛中，将在制备例2-24中制备的化合物(III-28)(75mg，0.08mmol)在5mL无水二甲基甲酰胺中的溶液滴加至该溶液中，随后在20℃至25℃下搅拌17小时。在反应完全后，进行真空浓缩，并且通过硅胶柱色谱法对剩余物进行纯化以得到标题化合物(135mg，100％)。
LC-MS m/z:1462.9[M+H]+,1485.9[M+Na]+
制备例3-25：化合物(IV-29)的制备
除了使用在制备例1-3中得到的化合物(II-4)的TFA盐(0.17g，0.212mmol)来替代在制备例1-2中得到的化合物(II-3)的TFA盐之外，重复制备例3-24中相同的过程来得到标题化合物(0.14g，44％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.69-0.78(m,6H),0.81-0.90(m,14H),1.11-1.64(m,3H),1.18-1.26(m,10H),1.38-1.51(m,6H),1.58-1.62(m,1H),1.63-1.83(m,3H),1.91-1.99(m,3H),2.11-2.26(m,7H),2.35-2.42(m,2H),2.87(s,6H),2.92-3.05(m,3H),3.13-3.18(m,4H),3.32-3.38(m,17H),3.62(brs,1H),3.92-3.99(m,4H),4.07-4.09(m,1H),4.15-4.84(m,9H),4.98(s,2H),5.4(s,2H),5.96-5.99(t,1H),6.99(s,1H),7.22-7.3(m,2H),7.53-7.65(m,2H),7.77-7.80(m,2H),7.84-7.89(t,1H),8.05-8.07(d,1H),8.37-8.43(m,1H),9.97(s,1H)
LC-MS m/z:1492.8[M+H]+,1514.7[M+Na]+
制备例3-26：化合物(IV-30)的制备
除了使用在制备例1-4中得到的化合物(II-5)的TFA盐(0.16g，0.212mmol)和在制备例2-25中得到的化合物(III-29)(0.2g,0.212mmol)来分别替代在制备例1-2中得到的化合物(II-3)的TFA盐和在制备例2-24中得到的化合物(III-28)之外，重复制备例3-24中相同的过程来得到标题化合物(0.13g，40％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.69-0.76(m,6H),0.81-0.92(m,14H),1.10-1.20(m,4H),1.25-1.26(m,8H),1.44-1.51(m,5H),1.55-1.65(m,1H),1.66-1.85(3H),1.86-2.05(m,3H),2.06-2.27(m,6H),2.28-2.46m,2H),2.84(s,1H),2.87-2.96(m,1H),2.99-3.04(m,5H),3.14-3.18(m,4H),3.32-3.47(m,11H),3.62(brs,1H),3.92-3.93(d,3H),4.00-4.91(m,8H),4.94(s,2H),5.41(s,2H),5.97-6.00(t,1H),7.00(s,1H),7.24-7.32(m,3H),7.58-7.60(d,2H),7.77-7.80(m,2H),7.85-7.89(t,1H),8.05-8.07(d,1H),8.19(t,1H),8.44(brs,1H),9.97(s,1H)
LC-MS m/z:1464.8[M+H]+,1487.9[M+Na]+
制备例3-27：化合物(IV-31)的制备
除了使用在制备例1-3中得到的化合物(II-4)的TFA盐(0.26g，0.324mmol)和在制备例2-26中得到的化合物(III-30)(0.2g，0.216mmol)来分别替代在制备例1-2中得到的化合物(II-3)的TFA盐和在制备例2-24中得到的化合物(III-28)之外，重复制备例3-24中相同的过程来得到标题化合物(0.2g，64％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.71-0.75(m,6H),0.80-0.91(m,15H),1.18-1.19(m,3H),1.22-1.27(m,9H),1.43-1.49(m,6H),1.90-1.98(m,3H),2.09-2.23(m,3H),2.25-2.40(m,7H),2.83-2.86(m,4H),2.96-3.01(m,4H),3.15-3.19(m,3H),3.26(s,3H),3.35-3.38(m,16H),3.85-3.96(m,3H),4.11-4.88(m,8H),4.97(s,2H),5.42(s,2H),5.97-5.99(t,1H),6.99-7.01(m,1H),7.06-7.16(m,2H),7.28(brs,2H),7.60-7.69(m,2H),7.81-7.83(d,1H),8.09-8.12(d,1H),8.29(brs,1H),10.09(s,1H)
LC-MS m/z:1472.9[M+H]+,1494.9[M+Na]+
制备例3-28：化合物(IV-32)的制备
除了使用在制备例1-4中得到的化合物(II-5)的TFA盐(0.24g，0.324mmol)和在制备例2-26中得到的化合物(III-30)(0.2g，0.216mmol)来分别替代在制备例1-2中得到的化合物(II-3)的TFA盐和在制备例2-24中得到的化合物(III-28)之外，重复制备例3-24中相同的过程来得到标题化合物(0.2g，67％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.71-0.75(m,7H),0.81-0.92(m,16H),1.03-1.04(m,2H),1.11-1.12(m,1H),1.18-1.27(m,7H),1.46-1.49(m,5H),1.90-1.98(m,3H),2.09-2.23(m,6H),2.28-2.38(m,7H),2.96-3.03(m,9H),3.15-3.17(m,4H),3.28(s,3H),3.35-3.38(m,14H),3.62-3.65(m,2H),3.85-4.00(m,3H),4.17-4.88(m,8H),4.94(s,2H),5.43(s,2H),5.88-6.00(t,1H),7.00(s,1H),7.06-7.16(m,2H),7.27-7.29(m,3H),7.58-7.69(m,2H),7.82-7.84(d,1H),8.09-8.12(d,1H),8.29(brs,1H),10.00(s,1H)
LC-MS m/z:1444.9[M+H]+,1466.9[M+Na]+
制备例3-29：化合物(IV-33)的制备
除了使用在制备例1-4中得到的化合物(II-5)的TFA盐(0.23g，0.307mmol)和在制备例2-27中得到的化合物(III-31)(0.2g，0.205mmol)来分别替代在制备例1-2中得到的化合物(II-3)的TFA盐和在制备例2-24中得到的化合物(III-28)之外，重复制备例3-24中相同的过程来得到标题化合物(0.16g，51％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.71-0.75(m,7H),0.81-0.92(m,16H),1.03-1.04(m,2H),1.11-1.12(m,1H),1.18-1.27(m,7H),1.46-1.49(m,5H),1.90-1.98(m,3H),2.09-2.23(m,6H),2.28-2.38(m,7H),2.96-3.03(m,9H),3.15-3.17(m,4H),3.28(s,3H),3.35-3.38(m,14H),3.62-3.65(m,2H),3.85-4.00(m,3H),4.17-4.88(m,8H),4.94(s,2H),5.43(s,2H),5.88-6.00(t,1H),7.00(s,1H),7.06-7.16(m,2H),7.27-7.29(m,3H),7.58-7.69(m,2H),7.82-7.84(d,1H),8.09-8.12(d,1H),8.29(brs,1H),10.00(s,1H)
LC-MS m/z:1497.6[M+H]+,1519.6[M+Na]+
制备例3-30：化合物(IV-34)的制备
除了使用在制备例2-28中得到的化合物(III-32)(1.2g，1.294mmol)来替代在制备例2-24中得到的化合物(III-28)并与在制备例1-2中得到的化合物(II-3)的TFA盐(1g，1.294mmol)一起使用之外，重复制备例3-24中相同的过程来得到标题化合物(1.3g，72％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.48-0.49(m,1H),0.58-0.59(m,2H),0.64-0.65(m,2H),0.70-0.76(m,5H),0.81-0.92(m,16H),1.11-1.13(m,2H),1.16-1.20(m,3H),1.22-1.28(m,9H),1.44-1.49(m,5H),1.90-1.98(m,3H),2.09-2.23(m,7H),2.96-3.04(m,9H),3.13-3.18(m,4H),3.33-3.38(m,14H),3.60-3.64(m,1H),3.90-3.94(m,4H),3.99-4.88(m,8H),4.94(s,2H),5.42(s,2H),5.86-5.99(t,1H),7.22-7.29(m,4H),7.38-7.42(m,1H),7.58-7.60(d,2H),7.80-7.82(d,1H),7.89-7.96(m,2H),8.00-8.10(m,2H),8.29(brs,1H),8.70(s,1H),10.00(s,1H)
LC-MS m/z:1452.8[M+H]+,1474.7[M+Na]+
制备例3-31：化合物(IV-35)的制备
除了使用在制备例1-5中得到的化合物(II-6)的TFA盐(0.18g，0.233mmol)来替代在制备例1-2中得到的化合物(II-3)的TFA盐并与在制备例2-25中得到的化合物(III-29)(0.2g，0.212mmol)一起使用之外，重复制备例3-24中相同的过程来得到标题化合物(0.16g，51％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.68-0.76(m,6H),0.81-0.90(m,14H),1.08-1.20(m,4H),1.23-1.27(m,9H),1.44-1.49(m,6H),1.58-1.62(m,1H),1.63-1.83(m,3H),1.91-1.99(m,3H),2.13-2.20(m,6H),2.35-2.42(m,2H),2.85-2.87(m,4H),2.99-3.01(m,4H),3.14-3.17(m,4H),3.28-3.38(m,19H),3.62(brs,1H),3.92-3.94(m,3H),4.07-4.09(m,1H),4.15-4.84(m,8H),4.98(s,2H),5.43(s,2H),5.98-6.00(t,1H),7.01(s,1H),7.22-7.36(m,3H),7.54-7.64(m,2H),7.77-7.97(m,2H),8.08-8.11(d,1H),8.22-8.45(m,2H),10.01(s,1H)
LC-MS m/z:1478.5[M+H]+,1500.5[M+Na]+
制备例4：化学式VI-1、化学式VI-2、化学式VI-3和化学式VI-4的化合物的制备
制备例4-1：化合物(VI-5)的制备
将4-巯基丁酸(V-1)(126mg，1.05mmol)和0.5mLDMSO加入至在制备例3-1中制备的化合物(IV-5)(274mg，0.21mmol)在5mL乙腈中的溶液中，随后在室温下搅拌4小时。在真空下对反应混合物进行浓缩以得到标题化合物(290mg，98％)。
MALDI-TOF MS m/z:1465.3[M+Na]+
制备例4-2：化合物(VI-6)的制备
将2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸(V-2)(44mg，0.3mmol)和0.7mLDMF加入至在制备例3-1中得到的化合物(IV-5)(70mg，0.053mmol)在2.5mL乙腈中的溶液中，随后在室温下搅拌4小时。在真空下对反应混合物进行浓缩，并且通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到固体形式的标题化合物(60mg，77％)。
MALDI-TOF MS m/z:1492.0[M+Na]+
制备例4-3：化合物(VI-7)的制备
除了使用6-巯基己酸(V-3)来替代2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸(V-2)之外，重复制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(54mg，69％)。
MALDI-TOF MS m/z:1493.2[M+Na]+
制备例4-4：化合物(VI-8)的制备
除了使用8-巯基辛酸(V-4)来替代2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸(V-2)之外，重复制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(66mg，84％)。
MALDI-TOF MS m/z:1522.0[M+Na]+
制备例4-5：化合物(VI-9)的制备
除了使用11-巯基十一酸(V-5)来替代2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸(V-2)之外，重复在制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(71mg，86％)。
MALDI-TOF MS m/z:1563.3[M+Na]+
制备例4-6：制备化合物(VI-10)
除了使用在制备例3-2中得到的化合物(IV-6)(70mg，0.054mmol)来替代在制备例3-1中得到的化合物(IV-5)之外，重复制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(53mg，68％)。
MALDI-TOF MS m/z:1469.5[M+Na]+
制备例4-7：化合物(VI-11)的制备
除了使用在制备例3-2中得到的化合物(IV-6)(70mg，0.054mmol)和6-巯基己酸(V-3)来分别替代在制备例3-1中得到的化合物(IV-5)和2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸(V-2)之外，重复制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(46mg，59％)。
MALDI-TOF MS m/z:1471.6[M+Na]+
制备例4-8：化合物(VI-12)的制备
除了使用在制备例3-3中得到的化合物(IV-7)(88mg，0.064mmol)来替代在制备例3-1中得到的化合物(IV-5)之外，重复制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(48mg，49％)。
MALDI-TOF MS m/z:1548.1[M+Na]+
制备例4-9：化合物(VI-13)的制备
除了使用在制备例3-4中得到的化合物(IV-8)(71mg，0.052mmol)来替代在制备例3-1中得到的化合物(IV-5)之外，重复制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(46mg，59％)。
MALDI-TOF MS m/z:1529.4[M+Na]+
制备例4-10：化合物(VI-14)的制备
除了使用在制备例3-5中得到的化合物(IV-9)(35mg，0.026mmol)来替代在制备例3-1中得到的化合物(IV-5)之外，重复制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(29mg，74％)。
MALDI-TOF MS m/z:1528.2[M+Na]+
制备例4-11：化合物(VI-15)的制备
除了使用在制备例3-6中得到的化合物(IV-10)(78mg，0.058mmol)来替代在制备例3-1中得到的化合物(IV-5)之外，重复制备例4-2中相同的过程来得到标题化合物(77mg，90％)。
MALDI-TOF MS m/z:1508.1[M+Na]+,1524.8[M+K]+
制备例4-12：化合物(VI-16)的制备
将2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸(19mg，0.126mmol)加入至在制备例3-7中得到的化合物(IV-11)(58mg，0.042mmol)在5mL甲醇和1.5mL无水二甲基甲酰胺的溶液中，随后在室温下搅拌4小时。在真空下对反应混合物进行浓缩，并且通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到固体形式的标题化合物(60mg，93％)。
LC-MS m/z:1523.8[M+]+,1545.8[M+Na]+
制备例4-13：化合物(VI-17)的制备
除了使用在制备例3-8中得到的化合物(IV-12)(41mg，0.031mmol)来替代在制备例3-7中得到的化合物(IV-11)之外，重复制备例4-12中相同的过程来得到标题化合物(39mg，85％)。
MALDI-TOF MS m/z:1496.8[M+Na]+
制备例4-14：化合物(VI-18)的制备
除了使用在制备例3-9中得到的化合物(IV-13)(347mg，0.257mmol)和11-巯基十一酸(112mg，0.514mmol)来分别替代在制备例3-7中得到的化合物(IV-11)和2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸之外，重复制备例4-12中相同的过程来得到标题化合物(266mg，66％)。
LC-MS m/z:1567[M+1]+
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.76-0.90(m,10H),0.90-1.14(m,20H),1.17(m,3H),1.26(m,4H),1.29(brs,20H),1.37(m,4H),1.50-1.64(m,14H),1.68-1.78(m,3H),1.88(m,2H),1.94(s,3H),2.21-2.26(m,6H),2.99-2.48(m,10H,N-CH3*2),2.70(m,1H),2.84(m,1H),3.07-3.19(m,6H),3.26-3.45(m,6H),3.45(m,4H),3.82(m,1H),4.15(m,1H),4.47(m,2H),4.64(m,1H),4.81(m,1H),4.98(m,3H),6.96(t,1H),7.08(t,1H),7.25(d,2H),7.28-7.40(m,2H),7.53(d,2H)
