CN104739881B - 一种高存活率的复方嗜酸乳杆菌颗粒制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高存活率的复方嗜酸乳杆菌颗粒制备方法，采用低沸点挥发油初步包合，低温喷雾干燥，保护复方嗜酸乳杆菌活度，进而采用聚丙烯酸树脂Ⅰ号包合，高温沸腾制粒。本发明着重解决了嗜酸乳杆菌存活率低的问题，采用低沸点挥发油初步包合，并在沸腾制粒的高温下挥发，从而实现嗜酸乳杆菌不被热破坏的同时，实现丙烯酸树脂Ⅰ号的二次包合，形成的丙烯酸树脂Ⅰ号嗜酸乳杆菌包合物在胃液中不分解，但是在到达肠道中时分解并粘附在肠壁表面，发挥生物学屏障作用，对致病菌进行阻断，起到治疗作用。同时，由于提升了复方嗜酸乳杆菌的存活率，故使服用量降低5倍以上，减少不良反应，增加患者对药物的适用性。可有效减少生产原料成本。
Description
技术领域
本发明涉及一种生化药物及其制备方法，具体涉及一种高存活率的复方嗜酸乳杆菌颗粒制备方法。
技术背景
在临床医疗中，患者出现胃肠道感染时，通常会导致菌群平衡失调，如采用抗生素治疗，不仅无效，甚至可以造成程度加深。嗜酸乳杆菌制剂，可进行有效纠正，重新建立平衡状态，达到治疗目的。患者通过口服后，菌体到达肠道中，粘附在肠壁表面，发挥生物学屏障作用，对致病菌进行阻断。而嗜酸乳杆菌在繁殖期时，可代谢产生乳酸及醋酸，降低了肠道pH值，促进厌氧菌生长，恢复生态平衡，抑制了致病菌的生长繁殖；粪链球菌可分解淀粉为葡萄糖并且合成B族维生素；枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中也会产生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些物质对致病菌或内院性感染的条件致病菌有明显的抑制作用，这三种都是肠道中的有益菌。将此三种菌共同制成制剂可以使三者协同发挥作用，治疗胃肠功能紊乱，而市售的大部分普通的嗜酸乳杆菌制剂在胃液中就会发生崩解，使大部分菌体在胃液中释放，到达小肠中的活菌数目减少，不能达到预期的治疗效果。
市面有售复方嗜酸乳杆菌片（商标：益君康），国药准字H10940114，通化金马药业集团股份有限公司有售。适应症为用于肠道菌群失调引起的肠功能紊乱，如转型急性腹泻等。由中国株嗜酸乳杆菌，日本株嗜酸乳杆菌、粪链球菌和枯草杆菌等四种菌粉组成的复方片剂。为肠道菌群调整药。可分解糖类产生乳酸，提高肠道酸度，从而抑制肠道致病菌繁殖。但复方嗜酸乳杆菌存活率低。
因此，目前临床上迫切需要一种嗜酸乳杆菌存活率高的复方嗜酸乳杆菌制剂，以提高疗效。包合物是一种有机晶体，是在一种分子的空间结构中全部或部分包入另一种分子而成，包合物可与复方嗜酸乳杆菌形成缔合物，降低胃液破坏，保证复方嗜酸乳杆菌存活率。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高存活率、提高疗效的复方嗜酸乳杆菌颗粒。
本发明采取了如下技术方案：
一种高存活率的复方嗜酸乳杆菌颗粒制备方法，包括以下步骤：
a、中国株嗜酸乳杆菌菌粉（菌种号34106）、日本株嗜酸乳杆菌菌粉（菌种号34107）、粪链球菌菌粉、枯草杆菌混合菌粉按质量比1:1:1:0.002的充分混匀，制成复方嗜酸乳杆菌，将复方嗜酸乳杆菌按照重量：体积比1:1~1:5溶解于纯化水中形成复方嗜酸乳杆菌水溶液。株嗜酸乳杆菌菌粉、日本株嗜酸乳杆菌菌粉、粪链球菌菌粉、枯草杆菌菌粉均为市场商售产品。
b、挥发油与乙醇按照体积比1:1~5:1混匀，制成挥发油乙醇溶液。
c、采用高速分散器剧烈搅拌复方嗜酸乳杆菌水溶液，并逐步加入挥发油乙醇溶液进行包合，形成混合溶液。
