CN104897557A - 流式细胞检测液路系统及流式细胞检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及人体血液检测技术领域.流式细胞检测液路系统包括稀释液加注系统由电机驱动稀释液注射器,连接稀释液桶吸取稀释液注入到流动室、反应池和采样针清洗装置；溶血素和血样加注系统由电机驱动溶血剂注射器，吸取溶血剂注入到反应池，样本注射器采集分配血样注入到反应池；压力系统由隔膜泵连接压力室建立正负压，抽排采样针清洗装置废液，将反应池内样本吸到流动室样本注入口，对反应池吹气搅拌和排空，抽取稀释液至反应池。本发明减少了反应池数量，简化了系统结构和复杂度，方便机器实现小型化和低成本化。

Description

流式细胞检测液路系统及流式细胞检测方法

技术领域

本发明涉及人体血液检测技术领域，特别是一种流式细胞检测液路系统及流式细胞检测方法。

背景技术

目前市场上的五分类血液分析仪的液路系统主要是由阻抗通道模块和DIFF通道模块组成，其中阻抗通道模块包括WBC/HGB计数池和RBC/PLT计数池及其附属管路系统，DIFF通道模块包括DIFF孵育反应池和流动室组件及其附属管路系统，另外还有采血分血模块，废液排放清洗模块，正负压建压模块。这些模块都相对独立，需要与之对应的注射器及其电机，阀、泵或是气源和稳压装置，液路器部件数量比较多，系统比较复杂，故障风险比较大，成本比较高，不能满足基层用户的需求。专利申请号CN201410173070.7)是鞘流注射器与稀释液注射器功能合并为一个稀释液注射器，样本流注射器与采样注射器功能合并为一个样本注射器，正压建压系统以及废液排放系统合并，稀释液注射器、样本注射器、溶血剂注射器共用一个电机，正压建压系统、废液排放系统用同一个电机驱动，将所有注射器共用一个电机驱动，影响时序控制的灵活性，影响整机测试速度，注射器干路中无压力感应单元，如管路中有堵塞易导致高压崩管，计数池阻抗计数没有后池清洗部分，极易影响下个测量的结果，流动室出口直接和负压罐连接，如果阻抗计数和鞘流同时进行易影响阻抗计数负压的稳定性，导致计数结果不准，只能串行执行，影响测速。采样针外壁清洗排废液阀与负压室排空共用一个三通电磁阀，负压室保压计数时不能切换该阀洗针外壁，会引起压力波动，且清洗针外壁通道和反应池排空管道都没有过滤装置，加大了该共用阀的堵阀概率。

发明内容

本发明的目的是提供一种低成本、高效率实现血液细胞五分类和计数的紧凑型流式细胞检测液路系统及流式细胞检测方法。

本发明的目的是通过如下途径实现的：

流式细胞检测液路系统,包括稀释液加注系统、溶血素和血样加注系统和压力系统；

所述稀释液加注系统是由电机6驱动稀释液注射器7串接液体压力传感器8后,经管路和电磁阀连接稀释液桶3吸取稀释液，分别注入到流动室44、反应池32和经样本注射器24注入至采样针清洗装置20和采样针21；

所述溶血素和血样加注系统是由电机26驱动第一溶血剂注射器23、第二溶血剂注射器25、样本注射器24，所述第一溶血剂注射器23和第二溶血剂注射器25经管路和电磁阀分别连接第一溶血剂瓶2和第二溶血剂瓶1，吸取溶血剂注入到反应池32，所述样本注射器24经管路和电磁阀连接采样针21采集分配血样注入到反应池32；

所述压力系统是由隔膜泵41经管路和电磁阀连接压力室38建立正负压，所述隔膜泵41经管路和电磁阀及拭子过滤器22连接采样针清洗装置20抽排废液，所述压力室38经管路和电磁阀及夹管阀31连接反应池32，将样本吸到流动室44样本注入口，所述压力室38经管路、电磁阀和隔离室33连接反应池32，所述压力室38经管路和电磁阀连接反应池32后池后连接稀释液桶3。

更进一步是：所述压力室38上装有气体压力传感器36。

更进一步是：所述反应池32内分前池和后池，在前后池间装有宝石孔做阻抗计数用，在所述反应池32外套装有HGB测试灯组件及恒温装置。

更进一步是：所述第一溶血剂注射器23和第二溶血剂注射器25对称分布在样本注射器两边。

更进一步是：所述隔离室33内装有过滤装置。

流式细胞检测方法是采用如下步骤：

笫一步样本采集，用样本注射器连通采样针吸取血样，注入到反应池；

笫二步样本孵育反应，用第一溶血剂注射器向反应池加入第一种溶血剂，然后用连接压力室的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡，混匀血样和第一种溶血剂，混匀后孵育。

