CN104862325B - 水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15在提高种子活力上的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15在提高种子活力上的应用，属于促分裂原活化蛋白激酶及其编码基因与应用技术领域。本发明的技术方案要点是通过PCR方法扩增出水稻OsMPK15基因的全长编码区cDNA，构建OsMPK15的过表达载体，提高OsMPK15基因的表达，转化模式植物拟南芥，结果表明在转基因的T3代植株中，转基因拟南芥种子比野生型拟南芥种子具有更强的在氯化钠胁迫下的萌发活力。因此，如果将OsMPK15转入到水稻、玉米、大豆和小麦等重要农作物中，则可能提高重要农作物种子在盐胁迫下的活力。OsMPK15的应用可降低全球每年因盐胁迫而造成的巨大农业损失，具有重要的经济效益和应用前景。

Description

水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15在提高种子活力上 的应用

技术领域

本发明属于促分裂原活化蛋白激酶及其编码基因与应用技术领域，具体涉及水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15在提高种子活力上的应用。

背景技术

自然界的植物是一个有固着的多细胞有机体，它不能像动物一样通过移动来摆脱不利的环境条件。因此自然界的植物面临各种各样的生存压力，如干旱、高盐以及温度变化等等，而外界环境的不断变化会对植物的生长发育产生一定的影响。MAPK家族在植物的胁迫应答中介导了非常复杂的信号通路，使植物在面对变化莫测的环境条件时，及时地做出调节，以便更好的适应环境的改变。

当植物暴露于高浓度盐的土壤中时，就会发生盐胁迫，它会对植物的生长和发育产生严重的影响，特别是一些农业作物的产量。盐胁迫对植物产生的毒害主要有两个方面的原因：一是土壤中高浓度的盐使得植物根对水的吸收变得困难；二是植物中高浓度的盐会导致植物中毒。世界上的植物，除了少数耐盐植物外，大多数植物都不能忍受高盐的胁迫。植物应对盐胁迫主要是通过盐分过于敏感1（salinity overly sensitive 1 ，SOS1）Na⁺/H⁺逆向转运蛋白、HKT转运蛋白和液泡膜上的NHX1逆向转运蛋白，来降低细胞内Na⁺的浓度。在高盐和高渗的早期会触发细胞内一系列的信号通路，包括ROS的形成，诱导由PLD介导的磷脂酸的产生，细胞质内Ca²⁺浓度瞬时升高和NO的积累。高盐和高渗可以激发许多MAPK家族的成员。在拟南芥中，高盐和高渗可以快速的激活MKKK20，而MKKK20处于MPK6的上游，它可以激活MPK6。在高盐高渗早期MPK6可以迅速的磷酸化SOS1 Na⁺/H⁺逆向转运蛋白，降低细胞内的Na⁺。此外，就长期来说，MPK6还可以通过磷酸化锌指转录因子ZAT6来调节高盐诱导的应答基因的表达。在拟南芥中存在MEKK1-MKK1/MKK2-MPK4的MAPK信号通路，mekk1突变体表现了对盐的耐受性，因此相对MKKK20对盐胁迫的正调控而言，MEKK1可能是盐胁迫的一个负调控因子。此外，拟南芥的MKK9和MPK3，苜蓿的SIMK，烟草的SIPK，玉米的ZmMPK3、ZmMAPK5和ZmSIMK1以及棉花的GhMPK7等均参与了盐胁迫的应答。

在水稻中，17个MAPK家族成员根据特征基序和序列的特征，可以分别划分为TDY、TEY两大类和7大组，其中A组包含了OsMAPK1和OsMAPK5；B组包括了OsMAPK2和OsMAPK2；C组包括了OsMAPK3和OsMAPK4；D组成员有OsMAPK7、OsMAPK8、OsMAPK9和OsMAPK10；E组包括了OsMAPK13、OsMAPK14、OsMAPK15和OsMAPK16；F组只有OsMAPK17。