制备例4-15：化合物(VI-19)的制备
除了使用在制备例3-10中得到的化合物(IV-14)(453mg，0.332mmol)来替代在制备例3-7中得到的化合物(IV-11)之外，重复制备例4-12中相同的过程来得到标题化合物(60mg，93％)。
LC-MS m/z:1510[M+1]+,
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.46-0.68(m,5H),0.82-1.10(m,27H),1.17(d,2H),1.22(d,1H),1.30(m,2H),1.40(m,1H),1.50-1.63(m,6H),1.68-1.80(m,2H),1.82-1.90(m,2H),1.94(s,3H),2.00-2.15(m,4H),2.20-2.35(m,5H),2.42(s,6H),2.38-2.50(m,2H),2.81-2.89(m,1H),2.91-2.98(m,2H),3.08-3.40(m,6H),3.26-3.33(m,10H,OCH3),3.43(d,2H),3.45-3.48(m,5H,OCH3),3.52-3.64(m,1H),3.74-3.86(m,1H),3.906-4.10(m,3H),4.15(d,1H),4.24(m,1H),4.44-4.54(m,2H),4.66(d,1H),4.74-5.10(m,5H),7.09-7.12(m,2H),7.23-7.27(m,2H),7.33-7.37(m,2H),7.52-7.59(m,2H)
制备例4-16：化合物(VI-20)的制备
除了使用在制备例3-11中得到的化合物(IV-15)(82mg，0.063mmol)来替代在制备例3-7中得到的化合物(IV-11)之外，重复制备例4-12中相同的过程来得到标题化合物(38mg，42％)。
LC-MS m/z:1506[M+1]+
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.42-0.67(m,4H),0.81-1.08(m,27H),1.13-1.20(m,4H),1.29(m,2H),1.40(m,1H),1.50-1.68(m,6H),1.75(m,2H),1.82-1.90(m,2H),1.94(s,3H),2.01-2.18(m,4H),2.23-2.32(m,3H),2.42(s,6H),2.35-2.50(m,1H),2.61(m,1H),2.79-3.00(m,3H),3.10-3.20(m,5H),3.28-3.40(m,19H,2*OCH3),3.43-3.48(m,3H),3.60(m,1H),3.74(d,3H),3.85-4.00(m,3H),4.14(d,1H),4.21-4.30(m,1H),4.48(m,2H),4.64-5.10(m,5H),6.86-7.60(m,8H)
制备例4-17：化合物(VI-21)的制备
除了使用在制备例3-12中得到的化合物(IV-16)(268mg，0.195mmol)来替代在制备例3-7中得到的化合物(IV-11)之外，重复制备例4-12中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(132mg，46％)。
LC-MS m/z:1521[M]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.48-0.50(m,6H),0.71-1.08(m,27H),1.16-1.22(m,4H),1.42-1.54(m,9H),1.60(m,1H),1.70(m,1H),1.94(s,3H),2.10-2.32(m,8H),2.32-2.46(m,6H),2.50(s,6H),2.78-3.10(m,8H),3.16(m,2H),3.21(m,1H),3.28-3.40(m,6H),3.62(s,1H),3.70(s,2H),3.86-4.00(m,5H),4.19(t,2H),4.38(m,2H),4.52(t,1H),4.60(m,1H),4.76(m,1H),4.88(m,1H),5.00(m,2H),5.08(m,1H),5.42(brs,2H),5.98(m,1H),6.81(d,1H),7.17(d,1H),7.28(dd,1H),7.50-7.70(m,3H),7.82(d,1H),8.10(d,1H),10.0(d,1H)
制备例4-18：化合物(VI-22)的制备
除了使用在制备例3-13中得到的化合物(IV-17)(440mg，0.33mmol)来替代在制备例3-7中得到的化合物(IV-11)之外，重复制备例4-12中相同的过程来得到标题化合物(296mg，60％)。
LC-MS m/z:1492[M+1]+
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ0.47-0.62(m,5H),0.81-1.02(m,26H),1.13-1.20(m,3H),1.25-1.32(m,2H),1.40(m,1H),1.50-1.68(m,6H),1.72-1.78(m,2H),1.82-1.98(m,3H),1.96(s,3H),2.00-2.09(m,4H),2.25-2.35(m,5H),2.38-2.48(m,6H),2.850-2.90(m,3H),3.05-3.20(m,6H),3.26-3.35(m,9H,OCH3),3.40-3.48(m,6H,OCH3),3.50-3.60(m,2H),3.65-3.80(m,3H),3.90-4.18(m,5H),4.48(m,1H),4.64(m,1H),4.70-5.10(m,8H),7.09-7.58(m,8H)
制备例4-19：化合物(VI-23)的制备
将2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸(12mg，0.083mmol)加入至在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)(37mg，0.027mmol)在5mL甲醇和1.5mL无水二甲基甲酰胺的溶液中，随后在室温下搅拌4小时。在真空下对反应混合物进行浓缩，并且通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到固体形式的标题化合物(33mg，81％)。
LC-MS m/z:1499[M+]+,1451[M+Na]+
制备例4-20：化合物(VI-24)的制备
除了使用在制备例3-15中得到的化合物(IV-19)(69mg，0.051mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(55mg，72％)。
LC-MS m/z:1508.9[M+]+
制备例4-21：化合物(VI-25)的制备
除了使用在制备例3-16中得到的化合物(IV-20)(94mg，0.07mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到标题化合物(99mg，94％)。
LC-MS m/z:1498[M+]+
制备例4-22：化合物(VI-26)的制备
除了使用在制备例3-17中得到的化合物(IV-21)(144mg，0.105mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(116mg，73％)。
LC-MS m/z:1512[M+]+
制备例4-23：化合物(VI-27)的制备
除了使用在制备例3-18中得到的化合物(IV-22)(0.14g，0.099mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(0.11g，75％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.50-0.52(m,4H),0.65-0.76(m,6H),0.82-0.92(m,13H),1.08-1.24(18H),1.43-1.49(m,6H),1.54-1.82(m,3H),1.84-1.98(m,3H),2.10-2.19(m,6H),2.79-3.04(m,12H),3.15-3.24(m,3H),3.30-3.44(m,15H),3.87-3.89(m,3H),3.97-4.00(m,1H),4.08-4.86(m,8H),4.86-5.04(m,1H),5.10(s,2H),5.46(s,2H),6.03(t,1H),7.22-7.36(m,2H),7.62-7.65(d,1H),7.77-7.80(d,1H),7.87-7.89(m,2H),8.17-8.23(m,1H),8.48(brs,1H),10.11(s,1H)
LC-MS m/z:1524.4[M+]+
制备例4-24：化合物(VI-28)的制备
除了使用在制备例3-19中得到的化合物(IV-23)(0.2g，0.15mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(0.06g，27％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.43-0.52(m,6H),0.69-0.76(m,7H),0.82-0.92(m,15H),1.02-1.06(m,7H),1.11-1.13(m,2H),1.18-1.23(m,4H),1.43-1.47(m,6H),1.54-1.65(m,1H),1.66-1.84(m,2H),1.89-1.98(m,3H),2.09-2.20(m,6H),2.91-3.03(m,10H),3.15-3.22(m,5H),3.33-3.46(m,15H),3.87-4.02(m,3H),4.15-4.95(m,8H),5.08(s,2H),5.44(s,2H),6.03(t,1H),7.07-7.16(m,2H),7.33-7.35(m,2H),7.62-7.70(d,2H),7.85-7.91(m,1H),7.98-8.07(m,1H),8.20(brs,1H),8.28-8.49(m,1H),10.10(s,1H)
LC-MS m/z:1504.4[M+]+
制备例4-25：化合物(VI-29)的制备
除了使用在制备例3-20中得到的化合物(IV-24)(0.1g，0.1mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(0.08g，53％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.43-0.47(m,5H),0.48-0.50(d,1H),0.58-0.59(d,1H)0.69-0.76(m,3H),0.82-0.92(m,16H),1.05-1.09(m,6H),1.11-1.13(m,2H),1.16-1.23(m,4H),1.43-1.47(m,6H),1.54-1.65(m,1H),1.66-1.84(m,2H),1.89-1.98(m,3H),2.10-2.20(m,8H),2.31-2.43(m,2H),2.58-2.68(m,1H),2.70-2.82(m,3H),2.87-2.88(m,2H),2.95-3.00(m,4H),3.13-3.22(m,4H),3.31-3.46(m,16H),3.90-3.92(m,3H),3.97-4.00(m,1H),4.06-5.00(m,8H),5.10(s,2H),5.47(s,2H),6.10(t,1H),7.22-7.28(m,1H),7.33-7.43(m,2H),7.55-7.58(d,1H),7.88-7.99(m,2H),8.01-8.03(d,1H),8.22-8.54(m,2H),8.64(s,1H),10.15(s,1H)
LC-MS m/z:1556.4[M+]+
制备例4-26：化合物(VI-30)的制备
除了使用在制备例3-21中得到的化合物(IV-25)(0.46g，0.33mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(0.49g，96％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.30-0.58(m,6H),0.59-0.78(m,8H),0.78-1.00(m,16H),1.05-1.32(m,6H),1.32-1.54(m,6H),1.54-1.64(m,1H),1.64-1.84(m,3H),1.84-2.05(m,3H),2.06-2.27(m,10H),2.27-2.43(m,4H),2.55-2.71(m,1H),2.71-2.85(m,2H),2.85-3.07(m,7H),3.09-3.18(m,3H),3.18-3.30(m,3H),3.74-3.88(m,6H),3.88-4.05(m,4H),4.06-4.22(m,2H),4.22-4.43(m,2H),4.43-4.53(m,1H),4.59-4.75(m,2H),4.96(s,2H),5.43(s,2H),5.78(s,1H),5.96-6.10(d,1H),7.01-7.13(d,1H),7.21-7.37(m,2H),7.41-7.48(s,1H),7.49-7.57(m,1H),7.57-7.75(m,3H),8.00-8.11(m,1H),10.00-10.20(brs,1H)
LC-MS m/z:1535.5[M+]+
制备例4-27：化合物(VI-31)的制备
除了使用在制备例3-22中得到的化合物(IV-26)(0.24g，0.17mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(0.19g，73％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.37-0.58(m,9H),0.60-0.78(m,6H),0.78-0.97(m,16H),1.06-1.37(m,7H),1.37-1.53(m,6H),1.54-1.85(m,5H),1.86-2.03(m,3H),2.05-2.26(m,10H),2.26-2.43(m,3H),2.58-2.67(m,1H),2.68-2.84(m,2H),2.85-3.09(m,8H),3.10-3.24(m,6H),3.24-3.33(m,3H),3.62-3.78(m,1H),3.78-4.05(m,3H),4.05-4.24(m,2H),4.27-4.40(m,1H),4.46-4.61(m,1H),4.61-4.72(m,1H),4.72-4.89(m,1H),5.01(s,2H),5.44(s,2H),5.96-6.14(t,1H),7.21-7.37(m,2H),7.45-7.56(m,1H),7.56-7.74(m,4H),7.93-8.08(m,3H),8.08-8.19(m,1H),8.28-8.39(m,1H),8.49-8.61(m,1H),8.73(s,1H),10.14(brs,1H)
LC-MS m/z:1535.5[M+]+
制备例4-28：化合物(VI-32)的制备
除了使用在制备例3-23中得到的化合物(IV-27)(0.21g，0.15mmol)来替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)之外，重复制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(0.21g，91％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.34-0.56(m,5H),0.64-0.78(m,6H),0.78-0.96(m,15H),0.96-1.07(m,2H),1.07-1.27(m,5H),1.29-1.39(m,1H),1.39-1.54(m,5H),1.54-1.65(m,1H),1.65-1.84(m,3H),1.84-2.03(m,3H),2.05-2.31(m,10H),2.31-2.44(m,2H),2.44-2.48(m,1H),2.58-2.61(m,2H),2.75-2.85(m,1H),2.86-3.08(m,7H),3.09-3.15(m,1H),3.24-3.55(m,14H),3.64-3.76(m,2H),3.77-3.86(m,2H),3.87-4.04(m,3H),4.04-4.14(m,2H),4.14-4.25(m,2H),4.33-4.40(m,1H),4.40-4.61(m,2H),4.61-4.76(m,1H),4.97(s,2H),5.44(s,2H),5.98-6.11(t,1H),6.82-6.94(m,1H),7.16-7.25(m,1H),7.25-7.37(m,2H),7.40-7.49(m,1H),7.49-7.68(m,3H),7.81-7.99(m,1H),7.99-8.12(m,1H),8.24-8.45(m,1H),10.12(brs,1H)
LC-MS m/z:1535.5[M+]+
制备例4-29：化合物(VI-33)的制备
除了使用在制备例3-17中得到的化合物(IV-21)(0.28g，0.21mmol)和6-巯基己酸(0.07g，0.41mmol)来分别替代在制备例3-14中得到的化合物(IV-18)和2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸之外，重复在制备例4-19中相同的过程来得到固体形式的标题化合物(0.26g，81％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.64-0.79(m,5H),0.79-0.98(m,17H),0.98-1.14(m,4H),1.14-1.28(m,5H),1.28-1.41(m,6H),1.41-1.65(m,14H),1.65-1.79(m,2H),1.83-2.05(m,7H),2.05-2.32(m,13H),2.32-2.56(m,1H),2.57-2.88(m,10H),2.89-3.06(m,6H),3.06-3.24(m,3H),3.69-3.86(m,3H),3.86-4.09(m,3H),4.09-4.28(m,1H),4.29-4.48(m,2H),4.48-4.78(m,2H),5.04(s,2H),5.42(s,2H),6.03(brs,1H),7.01(brs,2H),7.14-7.45(m,2H),7.45-7.70(m,1H),7.83-8.06(m,2H),10.08(brs,1H)
LC-MS m/z:1514.4[M+H]+,1536.4[M+Na]+
制备例4-30：化合物(VI-34)的制备
