CN105037279A - 含戊二烯酮结构的4-n取代喹唑啉类衍生物及制备和应用 - Google Patents

含戊二烯酮结构的4-n取代喹唑啉类衍生物及制备和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一类含戊二烯酮结构的4-<i>N</i>取代喹唑啉类衍生物，其结构如<b>I</b>所示。本发明介绍了以取代苯甲酸、甲醇、硝酸、甲酰胺、三氯氧磷氯、硝基苯甲醛、丙酮，氯化亚锡、取代芳香醛等为原料，经多步反应合成目标化合物。该类化合物可用于作为抗肿瘤、抗植物细菌及抗植物病毒方面的药物。

Description

含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉类衍生物及制备和应用
技术领域
本发明涉及化学技术领域，具体来说涉及一种含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉类衍生物在抗肿瘤、抗植物细菌和抗烟草花叶病毒方面的应用。
背景技术
喹唑啉类化合物具有多种生物活性，4-苯胺取代的喹唑啉类化合物在抗癌方面活性尤为突出。一方面，4-苯胺取代的喹唑啉类化合物对EGFR-TK表现出较好的抑制活性。另一方面，4-苯胺取代的喹唑啉类化合物能够有效抑制细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的活性，抑制其下游蛋白磷酸化，阻断细胞信息传导进而抑制细胞增殖，从而表现出较高的抗癌活性。同时4-苯胺取代喹唑啉具表现出一定的抗菌、抗病毒、抗炎等生物活性。
在抗肿瘤方面，2005年喹唑啉药物吉非替尼经国家食品药品监督管理局批准在中国上市，用于治疗不适合化疗局部晚期或转移性非小细胞肺癌的一线药物，该药物属于EGFR酪氨酸激酶的小分子抑制剂。2006年我国通过审批了首个选择性作用于EGFR的酪氨酸激酶药物埃罗替尼，该药适用于两个或两个以上化疗方案失败的局部晚期或转移性非小细胞肺癌的二、三线治疗。2012年Jiang等(Molecules,2012,17:5870-5881.)报道了一系列2肼基4苯胺基取代喹唑啉类化合物，体外抗肿瘤活性测试表明，该类化合物对HT-29(人结肠癌细胞)具有很好的抑制效果。2013年Zhang等(Eur.J.Med.Chem., 2013,66:335-344.)报道了一系列4-苯胺基-5,6,7-三甲氧基喹唑啉类化合物，体外抗肿瘤活性测试结果表明，该类化合物对PC3(人前列腺癌细胞)，BGC823(人胃癌细胞)和Bcap37(人乳腺癌细胞)细胞表现出一定的抑制活性。次年，该课题组(Eur.J.Med.Chem.,2014,78:23-34.)又报道了一系列4-取代哌嗪-5,6,7-三烷氧基喹唑啉类化合物，体外抗肿瘤活性测试结果表明，该类化合物对PC3(人前列腺癌细胞)，人BGC823(胃癌细胞)和Bcap37(人乳腺癌细胞)，A375(人皮肤癌细胞)和BGC823(人胃癌细胞)都表现出了较好的抑制活性，该类化合物能够通过阻断ERK1/2和P38的信号通路达到抑制细胞增殖的目的。
在抗植物细菌方面，Wang等(J.Agric.FoodChem.,2013,61:9575-9582.)报道了一系列含有芳香亚胺结构的喹唑啉类化合物，抗菌活性测试结果表明，该类化合物对表现出一定的抗烟草青枯菌(Ralstoniasolanacearum)，番茄青枯菌(Pseudomonassolanacearum)和水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.oryzae)活性，部分化合物的IC50值达到20.0,20.8,21.3,20.2μg/mL，高与对照药剂叶枯唑92.6μg/mL。
在抗植物病毒方面，2013年Luo等(Eur.J.Med.Chem., 2013,63:662-669.)报道了一系列戊二烯酮结构的4-O取代喹唑啉类化合物，抗烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒活性测试结果表明，该类化合物具有很好的抗植物病毒活性，部分化合物EC50值为257.7,320.7和243.3μg/mL，高于对照药剂宁南霉素370.8μg/mL。2014年Ma等(J.Agric.FoodChem., 2014,62:8928-8934.)报道了一系列戊二烯酮结构的喹唑啉类化合物，抗烟草花叶病毒活性测试结果表明，该类化合物具有很好的抗植物病毒活性，部分化合物EC50值为132.2,138.0,156.1和135.6μg/mL。
综上所述，4-取代苯胺喹唑啉类化合物表现出较好的抗肿瘤，抗菌和抗病毒活性，结合我们的前期工作，设计合成了一系列含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉类化合物。
发明内容
本发明的目的是：
制备了一系列含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉类衍生物，并应用于癌细胞抑制、植物细菌抑制及植物病毒抑制方面。通过实验证明本发明提供的化合物对A549(人肺癌细胞)、水稻白叶枯病菌(细菌及TMV(烟草花叶病毒)表现出良好的生物活性。
本发明提供的化合物结构通式如I所示：