笫三步样本准备，样本孵育后，用压力室负压从反应池内将样本经夹管阀吸入到流动室样本注入口的备样管路里；

笫四步HGB测量，备样完后，用第二溶血剂注射器向反应池内加入第二种溶血剂，然后用连接压力室的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡，混匀血样和第二溶血剂，然后用比色法测量HGB值；

笫五步稀释血样，清洗反应池，用隔膜泵经隔离室和两通电磁阀排空反应池，然后稀释液注射器向反应池内加液冲洗两次，之后用稀释液注射器向反应池加稀释液，样本注射器分血进入反应池，然后用连接压力室的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡，混匀稀释液和血样；

笫六步细胞检测，用稀释液注射器向流动室鞘液注入口推注稀释液，形成鞘液，用样本注射器向流动室样本注入口推注备样管路里样本形成样本流，两注射器同时推注，让流动室内憋压稳定后打开流动室出口阀，然后鞘流包裹样本流进入流动室光学检测部分进行白细胞五分类测量，根据检测到的白细胞的数量与检测样本的稀释比与体积换算出血样中白细胞的浓度，同时打开压力室和反应池后池相连的两通电磁阀，用负压将反应池前池的样本混合液通过宝石孔吸入后池进行阻抗法计数RBC和PLT细胞数量，然后与检测血样稀释比和体积换算出血样中RBC和PLT细胞浓度；

笫七步系统清洗，细胞检测都结束后，用稀释液注射器向流动室和反应池内加稀释液冲洗，用隔膜泵通过压力室排空前池废液，建负压通过后池到稀释液桶吸液清洗后池，清洗后所有部件恢复到测量准备状态。

更进一步是：实现鞘流是用压力室负压给备样管路的备样与稀释液注射器推鞘流，样本注射器推样本流结合。

本发明的积极效果：本发明流式细胞检测液路系统及流式细胞检测方法由于鞘流形成和给反应池加稀释液都由稀释液注射器完成，样本采集和鞘流技术中的样本流形成由样本注射器完成，这样减少了注射器的数量降低了成本。由于多种溶血剂注射器和样本注射器用同一个电机驱动控制，减少了驱动装置，因而整个系统结构更加简单，方便机器实现小型化和低成本化。由于稀释液注射器相对其他注射器的推液次数多，其单独驱动，使时序控制更加灵活，有利于提高系统检测速度。设置液体压力传感器对所有推液进行压力监测，起到过压保护的作用，提示通道堵塞，便于故障处理和维护。在采样针清洗装置排液端加装了拭子过滤器和在反应池下端加装了带滤芯的隔离室，能有效过滤外来杂质大颗粒，防止堵塞后端排空管路，尤其预防了隔膜泵建正压而串接的三通电磁阀堵塞而导致废液排不走，压力易泄漏的问题。由于白细胞分类样本孵育和HGB测量，RBC/PLT细胞计数都使用同一个反应池，减少了反应池数量，简化了系统结构和复杂度，方便机器实现小型化和低成本化。

附图说明

图1为本发明中的过压保护控制流程示意图

图2为本发明结构示意图

图中:1.第一溶血剂瓶,2.第二溶血剂瓶,3.稀释液桶,4.三通接头,5.第一两通电磁阀,6.电机7.稀释液注射器,8.液体压力传感器,9.三通接头,10.第一三通电磁阀,11.第二三通电磁阀,12.第二两通电磁阀,13.第三两通电磁阀,14.第四两通电磁阀,15.排出口,16.鞘流注入口,17.样本注入口,18.第五两通电磁阀,19.第三三通电磁阀,20.采样针清洗装置,21.采样针,22.拭子过滤器,23.第一溶血剂注射器,24.样本注射器,25.第二溶血剂注射器,26.电机,27.第四三通电磁阀,28.第五三通电磁阀,29.第六三通电磁阀,30.三通接头,31.夹管阀,32.反应池,33.隔离室,34.第六两通电磁阀,35.第七两通电磁阀,36.气体压力传感器,37.第八两通电磁阀,38.压力室,39.第九两通电磁阀,40.三通接头,41.隔膜泵,42.第七三通电磁阀,43.三通接头,44.流动室.