将2-(1-(巯基甲基)环丙基)乙酸(41mg，0.28mmol)加入至在制备例3-24中得到的化合物(IV-28)(137mg，0.093mmol)在5mL甲醇和3mL无水二甲基甲酰胺的溶液中，随后在室温下搅拌15小时。在真空下对反应混合物进行浓缩，并且通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到固体形式的标题化合物(25mg，17％)。
LC-MS m/z:1609.3[M+H]+
制备例4-31：化合物(VI-35)的制备
除了使用在制备例3-25中得到的化合物(IV-29)(0.19g，0.128mmol)来替代在制备例3-24中得到的化合物(IV-28)之外，重复制备例4-30中相同的过程来得到标题化合物(0.085g，41％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.42-0.55(m,6H),0.66-0.75(m,8H),0.81-0.87(m,14H),1.10-1.23(m,6H),1.37-1.49(m,6H),1.54-1.79(m,3H),1.91-1.98(m,7H),2.27(s,1H),2.30-2.37(m,1H),2.38-2.42(m,1H),2.44-2.45(m,1H),2.56-2.64(m,2H),2.75-2.86(m,6H),2.93-2.99(m,4H),3.12-3.24(m,4H),3.31-3.35(m,17H),3.91-4.06(m,6H),4.14-4.86(m,8H),4.98(s,2H),5.43(s,2H),5.97-5.98(t,1H),7.29-7.30(m,2H),7.58-7.60(d,2H),7.77-7.90(m,2H),7.93-8.10(m,2H),8.11-8.13(d,2H),8.46(brs,1H),10.01(s,1H),12.12(brs,1H)
LC-MS m/z:1639.0[M+H]+,1661.0[M+Na]+
制备例4-32：化合物(VI-36)的制备
除了使用在制备例3-26中得到的化合物(IV-30)(0.18g，0.119mmol)来替代在制备例3-24中得到的化合物(IV-28)之外，重复制备例4-30中相同的过程来得到标题化合物(0.12g，61％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.44-0.52(m,5H),0.66-0.75(m,7H),0.82-0.92(m,12H),1.09-1.23(m,6H),1.43-1.47(m,5H),1.54-1.83(m,3H),1.94-1.97(m,4H),2.10-2.22(m,7H),2.25-2.26(d,1H),2.38-2.46(m,4H),2.56-2.67(m,2H),2.78-2.81(m,2H),2.86-2.91(m,2H),2.96-3.04(m,5H),3.10-3.24(m,4H),3.32-3.35(m,17H),3.91-3.93(m,3H),3.97-4.00(m,2H),4.13-4.65(m,8H),4.80-4.86(m,2H),4.94(s,2H),5.44(s,2H),6.00(t,1H),7.22-7.32(m,4H),7.54-7.56(d,2H),7.78-7.81(d,1H),7.85-8.00(m,2H),8.09-8.23(m,2H),8.47(brs,1H),10.04(s,1H),12.12(brs,1H)
LC-MS m/z:1610.8[M+H]+,1632.8[M+Na]+
制备例4-33：化合物(VI-37)的制备
除了使用在制备例3-27中得到的化合物(IV-31)(0.2g，0.138mmol)来替代在制备例3-24中得到的化合物(IV-28)之外，重复制备例4-30中相同的过程来得到标题化合物(0.17g，77％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.00-0.57(m,6H),0.69-0.76(m,8H),0.82-0.87(m,14H),0.95-1.08(m,2H),1.09-1.18(m,2H),1.20-1.24(m,2H),1.43-1.49(m,6H),1.54-1.64(m,1H),1.81-2.05(m,4H),2.20-2.23(m,6H),2.27-2.38(m,9H),2.56-2.69(m,1H),2.70-2.81(m,2H),2.82-2.86(m,7H),2.96-3.00(m,5H),3.15-3.20(m,5H),3.27(s,3H),3.32-3.34(m,15H),3.89-4.00(m,3H),4.14-4.25(m,2H),4.26-4.82(m,8H),4.98(s,2H),5.43(s,2H),6.00-6.03(t,1H),7.06-7.16(m,2H),7.28-7.30(m,2H),7.59-7.69(m,3H),7.84-7.86(d,1H),7.97-8.05(m,1H),8.14-8.15(m,1H),8.23-8.28(m,1H),8.49(brs,1H),10.02(s,1H)
LC-MS m/z:1619.6[M+H]+,1641.6[M+Na]+
制备例4-34：化合物(VI-38)的制备
除了使用在制备例3-28中得到的化合物(IV-32)(0.2g，0.137mmol)来替代在制备例3-24中得到的化合物(IV-28)之外，重复制备例4-30中相同的过程来得到标题化合物(0.17g，76％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.50-0.52(m,4H),0.69-0.76(m,8H),0.82-0.92(m,14H),1.03-1.05(m,2H),1.11-1.12(m,1H),1.18-1.24(m,3H),1.42-1.49(m,6H),1.52-1.64(m,1H),1.66-1.83(m,3H),1.86-2.02(m,4H),2.10-2.20(m,6H),2.28-2.38(m,8H),2.45-2.49(m,1H),2.56-2.68(m,1H),2.78-2.86(m,3H),2.95-3.10(m,8H),3.15-3.17(m,4H),3.28(s,3H),3.34-3.35(m,10H),3.95-4.00(m,3H),4.02-4.88(m,8H),4.94(s,2H),5.43(s,2H),6.03(t,1H),7.06-7.15(m,2H),7.22-7.29(m,4H),7.54-7.69(m,3H),7.89(brs,1H),7.87-7.99(d,1H),8.03-8.05(d,1H),8.19(brs,1H),8.30(m,1H),8.50(m,1H),10.04(s,1H)
LC-MS m/z:1591.7[M+H]+,1613.7[M+Na]+
制备例4-35：化合物(VI-39)的制备
除了使用在制备例3-29中得到的化合物(IV-33)(0.15g，0.099mmol)来替代在制备例3-24中得到的化合物(IV-28)之外，重复制备例4-30中相同的过程来得到标题化合物(0.11g，70％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.41-0.54(m,6H),0.58-0.65(m,2H),0.68-0.76(m,3H),0.82-0.95(m,14H),1.09-1.23(m,8H),1.32-1.49(m,5H),1.59-1.61(m,1H),1.68-1.71(m,3H),1.87-2.04(m,3H),2.09-2.23(m,10H),2.32-2.39(m,3H),2.62-2.68(m,`H),2.74-3.25(m,15H),3.33-3.50(m,14H),3.90-3.97(m,3H),3.99-4.14(m,2H),4.16-4.89(m,8H),4.90(s,2H),5.45(s,2H),6.10(t,1H),7.22-7.28(m,3H),7.38-7.41(d,2H),7.55-7.85(d,2H),7.86-8.01(m,2H),8.03-8.05(m,1H),8.19-8.20(brs,1H),8.29(brs,1H),8.59(brs,1H),8.84(s,1H),10.08(s,1H)
LC-MS m/z:1642.8[M+H]+,1664.8[M+Na]+
制备例4-36：化合物(VI-40)的制备
除了使用在制备例3-30中得到的化合物(IV-34)(1.3g，0.895mmol)来替代在制备例3-24中得到的化合物(IV-28)之外，重复制备例4-30中相同的过程来得到标题化合物(1.1g，74％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.40-0.50(m,7H),0.70-0.77(m,8H),0.82-0.89(m,18H),1.02-0.07(m,3H),1.18-1.29(m,3H),1.44-1.47(m,6H),1.54-1.76(m,4H),1.89-1.94(m,5H),2.10-2.23(m,12H),2.32-2.44(m,3H),2.61-2.64(m,2H),2.74-3.00(m,10H),3.13-3.17(m,3H),3.20-3.33(m,10H),3.90-4.00(m,4H),4.16-4.84(m,8H),4.95(s,2H),5.41(s,2H),6.01-6.02(t,1H),7.01-7.05(m,2H),7.28-7.29(m,4H),7.59-7.60(d,2H),7.84-7.99(m,2H),8.13-8.16(m,1H),8.23(brs,1H),10.04(s,1H)
LC-MS m/z:1598.9[M+H]+,1621.9[M+Na]+
制备例4-37：化合物(VI-41)的制备
除了使用在制备例3-31中得到的化合物(IV-35)(0.14g，0.095mmol)来替代在制备例3-24中得到的化合物(IV-28)之外，重复在制备例4-30中相同的过程来得到标题化合物(0.072g，47％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.43-0.50(m,6H),0.66-0.76(m,8H),0.82-0.92(m,16H),1.09-1.23(m,6H),1.44-1.48(m,6H),1.65-1.81(m,3H),1.84-1.97(m,4H),2.01-2.30(m,10H),2.34-2.38(m,3H),2.56-2.64(m,2H),2.80-2.88(m,5H),2.91-3.04(m,5H),3.14-3.17(m,6H),3.27-3.39(m,17H),3.92-3.98(m,3H),4.15-4.86(m,8H),4.98(s,2H),5.42(s,2H),6.02-6.03(t,1H),7.21-7.36(m,4H),7.55-7.63(d,2H),7.77-8.01(m,4H),8.03-8.05(d,1H),8.13(brs,1H),8.45(brs,1H),10.01(s,1H)
LC-MS m/z:1624.9[M+H]+,1646.9[M+Na]+
制备例5：化学式VII-1、化学式VII-2、化学式VII-3和化学式VII-4的化合物的制备
制备例5-1：化合物(VII-5)的制备
在氩气气流下，将在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)(290mg，0.20mmol)溶解在10mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入N-羟基琥珀酰亚胺(35mg，0.30mmol)。将该反应混合物冷却至0℃，并且在加入EDC·HCl(58mg，0.30mmol)之后，在室温下搅拌15小时。在反应完全后，进行真空浓缩。将剩余物溶解在50mL乙酸乙酯中，并用5mL的1MHCl进行酸化，并且依次用30mL去离子水和30mL饱和盐水进行洗涤。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到标题化合物(226mg，73％)。
MALDI-TOF MS m/z:1562.9[M+Na]+
制备例5-2：化合物(VII-6)的制备
除了使用在制备例4-2中得到的化合物(VI-6)(60mg，0.041mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(53mg，83％)。
MALDI-TOF MS m/z:1586.7[M+Na]+
制备例5-3：化合物(VII-7)的制备
除了使用在制备例4-3中得到的化合物(VI-7)(54mg，0.037mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(57mg，98％)。
MALDI-TOF MS m/z:1607.4[M+K]+
制备例5-4：化合物(VII-8)的制备
除了使用在制备例4-4中得到的化合物(VI-8)(66mg，0.044mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(53mg，84％)。
MALDI-TOF MS m/z:1617.0[M+Na]+
制备例5-5：化合物(VII-9)的制备
除了使用在制备例4-5中得到的化合物(VI-9)(71mg，0.046mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(66mg，88％)。
MALDI-TOF MS m/z:1660.9[M+Na]+,1677.1[M+K]+
制备例5-6：化合物(VII-10)的制备
除了使用在制备例4-6中得到的化合物(VI-10)(53mg，0.037mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(38mg，67％)。
MALDI-TOF MS m/z:1565.5[M+Na]+
制备例5-7：化合物(VII-11)的制备
除了使用在制备例4-7中得到的化合物(VI-11)(46mg，0.032mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(30mg，61％)。
MALDI-TOF MS m/z:1568.9[M+Na]+,1585.0[M+K]+
制备例5-8：化合物(VII-12)的制备
除了使用在制备例4-8中得到的化合物(VI-12)(38mg，0.025mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(31mg，78％)。
MALDI-TOF MS m/z:1643.7[M+Na]+,1660.2[M+K]+
制备例5-9：化合物(VII-13)的制备
除了使用在制备例4-9中得到的化合物(VI-13)(34mg，0.023mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(27mg，75％)。
MALDI-TOF MS m/z:1627.7[M+Na]+,1644.8[M+K]+
制备例5-10：化合物(VII-14)的制备
除了使用在制备例4-10中得到的化合物(VI-14)(29mg，0.019mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(8mg，27％)。
MALDI-TOF MS m/z:1625.4[M+Na]+,1642.0[M+K]+
制备例5-11：化合物(VII-15)的制备
除了使用在制备例4-11中得到的化合物(VI-15)(77mg，0.052mmol)来替代在制备例4-1中得到的化合物(VI-5)之外，重复制备例5-1中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(34mg，41％)。
MALDI-TOF MS m/z:1603.8[M+Na]+,1621.2[M+K]+
制备例5-12：化合物(VII-16)的制备
在氩气气流下，将在制备例4-12中得到的化合物(VI-16)(60mg，0.039mmol)溶解在3mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入N-羟基琥珀酰亚胺(18.1mg，0.157mmol)。将该反应混合物冷却至0℃，并且在加入EDC·HCl(30.2mg，0.157mmol)之后，在室温下搅拌15小时。在反应完全后，进行真空浓缩。将剩余物溶解在50mL乙酸乙酯中，并用5mL的1MHCl进行酸化，并且依次用30mL去离子水和30mL饱和盐水进行洗涤。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到标题化合物(37mg，57％)。
LC-MS m/z:1620.8[M+]+,1643.7[M+Na]+
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ0.48(m,2H),0.64(m,2H),0.71(m,6H),0.78-0.88(m,17H),0.92-0.97(m,4H),1.02-1.03(d,2H),1.16(m,3H),1.40-1.45(m,5H),1.50-1.78(m,4H),1.82-2.01(m,5H),2.16(S,6H),2.06-2.28(m,3H),2.39(m,1H),2.47(S,3H),2.44-2.50(m,1H),2.60(m,1H),2.70(m,1H),2.77(S,3H),2.82-2.94(m,4H),2.96-3.00(m,3H),3.10-3.17(m,7H),3.18-3.52(m,13H),3.54-3.70(m,2H),3.76(m,1H),3.84-3.99(m,3H),4.00-4.16(m,2H),4.33(m,1H),4.49(t,1H),4.54-4.68(m,2H),4.92(m,2H),5.38(s,2H),5.95(m,1H),7.00-7.06(m,2H),7.22-7.27(m,3H),7.50-7.55(m,2H),7.70-7.78(m,1H),7.98-8.06(m,1H),9.95(S,1H)
制备例5-13：化合物(VII-17)的制备
除了使用在制备例4-13中得到的化合物(VI-17)(39mg，0.026mmol)来替代在制备例4-12中得到的化合物(VI-16)之外，重复制备例5-12中相同的过程来得到标题化合物(32mg，78％)。
MALDI-TOF MS m/z:1595.8[M+Na]+
制备例5-14：化合物(VII-18)的制备
除了使用在制备例4-14中得到的化合物(VI-18)(266mg，0.170mmol)来替代在制备例4-12中得到的化合物(VI-16)之外，重复制备例5-12中相同的过程来得到标题化合物(37mg，57％)。
LC-MS m/z:1590[M+]+
制备例5-15：化合物(VII-19)的制备
