CN105030651B - 一种具有美容作用的组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种具有美容作用的组合物及其应用，包括以下重量份的组分：红心火龙果粉100～180份、库拉索芦荟提取物120～180份、山楂提取物35～50份、茶多酚20～50份、维生素C 30～60份、富硒酵母2～5份。本发明公开的组合物依托衰老的自由基理论和免疫学说进行开发，具有抗氧化、增强免疫力和改善皮肤水分的作用，能够充分发挥抗衰老的美容保健功能。服用本发明提供的组合物30～45天，其皮肤衰老特征得到明显改善。

Description

一种具有美容作用的组合物及其应用

技术领域

本发明涉及医药技术和功能保健技术领域，具体涉及一种具有美容作用的组合物及其应用。

背景技术

衰老(又称老化)，通常是指在正常状况下生物发育成熟后，随年龄增加，自身机能减退，内环境稳定能力与应激能力下降，结构、组分逐步退行性变，趋向死亡，不可逆转的现象。衰老是一个机体内在的固有特征，同时又是一个不可逆的过程。衰老是生命发展的必然。衰老过程在整体、组织、细胞，乃至分子水平皆有所体现。随年龄增加，器官、组织的实质细胞数、反应敏感性及功能均逐步下降。

关于衰老的机理，目前科学界还众说不一。但其中的自由基学说和免疫学说是已被广大研究者公认的理论。

衰老的自由基学说是Denham Harman于1956年提出的。该理论认为，衰老过程中的退行性变化是由于细胞正常代谢过程中产生的自由基的有害作用造成的。生物体的衰老过程是机体的组织细胞不断产生的自由基积累结果，自由基可以引起DNA损伤从而导致突变，诱发肿瘤形成。自由基是正常代谢的中间产物，其反应能力很强，可使细胞中的多种物质发生氧化，损害生物膜。还能够使蛋白质、核酸等大分子交联，影响其正常功能。支持该学说的证据主要来自一些体内和体外实验。包括种间比较、饮食限制、与年龄相关的氧化压力现象测定、给予动物抗氧化饮食和药物处理；体外实验主要包括对体外二倍体成纤维细胞氧压力与代谢作用的观察、氧压力与倍增能力及抗氧化剂对细胞寿命的影响等。该学说的观点可以对一些实验现象加以解释，比如自由基抑制剂及抗氧化剂可以延长细胞和动物的寿命。体内自由基防御能力随年龄的增长而减弱。脊椎动物寿命长的，体内的氧自由基产率低。

免疫学说由免疫学家Walford和Burnet分别于1969和1970年率先提出，该理论认为老化与免疫功能减退和自身免疫出现有关。其理论基础概括为两点：①免疫系统是维持机体内环境统一的主要功能系统，在老年期免疫功能逐渐衰退，致使肿瘤、自身免疫疾病等的发病率逐渐增多。②胸腺是免疫系统的中心器官，是细胞免疫与体液免疫的总枢纽；胸腺从中年开始逐渐退化，到老年时仅残存少量生产免疫因子的活力。有研究表明，人体衰老过程中，免疫细胞的构成发生了变化，T、B细胞绝对值明显减少，其亚群也有变化；免疫功能下降，T细胞对有丝分裂原刺激的增殖能力下降，B细胞对外来抗原反应能力降低而对自身抗原反应能力增加；NK细胞活性明显下降。免疫细胞产生的细胞因子如IL-2、IFN-r活性下降，IL-6、TGF-B(B-转化生长因子)、IL-10在老化过程中也有明显改变。在上述事实基础上，可以认为老化过程中免疫系统的改变与整个机体的衰老密切有关。在这个变化中，免疫细胞的构成和组成包括使免疫细胞发挥功能的诸多物质基础发生了明显的变化，导致免疫活性细胞各种功能发生很大改变，出现对抗原的精细识别能力下降、精确调控功能减弱，以及免疫应答紊乱、低效和无效，使免疫系统的三大功能(防御、自稳、监视)失调或减弱，最终导致老年人感染性疾病、自身免疫性疾病及癌症的发生率明显增加。