式中：
其中基团在苯环的2、3或4位；
R为氢、烷氧基
R1为硝基苯基、卤代苯基、甲氧基苯基、乙氧基苯基、吗啉代乙氧基苯基、五元杂芳环基、六元杂芳环基、稠环基；
所述的化合物，其特征在于，在通式I中：
R选自氢、C1-C4烷氧基；
R1选自邻，间，对位单取代或多取代硝基苯基、邻，间，对位单取代或多取代卤原子苯基、邻，间，对位单取代或多取代甲氧基苯基、邻，间，对位单取代或多取代乙氧基苯基、邻，间，对位单取代或多取代吗啉代乙氧基苯基、邻，间，对位单取代或多取代五元杂芳环基、邻，间，对位单取代或多取代六元杂芳环基、稠环基或取代稠环基；
所述卤原子为氟、氯、溴、碘；
所述的化合物，其特征在于，在通式I中：
R中所指的烷氧基为单取代或多取代甲氧基、单取代或多取代乙氧基、单取代或多取代丙氧基、单取代或多取代丁氧基；
R1中所指的五元杂芳环基为呋喃环基、六元杂芳环基为吡啶环基、稠环基为萘环基；
本发明已合成的化合物为：
上述的化合物的用途，用于癌细胞抑制、植物病毒防治及植物细菌抑制。
所指癌细胞为A549(人肺癌细胞)。
所指植物病毒为TMV(烟草花叶病毒)。
所指植物细菌为水稻白叶枯病菌。
本发明化合物I可以采用如下的合成路线进行制备：
本发明含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉类衍生物制备方法，工艺步骤和工艺条件为：
A.含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉化合物制备工艺步骤和工艺条件依次为：
(1)不同取代苯甲酸甲酯的制备：以取代甲氧基苯甲酸为原料，甲醇作溶剂，65oC反应2h，饱和碳酸钠调pH至8左右，二氯甲烷萃取，脱溶得取代苯甲酸甲酯；
(2)不同取代硝基苯甲酸甲酯制备：以不同取代甲氧基苯甲酸甲酯为原料，70%硝酸为溶剂，冰浴下，反应1h，加水，析出固体，抽滤水洗，得不同取代硝基苯甲酸甲酯；
(3)不同取代氨基苯甲酸甲酯制备：以不同取代硝基苯甲酸甲酯为原料，钯碳作催化剂，甲醇作溶剂，室温下反应12h，抽滤脱溶，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得不同取代氨基苯甲酸甲酯；
(4)不同取代喹唑啉酮制备：以不同取代氨基苯甲酸甲酯和甲酰胺为原料，甲苯作溶剂，三氯氧磷条件下，反应5h，浓氨水调pH至8左右，二氯甲烷萃取，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得不同取代喹唑啉酮；
(5)不同取代4-氯喹唑啉制备：以同取代喹唑啉酮为原料，甲苯作溶剂，三氯氧磷和三乙胺条件下，反应5h，浓氨水调pH至8左右，二氯甲烷萃取，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得不同取代4-氯喹唑啉；
(6)4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮制备：以对硝基苯甲醛为原料，丙酮作溶剂，碳酸钾作缚酸剂，室温下反应12h，脱溶，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮；
(7)4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮制备：以4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮为原料，乙醇作溶剂，氯化亚锡作还原剂，加热回流2h，调pH至9左右，二氯甲烷萃取，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮；
(8)4-(2-(甲氧基取代喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮制备：以4-氯喹唑啉和4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮为原料，四氢呋喃作溶剂，碳酸钾作缚酸剂，加热回流2h，脱溶，柱层析(PE:EA=2:1,V/V)得4-(2-(甲氧基取代喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮；
(A)目标化合物制备：以4-(2-(甲氧基取代喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮和不同取代醛为原料，甲醇作溶剂，室温下反应6-12h，柱层析(DCM:MeOH=10:1,V/V)得目标分子。
具体实施方式
实施例一：(1E,4E)-1-苯基-5-(4-(5,6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成(A-14)
本发明含戊二烯酮的4-N取代喹唑啉类化合物的工艺步骤及工艺条件以(1E,4E)-1-苯基-5-(4-(5,6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮为例说明，其他不同取代苯氧甲基以此例参照合成。
(1)3,4-二甲氧基苯甲酸甲酯的制备