除了使用在制备例4-15中得到的化合物(VI-19)(247mg，0.16mmol)来替代在制备例4-12中得到的化合物(VI-16)之外，重复制备例5-12中相同的过程来得到标题化合物(197mg，77％)。
LC-MS m/z:1607[M]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.54(m,1H),0.65(m,3H),0.70-0.78(m,5H),0.80-1.00(m,18H),1.00-1.08(m,6H),1.20(m,3H),1.47(m,5H),1.60(m,2H),1.94(m,5H),2.08-2.20(m,3H),2.25(d,6H),2.40(m,1H),2.60(s,6H),2.73-3.02(m,13H),2.84-3.42(m,17H,2*OCH3),3.60(m,1H),3.70(m,1H),3.80-4.06(m,3H),4.20(t,2H),4.38(m,2H),4.53(t,1H),4.66(m,2H),4.78(m,1H),4.88-5.10(m,3H),5.42(s,2H),6.00(m,1H),7.07(m,1H),7.27-7.37(m,3H),7.50-7.58(m,2H),7.65-7.85(m,1H),8.10(m,1H),9.95(s,1H)
制备例5-16：化合物(VII-20)的制备
除了使用在制备例4-16中得到的化合物(VI-20)(38mg，0.025mmol)来替代在制备例4-12中得到的化合物(VI-16)之外，重复制备例5-12中相同的过程来得到标题化合物(25mg，62％)。
LC-MS m/z:1603[M]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.48(m,1H),0.62(m,2H),0.65-0.78(m,6H),0.71-1.02(m,25H),1.16(m,2H),1.30-1.52(m,5H),1.53-1.82(m,5H),1.83-2.12(m,5H),2.14(d,6H),2.54(s,3H),2.58-3.02(m,14H),3.10-3.16(m,6H),3.18-3.20(m,7H),3.28-3.70(m,11H),3.72-3.86(m,1H),3.90-4.04(m,1H),4.03-4.29(m,2H),4.32(m,1H),4.42-4.78(m,3H),4.82-4.98(m,2H),5.06(m,1H),5.39(s,2H),5.96(m,1H),6.78(m,1H),7.03-7.26(m,4H),7.58(m,2H),7.79(d,1H),8.00(d,1H),8.07(d,1H),9.95(S,1H)
制备例5-17：化合物(VII-21)的制备
除了使用在制备例4-17中得到的化合物(VI-21)(132mg，0.09mmol)来替代在制备例4-12中得到的化合物(VI-16)之外，重复制备例5-12中相同的过程来得到标题化合物(136mg，93％)。
LC-MS m/z:1619[M]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.54(m,1H),0.63-0.68(m,3H),0.70-0.80(m,5H),0.81-0.90(m,17H),1.00-1.1.08(m,8H),1.22(m,3H),1.40-1.54(m,6H),1.56-1.74(m,3H),1.80-2.00(m,3H),2.26-2.30(m,7H),2.51(m,6H),2.56(s,1H),2.64-3.04(m,14H),3.13-3.30(m,6H),3.36(m,6H),3.62(s,1H),3.69(s,2H),3.87-4.04(m,4H),4.19(t,2H0,4.37(m,2H),4.52(t,1H),4.62(m,1H),4.68(m,1H),4.76(m,1H),4.89(m,1H),4.979m,2H),5.08(d,1H),5.42(s,2H),5.98(m,1H),6.81(d,1H),7.17(d,1H),7.30(m,1H),7.60(m,3H),7.82(d,1h),8.10(m,1H),10.00(d,1H),
制备例5-18：化合物(VII-22)的制备
除了使用在制备例4-18中得到的化合物(VI-22)(296mg，0.198mmol)来替代在制备例4-12中得到的化合物(VI-16)之外，重复制备例5-12中相同的过程来得到标题化合物(132mg，83％)。
LC-MS m/z:1589[M]+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.48(m,1H),0.60(m,2H),0.71(m,5H),0.71-0.88(m,17H),0.98(d,3H),0.93-1.08(m,3H),1.16(m,3H),1.37-1.45(m,5H),1.50-1.86(m,4H),1.91(m,3H),2.0-2.42(m,11H),2.68(m,1H),2.77(S,3H),2.82-3.02(m,5H),3.10-3.19(m,6H),3.21-3.30(m,7H),3.36-3.50(m,16H),3.54-3.72(m,3H),3.80-4.00(m,4H),4.15(t,1H),4.33(m,1H),4.49-4.71(m,3H),4.86(m,2H),5.04(m,1H),5.39(s,2H),5.96(m,1H),7.03-7.21(m,5H),7.55(m,2H),7.79(d,1H),8.06(d,1H)9.95(S,1H)
制备例5-19：化合物(VII-23)的制备
在氩气气流下，将在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)(33.4mg，0.022mmol)溶解在3mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入N-羟基琥珀酰亚胺(7.7mg，0.066mmol)。将该反应混合物冷却至0℃，并且在加入EDC·HCl(12.8mg，0.066mmol)之后，在室温下搅拌15小时。在反应完全后，进行真空浓缩。将剩余物溶解在50mL乙酸乙酯中，并用5mL的1MHCl进行酸化，并且依次用30mL去离子水和30mL饱和盐水进行洗涤。用无水硫酸钠对有机层进行干燥，并且在真空下进行浓缩。通过硅胶柱色谱法对浓缩物进行纯化以得到标题化合物(32mg，91％)。
LC-MS m/z:1596[M+]+,1619[M+Na]+
制备例5-20：化合物(VII-24)的制备
除了使用在制备例4-20中得到的化合物(VI-24)(55mg，0.037mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(49mg，84％)。
LC-MS m/z:1606[M+]+
制备例5-21：化合物(VII-25)的制备
除了使用在制备例4-21中得到的化合物(VI-25)(65mg，0.043mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复在制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(56mg。82％)。
LC-MS m/z:1592[M+]+
制备例5-22：化合物(VII-26)的制备
除了使用在制备例4-22中得到的化合物(VI-26)(114mg，0.075mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(94mg，78％)。
LC-MS m/z:1609[M+]+
制备例5-23：化合物(VII-27)的制备
除了使用在制备例4-23中得到的化合物(VI-27)(91mg，0.0597mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复在制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(25mg，25％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,1H),0.62-0.71(m,7H),0.78-0.87(m,12H),1.05-1.17(m,4H),1.38-1.43(m,4H),1.84-1.98(m,3H),2.10-2.14(m,5H),2.79-3.04(m,10H),3.09-3.13(m,3H),3.25-3.36(m,10H),3.38-3.49(m,19H),3.87-3.89(m,4H),3.98-4.00(m,2H),4.12-4.99(m,8H),5.05(s,2H),5.39(s,2H),6.00-6.03(t,1H),7.23-7.31(m,3H),7.56-7.58(d,2H),7.72-7.80(m,3H),8.06-8.08(d,2H),8.16-8.41(m,1H),10.01(s,1H)
LC-MS m/z:1621.5[M+]+
制备例5-24：化合物(VII-28)的制备
除了使用在制备例4-24中得到的化合物(VI-28)(60mg，0.0399mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(14mg，23％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,1H),0.62-0.71(m,7H),0.78-0.87(m,12H),1.05-1.17(m,4H),1.38-1.43(m,4H),1.84-1.98(m,3H),2.14-2.15(m,7H),2.24-2.33(m,6H),2.79-3.04(m,10H),3.09-3.13(m,3H),3.25-3.36(m,10H),3.38-3.49(m,19H),3.87-3.89(m,4H),3.98-4.00(m,2H),4.12-4.99(m,8H),5.05(s,2H),5.39(s,2H),5.97(t,1H),7.02-7.11(m,2H),7.28-7.29(m,1H),7.57-7.65(d,2H),7.88-7.98(m,1H),8.07-8.08(m,1H),8.22-8.44(m,1H),10.00(s,1H)
LC-MS m/z:1601.7[M+]+
制备例5-25：化合物(VII-29)的制备
除了使用在制备例4-25中得到的化合物(VI-29)(83mg，0.053mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(23mg，25％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,2H),0.62-0.71(m,5H),0.78-0.87(m,9H),1.05-1.17(m,4H),1.38-1.43(m,4H),1.84-1.98(m,3H),2.14-2.15(m,4H),2.79-3.04(m,10H),3.09-3.13(m,3H),3.25-3.36(m,10H),3.38-3.49(m,19H),3.87-3.89(m,4H),3.98-4.00(m,2H),4.12-4.99(m,8H),5.05(s,2H),5.39(s,2H),5.97(t,1H),7.18-7.24(m,1H),7.29-7.37(m,2H),7.57-7.58(m,1H),7.78-8.07(m,5H),8.22-8.46(m,1H),8.58(s,1H),10.02(s,1H)
LC-MS m/z:1653.4[M+]+
制备例5-26：化合物(VII-30)的制备
除了使用在制备例4-26中得到的化合物(VI-30)(0.48g，0.31mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(0.44g，86％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.44-0.54(m,1H),0.55-0.75(m,10H),0.75-0.96(m,17H),0.96-1.04(m,1H),1.04-1.25(m,6H),1.271.51(m,6H),1.511.82(m,3H),1.822.02(m,3H),2.02-2.21(m,6H),2.21-2.36(m,3H),2.52-2.64(m,1H),2.65-2.75(m,4H),2.75-2.80(m,5H),2.80-2.84(m,2H),2.84-2.93(m,4H),2.93-3.06(m,4H),3.06-3.22(m,4H),3.25-3.28(m,3H),3.38-3.46(m,2H),3.48-3.64(m,1H),3.71-3.86(m,7H),3.86-4.04(m,4H),4.04-4.21(m,2H),4.21-4.31(m,1H),4.31-4.44(m,2H),4.44-4.56(m,1H),4.56-4.71(m,2H),4.71-4.87(m,1H),4.93(s,2H),5.38(s,2H),5.87-6.01(t,1H),6.95-7.09(d,1H),7.18-7.33(m,2H),7.37-7.54(m,1H),7.54-7.68(m,3H),7.71-7.85(d,1H),8.02-8.12(d,1H),9.96(brs,1H)
LC-MS m/z:1633[M+]+
制备例5-27：化合物(VII-31)的制备
除了使用在制备例4-27中得到的化合物(VI-31)(0.18g，0.12mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(0.13g，68％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.38-0.59(m,8H),0.60-0.79(m,8H),0.79-0.98(m,16H),1.05-1.36(m,7H),1.36-1.52(m,6H),1.54-1.86(m,5H),1.86-2.02(m,3H),2.04-2.28(m,10H),2.28-2.44(m,3H),2.59-2.68(m,1H),2.69-2.86(m,6H),2.86-3.09(m,8H),3.10-3.25(m,6H),3.25-3.43(m,3H),3.71-3.86(m,1H),3.88-4.07(m,2H),4.07-4.26(m,2H),4.31-4.43(m,1H),4.48-4.74(m,2H),4.74-4.90(m,1H),4.97(s,2H),5.41(m,2H),5.86-6.13(t,1H),7.16-7.43(m,2H),7.43-7.55(m,1H),7.56-7.75(m,2H),7.75-7.92(m,1H),7.92-8.21(m,4H),8.21-8.44(m,1H),8.44-8.66(m,1H),8.72(s,1H),9.38-9.82(brs,1H),10.01(brs,1H)
LC-MS m/z:1622[M+]+
制备例5-28：化合物(VII-32)的制备
除了使用在制备例4-28中得到的化合物(VI-32)(0.21g，0.14mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(0.19g，88％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.43-0.59(m,2H),0.59-0.78(m,8H),0.79-1.00(m,16H),1.00-1.08(m,3H),1.08-1.29(m,5H),1.29-1.64(m,9H),1.64-1.73(m,3H),1.74-2.04(m,4H),2.04-2.44(m,10H),2.56-2.64(m,2H),2.65-2.92(m,12H),2.92-3.08(m,6H),3.08-3.23(m,5H),3.23-3.32(m,3H),3.42-3.54(m,1H),3.55-3.64(m,1H),3.68-3.88(m,3H),3.88-4.06(m,2H),4.06-4.26(m,2H),4.26-4.46(m,2H),4.46-4.71(m,2H),4.74-4.88(m,1H),4.96(s,2H),5.41(s,2H),5.90-6.08(t,1H),6.74-7.04(m,1H),7.10-7.38(m,3H),7.38-7.68(m,4H),7.72-7.88(d,1H),8.01-8.18(d,1H),8.18-8.35(m,1H),10.00(brs,1H)
LC-MS m/z:1602[M+]+
制备例5-29：化合物(VII-33)的制备
除了使用在制备例4-29中得到的化合物(VI-33)(0.26g，0.17mmol)来替代在制备例4-19中得到的化合物(VI-23)之外，重复制备例5-19中相同的过程来得到乳白色固体形式的标题化合物(0.14g，52％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.53-0.94(m,28H),0.95-1.28(m,9H),1.28-1.74(m,18H),1.76-2.25(m,13H),2.27-2.43(m,1H),2.54-2.84(m,16H),2.84-3.03(m,5H),3.03-3.21(m,7H),3.60-3.82(m,2H),3.82-4.00(m,3H),4.05-4.24(m,1H),4.29-4.45(m,1H),4.45-4.78(m,2H),5.01(s,2H),5.39(s,2H),5.90-6.09(t,1H),6.97(brs,2H),7.09-7.43(m,2H),7.43-7.70(m,2H),7.70-7.87(m,1H),8.00-7.33(m,2H),10.01(brs,1H)
LC-MS m/z:1610[M+]+
制备例5-30：化合物(VII-34)的制备
在氩气气流下，将在制备例4-30中得到的化合物(VI-34)(25mg，0.016mmol)溶解在3mL无水二甲基甲酰胺中，并且加入N-羟基琥珀酰亚胺(7.2mg，0.062mmol)。将该反应混合物冷却至0℃，并且在加入EDC·HCl(11.9mg，0.062mmol)之后，在室温下搅拌15小时。在反应完全后，进行真空浓缩。通过硅胶柱色谱法对剩余物进行纯化以得到标题化合物(20mg，76％)。
LC-MS m/z:1706.9[M+H]+,1728.9[M+Na]+
制备例5-31：化合物(VII-35)的制备