目前市场上的抗衰老功能产品，从使用形式上主要分为外用和内服两类。外用类产品，主要应用于老化的肌肤表面，虽然能达到皮肤表面的一时美化，但也只能暂时缓解脸部皮肤的衰老状态，不能从根源上解决皮肤衰老问题；另一方面，外用产品中的乳化剂、香精、色素、防腐剂等化学添加物也可能给消费者造成一定程度的伤害，达不到应有的安全要求。相比之下，现有的内服类产品则侧重从清除自由基方面解决衰老问题，这类产品也能够在一定程度上起到抗衰老的美容作用，但因为导致衰老的原因是多方面的的，故使用抗氧化作用的物质并不能达到综合兼顾以提高机体抗衰老功能的目的。有鉴于此，根据学术界现已普遍认可的有关衰老的自由基理论和免疫学说，从清除自由基和增强免疫力这两个根本问题入手，兼顾改善衰老导致的皮肤干燥、粗糙、暗沉症状，以研制开发产品，对改善衰老症状具有明显效果，也更有利于综合提高机体的抗衰老能力，从而达到美容效果。

发明内容

为达到综合提高机体抗衰老能力的目的，本发明提供一种具有美容作用的组合物及其应用，该组合物兼具抗氧化、增强免疫力和改善皮肤水分的作用，从而综合发挥抗衰老美容的保健功效。

本发明通过下列技术方案实现：一种具有美容作用的组合物，包括以下重量份的组分：

红心火龙果粉100～180份、

库拉索芦荟提取物120～180份、

山楂提取物35～50份、

茶多酚20～50份、

维生素C 30～60份、

富硒酵母2～5份。

所述的重量份可以是μg、mg、g、kg等医药领域公知的重量单位，也可以是其倍数。

所述红心火龙果粉是经过下列操作制得：将红心火龙果鲜果去皮后，再采用胶体磨进行粉碎，然后经冷冻干燥及粉碎后，即得到红色至紫红色的红心火龙果粉。本发明所用的红心火龙果粉采用冷冻干燥工艺，能最大限度保留其中的营养成分。

其中，红心火龙果是一种绿色、环保果品和具有必定疗效的保健养分食品，其中富含碳水化合物、膳食纤维、植物白蛋白、维生素C、钙、磷、铁和大量天然色素，具有清除自由基、增强免疫力、美容护肤、减肥、降低胆固醇、预防便秘等功效。同时，其中的天然色素经冲调后呈现出亮丽的红色，可有效提升产品外观和消费者的食用欲望。

库拉索芦荟提取物为市购库拉索芦荟叶的提取物。其库拉索芦荟叶的提取物中芦荟多糖含量≥6％、O-乙酰基含量≥5％。库拉索芦荟中的化学成分达200多种，主要含有蒽醌类化合物、多糖、蛋白质、氨基酸、多肽、微量元素等。芦荟多糖是其中最主要的活性成分，具有调节免疫功能、保持皮肤水分、消炎、抗病毒、杀菌、抗肿瘤、抗凝血等多种功效。

山楂提取物为市购山楂的果实提取物。山楂的主要成分为黄酮类及有机酸类化合物。黄酮类化合物主要有牡荆素、槲皮素、槲皮苷、金丝桃苷、芦丁等；有机酸主要有山楂酸、柠檬酸、熊果酸等。黄酮类化合物和有机酸具抗氧化作用，能显著降低血清和肝脏中丙二醛含量，增强红细胞和肝脏超氧化物歧化酶的活性，同时增强血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。另外，山楂中尚含有人体所需的磷脂、维生素C、维生素B₂等。

茶多酚为市购绿茶或普洱茶的提取物，其提取物中茶多酚的含量≥90％。茶多酚是茶叶中所含的一类多羟基类化合物，主要化学成分为儿茶素类(黄烷醇类)、黄酮及黄酮醇类、花青素类、酚酸及缩酚酸类、聚合酚类等化合物的复合体。茶多酚抗氧化能力强，同时具有增强免疫、美容护肤、软化血管等功效，并能够促进维生素C的吸收。