已有的报道表达表明，水稻MAPK在植物各个组织器官中均有表达。已有的报道表明，绝大部分的MAPK都参与了水稻的非生物胁迫应答，包括干旱、高盐、低温/高温、氧化应激以及重金属胁迫等。如，水稻OsMAPK5，它是水稻比较特殊的MAPK基因，它参与了几乎所有的非生物胁迫应答反应，包括干旱、高盐、臭氧、UV-C射线、重金属和温度变化等。此外，水稻的OsMKK1-OsMPK4、OsMPK3、OsMKK4-OsMPK6以及OsMKK1、4、6和10-2等都参与了水稻的胁迫应答过程。

水稻是世界上重要的粮食作物，而种子是农业生产的根本。种子的活力对于植物繁殖、作物产量、种质资源保存和生物多样性起着决定性的影响。在逆境条件下，高质量的种子仍能够保持高的萌发率和长出健壮的幼苗。但是，在萌发时对逆境变得越来越敏感，最终不能萌发。

鉴于以上所述，本发明成功克隆了水稻OsMPK15基因的全长，通过构建水稻OsMPK15的过表达载体，转化模式植物拟南芥，结果表明转基因拟南芥种子比野生型拟南芥种子具有更强的在氯化钠胁迫下的萌发活力。OsMPK15可以用于植物的遗传转化，提高植物种子的萌发活力。对于水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15的功能尚未见相关报道。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供了一种水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15在提高种子活力上的应用。

本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15在提高种子活力上的应用，其特征在于：所述的水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15的核苷序列如SEQ ID NO:1所示，大小为1497bp。

进一步限定，所述的水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15应用于提高植物种子在盐胁迫下的萌发活力，所述的植物为拟南芥、水稻、玉米、大豆或小麦。

本发明所述的水稻促分裂原活化蛋白激酶在提高种子活力上的应用，其特征在于：所述的水稻促分裂原活化蛋白激酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，大小为498aa。

进一步限定，所述的水稻促分裂原活化蛋白激酶应用于提高植物种子在盐胁迫下的萌发活力，所述的植物为拟南芥、水稻、玉米、大豆或小麦。

本发明所述的提高植物种子盐胁迫下萌发活力的植物表达载体，其特性在于：所述的植物表达载体转入了水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15的cDNA。

进一步限定，所述的植物表达载体的具体构建方法是利用水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15的cDNA插到植物表达载体pCAMBIA-1302上的CaMV35S启动子下游，构建成在基因OsMPK15基因的cDNA上游含有CaMV35S启动子的新的植物表达载体，命名为pCAMBIA-1302-OsMPK15。通过花序侵染法转化模式植物拟南芥，成功获得转基因植株，继续培养直到获得T3代的转基因纯合子，将转基因纯合子种子和野生型种子在含有150mM的氯化钠的MS固体培养基上萌发，结果显示转基因种子的萌发速度和最终萌发率都明显高于对照的野生型种子，表明水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15能够有效提高植物种子在盐胁迫下的萌发活力。

本发明所述的携带有水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15的植物表达载体pCAMBIA-1302-OsMPK15能够通过使用Ti质粒、Ri质粒或植物病毒载体直接DNA转化、微注射或电穿孔导入到植物细胞。

本发明的有益效果为：从水稻中分离到的促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15，通过转化模式植物拟南芥证实了能够有效提高植物种子在盐胁迫下的萌发活力；将水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15转入到水稻、玉米、大豆或小麦等重要农作物中，能够提高重要农作物种子在盐胁迫下的活力，其应用可降低全球每年因盐胁迫而造成的巨大农业损失，具有重要的经济效益和应用前景。

附图说明

图1是本发明含水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15的植物表达载体的构建模型，图2是盐胁迫下转基因拟南芥与野生型拟南芥的表型对比图，其中A为150mM NaCl、B为200mM NaCl、C为300mM NaCl。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1 水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15 cDNA编码区的获得

（1）水稻的种植

取日本晴水稻（O. Sativa L. spp. Japonica cv Nipponbare,AA genome）种子若干置于小烧杯中，用体积分数为75%的酒精消毒30sec，再用无菌水冲洗5-6次，每次冲洗1min。用无菌水完全淹没种子，浸泡1h。将种子转移至培养皿中，加入适量的水（不能完全淹没种子），28℃黑暗培养2-3d。待种子长出幼芽后，采用人工气候箱进行培养，培养条件为28℃、光照强度16000lx、光照时间为16h/d。