除了使用在制备例4-31中得到的化合物(VI-35)(0.074g，0.0452mmol)来替代在制备例4-30中得到的化合物(VI-34)之外，重复制备例5-30中相同的过程来得到标题化合物(0.049g，62.4％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,1H),0.63-0.76(m,12H),0.81-0.86(m,18H),1.02-1.04(d,4H),1.11-1.14(m,4H),1.18-1.22(m,2H),1.42-1.49(m,6H),1.94-1.97(m,3H),2.18-2.19(m,6H),2.732.89(m,13H),2.93-2.99(m,5H),3.14-3.21(m,5H),3.31-3.39(m,17H),3.91-4.03(m,5H),4.14-4.85(m,8H),4.98(s,2H),5.42(s,2H),5.96-5.98(t,1H),7.27-7.30(m,3H),7.58-7.59(d,2H),7.77-7.87(m,2H),7.94-8.03(m,2H),8.08-8.11(d,1H),8.46(brs,1H),10.01(s,1H)
LC-MS m/z:1735.4[M+H]+,1758.4[M+Na]+
制备例5-32：化合物(VII-36)的制备
除了使用在制备例4-32中得到的化合物(VI-36)(0.11g，0.0664mmol)来替代在制备例4-30中得到的化合物(VI-34)之外，重复制备例5-30中相同的过程来得到标题化合物(0.079g，69.6％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,1H),0.63-0.76(m,7H),0.82-0.92(m,12H),1.02-1.04(d,1H),1.09-1.24(m,7H),1.42-1.49(m,8H),1.91-1.99(m,4H),2.11-2.19(m,8H),2.81-2.83(m,10H),2.99-3.14(m,6H),3.17-.21(m,5H),3.32-3.35(m,20H),3.92-3.93(m,4H),3.97-4.04(m,2H),4.13-4.85(m,8H),4.94(s,2H),5.43(s,2H),6.00-6.03(t,1H),7.27-7.32(m,5H),7.58-7.61(d,2H),7.77-7.96(m,3H),8.10-8.12(m,1H),8.47(brs,1H),10.02(s,1H)
LC-MS m/z:1708.4[M+H]+,1730.4[M+Na]+
制备例5-33：化合物(VII-37)的制备
除了使用在制备例4-33中得到的化合物(VI-37)(0.16g，0.096mmol)来替代在制备例4-30中得到的化合物(VI-34)之外，重复制备例5-30中相同的过程来得到标题化合物(0.12g，71％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,1H),0.70-0.75(m,8H),0.82-0.87(m,14H),1.03-1.05(m,4H),1.08-1.14(m,1H),1.18-1.23(m,4H),1.44-1.49(m,7H),2.08-2.20(m,10H),2.28-2.37(m,8H),2.77-2.89(m,13H),2.93-3.00(m,6H),3.14-3.20(m,5H),3.28(s,3H),3.32-3.34(m,18H),3.88-4.04(m,4H),4.08-4.87(m,8H),4.97(s,2H),5.42(s,2H),5.99-6.00(t,1H),7.05-7.15(m,2H),7.28-7.30(m,2H),7.59-7.69(m,2H),7.80-7.83(d,1H),7.97-8.05(m,1H),8.10-8.11(m,1H),8.23-8.28(m,1H),8.49(brs,1H),10.02(s,1H)
LC-MS m/z:1716.5[M+H]+,1740.5[M+Na]+
制备例5-34：化合物(VII-38)的制备
除了使用在制备例4-34中得到的化合物(VI-38)(0.15g，0.093mmol)来替代在制备例4-30中得到的化合物(VI-34)之外，重复制备例5-30中相同的过程来得到标题化合物(0.1g，67％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,1H),0.63-0.66(m,3H),0.69-0.76(m,8H),0.82-0.92(m,14H),1.03-1.05(m,2H),1.11-1.12(m,1H),1.18-1.24(m,3H),1.44-1.49(m,7H),2.13-2.20(m,9H),2.28-2.37(m,7H),2.73-2.89(m,7H),2.93-3.03(m,9H),3.15-3.19(m,5H),3.28(s,3H),3.31-3.35(m,15H),3.85-3.87(m,1H),3.95-4.04(m,3H),4.16-4.88(m,8H),4.94(s,2H),5.42(s,2H),5.99-6.02(t,1H),7.06-7.15(m,2H),7.27-7.29(m,4H),7.58-7.63(m,3H),7.81-7.83(d,1H),7.87-8.04(m,1H),8.10-8.11(d,1H),8.30-8.50(m,1H),10.02(s,1H)
LC-MS m/z:1687.6[M+H]+,1709.5[M+Na]+
制备例5-35：化合物(VII-39)的制备
除了使用在制备例4-35中得到的化合物(VI-39)(0.12g，0.073mmol)来替代在制备例4-30中得到的化合物(VI-34)之外，重复制备例5-30中相同的过程来得到标题化合物(0.058g，46％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.48-0.53(m,1H),0.58-0.59(m,1H),0.64-0.76(m,8H),0.82-0.92(m,15H),1.03-1.04(d,2H),1.11-1.22(m,6H),1.42-1.49(m,6H),1.86-1.97(m,3H),2.11-2.20(m,9H),2.73-2.95(m,10H),2.98-3.13(m,6H),3.14-3.21(m,5H),3.33-3.37(m,2H),3.90-3.92(m,4H),3.98-4.04(m,2H),4.14-4.80(m,8H),4.94(s,2H),5.42(s,2H),6.00-6.01(t,1H),7.22-7.29(m,4H),7.38-7.42(d,1H),7.59-7.61(d,2H),7.81-7.83(d,1H),7.89-7.96(m,2H),8.00-8.03(d,1H),8.09-8.12(d,1H),8.28-8.51(m,1H),8.64(s,1H),10.02(s,1H),
LC-MS m/z:1740.4[M+H]+,1762.3[M+Na]+
制备例5-36：化合物(VII-40)的制备
除了使用在制备例4-36中得到的化合物(VI-40)(0.1g，0.063mmol)来替代在制备例4-30中得到的化合物(VI-34)之外，重复制备例5-30中相同的过程来得到标题化合物(0.072g，68％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,1H),0.62-0.69(m,2H),0.70-0.77(m,7H),0.82-0.89(m,18H),1.02-0.07(m,3H),1.18-1.29(m,3H),1.44-1.47(m,6H),2.19-2.21(m,10H),2.61-2.64(m,2H),2.74-3.00(m,10H),3.17-3.18(m,7H),3.25-3.33(m,25H),3.90-4.01(m,5H),4.16-4.84(m,8H),4.95(s,2H),5.40(s,2H),6.01-6.02(t,1H),7.01-7.05(m,2H),7.26-7.29(m,4H),7.58-7.60(d,2H),7.79-7.82(m,1H),7.94-7.99(m,2H),8.08-8.10(m,1H),10.00(s,1H)
LC-MS m/z:1697.2[M+H]+,1719.1[M+Na]+
制备例5-37：化合物(VII-41)的制备
除了使用在制备例4-37中得到的化合物(VI-41)(0.062g，0.038mmol)来替代在制备例4-30中得到的化合物(VI-34)之外，重复制备例5-30中相同的过程来得到标题化合物(0.037g，56％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.51-0.53(m,1H),0.63-0.77(m,13H),0.81-0.91(m,17H),1.03-1.04(d,2H),1.09-1.22(m,6H),1.42-1.49(m,6H),1.95-1.97(m,3H),2.11-2.19(m,7H),2.77-2.89(m,13H),3.13-3.17(m,7H),3.32-3.36(m,18H),3.92-3.93(m,4H),4.00-4.04(m,2H),4.14-4.85(m,8H),4.99(s,2H),5.42(s,2H),5.88-6.00(t,1H),7.28-7.41(m,4H),7.58-7.65(d,2H),7.77-8.06(m,4H),8.10-8.11(d,1H),8.21-8.45(m,1H),10.00(s,1H)
LC-MS m/z:1722.5[M+H]+,1744.3[M+Na]+
实施例：化学式I-1、化学式I-2、化学I-3和化学式I-4的抗体-连接子-药物偶联物的制备
实施例1：偶联物(I-5)的制备
在与pH7.5的PBS(含有10mM磷酸盐、137mM NaCl、2.7mM KCl)进行交换处理之后，用2.5ml的pH7.5的PBS和7.5mL的pH 8.5的0.05M硼酸钠进一步处理5mL曲妥珠单抗(Herceptin)溶液(4.0g/mL，27μM)。随后，将曲妥珠单抗溶液与在制备例5-1中得到的化合物(VII-5)(2mg，0.001mmol，10当量)在3.75mL的20％DMSO中的溶液在25℃下进行混合，并同时搅拌4小时。
当反应完全时，通过0.45μm过滤器来过滤该反应混合物。将滤液放置到离心过滤器(centrifugal filter,Amicon Ultra-1530K)中，并且利用pH7.5的PBS进行两次或三次浓缩，直至移除有机溶剂和未反应的材料。
将所得到的浓缩物放置到平衡有pH 7.5的PBS的Sephadex G-25树脂填充柱(30×300mm)中，并且通过MPLC(280nm，UV范围0.08，流速10mL/min)进行纯化以得到13.5mg标题化合物(1.28mg/mL，总计10.5mL，68％)。利用UV分光仪，通过测量在三个波长(280nm、320nm//350nm)处的吸光度来确定所得到的化合物的浓度。
实施例2：偶联物(I-6)的制备
除了使用在制备例5-2中得到的化合物(VII-6)(4.2mg，0.003mmol，15当量)来替代在制备例5-1中得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：12.1mg(1.1mg/mL，总计11mL，45％)。
实施例3：偶联物(I-7)的制备
除了使用在制备例5-3中得到的化合物(VII-7)(3.12mg，0.002mmol，15当量)来替代在制备例5-1中得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：13.7mg(1.71mg/mL，总计8mL，68％)。
实施例4：偶联物(I-8)的制备
除了使用在制备例5-4中所得到的化合物(VII-8)(3.20mg，0.002mmol，15当量)来替代在制备例5-1中所得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：13.9mg(1.54mg/mL，总计9mL，68％)。
实施例5：偶联物(I-9)的制备
除了使用在制备例5-5中所得到的化合物(VII-9)(3.27mg，0.002mmol，15当量)来替代在制备例5-1中所得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：15.3mg(1.53mg/mL，总计10mL，77％)。
实施例6：偶联物(I-10)的制备
除了使用在制备例5-6中所得到的化合物(VII-10)(4.17mg，0.003mmol，15当量)来替代在制备例5-1中所得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：14.2mg(1.29mg/mL，总计11mL，53％)。
实施例7：偶联物(I-11)的制备
除了使用在制备例5-7中所得到的化合物(VII-11)(3.08mg，0.002mmol，15当量)来替代在制备例5-1中所得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：9.5mg(1.19mg/mL，总计8mL，48％)。
实施例8：偶联物(I-12)的制备
除了使用在制备例5-8中所得到的化合物(VII-12)(5.4mg，0.003mmol，10当量)来替代在制备例5-1中所得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：50mg(2.5mg/mL，总计20mL，100％)。
实施例9：偶联物(I-13)的制备
除了使用在制备例5-9中所得到的化合物(VII-13)(5.7mg，0.004mmol，20当量)来替代在制备例5-1中所得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：15.2mg(1.01mg/mL，总计15mL，56％)。
实施例10：偶联物(I-14)的制备
除了使用在制备例5-10中所得到的化合物(VII-14)(4.3mg，0.003mmol，15当量)来替代在制备例5-1中所得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：19.4mg(1.55mg/mL，总计12.5mL，72％)。
实施例11：偶联物(I-15)的制备
除了使用在制备例5-11中所得到的化合物(VII-15)(2.3mg，0.0015mmol，10当量)来替代在制备例5-1中所得到的化合物(VII-5)之外，重复实施例1中的相同的过程来得到标题化合物：20.1mg(1.6mg/mL，总计12.5mL，92％)。
实施例12：偶联物(I-16)的制备
在与pH7.5的PBS(含有10mM磷酸盐、137mM NaCl、2.7mM KCl)进行交换处理之后，用2.5ml的pH 7.5的PBS和7.5mL的pH 8.5的0.05M硼酸钠进一步处理5mL曲妥珠单抗(Herceptin)溶液(5.4g/mL，36μM)。随后，将曲妥珠单抗溶液与在制备例5-12中得到的化合物(VII-16)(4.4mg，0.003mmol，15当量)在3.75mL的20％DMSO中的溶液在25℃下进行混合，并同时搅拌4小时。当反应完全时，通过0.45μm过滤器来过滤该反应混合物。将滤液放置到离心过滤器(centrifugal filter,Amicon Ultra-1530K)中，并且利用pH7.5的PBS进行两次或三次浓缩，直至移除有机溶剂和未反应的材料。将所得到的浓缩物放置到平衡有pH7.5的PBS的Sephadex G-25树脂填充柱(30×300mm)，并且通过MPLC(280nm，UV范围0.08，流速10mL/min)进行纯化以得到标题化合物22.5mg(1.73mg/mL，总计13mL，83％)。利用UV分光仪，通过测量在三个波长(280nm、320nm、350nm)处的吸光度来确定所得到的化合物的浓度。
实施例13：偶联物(I-17)的制备
除了使用在制备例5-13中得到的化合物(VII-17)(5.6mg，0.004mmol，20当量)来替代在制备例5-13中得到的化合物(VII-16)之外，重复实施例12中的相同的过程来得到标题化合物：25.6mg(2.05mg/mL，总计12.5mL，95％)。
实施例14：偶联物(I-18)的制备
除了使用在制备例5-14中得到的化合物(VII-18)(4.0mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-12中得到的化合物(VII-16)之外，重复实施例12中的相同的过程来得到标题化合物：23.8mg(1.98mg/mL，总计12mL，99％)。
实施例15：偶联物(I-19)的制备
除了使用在制备例5-14中得到的化合物(VII-19)(4.0mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-12中得到的化合物(VII-16)之外，重复实施例12中的相同的过程来得到标题化合物：20.4mg(1.86mg/mL，总计11mL，82％)。
实施例16：偶联物(I-20)的制备
除了使用在制备例5-16中得到的化合物(VII-20)(3.8mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-12中得到的化合物(VII-16)之外，重复实施例12中的相同的过程来得到标题化合物：18.9mg(1.72mg/mL，总计11mL，79％)。
实施例17：偶联物(I-21)的制备
除了使用在制备例5-17中得到的化合物(VII-21)(4.0mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-12中得到的化合物(VII-16)之外，重复实施例12中的相同的过程来得到标题化合物：19.8mg(1.8mg/mL，总计11mL，80％)。
实施例17：偶联物(I-22)的制备
除了使用在制备例5-18中得到的化合物(VII-22)(3.8mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-12中得到的化合物(VII-16)之外，重复实施例12中的相同的过程来得到标题化合物：13.0mg(1.18mg/mL，总计11mL，54％)。
实施例19：偶联物(I-23)的制备
在与pH7.5的PBS(含有10mM磷酸盐、137mM NaCl、2.7mM KCl)进行交换处理之后，用2.5ml的pH7.5的PBS和7.5mL的pH 8.5的0.05M硼酸钠进一步处理5mL曲妥珠单抗(Herceptin)溶液(5.4g/mL，36μM)。随后，将曲妥珠单抗溶液与在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)(5.7mg，0.0036mmol，20当量)在3.75mL的20％DMSO中的溶液在25℃下进行混合，并同时搅拌4小时。当反应完全时，通过0.45μm过滤器来过滤该反应混合物。将滤液放置到离心过滤器(centrifugal filter,Amicon Ultra-1530K)中，并且利用pH7.5的PBS进行两次或三次浓缩，直至移除有机溶剂和未反应的材料。将所得到的浓缩物放置到平衡有pH7.5的PBS的Sephadex G-25树脂填充柱(30×300mm)，并且通过MPLC(280nm，UV范围0.08，流速10mL/min)进行纯化以得到标题化合物：16.9mg(1.21mg/mL，总计15mL，67％)。利用UV分光仪，通过测量在三个波长(280nm、320nm、350nm)处的吸光度来确定所得到的化合物的浓度。
