CN104762196A - 一种细胞分离管 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种细胞分离管,包括管体和筛板,所述筛板固定在所述管体内,所述筛板与所述管体底部之间形成一空腔,所述筛板由颗粒材料制成,颗粒与颗粒之间的间隙为贯通孔,所述贯通孔的孔径分布在0.1mm~0.5mm之间。本发明结构简单便于制造,安全无毒且成本低廉。
Description
技术领域
本发明涉及生物医学领域的细胞分离技术,特别是涉及一种细胞分离管。
背景技术
在临床医学检验中,针对特定细胞功能和生物学特性的检查常常涉及到细胞的分离技术,从外周血液和各种体液(胸水、腹水、心包积液等)中分离单个核细胞是体外进行淋巴细胞免疫学研究和细胞学实验的重要前处理步骤,分离的目的细胞的质和量是保证后续实验可靠性的重要环节。
外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)是参与机体免疫应答反应的一类重要免疫细胞群。PBMCs主要包含淋巴细胞和单核细胞,PBMCs中大部分(80%~90%)为淋巴细胞,对不同淋巴细胞的分离、鉴别以及功能的研究对疾病的诊断乃至治疗都有十分重要的临床意义。
目前,普遍采用的是淋巴细胞分离液通过密度梯度法实现细胞分离,但是分离过程中,特别是大批量样本处理时,血液样品加入淋巴细胞分离液时,二者界面很容易发生混合,造成分离效果差,效率低。
发明内容
本发明提出一种细胞分离管,其结构简单便于制造,安全无毒且成本低廉。
本发明的技术问题通过以下的技术方案予以解决:
一种细胞分离管,包括管体和筛板,所述筛板固定在所述管体内,所述筛板与所述管体底部之间形成一空腔,所述筛板由颗粒材料制成,颗粒与颗粒之间的间隙为贯通孔,所述贯通孔的孔径分布在0.1mm~0.5mm之间。
优选地:
所述筛板具有伸缩性,所述筛板依靠所述伸缩性固定在所述管体内,所述筛板的直径与所述管体的内直径的比值在1.015~1.03之间。
所述颗粒材料的颗粒直径在0.4mm~1mm之间,制成的所述筛板具有连续的所述贯通孔,所述筛板的压缩弹性模量在60kPa~100kPa之间,表观密度在0.45g/cm3~0.65g/cm3之间,孔隙率在35%~65%之间。
所述筛板的厚度为2mm~8mm。
所述筛板的中部还开设一个安装孔,所述安装孔的直径为1mm~2mm。
所述颗粒材料为聚乙烯(PE)、聚四氟乙烯(PTFE)、聚碳酸酯(PC)和聚丙烯(PP)中的至少一种。
所述管体在固定所述筛板的位置还设有卡槽,所述筛板还通过所述卡槽固定在所述管体内。
本发明的有益效果是:本发明中的筛板由颗粒材料制成,形成筛板后,颗粒与颗粒之间的间隙为具有特定孔径分布的贯通孔,筛板与分离液的接触面少,减少了材料有毒物质释放的风险,筛板的结构简单,便于制造,分离效果很好。
附图说明
图1是采用本发明的细胞分离管分离PBMCs细胞的过程示意图。
具体实施方式
下面对照附图并结合优选的实施方式对本发明作进一步说明。
如图1所示,本发明提供一种细胞分离管,在一个优选实施例中,该细胞分离管包括管体1和筛板2,筛板2固定在管体1内,将筛板2固定在管体1的中下部位置较适宜,在筛板2与管体1的底部之间形成一空腔,筛板2是由颗粒材料烧结而成,形成的筛板2的颗粒与颗粒之间的间隙为连续的贯通孔,这些贯通孔的孔径分布在0.1mm~0.5mm之间。筛板具有伸缩性,筛板2依靠自身的伸缩性固定在管体1内,筛板的直径与管体的内直径的比值在1.015~1.03之间。
本发明所用的管体,可以根据需要采用常见的各种容量规格的离心管,制备筛板的颗粒材料的颗粒直径在0.4mm~1mm之间,制成后的筛板的压缩弹性模量在60kPa~100kPa之间,表观密度在0.45g/cm3~0.65g/cm3之间,孔隙率在35%~65%之间,厚度在2mm~8mm之间。颗粒材料可以为聚乙烯、聚四氟乙烯、聚碳酸酯和聚丙烯中的至少一种,所选用的材料可以是疏水性的,也可以是亲水性的,也可以是筛板的一面为亲水性,一面为疏水性的。所选用的材料需要满足安全无毒、达到生物相容性要求、对细胞影响最小的条件。