具体实施方式

下面结合说明书附图对本发明作详细说明:

本发明流式细胞检测液路系统包括稀释液加注系统、溶血素和血样加注系统和压力系统。

稀释液加注系统包括稀释液桶、稀释液注射器、电机、液体压力传感器、流动室，反应池,包含前池和后池两部分，前后池间装有宝石孔做阻抗计数用，外套HGB测试灯组件及恒温装置。流动室上设置有用于样本流推入的样本注入口，有用于推鞘流的鞘流注入口，有用于鞘流样本混合液的排出口。稀释液注射器与稀释液桶相连通，使得稀释液注射器可从稀释液桶中吸取稀释液；稀释液注射器与流动室鞘流注入口相连通，使得稀释液注射器可注入稀释液到流动室形成鞘流；稀释液注射器与反应池相连通，使得稀释液注射器可注入稀释液到反应池；稀释液注射器与样本注射器相连通，并经过样本注射器还分别与采样针和采样清洗装置相连通，使得稀释液注射器可注入稀释液清洗采样针内外壁。稀释液注射器出口与液体压力传感器相连通，使得稀释液注射器每一个向外推送液体动作产生的压力都能被监控，以防压力过高导致系统崩管。

溶血剂和血样加注系统包括：第一、二溶血剂瓶、第一、二溶血剂注射器、样本注射器、电机、采样针、采样针清洗装置。两个溶血剂注射器分别与两个溶血剂瓶相连通并另一方向都与反应池相连通，使得溶血剂注射器可分别吸取两种溶血剂分别加入到反应池；样本注射器与流动室样本注入口相连通，使得样本注射器可将样本注入流动室形成样本流被鞘流包裹去检测；样本注射器与采样针相连通，使得样本注射器可通过采样针采集分配血样；溶血剂和血样加注系统中两个溶血剂注射器和样本注射器共用一个电机驱动控制，两个溶血剂注射器对称分布在样本注射器两边，使得三个注射器产生的阻力力矩保持平衡；

压力系统包括：隔离室、压力室、隔膜泵、气体压力传感器、拭子过滤器。压力室与流动室样本注入口、反应池相连通，使得压力室建负压后能将反应池中的样本吸到样本注入口附近；压力室与隔离室相连通，隔离室与反应池相连通，使得压力室排空时能排空反应池，压力室有正压时能通过隔离室向反应池打气泡；隔离室内装过滤装置，使得反应池排空后的废液中的大颗粒被所述隔离室内装过滤装置阻挡以防堵塞后端管路系统，同时也能阻挡压力室正压向反应池打气泡时携带的后端污染物进入反应池；压力室与反应池后池相连通，反应池后池进而与稀释液桶相连通，使得压力室建负压时能经过反应池后池从稀释液桶中吸取稀释液达到冲洗反应池后池的作用；压力室与压力传感器相连通，使得压力室建立压力时只能达到目标值而不超压引起系统崩管；隔膜泵与采样针清洗装置相连通并在相连通的管路中串接一个拭子过滤器，使得隔膜泵能够抽排清洗采样针后的废液和风干采样针外壁同时废液中大颗粒杂质被拭子过滤器过滤了不会堵住后端管路系统；隔膜泵两头都与压力室相连通，使得隔膜泵能够给压力室建负压和正压；

流式细胞检测液路系统还包括第一、二、三、四、五、六、七三通电磁阀，第一、二、三、四、五、六、七、八、九两通电磁阀和一个夹管阀，管路连接接头。第一三通电磁阀公共端与液体压力传感器相连接进而与稀释液注射器相连，其常开端与稀释液桶相连，其常闭端与第二三通电磁阀公共端连接；第二三通电磁阀常开端与第二两通电磁阀连接，其常闭端与流动室鞘流注入口连接。第三三通电磁阀公共端与第五三通电磁阀常开端相连进而与样本注射器连通，其常开端与采样针清洗装置连接，其常闭端与采样针相连。第四三通电磁阀公共端与第一溶血剂注射器相连，其常开端与第一溶血剂瓶相连，其常闭端与反应池相连。第五三通电磁阀公共端与样本注射器相连，其常开端与第三三通电磁阀公共端相连，其常闭端与样本流注入口和反应池相连。第六三通电磁阀公共端与第二溶血剂注射器相连，其常开端与第二溶血剂瓶相连，其常闭端与反应池相连。第七三通电磁阀公共端与隔膜泵出口端相连，其常开端与废液出口相通，其常闭端与压力室相连。第一两通电磁阀设置在稀释液桶与反应池后池中间。第二两通电磁阀设置在第二三通电磁阀常开端与反应池中间。第三两通电磁阀设置在压力室和样本流注入口之间。第四两通电磁阀设置在流动室出口与废液出口之间。第五两通电磁阀设置在稀释液注射器与样本注射器之间。第六两通电磁阀设置在隔离室与压力室之间。第七两通电磁阀设置在反应池后池与压力室之间。第八两通电磁阀设置在采样针清洗装置与隔膜泵之间。第九两通电磁阀设置在压力室和隔膜泵之间。第一三通接头连接稀释液桶、第一两通电磁阀与第一三通电磁阀；第二三通接头连接液体压力传感器、第一三通电磁阀和第五两通电磁阀；第三三通接头连接第五三通电磁阀、样本注入口和反应池；第三三通接头连接第七三通电磁阀、第四三通电磁阀和废液出口；