维生素C是天然植物(如针叶樱桃)提取，或化学合成和生物发酵制得，其中维生素C含量≥75％。维生素C主要发挥抗氧化和增强免疫力的作用。

富硒酵母是在培养酵母的过程中加入硒元素，使硒与酵母体内的蛋白质和多糖有机结合转化为有机硒，其中硒的含量≥0.2％。有机硒消除了无机硒对人体的毒副反应和肠胃刺激。硒能够有效调节人体免疫力，并在体内代谢过程中发挥抗氧化功能。

本发明还提供一种具有美容作用组合物的制备方法，经过下列各步骤：

(1)按以下重量份的组分备料：

红心火龙果粉100～180份、

库拉索芦荟提取物120～180份、

山楂提取物35～50份、

茶多酚20～50份、

维生素C 30～60份、

富硒酵母2～5份；

(2)将步骤(1)各组分混合后即得到具有美容作用的组合物。

所得具有美容作用的组合物中还添加功能或保健食品所接受的辅料，制成固体饮料、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液体制剂。其中胶囊剂是指硬胶囊、软胶囊；片剂是指普通片、咀嚼片、含片等。

所得具有美容作用的组合物是每日口服1次，4～12g，连续服用30～45天。

所得具有美容作用的组合物应用于保健食品或抗衰老美容产品。

本发明的有益效果在于：本发明公开的组合物依托衰老的自由基理论和免疫学说进行开发，具有抗氧化、增强免疫力和改善皮肤水分的作用，能够充分发挥抗衰老的美容保健功能。服用本发明提供的组合物30～45天，其皮肤衰老特征得到明显改善。

具体实施方式

本发明用下列实施例来进一步说明本发明，但本发明的保护范围不限于以下实施例。

实施例1

(1)按以下重量份的组分备料：

红心火龙果粉150份、

库拉索芦荟提取物150份、

山楂提取物40份、

茶多酚30份、

维生素C 60份、

富硒酵母3份；

(2)将步骤(1)各组分分别筛分至40目，再混合后添加甜味剂结晶果糖377份、罗汉果甜苷0.005份，于三维混合机中混合40min，即得到具有美容作用的固体饮料。

实施例2

(1)按以下重量份的组分备料：

红心火龙果粉100份、

库拉索芦荟提取物160份、

山楂提取物35份、

茶多酚40份、

维生素C 30份、

富硒酵母2份；

(2)将步骤(1)各组分添加蔗糖粉233份，再混合后进行干法制粒，即得到具有美容作用的颗粒剂。

实施例3

(1)按以下重量份的组分备料：

红心火龙果粉180份、

库拉索芦荟提取物180份、

山楂提取物50份、

茶多酚50份、

维生素C 40份、

富硒酵母5份；

(2)将步骤(1)各组分添加适量的甜味剂，用150份水于配料罐中使其充分溶解，过滤、灭菌、分装制成有美容作用的口服液体制剂。

实施例4

(1)按以下重量份的组分备料：

红心火龙果粉160份、

库拉索芦荟提取物120份、

山楂提取物50份、

茶多酚50份、

维生素C 60份、

富硒酵母5份；

(2)将步骤(1)各组分添加适量药用辅料或食品添加剂，干法制粒、压片，制成具有美容作用的片剂。

实施例5

(1)按以下重量份的组分备料：

红心火龙果粉120份、

库拉索芦荟提取物170份、

山楂提取物50份、

茶多酚20份、

维生素C 40份、

富硒酵母4份；

(2)将步骤(1)各组分添加适量辅料，再混合后按常规工艺制成具有美容作用的胶囊。

为进一步验证本发明的功能，以本发明提供的部分实施例进行体外抗氧化功能试验、抗氧化功能动物实验、增强免疫力功能试验和临床试验，结果如下：

一、体外抗氧化功能试验

1实验材料

1.1供试样品

本发明实施例1～3提供的组合物(不含添加辅料)：茶多酚(≥90％)，江苏德和生物科技有限公司；维生素C，东北制药集团股份有限公司；山楂提取物，沧州富正源生物食品有限公司；红心火龙果粉，云南万绿生物股份有限公司；库拉索芦荟提取物，云南万绿生物股份有限公司；富硒酵母，安琪酵母股份有限公司。