在100mL圆底烧瓶中加入2g(9.4mmol)3,4-三甲氧基苯甲酸，加50mL甲醇溶解，并滴加1mL(20.1mmol)浓硫酸，加热回流2h，TLC检测反应结束，饱和碳酸钠溶液调pH至7左右，二氯甲烷(30mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，脱溶，柱层析(PE：EA=10：1,V/V)得白色固体2.0g。产率93.4%，熔点：52-55oC。
(2)6-硝基-3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
冰浴下，在250mL圆底烧瓶加入15mL(333.27mmol)70%HNO3，并加入15mL冰水，将2.0g(8.8mmol)3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯加入到上述体系中，体系颜色变黄，反应1h，TLC检测反应结束，加入50mL水，析出白色固体，抽滤，200mL水洗，得白色纯净固体1.9g，产率81.3%，熔点69-72oC。
(3)6-氨基3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
在100mL圆底烧瓶加入1.9g(7.2mmol)6-硝基-3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯和0.2g钯炭催化剂，并加入50mL甲醇溶解，通入氢气，常温搅拌24h，TLC检测反应结束，脱溶得棕色固体。柱层析(PE:EA=10:1,V/V)分离纯化得白色固体1.51g，收率88.7%，熔点：91-93oC。
(4)6,7-三甲氧基喹唑啉酮的制备
在100mL三口烧瓶中加入1.5g(6.2mmol)6-氨基-3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯、3mL(75.5mmol)甲酰胺、3mL(32.77mmol)三氯氧磷和25mL甲苯混加热回流，TLC检测5h后反应结束，脱溶得棕色固体，加水后用氨水调PH值为中性，析出黄褐色沉淀，氯仿萃取脱溶，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)分离纯化得到白色絮状固体1.2g，收率78.7%，熔点：184-186oC。
(5)4-氯6,7-三甲氧基喹唑啉的制备
在100mL三口烧瓶中加入1.1g(4.6mmol)6,7-三甲氧基喹唑啉酮、三氯氧磷2mL(21.8mmol)以及12mL甲苯混合，再向反应瓶中滴入4mL三乙胺，冒白烟，氩气保护下开始回流反应，4h后停止，用稀氨水调pH值至7左右，用二氯甲烷(20mL×3)萃取，脱溶后得黄绿色固体，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)提纯得白色固体0.9g，产率：75.8%，熔点：115-117oC。
(6)4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
在100mL圆底烧瓶中加入4g(26.5mmol)对硝基苯甲醛，并加入30mL(407.0mmol)丙酮溶解中，加入固体K2CO31g(7.2mmol)，室温搅拌12h，想体系中加入浓盐酸2mL，继续搅拌6h，TLC检测反应结束，脱去部分溶剂，加入50mL水，析出大量淡黄色固体，水洗，烘干，柱层析(PE:EA:5:1,V/V)得淡黄色固体4.23g，产率83.5%。熔点：106-108°C。
(7)4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
在250mL三口瓶中加入4g(20.9mmol)中间体8，加入60mL乙醇溶解，加入氯化亚锡20.5g(80.4mmol)，滴加浓盐酸1mL，加热回流，TLC检测反应，2h反应结束，2mol/LNaOH调pH至9左右，二氯甲烷萃取(30mL×3)萃取，脱溶，柱层析(PE:EA=5::1,V/V)得黄色固体2.46g，产率：73.1%。熔点：96-97°C。
(8)4-(2-(6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
在100mL圆底烧瓶中加入0.9g(3.53mmol)6,7-三甲氧基4-氯喹唑啉，加入20mL四氢呋喃溶解，并加K2CO30.59g(4.24mmol)g，加入中间体90.5g(3.53mmol)，加热回流，TLC检测反应，1h反应结束，脱溶，柱层析(PE:EA=2:1,V/V)得黄色固体1.23g，产率87.7%。熔点：112-114°C。
(9)(1E,4E)-1-苯基-5-(4-(6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮(C-2)的制备
在50mL圆底烧瓶中加入0.3mmol中间体4-(2-(6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮，加入15mL甲醇，加入0.5mL50%NaOH溶液，加入苯甲醛醛1mmol，室温搅拌，TLC检测反应，1h结束，加入30mL水，析出固体，抽滤，甲醇重结晶得黄色固体0.12g，产率86.5%。
实施例二：(1E,4E)-1-(2,4-二氯苯基)-5-(4-(6,7-二甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成(A-15)