实施例20：偶联物(I-24)的制备
除了使用在制备例5-20中得到的化合物(VII-24)(4.3mg，0.0027mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：19.2mg(1.54mg/mL，总计11.5mL，71％)。
实施例21：偶联物(I-25)的制备
除了使用在制备例5-21中得到的化合物(VII-25)(5.74mg，0.0036mmol，20当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：14.7mg(1.23mg/mL，总计12mL，54％)。
实施例22：偶联物(I-26)的制备
除了使用在制备例5-22中得到的化合物(VII-26)(4.38mg，0.0027mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物23.7mg(1.58mg/mL。总计14mL，88％)。
实施例23：偶联物(I-27)的制备
除了使用在制备例5-23中得到的化合物(VII-27)(4.0mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：21.1mg(1.15mg/mL，总计14mL，85％)。
实施例24：偶联物(I-28)的制备
除了使用在制备例5-24中得到的化合物(VII-28)(3.9mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：17.3mg(1.58mg/mL，总计13mL，70％)。
实施例25：偶联物(I-29)的制备
除了使用在制备例5-25中得到的化合物(VII-29)(4.1mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：9.2mg(0.92mg/mL，总计10mL，24.8％)。
实施例26：偶联物(I-30)的制备
除了使用在制备例5-26中得到的化合物(VII-30)(4.0mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：16.7mg(1.19mg/mL，总计14mL，67％)。
实施例27：偶联物(I-31)的制备
除了使用在制备例5-27中得到的化合物(VII-31)(4.0mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：21mg(1.61mg/mL，总计13mL，85％)。
实施例28：偶联物(I-32)的制备
除了使用在制备例5-28中得到的化合物(VII-32)(4.0mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：12.3mg(0.88mg/mL，总计14mL，50％)。
实施例29：偶联物(I-33)的制备
除了使用在制备例5-29中得到的化合物(VII-33)(4.0mg，0.0025mmol，15当量)来替代在制备例5-19中得到的化合物(VII-23)之外，重复实施例19中的相同的过程来得到标题化合物：15.3mg(1.18mg/mL，总计13mL，62％)。
实施例30：偶联物(I-34)的制备
在与pH7.5的PBS(含有10mM磷酸盐、137mM NaCl、2.7mM KCl)进行交换处理之后，用2.5ml的pH7.5的PBS和7.5mL的pH 8.5的0.05M硼酸钠进一步处理5mL曲妥珠单抗(Herceptin)溶液(5.4g/mL,36μM)。随后，将曲妥珠单抗溶液与在制备例5-30中得到的化合物(VII-34)(5.7mg，0.0036mmol，20eqs)在3.75mL的20％DMSO中的溶液在25℃下进行混合，并同时搅拌18小时。当反应完全时，通过0.45μm过滤器来过滤该反应混合物。将滤液放置到离心过滤器(centrifugal filter,Amicon Ultra-1530K)中，并且利用pH7.5的PBS进行两次或三次浓缩，直至移除有机溶剂和未反应的材料。将所得到的浓缩物放置到平衡有pH7.5的PBS的Sephadex G-25树脂填充柱(30×300mm)，并且通过MPLC(280nm，UV范围0.08，流速10mL/min)进行纯化以得到标题化合物：26.4mg(2.20mg/mL，总计12mL，98％)。利用UV分光仪，通过测量在三个波长(280nm、320nm、350nm)处的吸光度来确定所得到的化合物的浓度。
实施例31：偶联物(I-35)的制备
除了使用在制备例5-31中得到的化合物(VII-35)(4.2mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-30中得到的化合物(VII-34)之外，重复实施例30中的相同的过程来得到标题化合物：14.5mg(1.21mg/mL，总计12mL，61％)。
实施例32：偶联物(I-36)的制备
除了使用在制备例5-32中得到的化合物(VII-36)(4.2mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-30中得到的化合物(VII-34)之外，重复实施例30中的相同的过程来得到标题化合物：17.9mg(1.63mg/mL，总计11mL，75％)。
实施例33：偶联物(I-37)的制备
除了使用在制备例5-33中得到的化合物(VII-37)(4.1mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-30中得到的化合物(VII-34)之外，重复实施例30中的相同的过程来得到标题化合物：11.8mg(1.48mg/mL，总计8mL，50％)。
实施例34：偶联物(I-38)的制备
除了使用在制备例5-34中得到的化合物(VII-38)(4.0mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-30中得到的化合物(VII-34)之外，重复实施例30中的相同的过程来得到标题化合物：15.8mg(1.21mg/mL，总计13mL，66％)。
实施例35：偶联物(I-39)的制备
除了使用在制备例5-35中得到的化合物(VII-39)(4.2mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-30中得到的化合物(VII-34)之外，重复实施例30中的相同的过程来得到标题化合物：18.3mg(1.52mg/mL，总计12mL，77％)。
实施例36：偶联物(I-40)的制备
除了使用在制备例5-36中得到的化合物(VII-40)(4.6mg，0.0027mmol，15当量)来替代在制备例5-30中得到的化合物(VII-34)之外，重复实施例30中的相同的过程来得到标题化合物：12.7mg(1.15mg/mL，总计11mL，47％)。
实施例37：偶联物(I-41)的制备
除了使用在制备例5-37中得到的化合物(VII-41)(4.1mg，0.0024mmol，15当量)来替代在制备例5-30中得到的化合物(VII-34)之外，重复实施例30中的相同的过程来得到标题化合物：16.1mg(1.24mg/mL，总计13mL，67％)。
测试例1：通过蛋白质质谱测定DAR
通过用内切糖苷酶PNGase F在37℃下处理在制备例中所制备的各个抗体-连接子-药物偶联物15±3小时来移除N-连接的聚糖。用包括安捷伦1200HPLC和安捷伦6530Q-TOF的LC-ESI-MS系统对该去糖基的抗体-连接子-药物偶联物进行分析。在安捷伦Zorbax柱(300SB-C18，2.1mm×75mm，5μm)上，利用在0.1％甲酸的水溶液/0.1％甲酸的乙腈溶液的梯度洗脱来完成抗体-连接子-药物偶联物的色谱分离，并且在900m/z至4000m/z的范围内，在每秒1谱的扫描速率下得到m/z(质荷比)数据，并进行去卷积，其中，使用分子量和每个峰相对于积分峰(D0、D1、D2...Dn)的丰度％(百分比)来计算DAR。
根据下式来计算各个峰的相对丰度。通过将每个峰的丰度除以峰的总丰度来计算每个峰的相对丰度％。
根据下式，利用相对丰度％来计算抗体-连接子-药物偶联物的DAR，并且在表1至表4中示出结果。
表1
表2
表3
表4
测试例2：SEC-HPLC分析
利用尺寸排阻色谱法(size exclusion chromatography:SEC-HPLC)，进行检查以查看抗体在连接至药物期间，抗体是否异常地破碎或聚集。这种异常蛋白结构可用作间接指示所制备的抗体-连接子-药物偶联物质量的指数，其对抗体的固有性质(包括抗原特异性亲和力、体内药代动力学等)具有不利的影响。
利用SEC-HPLC分析在制备例中制备的抗体-连接子-药物偶联物的正常抗体结构比例。在下表5至表8中示出了该结果。
表5
观察到，在实施例2、实施例6和实施例7中制备的抗体-连接子-药物偶联物中具有98.21％至98.55％的正常抗体结构，与预连接抗体的正常抗体结构(99.16％)相当。
表6
观察到，在实施例12至实施例18中制备的抗体-连接子-药物偶联物中具有92.43％至99.25％的正常抗体结构，与预连接抗体的正常抗体结构(99.48％)相当。
表7
观察到，在实施例19至实施例29中制备的抗体-连接子-药物偶联物中具有90.68％至99.13％的正常抗体结构，这与预连接抗体的正常抗体结构(99.48％)相当。
表8
观察到，在实施例30至实施例37中制备的抗体-连接子-药物偶联物中具有97.00％至98.93％的正常抗体结构，这与预连接抗体的正常抗体结构(99.48％)相当。
测试例3：IEF分析
利用等电点聚集(isoelectric focusing:IEF)分析来分析在制备例2、制备例4、制备例6和制备例7中分别制备的抗体-连接子-药物偶联物(I-6)、(I-8)、(I-10)和(I-11)的等电点(pI)值，并且在下表9中列出了结果。
表9
从表9中可以看出，与DAR结果一致，检测到在其上偶联有更多药物的偶联物(I-10)至偶联物(I-11)具有较低的pI条带。也就是说，连接至抗体的药物数目增加。
测试例4：体外细胞毒性检测
通过体外评价针对过表达HER-2的乳腺癌细胞系(BT-474)的抗增殖活性，来分析抗体-连接子-药物偶联物的抗癌效力。作为对照，单独使用用于制备抗体-连接子-药物偶联物的曲妥珠单抗。曲妥珠单抗是针对在乳腺癌细胞中特异性表达的HER-2抗原的单克隆抗体。
将BT-474细胞以1x104个细胞/孔的密度接种至96-孔微孔板上，并且与各种浓度的对照曲妥珠单抗或各种浓度的在制备例中制备的抗体-连接子-药物偶联物孵育5天。通过比色剂(CCK-8)测量吸光度来间接评价孵育5天后活细胞的数目。浓度和效力的相关性被拟合为4-参数逻辑曲线，并且在曲线拟合中利用EC50(50％的有效浓度)来评价相对效力。在图1至图17和表10至表13中示出了所得到的结果。
如表10所示，与对照曲妥珠单抗相比，实施例2、实施例6和实施例7制备的抗体-连接子-药物偶联物的EC50减小了13.2至17.8倍，表明了本发明的抗体-连接子-药物偶联物甚至在小得多的剂量下也能够发挥出与对照物相同的疗效，同时相应地降低了副作用。
此外，如图1至图3的4-参数逻辑曲线中所描绘的，与对照曲妥珠单抗相比，制备例2、制备例4、制备例6和制备例7中制备的抗体-连接子-药物偶联物获得了较低的吸光度，表明了本发明的偶联物在抗增殖活性中优于对照曲妥珠单抗。这是基于这样的事实：不仅通过抗体-依赖的抑制活性来抑制肿瘤细胞，而且还通过偶联至抗体的药物的细胞毒性效果来抑制肿瘤细胞。
表10
从表11中的数据中可知，与对照曲妥珠单抗相比，实施例1至实施例7所制备的抗体-连接子-药物偶联物的EC50降低了7.7至34.2倍，表明了本发明的抗体-连接子-药物偶联物甚至在小得多的剂量下也能够发挥出与对照物相同的疗效，同时相应地降低了副作用此外，如图4至图7的4-参数逻辑曲线中所描绘的，与对照曲妥珠单抗相比，制备例1至制备例7中制备的抗体-连接子-药物偶联物获得了较低的吸光度，表明了本发明的偶联物在抗增殖活性中优于对照曲妥珠单抗。这是基于这样的事实：不仅通过抗体-依赖的抑制活性来进一步抑制肿瘤细胞，而且还通过偶联至抗体的药物的细胞毒性效果来进一步抑制肿瘤细胞。
表11
样品 EC50(ng/ml) 相对效力(倍数)
曲妥珠单抗 98.6 1
偶联物(I-16) 2.88 34.2
曲妥珠单抗 110 1
偶联物(I-18) 14.3 7.7
曲妥珠单抗 96.6 1
偶联物(I-19) 5.18 18.6
曲妥珠单抗 92.3 1
偶联物(I-20) 5.72 16.1
曲妥珠单抗 96.6 1
偶联物(I-21) 7.09 13.6
曲妥珠单抗 92.3 1
偶联物(I-22) 6.7 13.8
如表12所示，与对照曲妥珠单抗相比，实施例19至实施例29所制备的抗体-连接子-药物偶联物的EC50降低了0.5至33.6倍。对于抗体-连接子-药物偶联物(I-23)、(I-25)、(I-26)和(I-33)，检测到EC50值处于低于对照组的20倍或更高的水平，表明了本发明的抗体-连接子-药物偶联物甚至在低于20倍或更高倍数的小剂量下也能够发挥出与对照物相同的疗效，同时相应地降低了副作用。
此外，如图8至图13的4-参数逻辑曲线中所描绘的，与对照曲妥珠单抗相比，制备例19至制备例29中制备的抗体-连接子-药物偶联物获得了较低的吸光度，表明了本发明的偶联物在抗增殖活性中优于对照曲妥珠单抗。这是基于这样的事实：不仅通过抗体-依赖的抑制活性来进一步抑制肿瘤细胞，而且还通过偶联至抗体的药物的细胞毒性效果来进一步抑制肿瘤细胞。
表12
样品 EC50(ng/mL) 相对效力(倍数)
曲妥珠单抗 102 1
偶联物(I-23) 4.73 21.6
曲妥珠单抗 106 1
偶联物(I-24) 68.4 1.5
曲妥珠单抗 107 1
偶联物(I-25) 4.75 22.2
曲妥珠单抗 101 1
偶联物(I-26) 4.17 24.2
曲妥珠单抗 97.9 1
偶联物(I-32) 12.7 7.7
曲妥珠单抗 97 1
偶联物(I-33) 2.89 33.6
由表10的数据明显可知，与对照曲妥珠单抗相比，实施例30至实施例36所制备的抗体-连接子-药物偶联物的EC50降低了8.9至22.6倍，表明了本发明的抗体-连接子-药物偶联物甚至在小得多的剂量下也能够发挥出与对照物相同的疗效，同时相应地降低了副作用。
此外，如图14至图17的4-参数逻辑曲线中所描绘的，与对照曲妥珠单抗相比，制备例30至制备例36中制备的抗体-连接子-药物偶联物获得了较低的吸光度，表明了本发明的偶联物在抗增殖活性中优于对照曲妥珠单抗。这是基于这样的事实：不仅通过抗体-依赖的抑制活性来进一步抑制肿瘤细胞，而且还通过偶联至抗体的药物的细胞毒性效果来进一步抑制肿瘤细胞。
表13
样品 EC50(ng/ml) 相对效力(倍数)
曲妥珠单抗 104 1
偶联物(I-34) 11.3 9.2
曲妥珠单抗 104 1
偶联物(I-35) 10.3 10.1
曲妥珠单抗 104 1
偶联物(I-36) 5.74 18.1
曲妥珠单抗 116 1
偶联物(I-37) 13 8.9
曲妥珠单抗 116 1
偶联物(I-38) 5.13 22.6
曲妥珠单抗 94.7 1
偶联物(I-39) 7 13.5
曲妥珠单抗 94.7 1
偶联物(I-40) 4.42 21.4
测试例5：药代动力学(PK)检测
将在制备例2和制备例4中分别制备的抗体-连接子-药物偶联物(I-6)和(I-8)以及对照的曲妥珠单抗各自以20mg/kg的剂量静脉注射至Balb/c Slc-nu小鼠一次，并且在一个月内检测药代动力学(Phamacokinetics:PK)。
观察到抗体-连接子-药物偶联物(I-6)和(I-8)分别具有8.3天和7.9天的半衰期，与对照的曲妥珠单抗的半衰期(8.6天)并没有显著的差异，这意味着细胞毒性药物在偶联期间并没有直接连接至新生Fc区域(FcRn)(影响抗体自身PK的位点)。
表14
测试例6：动物模型中的疗效研究
对于动物模型疗效测试，将在制备例2、6和7中制备的抗体-连接子-药物偶联物(I-6)、(I-10)和(I-11)分别以3种不同的剂量(1.25mg/kg、5mg/kg和20mg/kg)一次静脉注射至之前移植了过表达HER-2的乳腺癌细胞(BT-474)的裸鼠。监测注射后56天的肿瘤的体积和最终重量。磷酸盐缓冲盐水(PBS)被用作阴性对照，而以20mg/kg的剂量注射曲妥珠单抗作为阳性对照。图18和图19中示出了结果。
由图18和图19可知，与阴性对照相比，阳性对照曲妥珠单抗显著地降低了肿瘤大小；而与阳性对照相比，抗体-连接子-药物偶联物(I-6)、(I-10)和(I-11)更加显著地缩小了肿瘤大小。具体地，在注射偶联物之后28天，移植的肿瘤完全消失，并且在之后并没有复发。
将制备例12中制备的抗体-连接子-药物偶联物(I-16)以三种不同的剂量分别一次静脉注射至之前移植了过表达HER-2的乳腺癌细胞(BT-474)的裸鼠。监测注射后28天的肿瘤的体积和最终重量。磷酸盐缓冲盐水(PBS)被用作阴性对照，而以5mg/kg的剂量注射曲妥珠单抗作为阳性对照。图20和图21中示出了结果。
由图20和图21中的数据可知，与阴性对照相比，阳性对照曲妥珠单抗显著地降低了肿瘤大小，而与阳性对照相比，抗体-连接子-药物偶联物(I-16)进一步降低了肿瘤大小。
此外，将制备例19、21和22中制备的抗体-连接子-药物偶联物(I-23)、(I-25)和(I-26)分别以三种不同的剂量(0.05mg/kg、0.5mg/kg和5mg/kg)一次静脉注射至之前移植了过表达HER-2的乳腺癌细胞(BT-474)的裸鼠。监测注射后28天的肿瘤的体积和最终重量。磷酸盐缓冲盐水(PBS)被用作阴性对照，而以5mg/kg的剂量注射曲妥珠单抗作为阳性对照。图22和图27中示出了结果。
由图20至图27中的数据可知，与阴性对照相比，阳性对照曲妥珠单抗显著地降低了肿瘤大小，而与阳性对照相比，抗体-连接子-药物偶联物(I-23)、(I-25)和(I-26)更加显著性地降低了肿瘤大小。
在其它实验中，将制备例30中制备的(I-34)以三种不同的剂量(0.05mg/kg、0.5mg/kg和5mg/kg)一次静脉注射至移植了过表达HER-2的乳腺癌细胞系(BT-474)的裸鼠。监测注射后28天的肿瘤的体积和最终重量。磷酸盐缓冲盐水(PBS)被用作阴性对照，而以5mg/kg的剂量注射曲妥珠单抗作为阳性对照。图28和图29中示出了结果。
由图28至图29中的数据可知，与阴性对照相比，阳性对照曲妥珠单抗显著地降低了肿瘤大小，而与阳性对照相比，抗体-连接子-药物偶联物(I-34)进一步降低了肿瘤大小。

Claims (52)

1.一种抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，所述抗体-连接子-药物偶联物由化学式I-1表示：
[化学式I-1]
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