1.2试验试剂

DPPH；ABTS；邻苯三酚；Tris；K₂S₂O₈、FeSO₄·7H₂O、水杨酸、H₂O₂、K₃Fe(CN)₆、TCA、FeCl₃·6H₂O、NaH₂PO₄·2H₂O，Na₂HPO₄等，均为国产AR。

1.3仪器设备

ME104E电子分析天平，Mettle Toledo；PH-10型pH计，Mettle Toledo；Eon微孔板分光光度计，BioTek。

2实验方法

2.1对DPPH·的清除能力测定

取0.2mM DPPH乙醇溶液150μl，加入不同浓度的待测样品150μl，混匀后室温避光反应30min，酶标仪测定各反应孔517nm处OD值。

2.2对ABTS⁺·的清除能力测定

含7mM ABTS、140mM K₂S₂O₈的储备液，以pH7.40、100mM PBS稀释为A₇₃₄＝0.70应用液(约20～30倍稀释)，取此应用液150μl，加入样品150μl，酶标仪测定各反应孔734nm处OD值。

2.3对O₂ ^－·的清除能力测定

取pH 8.20、100mM Tris-HCl缓冲液150μl，加入样品50μl、0.5mM邻苯三酚溶液100μl，并作不添加邻苯三酚的样品对照，放置10min，测定325nm下OD。

2.4对·OH的清除能力测定

采用Fenton反应体系，取8mM FeSO₄溶液200μl与8mM水杨酸-乙醇溶液200μl混合后，加入样品200μl，再加入8mM H₂O₂溶液200μl，混匀，37℃水浴30min，3000rpm离心10min，取出冷却，510nm处测定OD值。

3实验结果

计算各浓度样品对自由基的清除率，制作浓度-清除率曲线，根据曲线计算出各样品对自由基清除作用的IC₅₀，详见表1。

表1体外清除自由基能力测定结果

茶多酚和维生素C对DPPH·、ABTS⁺·、O₂ ^-·和·OH均具有较好的清除作用。山楂提取物和红心火龙果粉对ABTS⁺·也有一定的清除作用，但对DPPH·、O₂ ^-·和·OH的清除作用较微弱。库拉索芦荟提取物、富硒酵母对4种自由基的清除能力则比较有限。与茶多酚和维生素C相比，实施例1～3的IC₅₀值较大，但与红心火龙果粉、山楂提取物、库拉索芦荟提取物、富硒酵母相比，则其IC₅₀值均较小，故可判断其清除能力较强。又因茶多酚和维生素C在组合物中所占比例较低，而其他未发挥清除自由基作用或作用微弱的组份的含量则较高，据此可判断一定程度上组合物中的抗氧化成分发挥了协同作用。

二、抗氧化功能动物试验

1材料与方法

1.1实验动物

SPF级成年雄性昆明小鼠50只，购回后于动物房(屏障系统)中适应性喂养5天。按体重随机分组。

1.2剂量设计与分组

以本发明实施例1制备的固体饮料为受试物，按人体推荐量8g/(60kg·bw)的10倍、20倍、30倍设低、中、高3个实验组(剂量分别为1.33g/kg·bw，2.67g/kg·bw，4.00g/kg·bw)，正常对照组，模型对照组。共5组，每组10只小鼠。

1.3实验方法与步骤

按体重随机分组。各实验组分别按不同受试物和剂量配制相应浓度的灌胃液，各组均以20ml/kg·bw进行灌胃，正常对照组和模型对照组灌胃等量蒸馏水。连续灌胃30天。每周称动物体重两次并调整灌胃量。

末次灌胃后，正常对照组不作处理，其他组禁食16h(过夜)，然后一次性灌胃给予50％乙醇12ml/kg·bw。灌胃乙醇6h后，所有小鼠股动脉取血处死，收集血液，3000r/min离心10min，取上清液备用。解剖小鼠，取肝脏，称取0.4～0.5g肝组织，加入9倍体积的冷生理盐水，于匀浆器中制成10％的组织匀浆液，2500r/min离心10min，取上清液备用。

按试剂盒方法操作，检测血清和肝组织抗氧化物质GSH含量、抗氧化酶T-SOD和GSH-Px活力以及脂质氧化产物MDA含量；采用全自动生化分析仪测定肝组织蛋白含量。

结果数据采用SPSS 19.0软件包进行组间差异的方差分析。进行方差前先进行方差齐性检验。如方差齐，则计算F值。若F值＞0.05，即P＜0.05，则进一步采用Dunnett-t检验进行各实验组与对照组间的两两比较。如方差不齐，则改用秩和检验进行统计分析。

2实验结果

2.1对小鼠体重的影响

见表2。实验结束时，模型对照组和各实验组与正常对照组比较，体重均略有增加但无统计学意义(P>0.05)。各组动物在实验过程中活动正常，无异常表现，表明受试物对小鼠生长发育和一般健康情况无不良影响。

表2对小鼠体重的影响

2.2对小鼠血清抗氧化能力的影响

见表3。给予大剂量乙醇造模后，模型对照组与正常对照组比较，小鼠血清GSH水平和SOD活性下降(P＜0.01)，GSH-Px活性下降(P＜0.05)，MDA水平升高(P＜0.05)。说明乙醇氧化损伤模型造模成功。

表3对小鼠血清GSH、SOD、GSH-Px和MDA的影响(n＝10)

与正常对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较，^○P<0.05，^○○P<0.01

给予不同剂量的受试样品30天后，经大剂量乙醇造模，各实验组与模型对照组比较，小鼠血清GSH水平、SOD活性、GSH-Px活性均升高(P＜0.01)，MDA水平降低(P＜0.01)。

2.2.3对小鼠肝组织抗氧化能力的影响

见表4。给予大剂量乙醇造模后，模型对照组与正常对照组比较，小鼠肝组织GSH水平、SOD活性和GSH-Px活性均下降(P＜0.01)，MDA水平升高(P＜0.01)。说明乙醇氧化损伤模型造模成功。

表4对小鼠肝组织GSH、SOD、GSH-Px和MDA的影响(n＝10)

与正常对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型对照组比较，^○P<0.05，^○○P<0.01

给予不同剂量的受试样品30天后，经大剂量乙醇造模，各实验组与模型对照组比较，小鼠肝组织GSH水平、SOD活性、GSH-Px活性均升高(P＜0.01)，MDA水平降低(P＜0.01)，且中、高剂量组GSH含量显著高于正常对照组(P＜0.01)。

3.实验结论

本研究结果表明，受试样品三个剂量组均能使乙醇氧化损伤模型小鼠血清和肝组织抗氧化物质GSH含量增加，抗氧化酶SOD和GSH-Px活力升高，脂质氧化产物MDA含量降低。该受试样品抗氧化功能动物实验结果呈阳性。

三、增强免疫力功能试验

1材料与方法

1.1实验动物

实验用清洁级雌性ICR小白鼠，体重(20±2)g。检测温度范围20～25℃，相对湿度40％～70％。实验前在动物房环境中适应3天。

1.2剂量设计与分组

以本发明提供的实施例1制备的固体饮料为受试物。每个试验项目均设立不同剂量的实验组和阴性对照组，每组各10只。其中实验组根据按人体推荐量8g/(60kg·bw)的5倍、10倍、30倍设低、中、高3个实验组(剂量分别为0.67g/kg·bw，1.33g/kg·bw，4.00g/kg·bw)所有实验组经口灌胃给予不同剂量的样品，灌胃容积为4ml/10g体重，一次/天，计30天；阴性对照组给予同等容积的蒸馏水。

1.3实验方法

1.3.1脏器/体重比值测定

称重后处死小鼠，取出脾脏和胸腺，在电子分析天平上称重，计算脏/体比值。

1.3.2 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)

在试验第30天，每鼠无菌取脾，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，用镊子撕碎，制成单细胞悬液，200目筛网过滤、洗涤、计数，最后用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2×10⁶个/ml。将细胞悬液分2孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加50μLConA液(相当于5μg/ml)，另一孔作为对照，置5％二氧化碳，37℃培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7ml，加入不含小牛血清原RPMI6640培养液0.7ml，同时加入MTT(5mg/ml)于570nm波长测定光密度。淋巴细胞的增殖能力用加ConA孔的光密度减去不加ConA孔的光密度表示。

1.3.3小鼠血清溶血素测定

在试验第25天，每只鼠腹腔注射0.2ml2％(V/V)压积绵羊红细胞(SRBC)悬液，进行免疫。5天后，取血离心，收集血清，用生理盐水将血清倍比稀释，37℃温箱孵育3h，观察血球凝集程度，计算抗体积数。

1.3.4抗体生成细胞检测

在试验第25天，每只鼠腹腔注射0.2ml2％(V/V)压积绵羊红细胞(SRBC)悬液，进行免疫。5天后，每鼠无菌取脾，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，用镊子撕碎，制成单细胞悬液，200目筛网过滤，洗涤，计数，最后用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为5×10⁶个/ml。将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水至100ml)加热溶解后，置于45℃水浴保温，与等量pH7.2～7.4、2倍浓度的Hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加50μl10％SRBC(V/V，用SA液配制)、20μl脾细胞悬液(5×10⁶个/ml)，迅速混匀，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中温育1～1.5h后，用SA缓冲液稀释的补体(1:8)加入到玻片架凹槽内，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数。

1.3.5小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验

小鼠腹腔注射20％(V/V，用生理盐水配制)的压积鸡红细胞(2000r/min，10min)悬液1ml，间隔30min，颈椎脱臼处死，取腹腔巨噬细胞洗液1ml，滴于载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，置37℃孵箱温育30min。孵毕，于生理盐水中漂洗以除去未贴片细胞。晾干，以甲醇:丙酮(1:1)固定，4％(V/V)Giemsa-磷酸缓冲液染色，用蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数，每片计数100个巨噬细胞，计算吞噬率与吞噬指数。

结果数据采用SPSS 19.0软件包进行统计分析。

2实验结果

2.1对小鼠脏器/体重比值的影响

由表5可知，受试物三个剂量组小鼠脾脏/体重比值和胸腺/体重比值与阴性对照组(蒸馏水)比较，无显著性差异(P＞0.05)。

表5对小鼠脏器/体重比值的影响

与阴性对照组比较，*P<0.05

2.2对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响

由表6可见，与阴性对照组(蒸馏水)比较，三剂量组的受试物均能显著提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力(P<0.05)。

表6对ConA诱导的小鼠脾细胞增殖能力的影响

与阴性对照组比较，*P<0.05

2.3对小鼠血清溶血素的影响

由表7可知，与阴性对照组(蒸馏水)比较，三剂量组的受试物均能显著提高小鼠血清溶血素抗体积数水平(P<0.05)。

表7对小鼠血清溶血素的影响

与阴性对照组比较，*P<0.05

2.4对小鼠抗体生成细胞数的影响

由表8可知，与阴性对照组(蒸馏水)比较，高剂量组受试物能够增加小鼠溶血空斑数，有显著性差异(P<0.05)。

表8对小鼠抗体生成细胞数的影响

与阴性对照组比较，*P<0.05

2.5对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响

由表9可见，与阴性对照组(蒸馏水)比较，三剂量组的受试物均能提高小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率，有显著性差异(P<0.05)。

表9对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响

与阴性对照组比较，*P<0.05

3、结论

经口给予小鼠0.67g/kg·bw，1.33g/kg·bw，4.00g/kg·bw剂量的本发明实施例1制备的样品固体饮料，对小鼠胸腺/体重比值及脾脏/体重比值无影响，并能提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖能力、小鼠血清溶血素抗体积数水平和小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率；4.00g/kg·bw剂量能增加小鼠溶血空斑数。据此可判断，受试样品具有增强免疫力的功能。

四、临床试验

1、人群选择

40-60岁，皮肤水分≤12，肤色暗沉、皮肤干燥、肤质较差的人群，应无明显脑、心、肝、肺、肾、血液疾患，无长期服药史，志愿受试保证配合的人群。受试者在试验期间不得服用其它保持皮肤水份的物品及影响结果判定的化妆品。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。

排除标准：妊娠或哺乳期妇女，对产品过敏者；合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病患者；短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者；不符合纳入标准，未按规定食用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。

2、方法

采用自身和组间两种对照设计。志愿者均为女性，共120例，按受试者的皮肤水分和肤质情况随机分为试食组和空白对照组，每组60人。并尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄等，进行均衡性检验。试验采用双盲法，试食组和空白对照组分别食用样品或安慰剂，每日1次，每次一袋(8g/袋)，连续服用45天。

试验前后，测试前额眉间皮肤的水分。测试在宽敞、通风条件良好、温度(20±2)℃、湿度(45％±5％)等空间环境稳定的检查室进行；在安静状态下用洁净的棉球蘸蒸馏水清洁被测部位，擦干后15min进行前额眉间皮肤水分测试。试验前后和期间，观察受试者皮肤光泽度和肤质改善情况。测定工作由同一台仪器、同一人操作。

采用SPSS18.0软件进行统计学分析。

3、结果判定

有效：经仪器测定，水分得到改善，并经统计学检验差异有统计学意义；皮肤光泽度明显提升，肤质明显改善。

无效：皮肤水分和肤质没有明显改善。

4、实验结果

初始试验人群，试验组60例，对照组60例，试验期间，对照组有1例受试者因间断服用受试品被筛除。最后有效试验人群，试验组60例，对照组59例。对照组年龄：(45.46±5.28)岁；试验组年龄：(45.69±5.33)岁。

表10皮肤水分检测结果(x±s，n＝60)

自身对照＊P<0.05；组间对照#P<0.05

表10结果显示，试食组皮肤水分在试食后明显提高，与试食前比较差异有统计学意义(P<0.05)，与对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)，提示受试物具有改善皮肤水分的功能。

表11皮肤改善情况

表10和表11结果显示，空白对照组60名受试者皮肤状况没有得到改善，试食组中60名志愿者的皮肤水分均得到明显改善，且其中46名受试者的皮肤光泽度明显提升，肤质明显改善，皮肤改善有效率为76.7％，说明受试物具有抗衰老美容作用。

Claims (5)

1.一种具有美容作用的组合物，其特征在于：由以下重量份的组分构成：

红心火龙果粉100-180份、库拉索芦荟提取物120-180份、

山楂提取物35-50份、茶多酚20-50份、维生素C30-60份、

富硒酵母2-5份；其中，将红心火龙果鲜果去皮后，再采用胶体磨进行粉碎，然后经冷冻干燥及粉碎后，即得到红心火龙果粉。

2.一种具有美容作用组合物的制备方法，其特征在于：经过下列各步骤 ：

（1）按以下重量份的组分备料：

红心火龙果粉100-180份、库拉索芦荟提取物120-180份、

山楂提取物35-50份、

茶多酚20-50份、

维生素 C30-60份、

富硒酵母 2-5份；其中，将红心火龙果鲜果去皮后，再采用胶体磨进行粉碎，然后经冷冻干燥及粉碎后，即得到红心火龙果粉；

（2）将步骤（1）各组分混合后即得到具有美容作用的组合物。

3.根据权利要求 2 所述的制备方法，其特征在于 ：所得具有美容作用的组合物中还添

加功能或保健食品所接受的辅料，制成固体饮料、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液体制剂。

4.根据权利要求 2 所述的制备方法，其特征在于：所得具有美容作用的组合物是每日口服1次，4 ～ 12g，连续服用 30 ～ 45 天。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所得具有美容作用的组合物应用于保健食品或抗衰老美容产品。