(1)3,4-二甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(1)方法和条件合成。
(2)6-硝基-3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(2)方法和条件合成。
(3)6-氨基3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(3)方法和条件合成。
(4)6,7-三甲氧基喹唑啉酮的制备
如实施例一(4)方法和条件合成。
(5)4-氯6,7-三甲氧基喹唑啉的制备
如实施例一(5)方法和条件合成。
(6)4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(6)方法和条件合成。
(7)4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备)
如实施例一(7)方法和条件合成。
(8)4-(2-(6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(8)方法和条件合成。
(9)(1E,4E)-1-(2,4-二氯苯基)-5-(4-(6,7-二甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成
如实施例一(9)方法和条件合成，区别在于加入加入(1mmol)2,4-二氯苯甲醛。
实施例三：(E)-4-(4-((5,6,7-三甲氧基喹唑啉-4-基)氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮的合成(A-17)
(1)2,3,4-二甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(1)方法和条件合成，区别在于加入(9.4mmol)2,3,4-三甲氧基苯甲酸。
(2)6-硝基-2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(2)方法和条件合成，区别在于加入(8.8mmol)2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯。
(3)6-氨基2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(3)方法和条件合成，区别在于加入(7.2mmol)6-硝基-2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯。
(4)5,6,7-三甲氧基喹唑啉酮的制备
如实施例一(4)方法和条件合成，区别在于加入(6.2mmol)6-氨基-2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯。
(5)4-氯5,6,7-三甲氧基喹唑啉的制备
如实施例一(5)方法和条件合成，区别在于加入(4.6mmol)5,6,7-三甲氧基喹唑啉酮。
(6)4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(6)方法和条件合成。
(7)4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备)
如实施例一(7)方法和条件合成。
(8)4-(2-(5,6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(8)方法和条件合成，区别在于加入(3.53mmol)5,6,7-三甲氧基4-氯喹唑啉。
实施例四：(1E,4E)-1-苯基-5-(4-(5,6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成(A-18)
(1)2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(1)方法和条件合成，区别在于加入(9.4mmol)2,3,4-三甲氧基苯甲酸。
(2)6-硝基-2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(2)方法和条件合成，区别在于加入(8.8mmol)2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯。
(3)6-氨基2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯的制备
如实施例一(3)方法和条件合成，区别在于加入(7.2mmol)6-硝基-2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯。
(4)5,6,7-三甲氧基喹唑啉酮的制备
如实施例一(4)方法和条件合成，区别在于加入(6.2mmol)6-氨基-2,3,4-三甲氧基苯甲酸甲酯。
(5)4-氯5,6,7-三甲氧基喹唑啉的制备
如实施例一(5)方法和条件合成，区别在于区别在于加入(4.6mmol)5,6,7-三甲氧基喹唑啉酮。
(6)4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(6)方法和条件合成。
(7)4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备)
如实施例一(7)方法和条件合成。
(8)4-(2-(5,6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(8)方法和条件合成，区别在于加入(3.53mmol)5,6,7-三甲氧基4-氯喹唑啉。
(9)(1E,4E)-1-苯基-5-(4-(5,6,7-二甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成
如实施例一(9)方法和条件合成，区别在于加入(0.3mmol)4-(2-(6,7-三甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮。
实施例五：(1E,4E)-1-苯基-5-(3-(喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成(A-1)
(1)喹唑啉酮的制备
如实施例一(4)方法和条件合成，区别在于加入(6.2mmol)2-氨基苯甲酸甲酯。
(2)4-氯喹唑啉的制备
如实施例一(5)方法和条件合成，区别在于加入(4.6mmol)喹唑啉酮。
(3)4-(3-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(6)方法和条件合成，区别在于加入(26.5mmol)间硝基苯甲醛。
(4)4-(3-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(7)方法和条件合成，区别在于加入(20.9mmol)4-(3-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮。
(5)4-(2-(喹唑啉-3-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(8)方法和条件合成，区别在于加入(3.53mmol)4-氯喹唑啉，加入4-(3-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮(3.53mmol)。
(6)(1E,4E)-1-苯基-5-(3-(5,6,7-二甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成
如实施例一(9)方法和条件合成，区别在于加入(0.3mmol)4-(2-(喹唑啉-3-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮。
实施例六：(1E,4E)-1-苯基-5-(4-(喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成(A-2)
(1)喹唑啉酮的制备
如实施例一(4)方法和条件合成，区别在于加入(6.2mmol)2-氨基苯甲酸甲酯。
(2)4-氯喹唑啉的制备
如实施例一(5)方法和条件合成，区别在于加入(4.6mmol)喹唑啉酮。
(3)4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(6)方法和条件合成区别在于加入(26.5mmol)对硝基苯甲醛。
(4)4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮的制备)
如实施例一(7)方法和条件合成区别在于加入(20.9mmol)4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮。
(5)4-(2-(喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮的制备
如实施例一(8)方法和条件合成区别在于加入(3.53mmol)4-氯喹唑啉，加入4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮(3.53mmol)。
(6)(1E,4E)-1-苯基-5-(4-(5,6,7-二甲氧基喹唑啉-4-氨基)苯基l)-1,4-戊二烯-3-酮的合成
如实施例一(9)方法和条件合成区别在于加入(0.3mmol)4-(2-(喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮。
利用以上的合成方法，选取不同的取代苯甲酸为原料，经甲醇酯化、硝酸硝化、氢气还原、三氯氧磷和甲酰胺闭环、三氯氧磷氯代得到取代4-氯喹唑啉。另一方面以硝基苯甲醛为原料，经丙酮羟醛缩合，氯化亚锡还原，产物与4-氯喹唑啉反应得到中间体4-(4-((取代喹唑啉-4-基)氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮，中间体与取代苯甲醛反应得到目标分子。设计合成了一系列含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉类衍生物，核磁共振氢谱(1HNMR)及核磁共振碳谱(13CNMR)数据如表1所示，物化性质、质谱及红外光谱(IR)数据如表2所示。
实施例七：部分化合物的抑细菌活性试验