（2）水稻总RNA的提取和cDNA的制备

TRIzol方法提取培养的水稻根总RNA，按照8μL RNA+1μL buffer+1μL RNase-freeDNaseI（TaKaRa）的体系，等比例扩大消化24μL的RNA，37℃处理30min。65℃温浴10min终止消化反应后，以OligodT和Random 6 mers为引物，利用PrimeScript® RT Enzyme Mix I37℃温浴15min，之后85℃ 5sec终止反应，合成cDNA第一链。

（3）水稻OsMPK15基因 cDNA编码区的扩增

设计引物从上述制备的水稻根组织的cDNA为模板，克隆OsMPK15基因的 cDNA编码区。所用反应体系如下：

PCR产物电泳（1%琼脂糖凝胶浓度）后切胶回收目的片段（OsMPK15的cDNA编码区，约1.5kb），连入pEASY-T载体（购自北京全氏金生物有限公司），进行测序。测序结果为该cDNA长1497bp，序列参照序列表SEQ ID NO:1中。OsMPK15的 cDNA片段的克隆所用引物见序列表SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4。

实施例2 水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15植物过表达载体的构建

以pEASY-T-OsMPK15重组载体为模板，以带有PstⅠ和BlnⅠ的特异性引物扩增OsMPK15基因cDNA的编码区序列，PCR产物进行双酶切，与同样双酶切的pCAMBIA-1302载体连接，构建将pCAMBIA-1302上的CaMV35S启动子上游插入OsMPK15 cDNA的植物过表达载体，测序验证，并将其命名为pCAMBIA-1302-OsMPK15。OsMPK15 过表达载体构建所用引物见序列表SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6，其载体构建模型见图1。

实施例3 转pCAMBIA-1302-OsMPK15的拟南芥的获得

（1）植物表达载体转入农杆菌

挑取根癌农杆菌EH105单菌落接种在5mL含50μg/mL利福平的LB液体培养基中，28℃，200rpm振荡培养2d。取1mL根癌农杆菌EH105菌液至50mL的含50μg/mL利福平LB液体培养基中，28℃振荡培养，至其OD600达到0.4-0.6为止。4000rpm，4℃离心10min，弃上清，沉淀悬浮于10mL预冷的20mM CaCl2溶液，温和重悬菌体，冰浴30min。4℃，4000rpm离心10min，弃上清，加入2mL预冷的20mM CaCl₂，温和重悬菌体。取200μL加入2μL质粒DNA，冰浴5min后，液氮速冻2min，37℃热激5min，加入800μL不含抗生素的LB液体培养基，28℃，180rpm振荡培养4-5h。12000rpm高速离心菌液1min，弃上清，剩余50μL左右的菌液重悬菌体，均匀涂布于含有50μg/mL利福平霉素和100μg/mL硫酸卡那霉素的LB平板上，28℃倒置培养2d。随机挑取单菌落进行PCR和酶切验证。

（2）花序浸染法转化拟南芥

将成熟拟南芥（生态型Col-0）种子于4℃春化3天，在质量浓度为0.1%的HgCl₂消毒水中浸泡10min后用无菌水冲洗6遍，播种于MS培养基上。16h光照/8h黑暗条件下22℃培养至其长出2-3片真叶后，移栽至土壤中（蛭石与营养土按2:1混匀）继续培养。约4周后顶端出现花蕾，开花一周后，去除已结的果荚，准备浸染。

用50mL新鲜的含50μg/mL利福平和100μg/mL硫酸卡那霉素的LB液体培养基28℃，200rpm振荡培养含有目标基因植物过表达载体的农杆菌36h。再取1mL菌液转入50mL含有50μg/mL利福平和100μg/mL硫酸卡那霉素的新鲜LB液体培养基，震荡培养36h。4℃，4000rpm离心10min，弃上清后，用100mL 转化Buffer(MS基本培养基+蔗糖5%+Silwet-77，pH5.8)重悬至OD600=1.0后，将拟南芥花序浸没到转化Buffer中30s，并不时晃动。将浸染后的拟南芥进行暗培养24h后，回复正常培养。

（3）转基因拟南芥的筛选和鉴定

将收获的T0代种子于4℃浸泡3天打破休眠，在质量浓度为0.1%的HgCl₂消毒水中浸泡10min后用无菌水漂洗6遍，播种于含潮霉素（25µg/mL）抗生素的MS培养基上。16h光照/8h黑暗下22℃培养10天左右可见子叶伸出，此时可见抗性植株呈深绿色，子叶健康，根比较长。而未转化植株呈黄色或白色，子叶萎蔫，没有根。此时将阳性植株移栽至装有蛭石和营养土的培养钵中自然培养至收获。重复筛选获得T2代植株及种子。将T2代种子继续筛选，后代都为抗性植株的则为纯合株系。

实施例4 转基因种子的盐胁迫萌发实验

转基因和野生型拟南芥种子在消毒灭菌后，放置于4℃春化三天。然后播种于含有50mM、100mM、150mM、200mM和300mM NaCl的MS固体培养基上进行萌发。在含150mM NaCl的MS固体培养基上的萌发情况如图2A所示，转基因种子的萌发速度和最终的萌发率都远高于野生型的种子；当NaCl的浓度达到200mM时，野生型种子不萌发，而转基因株系的萌发率还很高（图2B），当NaCl的浓度达到300mM时，野生型和转基因种子皆不萌发（图2C），这表明过量表达基因OsMPK15能提高在盐胁迫下萌发的活力。

水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15 cDNA核苷酸序列，SEQ ID NO：1

1 ATGGACTTCT TTACCGAGTA TGGTGAGGGG AACAGGTATA AGATAGAAGA GGTCATAGGA

61 AAAGGGAGTT ACGGTGTAGT ATGCTCCGCG CTGGATACTC ATACTGGTGA GAAAGTTGCT

121 ATCAAGAAGA TTAATGACAT TTTTGAACAT GTATCTGATG CTTCTCGGAT ACTTCGTGAA

181 ATCAAGTTGC TCCGGCTACT GCGACACCCA GATATCGTGG AAATAAAACA TATTTTGCTT

241 CCTCCGTCGA GGAGAGAATT CAAGAACATT TATGTTGTTT TTGAACTCAT GGAGTCTGAT

301 TTGCACCAAG TTATAAAGGC CAACGACGAC TTGACTCCAG AACACTACCA GTTTTTCCTC

361 TATCAGTTGC TTCGAGGATT GAAGTACATA CATACAGCAA ATGTGTTTCA CCGAGATCTT

421 AAACCAAAAA ATATTTTGGC AAATGCTGAT TGTAAGCTCA AAATATGTGA TTTTGGCCTT

481 GCAAGAGTTG CTTTCAGTGA TACACCAACT GCCATCTTTT GGACGGATTA TGTTGCAACA

541 AGGTGGTATC GTGCACCTGA ACTTTGTGGA TCTTTTTTCT CTAAGTACAC ACCAGCAATA

601 GATATATGGA GCATCGGTTG CATATTTGCA GAACTTTTAA CAGGAAAACC TCTTTTCCCC

661 GGGAAAAATG TGGTGCATCA ACTTGATATA ATTACAGATC TTTTGGGGAC ACCTTCTACA

721 GAAGCAATAT CTAGGATTCG AAATGAGAAG GCCAGGCGAT ATTTGAGCAG TATGAGATGC

781 AAAAAGCCTA TACCATTTAC TCAGAAGTTC CCAAATGCAG ATCCACTTGC ATTACGTTTG

841 TTGGAGAGAA TGCTATCTTT TGAGCCCAAA GATAGGCCAA ATGCTGAAGA GGCTCTTGCC

901 GATCCTTATT TCAGAAACAT AGCAAATGTA GATAGAGAAC CTTCAGCACA GCCTGTGACA

961 AAGCTGGAAT TTGAGTTTGA AAGGAGGAGG ATTACAAAGG AAGATATAAG GGAACTCATC

1021 TATAGAGAGA TTCCGGAGTA TCATCCAAAT ATGTTGAGGG AATACCTTGA AGGGACTGAG

1081 TCAGCTGGTT TCATGTACCC TAGTGCGGTA GATCATTTTA AAAAGCAATT TGCATATCTT

1141 GAAGAACATT ATGCTAAGGG ATCAACAGCA GCTCCACCTG AGAGGCAACA TAACTCTTTA

1201 CCAAGACCTT CTGTGTTATA TTCGGATGAC CGTCCACAAA ACACAGCCAA CATCGCCGAG

1261 GATCTTTCAA AATGTGTACT TGGAGATAAT ACACAAAAAA TGCATCAAGGT TCTGCTTCT

1321 GTTTGTGCAA ATAGAGTTCC TCAAGGTGGT GCTGCAAGAC CTGGTAAAGT TGTTGGTTCT

1381 GCGCTTCGAT ATGGTAACTG CTCAACATCT ACTGCTGAGC GATATGAGCA TCGACGAACC

1441 GATAGAAACC CAGCATTGGC TACTAACACT GTTTCTCCCC GAGGCTCTTA CCCCTGA

水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15的氨基酸序列，SEQ ID NO：2

1 MDFFTEYGEG NRYKIEEVIG KGSYGVVCSA LDTHTGEKVA IKKINDIFEH VSDASRILRE

61 IKLLRLLRHP DIVEIKHILL PPSRREFKNI YVVFELMESD LHQVIKANDD LTPEHYQFFL

121 YQLLRGLKYI HTANVFHRDL KPKNILANAD CKLKICDFGL ARVAFSDTPT AIFWTDYVAT

181 RWYRAPELCG SFFSKYTPAI DIWSIGCIFA ELLTGKPLFP GKNVVHQLDI ITDLLGTPST

241 EAISRIRNEK ARRYLSSMRC KKPIPFTQKF PNADPLALRL LERMLSFEPK DRPNAEEALA

301 DPYFRNIANV DREPSAQPVT KLEFEFERRR ITKEDIRELI YREIPEYHPN MLREYLEGTE

361 SAGFMYPSAV DHFKKQFAYL EEHYAKGSTA APPERQHNSL PRPSVLYSDDRPQNTANIAE

421 DLSKCVLGDN TQKMHQGSAS VCANRVPQGG AARPGKVVGS ALRYGNCSTS TAERYEHRRT

481 DRNPALATNT VSPRGSYP

水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15 cDNA克隆引物序列：

SEQ ID NO：3 AACTGTCTGA AATGGACTTC

SEQ ID NO：4 TTGCAGGATG GATTTCTTCA

水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15 过表达载体构建引物序列：

SEQ ID NO：5 AACTGCAGAT GGACTTCTTT ACCGAG

SEQ ID NO：6 ATACCTAGGG GGGTAAGAGC CTCGGGG

以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。

<110> 河南师范大学

<120> 水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15在提高种子活力上的应用

<160> 6

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 1497

<212> cDNA

<213> 水稻

<400> 1

ATGGACTTCT TTACCGAGTA TGGTGAGGGG AACAGGTATA AGATAGAAGA GGTCATAGGA 60

