CN104920517A

CN104920517A - 一种防治果树褐腐病的穿心莲水剂及其制备方法

Info

Publication number: CN104920517A
Application number: CN201510262436.2A
Authority: CN
Inventors: 葛喜珍; 裴庆慧; 田平芳
Original assignee: Beijing Union University
Current assignee: Beijing Union University
Priority date: 2015-05-21
Filing date: 2015-05-21
Publication date: 2015-09-23
Anticipated expiration: 2035-05-21
Also published as: CN104920517B

Abstract

本发明公开了一种防治果树褐腐病的穿心莲水剂及其制备方法。该穿心莲水剂包括穿心莲、百部和忍冬藤的复方提取物、茶皂素、防冻剂和防腐剂；提取物的原料配比为：穿心莲80-120份、百部5-40份、忍冬藤5-35份。其制备方法为：(1)将穿心莲、百部、忍冬藤按比例混合，微波水提，pH＝6.0-8.0，提取时间为30-45分钟，微波功率为500W，温度为50℃；提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到0.8-2.3g生药/mL的复方提取液；(2)将复方提取液与茶皂素、防冻剂和防腐剂混合搅拌，加入0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容即得穿心莲水剂。本发明能够有效的杀菌防腐，效果好，无毒无残留，生产工艺简单，适宜工业化生产。

Description

一种防治果树褐腐病的穿心莲水剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种防治果树褐腐病的穿心莲水剂及其制备方法。

背景技术

目前化学农药是预防和治疗植物病害的有效手段，在保障农作物高产和稳产方面发挥了巨大的作用。但传统化学农药的长期大量不合理使用所造成“3R”问题，即残留、抗性、再猖獗日趋严重，引起了社会的普遍关注，对环境和人体健康都存在巨大威胁。寻求和开发对人类健康及生态环境安全的新型农药的需求越来越迫切。与化学农药相比，生物农药通常被认为具有无公害、无污染、无残留、不易产生抗性等明显优点。

褐腐病又名果腐病、菌核病，是一种世界性病害，是各种核果尤其是桃树的重要病害之一。桃褐腐病能为害桃树的花叶、枝梢及果实，其中以果实受害最重，为核果种植领域亟待解决的难题之一。目前普遍采用化学杀菌剂及套袋方法在花期和结果期对病菌进行杀灭和防治；在果实采摘之后，还需要施用化学防腐剂以防止果实腐烂。整个过程中多次大量使用化学药剂，其带来的污染之大可想而知。因而急需寻找一种可以有效杀菌防腐的生物药剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种防治果树褐腐病的穿心莲水剂，该药剂能够有效的杀菌防腐，效果好，无毒无残留，生产工艺简单，适宜工业化生产。

本发明的另一目的在于提供一种所述穿心莲水剂的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种防治果树褐腐病的穿心莲水剂，包括穿心莲、百部和忍冬藤的复方提取物、茶皂素、防冻剂和防腐剂。优选地，所述复方提取物的原料按重量计配比为：穿心莲80-120份、百部5-40份、忍冬藤份5-35份。优选采用水提醇沉法提取所述复方提取物。所述复方提取物为0.8-2.3g生药/mL的复方提取液。

一种所述防治果树褐腐病的穿心莲水剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将穿心莲、百部、忍冬藤按比例混合，微波水提，pH＝6.0-8.0，提取时间为30-45分钟，微波功率为500W，温度为50℃；提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到0.8-2.3g生药/mL的复方提取液；

(2)将步骤(1)得到的复方提取液与茶皂素、防冻剂和和防腐剂按比例混合搅拌，加入0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容即得穿心莲水剂，其中，复方提取液体积百分比60-80％，每100mL穿心莲水剂含0.5-1.5g茶皂素，防冻剂体积百分比5-7％，防腐剂体积百分比5％。

其中，所述步骤(1)中微波水提时的料与水之间的重量比为1∶3-6。

所述防冻剂为丙二醇或丙三醇，所述防腐剂为乙醇。

本发明的优点在于：

本发明的穿心莲水剂能强烈抑制果树褐腐病，以无毒、无农药残留、环境友好为目标，利用天然无毒的植物材料，减少了化学农药带来的污染，同时具有稳定、高效、低成本的优点，其制备方法简单，应用广泛，适合规模化工业生产的需要。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明做进一步说明。

本发明的穿心莲水剂的有效成分为穿心莲、百部、忍冬藤提取物和茶皂素。其中，穿心莲为爵床科穿心莲属植物，分布广泛，为常用中药，具有清热解毒、凉血消肿等功效，临床上多用于呼吸道感染、急性菌痢、肠胃炎、感冒发热等疾病的治疗。穿心莲的化学成分主要有内酯类和黄酮类，内酯成分主要包括穿心莲内酯、新穿心莲内酯、脱氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、穿心莲内酯苷等。

本发明为水剂。凡能溶于水、在水中又不分解的农药，均可配制成水剂。水剂是农药原药的水溶液，药剂以离子或分子状态均匀分散在水中，药剂的浓度取决于原药的水溶解度，一般情况是其最大溶解度，使用时再兑水稀释。水剂与乳油相比，不需要有机溶剂，加适量表面活性剂即可喷雾使用，对环境的污染少，制造工艺简单，药效也很好。

在以下实施例中，分别对制得的防治果树褐腐病的穿心莲水剂进行稀释稳定性试验、低温稳定性试验和热贮稳定性试验，具体试验过程如下：

1、稀释稳定性试验

试剂和仪器：标准硬水，硬度以碳酸钙计为0.342g/L、量筒(100mL)、恒温水浴锅(30℃±2℃)。

试验步骤：

用移液管吸取5mL试样，置于100mL量筒中，加标准硬水至刻度，混匀；将此量筒放人30℃±2℃恒温水浴中，静置1h。稀释液均一，无析出物为合格。

2、低温稳定性试验

仪器：制冷器(保持0℃±2℃)、离心管(100mL，管底刻度精确至0.05mL)、离心机、量筒(100mL)。

试验步骤：

移取100mL的样品加人离心管中，在制冷器中冷却至0℃±2℃，让离心管及其内容物在0℃±2℃下保持1h，其间每隔15min搅拌一次，每次15_s，检查并记录有无固体物或油状物析出。将离心管放回制冷器，在0℃±2℃下继续放置7d，将离心管取出，在室温(不超过20℃)下静置3h，离心分离15min。记录管子底部析出物的体积(精确至0.05mL)。析出物不超过3mL为合格。

3、热稳定性试验

仪器：恒温箱(或恒温水浴，54℃±2℃)、安瓶或者54℃仍能密封的具塞玻璃瓶(50mL)、医用注射器(50mL)。

试验步骤：

用注射器将约30mL试样注入洁净的具塞玻璃瓶(避免试样接触瓶颈)，置此安瓶于冰浴中制冷，用高温火焰迅速封口(避免溶剂挥发)，至少封3瓶，冷却至室温称量。将封好的瓶置于金属容器内，再将金属容器放入542℃±2℃恒温箱(或恒温水浴)中，放置14d。取出冷至室温，将安瓶外面拭净分别称量，质量未发生变化的试样为合格。

实施例1

将原料按照穿心莲80份、百部30份、忍冬藤20份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶3，pH＝6.0，提取时间为30分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到1.63g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液480mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素6g，丙三醇40mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例2

将原料按照穿心莲90份、百部20份、忍冬藤20份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶6，pH＝7.0，提取时间为40分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到0.96g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液500mL，投入搅拌罐开始搅拌，依次加入茶皂素10g，丙三醇50mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例3

将原料按照穿心莲100份、百部10份、忍冬藤20份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶3.5，pH＝8.0，提取时间为45分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到2.30g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液520mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素8g，丙三醇45mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例4

将原料按照穿心莲110份、百部10份、忍冬藤10份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶3.5，pH＝8.0，提取时间为38分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到1.57g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液560mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素6g，丙三醇50mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例5

将原料按照穿心莲120份、百部5份、忍冬藤5份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶5，pH＝7.0，提取时间为42分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到0.80g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液600mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素4g，丙三醇45mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例6

将原料按照穿心莲80份、百部15份、忍冬藤35份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶4.5，pH＝6.0，提取时间为42分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到1.31g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液620mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素8g，丙三醇42mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例7

将原料按照穿心莲80份、百部10份、忍冬藤35份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶4，pH＝6.0，提取时间为44分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到1.17g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液640mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素5g，丙三醇48mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例8

将原料按照穿心莲100份、百部20份、忍冬藤10份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶3.8，pH＝7.5，提取时间为45分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到1.24g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液600mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素6g，丙三醇41mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例9

将原料按照穿心莲110份、百部10份、忍冬藤10份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶5，pH＝7.0，提取时间为36分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到1.35g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液540mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素8g，丙三醇50mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例10

将原料按照穿心莲105份、百部20份、忍冬藤5份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶4.5，pH＝7.0，提取时间为39分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到1.37g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液530mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素8g，丙三醇50mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例11

将原料按照穿心莲85份、百部40份、忍冬藤5份的比例混合，粉碎，微波水提，料水重量比为1∶4.5，pH＝6.0，提取时间为45分钟，微波功率为500W，温度为50℃，提取2次，合并提取液，过滤，滤液醇沉，真空抽滤，浓缩得到1.61g生药/mL的复方提取液。

取复方提取液630mL，投入搅拌罐搅拌，依次加入茶皂素12g，丙三醇40mL，乙醇40mL，0.5％羧甲基纤维素钠水溶液定容至800mL，得到穿心莲水剂，其稀释稳定性、热稳定性、低温稳定性均合格。

实施例12

穿心莲水剂抑制桃褐腐菌EC50测定，具体步骤：

配置带药(实施例8的穿心莲水剂)PDA培养基的终浓度分别为500.0000、250.0000、125.0000、62.5000、31.2500、15.6250、7.8130、3.9065μL/mL，并有一组PDA培养基加入等量的无菌水作为空白对照组，每组浓度设置三个重复，取出培养好的桃褐腐菌平板，无菌操作条件下，用打孔器打取菌块，每次打取菌块直径约为8mm，接种菌块贴到各个培养基平板的中心处(菌丝朝下)，共计3×9＝27个平板。待菌块贴好后(培养约24h)倒置平板，27℃恒温培养箱培养。用十字交叉法测定菌径大小，每隔24h记录一次生长情况，据此通过式1-1、式1-2计算抑制率。

菌落直径(mm)＝测量菌落直径平均值(mm)-8…………………(式1-1)

杀菌剂对桃褐腐菌抑制率(％)＝(空白对照组菌落直径-带药组菌落直径)/空白对照组菌落直径×100％…………………………………………………(式1-2)

根据查找机率值换算表将计算得到的抑制率换算成机率值，以浓度对数为横坐标，机率值为纵坐标，采用最小二乘法做回归直线，并作图法得到机率值5.0时的小檗碱浓度对数，据此计算出小檗碱对桃褐腐菌的EC₅₀。

穿心莲抑制桃褐腐菌EC50测定结果：独立回归方程y＝0.8485x+1.9803，相关系数R＝0.9555；EC₅₀＝42.679μL/mL。

实施例13

大田试验：参照农业部农药检定所生测室制定的农药田间药效试验准则进行。设计了三组，在10年生盛果期桃树试验。

分组：一组对照为未加有效成分(丙三醇、乙醇，加0.5％羧甲基纤维素钠定容)；另一组对照试验用65％代森锌可湿性粉剂500倍液在初花期(花开约20％时)喷一次，落花后10天左右加喷射一次，在第二次喷药后，间隔10～15天再喷1～2次，直至果实成熟前一个月左右再喷一次药。实验组：本发明实施例8制备的穿心莲水剂500倍液，喷药时间与对照组同时进行。

时间：2013年3月下旬开始。试验组和对照组均按常规田间管理进行。

结果：未加有效成分者防治区平均病果率为8.2％；本发明穿心莲水剂防治区平均病果率为3.1％；用65％代森锌可湿性粉剂500倍液喷雾组防治区平均病果率为3.0％。

Claims

1.一种防治果树褐腐病的穿心莲水剂，其特征在于，包括穿心莲、百部和忍冬藤的复方提取物、茶皂素、防冻剂和防腐剂。

2.根据权利要求1所述的防治果树褐腐病的穿心莲水剂，其特征在于，所述复方提取物的原料按重量计配比为：穿心莲80-120份、百部5-40份、忍冬藤份5-35份。

3.根据权利要求1或2所述的防治果树褐腐病的穿心莲水剂，其特征在于，所述复方提取物采用水提醇沉法提取。

4.根据权利要求1或2所述的防治果树褐腐病的穿心莲水剂，其特征在于，所述复方提取物为0.8-2.3g生药/mL的复方提取液。

5.一种权利要求1-4中所述防治果树褐腐病的穿心莲水剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中微波水提时的料与水之间的重量比为1∶3-6。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述防冻剂为丙二醇或丙三醇，所述防腐剂为乙醇。