抗体部分具有赖氨酸残基；
连接子-药物部分与所述抗体部分的赖氨酸残基直接结合；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1为氢原子、羟基或C1-C4烷氧基；
R2为氢原子或C1-C4烷基；
R3为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
R4为未取代的苯基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基；以及
n为1至5的整数。
2.根据权利要求1所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，其中，
Ab为曲妥珠单抗；
X为甲基、正丙基、正戊基、正辛基或环丙基；
R1为氢原子、羟基或甲氧基；
R2为氢原子或甲基；
R3为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；以及
R4为未取代的苯基，或者为被选自由甲基、甲氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基。
3.根据权利要求1的所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，所述抗体-连接子-药物偶联物选自由下列化合物所组成的组：
其中，n为1至5的整数。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，其中，所述抗体-连接子-药物偶联物具有98％或更高比例的正常抗体结构。
5.一种抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，所述抗体-连接子-药物偶联物由化学式I-2表示：
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
抗体部分具有赖氨酸残基；
连接子-药物部分与所述抗体部分的赖氨酸残基直接结合；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2和R4各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
Ar为未取代的苯基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基；
Z为氮原子；
R5为氢原子或C1-C4烷基；
R6为氢原子、羟基或C1-C4烷氧基；以及
n为1至5的整数。
6.根据权利要求5所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，其中，
Ab为曲妥珠单抗；
X为甲基、正丙基、正戊基、正辛基或环丙基；
R1、R2和R3均为甲基；
R4为氢原子或甲基；
Ar为未取代的苯基，或者为被选自由甲基、甲氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基；
Z为氮原子；
R5为氢原子或甲基；以及
R6为氢原子、羟基或甲氧基。
7.根据权利要求5所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，所述抗体-连接子-药物偶联物选自下列化合物所组成的组：
其中，n为1至5的整数。
8.根据权利要求5至7中任一项所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，其中，所述抗体-连接子-药物偶联物具有92％或更高比例的正常抗体结构。
9.一种抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，所述抗体-连接子-药物偶联物由化学式I-3表示：
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
抗体部分具有赖氨酸残基；
连接子-药物部分与所述抗体部分的赖氨酸残基直接结合；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2和R4各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
R5为氢原子、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；
当Y为氮原子时，R6为氢原子或C1-C4烷基；当Y为氧原子时，不存在R6；以及
n为1至5的整数。
10.根据权利要求9所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，其中，
Ab为曲妥珠单抗；
X为甲基、正丙基、正戊基、正辛基或环丙基；
R1、R2和R3均为甲基；
R4为氢原子或甲基；
R5为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由甲基、甲氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；以及
当Y为氮原子时，R6为氢原子或甲基；当Y为氧原子时，不存在R6。
11.根据权利要求9所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，所述抗体-连接子-药物偶联物选自由下列化合物所组成的组：
其中，n为1至5的整数。
12.根据权利要求9至11中任一项所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，其中，所述抗体-连接子-药物偶联物具有90％或更高比例的正常抗体结构。
13.一种抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，所述抗体-连接子-药物偶联物由化学式I-4表示：
[化学式I-4]
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
抗体部分具有赖氨酸残基；
连接子-药物部分与所述抗体部分的赖氨酸残基直接结合；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2、R4、R7和R8各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
R5为氢原子、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；
当Y为氮原子时，R6为氢原子或C1-C4烷基；当Y为氧原子时，不存在R6；以及
n为1至5的整数。
14.根据权利要求13所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，其中，
Ab为曲妥珠单抗；
X为甲基、正丙基、正戊基、正辛基或环丙基；
R1、R2和R3均为甲基；
R4、R7和R8各自为氢原子或甲基；
R5为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由甲基、甲氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；以及
当Y为氮原子时，R6为氢原子或甲基；当Y为氧原子时，不存在R6。
15.根据权利要求13所述的抗体-连接子-药物偶联物，或其药学上可接受的盐，所述抗体-连接子-药物偶联物选自由下列化合物所组成的组：
其中，n为1至5的整数。
16.根据权利要求13至15中任一项所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，其中，所述抗体-连接子-药物偶联物具有97％或更高比例的正常抗体结构。
17.一种用于制备由化学式I-1所表示的抗体-连接子-药物偶联物的方法，所述方法包括以下步骤：
(i)使下列化学式II-1的化合物与下列化学式III-1的海兔毒素10衍生物发生缩合反应以产生下列化学式IV-1的化合物；
(ii)使下列化学式IV-1的化合物与下列化学式V的化合物发生加成反应以产生下列化学式VI-1的化合物；
(iii)使下列化学式VI-1的化合物与N-羟基琥珀酰亚胺发生缩合反应以产生下列化学式VII-1的化合物；以及
(iv)使下列化学式VII-1的化合物与抗体发生反应，
[化学式II-1]
[化学式III-1]
[化学式IV-1]
[化学式V]
[化学式VI-1]
[化学式VII-1]
[化学式I-1]
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
抗体部分具有赖氨酸残基；
连接子-药物部分与所述抗体部分的赖氨酸残基直接结合；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1为氢原子、羟基或C1-C4烷氧基；
R2为氢原子或C1-C4烷基；
R3为氢原子、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
R4为未取代的苯基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基；以及
n为1至5的整数。
18.根据权利要求17所述的方法，其中，所述步骤(i)的缩合反应在缩合剂和有机碱的存在下进行，所述缩合剂选自由羟基苯并三唑(HOBt)、羟基氮杂苯并三唑(HOAt)和羟基琥珀酰亚胺(HOSu)所组成的组，所述有机碱选自由吡啶和二异丙基乙胺所组成的组。
19.根据权利要求17所述的方法，其中，所述步骤(iii)的缩合反应在缩合剂的存在下进行，所述缩合剂选自由二环己基碳二亚胺(DCC)和(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)所组成的组。
20.根据权利要求17所述的方法，其中，所述步骤(iv)的反应在磷酸盐缓冲液中进行，所述磷酸盐缓冲液具有6.0至8.0的pH并且作为反应溶剂。
21.根据权利要求17所述的方法，其中，所述步骤(iv)的反应在磷酸盐缓冲液和有机溶剂的混合反应溶剂中进行，所述磷酸盐缓冲液具有6.0至8.0的pH。
22.根据权利要求21所述的方法，其中，所述有机溶剂占混合溶剂的50％或更少。
23.根据权利要求17所述的方法，其中，在步骤(iv)中，基于所述抗体，以3至25当量的量使用所述化学式VII-1的化合物。
24.一种用于制备由化学式I-2所表示的抗体-连接子-药物偶联物的方法，所述方法包括以下步骤：
(i)使下列化学式II-1的化合物与下列化学式III-2的海兔毒素10衍生物发生缩合反应以产生下列化学式IV-2的化合物；
(ii)使下列化学式IV-2的化合物与下列化学式V的化合物发生加成反应以产生下列化学式VI-2的化合物；
(iii)使下列化学式VI-2的化合物与N-羟基琥珀酰亚胺发生缩合反应以产生下列化学式VII-2的化合物；以及
(iv)使下列化学式VII-2的化合物与抗体发生反应，
[化学式II-1]
[化学式III-2]
[化学式IV-2]
[化学式V]
[化学式VI-2]
[化学式VII-2]
[化学式I-2]
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
抗体部分具有赖氨酸残基；
连接子-药物部分与所述抗体部分的赖氨酸残基直接结合；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2和R4各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
Ar为未取代的苯基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基；
Z为氮原子；
R5为氢原子或C1-C4烷基；
R6为氢原子、羟基或C1-C4烷氧基；以及
n为1至5的整数。
25.根据权利要求24所述的方法，其中，所述步骤(i)的缩合反应在缩合剂和有机碱的存在下进行，所述缩合剂选自由羟基苯并三唑(HOBt)、羟基氮杂苯并三唑(HOAt)和羟基琥珀酰亚胺(HOSu)所组成的组，所述有机碱选自由吡啶和二异丙基乙胺所组成的组。
26.根据权利要求24所述的方法，其中，所述步骤(iii)的缩合反应在缩合剂的存在下进行，所述缩合剂选自由二环己基碳二亚胺(DCC)和(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)所组成的组。
27.根据权利要求24所述的方法，其中，所述步骤(iv)的反应在磷酸盐缓冲液中进行，所述磷酸盐缓冲液具有6.0至8.0的pH并且作为反应溶剂。
28.根据权利要求24所述的方法，其中，所述步骤(iv)的反应在磷酸盐缓冲液和有机溶剂的混合反应溶剂中进行，所述磷酸盐缓冲液具有6.0至8.0的pH。
29.根据权利要求28所述的方法，其中，所述有机溶剂占混合溶剂的50％或更少。
30.根据权利要求24所述的方法，其中，在步骤(iv)中，基于所述抗体，以3至25当量的量使用所述化学式VII-2的化合物。
31.一种用于制备由化学式I-3所表示的抗体-连接子-药物偶联物的方法，所述方法包括以下步骤：
(i)使下列化学式II-1的化合物与下列化学式III-3的海兔毒素10衍生物发生缩合反应以产生下列化学式IV-3的化合物；
(ii)使下列化学式IV-3的化合物与下列化学式V的化合物发生加成反应以产生下列化学式VI-3的化合物；
(iii)使下列化学式VI-3的化合物与N-羟基琥珀酰亚胺发生缩合反应以产生下列化学式VII-3的化合物；以及
(iv)使下列化学式VII-3的化合物与抗体发生反应，
[化学式II-1]
[化学式III-3]
[化学式IV-3]
[化学式V]
[化学式VI-3]
[化学式VII-3]
[化学式I-3]
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
抗体部分具有赖氨酸残基；
连接子-药物部分与所述抗体部分的赖氨酸残基直接结合；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2和R4各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
R5为氢原子、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；
当Y为氮原子时，R6为氢原子或C1-C4烷基；当Y为氧原子时，不存在R6；以及
n为1至5的整数。
32.根据权利要求31所述的方法，其中，所述步骤(i)的缩合反应在缩合剂和有机碱的存在下进行，所述缩合剂选自由羟基苯并三唑(HOBt)、羟基氮杂苯并三唑(HOAt)和羟基琥珀酰亚胺(HOSu)所组成的组，所述有机碱选自由吡啶和二异丙基乙胺所组成的组。
33.根据权利要求31所述的方法，其中，所述步骤(iii)的缩合反应在缩合剂的存在下进行，所述缩合剂选自由二环己基碳二亚胺(DCC)和(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)所组成的组。
34.根据权利要求31所述的方法，其中，所述步骤(iv)的反应在磷酸盐缓冲液中进行，所述磷酸盐缓冲液具有6.0至8.0的pH并且作为反应溶剂。
35.根据权利要求31所述的方法，其中，所述步骤(iv)的反应在磷酸盐缓冲液和有机溶剂的混合反应溶剂中进行，所述磷酸盐缓冲液具有6.0至8.0的pH。
36.根据权利要求35所述的方法，其中，所述有机溶剂占混合溶剂的50％或更少。
37.根据权利要求31所述的方法，其中，在步骤(iv)中，基于所述抗体，以3至25当量的量使用所述化学式VII-3的化合物。
38.一种用于制备由化学式I-4所表示的抗体-连接子-药物偶联物的方法，所述方法包括以下步骤：
(i)使下列化学式II-2的化合物与下列化学式III-4的海兔毒素10衍生物发生缩合反应以产生下列化学式IV-4的化合物；
(ii)使下列化学式IV-4的化合物与下列化学式V的化合物发生加成反应以产生下列化学式VI-4的化合物；
(iii)使下列化学式VI-4的化合物与N-羟基琥珀酰亚胺发生缩合反应以产生下列化学式VII-4的化合物；以及
(iv)使下列化学式VII-4的化合物与抗体发生反应，
[化学式II-2]
[化学式III-4]
[化学式IV-4]
[化学式V]
[化学式VI-4]
[化学式VII-4]
[化学式I-4]
其中，
Ab为曲妥珠单抗；
抗体部分具有赖氨酸残基；
连接子-药物部分与所述抗体部分的赖氨酸残基直接结合；
X为C1-C8烷基或C3-C6环烷基；
R1、R2、R4、R7和R8各自独立地为氢原子或C1-C4烷基；
R3为C1-C4烷基；
R5为氢原子、氨基、氧代基(＝O)或肟基(＝N-OH)；
Ar为未取代的苯基或萘基，或者为被选自由C1-C4烷基、C1-C4烷氧基和卤素原子组成的组中的至少一种取代基所取代的苯基或萘基；
Y为氮原子或氧原子；
当Y为氮原子时，R6为氢原子或C1-C4烷基；当Y为氧原子时，不存在R6；以及
n为1至5的整数。
39.根据权利要求38所述的方法，其中，所述步骤(i)的缩合反应在缩合剂和有机碱的存在下进行，所述缩合剂选自由羟基苯并三唑(HOBt)、羟基氮杂苯并三唑(HOAt)和羟基琥珀酰亚胺(HOSu)所组成的组，所述有机碱选自由吡啶和二异丙基乙胺所组成的组。
40.根据权利要求38所述的方法，其中，所述步骤(iii)的缩合反应在缩合剂的存在下进行，所述缩合剂选自由二环己基碳二亚胺(DCC)和(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)所组成的组。
41.根据权利要求38所述的方法，其中，所述步骤(iv)的反应在磷酸盐缓冲液中进行，所述磷酸盐缓冲液具有6.0至8.0的pH并且作为反应溶剂。
42.根据权利要求38所述的方法，其中，所述步骤(iv)的反应在磷酸盐缓冲液和有机溶剂的混合反应溶剂中进行，所述磷酸盐缓冲液具有6.0至8.0的pH。
43.根据权利要求42所述的方法，其中，所述有机溶剂占混合溶剂的50％或更少。
44.根据权利要求38所述的方法，其中，在步骤(iv)中，基于所述抗体，以3至25当量的量使用所述化学式VII-4的化合物。
45.一种抗癌组合物，所述抗癌组合物包含根据权利要求1至3中任一项所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
46.根据权利要求45所述的抗癌组合物，其中，所述抗癌组合物用于治疗乳腺癌。
47.一种抗癌组合物，所述抗癌组合物包含根据权利要求5至7中任一项所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
48.根据权利要求47所述的抗癌组合物，其中，所述抗癌组合物用于治疗乳腺癌。
49.一种抗癌组合物，所述抗癌组合物包含根据权利要求9至11中任一项所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
50.根据权利要求49所述的抗癌组合物，其中，所述抗癌组合物用于治疗乳腺癌。
51.一种抗癌组合物，所述抗癌组合物包含根据权利要求13至15中任一项所述的抗体-连接子-药物偶联物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。