本发明流式细胞检测方法采用如下步骤:

笫一步样本采集：用样本注射器连通采样针吸取血样，注入到反应池；通过样本注射器连通采样针吸取血样，然后稀释液注射器将稀释液通过样本注射器注入到采样针清洗装置，在采样针上升的过程中清洗采样针外壁，废液被隔膜泵通过连接到采样针清洗装置上的管路排走。

笫二步样本孵育反应：用第一溶血剂注射器向反应池加入第一种溶血剂，然后用连接压力室的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡，混匀血样和第一种溶血剂，混匀后孵育，具体时间是根据鞘流筒容积和注射器电机的速度来定的，容积和速度大小在一定范围内都是允许的。将样本针移到反应池中同时隔膜泵向压力室建正压，溶血剂注射器向反应池加第一种溶血剂，然后样本注射器向反应池内分血，之后采样针上升清洗外壁。接着反应池下端与压力室相连接的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡混匀血样和溶血剂。

笫三步样本准备：样本孵育后，用压力室负压从反应池内将样本经夹管阀吸入到流动室样本注入口的备样管路里；混匀后孵育，在孵育的时候压力室建负压。孵育结束后打开与压力室和样本注入口相连的两通电磁阀使用负压从反应池内将样本吸入夹管阀到样本注入口,超过注入口一定距离的备样管路里。

笫四步HGB测量：备样完后第二溶血剂注射器向反应池内加入第二种溶血剂，同时压力室建正压，之后反应池下端与压力室相连接的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡混匀血样和第二溶血剂，然后利用比色法测量HGB值。

笫五步稀释血样,清洗反应池,打开隔膜泵与隔离室下的两通电磁阀排空反应池，然后稀释液注射器向反应池内加液冲洗，如此重复一次。之后稀释液注射器向反应池加底液后采样针下到反应池，样本注射器分血进入反应池，同时压力室建正压。分血完成后反应池下端与压力室相连接的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡混匀血样和稀释液，同时采样针上升稀释液注射器打液清洗采样针外壁，针尖到达采样针清洗装置内之后再清洗采样针内壁，洗针内外壁过程中用隔膜泵将废液抽走。洗针之后给压力室建负压到指定值。

笫六步细胞检测：将稀释液注射器和样本注射器下拉指定量程，然后稀释液注射器向鞘流注入口推鞘液，样本注射器向样本注入口推样本流，两注射器同时推一定时间让流动室内憋压稳定后打开流动室出口阀，然后鞘流包裹样本流进入流动室光学检测部分进行白细胞五分类测量分析，然后根据检测到的白细胞的数量与检测样本的稀释比与体积做个计算就可以换算出患者血样中白细胞的浓度。在形成鞘流进行测试的同时，反应池那边打开压力室和反应池后池相连的两通电磁阀用负压将反应池前池的样本混合液通过宝石孔吸入后池进行阻抗法计数RBC和PLT细胞数量，然后与检测血样稀释比和体积换算出患者血样中RBC和PLT细胞浓度。

笫七步系统清洗：细胞检测都结束后稀释液注射器向流动室及其附属管路和反应池内加液冲洗，隔膜泵通过压力室排空前池废液，最后建负压通过后池到稀释液桶管道吸液清洗后池，清洗后所有部件恢复到测量准备状态。本发明的流式细胞检测方法,在稀释液注射器的近出口端串接一个液体压力传感器，对稀释液注射器的所有推液动作产生的压力进行监控并进行压力保护,控制单元将检测到的压力值与预设的压力值上线进行比较，发现超标就由控制单元发出命令立即停止所有器部件的动作然后打开流动室出口的阀泄掉流动室内的压力，其他阀在停止工作后的默认状态下都能使与注射器连接的管路与大气相通不会有憋压现象。这种压力监控方式能有效的判断流动室检测微孔、采样针及各通道管路系统是否堵塞并能明确提示堵塞点，不仅能有效保护液路系统也便于故障判断和维护，原理如图1所示。将样本流注入口处通过两通电磁阀与压力室连接起来，使得可以采用负压的方式进行样本流备样，不同于别的技术方案用稀释液注射器备样的方式，减少了对稀释液注射器的占用提高了测试速度。同时这种与压力室连接的方式可以在流动室检测微孔或是样本针堵塞的时候可以利用负压反吸流动室和样本针，即在负压作用下液流将与鞘流和样本流的相反方向流到压力室中去。

实施例,如图2所示,为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明作进一步详细说明。本发明中将流式细胞检测液路系统的器件合理利用，并将功能合理分配，设计了一种简单可靠、测试速度快的流式细胞检测液路系统。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不限定本发明。

本发明流式细胞检测液路系统，如图2所示，包括稀释液加注系统、溶血素和血样加注系统和压力系统。

稀释液加注系统包括稀释液桶3、稀释液注射器7、电机6、液体压力传感器8、流动室44，反应池32内用宝石孔做阻抗计数，其外套装HGB测试灯组件及恒温装置，三通接头4，三通接头9。流动室44上设置有用于样本流推入的样本注入口17，有用于推鞘流的鞘流注入口16，有用于鞘流样本混合液的排出口15。稀释液注射器7被电机6驱动，其出口串接液体压力传感器8，稀释液注射器(7)出口装有液体压力传感器(8)能监测稀释液注射器所有推液动作的压力，然后串接三通接头9，再连接第一三通电磁阀10的公共端，通过第一三通电磁阀10的常开端与三通接头4连接进而与稀释液桶3相连通，使得稀释液注射器7可从稀释液桶3中吸取稀释液；第一三通电磁阀10的常闭端与第二三通电磁阀11公共端连接，第二三通电磁阀11的常闭端与流动室鞘流注入口16连通，使得稀释液注射器7可注入稀释液到流动室44形成鞘流；流动室44的排出口15与第四两通电磁阀14连接，第四两通电磁阀14通过三通接头43与废液口相通，使得流动室44排出口15排出的废液能排入废液桶；第二三通电磁阀11常开端与第二两通电磁阀12连接，第二两通电磁阀12与反应池32加液口连通，使得稀释液注射器7可注入稀释液到反应池32；三通接头9连接到第五两通电磁阀18连接，第五两通电磁阀18与样本注射器24连通，样本注射器24出口与第五三通电磁阀28公共端连接，第五三通电磁阀28常开端与第三三通电磁阀19公共端连接，第三三通电磁阀19常开端与采样针清洗装置20的进液口连通，第三三通电磁阀19常闭端与采样针21连接，这样使得稀释液注射器7可注入稀释液来清洗采样针内外壁。稀释液注射器7出口串接液体压力传感器8，使得稀释液注射器7每一个向外推送液体动作产生的压力都能被监控，尤其对采样针21堵，样本注射器24堵，流动室44堵都能及时发现报警,并采取急停泄压措施以防压力过高导致系统崩管。

溶血剂和血样加注系统包括第一溶血剂瓶2、第二溶血剂瓶1、第一溶血剂注射器23、第二溶血剂注射器25、样本注射器24、电机26、采样针21、采样针清洗装置20，三通接头30。第一溶血剂注射器23、第二溶血剂注射器25、样本注射器24由同一个电机26驱动控制，第一溶血剂注射器23出口与第四三通电磁阀27公共端连接，第四三通电磁阀27常开端与第一溶血剂瓶2连通，第四三通电磁阀27常闭端与反应池第一溶血剂加液口连通，这样使得第一溶血剂注射器23可以从第一溶血剂瓶2内吸取第一溶血剂加入到反应池32中。第二溶血剂注射器25出口与第六三通电磁阀29公共端连接，第六三通电磁阀29常开端与第二溶血剂瓶1连通，第六三通电磁阀29常闭端与反应池第二溶血剂加液口连通，这样使得第二溶血剂注射器25可以从第二溶血剂瓶1内吸取第二溶血剂加入到反应池32中；样本注射器24通过第五三通电磁阀28常开端与第三三通电磁阀19公共端连接，第三三通电磁阀19常闭端与采样针21连通，样本注射器24出口与第五三通电磁阀28公共端连接，第五三通电磁阀28常闭端通过三通接头30与流动室样本注入口17右侧口相连通，使得样本注射器24可将样本注入流动室44形成样本流被鞘流包裹送去检测；使得样本注射器24可通过采样针21采集、分配血样；溶血剂和血样加注系统中两个溶血剂注射器和样本注射器24共用一个电机驱动控制，两个溶血剂注射器对称分布在样本注射器24两边，电机26安装在正中间，使得三个注射器产生的阻力力矩保持平衡；

