CN104922220A - 一种双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，它包括如下步骤：将干燥粉碎的油橄榄叶加到亲水小分子有机溶剂和无机盐溶液双水相体系中，混合，进行超声波萃取，油橄榄叶多酚萃取到上相；上相经过大孔吸附树脂富集，有机溶剂洗脱，洗脱液经浓缩，干燥，即得油橄榄叶多酚。油橄榄叶多酚回收率在90%以上，纯度达80%以上。本方法将双水相萃取技术这一新型的分离技术与传统的超声波辅助有机溶剂萃取技术相结合应用于油橄榄叶多酚的分离提取，具有产物得率高，产物纯度高，提取快速，条件温和，设备简单，易于放大等优点。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取物领域，尤其涉及一种双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法。
背景技术
油橄榄（Olea europea）又名洋橄榄、齐敦果，主要分布在地中海沿岸国家，主要利用鲜果加工成素有“ 植物油皇后”之称的橄榄油。现代生物技术分析表明，油橄榄叶中含有丰富的抗氧化活性成分，这些活性物质主要有橄榄多酚、黄酮类、裂环烯醚萜类（ 包括橄榄苦苷）、双黄酮等。而这些活性物质需要从油橄榄叶中提取出来，现有技术中与本发明相近的提取方法如下：
专利号为201010535347，发明名称为“一种从油橄榄叶中高效富集高品质羟基酪醇的方法”的中国专利公开如下制备方法：通过从10个油橄榄品种叶中筛选高含量羟基酪醇的生产原料，采用超声波或微波提取，大孔树脂吸附和中压柱色谱分离，制备90％以上羟基酪醇提取物。
专利号为201210088677，发明名称为“一种高含量橄榄苦苷提取物的制备方法”的中国专利公开如下制备方法：在获得粗提液后，先经大孔吸附树脂吸附分离，再加碱性溶液溶解、萃取后经硅胶或氧化铝柱层析分离，最后干燥得高含量橄榄苦苷提取物。
专利号为201010523056，发明名称为“富含高纯度橄榄苦甙的油橄榄叶提取物的制备方法”中的油橄榄叶提取物制备方法是：将油橄榄干叶投料到极性溶剂中进行提取；提取液回收溶剂后，加水和辅料，混匀、静置、压滤，合并滤液；滤液经大孔树脂吸附、乙醇水混合液解吸附后，收集解吸液；解吸液回收溶剂后真空浓缩，干燥，得到油橄榄叶提取物。
目前，上述油橄榄叶提取物的制备方法采用微波或超声波法萃取油橄榄叶提取物再进行大孔吸附树脂富集，或只用有机溶剂萃取再进行大孔吸附树脂富集，而没有用选择度高，极大保存生物物质活性的新兴分离技术-双水相萃取技术。
发明内容
本发明解决的技术问题在于提供一种双水相体系萃取油橄榄叶多酚的制备方法，提取物选择度高，纯度高，活性强。
本发明提供的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的制备方法，包括如下步骤：
（1）双水相体系组成：配制pH值范围为5.5-7.5的体系缓冲液，将亲水小分子有机溶剂和无机盐用体系缓冲液溶解，混合，形成萃取油橄榄叶多酚的双水相体系。无机盐在体系中的最终浓度范围为20%-40%、亲水小分子有机溶剂在体系中的最终浓度范围为20%-50%。
（2）油橄榄叶干燥粉碎，过筛，得到60目-100目油橄榄叶的粉末。
（3） 将粉末按照固液比为1:10至1:30的比例加入到双水相体系制成萃取溶液。
（4）将萃取溶液在300 W -500W，30℃-50℃下超声波处理20 min-30min。
（5）将萃取溶液室温静置30min-100min，分相并收集上相。
（6）将上相溶液加到非极性吸附树脂的层析柱内，层析柱的径高比为1:10至1:30，上相溶液的流速为0.5ml/min-3ml/min，上柱样为15-20个柱体积；
（7）然后用蒸馏水洗脱1-5个柱体积后，再用5-10个柱体积的浓度为50%-90%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；
（8）将乙醇洗脱液在40℃-50℃环境下旋转加热浓缩得到原体积的1/5-1/2倍体积的浓缩液；
（9）将浓缩液在40℃-50℃真空环境干燥得到油橄榄叶提取物的膏状物，将膏状物在负15℃-负25℃冷冻干燥，制成油橄榄叶提取物产品。
优选地，在步骤（1）中，配制pH值范围为6-7的体系缓冲液，将亲水小分子有机溶剂和无机盐用体系缓冲液溶解，混合，形成萃取油橄榄叶多酚的双水相体系。无机盐在体系中的最终浓度范围为25%-35%、亲水小分子有机溶剂在体系中的最终浓度范围为30%-40%。
优选地，在步骤（2）中，将油橄榄叶在40℃-50℃温度下干燥2h-4h，通过高速组织捣碎机粉碎得到油橄榄叶的粉末，将粉末过70-90目筛，制成油橄榄叶粉末。
优选地，在步骤（3）中，将粉末按照固液比为1:15-1:25的比例加入到双水相体系制成萃取溶液。
优选地，在步骤（4）中，将萃取溶液在300 W -500W, 30℃-50℃下超声波处理20min-30min。
优选地，在步骤（5）中，将萃取液静置50min-70min，分相并收集上相。
优选地，在步骤（6）中，将上相溶液加到非极性大孔吸附树脂的层析柱内，上相溶液的流速为1ml/min-2ml/min。
优选地，在步骤（7）中，用蒸馏水洗脱2-3个柱体积后，再用6-8个柱体积的浓度为60%-80%的乙醇洗脱。
优选地，在步骤（8）中，乙醇洗脱液通过旋转蒸发仪将上清液在40℃-50℃、60转/min-80转/min环境下旋转加热浓缩。
优选地，在步骤（9）中，浓缩液通过真空干燥箱在40℃-45℃真空环境干燥得到油橄榄叶提取物的膏状物。
优选地，在步骤（9）中，膏状物在负20℃冷冻干燥。
与现有技术相比，本发明提供的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，能在将油橄榄叶多酚萃取到上相的同时将蛋白质、多糖等杂质萃取到下相或在两相界面，从而提高目标产物纯度；结合超声波萃取技术，能大大提高油橄榄叶多酚的萃取率。
具体实施方式
为了本领域的技术人员能够更好地理解本发明所提供的技术方案，下面结合具体实施例进行阐述。
本发明的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，包括如下步骤：
（1）将油橄榄叶室温阴干，用前在50℃下干燥3h，通过高速组织捣碎机粉碎得到油橄榄叶的粉末，将粉末过80目筛，得到油橄榄叶的粉末；
（2）将粉末按照固液比为1:20的比例加入双水相体系制成萃取溶液，双水相体系组成为35%的乙醇或甲醇，29%的硫酸铵，体系pH为6.5。
（3）将萃取溶液置于超声波萃取装置中，在400w，40℃下萃取25min，然后静置60min分相；
（4）将上相加到非极性大孔吸附树脂的层析柱内，层析柱的径高比为1:15，上清液的流速为1.5ml/min，上柱样为18个柱体积；
（5）然后用蒸馏水洗脱1.5个柱体积后，再用7个柱体积的浓度为70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；
（6）乙醇洗脱液通过旋转蒸发仪将上清液在45℃、70转/min环境下旋转加热浓缩，得到原体积的1/5-1/2倍体积的浓缩液。
（7）浓缩液通过真空干燥箱在42℃真空环境干燥得到油橄榄叶提取物的膏状物，膏状物在负20℃冷冻干燥，制成油橄榄叶多酚产品。油橄榄叶多酚回收率在90%以上，纯度达80%以上。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
Claims (11)
1.一种双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）配制pH值范围为5.5-7.5的体系缓冲液，将亲水小分子有机溶剂和无机盐用体系缓冲液溶解，混合，形成萃取油橄榄叶多酚的双水相体系;无机盐在体系中的最终浓度范围为20%-40%、亲水小分子有机溶剂在体系中的最终浓度范围为20%-50%;
（2）油橄榄叶在40℃-50℃下干燥2h-4h，通过高速组织捣碎机粉碎得到油橄榄叶的粉末，将粉末过60目筛-100目筛得到粉末;
（3）将粉末按照固液比为1:5至1:50的比例加入到双水相体系制成萃取溶液；
（4）将萃取溶液在300 W-500W，3 0℃-50℃下超声波处理20min-30min，静置30min-100min，分相并收集上相;
（5）将上相溶液加到非极性吸附树脂的层析柱内，层析柱的径高比为1:10至1:30，上相溶液的流速为0.5ml/min-3ml/min，上柱样为15-20个柱体积;
（6）然后用蒸馏水洗脱1-5个柱体积后，再用5-10个柱体积的浓度为50%-90%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液;
（7）将乙醇洗脱液在40℃-50℃环境下旋转加热浓缩得到原体积的1/5-1/2倍体积的浓缩液;
（8）将浓缩液在40℃-45℃真空环境干燥得到油橄榄叶提取物的膏状物，将膏状物在负15℃-负25℃冷冻干燥，制成油橄榄叶多酚产品。
2.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（1）中，将亲水小分子有机溶剂和无机盐用pH 5.5-pH7.5的体系缓冲液溶解，混合，形成萃取油橄榄叶多酚的双水相体系；无机盐在体系中的最终浓度范围为20%-40%、亲水小分子有机溶剂在体系中的最终浓度范围为20%-50%。
3.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（2）中，将油橄榄叶在40℃-50℃温度下干燥2h-4h，通过高速组织捣碎机粉碎得到油橄榄叶的粉末，将粉末过70目筛-90目筛得到粉末。
4.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（3）中，油橄榄叶粉末按照固液比为1:15至1:25的比例加入到双水相体系制成萃取溶液。
5.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（4）中，将萃取溶液在300w-500w, 30℃-50℃下超声波处理20min-30min。
6.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（4）中，将萃取液静置30min-90min，分相并收集上相。
7.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（5）中，将步骤（4）中得到的上相加到非极性大孔吸附树脂的层析柱内，上相液的流速为1ml/min-2ml/min。
8.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（6）中，用蒸馏水洗脱2-3个柱体积后，再用6-8个柱体积的浓度为60%-80%的乙醇洗脱。
9.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（7）中，乙醇洗脱液通过旋转蒸发仪将上清液在40℃-50℃、60转/min-80转/min环境下旋转加热浓缩。
10.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（8）中，浓缩液通过真空干燥箱在40℃-45℃真空环境干燥得到油橄榄叶提取物的膏状物。
11.根据权利要求1所述的双水相体系萃取油橄榄叶多酚的方法，其特征在于，在步骤（8）中，膏状物在负20℃冷冻干燥。
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|---|---|
| CN (1) | CN104922220B (zh) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106883102A (zh) * | 2017-04-20 | 2017-06-23 | 中国科学院兰州化学物理研究所 | 一种从油橄榄果水中分离制备羟基酪醇的方法 |
| IT201600081660A1 (it) * | 2016-08-03 | 2018-02-03 | Zahedani Dario Nadimi | Integratore alimentare, processo per la sua preparazione e suoi usi |
| CN107715055A (zh) * | 2017-10-18 | 2018-02-23 | 青岛大学 | 一种具有抗炎止痛作用中药组合提取物的制备方法与应用 |
| CN108452006A (zh) * | 2018-06-01 | 2018-08-28 | 台州学院 | 一种脉冲电场-双水相-柱层析组合提取植物多酚的方法 |
| CN109224505A (zh) * | 2018-09-18 | 2019-01-18 | 浙江工业大学 | 一种n-甲基咪唑双水相体系及其应用 |
| CN109432814A (zh) * | 2018-09-18 | 2019-03-08 | 浙江工业大学 | 一种六甲基磷酰三胺双水相体系及其应用 |
| CN109864943A (zh) * | 2019-04-03 | 2019-06-11 | 黄山峰源生物科技有限公司 | 一种白芨多酚的制备方法与应用 |
| CN110652008A (zh) * | 2019-11-08 | 2020-01-07 | 深圳市清生元生物技术股份有限公司 | 一种超声辅助双水相提取荔枝多酚的方法 |
| CN111528268A (zh) * | 2020-05-28 | 2020-08-14 | 蚌埠学院 | 基于气体保护的肉类保鲜方法 |
| CN115554200A (zh) * | 2022-03-07 | 2023-01-03 | 科丝美诗(上海)检测科技有限公司 | 一种具有舒缓作用的淡竹叶提取物的制备方法及应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102432582A (zh) * | 2011-12-29 | 2012-05-02 | 广西金宏昕生物科技有限公司 | 一种原花青素的制备方法 |
| CN102599612A (zh) * | 2012-03-31 | 2012-07-25 | 徐州工程学院 | 一种石榴叶提取物的提取技术及其在气调保鲜熟禽肉制品中的应用 |
| WO2012140454A2 (en) * | 2011-04-11 | 2012-10-18 | Sotirelis Sotiris | Method of separation and management of the two phase olive pomace |
-
2015
- 2015-04-30 CN CN201510211626.1A patent/CN104922220B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012140454A2 (en) * | 2011-04-11 | 2012-10-18 | Sotirelis Sotiris | Method of separation and management of the two phase olive pomace |
| CN102432582A (zh) * | 2011-12-29 | 2012-05-02 | 广西金宏昕生物科技有限公司 | 一种原花青素的制备方法 |
| CN102599612A (zh) * | 2012-03-31 | 2012-07-25 | 徐州工程学院 | 一种石榴叶提取物的提取技术及其在气调保鲜熟禽肉制品中的应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| SUZY MCDONALD等: "Phenolic content and antioxidant activity of olive extracts", 《FOOD CHEMISTRY》 * |
| 周安存等: "乙醇-硫酸铵双水相体系与微波集成提取石榴皮多酚的实验研究", 《光明中医》 * |
| 张莉等: "《分离检测实训》", 31 January 2013, 中国科学技术大学出版社 * |
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT201600081660A1 (it) * | 2016-08-03 | 2018-02-03 | Zahedani Dario Nadimi | Integratore alimentare, processo per la sua preparazione e suoi usi |
| WO2018024716A1 (en) | 2016-08-03 | 2018-02-08 | Nadimi Zahedani Dario | Food supplement, process for preparing it and its uses |
| US10806168B2 (en) | 2016-08-03 | 2020-10-20 | Dario Nadimi Zahedani | Food supplement, process for preparing it and its uses |
| CN106883102A (zh) * | 2017-04-20 | 2017-06-23 | 中国科学院兰州化学物理研究所 | 一种从油橄榄果水中分离制备羟基酪醇的方法 |
| CN107715055B (zh) * | 2017-10-18 | 2020-09-01 | 青岛大学 | 一种具有抗炎止痛作用中药组合提取物的制备方法与应用 |
| CN107715055A (zh) * | 2017-10-18 | 2018-02-23 | 青岛大学 | 一种具有抗炎止痛作用中药组合提取物的制备方法与应用 |
| CN108452006A (zh) * | 2018-06-01 | 2018-08-28 | 台州学院 | 一种脉冲电场-双水相-柱层析组合提取植物多酚的方法 |
| CN109224505B (zh) * | 2018-09-18 | 2021-01-05 | 浙江工业大学 | 一种n-甲基咪唑双水相体系及其应用 |
| CN109432814A (zh) * | 2018-09-18 | 2019-03-08 | 浙江工业大学 | 一种六甲基磷酰三胺双水相体系及其应用 |
| CN109224505A (zh) * | 2018-09-18 | 2019-01-18 | 浙江工业大学 | 一种n-甲基咪唑双水相体系及其应用 |
| CN109864943A (zh) * | 2019-04-03 | 2019-06-11 | 黄山峰源生物科技有限公司 | 一种白芨多酚的制备方法与应用 |
| CN109864943B (zh) * | 2019-04-03 | 2021-07-30 | 黄山峰源生物科技有限公司 | 一种白芨多酚的制备方法与应用 |
| CN110652008A (zh) * | 2019-11-08 | 2020-01-07 | 深圳市清生元生物技术股份有限公司 | 一种超声辅助双水相提取荔枝多酚的方法 |
| CN111528268A (zh) * | 2020-05-28 | 2020-08-14 | 蚌埠学院 | 基于气体保护的肉类保鲜方法 |
| CN111528268B (zh) * | 2020-05-28 | 2022-05-27 | 蚌埠学院 | 基于气体保护的肉类保鲜方法 |
| CN115554200A (zh) * | 2022-03-07 | 2023-01-03 | 科丝美诗(上海)检测科技有限公司 | 一种具有舒缓作用的淡竹叶提取物的制备方法及应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104922220B (zh) | 2019-01-18 |
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Effective date of registration: 20190619 Address after: Room 1401, Huixin IBCB Block, No. 1 Zhang Bayi Road, Xi'an High-tech Zone, Shaanxi Province, 710000 Patentee after: XI'AN GREEN SPRING BIO-TECHNOLOGY CO., LTD. Address before: 610039 Jinzhou Road, Jinniu District, Chengdu, Sichuan Province, No. 999 Patentee before: Xihua University |
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| TR01 | Transfer of patent right | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Method for extracting Olea europaea leaf polyphenol by aqueous two phase system Effective date of registration: 20191012 Granted publication date: 20190118 Pledgee: Xi'an Science and Technology Financial Service Center Co., Ltd. Pledgor: XI'AN GREEN SPRING BIO-TECHNOLOGY CO., LTD. Registration number: Y2019980000255 |
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| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20201225 Granted publication date: 20190118 Pledgee: Xi'an Science and Technology Financial Service Center Co.,Ltd. Pledgor: XI'AN GREEN SPRING BIO-TECHNOLOGY Co.,Ltd. Registration number: Y2019980000255 |
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| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |