CN108244149A - 中药提取物在制备抗黄萎病菌药物中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了中药提取物在制备抗黄萎病菌药物中的用途。本发明中药提取物应用于制备抑制黄萎病菌药物中。本发明黑龙江产五味子提取物应用于制备抑制和/或抗黄萎病菌药物中。本发明中药提取物能对黄萎病菌的菌丝生长有效抑制；其中黑龙江产五味子的氯仿:丙酮＝3:2段提取物不仅能有效抑制棉花黄萎病菌的菌丝生长，而且能诱导棉花产生对黄萎病菌的抗性作用，降低维管束褐化并缓解发病程度。

Description

中药提取物在制备抗黄萎病菌药物中的用途
技术领域
本发明涉及一种中药提取物在制备抗黄萎病菌药物中的用途，属于生物技术领域。
背景技术
由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)引起的棉花黄萎病是我国棉花生产上的重要病害，严重影响棉花的产量，成为棉花可持续生产的主要障碍之一。棉花黄萎病菌是一种土传性的维管束真菌病害，防治难度较大，迄今没有特效的防治药剂。选育和种植抗黄萎病棉花品种是目前各国抗棉花黄萎病的主要措施，但是该措施存在选育周期长以及抗性不稳定的缺点。市场上也存在抗棉花黄萎病的农药或混配杀菌剂，虽然可以在一定程度上有效防治棉花黄萎病，但是化学农药的大量使用会随着食物链进行累积，污染环境并危害人类健康。此外，化学农药的使用也会增强病菌的抗药性，并对田间其它有益微生物产生抑制作用。为缓解农药残留带来的环境污染，满足无公害农产品生产的需要，生物农药的研究与开发已成为我国病虫害防治研究的热点之一。
发明内容
本发明的目的是提供一种中药提取物在制备抗黄萎病菌药物中的用途，本发明中中药提取物能对黄萎病菌的菌丝生长有效的抑制；其中，黑龙江产五味子的氯仿:丙酮＝3:2段提取物不仅能有效抑制棉花黄萎病菌的菌丝生长，而且能有效防治棉花黄萎病。
本发明提供的中药提取物在制备抑制黄萎病菌药物中的用途；
所述中药提取物包括红花木莲、五味子、滇润楠、铁箍散、华盖木、黄苞大戟、高山大戟、中平树、栽秧花根、大果大戟、尾叶血桐和盾叶木的提取物中的至少一种。
本发明通过实验显示所述中药提取物对黄萎病菌强烈的抑制作用，对进一步开发绿色环保型的杀菌剂提供依据。
本发明还提供了一种杀菌剂，该杀菌剂的活性成分为所述中药提取物。
本发明中，所述中药提取物具体应用在制备抑制棉花黄萎病菌药物中；
所述中药提取物能有效抑制植株中黄萎病菌的菌丝生长。
上述的用途中，所述中药提取物具体包括红花木莲氯仿:丙酮＝40:1段、红花木莲氯仿段、辽宁产五味子氯仿:丙酮＝3:2段、辽宁产五味子氯仿:丙酮＝9:1后段、辽宁产五味子氯仿:丙酮＝1:1段、黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段、黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝10:1段、华中五味子氯仿:丙酮＝9:1段、华中五味子甲醇部位、滇藏五味子甲醇部位、日本南五味子乙酸乙酯部分、铁箍散乙酸乙酯部位、铁箍散氯仿段、铁箍散氯仿:丙酮＝1:1段、铁箍散丙酮段、华盖木石油醚部分、黄苞大戟乙酸乙酯部位、黄苞大戟正丁醇部位、高山大戟乙酸乙酯部位、中平树乙酸乙酯部位、栽秧花根乙酸乙酯部位、栽秧花根正丁醇部位、大果大戟正丁醇部位、栽秧花地上部分正丁醇、尾叶血桐乙酸乙酯部位和盾叶木正丁醇部位的提取物中的至少一种。
本发明中，所述中药提取物的提取方法如下：药材品名和对应植物部位均为《中华人民共和国药典》2015版所规定的药材；取样0.5～1.0公斤药材，按药材特性和比重，用1～2升的玻璃层析柱进行分离；洗脱溶剂体积为柱床体积的3倍，并将溶剂提取段按馏分顺序分为前段、中段和后段，各为1倍柱床体积；洗脱液经旋转蒸发器浓缩；
按照所述中药提取物的提取方法，具体中药提取物的洗脱溶剂及体积比如下：红花木莲氯仿:丙酮＝40:1段的提取物为红花木莲的药用部位采用氯仿:丙酮＝40:1；红花木莲氯仿段的提取物为红花木莲的药用部位采用氯仿柱；辽宁产五味子氯仿:丙酮＝3:2段的提取物为辽宁产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝3:2；辽宁产五味子氯仿:丙酮＝9:1后段的提取物为辽宁产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝9:1；辽宁产五味子氯仿:丙酮＝1:1段的提取物为辽宁产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝1:1；黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段的提取物为黑龙江产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝3:2；黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝10:1段的提取物为黑龙江产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝10:1；华中五味子氯仿:丙酮＝9:1段的提取物为华中五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝9:1；华中五味子甲醇部位的提取物为华中五味子的药用部位采用甲醇；滇藏五味子甲醇部位的提取物为滇藏五味子的药用部位采用甲醇；日本南五味子乙酸乙酯部分的提取物为日本南五味子的药用部位采用乙酸乙酯；铁箍散乙酸乙酯部位的提取物为铁箍散的药用部位采用乙酸乙酯；铁箍散氯仿段的提取物为铁箍散的药用部位采用氯仿；铁箍散氯仿:丙酮＝1:1段的提取物为铁箍散的药用部位采用氯仿:丙酮＝1:1；铁箍散丙酮段的提取物为铁箍散的药用部位采用丙酮；华盖木石油醚部分的提取物为华盖木石的药用部位采用油醚；黄苞大戟乙酸乙酯部位的提取物为黄苞大戟的药用部位采用乙酸乙酯；黄苞大戟正丁醇部位的提取物为黄苞大戟的药用部位采用正丁醇；高山大戟乙酸乙酯部位的提取物为高山大戟的药用部位采用乙酸乙酯；中平树乙酸乙酯部位的提取物为中平树的药用部位采用乙酸乙酯；栽秧花根乙酸乙酯部位的提取物为栽秧花根的药用部位采用乙酸乙酯；栽秧花根正丁醇部位的提取物为栽秧花根的药用部位采用正丁醇；大果大戟正丁醇部位的提取物为大果大戟的药用部位采用正丁醇；栽秧花地上部分正丁醇的提取物为栽秧花地上部分的药用部位采用正丁醇；尾叶血桐乙酸乙酯部位的提取物为尾叶血桐的药用部位采用乙酸乙酯；盾叶木正丁醇部位的提取物为盾叶木的药用部位采用正丁醇。
上述的用途中，所述中药提取物的浓度为1～20g/L。
上述的用途中，所述中药提取物在制备抑制棉花黄萎病菌药物中的用途。
上述的用途中，所述中药提取物在制备抑制大丽轮枝菌药物中的用途。
本发明还提供了黑龙江产五味子提取物在制备抑制和/或抗黄萎病菌药物中的用途。
本发明中，所述黑龙江产五味子提取物具体应用在制备抑制和/或抗棉花黄萎病菌药物中；
所述黑龙江产五味子提取物能有效抑制植株中黄萎病菌丝生长，又能诱导植株对黄萎病菌的抗性。
上述的用途中，所述黑龙江产五味子提取物为黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段的提取物。
上述的用途中，所述黑龙江产五味子提取物的浓度可为1～20g/L，具体可为1g/L、3g/L、10g/L、20g/L。
上述的用途中，所述黑龙江产五味子提取物在制备抑制和/或抗棉花黄萎病菌药物中的用途。
上述的用途中，所述黑龙江产五味子提取物在制备抑制和/或抗大丽轮枝菌药物中的用途。
本发明具有以下优点：
本发明中药提取物在质量浓度为10g/L时对黄萎病菌的菌丝生长抑制率达到50％以上；进一步将这些中药提取物处理棉花植株，统计病情指数和抗性诱导指数，黑龙江产五味子的氯仿:丙酮＝3:2段提取物不仅能有效抑制棉花黄萎病菌的菌丝生长，而且能诱导棉花产生对黄萎病菌的抗性作用，降低维管束褐化并缓解发病程度。
附图说明
图1为本发明在不同提取物不同浓度下，PDA培养基上黄萎病菌的菌丝生长均受到不同程度的影响；其中，图1中CK为实验对照(在PDA培养基中以甲醇水溶液或丙酮为对照处理)，4为红花木莲氯仿段提取物的影响，46为黄苞大戟正丁醇部位提取物的；24为华中五味子氯仿:丙酮＝9:1段提取物的影响，7为辽宁产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物的影响，37为铁箍散乙酸乙酯部位的影响，49为中平树乙酸乙酯部位的影响，51为栽秧花根乙酸乙酯部位的影响，54为栽秧花地上部分正丁醇的影响；48为高山大戟正丁醇部分提取物的影响。
图2为黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物对大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病的抑制作用，其中图2(A)为提取物处理的植株茎秆中，由病原菌引起的棉花维管束褐变程度得到有效缓解；2(B)为在整体植株的作用上，提取物处理可以明显缓解黄萎病引起的落叶症状。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中，供试中药提取物来源：供试中药来自于云南省药材公司；药材品名和对应植物部位均为《中华人民共和国药典》2015版所规定的药材；取样0.5～1.0公斤药材，按药材特性和比重，用1～2升的玻璃层析柱进行分离；洗脱溶剂体积为柱床体积的3倍，并将溶剂提取段按馏分顺序分为前段、中段和后段，各为1倍柱床体积；洗脱液经旋转蒸发器浓缩待用；
按照所述中药提取物的提取方法，具体中药提取物的洗脱溶剂及体积比如下：红花木莲氯仿:丙酮＝40:1段的提取物为红花木莲的药用部位采用氯仿:丙酮＝40:1；红花木莲氯仿段的提取物为红花木莲的药用部位采用氯仿柱；辽宁产五味子氯仿:丙酮＝3:2段的提取物为辽宁产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝3:2；辽宁产五味子氯仿:丙酮＝9:1后段的提取物为辽宁产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝9:1；辽宁产五味子氯仿:丙酮＝1:1段的提取物为辽宁产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝1:1；黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段的提取物为黑龙江产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝3:2；黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝10:1段的提取物为黑龙江产五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝10:1；华中五味子氯仿:丙酮＝9:1段的提取物为华中五味子的药用部位采用氯仿:丙酮＝9:1；华中五味子甲醇部位的提取物为华中五味子的药用部位采用甲醇；滇藏五味子甲醇部位的提取物为滇藏五味子的药用部位采用甲醇；日本南五味子乙酸乙酯部分的提取物为日本南五味子的药用部位采用乙酸乙酯；铁箍散乙酸乙酯部位的提取物为铁箍散的药用部位采用乙酸乙酯；铁箍散氯仿段的提取物为铁箍散的药用部位采用氯仿；铁箍散氯仿:丙酮＝1:1段的提取物为铁箍散的药用部位采用氯仿:丙酮＝1:1；铁箍散丙酮段的提取物为铁箍散的药用部位采用丙酮；华盖木石油醚部分的提取物为华盖木石的药用部位采用油醚；黄苞大戟乙酸乙酯部位的提取物为黄苞大戟的药用部位采用乙酸乙酯；黄苞大戟正丁醇部位的提取物为黄苞大戟的药用部位采用正丁醇；高山大戟乙酸乙酯部位的提取物为高山大戟的药用部位采用乙酸乙酯；中平树乙酸乙酯部位的提取物为中平树的药用部位采用乙酸乙酯；栽秧花根乙酸乙酯部位的提取物为栽秧花根的药用部位采用乙酸乙酯；栽秧花根正丁醇部位的提取物为栽秧花根的药用部位采用正丁醇；大果大戟正丁醇部位的提取物为大果大戟的药用部位采用正丁醇；栽秧花地上部分正丁醇的提取物为栽秧花地上部分的药用部位采用正丁醇；尾叶血桐乙酸乙酯部位的提取物为尾叶血桐的药用部位采用乙酸乙酯；盾叶木正丁醇部位的提取物为盾叶木的药用部位采用正丁醇。
棉花黄萎病病原菌：新疆农垦科学院分子农业技术育种中心鉴定的132T菌株；
供试棉花品种：TM-1。
实施例1、
一、实验方法如下：
1、中药提取物抑菌活性测定：
采用生长速率法测定中药提取物对菌丝的生长抑制作用。将56种中药提取物用甲醇的水溶液溶解或悬浮成悬浊液，按比例加至PDA平板，使其终浓度分别为1g/L、10g/L和20g/L三个梯度的质量浓度。以添加水或等量百分比的甲醇水溶液的PDA培养基平板为对照。