分别称取目标化合物及对照药剂于DMSO中，配制5%溶液，分别取80μL、40μL溶液于含4mLNB培养基(牛肉膏3g、蛋白胨5g、酵母提取物1g、葡萄糖10g，二次水1L，pH=7.0-7.2)试管中，将配好溶液取出200μL用分光光度计测定OD值，再加入40μL已摇好菌液，于30℃，180rpm恒温摇床中培养24h。待试验结束，于试管取出200μL并用分光光度计测定OD值，对照药剂本身所造成的误差进行校正，校正OD值及防效的计算公式如下：
校正OD值：含菌培养基OD值-无菌培养基OD值
防效%=(校正后对照培养基菌液OD值-校正含药培养基菌液OD值)/校正后对照培养基菌液OD值×100
本发明实施例辅以说明本发明的技术方案，但实施例的内容并不局限于此，实验结果如表3所示。
对水稻白叶枯的活性测试表明，在100μg/mL浓度下，所测化合物表现出一定的抗菌活性，当取代苯为对溴取代时，表现出39.8%的抑制活性，当喹唑啉部分为6,7-二甲氧基取代时对水稻白叶枯的抑制率达到50%，表现出了中等的抗菌活性。
实施例八：部分化合物的抗烟草花叶病毒活性实验
采用半半叶斑法测定化合物的抗植物病毒活性。准确称取3mg供试化合物于称量瓶中，加入溶剂DMSO60μL使其充分溶解。用含1%Tween20的二次蒸馏水将其配成500mg/L的化合物溶液。另取250μL2%宁南霉素水剂，加入溶剂DMSO60μL，含1%Tween20的二次蒸馏水10mL，配成500mg/L的宁南霉素溶液。
药剂对TMV侵染的活体治疗活性。选取长势一致的心叶烟，先用排笔蘸取病毒液(浓度为6×10-3mg/mL)，在叶面(全叶)沿其支脉方向人工摩擦接种于撒有金刚砂的叶片上，左右叶片的接种力度尽量保持一致，叶片下方用平整木板支撑。待病毒液干后，用流水冲洗掉叶片上面的金刚砂。待叶片干后，在左半叶涂施药剂，右半叶涂施灭菌水作对照。每药剂处理设3株，每株3-4片叶，随后将植株放在光照培养箱中保湿培养，控制温度23±1°C，光照10000Lux，2-4d后观察并记录产生枯斑的数目。按上述方法每药剂进行3次重复，计算抑制率。
药剂对TMV侵染的活体保护活性。选取长势一致的心叶烟，用毛笔轻轻在左半叶涂施药剂，右半叶涂施灭菌水作对照，24小时后接种病毒。用排笔蘸取病毒汁液(浓度为6×10-3mg/mL)，在叶面(全叶)沿其支脉方向人工摩擦接种于撒有金刚砂的叶片上，左右叶片的接种力度尽量保持一致，叶片下方用平整木板支撑。待病毒液干后，用流水冲洗掉叶片上面的金刚砂。每药剂处理设3株，每株3-4片叶，随后将植株放在光照培养箱中保湿培养，控制温度23±1°C，光照10000Lux，2-4d后观察并记录产生枯斑的数目。按上述方法每药剂进行3次重复，计算抑制率。
Y(%)=(R-L)/R×100%
其中：Y为化合物对对烟草花叶病毒的抑制率；R为对照组(右半叶)枯斑个数，；L为处理组(左半叶)枯斑个数。本发明实施例辅以说明本发明的技术方案，但实施例的内容并不局限于此，实验结果如表4所示。
结果表明在500μg/mL浓度下，所测化合物对TMV表现出一定的治疗和保护活性，其中化合物A-1,A-6,A-14,A-15,A-19,A-33表现出较好的治疗活性：40.3%,38.8%,39.6%,40.4%,41.5%,39.3%，化合物A-1和A-2表现出较好的钝化活性：80.6%,80.6%，化合物A-13,A-18,A-33表现出较好的保护活性：62.1%,61.6%,64.9%，略低于对照药剂宁南霉素(治疗51.5%，钝化93.2%，保护68.8%)。
实施例九：部分化合物的抗肿瘤活性实验
采用MTT比色法测试化合物的抗肿瘤活性。
将96孔板的上、下行用灭菌二次水封边，每孔200μL。取对数生长期细胞，常规消化后，重悬于含10%FBS的RPMI1640培养基中，以3.5×104个/mL的终浓度接种于96孔培养板，每孔100μL，最右侧一列为空白对照组，加无细胞的有血清RPMI1640培养基。置于37℃、5%CO2的饱和湿度培养箱中培养24h使细胞贴壁。吸掉培养基，加入含不同药物浓度的有血清培养基，每孔200μL，注意培养基中DMSO终浓度不能超过0.1%，空白对照组每孔加200μL完全培养基。分别处理实验要求时间，去除上清，加100μl/well浓度0.5mg/mL的MTT。培养4h后再补加100μl/well的10%的SDS。37℃下10h使结晶物充分溶解后取出，微震荡5min，放置室温下30min，在A595波长下测OD值，并计算细胞活性、抑制率和P值。
以药物浓度或处理时间为横轴，OD值或者抑制率为纵轴，绘制曲线。每样本浓度重复六个孔，每个实验重复三次，取平均值为最终结果。
实验结果以SPSS软件进行方差分析，p<0.05时为差异显著，p<0.01时为差异极显著。细胞增殖的抑制率计算公式如下：
本发明实施例辅以说明本发明的技术方案，但实施例的内容并不局限于此，实验结果如表5所示。
测试了26个化合物对抑制人肺癌细胞(A549)增殖的活性。结果表明，该类化合物对A549细胞具有一定的抑制活性。在10μΜ浓度下，抑制率超过90%的化合物有11个，分别是化合物A-1,A-3,A-4,A-7,A-8,A-10,A-13,A-25,A-26,A-28和A-32，抑制率分别为97.1%,96.9%,95.0%,98.1%,99.2%,98.3%,99.0%,99.8%,99.2%,93.6%和98.9%，优于对照药物吉非替尼(72.0%)。在1μΜ浓度下，化合物A-25和A-26的抑制率分别为92.1%和80.0%，优于对照药物吉非替尼(54.0%)。初步构效关系表明，当取代基为吡啶基时活性明显优于取代苯甲醛。