d、聚丙烯酸树脂Ⅰ号（薄膜包衣材料，湖北艺康源化工有限公司商售产品），按照重量：体积比1:2~1:4溶解于纯化水中，超声使完全溶解，得聚丙烯酸树脂Ⅰ号水溶液。
e、混合溶液采用低温喷雾干燥，通过沸腾制粒机，干燥粉末采用丙烯酸树脂Ⅰ号溶液二次包衣，沸腾制粒干燥，获得复方嗜酸乳杆菌颗粒。
挥发油为低沸点的植物挥发油。
混合溶液采用低温喷雾干燥的温度为80~120℃。
沸腾制粒干燥温度为110~160℃。
所述的复方嗜酸乳杆菌颗粒还可以制成片剂，辅料为淀粉，碳酸钙，微晶纤维素，蔗糖细粉，硬脂酸镁中的一种或多种。
本发明优点是：1、本发明着重解决了嗜酸乳杆菌存活率低的问题，采用低沸点挥发油初步包合，并在沸腾制粒的高温下挥发，从而实现嗜酸乳杆菌不被热破坏的同时，实现丙烯酸树脂Ⅰ号的二次包合，形成的丙烯酸树脂Ⅰ号嗜酸乳杆菌包合物在胃液中不分解，但是在到达肠道中时分解并粘附在肠壁表面，发挥生物学屏障作用，对致病菌进行阻断，起到治疗作用。2、复方嗜酸乳杆菌颗粒中嗜酸乳杆菌的存活率高于70%。3、由于提升了复方嗜酸乳杆菌的存活率，故使服用量降低5倍以上，减少不良反应，增加患者对药物的适用性。可有效减少生产原料成本，减轻用药者经济负担。
具体实施方式
以下将结合实施例，对本发明的实施方式做详细说明。
实施例1
复方嗜酸乳杆菌颗粒
配方：
复方嗜酸乳杆菌（中国株嗜酸乳杆菌菌粉、日本株嗜酸乳杆菌菌粉、粪链球菌菌粉、枯草杆菌混合菌粉按质量比1:1:1:0.002的混合）200g；
荆芥挥发油：20ml；
丙烯酸树脂Ⅰ号：330g；
乙醇：10ml；
纯化水1500ml。
操作过程：
a、按照配方称取复方嗜酸乳杆菌200g，溶解于500ml纯化水中，超声使完全溶解，形成复方嗜酸乳杆菌水溶液；
b、按照配方取荆芥挥发油20ml，加入10ml乙醇中，超声混匀，制成荆芥挥发油溶液；
c、采用高速分散器剧烈搅拌，搅拌速度不低于10000转/分钟，向复方嗜酸乳杆菌水溶液中逐步加入荆芥挥发油溶液进行包合，形成混合溶液；
d、称取聚丙烯酸树脂Ⅰ号330g，溶解于1000ml纯化水中，超声使完全溶解，得浓度为33％的聚丙烯酸树脂Ⅰ号水溶液；
e、采用沸腾制粒机，混合溶液于110℃条件下喷雾干燥，干燥粉末采用丙烯酸树脂Ⅰ号溶液二次包衣，120℃条件下沸腾制粒干燥，获得复方嗜酸乳杆菌颗粒。
实施例2
复方嗜酸乳杆菌颗粒
配方：
复方嗜酸乳杆菌（中国株嗜酸乳杆菌菌粉、日本株嗜酸乳杆菌菌粉、粪链球菌菌粉、枯草杆菌混合菌粉按质量比1:1:1:0.002的混合）250g；
荆芥挥发油：40ml；
丙烯酸树脂Ⅰ号：300g；
乙醇：15ml；
纯化水1500ml。
操作过程：
a、按照配方称取复方嗜酸乳杆菌250g，溶解于600ml纯化水中，超声使完全溶解，形成复方嗜酸乳杆菌水溶液；
b、按照配方取荆芥挥发油40ml，加入15ml乙醇中，超声混匀，制成荆芥挥发油溶液；
c、采用高速分散器剧烈搅拌，搅拌速度不低于10000转/分钟，向复方嗜酸乳杆菌水溶液中逐步加入荆芥挥发油溶液进行包合，形成混合溶液；
d、称取聚丙烯酸树脂Ⅰ号300g，溶解于900ml纯化水中，超声使完全溶解，得浓度为30％的聚丙烯酸树脂Ⅰ号水溶液；
e、采用沸腾制粒机，混合溶液于95℃条件下喷雾干燥，干燥粉末采用丙烯酸树脂Ⅰ号溶液二次包衣，150℃条件下沸腾制粒干燥，获得复方嗜酸乳杆菌颗粒。
实施例3
复方嗜酸乳杆菌片剂
配方：
复方嗜酸乳杆菌（中国株嗜酸乳杆菌菌粉、日本株嗜酸乳杆菌菌粉、粪链球菌菌粉、枯草杆菌混合菌粉按质量比1:1:1:0.002的混合）200g；
荆芥挥发油：20ml；
丙烯酸树脂Ⅰ号：330g；
乙醇：10ml；
微晶纤维素：100g；