压力系统包括隔离室33、压力室38、隔膜泵41、气体压力传感器36、拭子过滤器22，三通接头43。压力室38与第三两通电磁阀13连接，第三两通电磁阀13与流动室样本注入口17左侧口连通，流动室样本注入口17右侧口通过三通接头30与反应池32相连通，三通接头30与反应池32相连通的管路上设置一个夹管阀31，使得压力室38建负压后能将反应池32中的样本吸到超过流动室样本注入口17左侧口一段距离；压力室38与第六两通电磁阀34连接，第六两通电磁阀34与隔离室33连通，隔离室33与反应池32连通，使得压力室38排空时能排空反应池32，压力室38建正压后能通过隔离室33向反应池32打气泡；隔离室33内装过滤装置，使得反应池32排空后的废液中的大颗粒被所述隔离室33内装过滤装置阻挡,以防堵塞后端管路系统，同时也能阻挡压力室38建正压后向反应池32内打气泡时携带的后端污染物进入反应池32；压力室38与第七两通电磁阀35连接，第七两通电磁阀35与反应池32后池一端口相连通，反应池32后池另一端口与第一两通电磁阀5连接进而与稀释液桶3相连通，使得压力室38建负压后能经过反应池32后池从稀释液桶3中吸取稀释液达到冲洗反应池32后池的作用，反应池32前池与后池之间内置了宝石孔，于是压力室38建负压后能将反应池32前池的液体通过宝石孔吸入后池完成阻抗法计数；压力室38与气体压力传感器36相连通，使得压力室38建立压力在可控范围内而不超压引起系统崩管；隔膜泵41吸入端三通接头40连通，三通接头40与第八两通电磁阀37连接，第八两通电磁阀37与拭子过滤器22连接，拭子过滤器22与采样针清洗装置20排液口连通，使得隔膜泵41能够抽排清洗采样针后的废液和风干采样针外壁同时废液中大颗粒杂质被拭子过滤器22过滤了不会堵住后端管路系统；隔膜泵41吸入端通过三通接头40又与第九两通电磁阀39连接，第九两通电磁阀39与压力室38连通，使得所述隔膜泵41能够排空压力室38或给压力室38内建立负压；使得所述隔膜泵41排出口与第七三通电磁阀42公共端连接，第七三通电磁阀42常闭端与压力室38连通，使得所述隔膜泵41能够给压力室38内建立正压；第七三通电磁阀42常开端通过三通接头43与废液出口相通，使得所述隔膜泵41能够将废液排出。

本发明流式细胞检测方法采用如下步骤:

样本采集：三通电磁阀19上电使得样本注射器24与采样针21相通，样本注射器下拉吸取目标量血样至采样针内，吸样完毕后三通电磁阀19失电，吸样同时稀释液注射器7下拉吸入稀释液，反应池32内检测HGB本底电压，HGB本底电压测试结束后，隔膜泵41和阀39、34上电排空反应池；然后采样针上升至采样针清洗装置20中，于此同时三通电磁阀10与两通电磁阀18上电，然后稀释液注射器7将稀释液通过样本注射器24注入到采样针清洗装置20，在采样针上升的过程中清洗采样针外壁，清洗的同时隔膜泵41、两通电磁阀37上电，通过隔膜泵将洗针外壁的废液排走。

样本孵育反应：将样本针移到反应池32过程中同时隔膜泵41、阀37、阀42上电给向压力室38建正压，气体压力传感器36监测压力值，压力室内压力达到目标值后控制单元将隔膜泵41和阀37、42失电停止；同时还有溶血剂注射器23向反应池32加第一种溶血剂，然后样本注射器24向反应池内分血，分血后采样针21上升，同时和样本采集后上升一样动作清洗针外壁。接着反应池32下端与压力室38相连接的两通电磁阀34间歇性的快速开闭向反应池32内打气泡混匀血样和溶血剂，同时稀释液注射器7下拉吸入定量稀释液，第二溶血素注射器25下拉吸入定量第二溶血剂。

样本准备：混匀后孵育设定时间，在孵育的时候隔膜泵41、阀39上电给压力室38建一定负压，气体压力传感器36监测压力值，压力室内压力达到目标值后控制单元将隔膜泵41和阀39失电停止。孵育结束后打开两通电磁阀13使用负压从反应池32内将孵育后的样本吸到超过样本注入口17左侧口一点点，使样本充满夹管阀到样本注入口17这段备样管路。

HGB测量：样本准备完后第二溶血剂注射器25向反应池32内加入定量第二种溶血剂，同时隔膜泵41、阀37、阀42上电给向压力室38建正压，气体压力传感器36监测压力值，压力室内压力达到目标值后控制单元将隔膜泵41和阀37、42失电停止，建压后两通电磁阀34间歇性的快速开闭向反应池内打气泡混匀前面制的剩余样本和第二溶血剂，然后利用比色法测量HGB样本电压值，通过前面的HGB本底电压和这次的HGB样本电压经过计算公式换算得到HGB浓度。

清洗反应池：HGB测量后打开隔膜泵41、阀34、39排空反应池，然后阀10、12上电，稀释液注射器7向反应池内加液冲洗，重复排空一次，再加定量底液到反应池32。同时采样针下21到反应池32，加底液后阀19上电，样本注射器24分定量血进入反应池，反应池加底液同时隔膜泵41、阀37、阀42上电给向压力室38建正压，气体压力传感器36监测压力值，压力室内压力达到目标值后控制单元将隔膜泵41和阀37、42失电停止。分血和建压完成后阀34间歇性的快速开闭向反应池32内打气泡混匀血样和稀释液，同时采样针21上升阀10、18上电，稀释液注射器7打液清洗采样针外壁，当针尖到达采样针清洗装置内之后阀19上电切换，让稀释液注射器7推来的稀释液注入采样针内壁进行清洗，洗针内外壁过程中同时隔膜泵41、阀37上电，通过隔膜泵将洗针内外壁的废液排走。洗针之后立马隔膜泵41、阀39上电给压力室38建一定负压，气体压力传感器36监测压力值，压力室内压力达到目标值后控制单元将隔膜泵41和阀39失电停止。

细胞检测：在上述建负压的同时将稀释液注射器7和样本注射器24下拉指定量程，然后阀10、11上电，稀释液注射器7向鞘流注入口16推入鞘液，同时样本注射器24向样本注入口17推样本流，两注射器同时推一定时间后流动室憋压稳定后打开阀14，然后鞘流包裹样本流进入流动室光学检测部分进行白细胞五分类测量分析，然后根据检测到的白细胞的数量与检测样本的稀释比与体积做个数学计算就可以换算出患者血样中白细胞的浓度。在形成鞘流进行白细胞测试的同时，反应池32那边打开阀35用负压将反应池前池的样本混合液通过宝石孔吸入后池进行阻抗法计数RBC和PLT细胞数量，然后与检测血样稀释比和体积换算出患者血样中RBC和PLT细胞浓度。

系统清洗：两边细胞检测都结束后稀释液注射器7通过阀10、11、12向反应池内加液冲洗；稀释液注射器7通过阀10、11、14向流动室推液清洗流动室，稀释液注射器7通过阀10、11、流动室内样本针、夹管阀31至反应池来反冲流动室内样本针；稀释液注射器7通过阀18、样本注射器24、阀28、13到压力室来清洗备样管路；稀释液注射器7通过阀18、样本注射器24、阀28、阀19至采样针21和采样针清洗装置20以清洗采样针内外壁；隔膜泵41通过阀37、拭子过滤器22至采样针清洗装置20将清洗采样针内外壁的废液通过阀42排走；隔膜泵41通过阀39、压力室38、阀34、隔离室33至反应池将废液通过阀42排出；隔膜泵41通过阀39向压力室38内建负压然后打开阀35、5从稀释液桶3中吸取稀释液清洗反应池32的后池，其废液由压力室38、阀39、隔膜泵41、阀42排出；清洗所有部件和管路后所有注射器、阀泵，采样针都恢复到测量准备状态等待下一次测量。