52.根据权利要求51所述的抗癌组合物，其中，所述抗癌组合物用于治疗乳腺癌。
CN201480003980.9A 2013-01-03 2014-01-02 抗体‑连接子‑药物偶联物、其制法及包含其的抗癌药物组合物 Expired - Fee Related CN105051032B (zh)

Applications Claiming Priority (11)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20130000771 2013-01-03
KR10-2013-0000771 2013-01-03
KR20130017588 2013-02-19
KR10-2013-0017585 2013-02-19
KR1020130017585A KR101597100B1 (ko) 2013-01-03 2013-02-19 항체-링커-약물 결합체, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 항암제 조성물
KR20130017591 2013-02-19
KR20130017587 2013-02-19
KR10-2013-0017587 2013-02-19
KR10-2013-0017591 2013-02-19
KR10-2013-0017588 2013-02-19
PCT/KR2014/000005 WO2014107024A1 (ko) 2013-01-03 2014-01-02 항체-링커-약물 결합체, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 항암제 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105051032A CN105051032A (zh) 2015-11-11
CN105051032B true CN105051032B (zh) 2017-08-15

Family

ID=54010781

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480003980.9A Expired - Fee Related CN105051032B (zh) 2013-01-03 2014-01-02 抗体‑连接子‑药物偶联物、其制法及包含其的抗癌药物组合物

Country Status (5)

Country Link
US (1) US9814784B2 (zh)
EP (1) EP2927227A4 (zh)
JP (1) JP6262768B2 (zh)
CN (1) CN105051032B (zh)
WO (1) WO2014107024A1 (zh)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230142808A (ko) 2012-10-11 2023-10-11 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 글리신아미드 화합물의 제조 방법
EP2910573B1 (en) 2012-10-19 2020-02-19 Daiichi Sankyo Company, Limited Antibody-drug conjugate produced by binding through linker having hydrophilic structure
SG10201705150RA (en) 2012-12-21 2017-07-28 Bioalliance Cv Hydrophilic self-immolative linkers and conjugates thereof
KR102288093B1 (ko) 2013-12-25 2021-08-09 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 항 trop2 항체-약물 컨쥬게이트
PL3466976T3 (pl) 2014-01-31 2021-12-20 Daiichi Sankyo Company, Limited Koniugat przeciwciało anty-HER2-lek
EP3789042A1 (en) 2014-04-10 2021-03-10 Daiichi Sankyo Company, Limited Method for producing anti-her3 antibody-drug conjugate
ES2754348T3 (es) 2014-04-10 2020-04-17 Daiichi Sankyo Co Ltd Conjugado de (anticuerpo anti-HER2)-fármaco
CA2952876A1 (en) 2014-06-20 2015-12-23 Bioalliance C.V. Anti-folate receptor alpha (fra) antibody-drug conjugates and methods of using thereof
US10590165B2 (en) * 2015-01-28 2020-03-17 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody drug conjugates
EA201792312A1 (ru) * 2015-04-21 2018-06-29 ЭББВИ СТЕМСЕНТРКС ЭлЭлСи Конструкции на основе калихеамицина и способы их применения
KR20180021723A (ko) 2015-06-29 2018-03-05 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 항체-약물 콘주게이트의 선택적 제조 방법
CN106729743B (zh) * 2015-11-23 2021-09-21 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 抗ErbB2抗体-药物偶联物及其组合物、制备方法和应用
RU2766000C2 (ru) 2016-01-08 2022-02-07 АльтруБио Инк. Четырехвалентные антитела к psgl-1 и их применения
CN107029244B (zh) * 2016-02-04 2021-04-27 浙江昭华生物医药有限公司 抗her2抗体-药物偶联物及其应用
CN109476648B (zh) * 2016-06-06 2022-09-13 豪夫迈·罗氏有限公司 司维司群抗体-药物缀合物和使用方法
EP3552626A4 (en) 2016-12-12 2020-06-10 Daiichi Sankyo Company, Limited ASSOCIATION OF AN ANTIBODY DRUG CONJUGATE AND AN IMMUNE CONTROL POINT INHIBITOR
CA3050668C (en) 2017-01-17 2023-08-15 Daiichi Sankyo Company, Limited Anti-gpr20 antibody and anti-gpr20 antibody-drug conjugate
JP7181181B2 (ja) 2017-02-28 2022-11-30 第一三共株式会社 抗ｈｅｒ３抗体－薬物コンジュゲート投与によるｅｇｆｒ－ｔｋｉ抵抗性の非小細胞肺癌の治療方法
TWI794230B (zh) 2017-05-15 2023-03-01 日商第一三共股份有限公司 抗ｃｄｈ６抗體及抗ｃｄｈ６抗體-藥物結合物、以及其製造方法
WO2019024979A1 (en) 2017-07-31 2019-02-07 Institute For Research In Biomedicine FUNCTIONAL DOMAIN ANTIBODIES IN THE ELBOW REGION
CN107652219B (zh) * 2017-08-14 2021-06-08 上海新理念生物医药科技有限公司 四马来酰亚胺型连接子及其应用
WO2019044946A1 (ja) 2017-08-31 2019-03-07 第一三共株式会社 抗体－薬物コンジュゲートの新規製造方法
JP7296396B2 (ja) * 2017-09-08 2023-06-22 バイリ－バイオ（チェンドゥ）ファーマスーティカル シーオー．，エルティーディー． アマニチン類抗体複合物
CN117815404A (zh) 2018-05-18 2024-04-05 第一三共株式会社 抗-muc1抗体-药物缀合物
US20210254106A1 (en) 2018-05-30 2021-08-19 Institute For Research In Biomedicine Engineering b lymphocytes by utilizing endogenous activation-induced cytidine deaminase
US20220072144A1 (en) 2018-09-20 2022-03-10 Daiichi Sankyo Company, Limited Treatment of her3-mutated cancer by administration of anti-her3 antibody-drug conjugate
US20220202948A1 (en) * 2019-02-13 2022-06-30 Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. Agent for Eliminating Pluripotent Stem Cells
EP4146283A1 (en) 2020-05-03 2023-03-15 Levena (Suzhou) Biopharma Co., Ltd. Antibody-drug conjugates (adcs) comprising an anti-trop-2 antibody, compositions comprising such adcs, as well as methods of making and using the same
TW202216212A (zh) 2020-07-17 2022-05-01 日商第一三共股份有限公司 抗體-藥物結合物之製造方法
KR20230154994A (ko) 2021-03-10 2023-11-09 마빌론 아게 Tdp-43에 대한 항체 및 이의 용도
TW202330015A (zh) * 2021-11-17 2023-08-01 美商斯布雷克薩四號公司 作為治療劑之肽微管蛋白抑制劑之肽結合物

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1938046A (zh) * 2003-11-06 2007-03-28 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
US7750116B1 (en) * 2006-02-18 2010-07-06 Seattle Genetics, Inc. Antibody drug conjugate metabolites

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
WO2004005326A2 (de) * 2002-07-09 2004-01-15 Morphochem Aktiengellschaft Fu Tubulysinkonjugate
SI1791565T1 (sl) * 2004-09-23 2016-08-31 Genentech, Inc. Cisteinsko konstruirana protitelesa in konjugati
JP2008519863A (ja) * 2004-11-12 2008-06-12 シアトル ジェネティクス インコーポレイティッド Ｎ末端にアミノ安息香酸単位を有するオーリスタチン
CN103826661B (zh) * 2011-04-21 2019-03-05 西雅图基因公司 新的结合剂-药物缀合物(adc)及其用途
WO2013092998A1 (en) * 2011-12-23 2013-06-27 Innate Pharma Enzymatic conjugation of antibodies

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1938046A (zh) * 2003-11-06 2007-03-28 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
US7750116B1 (en) * 2006-02-18 2010-07-06 Seattle Genetics, Inc. Antibody drug conjugate metabolites

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Antibody-Drug Conjugates: Linking Cytotoxic Payloads to Monoclonal Antibodies;Laurent Ducry and Bernhard Stump;《Bioconjugate Chem. 》;20090921;第21卷;第5–13页 *
Contribution of Linker Stability to the Activities of Anticancer Immunoconjugates;Stephen C. Alley等;《Bioconjugate Chem. 》;20080304;第19卷;第759–765页 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2927227A1 (en) 2015-10-07
US9814784B2 (en) 2017-11-14
JP2016504355A (ja) 2016-02-12
EP2927227A4 (en) 2015-12-30
CN105051032A (zh) 2015-11-11
US20150366990A1 (en) 2015-12-24
JP6262768B2 (ja) 2018-01-17
WO2014107024A1 (ko) 2014-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105051032B (zh) 抗体‑连接子‑药物偶联物、其制法及包含其的抗癌药物组合物
CN109069488B (zh) 乙型肝炎抗病毒剂
TWI476199B (zh) 用於治療疾病之巨環衍生物
CA3078218C (en) Antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate
TW408124B (en) Antibiotic compounds, preparation process thereof and composition comprising same
EP3604311A1 (en) Pyrrolobenzodiazepine dimer precursor and ligand-linker conjugate compound thereof
CN107001378B (zh) 吡咯并嘧啶化合物
CN109195965A (zh) Wdr5蛋白质-蛋白质结合的抑制剂
TWI714661B (zh) 新穎念珠藻素化合物及接合物、其製備與其治療用途
CN105451773A (zh) 细胞增殖抑制剂及其缀合物
DE3122479A1 (de) N-(vinblastin-23-oyl)-aminosaeurederivate
CA2264063C (en) Cryptophycin compounds
JP2023549547A (ja) 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子のモジュレーターとして使用するための１，３，４－オキサジアゾール環を含有する大環状化合物
EP3124486B1 (en) Substituted nitrogen-containing heterocyclic derivatives, pharmaceutical compositions comprising the same and applications of antitumor thereof
CN113195469A (zh) 含氮并环化合物、其制备方法及用途
AU2006263111A1 (en) Benzenoid ansamycin derivative
WO2023284651A1 (zh) N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺类化合物及其应用
EP3778573B1 (en) Compound with anticancer activity
SA04250302A (ar) 6ـفينيل(مستبدل) تريازولوبيريميدينات كعوامل مضاده للسرطان
EP3992193A1 (en) Pyrazolopyrimidine compound, preparation method for same, and applications thereof
WO2023221975A1 (zh) 包含蛋白降解剂类生物活性化合物的抗体药物偶联物及其制备方法和用途
KR101597105B1 (ko) 항체-링커-약물 결합체, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 항암제 조성물
KR101597101B1 (ko) 항체-링커-약물 결합체, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 항암제 조성물
WO2024012524A1 (zh) 抗体药物偶联物及其制备方法和用途
KR101597110B1 (ko) 항체-링커-약물 결합체, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 항암제 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20170815

Termination date: 20190102

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee