JP2015529194A - ＰＩ３Ｋインヒビターとｃ−Ｍｅｔインヒビターの組み合わせ - Google Patents

Abstract

本発明は、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患の治療において同時に、別々に又は連続して投与するために、（ａ）ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩とを含む薬学的な組み合わせ；そのような組み合わせを含む医薬組成物；それを必要とする対象に前記組み合わせを投与することを含む、増殖性疾患を有する対象を治療する方法；増殖性疾患の治療のためのそのような組み合わせの使用；及びそのような組み合わせを含む商業的包装に関する。

Description

本発明は、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患の治療において同時に、別々に又は連続して投与するための（ａ）ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビター、又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩とを含む薬学的な組み合わせ；そのような組み合わせを含む医薬組成物；それを必要とする対象に前記組み合わせを投与することを含む、増殖性疾患を有する対象を治療する方法；増殖性疾患の治療のためのそのような組み合わせの使用；及びそのような組み合わせを含む商業的包装に関する。

タンパク質キナーゼ（ＰＫ）は、とりわけ、細胞増殖、生存及び分化、臓器形成及び形態発生、血管新生、組織修復及び再生を含む様々な重要な生物学的プロセスを調節する一群の酵素である。タンパク質キナーゼは、タンパク質（又は基質）のリン酸化を触媒し、それにより多様な生物学的な文脈において基質の細胞活性を調整することを介して、生理学的機能を発揮する。

タンパク質キナーゼをレセプター型と非レセプター型に分類することができる。レセプターチロシンキナーゼ（ＲＴＫ）は、細胞外部分、膜貫通ドメイン及び細胞内部分を有し、一方、非レセプターチロシンキナーゼは、完全に細胞内にある。ＲＴＫ仲介シグナル伝達は、特定の増殖因子（リガンド）との細胞外相互作用、典型的には後に続くレセプター二量体化、固有のタンパク質キナーゼ活性の刺激及びレセプタートランスリン酸化によって典型的に開始される。これにより結合部位が、細胞内シグナル伝達分子のために作り出され、細胞分裂、分化、代謝効果及び細胞外微環境の変化などの適切な細胞応答を促進する一連の細胞質シグナル伝達分子との複合体の形成をもたらす。非レセプター型のチロシンキナーゼも、Ｓｒｃ、Ｂｔｋ、Ａｂｌ、Ｆａｋ及びＪａｋを含む多数のサブファミリーから構成される。

癌原遺伝子であるｃ−Ｍｅｔは、Ｍｅｔ、Ｒｏｎ及びＳｅａを含むヘテロ二量体レセプターチロシンキナーゼの特有のサブファミリーのメンバーである（Birchmeier, C. et al., Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2003, 4(12):915-925; Christensen, J. G. et al., Cancer Lett. 2005, 225(1):1-26）。ｃ−Ｍｅｔに対する唯一の高親和性リガンドは、散乱因子（ＳＦ）としても知られている肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）である。ｃ−ＭｅｔへのＨＧＦの結合は、自己リン酸化を介したレセプターの活性化を誘発し、レセプター依存性シグナル伝達の増加をもたらす。ｃ−Ｍｅｔ及びＨＧＦは両方とも多様な臓器に広範囲に発現するが、これらの発現は、通常、上皮及び間葉由来の細胞にそれぞれ限定されている。正常な組織及び癌などのヒト悪性腫瘍におけるｃ−Ｍｅｔ（又はｃ−Ｍｅｔシグナル伝達経路）の生物学的機能は、十分に考証されている（Christensen, J.G. et al., Cancer Lett. 2005, 225(1):1-26; Corso, S. et al., Trends in Mol. Med. 2005, 11(6):284-292）。

ＨＧＦ及びｃ−Ｍｅｔは、哺乳類の正常な発達のためにそれぞれ必要であり、ＨＧＦ及びｃ−Ｍｅｔヌルマウスの両方において報告された異常は、臓器形態発生の際の胚における発現及び上皮間葉移行の欠陥と近接に一致している（Christensen, J.G. et al., Cancer Lett. 2005, 225(1):1-26）。これらの知見と一致して、ＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔ経路のシグナル伝達、続く生物学的効果は、発達の際の、上皮間葉相互作用にとって、並びに細胞の遊走、浸潤、細胞の増殖及び生存、三次元管構造の血管新生、形態発生及び組織化（例えば、腎尿細管細胞、腺の形成）の調節にとって重要であることが示されている。所定の細胞／組織におけるｃ−Ｍｅｔ経路活性化の特定の結果は、極めて文脈依存的である。

証拠は、調節不全ｃ−Ｍｅｔ経路が、腫瘍の形成、増殖、維持及び進行において重要な役割を果たし、時には（遺伝子改変の場合）原因となることを示している（Birchmeier, C. et al., Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2003, 4(12):915-925; Boccaccio, C. et al., Nat. Rev. Cancer 2006, 6(8):637-645; Christensen, J.G. et al., Cancer Lett. 2005, 225(1):1-26）。ＨＧＦ及び／又はｃ−Ｍｅｔは、大部分のヒト癌の有意な部分に過剰発現しており、多くの場合に、より侵襲性の疾患、疾患の進行、腫瘍転移及び患者の生存期間の短縮などの不十分な臨床結果に関連する。更に、高レベルのＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔタンパク質を有する患者は、化学療法及び放射線療法に対してより抵抗性がある。異常なＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔ発現に加えて、ｃ−Ｍｅｔレセプターは、また、遺伝子突然変異（生殖細胞系列及び体細胞の両方）、並びに遺伝子増幅を介して癌患者において活性化されうる。遺伝子増幅及び突然変異は、患者において報告されている最も一般的な遺伝子改変であるが、レセプターは、欠失、切断、遺伝子再構成、並びに異常レセプタープロセシング及び欠陥のある負の調節機構によっても活性化されうる。

更に、活性化すると、ｃＭｅｔは、ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔ経路、ＥＲＫ １／２、ｐ３８及びＳＴＡＴ３が含まれるが、これらに限定されない多くの様々な細胞内シグナル伝達経路を活性化する。ＰＩ３Ｋは、リン酸塩がイノシトール脂質のＤ−３’位置に移動して、ホスホイノシトール−３−リン酸（ＰＩＰ）、ホスホイノシトール−３，４−二リン酸（ＰＩＰ２）及びホスホイノシトール−３，４，５−三リン酸（ＰＩＰ３）を産生することを触媒し、次にプレクストリン相同性、ＦＹＶＥ、Ｐｈｏｘ及び他のリン脂質結合ドメインを含有するタンパク質を、多くの場合に細胞膜にある多様なシグナル伝達複合体にドッキングさせるシグナル伝達カスケードにおける第二メッセンジャーとして作用する、脂質及びセリン／トレオニンキナーゼのファミリーを含む（Vanhaesebroeck et al., Annu. Rev. Biochem 70:535 (2001); Katso et al., Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17:615 (2001)）。２つのクラス１ ＰＩ３Ｋのうち、クラス１Ａ ＰＩ３Ｋは、ｐ８５α、ｐ５５α、ｐ５０α、ｐ８５β又はｐ５５γでありうる調節サブユニットと構成的に会合する触媒性ｐ１１０サブユニット（α、β、δアイソフォーム）から構成されるヘテロ二量体である。クラス１Ｂサブクラスは、２つの調節サブユニットの内の１つ、ｐ１０１又はｐ８４と会合する触媒性ｐ１１０γサブユニットから構成されるヘテロ二量体である、１つのファミリーメンバーを有する（Fruman et al., Annu Rev. Biochem. 67:481 (1998); Suire et al., Curr. Biol. 15:566 (2005)）。ｐ８５／５５／５０サブユニットのモジュラードメイン（modular domain）は、ホスホチロシン残基を、特定の配列の文脈において、活性化されたレセプター及び細胞質チロシンキナーゼに結合し、クラス１Ａ ＰＩ３Ｋの活性化及び局在化をもたらす、Ｓｒｃ相同性（ＳＨ２）ドメインを含む。クラス１Ｂ ＰＩ３Ｋは、様々なレパートリーのペプチド及び非ペプチドリガンドに結合するＧタンパク質共役レセプターによって、直接活性化される（Stephens et al., Cell 89:105 (1997)); Katso et al., Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 17:615-675 (2001)）。ＰＩ３Ｋ経路は、増殖、生存、走化性、細胞輸送、運動性、代謝、炎症及びアレルギー反応、転写、並びに翻訳を含む主要な細胞プロセスの重要なレギュレーターである（Cantley et al., Cell 64:281 (1991); Escobedo and Williams, Nature 335: 85 (1988); Fantl et al., Cell., 69: 413 (1992)）。

医学の有意な進歩及び癌を有する患者のための多数の治療選択肢にもかかわらず、有効で安全な治療剤の必要性及び癌の有効な長期治療のために投与されうる新たな併用療法の必要性が依然として存在する。（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又はこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビター、並びに（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター、特に２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩を含む組み合わせは、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患の治療に特に有効であることが、現在見出されている。この組み合わせの抗増殖効果は、いずれかの種類の成分が単独で達成しうる最大効果を超えることが予測される。

本発明は、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患の治療において同時に、別々に又は連続して投与するために、（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又はこれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼ、並びに（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩を含む、薬学的な組み合わせに関する。本発明の組み合わせは、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫の治療に特に有用である。

好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（「化合物Ａ」）又はそのモノトシレート塩及び８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（「化合物Ｂ」）である。

好ましい実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン（「化合物Ｃ」）又はその塩酸塩である。

好ましい実施形態において、式（ＩＩＩ）の化合物は、（Ｓ）−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸２−アミド１−（｛４−メチル−５−［２−（２，２，２−トリフルオロ−１，１−ジメチル−エチル）−ピリジン−４−イル］−チアゾール−２−イル｝−アミド）（「化合物Ｄ」）又は薬学的に許容されるその塩である。

好ましい実施形態において、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターは、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩である。

１つの態様において、本発明は、増殖性疾患を治療する方法であって、（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼと、（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩との組み合わせを、前記増殖性疾患に対して治療上有効である量により、それを必要とする対象に投与することを含む方法に関する。好ましくは、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。

更なる実施形態において、本発明は、癌を有する対象において転移の形成を阻害する方法であって、（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼと、（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩との組み合わせを、前記癌に対して治療上有効である量により、それを必要とする対象に投与することを含む方法に関する。好ましくは、癌は、ｃ−Ｍｅｔ依存性癌である。

１つの態様において、本発明は、増殖性疾患の治療における及び／又は増殖性疾患の治療ための医薬品の調製における本発明の組み合わせの使用に関する。好ましい実施形態において、増殖性疾患は癌である。好ましい実施形態において、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。

１つの態様において、本発明は、癌を有する対象における転移の形成の阻害における及び／又は癌を有する対象における転移の形成を阻害するための医薬品の調製における本発明の組み合わせの使用に関する。好ましい実施形態において、癌は、ｃ−Ｍｅｔ依存性癌である。

１つの態様において、本発明は、本発明の組み合わせ及び１つ以上の薬学的に許容される塩の、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量を含む医薬組成物を提供する。この医薬組成物は、任意の適切な経路により単一製剤又は単位剤形の固定された組み合わせとして対象に投与される治療剤（ａ）及び（ｂ）から構成されうる。あるいは、治療剤、例えばホスファチジルイノシトール−３−キナーゼインヒビター及びｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又はこれらの薬学的に許容される塩は、両方とも、別々の医薬組成物又は製剤又は単位剤形の固定されない組み合わせとして、特定の時間制限なしで同時に、同時発生的に又は連続して対象に投与される。

１つの態様において、本発明は、治療剤としての本発明の組み合わせを、増殖性疾患、特に肺癌（例えば、小細胞肺癌）又は神経膠芽腫の治療におけるその同時の、別々の又は連続した投与のための使用説明書と一緒に含む、商業的包装を提供する。

化合物Ｃと２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの用量を組み合わせた、Ｈ４ヒト神経膠芽腫腫瘍モデルの増殖に対する効果を示す図である。 化合物Ｃと２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの用量を組み合わせた、Ｕ８７−ＭＧヒト神経膠芽腫腫瘍モデルの増殖に対する効果を示す図である。 化合物Ｃと２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの用量を組み合わせた、Ａ１７２ヒト神経膠芽腫腫瘍モデルの増殖に対する効果を示す図である。 化合物Ｃと２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの用量を組み合わせた、ＬＮ２２９ヒト神経膠芽腫腫瘍モデルの増殖に対する効果を示す図である。 ＮＣＩ−Ｈ１９９３ヒト非小細胞肺癌異種移植モデルにおける２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド及び化合物Ｄの組み合わせの、ビヒクル対照及び両方の単剤療法と比較した比較平均抗腫瘍増殖効果を示す図である。

本発明は、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患の治療における使用おいて同時に、別々に又は連続して投与するために、（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼ、並びに（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩を含む、薬学的な組み合わせに関する。本発明の組み合わせは、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫の治療に特に有用である。

本明細書において使用される一般的な用語は、特に明確な記述のない限り、以下の意味によって定義される。

用語「含む（comprising）」及び「含む（including）」は、特に示されない限り、開放型の非限定的な意味で本明細書において使用される。

本発明を記載する文脈（特に以下の特許請求の範囲の文脈）における用語「ａ」及び「ａｎ」及び「ｔｈｅ」、並びに同様の参照は、本明細書において特に指示のない限り又は文脈により明確に否定されない限り、単数形及び複数形の両方を網羅すると解釈されるべきである。複数形態が化合物、塩などに使用される場合、これは、単一の化合物、塩なども意味する。

用語「組み合わせ」又は「薬学的な組み合わせ」は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビター及びｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩が、独立して、同時に又は治療剤が共同的、例えば相乗的な効果を示すことを可能にする時間間隔内で別々に投与されうる併用投与のための、１つの単位剤形に固定された組み合わせ、固定されない組み合わせ又はキットの部分のいずれかを指すことが、本明細書において定義される。

用語「固定された組み合わせ」は、治療剤、例えばホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビター及びｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターが、単一の実在物又は剤形の形態で同時に対象に投与されることを意味する。

用語「固定されない組み合わせ」は、治療剤、例えばホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビター及びｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩が、両方とも、別々の実在物又は剤形として、特定の時間制限なしで同時に、同時発生的に又は連続して患者に投与され、そのような投与が、それを必要とする対象、例えば哺乳動物又はヒトの体内に３つの化合物の治療有効レベルを提供することを意味する。

用語「キットの部分」は、独立して又は識別される量の治療剤（ａ）及び（ｂ）を有する異なる固定された組み合わせの使用により、すなわち同時に又は異なる時点において投与される、上記に定義された治療剤（ａ）及び（ｂ）を意味する。次にキットの部分の一部は、例えば、同時に又は経時的にずれて、すなわちキットの部分の任意の一部において異なる時点で等しい又は異なった時間間隔により投与されうる。組み合わせ調製物により投与される治療剤（ａ）と治療剤（ｂ）の総量の比は、例えば、治療される患者の亜集団の必要性又は単一の患者の必要性に対処するため変わりうる。

用語「ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビター」又は「ＰＩ３Ｋインヒビター」は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼを標的にする、減少する又は阻害する化合物を指すことが本明細書において定義される。ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ活性は、インスリン、血小板由来増殖因子、インスリン様増殖因子、上皮増殖因子、コロニー刺激因子及び肝細胞増殖因子を含む幾つかのホルモン及び増殖因子の刺激に応答して増加することが示されており、細胞増殖及び形質転換に関するプロセスに関与してきた。

用語「ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター」は、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼを標的にする、減少する又はそのインヒビター活性の化合物を意味するように本明細書に定義される。

用語「ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患」又は「ｃ−Ｍｅｔ依存性癌」は、ｃ−Ｍｅｔ及び／若しくはＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔシグナル伝達経路、特にＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔ遺伝子の過剰発現及び増幅、ＨＧＦ依存性オートクリン及びパラクリン活性化、並びに／又はｃ−Ｍｅｔレセプター遺伝子突然変異（生殖細胞系列及び体細胞の両方）の調節不全を有する増殖性疾患を意味する。好ましい実施形態において、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ及び／又はＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔシグナル伝達経路の調節不全を有する癌である。「ｃ−Ｍｅｔ及び／又はＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔシグナル伝達経路の調節不全」は、ＨＧＦ依存性オートクリン及びパラクリン活性化、ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔ遺伝子の過剰発現及び／又は増幅、点突然変異、欠失、切断、再構成、並びに異常なｃ−Ｍｅｔレセプタープロセシング及び欠陥のある負の調節機構が含まれるが、これらに限定されない多様な機構を介したｃ−Ｍｅｔの部類のレセプターチロシンキナーゼの活性化を含むことが意図される。好ましい実施形態において、用語「ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患」又は「ｃ−Ｍｅｔ依存性癌」は、ＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔ遺伝子の過剰発現及び増幅を含む。

用語「医薬組成物」は、対象が罹患している特定の疾患又は状態を治療するために対象、例えば哺乳動物又はヒトに投与される、少なくとも１つの治療剤を含有する混合物又は溶液を指すことが本明細書において定義される。

用語「薬学的に許容される」は、健全な医療判断の範囲内で、妥当な利益／危険比に相応する過剰な毒性、刺激 アレルギー反応及び他の問題のある合併症がなく、対象、例えば哺乳動物又はヒト組織との接触に適した化合物、材料、組成物及び／又は剤形を指すことが本明細書において定義される。

用語「治療する」又は「治療」は、本明細書で使用されるとき、対象において少なくとも１つの症状を軽減、低減若しくは緩和する又は疾患の進行を遅延させる治療を含む。例えば、治療は、障害の１つ若しくは幾つかの症状の減少又は癌などの障害の完全な消滅でありうる。本発明の意味の範囲内において、用語「治療する」は、発症を阻止すること、遅延すること（すなわち、疾患の臨床症状前の期間）及び／又は疾患が進展若しくは悪化する危険性を低減することも意味する。

用語「共同治療活性」又は「共同治療効果」は、本明細書で使用されるとき、温血動物、特にヒトにおいて、治療が望まれる時間間隔で（経時的にずれた方法で、とりわけ特定の順番で）治療剤を別々に与えることができ、依然として（好ましくは、相乗的に）相互作用（共同治療効果）を示すことを意味する。このことが当てはまるかは、とりわけ、両方の治療剤が治療されるヒトの血液中に少なくとも特定の時間間隔にわたって存在することを示す血中レベルを追跡することによって、決定することができる。

用語、治療剤の薬学的な組み合わせの「薬学的に有効な量」又は「臨床的に有効な量」は、組み合わせにより治療される増殖性疾患の臨床的に観察されうる兆候及び症状のベースラインを超える、観察されうる改善をもたらすのに十分な量である。

用語「相乗効果」は、本明細書で使用されるとき、投与されるそれぞれの治療剤の効果の単純な加算を超えて、増殖性疾患、特に癌又はその症状の症候性の進行を例えば遅くさせる効果を生じる、例えば、（ａ）式（Ｉ）の化合物、例えば化合物Ａ若しくは化合物Ｂ若しくは薬学的に許容されるその塩及び少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター若しくは薬学的に許容されるその塩又は（ｂ）式（ＩＩ）の化合物、例えば化合物Ｃ若しくは薬学的に許容されるその塩及びｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター若しくは薬学的に許容されるその塩又は（ｃ）式（ＩＩＩ）の化合物、化合物Ｄ若しくは薬学的に許容されるその塩及びｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター若しくは薬学的に許容されるその塩などの、２つの治療剤の作用を意味する。相乗効果は、例えば、Ｓｉｇｍｏｉｄ−Ｅｍａｘ方程式（Holford, N. H. G. and Scheiner, L. B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)）、Ｌｏｅｗｅ加算方程式（Loewe, S. and Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926)）及び半有効方程式（Chou, T. C. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984)）などの適切な方法を使用して計算することができる。上記に参照されたそれぞれの方程式を実験データに適用して、薬物の組み合わせの効果を評価するのに役立つ対応するグラフを生成することができる。上記に参照された方程式に関連した対応するグラフは、それぞれ濃度効果曲線、アイソボログラム曲線及び組み合わせ指数曲線（combination index curve）である。

用語「対象」又は「患者」には、本明細書で使用されるとき、増殖性疾患又は腫瘍に直接的若しくは間接的に関与する任意の障害に罹患する又は悩まされる可能性がある動物が含まれる。対象の例には、哺乳動物、例えばヒト、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ、ラット及び遺伝子導入非ヒト動物が含まれる。好ましい実施形態において、対象は、ヒト、例えば増殖性疾患に罹患している、罹患する危険性のある又は罹患する潜在的な可能性があるヒトである。

用語 約」又は「およそ」は、所定の値又は範囲の１０％以内、より好ましくは５％以内を意味するべきである。

本発明の組み合わせは、式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるＰＩ３Ｋインヒビターを含む。

ＷＯ２００６／１２２８０６及びＷＯ２００８／１０３６３６は、イミダゾキノリン誘導体を記載し、これはＰＩ３Ｋ及び哺乳類標的のラパマイシン（ｍＴＯＲ）の活性を阻害することが見出されている。本発明に適している特定のイミダゾキノリン誘導体、これらの調製及びそれを含有する適切な医薬製剤は、ＷＯ２００６／１２２８０６及びＷＯ２００８／１０３６３６に記載されており、式（Ｉ）：

［式中、
Ｒ_１は、ナフチル又はフェニルであり、ここで前記フェニルは、ハロゲン；非置換又はハロゲン、シアノ、イミダゾリル若しくはトリアゾリルで置換されている低級アルキル；シクロアルキル；低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコキシ及び低級アルコキシ低級アルキルアミノからなる群から独立して選択される１又は２つの置換基で置換されているアミノ；非置換又は低級アルキル及び低級アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１若しくは２つの置換基で置換されているピペラジニル；２−オキソ−ピロリジニル；低級アルコキシ低級アルキル；イミダゾリル；ピラゾリル；及びトリアゾリルからなる群から独立して選択される１又は２つの置換基により置換されており；
Ｒ_２は、Ｏ又はＳであり；
Ｒ_３は、低級アルキルであり；
Ｒ_４は、非置換若しくはハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシで置換されているピリジル又は非置換若しくは低級アルキルで置換されているピペラジニル；非置換又は低級アルコキシで置換されているピリミジニル；非置換又はハロゲンで置換されているキノリニル；キノキサリニル；又はアルコキシで置換されているフェニルであり；
Ｒ_５は、水素又はハロゲンであり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ_６は、オキシドであり；
但し、ｎ＝１である場合、Ｎ原子を担持しているラジカルＲ_６は、陽電荷を有し；
Ｒ_７は、水素又はアミノである］
の化合物が含まれる。

式（Ｉ）の化合物の定義に使用されているラジカル及び符号は、ＷＯ２００６／１２２８０６に開示されている意味を有し、この刊行物はその全体が参照により本出願に組み込まれる。

式（Ｉ）のＰＩ３Ｋインヒビター化合物は、遊離塩基又は薬学的に許容されるその塩の形態で組み合わせ中に存在してもよい。式（Ｉ）の化合物の適切な塩には、例えば、好ましくは有機又は無機酸との酸付加塩として形成されるものが含まれる。適切な無機酸は、例えば、塩酸、硫酸又はリン酸などのハロゲン酸である。適切な有機酸は、例えば、カルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸又はスルファミン酸、例えば酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、マロン酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、グルタミン酸若しくはアスパラギン酸などのアミノ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、シクロヘキサンカルボン酸、アダマンタンカルボン酸、安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、ケイ皮酸、メタン−若しくはエタン−スルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、１，５−ナフタレン−ジスルホン酸、２−若しくは３−メチルベンゼンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、Ｎ−メチル−、Ｎ−エチル−若しくはＮ−プロピル−スルファミン酸又はアスコルビン酸などの他の有機プロトン酸である。

本発明の組み合わせに使用される式（Ｉ）の好ましい化合物は、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（「化合物Ａ」）又はそのモノトシレート塩及び８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（「化合物Ｂ」）である。化合物Ａ及びそのモノトシレート塩の合成は、例えば、ＷＯ２００６／１２２８０６の実施例７及び１５２〜３にそれぞれ記載されている。化合物Ｂの合成は、例えばＷＯ２００６／１２２８０６の実施例８６に記載されている。１つの好ましい実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、化合物Ａ又はそのモノトシレート塩である。

ＷＯ０７／０８４７８６は、ピリミジン誘導体を記載し、これはＰＩ３Ｋの活性を阻害することが見出されている。これら特定のＰＩ３Ｋインヒビターは本発明の組み合わせに適しており、これらの調製及びそれを含有する適切な医薬製剤は、ＷＯ０７／０８４７８６に記載されており、式（ＩＩ）：

［式中、Ｗは、ＣＲ_ｗ又はＮであり、ここで、
Ｒ_ｗは、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ハロゲン、
（４）メチル、
５）トリフルオロメチル、
（６）スルホンアミド
からなる群から選択され；
Ｒ_１は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）置換及び非置換アルキル、
（６）置換及び非置換アルケニル、
（７）置換及び非置換アルキニル、
（８）置換及び非置換アリール、
（９）置換及び非置換ヘテロアリール、
（１０）置換及び非置換ヘテロシクリル、
（１１）置換及び非置換シクロアルキル、
（１２）−ＣＯＲ_１ａ、
（１３）−ＣＯ_２Ｒ_１ａ、
（１４）−ＣＯＮＲ_１ａＲ_１ｂ、
（１５）−ＮＲ_１ａＲ_１ｂ、
（１６）−ＮＲ_１ａＣＯＲ_１ｂ、
（１７）−ＮＲ_１ａＳＯ_２Ｒ_１ｂ、
（１８）−ＯＣＯＲ_１ａ、
（１９）−ＯＲ_１ａ、
（２０）−ＳＲ_１ａ、
（２１）−ＳＯＲ_１ａ、
（２３）−ＳＯ_２ＮＲ_１ａＲ_１ｂ
からなる群から選択され、ここで、
Ｒ_１ａ及びＲ_１ｂは、
（ａ）水素、
（ｂ）置換又は非置換アルキル、
（ｃ）置換及び非置換アリール、
（ｄ）置換及び非置換ヘテロアリール、
（ｅ）置換及び非置換ヘテロシクリル、並びに
（ｆ）置換及び非置換シクロアルキルからなる群から独立して選択され；
Ｒ_２は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）ヒドロキシ、
（６）アミノ、
（７）置換及び非置換アルキル、
（８）−ＣＯＲ_２ａ、並びに
（９）−ＮＲ_２ａＣＯＲ_２ｂからなる群から選択され、ここで、
Ｒ_２ａ及びＲ_２ｂは、
（ａ）水素及び
（ｂ）置換又は非置換アルキルからなる群から独立して選択され；
Ｒ_３は、
（１）水素、
（２）シアノ、
（３）ニトロ、
（４）ハロゲン、
（５）置換及び非置換アルキル、
（６）置換及び非置換アルケニル、
（７）置換及び非置換アルキニル、
（８）置換及び非置換アリール、
（９）置換及び非置換ヘテロアリール、
（１０）置換及び非置換ヘテロシクリル、
（１１）置換及び非置換シクロアルキル、
（１２）−ＣＯＲ_３ａ、
（１４）−ＮＲ_３ａＲ_３ｂ、
（１３）−ＮＲ_３ａＣＯＲ_３ｂ、
（１５）−ＮＲ_３ａＳＯ_２Ｒ_３ｂ、
（１６）−ＯＲ_３ａ、
（１７）−ＳＲ_３ａ、
（１８）−ＳＯＲ_３ａ、
（１９）−ＳＯ_２Ｒ_３ａ
からなる群から選択され、ここで、
Ｒ_３ａ及びＲ_３ｂは、
（ａ）水素、
（ｂ）置換又は非置換アルキル、
（ｃ）置換及び非置換アリール、
（ｄ）置換及び非置換ヘテロアリール、
（ｅ）置換及び非置換ヘテロシクリル、並びに
（ｆ）置換及び非置換シクロアルキルからなる群から独立して選択され；
Ｒ_４は、
（１）水素及び
（２）ハロゲンからなる群から選択される］
の化合物が含まれる。

式（ＩＩ）の化合物の定義に使用されているラジカル及び符号は、ＷＯ０７／０８４７８６に開示されている意味を有し、この刊行物はその全体が参照により本出願に組み込まれる。

式（ＩＩ）のＰＩ３Ｋ化合物は、遊離塩基又は薬学的に許容されるその塩の形態で組み合わせ中に存在してもよい。式（ＩＩ）の化合物の適切な塩には、以下が含まれるが、これらに限定されない。酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、ジグルコン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、半硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロイオネート（3 phenylproionate）、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩及びウンデカン酸塩。また、塩基性の窒素含有基は、塩化、臭化及びヨウ化メチル、エチル、プロピル及びブチルなどのハロゲン化アルキル、硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル及びジアミルのような硫酸ジアルキル、塩化、臭化及びヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルなどの長鎖ハロゲン化物、臭化ベンジル及びフェネチルのようなハロゲン化アラルキル他などの作用物質によって四級化されうる。

更に、式（ＩＩ）の化合物の適切な塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム塩などのアルカリ及びアルカリ土類金属に基づいたカチオン、並びにアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどが含まれるが、これらに限定されない非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム及びアミンカチオンが含まれるが、これらに限定されない。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンには、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ピリジン、ピコリン、トリエタノールアミンなど、並びにアルギニン、リシン及びオルニチンなどの塩基性アミノ酸が含まれる。

本発明の組み合わせにおける使用に好ましい式（ＩＩ）の化合物は、ＰＩ３Ｋインヒビターの５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン（以下、「化合物Ｃ」）又はその塩酸塩である。化合物Ｃの合成は、ＷＯ２００７／０８４７８６の実施例１０に記載されており、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。

Ｗ０２０１０／０２９０８２は、ＰＩ３Ｋのαアイソフォームに対して阻害活性を有することが見出されている、特定の２−カルボキサミドシクロアミノ尿素誘導体を記載する。本発明の組み合わせに適している特定の２−カルボキサミドシクロアミノ尿素誘導体、これらの調製及びそれを含有する適切な製剤は、ＷＯ２０１０／０２９０８２に記載されており、式（ＩＩＩ）：

［式中、
Ａは、以下：

からなる群から選択されるヘテロアリールを表し、
Ｒ^１は、以下の置換基：（１）非置換又は置換、好ましくは置換Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、フルオロ又は１〜２つの以下の部分Ｃ_３〜Ｃ_５シクロアルキルの１つ以上、好ましくは１〜９つから独立して選択される）；（２）場合により置換されているＣ_３〜Ｃ_５シクロアルキル（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル（好ましくは、メチル）、フルオロ、シアノ、アミノカルボニルの１つ以上、好ましくは１〜４つから独立して選択される）；（３）場合により置換されているフェニル（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、ハロ、シアノ、Ｃ_１〜Ｃ_７−アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_７アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル）アミノ、Ｃ_１〜Ｃ_７アルキルアミノカルボニル、ジ（Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル）アミノカルボニル、Ｃ_１〜Ｃ_７アルコキシの１つ以上、好ましくは１〜２つから独立して選択される）；（４）場合により一又は二置換されているアミン（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル（非置換又は重水素、フルオロ、クロロ、ヒドロキシの群から選択される１つ以上の置換基で置換されている）、フェニルスルホニル（非置換又はＣ_１〜Ｃ_７アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_７アルコキシ、ジ（Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル）アミノ−Ｃ_１〜Ｃ_７アルコキシの１つ以上、好ましくは１つにより置換されている）から独立して選択される）；（５）置換スルホニル（ここで前記置換基は、以下の部分：Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル（非置換又は重水素、フルオロの群から選択される１つ以上の置換基で置換されている）、ピロリジノ（非置換又は重水素、ヒドロキシ、オキソの群から選択される１つ以上の置換基により、特に１つのオキソにより置換されている）から選択される）；（６）フルオロ、クロロ、のうちの１つを表し；
Ｒ²は、水素を表し；
Ｒ^３は、（１）水素、（２）フルオロ、クロロ、（３）場合により置換されているメチル（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、フルオロ、クロロ、ジメチルアミノの１つ以上、好ましくは１〜３つから独立して選択される）を表す］の化合物が含まれる。

式（ＩＩＩ）の化合物の定義に使用されているラジカル及び符号は、ＷＯ２０１０／０２９０８２に開示されている意味を有し、この公報はその全体が参照として本出願に組み込まれる。

本発明の好ましい化合物は、ＷＯ２０１０／０２９０８２に特定的に記載されている化合物である。本発明の非常に好ましい化合物は、（Ｓ）−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸２−アミド１−（｛４−メチル−５−［２−（２，２，２−トリフルオロ−１，１−ジメチル−エチル）−ピリジン−４−イル］−チアゾール−２−イル｝−アミド）（本明細書において「化合物Ｄ」と呼ばれる）又は薬学的に許容されるその塩である。化合物Ｄの合成は、ＷＯ２０１０／０２９０８２の実施例１５に記載されている。

式（ＩＩＩ）の化合物は、遊離塩基又は薬学的に許容されるその塩の形態で使用することができる。適切な塩には、例えば、塩基性窒素原子を有する式（ＩＩＩ）の化合物から、好ましくは有機又は無機酸との酸付加塩として形成されるものが含まれる。適切な無機酸は、例えば、塩酸、硫酸又はリン酸などのハロゲン酸である。適切な有機酸は、例えば、フマル酸又はメタンスルホン酸などのカルボン酸又はスルホン酸である。

本発明の組み合わせは、少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩を更に含む。適切なｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターの例には、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド、ＡＲＱ１９７（チバンチニブ（tavantinib））、ＡＭＧ４５８、ＧＳＫ１３６３０８９（ＸＬ８８０若しくはフォレチニブ（foretinib））、ＰＦ２３４１０６６（クリゾチニブ）又は薬学的に許容されるその塩が含まれるが、これらに限定されない。

好ましくは、本発明の組み合わせに使用されるｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターは、式（ＩＶ）：

の化合物又は薬学的に許容されるその塩である。式（ＩＶ）の化合物は、化学名の２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドを有する。この化合物及びこの化合物の合成方法は、国際ＰＣＴ特許出願ＷＯ２００８／０６４１５７の実施例７に開示されており、その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

式（ＩＶ）の化合物は、遊離塩基又は薬学的に許容されるその塩の形態で使用することができる。２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの適切な塩には、アミンなどの塩基性残基の鉱物又は有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ又は有機塩、などが含まれる。本発明の薬学的に許容される塩には、例えば非毒性無機又は有機酸から形成される、親化合物の従来の非毒性塩が含まれる。好ましくは、式（ＩＶ）の化合物は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ特許出願ＷＯ２００９／１４３２１１に開示されている塩形態である。式（ＩＶ）の化合物の好ましい塩形態には、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの二塩酸塩形態及びジベンゼンスルホン酸塩形態が含まれる。

適切なｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターには、更に、
（ｉ）化学構造：

を有するＡＲＱ１９７（チバンチニブ）（Ｄａｉｉｃｈｉ Ｓａｎｋｙｏ及びＡｒＱｕｌｅにより開発された）、
（ｉｉ）化学構造：

を有するＡＭＧ４５８（Ａｍｇｅｎにより開発された）、
（ｉｉｉ）化学構造：

を有するＧＳＫ１３６３０８９（ＸＬ８８０又はフォレチニブ（foretinib）としても知られている）、
並びに
（ｉｖ）化学構造：

を有するＰＦ２３４１０６６（クリゾチニブとしても知られている）（Ｐｆｉｚｅｒにより開発された）
が含まれる。

コード番号、一般又は商標名により確認される治療剤の構造は、標準的大要である最新版の「Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ」又はデータベース、例えばＰａｔｅｎｔｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（例えば、ＩＭＳ Ｗｏｒｌｄ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ）から選び取ることができる。その対応する内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼ及び（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩を含む薬学的な組み合わせは、以下、本発明の組み合わせと呼ばれる。

特に指定のない限り又は文章により明確に示されない限り又は適用不可でない限り、本発明の組み合わせに有用な治療剤への参照には、化合物の遊離塩基及び化合物の全ての薬学的に許容される塩の両方が含まれる。

本発明の１つの好ましい実施形態において、組み合わせは、（ａ）ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ若しくは化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩とを含む。

本発明の別の好ましい実施形態において、組み合わせは、（ａ）ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ｃ又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩を含む群から選択される少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔインヒビターとを含む。

本発明の別の好ましい実施形態において、組み合わせは、（ａ）ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩とを含む。

本発明によると、本発明の組み合わせは、それを必要とする対象における増殖性疾患の治療に有用である。本発明の組み合わせは、（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼの有効量、並びに（ｂ）少なくとも１つの、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドなどのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩の有効量を含む薬学的な組み合わせを対象に投与することによる、それを必要とする対象における増殖性疾患の治療に使用することができる。好ましくは、これらの治療剤は、組み合わされたとき、共同で有益な効果を提供する治療有効投与量で投与される。投与は、別々、同時又は連続でありうる。

好ましい実施形態において、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。

増殖性疾患の性質は、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患は、多因子性である。特定の状況下では、異なる作用機構を有する薬物を組み合わせることができる。しかし、異なる作用様式を有する薬物の任意の組み合わせを考慮するだけでは、有利な効果を有する組み合わせをもたらすとは限らない。

本発明の組み合わせの投与は、増殖性疾患、特に肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫を有する対象を治療するために使用できることが見出されている。本発明において、本発明の組み合わせの投与は、例えば、いずれかの単剤療法と比較して、増殖性疾患の進行の遅延に関して又は腫瘍体積の変化に関してより有益な治療、例えば相乗的な又は改善された抗増殖性効果をもたらす。

好ましい実施形態において、本発明の組み合わせは、ｃ−Ｍｅｔ及び／又はＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔシグナル伝達経路の調節不全を有する増殖性疾患の治療に有用である。１つの実施形態において、この増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ及び／又はＨＧＦ／ｃ−Ｍｅｔシグナル伝達経路の調節不全を有する癌である。更なる実施形態において、この増殖性疾患は、ＨＧＦ／ｃ−ｍｅｔ遺伝子の過剰発現及び／又は増幅を有する癌である。

本発明の組み合わせによる治療に適した増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患には、癌、アテローム性動脈硬化症、肺線維症、腎線維症及び再生、肝疾患、アレルギー性障害、炎症及び自己免疫性障害、脳血管疾患、心血管疾患、並びに臓器移植に関連する状態が含まれるが、これらに限定されない。

１つの実施形態において、増殖性疾患は癌である。用語「癌」は、全ての固形及び血液系悪性腫瘍を含む広範囲の腫瘍を意味するために本明細書において使用される。そのような腫瘍の例には、乳房、膀胱、子宮頸部、肝内胆管癌、結腸直腸、食道、胃、頭頸部、腎臓（例えば、乳頭状腎細胞癌）、肝臓（例えば、肝細胞癌）、肺（例えば、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌）、鼻咽頭（nasopharygeal）、卵巣、膵臓、前立腺、甲状腺、子宮内膜、筋骨格系の肉腫（例えば、骨肉腫（osteosarcaoma）、滑膜肉腫、横紋筋肉腫）、軟部組織肉腫の肉腫（例えば、ＭＦＨ／線維肉腫、平滑筋肉腫、カポジ肉腫）、多発性骨髄腫、リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、神経膠芽腫、星状細胞腫、黒色腫、中皮腫、及びウィルムス腫瘍などの良性並びに悪性腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。

本発明の更なる実施形態において、増殖性疾患は固形腫瘍である。用語「固形腫瘍」は、とりわけ、乳癌、膀胱癌、卵巣癌、結腸直腸癌、黒色腫、胃癌、子宮頸癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌）、頭頸部癌、前立腺癌又はカポジ肉腫を意味する。本発明の組み合わせは、固形腫瘍、また液性腫瘍の増殖を阻害する。

本発明の更なる実施形態において、増殖性疾患は、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫である。

本発明は、上記記載の増殖性疾患又は癌のいずれかがｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患又は癌である更なる実施形態を含むことが理解される。

更なる実施形態において、本発明は、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター、特に２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩による治療に抵抗性がある増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患の治療に有用な本発明の組み合わせに関する。本明細書で使用されるとき、用語「抵抗性」は、ｃ−ＭＥＴレセプターチロシンキナーゼインヒビターの連続した存在下で、治療によって収縮した後に再増殖した又は治療によって一次的に排除された後に再出現した、以前は感受性のあった腫瘍を意味する。抵抗性腫瘍の治療の成功は、例えば、新規又は以前に試みられた抗癌療法及び／又は化学療法剤に対する腫瘍細胞の感受性の増加を生じることができ、例えば、続く腫瘍細胞死及び転移の防止をもたらすことができる。

更なる実施形態において、本発明は、癌、特にｃ−Ｍｅｔ依存性腫瘍の増殖及び／又は転移の拡散の阻害に有用である。本発明の組み合わせは、不十分な予後の患者、とりわけ転移性肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫を有する不十分な予後の患者の治療に適している。

更なる実施形態において、本発明は、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患の治療に使用される、（ａ）ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ｃ若しくは化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩とを含む薬学的な組み合わせに関する。好ましくは、増殖性疾患は癌、最も好ましくは、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫である。

更なる実施形態において、本発明は、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患の治療に使用される、（ａ）ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ｃ又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）ｃ−ＭｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターのＰＦ２３４１０６６（クリゾチニブとしても知られている）又は薬学的に許容されるその塩とを含む薬学的な組み合わせに関する。好ましくは、増殖性疾患は癌、最も好ましくは、神経膠芽腫である。

１つの態様において、本発明は、増殖性疾患を治療する方法であって、（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物、式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼと、（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩との組み合わせを、増殖性疾患に対して治療上有効である量により、それを必要とする対象に投与することを含む方法に関する。

増殖性疾患、特に肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫を有する患者には、（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼと、（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩とを含む組み合わせを、前記増殖性疾患の治療のために本発明に従って別々に、同時に又は連続して投与することができる。

更なる実施形態において、本発明は、増殖性疾患を治療する方法であって、（ａ）ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ｃ若しくは化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩とを含む組み合わせを、前記増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量により、それを必要とする対象に投与することを含む方法に関する。 好ましくは、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。好ましくは、増殖性疾患は癌、最も好ましくは、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫である。

更なる実施形態において、本発明は、増殖性疾患を治療する方法であって、（ａ）ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ｃ又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）ｃ−ＭｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターのＰＦ２３４１０６６（クリゾチニブとしても知られている）又は薬学的に許容されるその塩とを含む組み合わせを、前記増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量により、それを必要とする対象に投与することを含む方法に関する。好ましくは、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。好ましくは、増殖性疾患は癌、最も好ましくは、神経膠芽腫である。

更なる実施形態において、本発明は、癌を有する対象において転移の形成を阻害する方法であって、（ａ）式（Ｉ）の化合物、式（ＩＩ）の化合物及び式（ＩＩＩ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼと、（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩との組み合わせを、前記癌に対して共同で治療上有効である量により、それを必要とする対象に投与することを含む方法に関する。好ましくは、癌は、ｃ−Ｍｅｔ依存性癌である。適切な癌は、上記の実施形態に記載されたもの及び参照により本明細書に組み込まれるものである。

好ましい実施形態において、本発明の方法及び組み合わせを使用して、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫を治療することができる。

１つの態様において、本発明は、増殖性疾患の治療における及び／又は増殖性疾患の治療ための医薬品の調製における本発明の組み合わせの使用に関する。好ましい実施形態において、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。好ましい実施形態において、増殖性疾患は癌である。適切な増殖性疾患及び／又は癌は、上記の実施形態に記載されたもの及び参照により本明細書に組み込まれるものである。

１つの実施形態において、本発明は、増殖性疾患の治療のための医薬品の調製における、式（Ｉ）の化合物（例えば、化合物Ａ若しくはＢ）、式（ＩＩ）の化合物（例えば、化合物Ｃ）及び式（ＩＩＩ）の化合物（例えば、化合物Ｄ）又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターと、少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩との組み合わせの使用に関する。好ましい実施形態において、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。好ましい実施形態において、増殖性疾患は癌、特に肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫である。

更なる実施形態において、本発明は、増殖性疾患の治療のための医薬品の調製における、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ｃ若しくは化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩と、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩との組み合わせの使用に関する。好ましい実施形態において、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。好ましい実施形態において、増殖性疾患は癌、特に肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫である。

更なる実施形態において、本発明は、増殖性疾患の治療のための医薬品の調製における、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの化合物Ｃ又は薬学的に許容されるその塩と、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターと、ｃ−ＭｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターのＰＦ２３４１０６６（クリゾチニブとしても知られている）又は薬学的に許容されるその塩との組み合わせの使用に関する。好ましい実施形態において、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。好ましい実施形態において、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患は、癌、特に神経膠芽腫である。

１つの態様において、本発明は、癌を有する対象における転移の形成の阻害における及び／又は癌を有する対象における転移の形成を阻害するための医薬品の調製における本発明の組み合わせの使用に関する。好ましい実施形態において、癌は、ｃ−Ｍｅｔ依存性癌である。

本発明の組み合わせの投与は、個別の治療剤の組み合わせの単剤療法と比較して有益な効果、例えば治療効果、例えば症状の緩和、症状の進行の遅延又は症状の抑制に関する例えば相乗的な治療効果のみならず、本発明の組み合わせに使用される薬学的に治療剤の１つのみを適用する単剤療法と比較して更に驚くべき有益な効果、例えばより少ない副作用、改善された生活の質又は罹患率の減少をもたらすこともできる。

更なる利益は、低い用量の治療剤の本発明の組み合わせを使用できること、例えば、用量が多くの場合に少量しか必要でないばかりでなく、少ない頻度で適用されること又は治療剤の１つのみで観察される副作用の発生を減らすために使用できることである。このことは、治療される患者の希望及び要求に合致している。

本発明の組み合わせは、本明細書前記に記載された有益な効果をもたらすことが、確立された試験モデルによって示すことができる。当業者は、そのような有益な効果を立証するために、関連した試験モデルを選択することが十分に可能である。本発明の組み合わせの薬学的活性は、例えば、臨床研究又は以下に本質的に記載されているインビトロの試験手順によって実証することができる。

適切な臨床研究は、特に、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患、特に肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫を有する患者における、例えばオープンラベル用量漸増研究である。そのような研究は、特に、本発明の組み合わせにおける治療剤の相乗効果を立証する。ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患に対する有益な効果は、当業者にそれ自体知られているこれらの研究の結果を介して直接的に決定することができる。そのような研究は、特に、いずれかの治療剤を使用する単剤療法と本発明の薬学的な組み合わせの効果を比較するのに適切でありうる。１つの実施形態において、式（Ｉ）の化合物（例えば化合物Ａ若しくはＢ）、式（ＩＩ）の化合物（例えば化合物Ｃ）及び式（ＩＩＩ）の化合物（例えば化合物Ｄ）からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの用量は、最大許容投与量が達成されるまで漸増され、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター、例えば２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドは、固定用量で投与される。あるいは、式（Ｉ）の化合物（例えば、化合物Ａ若しくはＢ）、式（ＩＩ）の化合物（例えば、化合物Ｃ）又は式（ＩＩＩ）の化合物（例えば、化合物Ｄ）からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターは、固定用量で投与することができ、ｃ−ＭＥＴレセプターチロシンキナーゼインヒビターの、例えば２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの用量は、漸増させることができる。各患者は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの用量を毎日又は断続的に摂取してもよい。治療の効力は、そのような研究において、例えば、６週間毎に症状のスコアを評価することによって１２、１８又は２４週間後に決定することができる。

１つ以上の成分の相乗的相互作用を決定するためには、効果におけるそれぞれの成分の最適な効果範囲及び絶対用量範囲を、治療の必要な患者への異なるｗ／ｗの比範囲及び用量にわたる成分の投与により明確に測定することができる。ヒトでは、患者において臨床研究を実施する複雑さ及び費用が、相乗作用の一次モデルとしてのこの試験形態の使用を実用的でなくすることがある。しかし、１つの種における相乗作用の観察は、相乗効果を測定する、本明細書に記載されている現存の他の種及び動物モデルにおける効果の予測となる可能性があり、そのような研究の結果は、薬物動態学的／薬力学的方法の適用により他の種に必要な有効用量比範囲、並びに絶対用量及び血漿濃度を予測するのに使用することもできる。ヒトにおいて見られる腫瘍モデルと効果の間の確立された相関関係は、動物における相乗作用が、例えば異種移植モデル又は適切な細胞系において実証されうることを示唆している。

本発明の方法は、１つ以上の薬学的に許容される担体を含む医薬組成物として処方されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターの組み合わせを用いることができる。

１つの態様において、本発明は、本発明の組み合わせ及び１つ以上の薬学的に許容される担体の、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量を含む医薬組成物を提供する。この医薬組成物は、任意の適切な経路により単一製剤又は単位剤形の固定された組み合わせとして患者に投与される治療剤（ａ）及び（ｂ）から構成されうる。あるいは、治療剤、例えばホスファチジルイノシトール−３−キナーゼインヒビター及びｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩は、両方とも、別々の医薬組成物又は製剤又は単位剤形で、特定の時間制限なしに同時に、同時発生的に又は連続して投与される固定されない組み合わせとして患者に投与される。

好ましい実施形態において、本発明は、それを必要とする患者に、同時発生的であるが、別々に投与される又は連続して投与される治療剤（ａ）及び治療剤（ｂ）の、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量を別々に含む医薬組成物を提供する。

治療剤の別々の投与のため又は固定された組み合わせ、すなわち本発明の組み合わせを含む単一ガレノス組成物による治療剤の投与のための医薬組成物は、それ自体既知の方法で調製することができ、治療有効量の少なくとも１つの薬理学的に活性な治療剤を単独で、例えば上記に示されたように含む又は経腸若しくは非経口適用にとりわけ適している１つ以上の薬学的に許容される担体と組み合わせて含む、ヒトを含む対象（温血動物）への経口又は直腸などの経腸投与及び非経口投与に適したものである。

新規医薬組成物は、約０．１％〜約９９．９％、好ましくは約１％〜約６０％の治療剤を含有し、含有してもよい。

経腸又は非経口投与用の固定された組み合わせ又は固定されない組み合わせを含む、併用療法のための医薬組成物は、例えば、糖衣錠、錠剤、カプセル剤若しくは坐剤又はアンプル剤などの単位剤形のものである。特に指示のない限り、これらはそれ自体既知の方法により、例えば、多様な従来の混合、微粉砕、粉砕、糖衣、溶解、凍結乾燥法又は当業者に容易に理解される製作技術によって調製される。それぞれの剤形の個別の用量に含有される治療剤の単位含有量は、必要な有効量が複数の投与単位の投与により達成されうるので、それ自体有効量を構成する必要がないことが理解される。

作用物質の組み合わせを含有する単位剤形又は作用物質の組み合わせにおける個別の作用物質は、カプセル、例えばゼラチンカプセル内に封入されたマイクロ錠剤の形態でありうる。これには、Ｐｆｉｚｅｒから入手可能なＣＡＰＳＵＧＥＬとして知られている硬質ゼラチンカプセルなどの、医薬製剤に用いられるゼラチンカプセルを使用してもよい。

本発明の単位剤形は、場合により、医薬に使用される追加の従来の担体又は賦形剤を更に含むことができる。そのような担体の例には、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、滑剤、安定剤及び充填剤、希釈剤、着色剤、風味剤、並びに防腐剤が含まれるが、これらに限定されない。当業者は、日常的な実験により、必要以上の負担を負うことなく、剤形の特定の所望の特性に関して１つ以上の上述の担体を選択することができる。使用される各担体の量は、当該技術分野において慣用の範囲内で変わりうる。参照により全て本明細書に組み込まれる以下の参考文献は、経口剤形の製剤化に使用される技術及び賦形剤を開示する。The Handbook of Pharmaceutical Excipients, 4^th edition, Rowe et al., Eds., American Pharmaceuticals Association (2003)及びRemington: the Science and Practice of Pharmacy, 20^thedition, Gennaro, Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2003)を参照すること。

これらの任意の追加の従来の担体は、１つ以上の従来の担体を、溶解造粒の前若しくは間に最初の混合物に組み込むこと又は１つ以上の従来の担体を顆粒と組み合わせることにより経口剤形にすることによって、経口剤形に組み込むことができる。後者の実施形態では、組み合わせた混合物を、例えばＶブレンダーにより更にブレンドし、続いて錠剤、例えば一体化錠剤に圧縮若しくは成形する、カプセルによりカプセル化する又はサッシュに充填することができる。

薬学的に許容される崩壊剤の例には、デンプン；粘土；セルロース；アルギン酸塩；ゴム；架橋ポリマー、例えば架橋ポリビニルピロリドン又はクロスポビドン、例えばＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ（Ｗａｙｎｅ、ＮＪ）からのＰＯＬＹＰＬＡＳＤＯＮＥ ＸＬ；架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム又はクロスカルメロースナトリウム、例えばＦＭＣからのＡＣ−ＤＩ−ＳＯＬ；架橋カルボキシメチルセルロースカルシウム；ダイズ多糖；及びグアーゴムが含まれるが、これらに限定されない。崩壊剤は、組成物の約０重量％〜約１０重量％の量で存在してもよい。１つの実施形態において、崩壊剤は、組成物の約０．１重量％〜約５重量％の量で存在する。

薬学的に許容される結合剤の例には、デンプン；セルロース及びその誘導体、例えば微晶質セルロース、例えばＦＭＣ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ）からのＡＶＩＣＥＬ ＰＨ、ヒドロキシプロピルセルロース ヒドロキシエチルセルロース及びＤｏｗ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｒｐ．（Ｍｉｄｌａｎｄ、ＭＩ）からのヒドロキシプロプルメチルセルロースのＭＥＴＨＯＣＥＬ；スクロース；デキストロース；トウモロコシシロップ；多糖；並びにゼラチンが含まれるが、これらに限定されない。結合剤は、組成物の約０重量％〜約５０重量％、例えば２〜２０重量％の量で存在してもよい。

薬学的に許容される潤滑剤及び薬学的に許容される滑剤の例には、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、デンプン、タルク、第三リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ポリエチレングリコール、粉末セルロース及び微晶質セルロースが含まれるが、これらに限定されない。潤滑剤は、組成物の約０重量％〜約１０重量％の量で存在してもよい。１つの実施形態において、潤滑剤は、組成物の約０．１重量％〜約１．５重量％の量で存在してもよい。滑剤は、約０．１重量％〜約１０重量％の量で存在してもよい。

薬学的に許容される充填剤及び薬学的に許容される希釈剤の例には、粉砂糖、圧縮糖、デキストラン、デキストリン、デキストロース、ラクトース、マンニトール、微晶質セルロース、粉末セルロース、ソルビトール、スクロース及びタルクが含まれるが、これらに限定されない。充填剤及び／又は希釈剤は、例えば、組成物の約０重量％〜約８０重量％の量で存在してもよい。

１つの実施形態において、医薬組成物は、本発明の組み合わせ及び１つ以上の薬学的に許容される担体の、増殖性疾患、特にｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量を含み、ここでホスファチジルイノシトール−３−キナーゼインヒビターは、化合物Ａ、化合物Ｂ、化合物Ｃ及び化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される。

更なる実施形態において、医薬組成物は、本発明の組み合わせ及び１つ以上の薬学的に許容される担体の、増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量を含み、ここでｃ−Ｍｅｔインヒビターは、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩である。

更なる実施形態において、医薬組成物は、本発明の組み合わせ及び１つ以上の薬学的に許容される担体の、増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量を含み、ここで、ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼインヒビターは、化合物Ｃ、化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択され、ｃ−Ｍｅｔインヒビターは、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩である。

更なる実施形態において、医薬組成物は、本発明の組み合わせ及び１つ以上の薬学的に許容される担体の、増殖性疾患に対して共同で治療上有効である量を含み、ここで、ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼインヒビターは、化合物Ｃ、化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択され、ｃ−Ｍｅｔインヒビターは、ＰＦ２３４１０６６（クリゾチニブとしても知られている）又は薬学的に許容されるその塩である。

本発明によると、本発明の組み合わせにおけるそれぞれの治療剤の治療有効量を、同時に又は連続して任意の順番で投与することができ、要素を、別々に又は固定された組み合わせとして投与することができる。例えば、本発明により増殖性疾患を治療する方法は、共同で治療上有効である量、好ましくは相乗的に有効である量、例えば本明細書に記載されている量に対応する１日又は断続投与量により、同時に又は任意の順番で連続して、（ｉ）遊離又は薬学的に許容される塩形態の第１の治療剤（ａ）を投与すること及び（ｉｉ）遊離又は薬学的に許容される塩形態の治療剤（ｂ）を投与することを含むことができる。本発明の組み合わせの個別の治療剤を、分割した又は単一の組み合わせ形態により、一連の治療の間に異なる時間で別々に又は同時発生的に投与することができる。更に、用語「投与する」は、治療剤それ自体にインビボで変換する治療剤のプロドラッグの使用も包含する。したがって本発明は、そのようなレジメンの同時又は交互治療を全て包含すると理解されるべきであり、用語「投与する」は、そのように解釈されるべきである。

本発明の組み合わせに用いられるそれぞれの治療剤の有効投与量は、用いられる特定の化合物又は医薬組成物、投与様式、治療される状態及び治療される状態の重症度に応じて変わりうる。したがって、本発明の組み合わせの投与量レジメンは、投与経路、並びに患者の腎臓及び肝臓機能を含む多様な要因によって選択される。通常の技能を有する臨床医又は医師は、状態の緩和、対抗又は進行の阻止に必要な単一治療剤の有効量を容易に決定及び処方することができる。

それぞれの治療剤の有効投与量は、組み合わせにおける他の化合物と比較して、１つの化合物のより頻繁な投与を必要とする場合がある。したがって、適切な投与を可能にするため、包装された医薬製品は、化合物の組み合わせを含有する１つ以上の剤形及び組み合わせにおける化合物の１つを含有するが、組み合わせの他の化合物を含有しない１つ以上の剤形を含有してもよい。

本発明の組み合わせに用いられる治療剤が、単一薬物として市販されている形態に適用されるとき、これらの投与量及び投与様式は、本明細書に記述されていない場合は、それぞれの市販薬の添付文書に提供されている情報に従うことができる。

それを必要とする対象、例えば体重がおよそ７０ｋｇのヒトに投与される式Ｉの化合物、とりわけ化合物Ａ又は薬学的に許容されるその塩の用量は、例えば同じサイズでありうる好ましくは１〜３つの単一用量に分割された、１人あたり１日に好ましくはおよそ３ｍｇ〜およそ５ｇ、より好ましくはおよそ１０ｍｇ〜およそ１．５ｇ、より好ましくはおよそ１００ｍｇ〜約１２００ｍｇ、最も好ましくは約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇである。

式ＩＩの化合物、とりわけ化合物Ｃは、好ましくは１日に約０．００１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは１．０〜３０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の用量で毎日投与される。１つの好ましい実施形態において、式Ｉの化合物、とりわけ化合物Ｃの投与量は、１人あたり約１０ｍｇ〜約２０００ｍｇ／日の範囲である。

式ＩＩＩの化合物、とりわけ化合物Ｄの用量は、好ましくは、１日あたり受容者の体重１キログラム毎に約０．０５〜約５０ｍｇ、好ましくは約０．１〜２５ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは約０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の用量で毎日投与される。したがって、７０ｋｇの人への投与では、投与量範囲は、最も好ましくは１日あたり約３５〜７００ｍｇである。

ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター、とりわけ２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドは、好ましくは、１日あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の用量で毎日投与される。したがって、７０ｋｇの人への投与では、投与量範囲は、最も好ましくは１日あたり約０．７ｍｇ〜７ｇ、より好ましくは１日あたり５０ｍｇ〜３００ｍｇである。

増殖性疾患を治療するためのそれぞれの治療剤の最適投与量は、既知の方法を使用してそれぞれの個体のために経験的に決定することができ、疾患の進展の程度；個体の年齢、体重、身体全体の健康、性別及び食事；投与の時間及び経路；並びに個体が服用している他の薬剤が含まれるが、これらに限定されない多様な要因によって左右される。最適投与量は、当該技術分野において良く知られている日常的な試験及び手順を使用して確立することができる。

担体材料と組み合わせて単一剤形を生成することができるそれぞれの治療剤の量は、治療される個体及び特定の投与様式に応じて変わる。幾つかの実施形態において、本明細書に記載されている作用物質の組み合わせを含有する単位剤形は、作用物質が単独で投与される場合に典型的に投与される、組み合わせにおけるそれぞれの作用物質の量を含有する。

投与の頻度は、使用される化合物及び治療される特定の状態に応じて変わりうる。一般に、有効な療法を提供するのに十分な最小投与量の使用が好ましい。患者では、一般に、治療される状態に適したアッセイを使用して治療有効性をモニターすることができ、このことは当業者に周知である。

１つの実施形態において、本発明は、治療剤の化合物Ａ若しくはＢ又は薬学的に許容されるその塩の薬学的組み合わせを提供し、ｃ−ＭＥＴレセプターチロシンキナーゼインヒビター、好ましくは２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド）又は薬学的に許容されるその塩は、本明細書に開示されている組み合わせ、医薬組成物及び剤形に、２０：１〜２：１、より好ましくは２０：１〜５：１の範囲の比でそれぞれ毎日存在することができる。

好ましい実施形態において、本発明は、治療剤の化合物Ｃ又は薬学的に許容されるその塩の薬学的組み合わせを提供し、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター、好ましくは２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩は、毎日１：１〜１：４、より好ましくは毎日１：１又は１：２の範囲の投与量比で存在する。

好ましい実施形態において、本発明は、治療剤の化合物Ｄ又は薬学的に許容されるその塩の薬学的組み合わせを提供し、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター、好ましくは２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩は、８：１〜１：１、より好ましくは４：１〜２：１〜１：１の範囲の投与量比でそれぞれ毎日存在する。

毒性を有することなく効力を生じる薬物化合物の最適比、個別の及び組み合わせた投与量、並びに濃度は、標的部位へ治療剤利用能の動態学に基づいており、当業者に既知の方法を使用して決定される。

更に、本発明は、治療剤としての本発明の組み合わせを、増殖性疾患の治療におけるその同時の、別々の又は連続した投与のための使用説明書と一緒に含む、商業的な包装を提供する。好ましい実施形態において、増殖性疾患は、ｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である。好ましい実施形態において、増殖性疾患は肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫である。

以下の実施例は、上記に記載された本発明を例示しているが、本発明の範囲をいかようにも制限することを意図しない。本発明の薬学的な組み合わせの有益な効果は、それ自体当業者に既知の他の試験モデルによって決定することもできる。

本明細書に記載されている本発明の組み合わせの有用性は、インビトロ、動物試験の方法、並びに臨床研究によって実証することができる。例えば、本発明の式（Ｉ）の化合物の有用性において、以下に記載されている方法によって実証することができる。

〔実施例１〕
非小細胞肺癌における化合物Ａとの組み合わせ
材料及び方法
ＰＩ３Ｋインヒビター（化合物Ａ）及びｃ−ＭＥＴレセプターチロシンキナーゼインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドを、非小細胞肺癌モデルにおいて組み合わせにより評価する。両方の化合物の化合物貯蔵物をＤＭＳＯにより個別に調製する。化合物を、Ｔｅｃａｎ分配器の使用により、約１０００×の範囲の濃度を網羅するように連続的に希釈する。実験に使用した最高濃度は、以下である。化合物Ａ＝２．７μＭ及び２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド＝０．２７μＭ。単一の作用物質及び組み合わせの両方を、対照及び１つの自己交差を伴って、複数の濃度で試験する。

細胞培養及び生存度の測定
この研究に使用される細胞系は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｅｌｌ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入され、ヒト非小細胞肺癌細胞系ＥＢＣ−１（ｃ−Ｍｅｔ増幅を担持する）、ＮＣＩ−Ｈ１９９３（ｃ−ＭＥＴ増幅を担持する）、ＮＣＩ−Ｈ１６４８（ｃ−Ｍｅｔ増幅を担持する）、ＮＣＩ−Ｈ１５７３（ｃ−Ｍｅｔ増幅及びＫＲＡＳ突然変異を担持する）、並びにＨＣＣ２９３５（ＥＧＦＲ突然変異）が含まれる。全ての細胞系は、提供者により指定された対応する培養培地に維持されている。

組み合わせの効果を評価するため、細胞を３８４ウェルプレートに５００細胞／ウェルで接種し、一晩インキュベートする。化合物マスタープレートの内容物を、１：２００（１μＬの化合物溶液対２００μＬの、１０％ウシ胎児血清を含有するＲＰＭＩ−１６０培養培地）に前希釈してから、５μＬのこの前希釈物を、２０μＬの細胞培養培地を含有する細胞プレートに移して、標的とする最終化合物濃度並びにビヒクル（ＤＭＳＯ）濃度の０．０９％を達成する。

細胞生存度に対する単一の作用物質、及びこれらの組み合わせの効果を、３７℃／５％ＣＯ_２による７２時間のインキュベーションの後、条件１つあたり２５μＬ試薬／ウェル及びｎ＝２複製プレートを使用する細胞ＡＴＰレベルの定量化（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏ、Ｐｒｏｍｅｇａ）により評価する。化合物添加時の細胞の数／生存度も同様に評価し、細胞系の個体群倍加時間の推定に使用する。

未処理及び処理レベルＵ及びＴでは、阻害は、式：Ｉ＝１−Ｔ／Ｕを使用して計算され、完全阻害の０％〜１００％の範囲である。「増殖阻害」は、Ｔ＜Ｕ_０の場合、ＧＩ＝１−（Ｔ−Ｕ_０）／Ｖ_０であり、そうでなければ１−（Ｔ−Ｕ_０）／（Ｕ−Ｕ_０）であり、ここでＵ_０は、０時点での未処理レベルである。ＧＩレベルの０、１００％及び２００％は、不活性、細胞増殖阻害性及び細胞障害性の化合物に相当する。

化合物の活性、相乗作用及び選択性の計算
それぞれの化合物における単一の作用物質の活性は、形式：Ｉ＝Ｉ_ｍａｘＣ^α／［Ｃ^α＋ＥＣ_５０ ^α］のＳ字形ヒル関数を当てはめることにより特徴決定され、ここで、Ｃは濃度であり、ＥＣ_５０は変曲点であり、αはＳ字曲線性である。ＩＣ_５０交差点は、当てはめた曲線が５０％の阻害を達成した場所を計算する。

組み合わせでは、相乗作用の計算は、Ｌｏｅｗｅ相加モデル（有効用量を添加することによりもたらされる「薬物それ自体」の期待値）が参照される。Ｌｏｅｗｅ期待値［Loewe S., Ergebn Physiol 27: 47−187 (1928)）は、数値最適化を使用して、（Ｃ_Ｘ／ＩＣ_Ｘ）＋（Ｃ_Ｙ／ＩＣ_Ｙ）＝１であり、ＩＣ_Ｘ.Ｙが、当てはめた単一作用物質の曲線Ｉ_{Ｌｏｅｗｅ}で有効濃度であるような阻害Ｉ_{Ｌｏｅｗｅ}を見出すことによって、それぞれの用量対Ｃ_Ｘ，Ｙについて計算される［Berenbaum MC, J Theor Biol 114: 413−431 (1985)］。「相乗作用スコア」Ｓは、おそらく薬物のオフターゲット効果により占められている用量マトリックスにおける最高濃度点を除いて、試験した全ての組み合わせ用量点にわたってＩ_ｄａｔａとＩ_{Ｌｏｅｗｅ}の差を平均することにより計算される。ＧＩ_ｍａｘは、全体的な組み合わせの有効性の測度である、マトリックスにおける（最高用量対を除いた）最大増殖阻害である。

選択的相乗作用は、試験した全ての細胞系における組み合わせについて相乗作用スコアを比較することによって評価される。単一の細胞系におけるその組み合わせの「選択性スコア」は、ＳＳ＝ａｂｓ（Ｓ）^＊ＧＩ_ｍａｘ ^＊（Ｓ−μ）／σとして計算され、ここで、μは中央値であり、σは全ての細胞系にわたるＳの絶対偏差中央値である。重み付けＺスコアは、細胞系において際だって相乗的である及びそれ自体が有効でもあり、相乗的でもある組み合わせを強調する。

全ての計算は、Ｃｈａｌｉｃｅソフトウエア（ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ ＭＡ）を使用して実施される。この実験では、ＧＩｍａｘデータは、以下のようなスケールとして解釈される。（ａ）ＧＩｍａｘ＝「０」は、阻害なしを示し、（ｂ）ＧＩｍａｘ＝およそ「１」は、１００％の阻害及び静止を示し、（ｃ）ＧＩｍａｘ＝２は、２００％の阻害及び癌細胞の完全な消滅又は死を示す。この手順を使用して、最高濃度を除く組み合わせの有効性（ＧＩｍａｘ）が以下のように示される。

この実験において、相乗作用スコア（ＳＳ）は、以下のように解釈される。（ａ）ＳＳ＝「０」は、相乗作用を示し、（Ｂ）ＳＳ＝「０．１」は、高い相乗作用を示し、（ｃ）ＳＳ＝「−０．０１〜−０．０７」の負の値は、相加性を示す。最高濃度を除いた組み合わせにより得られる選択的相乗作用スコアが、以下のように示される。

〔実施例２〕
非小細胞肺癌における化合物Ｃとの組み合わせ
上記の実施例１に記載された実験手順に従って、ＰＩ３Ｋインヒビターの化合物Ｃ及びｃ−ＭＥＴレセプターチロシンキナーゼインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの組み合わせの効力及び相乗作用を、非小細胞肺癌モデルにおいて組み合わせにより評価する。化合物を、Ｔｅｃａｎ分配器の使用により、約１０００×の範囲の濃度を網羅するように連続的に希釈する。実験に使用した最高濃度は、以下である。化合物Ｃ＝１１μＭ及び２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド＝０．２７μＭ。単一の作用物質及び組み合わせの両方を、対照及び１つの自己交差を伴って、複数の濃度で試験する。

全ての計算は、Ｃｈａｌｉｃｅソフトウエア（ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ ＭＡ）を使用して実施される。この手順を使用して、最高濃度を除く組み合わせの有効性（ＧＩｍａｘ）が以下のように示される。

更に、最高濃度を除いた組み合わせの選択的相乗作用スコアが、以下のように示される。

〔実施例３〕
非小細胞肺癌における化合物Ｄとの組み合わせ
上記の実施例１に記載された実験手順に従って、ＰＩ３Ｋインヒビターの化合物Ｄ及びｃ−ＭＥＴレセプターチロシンキナーゼインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの組み合わせの効力及び相乗作用を、非小細胞肺癌モデルにおいて組み合わせにより評価する。化合物を、Ｔｅｃａｎ分配器の使用により、約１０００×の範囲の濃度を網羅するように連続的に希釈する。実験に使用した最高濃度は、以下である。化合物Ｄ＝１１μＭ及び２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド＝０．２７μＭ。実験に使用した最低濃度は、以下である。化合物Ｄ＝０．１５μＭ及び２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド＝０．０００３μＭ。単一の作用物質及び組み合わせの両方を、対照及び１つの自己交差を伴って、複数の濃度で試験する。

全ての計算は、Ｃｈａｌｉｃｅソフトウエア（ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ ＭＡ）を使用して実施される。この手順を使用して、最高濃度を除く組み合わせの有効性（ＧＩｍａｘ）が以下のように示される。

更に、最高濃度を除いた組み合わせの選択的相乗作用スコアが、以下のように示される。

〔実施例４〕
神経膠芽腫における化合物Ｃとの組み合わせ
方法
ＰＩ３Ｋインヒビターの化合物Ｃ及びｃ−ＭＥＴレセプターチロシンキナーゼインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドを、神経膠芽腫腫瘍モデルにおいて組み合わせにより評価する。化合物Ｃ（１０ｍＭ）及び２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド（１０ｍＭ）をＤＭＳＯに溶解し、アリコートにより−２０℃で保存する。

細胞培養及び細胞生存度アッセイ
ヒト神経膠芽腫細胞系のＵ−８７ＭＧ（ＰＴＥＮ突然変異及びＨＧＦ発現系）、Ｈ４（ＰＴＥＮ突然変異及びＨＧＦ発現系）、Ａ１７２（低ＨＧＦ発現レベルのＰＴＥＮ突然変異）、並びにＬＮ−２２９（ＰＴＥＮ野生型及び低ＨＧＦ）をＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｅｌｌ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入し、推奨された培地中で３７℃、５％ＣＯ_２の加湿インキュベーターにより維持する。４つの細胞系全てが、検出されたＭＥＴをｍＲＮＡレベルで発現する。

細胞は、１週間に２回継代され、培地は２〜３日毎に交換される。細胞生存度アッセイでは、細胞を、ＴｒｙＰＬＥ Ｅｘｐｒｅｓｓの使用によりトリプシン処理し、透明底９６ウェル黒色プレート（Ｃｏｓｔａｒ、＃３９０４）により三連で平板培養（４０００細胞／ウェル）し、一晩かけて付着させ、続いて多様な濃度のインヒビター作用物質又は作用物質の組み合わせと共に７２時間インキュベートする。

細胞生存度は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）（ＣＴＧ）発光細胞生存度アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）の使用により細胞ＡＴＰ内容物を測定することによって決定される。単一作用物質及び組み合わせによる細胞の各処理を、対照又は等量の培地で処理された細胞と比較する。等量のＣＴＧ試薬を、化合物処理の終了時に各ウェルに加え、発光をＥｎｖｉｓｉｏｎプレート読み取り機（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に記録する。発光シグナル値の低減又は増強（応答）を、未処理（対照）細胞と比べて計算する。

組み合わせの効果を計算する方法
このｃＭＥＴインヒビターを伴うこのＰＩ３Ｋインヒビターの抗増殖性活性を偏りのない方法で評価するため、並びに全ての可能な濃度での相乗効果を同定するため、研究を「用量マトリックス」により実施する。これには、連続希釈単一作用物質の全ての可能な並べ換えを利用し、「用量マトリックス」は、以下から構成される。
・５用量の２×連続希釈に付され、高用量が２．４μＭであり、低用量がおよそ１５０ｎＭである、化合物Ｃ。
・５用量の２×連続希釈に付され、高用量が１μＭであり、低用量がおよそ１２ｎＭである、ｃ−ＭＥＴインヒビター。
相乗的相互作用（Ｃｈａｌｉｃｅソフトウエア［ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ ＭＡ］を使用して分析）は、薬剤それ自体の用量相加参照モデルに対して、組み合わせによる応答と、単独で作用する作用物質による応答とを比較することによって計算される。用量相加の偏差は、組み合わせ効果の全体的な強度を定量化する組み合わせ指数（ＣＩ）により数値的に評価することができる。この計算（実質的には、体積スコア）は、以下の通りである。
Ｖ_ＨＳＡ＝ΣＸ，Ｙ ｌｎｆ_Ｘ ｌｎｆ_Ｙ（Ｉ_ｄａｔａ−Ｉ_ＨＳＡ）
加えて、ＣＩは、データと、単一作用物質希釈因数に正規化される最高単一作用物質表面から計算される（Lehar J et al (2009), “Synergistic drug combinations tend to improve therapeutically relevant selectivity”, Nature Biotechnology 27: 659-66 (2009)）。

データ解析
データ評価及びグラフ生成は、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌソフトウエア及びＣｈａｌｉｃｅソフトウエアを使用して実施される。

結果
化合物Ｃ及び２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの効果を、上記に考察された「用量マトリックス」スキームにより評価する。４つの細胞全てを、化合物Ｃ及び２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドにより、９８ウェルフォーマットで２日間処理する。細胞生存度を、ＣｅｌｌＴｉｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏアッセイの使用により測定し、阻害％データを６×６用量格子として数値的に表示する。本明細書の図１〜４は、前述の手順の結果のまとめを提供する。各データポイントは、３つのウェルの平均データを表し、また色の範囲は、阻害レベルを表す。太線長方形は、組み合わせが同じ用量の単一作用物質より有効である領域を強調する。

用量格子全体にわたる阻害の百分率が、本明細書の図１〜４において示されている。化合物Ｃは、４つの細胞系全てにおいて濃度依存性の抗増殖性活性を示し、ＰＴＥ野生型（ＬＮ２２９）である１つの細胞系では活性が低い。２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドは、２つ高ＨＧＦ細胞系（Ｕ８７ＭＧ及びＨ４）において中程度の活性のみを示し、他の２つ（Ａ１７２及びＬＮ２２９）では完全に不活性である。一緒に使用すると、相乗作用はＨ４とＵ８７−ＭＧの両方において観察されたが、Ａ１７２とＬＮ２２９では観察されず、本明細書の図１〜４に示されている強調領域、並びにアイソボログラムにおけるそれぞれの単一作用物質による増強された増殖阻害によって証明されている。

このデータは、この組み合わせが神経膠芽腫細胞系の亜集団の増殖を相乗的に阻害すること、ＰＴＥＮ突然変異、並びに高ＨＧＦ細胞系が、単一作用物質のそれぞれに対してより感受性があると思われること、組み合わせがより顕著な増殖阻害をもたらすことを示唆している。

〔実施例５〕
神経膠芽腫異種移植モデルにおける化合物Ｃとの組み合わせ
この実験では、Ｕ−８７ＭＧヒト神経膠芽腫異種移植モデルを使用して、ＰＩ３Ｋインヒビターの化合物Ｃ及びｃ−Ｍｅｔインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの抗腫瘍効力を、単一作用物質又は組み合わせとして評価する。国立癌研究所から得たＵ−８７ＭＧ腫瘍細胞は、発癌性と思われる変種のＣＤＫＮ２Ａ、ＣＤＫＮ２Ｃ、ＣＤＫＮ２ａ及びＰＴＥＮとホモ接合性であると報告されており、ＭＥＴ、ＰＩＫ３ＣＡ又は新生物細胞及びＨＧＦ発現において頻繁に改変する５８個の他の遺伝子において突然変異は検出されない。

マウスを、１７．７及び３５．３ｍｇ／ｋｇのｃ−Ｍｅｔインヒビター、並び３２．７ｍｇ／ｋｇの化合物Ｃの単剤療法により、１７．７：３２．７のｃ−Ｍｅｔインヒビター／化合物Ｃの二重療法により、２１日間、毎日治療する。５８．８：５．４ｍｇ／ｋｇ用量比のｃ−Ｍｅｔインヒビター／化合物Ｃの組み合わせを、この研究に含めた。対照マウスは、両方のビヒクルを受け、標準的な前臨床テモゾロミドレジメンにより、腫瘍モデルの性能をモニターした。経口治療は、１日目（Ｄ１）から、確立された皮下腫瘍を有するヌードマウスにおいて開始した。それぞれの動物は、腫瘍が所定の２０００ｍｍ３の終点体積に達したとき又はＤ６０のいずれか早いほうで安楽死させた。この試験はＤ５１に終了した。短期効力は、あらゆる群において５０％を超えるマウスが試験を離脱する前の最終日である、Ｄ１３の腫瘍体積変化の平均及び中央値から決定された。全体的な効力は、腫瘍が体積終点に進行するまでに要した時間から、並びにＤ５１の生存及び退縮率から決定された。この報告は、Ｕ８７ＭＧ−ｅ３２６腫瘍増殖遅延実験の方法及び結果を記載する。

マウス
メスヌードマウス（ｎｕ／ｎｕ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）は、試験のＤ１に１０週齢であり、１５．５〜２７．３ｇの体重（ＢＷ）範囲を有した。動物には、水（逆浸透、１ｐｐｍのＣｌ）、並びに１８．０％の粗タンパク質、５．０％の粗脂肪及び５．０％の粗線維から構成されるＮＩＨ３１ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｎｄ Ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ Ｌａｂ Ｄｉｅｔ（登録商標）を適宜に給餌する。マウスを、２０〜２２℃（６８〜７２°Ｆ）及び４０〜６０％の湿度で１２時間の明サイクルにより照射された静止マイクロアイソレーター（microisolator）中のＥｎｒｉｃｈ−ｏ’ｃｏｂｓ（商標）Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｂｅｄｄｉｎｇに収容する。

腫瘍埋め込み及び測定
Ｕ−８７ＭＧ腫瘍系をＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得て、ヌードマウスへの一連の生着により維持する。腫瘍フラグメント（１ｍｍ^３）を、それぞれの試験マウスの腹部右側の皮下に埋め込む。腫瘍をカリパスにより二次元で測定して、平均体積が所望の１００〜１５０ｍｍ^３の範囲に達するように、増殖をモニターする。腫瘍サイズ（ｍｍ^３）は、腫瘍体積＝（幅^２×長さ）／２により計算され、ここで幅及び長さ（ｍｍ）は、腫瘍の測定値である。腫瘍重量は、１ｍｇが１ｍｍ^３の腫瘍体積と同等であるという前提によって推定することができる。腫瘍細胞の埋め込みの１４日後、研究のＤ１に、個別の腫瘍体積の６３〜１９６ｍｍ^３を有するマウスを７群に分け、群の平均腫瘍体積は１２２〜１２７ｍｍ^３である。

試験物品
ｃ−Ｍｅｔインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド（ジ−ＨＣｌ塩、８４．９８％の遊離塩基）を４℃で保存し、脱イオン水に最終濃度の２×で加え、溶解するまで超音波処理する。等量の脱イオン水中０．５％メチルセルロース及び０．１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を加えて、脱イオン水中０．２５％メチルセルロース及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０中の５．８８４ｍｇ／ｍＬの投与溶液（ビヒクル１）をもたらす。この溶液の一部をビヒクル１で希釈して、３．５３及び１．７６５ｍｇ／ｍＬの投与溶液をもたらす。

化合物Ｃ（ＨＣｌ塩、９１．８５％の遊離塩基）を−２０℃で保存し、脱イオン水中の１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０に加え、超音波処理して、最終濃度の２×で均一の懸濁液を得る。等量の脱イオン水中１％メチルセルロースを加え、混合物を撹拌し、超音波処理して、脱イオン水中０．５％メチルセルロース及び０．５％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０中の不透明無色の３．２６６ｍｇ／ｍＬの投与懸濁液（ビヒクル２）を得る。０．５４４ｍｇ／ｍＬの投与懸濁液は、最初の懸濁液の一部をビヒクル２で希釈することにより得られる。

テモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、１００ｍｇカプセル剤、ロット番号ＩＲＳＡ００１）は、脱イオン水への懸濁により１回調製し、４℃で保存する。

治療計画
試験剤とビヒクルの両方を、経口胃管栄養投与（ｐ．ｏ．）により、１日１回、連続２１日間（ｑｄ×２１）にわたって投与する。組み合わせ療法では、化合物Ａをｃ−Ｍｅｔインヒビター後の６０分以内に投与する。テモゾロミドを、ｐ．ｏ．により１日１回、連続５日間（ｑｄ×５）にわたって投与する。全ての群において、投与量の１０ｍＬ／ｋｇ（０．２ｍＬ／２０ｇマウス）が各動物の体重に対して計られ、以前のＢＷが繰り越される週末を除いて、投与日に決定される。

７群のヌードマウス（ｎ＝１０匹／群）が以下のように治療される。群１のマウスは、ビヒクル１及び２を受け、全ての分析において対照として機能する。Ｄ７において、この群には不用意にＩｇＧの負の対照抗体が投与され、この誤りは対照腫瘍増殖に対して影響がなかったと結論づけられた。群２及び３は、それぞれ１７．７及び３５．５ｍｇ／ｋｇ（１５及び３０ｍｇ／ｋｇの遊離塩基と同等）の単剤療法である、ｃ−Ｍｅｔ単剤療法を受ける。群４は、化合物Ｃの単剤療法を３２．７ｍｇ／ｋｇ（３０ｍｇ／ｋｇの遊離塩基）で受けた。群５は、１７．７ｍｇ／ｋｇのｃ−Ｍｅｔインヒビターを、３２．７ｍｇ／ｋｇの化合物Ｃと組み合わせて受けた。群６は、５８．８ｍｇ／ｋｇのｃ−Ｍｅｔインヒビターを、５．４ｍｇ／ｋｇの化合物Ｃと組み合わせて受けた（それぞれ５０及び５ｍｇ／ｋｇの遊離塩基と同等）。群７は、参照群であり、テモゾロミド単剤療法を１００ｍｇ／ｋｇで受けた。

腫瘍増殖の阻害
短期効力は、Ｄ１３に決定される。Ｄ１３より前では、二重腫瘍を有する群１の１匹の動物が、腫瘍体積の合計が終点まで進行したので、離脱している。最後に記録されたこの動物の腫瘍体積は、Ｄ１３のデータに含まれる。Ｄ１（投与の開始）と終点日の腫瘍体積の差であるΔＴＶを、それぞれの動物において決定した。それぞれの治療群では、終点日の応答は、以下の関係式の１つにより計算した。
ΔＴ＞０では、Ｔ／Ｃ（％）＝１００×ΔＴ／ΔＣ
ΔＴ＜０では、Ｔ／Ｔ０（％）＝１００×ΔＴ／Ｔ０
式中、
ΔＴ＝（終点日の治療群の平均腫瘍体積）−（Ｄ１の治療群の平均腫瘍体積）であり、
ΔＣ＝（終点日の対照群の平均腫瘍体積）−（Ｄ１の対照群の平均腫瘍体積）であり、
Ｔ０＝Ｄ１の治療群の平均腫瘍体積である。

負のＴ／Ｔ０値は、群の正味の腫瘍低減を表す。Ｔ／Ｃ値の４０％以下は、潜在的な治療活性を示唆している。

腫瘍増殖の遅延
それぞれの動物は、その新生物が終点体積（２０００ｍｍ３）に達したとき又は研究の最終日（Ｄ５１）に安楽死させる。腫瘍が終点体積に達した各動物では、終点時間（ＴＴＥ）を以下の方程式により計算した。
ＴＴＥ＝（ｌｏｇ_１０（終点体積）−ｂ）／ｍ
式中、ＴＴＥは日数で表され、終点体積はｍｍ３であり、ｂは切片であり、ｍは対数変換腫瘍増殖データセットの線形回帰により得られた線の勾配である。データセットは、研究の終点体積を超える最初の観察及び終点体積を得た直後の３つの連続した観察から構成される。終点に達していない腫瘍を有する任意の動物には、研究の最終日と等しいＴＴＥ値が割り当てられる。ＴＲの原因で死亡したと分類される任意の動物には、死亡日と等しいＴＴＥ値が割り当てられる。ＮＴＲの原因（転移以外）で死亡したと分類される任意の動物は、ＴＴＥの計算から除外される。

治療効力は、腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）から決定され、これは、対照群と比較した治療群のＴＴＥ中央値の増加と定義され、
ＴＧＤ＝Ｔ−Ｃ
日数により又は対照群のＴＴＥ中央値の百分率として表され、
％ＴＧＤ＝［（Ｔ−Ｃ）Ｃ］×１００
ここで、
Ｔ＝治療群のＴＴＥ中央値であり、
Ｃ＝指定された対照群のＴＴＥ中央値である。

退縮応答のＭＴＶ及び基準
治療効力は、最終日に研究に残っている動物の腫瘍体積から及び退縮応答の数から決定することもできる。ＭＴＶ（ｎ）は、腫瘍が終点体積を得ていない残った動物の数ｎにおける、Ｄ５１の腫瘍体積中央値と定義される。治療は、動物において腫瘍の部分的な退縮（ＰＲ）又は完全な退縮（ＣＲ）を引き起こすことができる。ＰＲは、腫瘍体積が研究の間の３回の連続測定でＤ１の体積の５０％以下であり、これらの３回の測定の１回以上が１３．５ｍｍ^３以上であることを示す。ＣＲは、腫瘍体積が研究の間の３回の連続測定で１３．５ｍｍ^３未満であることを示す。研究の最終日にＣＲ応答を表す任意の動物は、無腫瘍生存者（ＴＦＳ）と追加的に分類される。

毒性
動物を、１〜５日目、各治療日（週末を除く）、その後は研究が終了するまで、１週間に２回、計量する。群平均ＢＷ最下点決定は、群の５０％を超える評価可能なマウスが研究から離脱した後の測定値を除外し、研究の間にＮＴＲ死亡と分類された任意の動物も除外した。最大耐量（ＭＴＤ）の許容される毒性は、試験の間の１５％未満の群平均ＢＷ減少及び１０匹の動物中の１匹以下のＴＲ死亡と定義される。３回の連続測定で１５％を超えるＢＷ減少を有する又は１回の測定で２０％を超えるＢＷ減少を有する任意の動物を安楽死させ、群における最初の死でない限り、ＴＲ死亡と分類する。死亡は、死亡が治療の副作用に関連する及び死亡が投与終了後の１４日間を超えて生じる証拠がない場合、非治療関連（ＮＴＲ）と分類される。ＮＴＲ死亡は、ＮＴＲａ（事故若しくは誤りに起因する）、ＮＴＲｕ（不明な原因に起因する）又はＮＴＲｍ（浸潤及び／若しくは転移による屍検確認腫瘍播種）と分類される。最大限の情報を提供している間に動物を保存するため、群における最初の死亡をＮＴＲｕと分類し、そのようなＮＴＲ死亡を、２つの連続したＴＲ死亡が同じ群で記録される場合にはＴＲと再分類した。

統計的及び図式分析
全ての統計的及び図式分析は、ウインドウズ用のＰｒｉｓｍ ３．０３（ＧｒａｐｈＰａｄ）により実施する。群１〜７の平均腫瘍体積変化を、バートレットの検定を用いて分散分析（ＡＮＯＶＡ）により最初に比較した。バートレットの検定が分散における有意な差（Ｐ＜０．０００１）を示す場合、群をクラスカルワリス分析により比較し、腫瘍体積変化の中央値に有意な差（Ｐ＜０．０００１）を示す。事後Ｄｕｎｎ多重比較検定は、薬剤治療群を対照群１と比較する。非母数検定を１回繰り返して、組み合わせ療法群の１つを、対応する単剤療法と比較する。

生存率は、カプランメイヤー法により分析される。ログランク（Ｍａｎｔｅｌ−Ｃｏｘ）検定を用いて、２群の全生存経験（生存曲線）の差の有意性を分析する。ログランク検定は、非治療関連（ＮＴＲ）死亡として除外されたものを除いて、郡中の全ての動物の個別のＴＴＥを分析する。両側統計分析を、Ｐ＝０．０５で実施する。Ｐｒｉｓｍは、検定結果を、Ｐ＞０．０５で有意ではない（ｎｓ）、０．０１＜Ｐ≦０．０５で有意である（「^＊」と表す）、０．００１＜Ｐ≦０．０１で非常に有意である（「^＊＊」）、Ｐ≦０．００１で極めて有意である（「^＊＊＊」）とまとめる。統計的有意性の検定は、群間の差の大きさについての推定値を提供しないので、全ての有意性のレベルは、有意である又は有意ではない、とこの報告の文章内に記載されている。

結果
上記の手順に従って、以下の結果が研究において得られる。

１５ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇによるｃ−Ｍｅｔインヒビター単剤療法は、それぞれ５％及び１％のＴ／Ｃをもたらした。３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｃは、３１％のＴ／Ｃをもたらす。１５ｍｇ／ｋｇのｃ−Ｍｅｔインヒビターと３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｃとの組み合わせは、Ｔ／Ｔ０：−８３％の腫瘍退縮を達成し、これは単一作用物質のいずれか単独よりも良好な有意性がある。

治療が終了した後、腫瘍増殖遅延のパーセント（％ＴＧＤ）は、腫瘍増殖をモニターし、終点時間（ＴＴＥ）を記録することによって評価される。ビヒクル治療群は、１１．７日で終点に達した。１５ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇのｃ−Ｍｅｔインヒビターは、ＴＴＥ中央値を、それぞれ２１．４日間（１８３％のＴＧＤ）及び２３．４日間（２００％のＴＧＤ）増加する。３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｃは、ＴＴＥ中央値を９．３日間（７９％のＴＧＤ）増加した。１５ｍｇ／ｋｇのｃ−Ｍｅｔインヒビターと３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｃとの組み合わせは、２８．７日のＴＴＥ中央値を示し、これは２４５％のＴＧＤである。

〔実施例６〕
非小細胞肺癌異種移植モデルにおける化合物Ｄとの組み合わせ
この実験では、ＮＣｌ−Ｈ１９９３ヒト非小細胞肺癌異種移植モデルを使用して、ＰＩ３Ｋインヒビターの化合物Ｄ及びｃ−Ｍｅｔインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミドの抗腫瘍効力を、単一作用物質又は組み合わせとして評価する。Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から得たＮＣｌ−Ｈ１９９３ヒト腫瘍細胞は、病期３Ａの肺腺癌及び喫煙歴を有する患者のリンパ節転移から誘導されている。

マウス
メス胸腺欠損ヌードマウス（Ｃｒｌ：ＮＵ（Ｎｃｒ）−Ｆｏｘｎ１^ｎｕ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ）は、試験のＤ１に８週齢であり、１６．１〜２６．２ｇの体重（ＢＷ）範囲を有する。動物には、水（逆浸透、１ｐｐｍのＣｌ）、並びに１８．０％の粗タンパク質、５．０％の粗脂肪及び５．０％の粗繊維からなるＮＩＨ３１ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｎｄ Ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ Ｌａｂ Ｄｉｅｔ（登録商標）を適宜に給餌する。マウスを、２０〜２２℃（６８〜７２°Ｆ）及び４０〜６０％の湿度で１２時間の明サイクルにより照射された静止マイクロアイソレーター中のＥｎｒｉｃｈ−ｏ’ｃｏｂｓ（商標）Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｂｅｄｄｉｎｇに収容する。

腫瘍埋め込み及び測定
ＮＣｌ−Ｈ１９９３腫瘍系をＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから得て、１００単位／ペニシリンＧナトリウム、１００μｇ／ｍＬの硫酸ストレプトマイシン、２５μｇ／ｍＬのゲンタマイシン、１０％のウシ胎児血清及び２ｍＭのグルタミンを含有するＲＰＭＩ−１６４０培地中のＤＲＳ＿ＮＣに維持する。腫瘍細胞を、５％ＣＯ_２及び９５％空気の雰囲気下で３７℃の加湿インキュベーターにおける組織培養フラスコにより培養する。

埋め込みに使用される腫瘍細胞は、対数期増殖の際に採取し、５０％Ｍａｔｒｉｇｅｌ（商標）（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を含有する冷ＰＢＳに再懸濁する。それぞれのマウスには、１×１０^７細胞（０．２ｍＬの細胞懸濁液）を腹部右側の皮下に注射する。腫瘍をカリパスにより二次元で測定して、平均体積が所望の２００〜２５０ｍｍ^３の範囲に達するように、増殖をモニターする。腫瘍サイズ（ｍｍ^３）は、腫瘍体積＝（幅^２×長さ）／２により計算され、ここで幅及び長さ（ｍｍ）は、腫瘍の測定値である。腫瘍重量は、１ｍｇが１ｍｍ^３の腫瘍体積と同等であるという前提によって推定することができる。腫瘍細胞の埋め込みの１４日後、研究のＤ１に、個別の腫瘍体積の１７２〜２５６ｍｍ^３を有するマウスを１０匹の群に分け、群の平均腫瘍体積は２０６〜２１５ｍｍ^３である。

試験物品
ｃ−Ｍｅｔインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド（ＨＣｌ塩、８４．９８％の遊離塩基）を４℃で保存し、最終体積の１／２に等しい脱イオン水の量に加え、溶解して均一の２×懸濁液を得るまで超音波処理する。等量の０．５％メチルセルロース：０．１％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を加えて、脱イオン水中０．２５％メチルセルロース及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０の最終ビヒクル濃度を有する１．７７ｍｇ／ｍＬの溶液（ビヒクル１）をもたらす。新たな溶液を、１日に１回、午後の投与のために調製し、午前の投与まで室温で保存する。

化合物Ｄを、脱イオン水中０．５％メチルセルロースに３．０ｍｇ／ｍＬで懸濁する。ビヒクルを少量ずつ、最終体積の１／３に等しい部分を加える。懸濁液をそれぞれの添加後に撹拌し、最後にプローブにより氷上で超音波処理して、均質で白色の懸濁液をもたらす。新たな懸濁液を毎週調製し、４℃で保存し、投与前に再懸濁する。

ビヒクル２は、３５％ Ｄ５Ｗ（水中５％デキストロース）：５％の１０％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０（最終濃度０．０５％）：６０％の１００ｍＭ酢酸緩衝液 ｐＨ４．５の最終ビヒクル濃度で調製される。

治療計画
ｃ−Ｍｅｔインヒビター及びビヒクルは、経口胃管栄養投与（ｐ．ｏ．）により、研究の期間にわたって１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．（終了まで））それぞれ投与される。化合物Ｄは、経口胃管栄養投与（ｐ．ｏ．）により、研究の期間にわたって１日１回（ｑｄ（終了まで））投与される。併用療法では、化合物Ｄをｃ−Ｍｅｔインヒビター後の３０分以内に投与する。全ての群において、投与量の１０ｍＬ／ｋｇ（０．２ｍＬ／２０ｇマウス）が各動物の体重に対して計られ、以前のＢＷが繰り越される週末を除いて、投与日に決定される。

ヌードマウスの群（ｎ＝１０匹／群）が以下のように治療される。群１は、ビヒクル１及びビヒクル２を受け、研究の対照として機能する。群２は、１７．７ｍｇ／ｋｇのｃ−ＭＥＴインヒビター単剤療法を研究の期間にわたって１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．（終了まで））受ける。群３は、３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｄの単剤療法を研究の期間にわたって１日１回（ｑｄ（終了まで））受ける。群４は、１７．７ｍｇ／ｋｇのｃ−ＭＥＴインヒビター ｂ．ｉ．ｄ．（終了まで）を、３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｄ ｑｄ（終了まで）と組み合わせて受ける。

腫瘍増殖の阻害
短期効力は、２０日目（Ｄ２０）に決定される。Ｄ２０以前に、群１の１匹の動物及び群３の１匹の動物が、腫瘍進行のために離脱し、それぞれの最終腫瘍体積は、繰り越され、群の平均体積に含まれる。

Ｄ１（投与の開始）と終点日の腫瘍体積の差であるΔＴＶを、それぞれの動物において決定した。それぞれの治療群では、終点日の応答は、以下の関係式の１つにより計算した。
ΔＴ＞０では、Ｔ／Ｃ（％）＝１００×ΔＴ／ΔＣ
ΔＴ＜０では、Ｔ／Ｔ０（％）＝１００×ΔＴ／Ｔ０
式中、
ΔＴ＝（終点日の治療群の平均腫瘍体積）−（Ｄ１の治療群の平均腫瘍体積）であり、
ΔＣ＝（終点日の対照群の平均腫瘍体積）−（Ｄ１の対照群の平均腫瘍体積）であり、
Ｔ０＝Ｄ１の治療群の平均腫瘍体積である。

負のＴ／Ｔ０値は、群の正味の腫瘍低減を表す。Ｔ／Ｃ値の４０％以下は、潜在的な治療活性を示唆している。

腫瘍増殖の遅延
腫瘍を１週間に２回、カリパスにより測定し、それぞれの動物を、新生物が終点体積（６００ｍｍ^３）に達したとき又は研究の最終日（Ｄ７１）のいずれか早いほうで安楽死させた。それぞれのマウスの終点時間（ＴＴＥ）を以下の方程式により計算する。
ＴＴＥ＝（ｌｏｇ_１０（終点体積）−ｂ）／ｍ
式中、ＴＴＥは日数で表され、終点体積はｍｍ^３であり、ｂは切片であり、ｍは対数変換腫瘍増殖データセットの線形回帰により得られた線の勾配である。それぞれのデータセットは、研究の終点体積を超える最初の観察及び終点体積を得た直後の３つの連続した観察から構成される。終点に達していない腫瘍を有する任意の動物には、研究の最終日と等しいＴＴＥ値が割り当てられる。治療関連（ＴＲ）の原因で死亡したと分類される任意の動物には、死亡日と等しいＴＴＥ値が割り当てられる。非治療関連（ＮＴＲ）の原因（転移以外）で死亡したと分類される任意の動物は、ＴＴＥの計算から除外される。

治療効力は、腫瘍増殖遅延（ＴＧＤ）から決定され、これは、対照群と比較した治療群のＴＴＥ中央値の増加と定義され、
ＴＧＤ＝Ｔ−Ｃ
日数により又は対照群のＴＴＥ中央値の百分率として表され、
％ＴＧＤ＝［（Ｔ−Ｃ）Ｃ］×１００
ここで、
Ｔ＝治療群のＴＴＥ中央値であり、
Ｃ＝指定された対照群のＴＴＥ中央値である。

退縮応答のＭＴＶ及び基準
治療効力は、最終日に研究に残っている動物の腫瘍体積から及び退縮応答の数から決定することもできる。ＭＴＶ（ｎ）は、腫瘍が終点体積を得ていない残った動物の数ｎにおける、Ｄ７１の腫瘍体積中央値と定義される。

治療は、動物において腫瘍の部分的な退縮（ＰＲ）又は完全な退縮（ＣＲ）を引き起こすことができる。ＰＲは、腫瘍体積が研究の間の３回の連続測定でＤ１の体積の５０％以下であり、これらの３回の測定の１回以上が１３．５ｍｍ^３以上であることを示す。ＣＲは、腫瘍体積が研究の間の３回の連続測定で１３．５ｍｍ^３未満であることを示す。

毒性
動物を、１〜５日目、各治療日（週末を除く）、その後は研究が終了するまで、１週間に２回、計量する。最大群平均体重（ＢＷ）減少は、Ｄ１とＤ２０の間の間隔において、並びに研究全体にわたって決定される。群平均ＢＷ最下点の決定は、群における５０％を超える評価可能なマウスが研究から離脱した後の測定値を除外し、研究の間に非治療関連（ＮＴＲ）死亡と分類された任意の動物も除外する。最大耐量（ＭＴＤ）の許容される毒性は、試験の間の１５％未満の群平均ＢＷ減少及び１０匹の動物中の１匹以下のＴＲ死亡と定義される。３回の連続測定で１５％を超えるＢＷ減少を有する又は１回の測定で２０％を超えるＢＷ減少を有する任意の動物を安楽死させ、群における最初の死亡でない限り、ＴＲ死亡と分類する。死亡は、死亡が治療の副作用に関連する及び死亡が投与終了後の１４日間を超えて生じる証拠がない場合、ＮＴＲと分類される。ＮＴＲ死亡は、ＮＴＲａ（事故若しくは誤りに起因する）、ＮＴＲｕ（不明な原因に起因する）又はＮＴＲｍ（浸潤及び／若しくは転移による屍検確認腫瘍播種）と分類される。最大限の情報を提供している間に動物を保存するため、群における最初の死亡をＮＴＲｕと分類し、そのようなＮＴＲ死亡を、２つの連続したＴＲ死亡が同じ群で記録される場合にはＴＲと再分類した。

統計的及び図式分析
統計的及び図式分析は、ウインドウズ用のＰｒｉｓｍ ３．０３（ＧｒａｐｈＰａｄ）により実施する。全群の平均腫瘍体積変化を、等しい分散のためにバートレットの検定を用いて一方向分散分析（ＡＮＯＶＡ）により比較する。分散における差が有意である（Ｐ＜０．０１）ので、群を、クラスカルワリス分析及びＤｕｎｎの事後多重比較検定により比較する。これらの後者の検定を繰り返して、組み合わせと、その成分の単剤療法とを比較する。

生存は、ＴＴＥ値に基づいてカプランメイヤー法により分析される。ログランク検定を用いて、２群の全生存経験（生存曲線）の差の有意性を決定する。両側統計分析を、Ｐ＝０．０５で実施する。Ｐｒｉｓｍは、検定結果を、Ｐ＞０．０５で有意ではない（ｎｓ）、０．０１＜Ｐ≦０．０５で有意である（「^＊」と表す）、０．００１＜Ｐ≦０．０１で非常に有意である（「^＊＊」）、Ｐ≦０．００１で極めて有意である（「^＊＊＊」）とまとめる。統計的有意性の検定は、群間の差の大きさについての推定値を提供しないので、全ての有意性のレベルは、有意である又は有意ではない、とこの報告の文章内に記載されている。

結果
上記の手順に従って、以下の結果が上記に定義された研究の終了時に得られる。

１７．７ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ． ｂ．ｉ．ｄ．（終了まで）でのｃ−Ｍｅｔインヒビター単剤療法は、変動する応答及び腫瘍体積範囲の重複した変化に起因して、対照（群１）と比べて有意な阻害を達成しない。３０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ． ｑｄ（終了まで）での化合物Ｄの単剤療法は、有意ではない腫瘍増殖加速中央値をもたらす。ｃ−Ｍｅｔインヒビターと化後物Ｄの組み合わせは、−１７％のＴ／Ｔ_０及び有意な活性中央値（Ｐ＜０．０１、Ｄｕｎｎｅｔｔの検定）をもたらすが、２０日目のｃ−Ｍｅｔインヒビター単剤療法に対して有意に改善しない。

全体的に、ｃ−Ｍｅｔインヒビター単剤療法は、ＴＴＥ中央値を９７％増加し、生存期間を有意に延長し（Ｐ＜０．００１、ログランク検定）、４匹のＤ７１生存者及び１匹のＰＲを生じる。十分に耐容性がある化合物Ｄ単剤療法は、対照（群１）と比べて、有意ではないより短い全生存期間をもたらす。

ｃ−Ｍｅｔインヒビターと化合物Ｄの組み合わせは、ＴＴＥ中央値を最大限１８４％増加する。組み合わせ群は、８匹の生存者及び１匹の部分退縮を有する。組み合わせは、両方の単剤療法に対して有意に改善する。本明細書の図５は、結果のまとめを提供する。

まとめると、１７．７ｍｇ／ｋｇ ｂ．ｉ．ｄ．（終了まで）でのｃ−Ｍｅｔインヒビター単剤療法は、１５％のＴ／Ｃ及び有意ではないＤ２０腫瘍増殖阻害を生じるが、ＴＴＥ中央値に９７％の増加及び有意な生存延長を生じる。３０ｍｇ／ｋｇ ｑｄ（終了まで）での化合物Ｄ単剤療法は、有意に活性ではない（不活性である）。組み合わせは、Ｄ２０に腫瘍低減をもたらすこと及びＴＴＥ中央値に最大限１８４％の増加を生じることにより、好ましい薬剤相互作用を示す。ｃ−Ｍｅｔインヒビター単剤療法に対する有意な改善は、Ｄ２０に観察されないが、組み合わせは、両方の対応する単剤療法に対して生存期間を有意に延長する。ｃ−Ｍｅｔインヒビター単剤療法の際の１匹の死亡及び併用療法の際の２匹の死亡は、個別の体重減少に起因する。群平均体重減少は、ゼロ又は無視できる程であるので、ｃ−Ｍｅｔインヒビター単剤療法が最大終末用量であるか及び組み合わせがモデルの最大終末用量を超えているか、については不明である。

Claims (19)

1. （ａ）式（Ｉ）：
   
   ［式中、
   Ｒ_１は、ナフチル又はフェニルであり、ここで前記フェニルは、ハロゲン；非置換又はハロゲン、シアノ、イミダゾリル若しくはトリアゾリルで置換されている低級アルキル；シクロアルキル；低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコキシ及び低級アルコキシ低級アルキルアミノからなる群から独立して選択される１又は２つの置換基で置換されているアミノ；非置換又は低級アルキル及び低級アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１若しくは２つの置換基で置換されているピペラジニル；２−オキソ−ピロリジニル；低級アルコキシ低級アルキル；イミダゾリル；ピラゾリル；及びトリアゾリルからなる群から独立して選択される１又は２つの置換基により置換されており；
   Ｒ_２は、Ｏ又はＳであり；
   Ｒ_３は、低級アルキルであり；
   Ｒ_４は、非置換若しくはハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシで置換されているピリジル又は非置換若しくは低級アルキルで置換されているピペラジニル；非置換又は低級アルコキシで置換されているピリミジニル；非置換又はハロゲンで置換されているキノリニル；キノキサリニル；又はアルコキシで置換されているフェニルであり；
   Ｒ_５は、水素又はハロゲンであり；
   ｎは、０又は１であり；
   Ｒ_６は、オキシドであり；
   但し、ｎ＝１である場合、Ｎ原子を担持しているラジカルＲ_６は、陽電荷を有し；
   Ｒ_７は、水素又はアミノである］の化合物、若しくは
   式（ＩＩ）：
   
   ［式中、Ｗは、ＣＲ_ｗ又はＮであり、ここで、
   Ｒ_ｗは、
   （１）水素、
   （２）シアノ、
   （３）ハロゲン、
   （４）メチル、
   ５）トリフルオロメチル、
   （６）スルホンアミド
   からなる群から選択され；
   Ｒ_１は、
   （１）水素、
   （２）シアノ、
   （３）ニトロ、
   （４）ハロゲン、
   （５）置換及び非置換アルキル、
   （６）置換及び非置換アルケニル、
   （７）置換及び非置換アルキニル、
   （８）置換及び非置換アリール、
   （９）置換及び非置換ヘテロアリール、
   （１０）置換及び非置換ヘテロシクリル、
   （１１）置換及び非置換シクロアルキル、
   （１２）−ＣＯＲ_１ａ、
   （１３）−ＣＯ_２Ｒ_１ａ、
   （１４）−ＣＯＮＲ_１ａＲ_１ｂ、
   （１５）−ＮＲ_１ａＲ_１ｂ、
   （１６）−ＮＲ_１ａＣＯＲ_１ｂ、
   （１７）−ＮＲ_１ａＳＯ_２Ｒ_１ｂ、
   （１８）−ＯＣＯＲ_１ａ、
   （１９）−ＯＲ_１ａ、
   （２０）−ＳＲ_１ａ、
   （２１）−ＳＯＲ_１ａ、
   （２３）−ＳＯ_２ＮＲ_１ａＲ_１ｂ
   からなる群から選択され、ここで、
   Ｒ_１ａ及びＲ_１ｂは、
   （ａ）水素、
   （ｂ）置換又は非置換アルキル、
   （ｃ）置換及び非置換アリール、
   （ｄ）置換及び非置換ヘテロアリール、
   （ｅ）置換及び非置換ヘテロシクリル、並びに
   （ｆ）置換及び非置換シクロアルキルからなる群から独立して選択され；
   Ｒ₂は、
   （１）水素、
   （２）シアノ、
   （３）ニトロ、
   （４）ハロゲン、
   （５）ヒドロキシ、
   （６）アミノ、
   （7）置換及び非置換アルキル、
   （８）−ＣＯＲ_２ａ、並びに
   （９）−ＮＲ_２ａＣＯＲ_２ｂからなる群から選択され、ここで、
   Ｒ_２ａ及びＲ_２ｂは、
   （ａ）水素及び
   （ｂ）置換又は非置換アルキルからなる群から独立して選択され；
   Ｒ₃は、
   （１）水素、
   （２）シアノ、
   （３）ニトロ、
   （４）ハロゲン、
   （５）置換及び非置換アルキル、
   （６）置換及び非置換アルケニル、
   （７）置換及び非置換アルキニル、
   （８）置換及び非置換アリール、
   （９）置換及び非置換ヘテロアリール、
   （１０）置換及び非置換ヘテロシクリル、
   （１１）置換及び非置換シクロアルキル、
   （１２）−ＣＯＲ_３ａ、
   （１４）−ＮＲ_３ａＲ_３ｂ、
   （１３）−ＮＲ_３ａＣＯＲ_３ｂ、
   （１５）−ＮＲ_３ａＳＯ_２Ｒ_３ｂ、
   （１６）−ＯＲ_３ａ、
   （１７）−ＳＲ_３ａ、
   （１８）−ＳＯＲ_３ａ、
   （１９）−ＳＯ_２Ｒ_３ａ
   からなる群から選択され、ここで、
   Ｒ_３ａ及びＲ_３ｂは、
   （ａ）水素、
   （ｂ）置換又は非置換アルキル、
   （ｃ）置換及び非置換アリール、
   （ｄ）置換及び非置換ヘテロアリール、
   （ｅ）置換及び非置換ヘテロシクリル、並びに
   （ｆ）置換及び非置換シクロアルキルからなる群から独立して選択され；
   Ｒ_４は、
   （１）水素及び
   （２）ハロゲンからなる群から選択される］の化合物、並びに
   式（ＩＩＩ）：
   
   ［式中、
   Ａは、以下：
   
   からなる群から選択されるヘテロアリールを表し、
   Ｒ^１は、以下の置換基：（１）非置換又は置換、好ましくは置換Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、フルオロ又は１〜２つの以下の部分Ｃ_３〜Ｃ_５シクロアルキルの１つ以上、好ましくは１〜９つから独立して選択される）；（２）場合により置換されているＣ_３〜Ｃ_５シクロアルキル（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル（好ましくは、メチル）、フルオロ、シアノ、アミノカルボニルの１つ以上、好ましくは１〜４つから独立して選択される）；（３）場合により置換されているフェニル（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、ハロ、シアノ、Ｃ_１〜Ｃ_７−アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_７アルキルアミノ、ジ（Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル）アミノ、Ｃ_１〜Ｃ_７アルキルアミノカルボニル、ジ（Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル）アミノカルボニル、Ｃ_１〜Ｃ_７アルコキシの１つ以上、好ましくは１〜２つから独立して選択される）；（４）場合により一又は二置換されているアミン（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル（非置換又は重水素、フルオロ、クロロ、ヒドロキシの群から選択される１つ以上の置換基で置換されている）、フェニルスルホニル（非置換又はＣ_１〜Ｃ_７アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_７アルコキシ、ジ（Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル）アミノ−Ｃ_１〜Ｃ_７アルコキシの１つ以上、好ましくは１つにより置換されている）から独立して選択される）；（５）置換スルホニル（ここで前記置換基は、以下の部分：Ｃ_１〜Ｃ_７アルキル（非置換又は重水素、フルオロの群から選択される１つ以上の置換基で置換されている）、ピロリジノ（非置換又は重水素、ヒドロキシ、オキソの群から選択される１つ以上の置換基により、特に１つのオキソにより置換されている）から選択される）；（６）フルオロ、クロロ、のうちの１つを表し；
   Ｒ²は、水素を表し；
   Ｒ^３は、（１）水素、（２）フルオロ、クロロ、（３）場合により置換されているメチル（ここで前記置換基は、以下の部分：重水素、フルオロ、クロロ、ジメチルアミノの１つ以上、好ましくは１〜３つから独立して選択される）を表す］の化合物
   からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩と、（ｂ）少なくとも１つのｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビター又は薬学的に許容されるその塩とを含む、増殖性疾患の治療における同時の、別々の又は連続した投与のための薬学的な組み合わせ。
2. ホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターが、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）、８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（化合物Ｂ）、５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン（化合物Ｃ）及び（Ｓ）−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸２−アミド１−（｛４−メチル−５−［２−（２，２，２−トリフルオロ−１，１−ジメチル−エチル）−ピリジン−４−イル］−チアゾール−２−イル｝−アミド）（化合物Ｄ）又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１に記載の薬学的な組み合わせ。
3. ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターが、２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド、ＡＲＱ１９７（チバンチニブ）、ＡＭＧ４５８、ＧＳＫ１３６３０８９（ＸＬ８８０若しくはフォレチニブ（foretinib））、ＰＦ２３４１０６６（クリゾチニブ）又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１に記載の薬学的な組み合わせ。
4. 増殖性疾患がｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である、請求項１に記載の薬学的な組み合わせ。
5. 増殖性疾患が癌である、請求項１に記載の薬学的な組み合わせ。
6. 増殖性疾患が、乳房、膀胱、子宮頸部、肝内胆管癌、結腸直腸、食道、胃、頭頸部、腎臓、肝臓、肺、鼻咽頭、卵巣、膵臓、前立腺、甲状腺、子宮内膜、筋骨格系の肉腫、軟部組織肉腫の肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、神経膠芽腫、星状細胞腫、黒色腫、中皮腫及びウィルムス腫瘍などの良性及び悪性腫瘍からなる群から選択される癌である、請求項１に記載の薬学的な組み合わせ。
7. 増殖性疾患が、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）又は神経膠芽腫である、請求項１に記載の薬学的な組み合わせ。
8. 請求項１から３のいずれか一項に記載の薬学的な組み合わせと、少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
9. 増殖性疾患を治療する方法であって、請求項１に記載の薬学的な組み合わせを、前記増殖性疾患に対して共同で治療上有効である分量で、それを必要とする対象に投与することを含む方法。
10. 癌を有する対象において転移の形成を阻害する方法であって、治療有効量の請求項１に記載の薬学的な組み合わせを、それを必要とする対象に投与することを含む方法。
11. 増殖性疾患がｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である、請求項９に記載の方法。
12. 増殖性疾患又は癌が、乳房、膀胱、子宮頸部、肝内胆管癌、結腸直腸、食道、胃、頭頸部、腎臓、肝臓、肺、鼻咽頭、卵巣、膵臓、前立腺、甲状腺、子宮内膜、筋骨格系の肉腫、軟部組織肉腫の肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、神経膠芽腫、星状細胞腫、黒色腫、中皮腫及びウィルムス腫瘍などの良性及び悪性腫瘍からなる群から選択される癌である、請求項９又は１０に記載の方法。
13. 治療が、治療剤（ａ）の量及び治療剤（ｂ）の量を別々に又は連続して投与することを含む、請求項９又は１０に記載の方法。
14. 増殖性疾患の治療のための医薬品の調製における、請求項１に記載の組み合わせの使用。
15. 増殖性疾患がｃ−Ｍｅｔ依存性の増殖性疾患である、請求項１４に記載の使用。
16. 増殖性疾患が癌である、請求項１４に記載の使用。
17. 増殖性疾患が、乳房、膀胱、子宮頸部、肝内胆管癌、結腸直腸、食道、胃、頭頸部、腎臓、肝臓、肺、鼻咽頭、卵巣、膵臓、前立腺、甲状腺、子宮内膜、筋骨格系の肉腫、軟部組織肉腫の肉腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、神経膠芽腫、星状細胞腫、黒色腫、中皮腫及びウィルムス腫瘍などからなる群から選択される癌である、請求項１４に記載の使用。
18. ５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン（化合物Ｃ）及び（Ｓ）−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸２−アミド１−（｛４−メチル−５−［２−（２，２，２−トリフルオロ−１，１−ジメチル−エチル）−ピリジン−４−イル］−チアゾール−２−イル｝−アミド）（化合物Ｄ）又は薬学的に許容されるその塩からなる群から選択されるホスファチジルイノシトール３−キナーゼインヒビターと、ｃ−Ｍｅｔレセプターチロシンキナーゼインヒビターの２−フルオロ−Ｎ−メチル−４−［７−キノリン−６−イル−メチル）−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジン−２イル］ベンズアミド又は薬学的に許容されるその塩とを含む、増殖性疾患の治療における使用のための、薬学的な組み合わせ。
19. 請求項１〜３に記載の薬学的な組み合わせを、増殖性疾患の治療におけるその同時の、別々の又は連続した投与のための使用説明書と一緒に含む、商業的包装。