CN105050623A

CN105050623A - Pi3k抑制剂和c-met抑制剂的组合

Info

Publication number: CN105050623A
Application number: CN201380043882.3A
Authority: CN
Inventors: G·卡波尼格罗; X·黄; J·莱哈尔; H-Q·王
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2012-08-16
Filing date: 2013-08-14
Publication date: 2015-11-11
Anticipated expiration: 2033-08-14
Also published as: JP2015529194A; MX369518B; AU2016238903A1; US20200253980A1; WO2014028566A1; JP2020079243A; HK1211476A1; US20150216870A1; US20220280523A1; US20190083500A1; ES2901712T3; JP6970217B2; AU2019226212B2; RU2705095C2; CA2879704A1; KR20150043328A; CN105050623B; JP6644042B2; KR20210049187A; JP2018035188A

Abstract

本发明涉及包含以下的药物组合：(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，用于同时、分开或顺序施用以治疗增殖性疾病，特别是c-Met依赖性增殖性疾病；包含所述组合的药物组合物；治疗患有增殖性疾病的对象的方法，所述方法包括向有需要的对象施用该组合；该组合在治疗增殖性疾病中的用途；以及包含该组合的商业包装物。<pb pnum="1" />

Description

PI3K抑制剂和C-MET抑制剂的组合

技术领域

本发明涉及包含以下的药物组合，其包括(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂或其药学上可接受盐和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，用于同时、分开或顺序施用以治疗增殖性疾病，特别是c-Met依赖性增殖性疾病；包含所述组合的药物组合物；治疗患有增殖性疾病的对象的方法，包括向有需要的对象施用该组合；该组合在治疗增殖性疾病中的用途；以及包含该组合的商业包装物。

背景技术

蛋白激酶(PK)是一组调节多样化的且重要的生物过程的酶，所述生物过程包括细胞生长、存活和分化、器官形成和形态发生、新血管形成、组织修复和再生等。蛋白激酶通过催化蛋白(或底物)的磷酸化从而调节不同生物背景下底物的细胞活性来发挥其生理功能。

蛋白激酶能分为受体型和非受体型。受体酪氨酸激酶(RTK)具有胞外部分、跨膜结构域和胞内部分，而非受体酪氨酸激酶完全为胞内。RTK介导的信号转导通常开始于与特异生长因子(配体)发生胞外相互作用，通常随后是受体二聚化，刺激内在蛋白酪氨酸激酶活性，和受体转磷酸。从而为胞内信号转导分子形成结合位点并导致与一系列胞质信号分子形成复合体，促进合适细胞反应如细胞分裂、分化、代谢效应和胞外微环境变化。非受体型酪氨酸激酶也由多个亚家族组成，包括Src、Btk、Abl、Fak和Jak。

原癌基因c-Met是独特的异二聚受体酪氨酸激酶亚家族成员，包括Met、Ron、和Sea(Birchmeier,C.等,Nat.Rev.Mol.CellBiol.2003,4(12):915-925；Christensen,J.G.等,CancerLett.2005,225(1):1-26)。c-Met的唯一高亲和性配体是肝细胞生长因子(HGF)，也称为分散因子(SF)。HGF结合c-Met可诱导经自体磷酸化的受体活化，引起受体依赖性信号传导增加。c-Met和HGF广泛表达于多种器官中，但其表达通常分别限于上皮和间充质来源的细胞。c-Met(或c-Met信号通路)在正常组织和人类恶性肿瘤如癌症中的生物功能已有详细记载(Christensen,J.G.等,CancerLett.2005,225(1):1-26；Corso,S.等,TrendsinMol.Med.2005,11(6):284-292)。

正常哺乳动物发育需要HGF和c-Met，在HGF-缺失和c-Met-缺失的小鼠中报告的异常与器官形态发生过程中的近胚胎表达和上皮间质转化缺陷一致(Christensen,J.G.等,CancerLett.2005,225(1):1-26)。与这些发现一致的是，HGF/c-Met通路的信号转导和随后的生物效应显示出对发育期间的上皮间质相互作用以及对细胞迁移、侵袭、细胞增殖及存活、血管生成、形态发生和三维管结构组成的调节(如肾小管细胞、腺形成)是重要的。c-Met通路活化在给定细胞/组织中的特异性结果是高度背景依赖性的。

有证据显示失调的c-Met通路在肿瘤形成、生长、维持和进展中起重要作用且有时是成因(在基因改变的情况中)((Birchmeier,C.等,Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.2003,4(12):915-925；Boccaccio,C.等,Nat.Rev.Cancer2006,6(8):637-645；Christensen,J.G.等,CancerLett.2005,225(1):1-26)。HGF和/或c-Met在大多数人类癌症中的相当一部分中过表达，且通常与不良临床结果相关，如更严重疾病、疾病进展、肿瘤转移和缩短的患者存活期。此外，HGF/c-Met蛋白水平高的患者对化疗和放疗更耐受。除了异常HGF/c-Met表达，c-Met受体还能通过基因突变(种系突变和体细胞突变)和基因扩增在癌症患者中激活。尽管基因扩增和突变是患者中报告的最常见基因改变，所述受体还能通过缺失、截断和基因重排以及异常受体加工和缺陷型负调控机制来活化。

此外，活化后，cMET激活多种胞内信号通路，包括但不限于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt通路、ERK1/2、p38、和STAT3。PI3K包括脂质和丝氨酸/苏氨酸激酶家族，其催化磷酸转移到肌醇脂质的D-3’位以产生磷脂酰肌醇-3-磷酸(PIP)、磷脂酰肌醇-3,4-二磷酸(PIP2)和磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸(PIP3)，进而通过使含普列克底物蛋白同源域、FYVE、Phox和其它磷脂结合域的蛋白停靠进多种通常位于质膜的信号复合体内来充当信号级联的第二信使(Vanhaesebroeck等.,Annu.Rev.Biochem70:535(2001)；Katso等.,Annu.Rev.CellDev.Biol.17:615(2001))。两种1型PI3K中，1A型PI3K是如下组成的杂二聚体：催化p110亚基(α、β、δ异构体)与调节亚基组成型相联，所述调节亚基可以是p85α、p55α、p50α、p85β或p55γ。1B型亚类具有一个家族成员，即由催化p110γ亚基与2个调节亚基p101或p84之一相联组成的杂二聚体(Fruman等.,AnnuRev.Biochem.67:481(1998)；Suire等.,Curr.Biol.15:566(2005))。p85/55/50亚基的模块结构域包括Src同源(SH2)结构域，该结构域在特定序列背景下结合活化受体和胞质酪氨酸激酶上的磷酸酪氨酸残基，引起1A型PI3K的活化和定位。1B型PI3K由G蛋白偶联受体直接活化，所述受体结合一个多样化的肽和非肽配体库(Stephens等.,Cell89:105(1997))；Katso等.,Annu.Rev.CellDev.Biol.17:615-675(2001))。PI3K通路是关键细胞过程的重要调节因子，所述细胞过程包括增殖、存活、趋化性、细胞运输、运动性、代谢、炎性和过敏反应、转录和翻译(Cantley等.,Cell64:281(1991)；Escobedo和Williams,Nature335:85(1988)；Fantl等.,Cell.,69:413(1992).)。

尽管在医学和许多癌症患者的治疗选择方面有显著进展，但仍需要有效和安全的治疗剂以及能施用于有效长期治疗癌症的新的组合疗法。现在发现包含以下的组合对治疗增殖性疾病，特别是c-Met依赖性增殖性疾病尤其有效：(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂，特别是2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。预期此组合的抗增殖效果高于任一类单独成分能达到的最大效果。

发明内容

本发明关于一种药物组合，其包括(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，用于同时、分开或顺序施用以治疗增殖性疾病，特别是c-Met依赖性增殖性疾病。本发明组合特别用于治疗肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

在一个优选实施方式中，式(I)化合物是2-甲基-2-[4-(3-甲基-2-氧-8-喹啉-3-基-2,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)-苯基]-丙腈(“化合物A”)或其单甲苯磺酸盐和8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮(“化合物B”)。

在一个优选实施方式中，式(II)化合物是5-(2,6-二-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-4-三氟甲基-吡啶-2-基胺(“化合物C”)或其盐酸盐。

在一个优选实施方式中，式(III)化合物是(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物D”)或其药学上可接受盐。

在一个优选实施方式中，c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂是2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。

一方面，本发明涉及治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括向有需要的对象施用治疗上有效抵御所述增殖性疾病的量的以下组合：(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐。优选地，所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。

在另一个实施方式中，本发明涉及抑制患癌对象中转移形成的方法，所述方法包括向有需要的对象施用治疗上有效抵御所述增殖性疾病的量的以下组合：(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐。优选地，所述癌症是c-Met依赖性癌症。

一方面，本发明涉及本发明组合在治疗增殖性疾病和/或在制备治疗增殖性疾病药物中的用途。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是癌症。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。

一方面，本发明涉及本发明组合在抑制患癌对象内转移形成和/或在制备抑制患癌对象中转移形成的药物中的用途。在一个优选实施方式中，所述癌症是c-Met依赖性癌症。

一方面，本发明提供含定量的本发明组合和一种或多种药学上可接受载体的药物组合物，所述量在治疗上共同有效抵御增殖性疾病，特别是c-Met依赖性增殖性疾病。此药物组合物可由治疗剂(a)和(b)组成，其作为固定组合以单一制剂或单位剂型通过任意合适的途径施用于对象。或者，所述治疗剂如磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐均作为非固定组合以分开的药物组合物或制剂或单位剂型施用于对象，并且无特定时间限制地同时、同步或顺序施用。

一方面，本发明提供一种商业包装物，其包含作为治疗剂的本发明组合以及说明书，所述说明书用于在治疗增殖性疾病特别是肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤中同时、分开或顺序施用本发明组合。

附图说明

图1显示化合物C和2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺的组合剂量对H4人类成胶质细胞瘤模型中增殖的效果。

图2显示化合物C和2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺的组合剂量对U87-MG人类成胶质细胞瘤模型中增殖的效果。

图3显示化合物C和2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺的组合剂量对A172人类成胶质细胞瘤模型中增殖的效果。

图4显示化合物C和2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺的组合剂量对LN229人类成胶质细胞瘤模型中增殖的效果。

图5显示与载剂对照和两种单一治疗相比，2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺和化合物D的组合在NCI-H1993人类非小细胞肺癌异种移植模型中的比较平均抗肿瘤生长效果。

发明详述

本发明涉及一种药物组合，其包括：(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，用于同时、分开或顺序施用以治疗增殖性疾病，特别是c-Met依赖性增殖性疾病。本发明组合特别适用于治疗肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

除非另有明确说明，本文所用的一般术语用下列含义定义：

除非另有说明，术语“包含”和“包括”以开放式和无限制含义在本文使用。

在描述本发明的上下文(尤其是权利要求的上下文)中术语“一”和“所述”以及类似提及视作涵盖单数和复数，除了本文另有说明或与上下文明显矛盾。复数形式用于化合物、盐等时，还表示单一化合物、盐等。

术语“组合”或“药物组合”在本文中定义成用于联合给药的单一剂量单位形式中的固定组合、非固定组合或含各部分的药盒，其中磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐可同时单独地施用或在允许治疗剂显示协作(如协同)效应的时间间隔内单独施用。

术语“固定组合”指治疗剂，例如磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂，以单个实体或剂型同时施用于对象。

术语“非固定组合”指所述治疗剂，例如磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，作为单独实体或剂型无特定时间限制地同时、同步或顺序施用于对象，其中所述施用在有需要的对象如哺乳动物或人体内提供治疗有效水平的3种化合物。

术语“含各部分的药盒”指以上定义的治疗剂(a)和(b)，其单独或通过使用具有不同量治疗剂(a)和(b)的不同固定组合来配制剂量，即同时地或在不同时间点。然后，药盒的各部分能，例如同时或按时间顺序交叉施用，即在不同时间点和就任何药盒部分而言具有相同或不同的时间间隔。组合制剂中待施用的治疗剂(a)与治疗剂(b)总量的比例可变化，例如为了满足待治疗患者亚群的需求或单一患者的需求。

术语“磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂”或“PI3K抑制剂”在本文中定义为靶向、减少或抑制磷脂酰肌醇3-激酶的化合物。磷脂酰肌醇3-激酶活性已显示响应许多激素和生长因子的刺激而增加，包括胰岛素、血小板衍生生长因子、胰岛素样生长因子、上皮生长因子、集落刺激因子和肝细胞生长因子，且参与涉及细胞生长和转化的过程。

术语“c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂”在本文中定义为靶向、减少或抑制c-Met受体酪氨酸激酶活性的化合物。

术语“c-Met依赖性增殖性疾病”或“c-Met依赖性癌症”指c-Met和/或HGF/c-Met信号通路失调的那些增殖性疾病，特别是HGF/c-Met基因过表达和扩增、HGF-依赖性自分泌和旁分泌激活和/或c-Met受体基因突变(种系突变和体细胞突变)。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是c-Met和/或HGF/c-Met信号通路失调的癌症。“c-Met和/或HGF/c-Met信号通路失调”意在包括经多种机制活化c-Met类受体酪氨酸激酶，所述机制包括但不限于HGF-依赖性自分泌和旁分泌激活、HGF/c-met基因过表达和/或扩增、点突变、缺失、截断、重排以及异常c-Met受体加工和缺陷型负调控机制。在一个优选实施方式中，术语“c-Met依赖性增殖性疾病”或“c-Met依赖性癌症”包括HGF/c-met基因过表达和扩增。

术语“药物组合物”在本文中定义为含有至少一种待施用于对象如哺乳动物或人的治疗剂的混合物或溶液，用于治疗影响对象的特定疾病或病症。

术语“药学上可接受”在本文中定义为在合理医学判断范围内适于接触对象如哺乳动物或人组织的那些化合物、材料、组合物和/或剂型，而没有过度毒性、刺激、过敏反应和其它问题并发症，并具有合理的益处/风险比。

本文所用的术语“治疗”或“处理”包括缓解、减少或改善至少一种对象症状或引起疾病进展延迟的治疗。例如，治疗可以是减少一种或多种疾病症状或者完全消除疾病，如癌症。在本发明意义范围内，术语“治疗”还指阻滞、延迟疾病发生(即疾病临床表现前的阶段)和/或降低疾病发展或恶化的风险。

本文所用的术语“共同治疗活性”或“联合治疗效果”指治疗剂可以以一定时间间隔分开(采用按时间顺序交叉方式，特别是顺序特异性方式)施用，从而其在待治疗的温血动物尤其是人中优选仍显示(优选协同)相互作用(联合治疗效果)。情况是否如此能通过下列血液水平测定，显示2种治疗剂在至少某些时间间隔中共同存在于待治疗人的血液内。

术语“药学上有效量”或“临床有效量”的治疗剂药物组合是指，相比于用该组合所治疗增殖性疾病的基线临床可观察征象和症状，足以提供明显改善的量。

本文所用的术语“协同效应”指2种治疗剂产生某一效果的作用，所述效果例如减缓增殖性疾病尤其是癌症的症状进展或其症状，其超过独自施用各治疗剂效果的简单叠加，所述2种治疗剂如(a)式(I)化合物例如化合物A或化合物B或其药学上可接受盐和至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，或(b)式(II)化合物例如化合物C或其药学上可接受盐和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，或(c)式(III)化合物，化合物D或其药学上可接受盐和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐。协同效应能用合适的方法如Sigmoid-Emax方程(Holford,N.H.G.和Scheiner,L.B.,Clin.Pharmacokinet.6:429-453(1981))、Loewe加和方程(Loewe,S.和Muischnek,H.,Arch.Exp.PatholPharmacol.114:313-326(1926))和中效公式(Chou,T.C.和Talalay,P.,Adv.EnzymeRegul.22:27-55(1984))计算。上述各方程能应用于实验数据以产生对应图表从而协助评价药物组合的效果。与上述方程相关的对应图表分别是浓度-效果曲线、等效线图曲线和组合指数曲线。

本文所用的术语“对象”或“患者”包括动物，其能患有增殖性疾病或任何直接或间接涉及肿瘤的疾病或者受其影响。对象的实例包括哺乳动物，如人、狗、牛、马、猪、绵羊、山羊、猫、小鼠、兔、大鼠和转基因非人动物。在优选的实施方式中，所述对象是人，例如患有、有风险患有、或潜在地能患有增殖性疾病的人。

术语“约”或“大致”应表示在给定值或范围的10％内，更优选在给定值或范围的5％内。

本发明的组合包括选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的PI3K抑制剂或其药学上可接受盐。

WO2006/122806和WO2008/103636描述咪唑喹啉衍生物，发现其抑制PI3K和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的活性。适合本发明的特定咪唑喹啉衍生物、其制备和含有其的合适药物制剂描述于WO2006/122806和WO2008/103636，并且包括式(I)化合物

其中

R₁是萘基或苯基，其中所述苯基被独立选自卤素的1个或2个取代基取代；未被取代或被卤素、氰基、咪唑基或三唑基取代的低级烷基；环烷基；被独立选自下组的1个或2个取代基取代的氨基：低级烷基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基和低级烷氧基低级烷基氨基；未被取代或被独立选自低级烷基和低级烷基磺酰基的1个或2个取代基取代的哌嗪基；2-氧代-吡咯烷基；低级烷氧基低级烷基；咪唑基；吡唑基；和三唑基；

R₂是O或S；

R₃是低级烷基；

R₄是未被取代或被卤素、氰基、低级烷基、低级烷氧基取代的吡啶基，或者未被取代或被低级烷基取代的哌嗪基；未被取代或被低级烷氧基取代的嘧啶基；未被取代或被卤素取代的喹啉基；喹喔啉基；或用烷氧基取代的苯基；

R₅是氢或卤素；

n是0或1；

R₆是氧化基；

附加条件是若n＝1，则携带基团R₆的N原子具有正电荷；

R₇是氢或氨基。

式(I)化合物定义所用的基团和符号具有如WO2006/122806所公开的意义，其通过引用全文并入本申请。

一种PI3K抑制剂即式(I)化合物可以以游离碱或其药学上可接受盐形式存在于组合中。式(I)化合物的合适盐包括例如作为酸加成盐形成的那些，优选使用有机或无机酸。例如，合适的无机酸是氢卤酸，如盐酸、硫酸或磷酸。例如，合适的有机酸是羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、十二烷酸、乙醇酸、乳酸、富马酸、琥珀酸、丙二酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、氨基酸如谷氨酸或天冬氨酸、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、环己烷羧酸、金刚烷羧酸、苯甲酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、邻苯二甲酸、苯乙酸、苦杏仁酸、肉桂酸、甲磺酸或乙磺酸、2-羟基乙磺酸、乙烷-1,2-二磺酸、苯磺酸、4-甲苯磺酸、2-萘磺酸、1,5-萘二磺酸、2-或3-甲苯磺酸、甲基硫酸、乙基硫酸、十二烷基硫酸、N-环己基氨基磺酸、N-甲基-、N-乙基或N-丙基-氨基磺酸，或其它有机质子酸如抗坏血酸。

用于本发明组合的优选的式(I)化合物是2-甲基-2-[4-(3-甲基-2-氧-8-喹啉-3-基-2,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)-苯基]-丙腈(“化合物A”)或其单甲苯磺酸盐和8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮(“化合物B”)。例如，化合物A和其单甲苯磺酸盐的合成分别描述于WO2006/122806的实施例7和152-3中。例如，化合物B的合成描述于WO2006/122806的实施例86中。在一个优选实施方式中，式(I)化合物是化合物A或其单甲苯磺酸盐。

WO07/084786描述被发现能抑制PI3K活性的嘧啶衍生物。适合本发明组合的特定PI3K抑制剂、其制备和含有其的合适药物制剂描述于WO07/084786，且包括式(II)化合物：

其中W是CR_w或N，其中

R_w选自下组：

(1)氢，

(2)氰基，

(3)卤素，

(4)甲基，

(5)三氟甲基，

(6)磺酰胺；

R₁选自下组：

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)取代和未被取代的烷基，

(6)取代和未被取代的烯基，

(7)取代和未被取代的炔基，

(8)取代和未被取代的芳基，

(9)取代和未被取代的杂芳基，

(10)取代和未被取代的杂环基，

(11)取代和未被取代的环烷基，

(12)-COR_1a，

(13)-CO₂R_1a，

(14)-CONR_1aR_1b，

(15)-NR_1aR_1b，

(16)-NR_1aCOR_1b，

(17)-NR_1aSO₂R_1b，

(18)-OCOR_1a，

(19)-OR_1a，

(20)-SR_1a，

(21)-SOR_1a

(23)-SO₂NR_laR_1b，其中

R_1a和R_1b独立选自下组：

(a)氢，

(b)取代或未被取代的烷基，

(c)取代和未被取代的芳基，

(d)取代和未被取代的杂芳基，

(e)取代和未被取代的杂环基，和

(f)取代和未被取代的环烷基；

R₂选自下组：

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)羟基，

(6)氨基，

(7)取代和未被取代的烷基，

(8)-COR_2a，和

(9)-NR_2aCOR_2b，其中

R_2a和R_2b独立选自下组：

(a)氢和

(b)取代或未被取代的烷基；

R₃选自下组：

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)取代和未被取代的烷基，

(6)取代和未被取代的烯基，

(7)取代和未被取代的炔基，

(8)取代和未被取代的芳基，

(9)取代和未被取代的杂芳基，

(10)取代和未被取代的杂环基，

(11)取代和未被取代的环烷基，

(12)-COR_3a，

(14)-NR_3aR_3b，

(13)-NR_3aCOR_3b，

(15)-NR_3aSO₂R_3b，

(16)-OR_3a，

(17)-SR_3a，

(18)-SOR_3a，

(19)-SO₂R_3a，其中

R_3a和R_3b独立选自下组：

(a)氢，

(b)取代或未被取代的烷基，

(c)取代和未被取代的芳基，

(d)取代和未被取代的杂芳基，

(e)取代和未被取代的杂环基，和

(f)取代和未被取代的环烷基；和

R₄选自下组：

(1)氢，和

(2)卤素。

式(II)化合物定义所用的基团和符号具有如WO07/084786所公开的意义，其通过引用全文并入本申请。

PI3K抑制剂即式(II)化合物可以以游离碱或其药学上可接受盐形式存在于组合中。式(II)化合物的合适盐包括但不限于以下：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡萄糖酸盐、环戊烷丙酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、葡庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐和癸酸盐。同样，所述碱性含氮基团能用诸如以下的试剂季铵化：卤代烷如甲基-、乙基-、丙基-和丁基氯化物、溴化物以及碘化物；二烷基硫酸盐例如二甲基-、二乙基-、二丁基-和二戊基硫酸盐，长链卤化物例如癸基-、十二烷基-、十四烷基-和十八烷基氯化物、溴化物以及碘化物，芳烷基卤化物例如苯甲基和苯乙基溴，等等。

式(II)化合物的合适盐包括但不限于基于碱金属和碱土金属的阳离子，例如钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐、铝盐等，以及无毒铵、季铵和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。用于形成碱加成盐的其他代表性有机胺包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、吡啶、甲基吡啶、三乙醇胺等和碱性氨基酸例如精氨酸、赖氨酸和鸟氨酸。

用于本发明组合的优选的式(II)化合物是PI3K抑制剂5-(2,6-二-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-4-三氟甲基-吡啶-2-基胺(下文的“化合物C”)或其盐酸盐。化合物C的合成描述于WO2007/084786的实施例10，其内容通过引用并入本文。

WO2010/029082描述特定的2-甲酰胺环氨基脲衍生物，其被发现对PI3Kα–同种型具有抑制活性。适合本发明组合的特定的2-甲酰胺环氨基脲衍生物、其制备和含有其的合适制剂描述于WO2010/029082，且包括式(III)化合物：

其中

A代表选自下组的杂芳基：

R¹代表下列取代基之一：(1)未被取代或取代的，优选取代的C₁-C₇-烷基，其中所述取代基独立选自一个或多个，优选1-9个下列部分：氘、氟，或者1-2个下列部分C₃-C₅-环烷基；(2)任选取代的C₃-C₅-环烷基，其中所述取代基独立选自一个或多个，优选1-4个下列部分：氘、C₁-C₄-烷基(优选甲基)、氟、氰基、氨基羰基；(3)任选取代的苯基，其中所述取代基独立选自一个或多个，优选1-2个下列部分：氘、卤素、氰基、C₁-C₇-烷基、C₁-C₇-烷基氨基、二(C₁-C₇-烷基)氨基、C₁-C₇-烷基氨基羰基、二(C₁-C₇-烷基)氨基羰基、C₁-C₇-烷氧基；(4)任选的单取代或双取代胺；其中所述取代基独立选自下列部分：氘、C₁-C₇-烷基(未被取代或被一个或多个选自氘、氟、氯、羟基的取代基取代)、苯磺酰基(未被取代或被以下一个或多个(优选一个)取代：C₁-C₇-烷基、C₁-C₇-烷氧基、二(C₁-C₇-烷基)氨基-C₁-C₇-烷氧基)；(5)取代的磺酰基；其中所述取代基选自下列部分：C₁-C₇-烷基(未被取代或被一个或多个选自氘、氟的取代基取代)、吡咯烷基(未被取代或被一个或多个选自氘、羟基、氧基的取代基取代；特别是一个氧基)；(6)氟、氯；

R²代表氢；

R³代表(1)氢，(2)氟、氯，(3)任选取代的甲基，其中所述取代基独立选自一个或多个，优选1-3个下列部分：氘、氟、氯、二甲基氨基。

式(III)化合物定义所用的基团和符号具有如WO2010/029082所公开的意义，其通过引用全文并入本申请。

本发明的优选化合物是WO2010/029082特定描述的化合物。本发明的极优选化合物是(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(本文称为“化合物D”)或其药学上可接受盐。化合物D的合成描述于WO2010/029082的实施例15中。

式(III)化合物可以以游离碱或其药学上可接受盐形式使用。合适盐包括例如从有碱性氮原子的式(III)化合物中作为酸加成盐形成的那些，优选使用有机或无机酸。例如，合适的无机酸是氢卤酸，如盐酸、硫酸或磷酸。例如，合适的有机酸是羧酸或磺酸，如富马酸或甲磺酸。

本发明的组合还包括至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐。合适的c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂的实例包括但不限于2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺，ARQ197(tavantinib)，AMG458、GSK1363089(XL880或foretinib)，PF2341066(克唑替尼)，或其药学上可接受盐。

优选地，用于本发明组合的c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂是式(IV)化合物

或其药学上可接受盐。式(IV)化合物具有化学名称2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺。此化合物和其合成方法公开于国际PCT专利申请WO2008/064157的实施例7中，所述专利申请内容通过引用全文并入本文。

式(IV)化合物可以游离碱或其药学上可接受盐形式使用。2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺的合适盐包括碱性残基如胺的矿物或有机酸盐；酸性残基如羧酸的碱或有机盐等等。本发明的药学上可接受盐包括常用的例如从无毒的无机或有机酸形成的亲代化合物的无毒盐。优选地，式(IV)化合物是PCT专利申请WO2009/143211公开的盐形式，其通过引用全文并入本文。式(IV)化合物的优选盐形式包括2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺的二盐酸盐形式和二苯磺酸盐形式。

合适的c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂还包括：

(i.)ARQ197(tavantinib)(由第一三共株式会社(DaiichiSankyo)和阿库利(ArQule)开发)，具有化学式：

(ii.)AMG458(由安进(Amgen)开发)，具有化学式：

(iii.)GSK1363089(也称为XL880或foretinib)(由葛兰素史克(GlaxoSmithKline)开发)，具有化学式：

(iv.)PF2341066(也称为克唑替尼)(由辉瑞(Pfizer)开发)，具有化学式：

由编号、通用名或商品名确定的治疗剂结构可从标准纲要《默克索引》("TheMerckIndex")的现行版本或数据库如国际专利(PatentsInternational)(如IMS世界出版物(IMSWorldPublications))获得。其对应内容通过引用并入本文。

包括以下的药物组合在下文中称为本发明组合：(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐。

除非另有规定，或由上下文明确指明，或不适用，否则提及用于本发明组合的治疗剂包括化合物的游离碱以及该化合物的所有药学上可接受盐。

在本发明的一个优选实施方式中，所述组合包括(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物A、化合物B、化合物C或化合物D或其药学上可接受盐，和(b)2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。

在本发明的另一个优选实施方式中，所述组合包括(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物C或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met抑制剂，选自2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。

在本发明的另一个优选实施方式中，所述组合包括(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物D或其药学上可接受盐，和(b)2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。

根据本发明，本发明组合用于治疗有需要的对象的增殖性疾病。本发明组合可用于治疗有需要的对象的增殖性疾病，其通过向对象施用包括以下的药物组合：(a)有效量的选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)有效量的至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂如2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。优选地，这些治疗剂以治疗有效的剂量施用，其在组合时可提供共同有益效果。所述施用可以是分开、同时或顺序施用。

在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。

所述增殖性疾病特别是c-Met依赖性增殖性疾病的性质是多因子的。某些情况下，作用机制不同的药物可以进行组合。然而，仅考虑作用模式不同的任何药物组合，不一定产生具有有利效果的组合。

已发现施用本发明组合可用于治疗患有增殖性疾病的对象，特别是肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。本发明中，施用本发明组合产生更有益的治疗，如协同或改善的抗增殖效果，例如与任一单一治疗相比涉及增殖性疾病进展延迟或涉及肿瘤体积改变。

在一个优选实施方式中，本发明组合用于治疗c-Met和/或HGF/c-Met信号通路失调的增殖性疾病。在一个实施方式中，该增殖性疾病是c-Met和/或HGF/c-Met信号通路失调的癌症。在另一个实施方式中，所述增殖性疾病是HGF/c-met基因过表达和扩增的癌症。

适用于本发明组合治疗的增殖性疾病特别是c-Met依赖性增殖性疾病，包括但不限于癌症、动脉粥样硬化、肺纤维化、肾纤维化和再生、肝病、过敏性疾病、炎症和自身免疫性疾病、脑血管疾病、心血管疾病和与器官移植相关的病症。

在一个实施方式中，所述增殖性疾病是癌症。术语“癌症”在本文中用于指广谱范围的肿瘤，包括所有实体和恶性血液肿瘤。这类肿瘤的实例包括但不限于以下部位的良性和恶性肿瘤：乳腺、膀胱、子宫颈、肝外胆管、结直肠、食管、胃、头和颈、肾(如乳头状肾细胞癌)、肝(如肝细胞癌)、肺(如小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、鼻咽、卵巢、胰腺、前列腺、甲状腺、子宫内膜，肌肉骨骼系统肉瘤(如骨肉瘤、滑膜肉瘤、横纹肌肉瘤)，软组织肉瘤(如MFH/纤维肉瘤、平滑肌肉瘤、卡波西肉瘤)，多发性骨髓瘤、淋巴瘤、成人型T细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、黑素瘤、间皮瘤和胚胎性癌肉瘤等。

在本发明的另一个实施方式中，所述增殖性疾病是实体瘤。术语“实体瘤”尤其指乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌、结直肠癌、黑素瘤、胃癌、宫颈癌、肺癌(如小细胞肺癌和非小细胞肺癌)、头颈癌、前列腺癌、或卡波西肉瘤。本发明组合抑制实体瘤以及液体瘤的生长。

在本发明的另一个实施方式中，所述增殖性疾病是肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

应理解本发明包括其它实施方式，其中任何上述增殖性疾病或癌症是c-Met依赖性增殖性疾病或癌症。

在另一个实施方式中，本发明涉及用于治疗增殖性疾病特别是c-Met依赖性增殖性疾病的本发明组合，所述疾病耐受c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂治疗，特别是2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。本文所用的术语“耐受”指连续存在c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂时，先前的敏感性肿瘤在治疗导致萎缩后发生再生长，或治疗导致短暂消除后再出现。耐受肿瘤的成功治疗能引起例如肿瘤细胞对新型或先前所尝试抗肿瘤治疗和/或化疗剂的敏感性增加，并能引起例如后续肿瘤细胞死亡和防止转移。

在另一个实施方式中，本发明涉及用于抑制癌生长和/或转移扩散的本发明组合，特别是c-Met依赖性肿瘤。本发明组合适于治疗不良预后患者，尤其是患有转移性肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤的这些不良预后患者。

在另一个实施方式中，本发明涉及包括以下的药物组合：(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物C或化合物D或其药学上可接受盐，和(b)c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐，用于治疗增殖性疾病，特别是c-Met依赖性增殖性疾病。优选地，所述增殖性疾病是癌症，最优选肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

在另一个实施方式中，本发明涉及一个药物组合，其包括：(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物C或其药学上可接受盐，和(b)c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂PF2341066(也称为克唑替尼)或其药学上可接受盐，用于治疗增殖性疾病，特别是c-Met依赖性增殖性疾病。优选地，所述增殖性疾病是癌症，最优选成胶质细胞瘤。

一方面，本发明关于一种治疗增殖性疾病的方法，包括向有需要的对象施用在治疗上能有效针对增殖性疾病的量的以下组合：(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐。

可向患有增殖性疾病特别是肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤的患者分开、同时或顺序施用包括以下的组合：(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，用于根据本发明治疗所述增殖性疾病。

在另一个实施方式中，本发明关于一种治疗增殖性疾病的方法，包括向有需要的对象施用在治疗上能有效针对增殖性疾病的量的以下组合：(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物C或化合物D或其药学上可接受盐，和(b)c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。所述增殖性疾病优选是c-Met依赖性增殖性疾病。所述增殖性疾病优选是癌，最优选肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

在另一个实施方式中，本发明关于一种治疗增殖性疾病的方法，包括向有需要的对象施用在治疗上能有效针对增殖性疾病的量的以下组合：(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物C或其药学上可接受盐，和(b)c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂PF2341066(也称为克唑替尼)或其药学上可接受盐。所述增殖性疾病优选是c-Met依赖性增殖性疾病。所述增殖性疾病优选是癌，最优选成胶质细胞瘤。

在另一个实施方式中，本发明关于一种抑制患癌对象中转移形成的方法，包括向有需要的对象施用在治疗上能有效针对增殖性疾病的量的以下组合：(a)选自式(I)化合物、式(II)化合物和式(III)化合物的磷脂酰肌醇3-激酶或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐。所述癌症优选是c-Met依赖性癌症。合适的癌症是以上在实施方式中详述且通过引用并入本文的那些。

在一个优选实施方式中，本方法和组合能用于治疗肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

一方面，本发明关于本发明组合在治疗增殖性疾病和/或制备治疗增殖性疾病药物中的用途。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是癌症。合适的增殖性疾病和/或癌症是在以上的实施方式中详述并且通过引用并入本文的那些。

在一个实施方式中，本发明关于选自式(I)化合物(如化合物A或B)、式(II)化合物(如化合物C)和式(III)化合物(如化合物D)的磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂或其药学上可接受盐与至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐的组合在制备治疗的用途增殖性疾病药物中的用途。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是癌症，特别是肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

在另一个实施方式中，本发明关于磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物C或化合物D或其药学上可接受盐与c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐的组合在制备治疗增殖性疾病药物中的用途。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是癌症，特别是肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

在另一个实施方式中，本发明关于磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂化合物C或其药学上可接受盐与c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂PF2341066(也称为克里唑替尼)或其药学上可接受盐的组合在制备治疗增殖性疾病药物中的用途。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。在一个优选实施方式中，所述c-Met依赖性增殖性疾病是癌症，特别是成胶质细胞瘤。

一方面，本发明关于本发明组合在抑制患癌对象内转移形成和/或制备抑制患癌对象内转移形成的药物中的用途。在一个优选实施方式中，所述癌症是c-Met依赖性癌症。

施用本发明组合可能不仅产生有益效果，例如与所述组合中个体治疗剂的单一疗法的治疗效果相比如协同治疗效果，例如涉及缓解、延迟症状发展或抑制症状，而且还产生令人惊讶的有益效果，如与施用一种本发明组合所用药物治疗剂的单一疗法相比，副作用更少、生活质量提高或发病率降低。

另一益处是能采用更低剂量的本发明组合的治疗剂，例如剂量不仅通常更小，而且施用频率更低，或能用以减少分开施用一种治疗剂时观察到的副作用发生。这与待治疗患者的愿望和需求一致。

通过已建立的试验模型可显示，本发明组合产生本文之前描述的有益效果。本领域技术人员完全能选择相关试验模型以证明所述有益效果。例如，本发明组合的药理学活性可在临床研究或体外试验过程中得到证明，基本如下文所述。

合适的临床研究尤其是例如在增殖性疾病患者中的开放标签、剂量递增研究，特别是c-Met依赖性增殖性疾病，尤其是肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。这些研究特别证明本发明组合的治疗剂的协同性。可直接通过这些本领域技术人员已知的研究的结果确定对c-Met依赖性增殖性疾病的有益效果。这些研究尤其适合比较用任一治疗剂的单一疗法和本发明组合的效果。在一个实施方式中，增加选自式(I)化合物(如化合物A或B)、式(II)化合物(如化合物C)和式(III)化合物(如化合物D)的磷脂酰肌醇3激酶抑制剂的剂量，直至达到最大耐受剂量，而c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂如2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺以固定剂量施用。或者，选自式(I)化合物(如化合物A或B)、式(II)化合物(如化合物C)或式(III)化合物(如化合物D)的磷脂酰肌醇3激酶抑制剂可以以固定剂量施用，而c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂如2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺的剂量可递增。各患者可以每日地或间歇性地接受磷脂酰肌醇3激酶抑制剂的剂量。所述治疗的功效可在这类研究中确定，如在12、18或24周后，通过每6周评估症状评分确定。

为确定一种或多种组分之间的协同相互作用，就所述效果而言的最优范围和各组分绝对剂量范围可通过以不同w/w比例范围和剂量向需要治疗的患者施用组分来明确测量。对于人，完成患者的临床研究的复杂性和花费可能使得此试验形式作为主要协同性模型的用途不切实际。然而，在一个物种中观察到协同性能对该效果存在于本文所述其它物种和动物模型起到预示，以测量协同效果，且这类研究的结果通过应用药代动力学/药效学方法也能用于预测其它物种所需的有效剂量比例范围、绝对剂量和血浆浓度。肿瘤模型与人体中所见效果之间的已确立的相关性表明动物中的协同性可通过例如异种移植模型或合适的细胞系来证明。

本发明方法可采用磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂的组合，配制成包含一种或多种药学上可接受载体的药物组合物。

一方面，本发明提供包含在治疗上共同有效针对增殖性疾病特别是c-Met依赖性增殖性疾病的量的本发明组合和一种或多种药学上可接受载体的药物组合物。该药物组合物可由治疗剂(a)和(b)组成，其作为固定组合以单一制剂或单位剂型通过任意合适途径施用于患者。或者，所述治疗剂如磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐都作为非固定组合以单独药物组合物或制剂或单位剂型施用于患者，并且同时、同步或顺序施用而无特定时间限制。

在一个优选实施方式中，本发明提供分别包含在治疗上共同有效针对增殖性疾病特别是c-Met依赖性增殖性疾病的量的治疗剂(a)和治疗剂(b)的药物组合物。所述治疗剂同步但分开施用，或顺序施用于有需要的对象。

用于分开施用的治疗剂或以固定组合(即包含本发明组合的单个盖仑制剂)施用的治疗剂的药物组合物可以本身已知的方式制备，且适合肠部施用如经口或经直肠以及胃肠外施用于包括人在内的对象(温血动物)，包含治疗有效量的至少一种如上所述的单独药理活性治疗剂，或联合一种或多种药学上可接受载体，尤其适合肠部或胃肠外施用。

所述新型药物组合物可包含约0.1％-约99.9％，优选约1％-约60％的治疗剂。

就肠部施用或胃肠外施用而言，用于联合治疗的药物组合物包括固定组合或非固定组合，其例如采用单位剂型，如糖衣片剂、片剂、胶囊或栓剂或安瓿瓶。除非另有说明，其以本身已知的方式制备，例如通过本领域技术人员清楚了解的多种常规混合、粉碎、造粒、包糖衣、溶解、冻干工艺或制造技术。应理解各剂型个体剂量所含治疗剂的单位内容物本身不需构成有效量，因为必需的有效量可通过施用多个剂量单位来达到。

含试剂组合或该试剂组合个体试剂的单位剂型可采用封装于胶囊如明胶胶囊内的微片剂形式。为此，可采用药物制剂所用的明胶胶囊，如获自辉瑞(Pfizer)的称为CAPSUGEL的硬明胶胶囊。

本发明的单位剂型可任选进一步包括用于药物的额外常规载体或赋形剂。所述载体示例包括但不限于崩解剂、粘合剂、润滑剂、助流剂、稳定剂、和填充剂、稀释剂、着色剂、调味剂和防腐剂。本领域普通技术人员可根据具体的所需剂型性质通过常规实验选择一种或多种上述载体，而没有任何过度负担。所用各载体的量能在本领域常规范围内变化。下列通过引用全文并入本文的参考文献公开了用于配制口服剂型的技术和赋形剂。参见《药用赋形剂手册》(TheHandbookofPharmaceuticalExcipients),第4版,Rowe等编,美国药学会(AmericanPharmaceuticalsAssociation)(2003)；和《雷明顿：药物科学与实践》(Remington:theScienceandPracticeofPharmacy),第20版,Gennaro编,利平科特威廉斯.威尔金斯出版公司(LippincottWilliams&Wilkins)(2003)。

通过将一种或多种常规载体在熔融制粒前或期间纳入初始混合物或通过在口服剂型中组合一种或多种常规载体与颗粒，这些任选的额外常规载体可纳入口服剂型。在后面的实施方式中，合并的混合物能通过例如V型混合机进一步混合，随后压制或成型为片剂，例如单层片剂、由胶囊封装或填装入小药袋。

药学上可接受崩解剂的示例包括但不限于淀粉；粘土；纤维素；藻酸盐；树胶；交联聚合物，例如交联聚乙烯吡咯烷酮或交联聚维酮，如ISP(InternationalSpecialtyProducts)(新泽西州韦恩)的POLYPLASDONEXL；交联羧甲基纤维素钠，例如FMC的AC-D1-SOL；和交联羧甲基纤维素钙；大豆多糖；和瓜尔胶。所述崩解剂存在的量可以是约0％-约10％的组合物重量。在一个实施方式中，所述崩解剂存在的量是约0.1％-约5％的组合物重量。

药学上可接受粘合剂的示例包括但不限于淀粉；纤维素及其衍生物，例如微晶纤维素如FMC(宾夕法尼亚州费城)的AVICELPH，羟丙基纤维素、羟乙基纤维素和羟丙基甲基纤维素，如陶氏化学公司(DowChemicalCorp.)(密歇根州米德兰)的METHOCEL；蔗糖；葡萄糖；玉米糖浆；多糖以及明胶。所述粘合剂存在的量可以是约0％-约50％的组合物重量，例如2％-20％的组合物重量。

药学上可接受润滑剂和药学上可接受助流剂的示例包括但不限于硅胶、三硅酸镁、淀粉、滑石粉、三碱基磷酸钙、硬脂酸镁、硬脂酸铝、硬脂酸钙、碳酸镁、氧化镁、聚乙二醇、粉状纤维素和微晶纤维素。所述润滑剂存在的量可以是约0％-约10％的组合物重量。在一个实施方式中，所述润滑剂存在的量可以是约0.1％-约1.5％的组合物重量。所述助流剂存在的量可以是约0.1％-约10％的组合物重量。

药学上可接受填充剂和药学上可接受稀释剂的示例包括但不限于糖粉、可压缩糖、葡萄糖结合剂、糊精、葡萄糖、乳糖、甘露醇、微晶纤维素、粉状纤维素、山梨醇、蔗糖和滑石粉。例如，所述填充剂和/或稀释剂存在的量可以是约0％-约80％的组合物重量。

在一个实施方式中，所述药物组合物包括在治疗上共同有效针对增殖性疾病特别是c-Met依赖性增殖性疾病的量的本发明组合和一种或多种药学上可接受载体，其中磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂选自化合物A、化合物B、化合物C和化合物D或其药学上可接受盐。

在另一个实施方式中，所述药物组合物包括在治疗上共同有效针对增殖性疾病的量的本发明组合和一种或多种药学上可接受载体，其中c-Met抑制剂是2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。

在另一个实施方式中，所述药物组合物包括在治疗上共同有效针对增殖性疾病的量的本发明组合和一种或多种药学上可接受载体，其中所述磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂是化合物C、化合物D或其药学上可接受盐，所述c-Met抑制剂是2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐。

在另一个实施方式中，所述药物组合物包括在治疗上共同有效针对增殖性疾病的量的本发明组合和一种或多种药学上可接受载体，其中所述磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂是化合物C、化合物D或其药学上可接受盐，所述c-Met抑制剂是PF2341066(也称为克唑替尼)或其药学上可接受盐。

根据本发明，治疗有效量的本发明组合的各治疗剂可同时或以任何顺序依序施用，所述组分能分开或作为固定组合施用。例如，根据本发明治疗增殖性疾病的方法可包括(i)施用游离形式或药学上可接受盐形式的第一治疗剂(a)，和(ii)施用游离形式或药学上可接受盐形式的治疗剂(b)，同时或以任何顺序依序施用，采用联合治疗有效量，优选协同有效量，例如对应于本文所述量的每日或间歇性剂量。本发明组合的个体治疗剂可在治疗进程中的不同时间分开施用或者以分开或单个组合形式同步施用。此外，术语“施用”还包括使用在体内转化成治疗剂的治疗剂前药。因此，本发明应理解成涵盖所有这类同时或交替治疗的方案，术语“施用”也应相应地解释。

本发明组合所用各治疗剂的有效剂量可根据所用特定化合物或药物组合物、施用模式、所治疗病症、所治疗病症的严重性而变化。因此，本发明组合的剂量方案根据多种因素选择，包括施用途径和患者的肾及肝功能。掌握普通技术的临床医生或医师能容易确定和开具缓解、抵消或阻滞病症进展所需的有效量的单一治疗剂的处方。

各治疗剂的有效剂量可能需要一种化合物相较该组合的其它化合物更频繁施用。因此，为允许适当施用，包装的药物产品可包括一种或多种包含化合物组合的剂型以及一种或多种包含化合物组合之一而不包含该组合其它化合物的剂型。

用于本发明组合的治疗剂作为单一药物市售形式使用时，其剂量和施用模式应与各市售药物包装说明书所提供的信息一致，除非本文另有提及。

待施用于有需要的对象如约70kg体重的人的式I化合物尤其是化合物A或其药学上可接受盐的剂量优选是每人每天约3mg-约5g，更优选约10mg-约1.5g，更优选约100mg–约1200mg，最优选约100mg–约1000mg，优选分成1-3个单一剂量，其可以例如具有相同大小。

式II化合物尤其是化合物C优选以每日约0.001-1000mg/kg体重的剂量范围每天施用，更优选1.0-30mg/kg体重。在一个优选实施方式中，式I化合物尤其是化合物C的剂量范围是每人每天约10mg-约2000mg。

式III化合物尤其是化合物D优选以每日约0.05-50mg/kg接受者体重的剂量范围每天施用，优选约0.1-25mg/kg/日，更优选约0.5-10mg/kg/日。因此，对70kg的人施用而言，剂量范围最优选是每天约35-700mg。

所述c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂尤其是2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺优选以每日约0.01mg/kg-约100mg/kg体重的剂量每天施用。因此，对70kg的人施用而言，剂量范围最优选是每天约0.7mg-7g，更优选每天约50mg-300mg。

用于治疗增殖性疾病的各治疗剂的最优剂量能用已知方法根据经验为每个个体确定，且取决于多种因素，包括但不限于疾病进展程度；个体的年龄、体重、总体健康、性别和饮食；施用时间和途径；个体服用的其它药物。最优剂量可用本领域熟知的常规测试和过程确定。

可与载体材料联合制成单一剂型的各治疗剂的量会根据所治疗个体和特定施用模式而变化。在一些实施方式中，含本文所述试剂组合的单位剂型会包含所述试剂分开施用时通常施用的各组合试剂量。

剂量频率可根据所用化合物和待治疗特定病症而变化。一般地，优选使用足以提供有效治疗的最小剂量。一般用适合所治疗病症的本领域普通技术人员熟知的试验来监控患者的治疗有效性。

在一个实施方式中，本发明提供一种药物组合，包括治疗剂化合物A或B或其药学上可接受盐和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂，优选2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐，其可以以本文所公开的组合、药物组合物和剂型存在，且比例范围分别为每日20:1-2:1，更优选20:1-5:1。

在一个优选实施方式中，本发明提供一种药物组合，包括治疗剂化合物C或其药学上可接受盐和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂，优选2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐，其以剂量比例范围为每日1:1-1:4，更优选每日1:1或1:2存在。

在一个优选实施方式中，本发明提供一种药物组合，包括治疗剂化合物D或其药学上可接受盐和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂，优选2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐，其以剂量比例范围分别为每日8:1-1:1，更优选4:1-2:1-1:1存在。

产生功效而无毒性的药物化合物的最优比例、分开和组合剂量以及浓度是基于治疗剂对靶位点的可用性的动力学，并用本领域技术人员已知方法测定。

此外，本发明提供包含本发明组合作为治疗剂的商业包装物，以及用于其在治疗增殖性疾病中同时、分开或顺序施用的说明书。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。在一个优选实施方式中，所述增殖性疾病是肺癌(如非小细胞肺癌)或成胶质细胞瘤。

下列实施例阐明上述发明；但不意在以任何方式限制发明范围。本发明药物组合的有益效果也能用相关领域技术人员已知的其它测试模型确定。

如本文所述，本发明组合的效用可在体外试验、动物试验模型以及临床研究中证明。例如，根据本发明所述的式(I)化合物的效用可根据下述方法加以证明：

实施例1：非小细胞肺癌中使用化合物A的组合

材料和方法

PI3K抑制剂(化合物A)和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺在非小细胞肺癌模型中组合评估。两种化合物的化合物储液在DMSO中单独制备。化合物用Tecan分液器连续稀释以覆盖～1000x浓度范围。用于实验的最高浓度如下：化合物A＝2.7μM且2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺＝0.27μM。单一试剂和组合都以多个浓度测试，连同对照和一个自交。

细胞培养和活力测量

用于此研究的细胞系购自美国模式培养物保藏所(AmericanTypeCellCollection)，包括人非小细胞肺癌细胞系EBC-1(其具有c-Met扩增)、NCI-H1993(其具有扩增的c-MET)、NCI-H1648(其具有c-Met扩增)、NCI-H1573(其具有c-Met扩增和KRAS突变)和HCC2935(EGFR突变)。根据供应商的说明，所有细胞系在各自培养基中培养。

为了评估组合效果，将细胞以500个细胞/孔接种于384孔板并孵育过夜。所述化合物主板的内容物预稀释1:200(1μL化合物溶液用200μL含10％胎牛血清的细胞RPMI-160培养基)，然后转移5μL此预稀释液到含20μL细胞培养基的细胞板，以达到目标终化合物浓度以及0.09％的载剂(DMSO)浓度。

通过定量细胞ATP水平(CellTiterGlo，普洛麦格(Promega))在37℃/5％CO₂孵育72小时后评价单一试剂以及其组合对细胞活力的效果，使用25μL试剂/孔和n＝2重复板/条件。同样评价化合物添加时的细胞数量/活力并用于估计细胞系群体倍增时间。

对于未处理和经处理水平U和T，抑制用式I＝1-T/U计算，就完全抑制而言其范围为0％-100％。当T<U₀时，“生长抑制”GI＝1–(T-U₀)/V₀，且另外情况下1–(T-U₀)/(U-U₀)，其中U₀是时间为零时的未处理水平。0、100％和200％的GI水平对应于失活、细胞抑制和细胞毒性化合物。

化合物活性、协同性和选择性计算

通过拟合形式I＝I_maxC^α/[C^α+EC₅₀ ^α]的S形希尔函数来鉴定各化合物的单一试剂活性，其中C是浓度，EC₅₀是拐点，且α是S形变化。计算IC₅₀交点，其中拟合曲线达到50％抑制。

对于组合，协同性计算为Loewe加性模型(由增加有效剂量产生的“药物本身”预期)。计算各剂量对C_X,Y的Loewe预期(LoeweS.,ErgebnPhysiol27:47–187(1928))，这是通过找到抑制I_Loewe，从而(C_X/IC_X)+(C_Y/IC_Y)＝1且IC_X,Y是就拟合单一试剂曲线而言I_Loewe处的有效浓度，使用数值优化[BerenbaumMC,JTheorBiol114:413–431(1985)]。“协同评分”S如下计算：对所有测试组合剂量点中I_数 _据与I_Loewe之间的差异取平均值，排除剂量矩阵的最高浓度点，其最可能通过药物脱靶效果来控制。GI_max是矩阵的最大生长抑制(排除最高剂量对)，作为总体组合效力的量度。

通过对所有测试细胞系中组合进行协同评分比较来评价选择性协同。单一细胞系中该组合的“选择性评分”计算为SS＝abs(S)*GI_max*(S-μ)/σ，其中μ是中值且σ是所有细胞系中S的中值绝对偏差。此权重Z分数突出细胞系中异常协同的组合且其本身是有效且协同的。

所有计算用Chalice软件(CombinatoRx，马萨诸塞州剑桥)进行。此实验中，GImax数据以如下标度解读：(a)GImax＝“0”表示无抑制，GImax＝约“1”表示100％抑制和静态，以及GImax＝2表示200％抑制和癌细胞的总体消除或死亡。使用此程序，排除最高浓度的组合效力(GImax)如下所示：

此实验中，协同性评分(SS)如下解释：(a)SS＝“0”表示协同，(b)SS＝“0.1”表示高协同，以及(c)SS＝“-0.01到-0.07”的负值表示加和性。就该组合获得的选择性协同评分(排除最高浓度)如下所示：

实施例2：非小细胞肺癌中使用化合物C的组合

按照上面实施例1所述的实验程序，在非小细胞肺癌模型中评估PI3K抑制剂化合物C与c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺组合的功效和协同性。化合物用Tecan分液器连续稀释以覆盖～1000x浓度范围。用于实验的最高浓度如下：化合物C＝11μM且2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺＝0.27μM。单一试剂和组合都以多个浓度测试，连同对照和一个自交。

所有计算用Chalice软件(CombinatoRx，马萨诸塞州剑桥)进行。使用此程序，排除最高浓度的组合效力(GImax)如下所示：

此外，排除最高浓度的该组合选择性协同评分如下所示：

实施例3：非小细胞肺癌中使用化合物D的组合

按照上面实施例1所述的实验程序，在非小细胞肺癌模型中评估PI3K抑制剂化合物D与c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺组合的功效和协同性。化合物用Tecan分液器连续稀释以覆盖～1000x浓度范围。用于实验的最高浓度如下：化合物D＝11μM且2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺＝0.27μM。用于实验的最低浓度如下：化合物D＝0.15μM且2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺＝0.0003μM。单一试剂和组合都以多个浓度测试，连同对照和一个自交。

此外，排除最高浓度的该组合选择性协同评分如下所示：

实施例4：成胶质细胞瘤中使用化合物C的组合

方法

在成胶质细胞瘤模型中以组合形式评估PI3K抑制剂化合物C和c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺。化合物C(10mM)和2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺(10mM)溶于DMSO，并在-20℃等分保存。

细胞培养和细胞活力检测

人成胶质细胞瘤细胞系U-87MG(PTEN突变体和HGF表达系)、H4(PTEN突变体和HGF表达系)、A172(HGF表达水平低的PTEN突变细胞系)和LN-229(PTEN野生型且HGF低)购自美国模式培养物保藏所并维持于37℃,5％CO₂的加湿培养箱，处于推荐的培养基中。所有4种细胞系在mRNA水平表达可检测的MET。

细胞每周传代2次，培养基每2-3天更换。对于细胞活力检测，细胞用TryPLEExpress进行胰蛋白酶处理并一式三份接种到透明底96孔黑板(科斯塔(Costar),#3904)，使其能贴壁过夜，然后用不同浓度的抑制剂或试剂组合孵育72小时。

细胞活力通过测量细胞ATP含量测定，用(CTG)发光细胞活力检测(普洛麦格)。将各单一试剂和组合处理细胞与对照或用等体积培养基处理的细胞作比较。化合物处理结束时向各孔加入等体积CTG试剂并在Envision读板仪(珀金埃尔默(PerkinElmer))上记录发光。相对于未处理(对照)的细胞计算减少和增强的发光信号值(响应)。

计算组合效果的方法

为了以无偏方式评估所述PI3K抑制剂与所述cMET抑制剂的抗增殖活性以及鉴定所有可能浓度下的协同效果，用“剂量矩阵”进行研究。这采用了所有可能排列的连续稀释单一试剂和“剂量矩阵”，由以下组成：

·化合物C，接受5剂量2X连续稀释，高剂量为2.4μM且低剂量为约150nM

·此c-MET抑制剂，接受5剂量2X连续稀释，高剂量为1μM且低剂量为约12nM

协同相互作用(用Chalice软件[CombinatoRx，马萨诸塞州剑桥]分析)如下计算：比较来自组合的反应与单独试剂作用的反应，针对药物本身剂量叠加参照模型。剂量叠加的偏差能用组合指数(CI)在数值上评价，其定量组合效果的总强度。此计算(本质上是体积分数)如下：

V_HSA＝Σ_X,Ylnf_Xlnf_Y(I_数据–I_HSA)

另外，计算数据和最高单一试剂表面之间的CI，对单一试剂稀释因子进行标准化(LeharJ等(2009)，“协同药物组合往往提高治疗相关选择性(Synergisticdrugcombinationstendtoimprovetherapeuticallyrelevantselectivity)”,NatureBiotechnology27:659-66(2009))。

数据分析

数据评估和图形生成用MicrosoftExcel软件和Chalice软件进行。

结果

在“剂量矩阵”方案中如上所述评估化合物C和2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺的效果。所有4种细胞用化合物C和2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺在96孔板中处理。细胞活力用CellTiter-Glo试验测量且％抑制数据在数值上显示为6X6剂量格。本文的图1-4提供来自上述过程的结果概括。各数据点代表来自3个孔的平均数据，色谱还代表抑制水平。粗体矩形突出组合功效高于相同剂量的单一试剂的区域。

各剂量格的抑制百分比如本文的图1-4所示。化合物C在所有4种细胞系中显示浓度依赖性抗增殖活性，一个细胞系即PTEN野生型(LN229)中的活性较低，2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺在2个HGF高细胞系(U87MG和H4)中仅显示适度活性，另2个(A172和LN229)中完全失活。联用时，H4和U87-MG都观察到协同性，但A172和LN229没有，这通过突出区域以及等效线图中各单一试剂的生长抑制增加来证明，如本文的图1-4所示。

此数据表明该组合协同抑制成胶质细胞瘤细胞系亚群生长，PTEN突变体和HGF高细胞系看来对各单一试剂更敏感，而组合引起更显著的生长抑制。

实施例5：成胶质细胞瘤异种移植模型中使用化合物C的组合

此实验中，U-87MG人成胶质细胞瘤异种移植模型用于评价PI3K抑制剂化合物C和c-Met抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺作为单一试剂或组合的抗肿瘤功效。据报道，获自美国国家癌症研究所的U-87MG肿瘤细胞就CDKN2A、CDKN2C、CDKN2a和PTEN的可能致癌变体而言是纯合的；在MET、PIK3CA或其他58个在赘生性细胞中频繁改变的基因内没有检测到突变；和HGF表达。

小鼠用17.7和35.3mg/kgc-Met抑制剂及32.7mg/kg化合物C单一疗法以及c-Met抑制剂/化合物C双联疗法(17.7:32.7)每日治疗，持续21天。研究包括剂量比例为58.8:5.4mg/kg的c-Met抑制剂/化合物C组合。对照小鼠接受2种载剂，用标准临床前替莫唑胺方案监控肿瘤模型表现。具有已建立的肿瘤的裸小鼠的口服治疗开始于第1天(D1)。当肿瘤达到预定的2000mm³终点体积或到D60(无论哪个先发生)，对各动物实施安乐死。研究在D51终止。短期功效根据D13的平均和中值肿瘤体积变化测定，D13是任何组中大于50％小鼠退出研究前的最后一天。总功效根据肿瘤进展到体积终点所需的时间以及根据D51存活率和消退率测定。此报告描述了U87MG-e326肿瘤生长延迟实验的方法和结果。

小鼠

在研究的D1，雌性裸小鼠(nu/nu,查尔斯河(CharlesRiver))为10周龄，体重范围为15.5–27.3g。动物可自由饮水(反渗透，1ppmCl)，自由采食NIH31ModifiedandIrradiatedLabDiet(改良和辐照实验室饮食)所述饮食由18.0％粗蛋白、5.0％粗脂肪和5.0％粗纤维组成。小鼠饲养在静态式微隔离器中受辐照的Enrich-o’cobs^TM实验室垫料上，设20–22℃(68–72°F)和40–60％湿度及12小时光循环。

肿瘤移植和测量

U-87MG肿瘤细胞系获自美国模式培养物保藏所并通过连续移植在裸小鼠中维持。将肿瘤片段(1mm³)皮下移植到各试验小鼠的右侧腋下。肿瘤用卡尺以2个维度测量从而监控生长，当其平均体积接近所需的100–150mm³范围。以mm³计的肿瘤大小如下计算：肿瘤体积＝(宽度²x长度)/2，其中宽度和长度(以mm计)是肿瘤量度。肿瘤重量可用以下假设估计：1mg等于1mm³肿瘤体积。肿瘤细胞移植后14天，在研究的D1，个体肿瘤体积为63–196mm³的小鼠分成7组，每组平均肿瘤体积为122–127mm³。

试验样品

c-Met抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺(二盐酸盐，84.98％游离碱)在4℃保存并以2X终浓度加入去离子水，以超声波处理直至溶解。加入溶于去离子水的等体积0.5％甲基纤维素和0.1％80以提供溶于0.25％甲基纤维素的5.884mg/mL的施用溶液和溶于去离子水的0.05％80(载剂1)。此溶液部分用载剂1稀释以提供3.53和1.765mg/mL的施用溶液。

化合物C(盐酸盐，91.85％游离碱)在–20℃保存并加入溶于去离子水的1％80，超声波处理获得2X终浓度的均匀悬液。加入溶于去离子水的等体积1％甲基纤维素，搅拌混合物并进行超声波处理获得溶于0.5％甲基纤维素的不透明无色3.266mg/mL的施用悬液和溶于去离子水的0.5％80(载剂2)。通过用载剂2稀释部分第一个悬液来获得0.544mg/mL的施用悬液。

通过悬于去离子水并在4℃保存，一次制备替莫唑胺(先灵公司(ScheringCorporation),100mg胶囊,批号IRSA001)。

治疗计划

试验试剂和载剂都通过每日一次灌胃法施用，连续21天(qd×21)。联合治疗中，化合物A在c-Met抑制剂后60分钟内施用。替莫唑胺酮每日一次灌胃法施用，连续5天(qd×5)。所有组中，10mL/kg的给药体积(0.2mL/20g小鼠)根据给药日所测的各动物重量缩放，除了继续先前BW的周末。

7组裸小鼠(n＝10/组)如下治疗。组1小鼠接受载剂1和2，并用作所有分析的对照。在D7，此组无意中用IgG负对照抗体给药；认为此失误对对照肿瘤生长没有影响。组2和3接受c-Met单一疗法，分别为17.7和35.3mg/kg(等同于15和30mg/kg游离碱)。组4接受32.7mg/kg(30mg/kg游离碱)的化合物C单一疗法。组5接受17.7mg/kgc-Met抑制剂和32.7mg/kg化合物C的组合。组6接受58.8mg/kgc-Met抑制剂和5.4mg/kg化合物C(分别等同于50和5mg/kg游离碱)的组合。组7即参照组接受100mg/kg的替莫唑胺单一疗法。

肿瘤生长抑制

短期功效在D13测定。D13前，肿瘤体积总和发展到终点时，一只有双重肿瘤的组1中的动物退出。D13数据包括此动物最后记录的肿瘤体积。测定各动物在D1(施用开始)与终点日之间的肿瘤体积差异终点。对于各治疗组，终点日的反应通过下列关系式之一计算：

其中

ΔT＝(治疗组在终点日的平均肿瘤体积)–(治疗组在D1的平均肿瘤体积)，

ΔC＝(对照组在终点日的平均肿瘤体积)–(对照组在D1的平均肿瘤体积)，和

T0＝治疗组在D1的平均肿瘤体积。

负T/T0值代表某一组的净肿瘤减少。40％或更小的T/C值表明潜在的治疗活性。

肿瘤生长延迟

赘生物达到终点体积(2000mm³)或到达研究的最后一天(D51)时，对各动物实施安乐死。对于肿瘤达到终点体积的各动物，终点时间(TTE)通过以下等式计算：

TTE＝(log₁₀(终点体积)–b)/m

其中TTE以天数表示，终点体积以mm³表示，b是截距，m是对数变换的肿瘤生长数据集线性回归所得线的斜率。数据集包括超过研究终点体积的第一观察和临达到终点体积之前的连续3次观察。肿瘤未达到终点的任何动物被赋予等于研究最后一天的TTE值。归类为由TR原因致死的任何动物被赋予等于死亡日的TTE值。归类为由NTR原因(转移以外)致死的任何动物从TTE计算中排除。

治疗功效根据肿瘤生长延迟(TGD)测定，TGD定义为治疗组相较对照组的中值TTE增加：

TGD＝T–C,

以天数表示，或作为对照组中值TTE的百分比：

％TGD＝[(T-C)C]x100

其中：

T＝治疗组的中值TTE，

C＝指定对照组的中值TTE。

消退反应的MTV和标准

治疗功效还可根据最后一天仍保留在研究中的动物肿瘤体积以及消退反应数量来测定。MTV(n)定义为保留的动物数量n中D51的中值肿瘤体积，所述动物的肿瘤未达到终点体积。治疗可引起动物中肿瘤的部分消退(PR)或完全消退(CR)。PR表明就研究进程中3次连续测量而言，肿瘤体积为50％或更少的其D1体积，且就一个或多个所述3次测量而言等于或大于13.5mm³。CR表明就研究进程中3次连续测量而言，肿瘤体积小于13.5mm³。在研究最后一天呈现CR反应的任何动物被额外归类为无肿瘤生存者(TFS)。

毒性

动物在第1–5天、各治疗日(除了周末)称重，之后每周2次，直到研究结束。组平均BW最低点测定可排除组中大于50％可评估小鼠退出研究后进行的测量，还排除研究中归类为NTR死亡的任何动物。最大耐受剂量(MTD)的可接受毒性定义为试验中小于15％的组平均BW损失，且10只动物中不超过一例TR死亡。就3次连续测量而言BW损失超过15％或就1次测量而言BW损失超过20％的任何动物被施以安乐死，归类为TR死亡，除非其是组中的第一例死亡。如果没有证据显示死亡与治疗副作用相关且死亡在施用结束后超过14天出现，该死亡被归类为非治疗相关(NTR)。NTR死亡分类为NTRa(归因于意外或错误)、NTRu(归因于未知原因)或NTRm(通过侵入和/或转移来尸检确认的肿瘤扩散)。为保存动物而同时提供最大信息，组中的第一例死亡归类为NTRu；如果同一组中记录了2次随后的TR死亡，该NTR死亡重新归类为TR。

统计和图形分析

所有统计和图形分析用针对Windows的Prism3.03(GraphPad)进行。组1–7的平均肿瘤体积变化首先用方差分析(ANOVA)比较，用巴特利特检验。巴特利特检验提示方差间有显著差异(P<0.0001)时，该组用克-瓦氏单向方差分析比较，显示中值肿瘤体积变化间有显著差异(P<0.0001)。之后的邓恩多重比较检验可比较药物治疗组与对照组1。重复一次这些非参数检验以比较联合治疗组之一与其对应的单一治疗。

存活通过卡普兰-梅耶方法分析。对数秩(Mantel-Cox)检验用于分析两组的总生存经历(生存曲线)之间差异的显著性。对数秩检验分析组中所有动物的个体TTE，除了那些作为非治疗相关(NTR)死亡而排除的。双尾统计分析在P＝0.05下实施。Prism将检验结果概括为：P>0.05时不显著(ns)，0.01<P≤0.05时为显著(用符号“*”表示)，0.001<P≤0.01时为很显著(“**”)，P≤0.001时为极显著(“***”)。由于统计显著性检验不提供组间差异程度的估计，所有水平的显著性在此报告文本中描述为显著或不显著。

结果

按照上述程序，在研究中得到下列结果：

研究终点＝2000mm³，短期活性＝13天，进展51中的天数。

N＝组中未由意外或未知原因导致死亡的动物数量，或为了取样实施安乐死的动物数量。

T/C＝100x(ΔT/ΔC)＝治疗组的平均肿瘤体积相较对照组在D1与D13之间的％变化。

T/T₀＝100x(ΔT/T0)＝当ΔT＝0时，治疗组的平均肿瘤体积相较其初始体积在D1与D13之间的％变化。

统计显著性(邓恩检验)＝来自克-瓦氏单向方差邓恩多重比较检验的P值：ns＝不显著＝P>0.05，相较所示组。

统计显著性(对数秩检验)＝相较所示组来自对数秩检验的P值：ns＝不显著；P<0.05时结果视作显著。

15mg/kg和30mg/kg的c-Met抑制剂单一治疗分别产生5％和1％T/C。30mg/kg的化合物C产生31％的T/C。15mg/kgc-Met抑制剂与30mg/kg化合物C的组合实现T/T0:-83％的肿瘤消退，明显优于任一单独试剂。

治疗终止后，通过监控肿瘤生长和记录终点时间(TTE)来评估肿瘤生长延迟百分比(％TGD)。载剂治疗组在11.7天达到终点。15mg/kg和30mg/kg的c-Met抑制剂分别使中值TTE增加21.4天(183％TGD)和23.4天(200％TGD)。30mg/kg的化合物C使中值TTE增加9.3天(79％TGD)。15mg/kgc-Met抑制剂与30mg/kg化合物C的组合显示28.7天的中值TTE，其为245％TGD。

实施例6：非小细胞肺癌异种移植模型中使用化合物D的组合

此实验中，NCI-H1993人非小细胞肺癌异种移植模型用于评价PI3K抑制剂化合物D和c-Met抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺作为单一试剂或组合的抗肿瘤功效。获自美国模式培养物保藏所(ATCC)的NCI-H1993肿瘤细胞从患者淋巴结转移灶衍生，所述患者患有3A期肺腺癌且有吸烟史。

小鼠

在研究的D1，雌性无胸腺裸小鼠(Crl:NU(Ncr)-Foxn1^nu,查尔斯河)为8周龄，体重(BW)范围为16.1-26.2g。动物可自由饮水(反渗透，1ppmCl)，自由采食NIH31ModifiedandIrradiatedLab所述饮食由18.0％粗蛋白、5.0％粗脂肪和5.0％粗纤维组成。小鼠饲养在辐照Enrich-o’cobs^TM实验室垫料上，采用静态式微隔离器，处于20–22℃(68–72°F)和40–60％湿度的12小时光循环中。

肿瘤移植和测量

NCI-H1993肿瘤细胞系获自美国模式培养物保藏所并维持于溶于RPMI-1640培养基的DRS_NC，所述培养基包含100单位/青霉素G钠、100μg/mL链霉素硫酸盐、25μg/mL庆大霉素、10％胎牛血清和2mM谷氨酰胺。肿瘤细胞在组织培养瓶中培养，采用37℃且气氛为5％CO₂和95％空气的加湿培养箱。

在对数生长期收获用于实施的肿瘤细胞并重悬于含50％Matrigel^TM(BD生物科学(BDBiosciences))的冷PBS。各小鼠的右侧腋下皮下注入1x10⁷个细胞(0.2mL细胞悬液)。肿瘤用卡尺以2个维度测量从而监控生长，当其平均体积接近所需的200-250mm³范围时。以mm³计的肿瘤大小如下计算：肿瘤体积＝(宽度²x长度)/2，其中宽度和长度(以mm计)是肿瘤量度。肿瘤重量可用以下假设估计：1mg等于1mm³肿瘤体积。肿瘤细胞移植后14天，在研究的D1，个体肿瘤体积为172-256mm³的小鼠分成每组10只小鼠，组平均肿瘤体积为206-215mm³。

试验样品

c-Met抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺(盐酸盐，84.98％游离碱)在4℃保存并加入等于1/2终体积的去离子水，超声波处理直至溶解获得均匀2X悬液。加入等体积0.5％甲基纤维素:0.1％80以提供溶于去离子水的1.77mg/mL溶液，终载剂浓度为0.25％甲基纤维素和0.05％80(载剂1)。每日制备一次新鲜溶液用于p.m.施用并室温保存，直到a.m.施用。

化合物D以3.0mg/mL悬于含0.5％甲基纤维素的去离子水。分部分加入等于1/3终体积的载剂。每次加入后振荡悬液，然后最终探针在冰上超声波处理以制备均一的白色悬液。每周制备新鲜悬液，4℃保存，施用前重新悬浮。

制备载剂2，终载剂浓度为35％D5W(溶于水的5％葡萄糖):5％10％80(0.05％终浓度):60％100mM乙酸盐缓冲液pH4.5。

治疗计划

在研究期间c-Met抑制剂和载剂各通过灌胃法(p.o.)施用每日两次直到结束。化合物D在研究期间通过灌胃法施用每日一次直到结束。联合治疗中，化合物D在c-Met抑制剂后30分钟内施用。所有组中，10mL/kg的施用体积(0.2mL/20g小鼠)根据如施用日所测的各动物重量缩放，除了继续先前BW的周末。

裸小鼠(n＝10/组)如下治疗。组1接受载剂1和载剂2，并用作研究的对照。组2在研究期间接受每日两次的17.7mg/kgc-Met单一疗法(b.i.d.直到结束)。组3在研究期间接受每日一次的30mg/kg化合物D单一疗法(q.d.直到结束)。组4接受17.7mg/kgc-Met抑制剂每日两次直到结束和30mg/kg化合物D每日一次直到结束的组合。

肿瘤生长抑制

短期功效在第20天(D20)测定。D20前，组1的1只动物和组3的1只动物由于肿瘤发展而退出；各自的终肿瘤体积继续发展并纳入组平均体积。

测定各动物在D1(施用开始)与终点日之间的肿瘤体积差异终点。对于各治疗组，终点日的反应通过下列关系式之一计算：

其中

T0＝治疗组在D1的平均肿瘤体积。

肿瘤生长延迟

肿瘤用卡尺每周测量二次，赘生物达到终点体积(600mm³)或到达研究的最后一天(D71)时(无论哪个先发生)，对各动物实施安乐死。各小鼠的终点时间(TTE)通过以下等式计算：

TTE＝(log₁₀(终点体积)–b)/m

其中TTE以天数表示，终点体积以mm3表示，b是截距，m是对数变换的肿瘤生长数据集线性回归所得线的斜率。各数据集包括超过研究终点体积的第一观察和临达到终点体积之前的连续3次观察。肿瘤未达到终点的任何动物被赋予等于研究最后一天的TTE值。归类为由治疗相关(TR)原因致死的任何动物被赋予等于死亡日的TTE值。归类为由非治疗相关(NTR)原因(转移以外)致死的任何动物从TTE计算中排除。

TGD＝T–C,

以天数表示，或作为对照组中值TTE的百分比：

％TGD＝[(T-C)C]x100

其中：

T＝治疗组的中值TTE，

C＝指定对照组的中值TTE。

消退反应的MTV和标准

治疗功效还可根据最后一天仍保留在研究中的动物肿瘤体积以及消退反应数量来测定。MTV(n)定义为保留的动物数量n中D71的中值肿瘤体积，该肿瘤未达到终点体积。

治疗可引起动物中肿瘤的部分消退(PR)或完全消退(CR)。PR表明就研究进程中3次连续测量而言，肿瘤体积为50％或更少的其D1体积，且就一个或多个所述3次测量而言等于或大于13.5mm³。CR表明就研究进程中3次连续测量而言，肿瘤体积小于13.5mm³。

毒性

动物在第1–5天、各治疗日(除了周末)称重，之后每周2次，直到研究结束。就D1与D20的间隔以及完整研究测定最大组平均体重(BW)损失。组平均BW最低点测定可排除组中大于50％可评估小鼠退出研究后进行的测量，还排除研究中归类为非治疗相关(NTR)死亡的任何动物。最大耐受剂量(MTD)的可接受毒性定义为试验中小于15％的组平均BW损失，且10只动物中不超过一例TR死亡。就3次连续测量而言BW损失超过15％或就1次测量而言BW损失超过20％的任何动物被施以安乐死，归类为TR死亡，除非其是组中的第一例死亡。如果没有证据显示死亡与治疗副作用相关且死亡在施用结束后超过14天出现，该死亡被归类为NTR。NTR死亡分类为NTRa(归因于意外或错误)、NTRu(归因于未知原因)或NTRm(通过侵入和/或转移来尸检确认的肿瘤扩散)。为保存动物而同时提供最大信息，组中的第一例死亡归类为NTRu；如果同一组中记录了2次随后TR死亡，该NTR死亡重新归类为TR。

统计和图形分析

所有统计和图形分析用针对Windows的Prism3.03(GraphPad)进行。所有组的平均肿瘤体积变化用单向方差分析(ANOVA)比较，巴特利特检验用于方差齐。由于方差间有显著差异((P<0.01)，所述组用克-瓦氏单向方差分析和邓恩事后多重比较检验来比较。重复后面的检验以比较所述组合与其组分的单一治疗。

存活通过卡普兰-梅耶方法基于TTE值分析。对数秩检验用于分析两组的总生存经历(生存曲线)之间差异的显著性。双尾统计分析在P＝0.05下实施。Prism将检验结果概括为：P>0.05时不显著(ns)，0.01<P≤0.05时为显著(用符号“*”表示)，0.001<P≤0.01时为很显著(“**”)，P≤0.001时为极显著(“***”)。由于统计显著性检验不提供组间差异程度的估计，所有水平的显著性在此报告文本中描述为显著或不显著。

结果

按照上述程序，研究结束时获得如上所定义的下列结果：

N＝组中未由治疗相关、意外或未知原因导致死亡的动物数量，或为了取样实施安乐死的动物数量

T/C＝100x(ΔT/ΔC)＝治疗组的平均肿瘤体积相较对照组在D1与D20之间的％变化。

T/T₀＝100x(ΔT/T0)＝ΔT＝0时，治疗组的平均肿瘤体积相较其初始体积在D1与D13之间的％变化。

由于可变反应和肿瘤体积范围的重叠变化，以17.7mg/kg灌胃每日两次直到结束的c-Met抑制剂单一治疗未实现相比对照(组1)的显著抑制。以30mg/kg灌胃每日一次直到结束的化合物D单一治疗引起不显著的中值肿瘤生长加速。c-Met抑制剂与化合物D的组合产生-17％T/T₀和显著中值活性(P<0.01,邓尼特检验)，但在第20天相比c-Met抑制剂单一治疗没有显著改善。

总体上，c-Met抑制剂单一治疗使中值TTE增加97％且显著延长存活(P<0.001，对数秩检验)，产生4个D71幸存者和1个PR。相比对照(组1)，良好耐受的化合物D单一治疗产生不明显减短的总体存活。

c-Met抑制剂与化合物D的组合使中值TTE增加最大可能的184％。该组合组有8个幸存者和1个部分消退。该组合相比两种单一治疗显著改善。本文的图5提供了结果的概括。

总之，17.7mg/kgc-Met抑制剂单一治疗(每日两次直到结束)产生15％T/C和非显著的D20肿瘤生长抑制，但引起中值TTE增加97％和生存显著延长。30mg/kg化合物D的单一治疗(每日一次直到结束)不具有显著活性(失活)。通过在D20引起肿瘤减少和生成最大可能的184％中值TTE增加，该组合展示有利的药物相互作用。在D20未观察到相比c-Met抑制剂单一治疗的显著改善；然而，所述组合相对于两种对应的单一治疗，显著延长存活。c-Met抑制剂单一治疗中的1例死亡和联合治疗中的2例死亡归因于个体体重损失。由于组平均体重损失是零或可忽略，不能确定c-Met抑制剂单一治疗是否处于最大终剂量以及所述组合是否超过模型的最大终剂量。

Claims

1.一种药物组合，其包括(a)磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂，所述抑制剂选自式(I)化合物，

其中

R₂是O或S；

R₃是低级烷基；

R₄是未被取代或被卤素、氰基、低级烷基、低级烷氧基取代的吡啶基，或者未被取代或被低级烷基取代的哌嗪基；未被取代或被低级烷氧基取代的嘧啶基；未被取代或被卤素取代的喹啉基；喹喔啉基；或被烷氧基取代的苯基；

R₅是氢或卤素；

n是0或1；

R₆是氧化基；

附加条件是若n＝1，则携带基团R₆的N原子具有正电荷；

R₇是氢或氨基；

或式(II)化合物，

其中W是CR_w或N，其中

R_w选自下组：

(1)氢，

(2)氰基，

(3)卤素，

(4)甲基，

(5)三氟甲基，

(6)磺酰胺；

R₁选自下组：

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)取代和未被取代的烷基，

(6)取代和未被取代的烯基，

(7)取代和未被取代的炔基，

(8)取代和未被取代的芳基，

(9)取代和未被取代的杂芳基，

(10)取代和未被取代的杂环基，

(11)取代和未被取代的环烷基，

(12)-COR_1a，

(13)-CO₂R_1a，

(14)-CONR_1aR_1b，

(15)-NR_1aR_1b，

(16)-NR_1aCOR_1b，

(17)-NR_1aSO₂R_1b，

(18)-OCOR_1a，

(19)-OR_1a，

(20)-SR_1a，

(21)-SOR_1a

(23)-SO₂NR_laR_1b，其中

R_1a和R_1b独立选自下组：

(a)氢，

(b)取代或未被取代的烷基，

(c)取代和未被取代的芳基，

(d)取代和未被取代的杂芳基，

(e)取代和未被取代的杂环基，和

(f)取代和未被取代的环烷基；

R₂选自下组：

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)羟基，

(6)氨基，

(7)取代和未被取代的烷基，

(8)-COR_2a，和

(9)-NR_2aCOR_2b，其中

R_2a和R_2b独立选自下组：

(a)氢和

(b)取代或未被取代的烷基；

R₃选自下组：

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)取代和未被取代的烷基，

(6)取代和未被取代的烯基，

(7)取代和未被取代的炔基，

(8)取代和未被取代的芳基，

(9)取代和未被取代的杂芳基，

(10)取代和未被取代的杂环基，

(11)取代和未被取代的环烷基，

(12)-COR_3a，

(14)-NR_3aR_3b，

(13)-NR_3aCOR_3b，

(15)-NR_3aSO₂R_3b，

(16)-OR_3a，

(17)-SR_3a，

(18)-SOR_3a，

(19)-SO₂R_3a，其中

R_3a和R_3b独立选自下组：

(a)氢，

(b)取代或未被取代的烷基，

(c)取代和未被取代的芳基，

(d)取代和未被取代的杂芳基，

(e)取代和未被取代的杂环基，和

(f)取代和未被取代的环烷基；和

R₄选自下组：

(1)氢，和

(2)卤素，

和式(III)化合物

其中

A表示选自下组的杂芳基：

R²代表氢；

R³代表(1)氢，(2)氟、氯，(3)任选取代的甲基，其中所述取代基独立选自一个或多个，优选1-3个下列部分：氘、氟、氯、二甲基氨基，

或其药学上可接受盐，和(b)至少一种c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂或其药学上可接受盐，用于同时、分开或顺序施用以治疗增殖性疾病。

2.根据权利要求1的药物组合，其特征在于，所述磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂是2-甲基-2-[4-(3-甲基-2-氧-8-喹啉-3-基-2,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)-苯基]-丙腈即化合物A，8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮即化合物B，5-(2,6-二-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-4-三氟甲基-吡啶-2-基胺即化合物C，和(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)即化合物D或其药学上可接受盐。

3.根据权利要求1的药物组合，其特征在于所述c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂是2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺，ARQ197即tavantinib，AMG458，GSK1363089即XL880或foretinib，PF2341066即克唑替尼，或其药学上可接受盐。

4.根据权利要求1的药物组合，其中所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。

5.根据权利要求1的药物组合，其中所述增殖性疾病是癌症。

6.根据权利要求1的药物组合，其中所述增殖性疾病是选自下组的良性和恶性肿瘤的癌症：乳腺、膀胱、子宫颈、肝外胆管癌、结直肠、食管、胃、头和颈、肾、肝、肺、鼻咽、卵巢、胰腺、前列腺、甲状腺、子宫内膜、肌肉骨骼系统肉瘤、软组织肉瘤、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、成人型T细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓白血病、成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、黑素瘤、间皮瘤和胚胎性癌肉瘤等。

7.根据权利要求1的药物组合，其特征在于，所述增殖性疾病是肺癌如非小细胞肺癌或成胶质细胞瘤。

8.一种药物组合物，其包括权利要求1-3中任一项所述的药物组合和至少一种药学上可接受载体。

9.一种治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括向有需要的对象施用一定量的根据权利要求1所述的药物组合，所述给药量可在治疗上共同有效抵御所述增殖性疾病。

10.一种抑制患癌对象中的转移形成的方法，所述方法包括向有需要的对象施用药学上有效量的如权利要求1所述的药物组合。

11.根据权利要求9的方法，其中所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。

12.根据权利要求9或10的方法，其特征在于，所述增殖性疾病或癌症是选自下组的良性和恶性肿瘤：乳腺、膀胱、子宫颈、肝外胆管癌、结直肠、食管、胃、头和颈、肾、肝、肺、鼻咽、卵巢、胰腺、前列腺、甲状腺、子宫内膜，肌肉骨骼系统肉瘤、软组织肉瘤、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、成人型T细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓白血病、成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、黑素瘤、间皮瘤和胚胎性癌肉瘤等。

13.根据权利要求9或10的方法，其中所述治疗包括分开或顺序施用所述量的治疗剂(a)和所述量的治疗剂(b)。

14.根据权利要求1所述的组合在制备用于治疗增殖性疾病的药物中的用途。

15.根据权利要求14的用途，其中所述增殖性疾病是c-Met依赖性增殖性疾病。

16.根据权利要求14的用途，其中所述增殖性疾病是癌症。

17.根据权利要求14的用途，其中所述增殖性疾病是的用途选自下组的癌症：乳腺、膀胱、子宫颈、肝外胆管癌、结直肠、食管、胃、头和颈、肾、肝、肺、鼻咽、卵巢、胰腺、前列腺、甲状腺、子宫内膜，肌肉骨骼系统肉瘤、软组织肉瘤、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、成人型T细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓白血病、成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、黑素瘤、间皮瘤和胚胎性癌肉瘤等。

18.一种药物组合，所述组合包括选自下组的5-(2,6-二-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-4-三氟甲基-吡啶-2-基胺即化合物C和(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)即化合物D的磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂或其药学上可接受盐以及c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂2-氟-N-甲基-4-[7-喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三嗪-2基]苯甲酰胺或其药学上可接受盐，所述组合用于治疗增殖性疾病。

19.一种商业包装物，其包括如权利要求1-3所述的药物组合，以及将该组合物用于治疗增殖性疾病中同时、分开或顺序施用的说明书。