AAAGGGAGTT ACGGTGTAGT ATGCTCCGCG CTGGATACTC ATACTGGTGA GAAAGTTGCT 120

ATCAAGAAGA TTAATGACAT TTTTGAACAT GTATCTGATG CTTCTCGGAT ACTTCGTGAA 180

ATCAAGTTGC TCCGGCTACT GCGACACCCA GATATCGTGG AAATAAAACA TATTTTGCTT 240

CCTCCGTCGA GGAGAGAATT CAAGAACATT TATGTTGTTT TTGAACTCAT GGAGTCTGAT 300

TTGCACCAAG TTATAAAGGC CAACGACGAC TTGACTCCAG AACACTACCA GTTTTTCCTC 360

TATCAGTTGC TTCGAGGATT GAAGTACATA CATACAGCAA ATGTGTTTCA CCGAGATCTT 420

AAACCAAAAA ATATTTTGGC AAATGCTGAT TGTAAGCTCA AAATATGTGA TTTTGGCCTT 480

GCAAGAGTTG CTTTCAGTGA TACACCAACT GCCATCTTTT GGACGGATTA TGTTGCAACA 540

AGGTGGTATC GTGCACCTGA ACTTTGTGGA TCTTTTTTCT CTAAGTACAC ACCAGCAATA 600

GATATATGGA GCATCGGTTG CATATTTGCA GAACTTTTAA CAGGAAAACC TCTTTTCCCC 660

GGGAAAAATG TGGTGCATCA ACTTGATATA ATTACAGATC TTTTGGGGAC ACCTTCTACA 720

GAAGCAATAT CTAGGATTCG AAATGAGAAG GCCAGGCGAT ATTTGAGCAG TATGAGATGC 780

AAAAAGCCTA TACCATTTAC TCAGAAGTTC CCAAATGCAG ATCCACTTGC ATTACGTTTG 840

TTGGAGAGAA TGCTATCTTT TGAGCCCAAA GATAGGCCAA ATGCTGAAGA GGCTCTTGCC 900

GATCCTTATT TCAGAAACAT AGCAAATGTA GATAGAGAAC CTTCAGCACA GCCTGTGACA 960

AAGCTGGAAT TTGAGTTTGA AAGGAGGAGG ATTACAAAGG AAGATATAAG GGAACTCATC 1020

TATAGAGAGA TTCCGGAGTA TCATCCAAAT ATGTTGAGGG AATACCTTGA AGGGACTGAG 1080

TCAGCTGGTT TCATGTACCC TAGTGCGGTA GATCATTTTA AAAAGCAATT TGCATATCTT 1140

GAAGAACATT ATGCTAAGGG ATCAACAGCA GCTCCACCTG AGAGGCAACA TAACTCTTTA 1200

CCAAGACCTT CTGTGTTATA TTCGGATGAC CGTCCACAAA ACACAGCCAA CATCGCCGAG 1260

GATCTTTCAA AATGTGTACT TGGAGATAAT ACACAAAAAA TGCATCAAGG TTCTGCTTCT 1320

GTTTGTGCAA ATAGAGTTCC TCAAGGTGGT GCTGCAAGAC CTGGTAAAGT TGTTGGTTCT 1380

GCGCTTCGAT ATGGTAACTG CTCAACATCT ACTGCTGAGC GATATGAGCA TCGACGAACC 1440

GATAGAAACC CAGCATTGGC TACTAACACT GTTTCTCCCC GAGGCTCTTA CCCCTGA 1497

<210> 2

<211> 498

<212> PRT

<213> 水稻

<400> 2

MDFFTEYGEG NRYKIEEVIG KGSYGVVCSA LDTHTGEKVA IKKINDIFEH VSDASRILRE 60

IKLLRLLRHP DIVEIKHILL PPSRREFKNI YVVFELMESD LHQVIKANDD LTPEHYQFFL 120

YQLLRGLKYI HTANVFHRDL KPKNILANAD CKLKICDFGL ARVAFSDTPT AIFWTDYVAT 180

RWYRAPELCG SFFSKYTPAI DIWSIGCIFA ELLTGKPLFP GKNVVHQLDI ITDLLGTPST 240

EAISRIRNEK ARRYLSSMRC KKPIPFTQKF PNADPLALRL LERMLSFEPK DRPNAEEALA 300

DPYFRNIANV DREPSAQPVT KLEFEFERRR ITKEDIRELI YREIPEYHPN MLREYLEGTE 360

SAGFMYPSAV DHFKKQFAYL EEHYAKGSTA APPERQHNSL PRPSVLYSDD RPQNTANIAE 420

DLSKCVLGDN TQKMHQGSAS VCANRVPQGG AARPGKVVGS ALRYGNCSTS TAERYEHRRT 480

DRNPALATNT VSPRGSYP 498

<210> 3

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 3

AACTGTCTGA AATGGACTTC 20

<210> 4

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 4

TTGCAGGATG GATTTCTTCA 20

<210> 5

<211> 26

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 5

AACTGCAGAT GGACTTCTTT ACCGAG 26

<210> 6

<211> 27

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 6

ATACCTAGGG GGGTAAGAGC CTCGGGG 27

Claims (2)

1.水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15在提高种子活力上的应用，其特征在于：其特征在于：所述的水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15应用于提高植物种子在盐胁迫下的萌发活力，该水稻促分裂原活化蛋白激酶基因OsMPK15的核苷序列如SEQ ID NO:1所示，所述的植物为拟南芥。

2.水稻促分裂原活化蛋白激酶在提高种子活力上的应用，其特征在于：所述的水稻促分裂原活化蛋白激酶应用于提高植物种子在盐胁迫下的萌发活力，该水稻促分裂原活化蛋白激酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述的植物为拟南芥。