孢子悬浮液制备：将液态培养的棉花黄萎病菌过滤并离心收集孢子，制成浓度为1×107个/ml的孢子悬浮液。吸取5μl孢子溶液接种于PDA培养基中央，于28℃暗培养7天。每个处理重复2次。采用十字交叉法测定菌落直径，并计算抑菌率。抑菌率计算公式：菌丝生长抑制率(％)＝[(对照菌落生长直径-处理菌落生长直径)/对照菌落生长直径]×100。
2、中药提取物对棉花黄萎病抗性诱导作用的测定：
利用棉花水培苗蘸根接菌和叶面喷药的处理方法，计算病情指数并分析黄萎病防治效果。
中药提取物用DMSO溶解，再用0.1％的吐温-80溶液稀释到3g/L质量浓度。选取二叶一心期营养液培养棉苗12株，将3g/L的中药提取物溶液喷雾到棉苗叶片表面，至叶面全部喷湿。叶面喷施5mM水杨酸作为阳性对照，喷施含DMSO的0.1％土温-80作为阴性对照。中药提取物喷施后第三天进行棉苗蘸根接菌，孢子悬浮液浓度为5×106个/ml。接菌2周后进行病情指数统计及防治效果分析。上述试验独立重复3次。发病程度划分为六级：1级(级值为0):植株健康，叶片无发病症状；2级(级值为1):子叶发病或脱落；3级(级值为2)：1片真叶发病或脱落；4级(级值为3)：2片真叶发病或脱落；5级(级值为4):3片真叶发病或脱落；6级(级值为5):4片以上真叶发病或脱落以及整株萎蔫或顶心枯死。计算公式分别为：
病情指数＝∑(各级植株数×对应级值)/(植株总数×最高级值)；
防治效果＝[(负对照病情指数-处理病情指数)/负对照病情指数]×100％。
二、实验结果如下：
1、中药提取物对大丽轮枝菌的抑制活性筛选
采用生长速率法，对56种提取物在质量浓度分别为1、10和20g/L下进行抑菌作用测定。如表1所示，在1g/L浓度下抑菌率达到50％的中药提取物有3种，分别为红花木莲氯仿段(50％，4号)，华盖木石油醚部分(57.1％，42号)和黄苞大戟正丁醇部位(53.6％，46号)。在10g/L浓度下抑菌率达到50％以上的有26种(编号分别为3、4、7、9、11、13、16、24、26、27、34、37、38、39、40、42、45、46、47、49、51、52、53、54、55和56)，其中5种提取物的抑菌率达到了100％，分别为24、45、46、47和56号。在20g/L浓度下抑菌率达到100％的提取物有18种(编号为7,11,13,22,24,26,34,37,45,46,47,49,51,52,53,54,55和56)，主要集中于五味子、铁箍散、华盖木、黄苞大戟、中平树、大果大戟、尾叶血桐、栽秧花和盾叶木等植物提取物中。其中以五味子最为突出，铁箍散和黄苞大戟次之。
表1 56种提取物对黄萎病菌丝的生长抑制作用
2、中药提取物对大丽轮枝菌菌丝生长的抑制作用
在抑菌率测定时发现，在不同提取物不同浓度下,PDA培养基上黄萎病菌的菌丝生长均受到不同程度的影响(如图1所示)，可归纳为以下5种类型：(1)在1g/L浓度下已经能够明显抑制菌生长，但随着浓度的提高抑菌活性变化并不大，如红花木莲氯仿段提取物(4号)；(2)在1g/L浓度下抑制菌作用明显，但在10g/L浓度下抑菌率达到100％，如黄苞大戟正丁醇部位提取物(46号)；(3)在1g/L浓度下抑制菌作用较弱，但在10g/L浓度下抑菌率达到100％，如华中五味子氯仿:丙酮＝9:1段提取物(24号)；(4)浓度增加到20g/L时表现出良好的抑菌效果，如辽宁产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物(7号)、铁箍散乙酸乙酯部位(37号)、中平树乙酸乙酯部位(49号)、栽秧花根乙酸乙酯部位(51号)和栽秧花地上部分正丁醇(54号)等提取物；(5)在所有浓度下对黄萎病菌菌丝的生长抑制作用都没有明显效果,菌丝生长正常，如高山大戟正丁醇部分提取物(48号)。
3、中药提取物对大丽轮枝菌引起的棉花黄萎病的抗性诱导作用鉴定
从上述2中分类的5种类型中，随机选取了13种中药提取物对其防治效果做了进一步鉴定。用3g/L中药提取物处理棉花植株，统计棉花黄萎病病情指数。由于不同批次实验条件的差异，病情指数不能直接用于比较，因此以每一批次的阴性对照病情指数为基准计算防治效果进行比较评价。在实验中发现部分中药提取物对棉花本身存在一定的毒害作用，处理后植株表现出非病态的伤害表型，因此对其结果不做统计。如表2所示，在3g/L的中药提取物浓度下,植株对棉花黄萎病的防治效果存在较大差异。其中拟单性木兰生物碱段(2号)、红花木莲氯仿:丙酮＝40:1段(3号)、辽宁产五味子氯仿:丙酮＝7:3段(12号)和黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段(13号)提取物效果最好，其防治效果较好且重复性良好，表明这些提取物对棉花黄萎病有明显的防治效果。而其它提取物的防治效果较差(有的甚至为负值)或重复性差，说明这些提取物虽然抑菌活性强，但对黄萎病的防治效果并不明显。鉴于黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物的抑菌率在10g/L和20g/L浓度下分别为71.4％和100％，明显高于黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝10:1段和红花木莲氯仿:丙酮＝40:1段提取物(如表1所示)，上述结果表明黑龙江产五味子的氯仿:丙酮＝3:2段提取物不仅能有效地抑制棉花黄萎病菌的菌丝生长，而且能提高棉花黄萎病的防治效果。
表2中药提取物对黄萎病的防治效果测定
注：表2中ND表示未检测。
4、黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物对棉花黄萎病的抑制作用
为了进一步揭示黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物诱导黄萎病抗性机制，采用质量浓度为3g/L的提取物处理二叶一心期棉花幼苗，并在接菌后2周进行棉花茎秆切片观察。如图2所示，在对照植株中，黄萎病菌侵染导致明显的维管束褐化。而在提取物处理的植株茎秆中，由病原菌引起的棉花维管束褐变程度得到有效缓解(图2A)。在整体植株的作用上,提取物处理可以明显缓解黄萎病引起的落叶症状(图2B)。以上结果表明，黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物可能通过抑制病菌侵染维管束来提高棉花对于黄萎病菌的抗性作用。
三、实验讨论
由上述实验结果可知：
1、中药提取物对棉花黄萎病菌的菌丝生长有强烈的抑制作用
(1)本发明中26种中药提取物对棉花黄萎病有不同程度的抑制效果，其中五味子氯仿:丙酮的不同比例提取段对棉花黄萎病菌也具有良好的抑菌效果，在质量浓度为10g/L时抑菌率即可达到50％以上，其中黑龙江产五味子(又称北五味子)效果最好。
(2)铁箍散的乙酸乙酯部位和氯仿:丙酮＝1:1段的两种不同提取物对黄萎病菌的菌丝生长有较明显的抑制作用；在质量浓度为10g/L时，即可表现出较好的抑菌活性，抑菌率分别为78.6％和82.1％。
(3)黄苞大戟的乙酸乙酯和正丁醇部位的中药提取物对黄萎病菌的菌丝生长有明显的抑制作用；在10g/L的质量浓度下，其抑菌率即可达到100％；这为黄苞大戟作为植物源提取物的抗病机理的研究提供了实验依据。
2、同一种中药提取物中可能存在多种对棉花黄萎病菌有抑制作用的活性成分
本发明中，在中药提取物质量浓度为10g/L时，辽宁产五味子氯仿:丙酮＝3:2段、辽宁产五味子氯仿:丙酮＝1:1段和辽宁产五味子氯仿:丙酮＝9:1后段对黄萎病菌的菌丝生长抑制率分别为82.1％、78.1％和64.3％。黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段和黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝10:1段的菌丝生长抑制率分别为71.4％和57.1％。表明在同一植物中存在多种对黄萎病菌有活性抑制的成分，而且不同产地的同一种中药也会影响抑菌效果。
3、黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物对棉花黄萎病有较好的防治效果
实验中有26种中药提取物对棉花黄萎病菌的菌丝生长表现出良好的抑制作用，但是在进行病情指数和防治效果测定中发现，中药提取物对黄萎病菌的菌丝生长抑制作用与防治效果并不一致。辽宁产五味子氯仿:丙酮＝3:2段在10g/L质量浓度下菌丝生长抑制率为82.1％，而防治效果为-109％，说明该提取物虽然可以有效抑制黄萎病菌的菌丝生长，但是在黄萎病防治效果方面较菌丝抑制效果要差。而黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段在10g/L质量浓度下菌丝生长抑制率为71.4％，平均抗性防治效果为68.5％。表明该提取物不仅可以有效抑制黄萎病菌的菌丝生长，而且对黄萎病菌有较好的防治效果。造成这种防治效果不同的原因或许是由于不同产地的五味子药效成分的差异，如南北五味子其实不是同一种植物。
黄萎病菌侵染植物根部后，在适宜的环境下开始侵染维管束，随着病原菌的不断积累和扩展，感病植株开始出现一系列发病症状，包括萎蔫、褪绿、黄化、组织坏死、生长迟缓和维管束褐化。黄萎病菌侵染植株后，依据植株是否产生病叶症状和维管束是否变色来判断抗感病。通常认为维管束变色说明病原菌已经侵入植株，产生落叶症状的植株维管束褐化程度更高。通过茎切片观察发现，本发明质量浓度为3g/L的黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段能有效抑制黄萎病菌引起的维管束褐化，并且落叶症状得到明显抑制。说明本发明黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段提取物能诱导植株产生抗黄萎病效果。即本发明黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段中药提取物，不仅能有效抑制黄萎病菌的菌丝生长，而且能诱导植物对于黄萎病菌的抗性作用。

Claims (10)

1.中药提取物在制备抑制黄萎病菌药物中的用途；
所述中药提取物包括红花木莲、五味子、滇润楠、铁箍散、华盖木、黄苞大戟、高山大戟、中平树、栽秧花根、大果大戟、尾叶血桐和盾叶木的提取物中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述中药提取物包括红花木莲氯仿:丙酮＝40:1段、红花木莲氯仿段、辽宁产五味子氯仿:丙酮＝3:2段、辽宁产五味子氯仿:丙酮＝9:1后段、辽宁产五味子氯仿:丙酮＝1:1段、黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段、黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝10:1段、华中五味子氯仿:丙酮＝9:1段、华中五味子甲醇部位、滇藏五味子甲醇部位、日本南五味子乙酸乙酯部分、铁箍散乙酸乙酯部位、铁箍散氯仿段、铁箍散氯仿:丙酮＝1:1段、铁箍散丙酮段、华盖木石油醚部分、黄苞大戟乙酸乙酯部位、黄苞大戟正丁醇部位、高山大戟乙酸乙酯部位、中平树乙酸乙酯部位、栽秧花根乙酸乙酯部位、栽秧花根正丁醇部位、大果大戟正丁醇部位、栽秧花地上部分正丁醇、尾叶血桐乙酸乙酯部位和盾叶木正丁醇部位的提取物中的至少一种。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述中药提取物的浓度为1～20g/L。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其特征在于：所述中药提取物在制备抑制棉花黄萎病菌药物中的用途。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的用途，其特征在于：所述中药提取物在制备抑制大丽轮枝菌药物中的用途。
6.黑龙江产五味子提取物在制备抑制和/或抗黄萎病菌药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述黑龙江产五味子提取物为黑龙江产五味子氯仿:丙酮＝3:2段的提取物。
8.根据权利要求6或7所述的用途，其特征在于：所述黑龙江产五味子提取物的浓度为1～20g/L。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的用途，其特征在于：所述黑龙江产五味子提取物在制备抑制和/或抗棉花黄萎病菌药物中的用途。
10.根据权利要求6-9中任一项所述的用途，其特征在于：所述黑龙江产五味子提取物在制备抑制和/或抗大丽轮枝菌药物中的用途。
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姜岚 等: "56种中药提取物对棉花黄萎病的防治效果研究", 《生物技术通报》 *

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