Claims (7)

1.一种流式细胞检测液路系统,包括稀释液加注系统、溶血素和血样加注系统和压力系统,其特征是：

所述稀释液加注系统是由电机(6)驱动稀释液注射器(7)串接液体压力传感器(8)后,经管路和电磁阀连接稀释液桶(3)吸取稀释液，分别注入到流动室(44)、反应池(32)和经样本注射器(24)注入至采样针清洗装置(20)和采样针(21)；

所述溶血素和血样加注系统是由电机(26)驱动第一溶血剂注射器(23)、第二溶血剂注射器(25)、样本注射器(24)，所述第一溶血剂注射器(23)和第二溶血剂注射器(25)经管路和电磁阀分别连接第一溶血剂瓶(2)和第二溶血剂瓶(1)，吸取溶血剂注入到反应池(32)，所述样本注射器(24)经管路和电磁阀连接采样针(21)采集分配血样注入到反应池(32)；

所述压力系统是由隔膜泵(41)经管路和电磁阀连接压力室(38)建立正负压，所述隔膜泵(41)经管路和电磁阀及拭子过滤器(22)连接采样针清洗装置(20)抽排废液，所述压力室(38)经管路和电磁阀及夹管阀(31)连接反应池(32)，将样本吸到流动室(44)样本注入口，所述压力室(38)经管路、电磁阀和隔离室(33)连接反应池(32)，所述压力室(38)经管路和电磁阀连接反应池(32)后池后连接稀释液桶(3)。

2.根据权利要求1所述流式细胞检测液路系统，其特征在于所述压力室(38)上装有气体压力传感器(36)。

3.根据权利要求1所述流式细胞检测液路系统，其特征在于所述反应池(32)内分前池和后池，在前后池间装有宝石孔做阻抗计数，在所述反应池(32)外套装有HGB测试灯组件及恒温装置。

4.根据权利要求1所述流式细胞检测液路系统，其特征在于所述第一溶血剂注射器(23)和第二溶血剂注射器(25)对称分布在样本注射器两边。

5.根据权利要求1所述流式细胞检测液路系统，其特征在于所述隔离室(33)内装有过滤装置。

6.一种流式细胞检测方法，其特征是采用如下步骤：

笫一步样本采集，用样本注射器连通采样针吸取血样，注入到反应池；

笫二步样本孵育反应，用第一溶血剂注射器向反应池加入第一种溶血剂，然后用连接压力室的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡，混匀血样和第一种溶血剂，混匀后孵育。

笫三步样本准备，样本孵育后，用压力室负压从反应池内将样本经夹管阀吸入到流动室样本注入口的备样管路里；

笫四步HGB测量，备样完后，用第二溶血剂注射器向反应池内加入第二种溶血剂，然后用连接压力室的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡，混匀血样和第二溶血剂，然后用比色法测量HGB值；

笫五步稀释血样，清洗反应池，用隔膜泵经隔离室和两通阀排空反应池，然后稀释液注射器向反应池内加液冲洗两次，用稀释液注射器向反应池加稀释液，样本注射器分血注入反应池，然后用连接压力室的两通电磁阀间歇性的快速开闭向反应池内打气泡，混匀稀释液和血样；

笫六步细胞检测，用稀释液注射器向流动室注入口推注稀释液，形成鞘液，用样本注射器向流动室样本注入口推注备样管路里样本流，两注射器同时推注，让流动室内憋压稳定后打开流动室出口阀，然后鞘流包裹样本流进入流动室光学检测部分进行白细胞五分类测量，根据检测到的白细胞的数量与检测样本的稀释比与体积换算出血样中白细胞的浓度，同时打开压力室和反应池后池相连的两通阀，用负压将反应池前池的样本混合液通过宝石孔吸入后池进行阻抗法计数RBC和PLT细胞数量，然后与检测血样稀释比和体积换算出血样中RBC和PLT细胞浓度；

笫七步系统清洗，细胞检测都结束后，用稀释液注射器向流动室和反应池内加稀释液冲洗，用隔膜泵通过压力室排空前池废液，建负压通过后池到稀释液桶吸液清洗后池，清洗后所有部件恢复到测量准备状态。

7.根据权利要求6所述流式细胞检测方法，其特征在于实现鞘流是用压力室负压给备样管路的备样与稀释液注射器推鞘流，样本注射器推样本流结合。