由于筛板本身具有伸缩性,且筛板的直径与管体的内直径之间有一定的比值关系,将筛板放入管体内后,可以依靠其自身的伸缩性而固定,不需要任何的胶水来粘合,也可以不需要对管体做任何特殊的结构,在分离的时候,筛板不会移动,这样的筛板生产工艺简单,能节省成本。
当然,为了便于安装,也可以在制成筛板后,在筛板的中部开设一个安装孔,安装孔的直径为1mm~2mm,安装孔的直径虽然在1mm~2mm,但仅有的这一个安装孔并不影响细胞的分离。
当然,为了能使筛板更好的固定在管体内,在另一个优选实施例中,还可以在管体在固定筛板的位置设卡槽,筛板通过自身的伸缩性和卡槽固定在管体内。
以分离淋巴细胞为例,本发明的细胞分离管工作时的具体操作过程如图1所示,其中3表示血液样品,4表示细胞分离液,5表示红细胞,6表示PBMCs细胞,7表示血浆。图1中,左图:将细胞分离液倒入细胞分离管内,细胞分离液紧贴筛板,不能有气泡,且也不能高于筛板的上表面,也即,细胞分离液的液面高度介于筛板的下表面和上表面之间为宜;图1中的中图:然后将血液样品倒入细胞分离管,血液样品与细胞分离液不会混合,旋紧盖子,放入离心机,设置常规的离心力和离心时间进行离心;图1中的右图:在离心力场的作用下,细胞分离管内的液体分成清晰的四层,筛板2以上依次是少部分细胞分离液、PBMCs细胞层和血浆层,红细胞离心后沉积在筛板以下的管体底部。然后取出细胞分离管,吸去最上层的血浆层,倒出PBMCs细胞层,清洗,离心,染色,计数。
采用本发明的细胞分离管经过多次实验,发现分离血液淋巴细胞的效果非常理想,与传统的直接使用细胞分离液进行淋巴细胞分离作了对比,具体的实验数据见下方的表一,其中,所用的筛板是用PE颗粒烧结而成的,颗粒之间的贯通孔的孔径分布在0.1mm~0.5mm之间。
表一:本发明的细胞分离管、传统的细胞分离液分离全血得到的淋巴细胞得率
样品 | 血样体积 | 细胞得率 | 细胞总数 |
细胞分离管 | 3mL | 160w/mL | 480w |
细胞分离液 | 3mL | 146w/mL | 438w |
实验表明,本发明的细胞分离管分离相同量的血液与传统的细胞分离液得到的淋巴细胞数量接近。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干等同替代或明显变型,而且性能或用途相同,都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种细胞分离管,包括管体,其特征在于:还包括筛板,所述筛板固定在所述管体内,所述筛板与所述管体底部之间形成一空腔,所述筛板由颗粒材料制成,颗粒与颗粒之间的间隙为贯通孔,所述贯通孔的孔径分布在0.1mm~0.5mm之间。
2.如权利要求1所述的细胞分离管,其特征在于:所述筛板具有伸缩性,所述筛板依靠所述伸缩性固定在所述管体内,所述筛板的直径与所述管体的内直径的比值在1.015~1.03之间。
3.如权利要求1所述的细胞分离管,其特征在于:所述颗粒材料的颗粒直径在0.4mm~1mm之间,制成的所述筛板具有连续的所述贯通孔,所述筛板的压缩弹性模量在60kPa~100kPa之间,表观密度在0.45g/cm3~0.65g/cm3之间,孔隙率在35%~65%之间。
4.如权利要求1所述的细胞分离管,其特征在于:所述筛板的厚度为2mm~8mm。
5.如权利要求1所述的细胞分离管,其特征在于:所述筛板的中部还开设一个安装孔,所述安装孔的直径为1mm~2mm。
6.如权利要求1所述的细胞分离管,其特征在于:所述颗粒材料为聚乙烯、聚四氟乙烯、聚碳酸酯和聚丙烯中的至少一种。
7.如权利要求2所述的细胞分离管,其特征在于:所述管体在固定所述筛板的位置还设有卡槽,所述筛板还通过所述卡槽固定在所述管体内。
8.如权利要求1所述的细胞分离管,其特征在于:所述筛板由颗粒材料烧结成型。
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