CN104774854B - 一个簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因及其表达载体和应用 - Google Patents
一个簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因及其表达载体和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104774854B CN104774854B CN201510031766.0A CN201510031766A CN104774854B CN 104774854 B CN104774854 B CN 104774854B CN 201510031766 A CN201510031766 A CN 201510031766A CN 104774854 B CN104774854 B CN 104774854B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mpk12
- gene
- wheat
- mildew
- resistance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 101150105302 MAPK gene Proteins 0.000 title claims abstract description 17
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 title claims description 13
- 241000122204 Dasypyrum villosum Species 0.000 title abstract description 25
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims abstract description 28
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims abstract 6
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims 1
- 241000221785 Erysiphales Species 0.000 abstract description 22
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 10
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 abstract description 6
- 101150002748 MPK12 gene Proteins 0.000 abstract description 5
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 abstract description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract description 4
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 abstract description 4
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract description 3
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 24
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 6
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 6
- 241000209219 Hordeum Species 0.000 description 5
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 2
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 108010079058 casein hydrolysate Proteins 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000004665 defense response Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 1
- 241001480061 Blumeria graminis Species 0.000 description 1
- 108090000312 Calcium Channels Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 1
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 102100026932 Mitogen-activated protein kinase 12 Human genes 0.000 description 1
- 108700015929 Mitogen-activated protein kinase 12 Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 238000010818 SYBR green PCR Master Mix Methods 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 238000009412 basement excavation Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- GINJFDRNADDBIN-FXQIFTODSA-N bilanafos Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCP(C)(O)=O GINJFDRNADDBIN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 239000006160 differential media Substances 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000024241 parasitism Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 1