Claims (9)

1.含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉类衍生物，结构如通式I所示：
式中：
其中基团在苯环的2、3或4位；
R为氢、烷氧基
R1为硝基苯基、卤代苯基、甲氧基苯基、乙氧基苯基、吗啉代乙氧基苯基、五元杂芳环基、六元杂芳环基、稠环基。
2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，在通式I中：
R选自氢、C1-C4烷氧基；
R1选自邻，间，对位单取代或多取代硝基苯基、邻，间，对位单取代或多取代卤原子苯基、邻，间，对位单取代或多取代甲氧基苯基、邻，间，对位单取代或多取代乙氧基苯基、邻，间，对位单取代或多取代吗啉代乙氧基苯基、邻，间，对位单取代或多取代五元杂芳环基、邻，间，对位单取代或多取代六元杂芳环基、稠环基或取代稠环基；
所述卤原子为氟、氯、溴、碘。
3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，在通式I中：
R中所指的烷氧基为单取代或多取代甲氧基、单取代或多取代乙氧基、单取代或多取代丙氧基、单取代或多取代丁氧基；
R1中所指的五元杂环基为呋喃环基、六元杂环基为吡啶环基、稠环基为萘环基。
4.根据权利要求1任一项所述的喹唑啉类衍生物，其特征是已合成的具体化合物如下：
。
5.根据权利要求4所述化合物的用途，其特征是用于人肺癌细胞A549的抑制。
6.根据权利要求4所述化合物的用途，其特征是用于作为防治水稻白叶枯病。
7.根据权利要求4所述化合物的用途，其特征是用于作为防治烟草花叶病。
8.根据权利要求4所述的含戊二烯酮的4-N取代喹唑啉类衍生物制备方法，其特征在于合成路线如下：
反应式中R为H、6,7-二甲氧基或5,6,7-三甲氧基、R1所指同上。
9.本发明含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉类衍生物制备方法，工艺步骤和工艺条件为：
A.含戊二烯酮结构的4-N取代喹唑啉化合物制备工艺步骤和工艺条件依次为：
不同取代苯甲酸甲酯的制备：以取代甲氧基苯甲酸为原料，甲醇作溶剂，65oC反应2h，饱和碳酸钠调pH至8左右，二氯甲烷萃取，脱溶得取代苯甲酸甲酯；
不同取代硝基苯甲酸甲酯制备：以不同取代甲氧基苯甲酸甲酯为原料，70%硝酸为溶剂，冰浴下，反应1h，加水，析出固体，抽滤水洗，得不同取代硝基苯甲酸甲酯；
不同取代氨基苯甲酸甲酯制备：以不同取代硝基苯甲酸甲酯为原料，钯碳作催化剂，甲醇作溶剂，室温下反应12h，抽滤脱溶，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得不同取代氨基苯甲酸甲酯；
不同取代喹唑啉酮制备：以不同取代氨基苯甲酸甲酯和甲酰胺为原料，甲苯作溶剂，三氯氧磷条件下，反应5h，浓氨水调pH至8左右，二氯甲烷萃取，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得不同取代喹唑啉酮；
不同取代4-氯喹唑啉制备：以同取代喹唑啉酮为原料，甲苯作溶剂，三氯氧磷和三乙胺条件下，反应5h，浓氨水调pH至8左右，二氯甲烷萃取，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得不同取代4-氯喹唑啉；
(6)4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮制备：以对硝基苯甲醛为原料，丙酮作溶剂，碳酸钾作缚酸剂，室温下反应12h，脱溶，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮；
(7)4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮制备：以4-(4-硝基苯基)-3-丁烯-2-酮为原料，乙醇作溶剂，氯化亚锡作还原剂，加热回流2h，调pH至9左右，二氯甲烷萃取，柱层析(PE:EA=5:1,V/V)得4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮；
(8)4-(2-(甲氧基取代喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮制备：以4-氯喹唑啉和4-(4-氨基苯基)-3-丁烯-2-酮为原料，四氢呋喃作溶剂，碳酸钾作缚酸剂，加热回流2h，脱溶，柱层析(PE:EA=2:1,V/V)得4-(2-(甲氧基取代喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮；
(A)目标化合物制备：以4-(2-(甲氧基取代喹唑啉-4-氨基)苯基)-3-丁烯-2-酮和不同取代醛为原料，甲醇作溶剂，室温下反应6-12h，柱层析(DCM:MeOH=10:1,V/V)得目标分子。
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