纯化水1000ml。
操作过程：
a、按照配方称取复方嗜酸乳杆菌200g，溶解于500ml纯化水中，超声使完全溶解，形成复方嗜酸乳杆菌水溶液；
b、按照配方取荆芥挥发油20ml，加入10ml乙醇中，超声混匀，制成荆芥挥发油溶液；
c、采用高速分散器剧烈搅拌，搅拌速度不低于10000转/分钟，向复方嗜酸乳杆菌水溶液中逐步加入荆芥挥发油溶液进行包合，形成混合溶液；
d、称取聚丙烯酸树脂Ⅰ号330g，溶解于1000ml纯化水中，超声使完全溶解，得浓度为33％的聚丙烯酸树脂Ⅰ号水溶液；
e、采用沸腾制粒机，混合溶液于105℃条件下喷雾干燥，干燥粉末采用丙烯酸树脂Ⅰ号溶液二次包衣，120℃条件下沸腾制粒干燥，获得复方嗜酸乳杆菌颗粒；
f、复方嗜酸乳杆菌颗粒，过100目筛，按配方比例与100g微晶纤维素混合，直接压片，得复方嗜酸乳杆菌片。
实验例1
复方嗜酸乳杆菌的存活率
取实施例1、2、3中制备的复方嗜酸乳杆菌颗粒及片剂，进行嗜酸乳杆菌存活率检测。
活菌计数按GB4789.35－2010［7］《食品微生物学检验—乳酸菌检验》部分检测方法进行。采用MRS固体培养基平板涂布计数法计数，样品采用生理盐水梯度稀释，选取3个适当的稀释度接于平皿进行平板涂布，倾注固体MRS培养基，37℃恒温培养48h进行活菌计数，每个梯度重复3次，取平均值，结果见下表。
复方嗜酸乳杆菌的存活率（n=3）
| 样品 | 存活率（%） |
| 实施例1 | 77.6 |
| 实施例2 | 70.6 |
| 实施例3 | 75.4 |
Claims (4)
1.一种高存活率的复方嗜酸乳杆菌颗粒制备方法，其特征在于包括以下步骤：
a、中国株嗜酸乳杆菌菌粉、日本株嗜酸乳杆菌菌粉、粪链球菌菌粉、枯草杆菌混合菌粉按质量比1:1:1:0.002充分混匀，制成复方嗜酸乳杆菌，将复方嗜酸乳杆菌按照重量：体积比1:1~1:5溶解于纯化水中形成复方嗜酸乳杆菌水溶液；
b、荆芥挥发油与乙醇按照体积比2:1~8:3混匀，制成挥发油乙醇溶液；
c、采用高速分散器剧烈搅拌复方嗜酸乳杆菌水溶液，并逐步加入挥发油乙醇溶液进行包合，形成混合溶液；
d、聚丙烯酸树脂Ⅰ号按照重量：体积比1:2~1:4溶解于纯化水中，超声使完全溶解，得聚丙烯酸树脂Ⅰ号水溶液；
e、混合溶液采用低温喷雾干燥，通过沸腾制粒机，干燥粉末采用丙烯酸树脂Ⅰ号溶液二次包衣，沸腾制粒干燥，获得复方嗜酸乳杆菌颗粒。
2.根据权利要求1所述复方嗜酸乳杆菌颗粒制备方法，其特征在于：步骤e中，混合溶液采用低温喷雾干燥的温度为80~120℃。
3.根据权利要求1所述复方嗜酸乳杆菌颗粒制备方法，其特征在于：步骤e中，沸腾制粒干燥温度为110~160℃。
4.一种高存活率的复方嗜酸乳杆菌片剂制备方法，其特征在于包括以下步骤：
a、中国株嗜酸乳杆菌菌粉、日本株嗜酸乳杆菌菌粉、粪链球菌菌粉、枯草杆菌混合菌粉按质量比1:1:1:0.002充分混匀，制成复方嗜酸乳杆菌，将复方嗜酸乳杆菌按照重量：体积比1:1~1:5溶解于纯化水中形成复方嗜酸乳杆菌水溶液；
b、荆芥挥发油与乙醇按照体积比2:1~8:3混匀，制成挥发油乙醇溶液；
c、采用高速分散器剧烈搅拌复方嗜酸乳杆菌水溶液，并逐步加入挥发油乙醇溶液进行包合，形成混合溶液；
d、聚丙烯酸树脂Ⅰ号按照重量：体积比1:2~1:4溶解于纯化水中，超声使完全溶解，得聚丙烯酸树脂Ⅰ号水溶液；
e、混合溶液采用低温喷雾干燥，通过沸腾制粒机，干燥粉末采用丙烯酸树脂Ⅰ号溶液二次包衣，制成片剂；辅料为淀粉，碳酸钙，微晶纤维素，蔗糖细粉，硬脂酸镁中的一种或多种。
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