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明公开了一个簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因Hv‑MPK12及其所编码的蛋白质，属于基因工程领域。Hv‑MPK12的cDNA序列为SEQ ID NO.1及其编码的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。该基因来自二倍体簇毛麦(Haynaldia villosa,L.,2n＝2x＝14,基因组VV)，在抗白粉病二倍体簇毛麦中受白粉菌诱导表达增强。将该基因转化感病小麦品种扬麦158，结果表明Hv‑MPK12基因的过量表达可以增强扬麦158对小麦白粉病的抗性。因此，Hv‑MPK12可望用于基因工程育种，将其导入易感白粉病小麦品种中，有望提高小麦的白粉病抗性。
Description
技术领域
本发明属于基因工程领域，公开了一个簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12及其表达载体和应用。
背景技术：
小麦是我国乃至世界最重要的粮食作物之一，其生长发育却受多种非生物和生物胁迫。由小麦白粉菌(Blumeria graminis f.sp tritici)引起的小麦白粉病是小麦主要的病害之一。它属于专化寄生，可以在整个生育期侵染小麦的叶部、茎秆、穗部等。其中主要危害小麦叶片，严重时影响小麦正常的光合作用，从而影响其正常的生长，降低产量。一般情况下，小麦白粉病能够引起小麦减产5-19％，严重情况下能够使小麦减产30％以上(李振岐等，1997)。从九十年代以后，全国每年小麦白粉病的发病面积在600万公顷以上，严重危害小麦生产安全，因此小麦白粉病的防治越来越受到人们的关注。选育抗白粉病小麦品种是最有效的方法，而挖掘新的抗白粉病基因及解析抗病信号途径的分子机制将为抗性基因的选育奠定基础。
以往对小麦白粉病抗性的研究主要集中在抗白粉病基因的发掘和克隆方面，虽然已经发掘到很多抗白粉病基因，但是由于小麦基因组的复杂性使得抗白粉病基因的克隆异常艰难，限制了对抗性机制的系统研究。在小麦的一个野生近缘种簇毛麦的6V染色体上具有广谱抗白粉病的主效基因Pm21，而研究Pm21基因发挥抗病作用过程中所涉及的信号转导途径基因和重要的防卫反应基因，对于了解广谱抗性的分子机理，运用基因工程手段提高小麦对白粉病的抗性具有重要意义。
发明内容：
本发明的目的是针对现有技术的上述缺陷，提供一种簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12。
本发明的另一目的是提供该基因的表达载体。
本发明的又一目的是提供该基因和表达载体的应用。
本发明的目的可通过如下技术方案实现：
丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12，来自簇毛麦，其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。
该簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因编码的蛋白质Hv-MPK12，其氨基酸序列为SEQID NO.2。
含有所述的簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12的表达载体。
含有所述的簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12的表达载体优选以pBI220-6为出发载体，将所述的Hv-MPK12基因插入pBI 220-6的BamHⅠ和KpnⅠ酶切位点间所得。
所述的簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12在培育抗白粉病小麦品种中的应用。
所述的簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12的表达载体在培育白粉病小麦品种中的应用。
有益效果：
本发明从簇毛麦中克隆得到了一个丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12及其所编码的蛋白质Hv-MPK12。Hv-MPK12可用于基因工程育种，将其插入表达载体pBI 220-6，得到该基因的过量表达载体导入感病小麦品种中，可以提高感白粉病小麦品种对白粉病的抗性。
附图说明
图1 Hv-MPK12在簇毛麦叶片经白粉菌诱导后的实时定量qPCR分析
0h、2h、6h、12h、24h、48h、72h分别表示白粉病菌诱导了0h、2h、6h、12h、24h、48h、72h的簇毛麦叶片cDNA样品。
图2 Hv-MPK12过量表达载体构建
图3 Hv-MPK12基因转化扬麦158的T0代阳性转基因植株PCR分子鉴定结果
M:DL2000，“Y158”泳道为受体扬158对照，“-”泳道为水对照，“+”泳道为质粒对照，其余编号泳道为不同的T0代转基因植株。箭头所示为扩增出的目标基因片段。
图4转基因Hv-MPK12 T0代植株苗期白粉病鉴定
具体实施方式
实施例1簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12的克隆
本实验室前期利用簇毛麦受白粉菌诱导后的cDNA样品与大麦表达谱芯片Barley1 GeneChip(http://www.affymetrix.com/products/arrays/specific/barley.affx)进行杂交，通过比较接种白粉菌前后抗病簇毛麦的表达谱，筛选出上调表达的基因，包括病程相关蛋白、防卫反应基因、转录因子、信号传导因子和抗病基因类似物等。根据芯片杂交结果，选择上调表达、根据抗病相关钙离子通道基因设计的探针Contig4711，经NCBI注释为一个MAPK类基因，根据大麦的cDNA库(公知公用)序列用Primer3(http:// www.genome.wi.mit.edu/cgi-bin/primer/primer3www.cgi)设计全长引物，引物对序列为P1(ATGGGGGGAGGGAACGGCAT(SEQ ID NO.3))和P2(CTAGGCATGCATCTTGGAGA(SEQ ID NO.4))对簇毛麦受白粉菌诱导24hcDNA进行PCR扩增，经过筛选得到阳性单克隆进行测序，获得Hv-MPK12基因的cDNA全长。
测序结果表明，该基因完整的开放阅读框为1521bp，序列如SEQ ID NO.1所示，编码506个氨基酸，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过对该氨基酸序列进行保守结构分析，Hv-MPK12基因推导的蛋白序列属于植物的类PKc超家族，该蛋白序列在15-306位置包含一个MAP Kinase催化结构域：S_TKc，在催化结构与前具有一个ATP结合位点和底物结合位点。经BLAST分析，Hv-MPK12基因推导的蛋白质序列与面包小麦中的MAP Kinase(GenBankaccession ABC54587.1)具有99％一致性；与大麦的MAP Kinase(GenBank accessionCAD42638.1)具有98％一致性；与水稻的MAP Kinase 12(GenBank accession AAF23902.1)有88％一致性；与玉米的MAP Kinase(GenBank accession AFW75830.1)具有87％的一致性；与拟南芥的MAP Kinase(GenBank accession BAB02016.1)具有76％一致性。故将该基因命名为Hv-MPK12。
实施例2白粉菌诱导后Hv-MPK12的表达特征分析
把簇毛麦的非诱导和诱导不同时间的样品的cDNA为模板、以引物对P3(CTAGCTAGCTGGGGCTAATGTATTTCATC(SEQ ID NO.5))和P4(CTAGCTAGCAAAAGGAGCCACATAATTCA(SEQ ID NO.6))进行实时荧光定量qPCR分析，以管家基因Tubulin作为内参。PCR反应在实时荧光定量PCR仪(MyIQ，Bio-Rad，USA)上扩增并检测荧光。20μl PCR反应体系中含2×SYBR Green PCR Master Mix 10μl，0.4nmol/μl引物P3和P4，反转录产物2μl。扩增参数为：95℃10min，然后95℃15s、58℃30s，72℃1min，共40个循环。反应结束后，进行熔解曲线的测定。检测基因表达水平定量用MyiQ系统软件进行分析。qPCR结果表明：Hv-MPK12在白粉菌诱导1h后开始上调表达，在24h达到峰值，48h时表达水平下降，72h又显著上调表达(图1)。表明HvEREBP基因的表达显著受白粉菌诱导，该基因可能在簇毛麦抗白粉病途径中起一定作用。
实施例3 Hv-MPK12基因的表达载体的构建及其转化普通小麦扬麦158
把用P5(CTAGCAAGGAATCGAAGCGTA(SEQ ID NO.7))和P6(CTAGCCCAGCAGAAATGACAG(SEQ ID NO.8))从簇毛麦cDNA中扩增出来的Hv-MPK12基因片段构建入转化载体pBI 220-6(公知公用，参考文献：Jefferson RA,Kavanagh TA,Bevan MW.GUS fusions:beta-glucuronidase as a sensitive and versatile gene fusion marker in higherplants.EMBO J.1987,6:3901-3907)，用BamH Ⅰ和Kpn Ⅰ分别双酶切载体pBI 220-6和目标片段Hv-MPK12基因，连接转化大肠杆菌获得重组子，由此将目标基因克隆到强启动子35s的下游，获得表达载体pBI220:HvEREBP(图2)。
将构建好的过量表达载体通过基因枪法转化扬麦158，四批次转化共轰击2240块幼胚，轰击前在高渗培养基(MS+2,4-D2mg/L+蔗糖30g/L+0.4mol/L甘露醇,pH5.8)上预处理4小时，轰击后在高渗培养基上继续培养16小时。之后将愈伤组织转移至恢复培养基(1/2MS(只有大量元素减半的MS)+水解酪蛋白500mg/L+2,4-D2mg/L+蔗糖30g/L,pH5.8)上暗培养2周，再将其转移至含有除草剂的筛选培养基上(1/2MS+ZT 1mg/L+IAA 0.5mg/L+水解酪蛋白500mg/L+2,4-D1mg/L+蔗糖30g/L+3mg/L Bialaphos,pH5.8)，分化筛选培养2周。然后将具有抗性的愈伤组织转移到分化培养基中(1/2MS+水解酪蛋白200mg/L+ZT 1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂0.8％,pH5.8)进行分化，待分化芽长至2-4cm时将其转移至生根培养基(1/2MS+IAA1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂0.8％,pH5.8)中。至再生苗长约5-8cm、根系较健壮时，即可开管炼苗1-2天，最后洗去根系携带的培养基残渣便可移栽入盆钵，获得再生植株共180株。
提取所有再生植株基因组DNA，对转化植株利用载体上启动子引物P7(GATTCCATTGCCCAGCTATCTG(SEQ ID NO.9))和基因Hv-MPK12内部引物P8(CCATGAGCTCGAAAACAACA(SEQ ID NO.10))进行PCR扩增，以鉴定阳性植株。PCR程序：10-50ng/μl基因组模板，10μM的5’引物P7(35sF4)和3’引物P8(Hv-MPK12R)各0.5μl；2.5μl 10×buffer；2.5μl 2.5mM的dNTP；1.5μl 25mM的Mg2+；0.25μl(5U/μl)Taq polymerase(TaKaRa)，加水至25μl。PCR反应条件为：94℃预变性3min；94℃45s，58℃45s，72℃1min，35个循环；72℃延伸10min。PCR产物经8％的聚丙烯凝胶电泳检测。经过多次重复扩增，有17个单株能扩出目标基因条带，初步确定为阳性植株(图3)。
实施例4 T0代转基因植株的白粉病抗性鉴定
将实施案例3中所述17个阳性单株的幼嫩叶片剪下保存在6-BA保鲜培养基上，接入新鲜白粉菌孢子，培养7天，观察发病情况。抗性鉴定标准采用“0-9级”白粉病抗性反应型的分级标准(盛宝钦，1988)：0-2级为高抗、3-4级为中抗、5-6级为中感、7-9为高感。结果表明：T013-5、T016-4病级是1级；T02-3、T06-1病级是3级；T04-3、T015-1、T016-2病级为4级；T05-6、T011-5、T012-5、T019-2、T021-1病级为5级；T01-6，T018-4、T021-5表现为0级免疫；T012-4出现HR反应的坏死斑。而扬麦158受体对照则表现为7-8级感病(表1)(图4)。
表4-1转Hv-MPK12基因T0代植株苗期白粉病抗性鉴定
Claims (5)
1.一种丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12，其特征在于核苷酸序列为SEQ ID NO.1。
2.权利要求1所述的丝裂原活化蛋白激酶基因编码的蛋白质Hv-MPK12，其特征在于氨基酸序列为SEQ ID NO.2。
3.含有权利要求1所述的丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12的表达载体。
4.权利要求1所述的丝裂原活化蛋白激酶基因Hv-MPK12在培育抗白粉病小麦品种中的应用。
5.权利要求3所述的表达载体在培育抗白粉病小麦品种中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510031766.0A CN104774854B (zh) | 2015-01-21 | 2015-01-21 | 一个簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因及其表达载体和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510031766.0A CN104774854B (zh) | 2015-01-21 | 2015-01-21 | 一个簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因及其表达载体和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104774854A CN104774854A (zh) | 2015-07-15 |
| CN104774854B true CN104774854B (zh) | 2018-02-02 |
Family
ID=53616625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510031766.0A Expired - Fee Related CN104774854B (zh) | 2015-01-21 | 2015-01-21 | 一个簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因及其表达载体和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104774854B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111748567A (zh) * | 2020-07-14 | 2020-10-09 | 甘肃农业大学 | 一种大麦条纹病致病性基因pgssk2及其应用 |
| CN114317566B (zh) * | 2022-01-13 | 2023-04-11 | 福建农林大学 | 白粉病抗性相关基因mpk15的应用 |
-
2015
- 2015-01-21 CN CN201510031766.0A patent/CN104774854B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Isolation and molecular characterization of the Triticum aestivum L. ethylene-responsive factor 1 (TaERF1) that increases multiple stress tolerance;Xu ZS等;《Plant Mol Biol.》;20070915;第65卷(第6期);摘要下方第1段、GenBank：AY881102的CDS区、图3C、第729页右栏第1段 * |
| 利用大麦基因芯片筛选簇毛麦抗白粉病相关基因及其抗病机制的初步研究;曹爱忠 等;《作物学报》;20061031;第32卷(第10期);1444-1452 * |
| 利用现代生物技术把簇毛麦抗白粉病基因导入小麦的研究;中国农业科学院作物育种栽培研究所;《农业科技通讯》;20031231;39 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104774854A (zh) | 2015-07-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106148353B (zh) | 水稻抗褐飞虱基因Bph6及其紧密连锁的分子标记 | |
| EP3561079A1 (en) | Soybean anti-pod-shattering major qtlqpd08-1, and mapping method and application thereof | |
| CN108165653B (zh) | 用于鉴定辣椒熟性的InDel分子标记及其应用 | |
| CN107058348A (zh) | 一种提高植物赤霉病抗性的小麦基因及其应用 | |
| CN111235165A (zh) | 一种百合的易感真菌基因LrWRKY-S1及其应用 | |
| KR101970264B1 (ko) | 고추 풋마름병 저항성 품종 판별용 caps 마커 및 이의 용도 | |
| CN112175965B (zh) | 增强水稻稻瘟病和白叶枯病抗性的基因、蛋白及提高水稻稻瘟病和白叶枯病抗性的方法 | |
| CN104774854B (zh) | 一个簇毛麦丝裂原活化蛋白激酶基因及其表达载体和应用 | |
| CN104711254B (zh) | 玉米低磷响应基因ZmARF31的INDEL分子标记及其应用 | |
| CN104593381B (zh) | 一种玉米耐盐基因及其应用 | |
| CN112813192A (zh) | 小麦抗叶锈病基因Lr13的分子标记HBAU-LrZH22及其检测引物和应用 | |
| CN104946630B (zh) | 黄瓜靶斑病抗病连锁分子标记及其专用引物和应用 | |
| WO2018196744A1 (zh) | 转基因大豆事件gc1-1外源插入片段旁侧序列及其应用 | |
| CN113652423B (zh) | 一种辅助鉴定待测小麦抗旱性的方法及其专用的分子标记 | |
| CN102994528B (zh) | 一个簇毛麦类钙调素互作蛋白激酶基因及其表达载体和应用 | |
| CN105200063B (zh) | 一个小GTP结合蛋白基因TaRab18及其表达载体和应用 | |
| CN107435046A (zh) | 一种谷子SiARGOS基因的克隆、表达分析及功能标记的开发方法 | |
| CN106434694B (zh) | 棉花GbDREB基因在抗黄萎病中的应用 | |
| CN114807167B (zh) | 一个簇毛麦全生育期广谱抗白粉病基因Pm5V及其应用 | |
| SHEN et al. | Transgenic rice plants harboring genomic DNA from Zizania latifolia confer bacterial blight resistance | |
| KR102530404B1 (ko) | 내염성 토마토 판별용 분자마커 및 이를 이용한 토마토 선별방법 | |
| CN112094940B (zh) | 与黄瓜长下胚轴基因lh1连锁的Indel标记及其引物、试剂盒与应用 | |
| CN114231538B (zh) | 一条天目地黄RcMYB3基因及其在提高植物花青素含量中的应用 | |
| CN104630236A (zh) | 一个簇毛麦乙烯反应元件结合蛋白基因的应用 | |
| CN116970734B (zh) | 一种棉花多心室控制基因GaMV连锁的SNP位点及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20180202 |