CN104721245A

CN104721245A - 多酶酶解制作人参提取成份的方法

Info

Publication number: CN104721245A
Application number: CN201510148374.2A
Authority: CN
Inventors: 曲新砉
Original assignee: Lv Yuan Can Ye Bio Tech Ltd Hunchun
Current assignee: Lv Yuan Can Ye Bio Tech Ltd Hunchun
Priority date: 2015-03-28
Filing date: 2015-03-28
Publication date: 2015-06-24

Abstract

本发明公开了多酶酶解制作人参提取成份的方法，包括如下步骤：取干净人参切成5毫米厚度的片状后，进行超微粉碎，加入蒸馏水后，用柠檬酸和乳酸调节PH值至3.6～4.8后，置于30～45℃的温度下，低温处理10～15分钟，置于试管中，加塞后放人超声波水浴中，恒温超声30min；倒入酶解罐中，加入活性为55～85U/mL木质素降解酶，50～60℃酶解0.7～1.8h；加入复合酶解液，35℃，酶解72小时，每4小时搅拌、充氧一次，控制PH值在3.5～6.2之间；酶解结束后，过滤，残渣加入乙醇浸提，滤过，合并滤液，进行喷雾干燥，得粉体。本发明工艺简便易操作，提取率高。

Description

多酶酶解制作人参提取成份的方法

技术领域

本发明涉及酶工程技术领域，具体涉及一种多酶酶解制作人参提取成份的方法。

背景技术

人参(Panax ginseng C.A.Mey)是五加科(Aral iaceae)植物人参的干燥根，俗称人衔、鬼盖、地精、孩儿参等，是我国名贵的药材，已有数千年的药用历史。人参性平、味甘、微苦且微温，具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津止渴，安神益智之功效。近年来，国内外学者对人参的有效成分进行了药理研究、临床观察和流行病学检查，结果表明人参具有改善微循环、提高组织抗缺氧能力、抑制血小板聚集、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗疲劳等多种生物活性。

人参的化学成分主要有三萜类人参皂苷、有机酸及酯类、维生素类、多糖类等，其中人参皂苷是其最主要活性成分。按照人参皂苷的结构类型(羟基的数量不同)、糖基的数量和位置，可将目前已分离鉴定出的60余种单体皂苷化合物分为3组：

(a)oleanol ic酸型，即齐墩果酸(Oleanol ic acid)类，如人参皂苷Ro，主要有抗炎、抗血小板释放等作用；

(b)20(S)-原人参萜二醇(PD)型，如人参皂苷Ra、Rb1、Rb3、Rc、Rd、Rg3、Rh2、Rs。其中人参皂苷Rb1、Rb2表现出具有中枢神经抑制、降低细胞内钙、抗氧化、清除自由基和改善心肌缺血再灌注损伤等作用，原人参二醇组皂苷无溶血活性；

(c)20(S)-原人参萜三醇(PT)型，如人参皂苷Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1。其中人参皂苷Rg1表现出具有中枢神经兴奋、促智、促进蛋白质及DNA和RNA的合成等作用；人参皂苷Re是抗心律失常有效成分，具有可抑制吗啡诱发小鼠产生的耐药性等作用；人参皂苷Rg2具有可抑制兔血小板释放反应等作用。

现有的人参有效成分提取方法，普遍存在提取率低、生物活性低、残渣不能循环再利用的缺点。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种多酶酶解制作人参提取成份的方法.工艺简便易操作，提取率高。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

多酶酶解制作人参提取成份的方法，包括如下步骤：

S1、取干争人参切成5毫米厚度的片状后，进行超微粉碎，过100～400目药筛；

S2、按1∶8～1∶12的比例加入蒸馏水后，用柠檬酸和乳酸调节PH值至3.6～4.8；

S3、将步骤S1所得的人参浆置于30～45℃的温度下，低温处理10～15分钟；

S4、将步骤S3所得的人参浆置于试管中，加塞后放人超声波水浴中，恒温超声30min；

S5、将步骤S4所得的人参浆倒入酶解罐中，加入活性为55～85U/mL木质素降解酶，50～60℃酶解0.7～1.8h；

S6、按300.0～350.0克/吨的比例加入复合酶解液，35℃，酶解72小时，每4小时搅拌、充氧一次，控制PH值在3.5～6.2之间；

S7、酶解结束后，过滤，残渣加入65～80％乙醇浸提2～3次，滤过，合并滤液，进行喷雾干燥，干燥温度不超过65℃，水分控制在7％以下，得粉体；

优选的，所述复合酶解液由超滤酶、蛋白酶、果胶酶、葡萄糖异构酶、纤维素酶按3∶1∶1∶2∶3的比例混合所得。

优选的，所述木质素降解酶为过氧化物酶和真菌漆酶的混合物。

优选的，所述过氧化物酶和真菌漆酶的比例为1∶1。

优选的，所述人参浆与木质素降解酶重量体积比(kg/L)为1∶13～27。

优选的，所述步骤S7中乙醇浸提温度为80～90℃，时间为0.5～1.5小时。

优选的，所述步骤S4中的温度为35～50℃。

本发明具有以下有益效果：

采用微粉碎技术将人参材粉碎，药物粒径越小，其表面积越大，有助于药物有效成分的溶出。同时由于药材细胞的破壁，细胞内各类有效成分均呈释放状态，缩短提取时间。采用木质素降解酶可以降解人参中的木质素，促进植物中活性成分的释放，进一步提高提取效率，采用生物酶技术与传统的中药提取技术相结合，采用多种酶协同作用，使有效成分更加充分的提取出，提取出的皂苷成分更充分全面，提取率高。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例

以下实施例中，复合酶解液由超滤酶、蛋白酶、果胶酶、葡萄糖异构酶、纤维素酶按3∶1∶1∶2∶3的比例混合所得；所述木质素降解酶由过氧化物酶和真菌按1∶1的比例混合所得。

实施例1

S1、取干净人参切成5毫米厚度的片状后，进行超微粉碎，过100目药筛；

S2、按1∶8的比例加入蒸馏水后，用柠檬酸和乳酸调节PH值至3.6；

S3、将步骤S1所得的人参浆置于30℃的温度下，低温处理10分钟；

S5、将步骤S4所得的人参浆倒入酶解罐中，加入活性为55U/mL木质素降解酶，50℃酶解0.7h；

S6、按300.0克/吨的比例加入复合酶解液，35℃，酶解72小时，每4小时搅拌、充氧一次，控制PH值在3.5之间；

S7、酶解结束后，过滤，残渣加入65％乙醇浸提2次，滤过，合并滤液，进行喷雾干燥，干燥温度不超过65℃，水分控制在7％以下，得粉体。

实施例2

S1、取干净人参切成5毫米厚度的片状后，进行超微粉碎，过400目药筛；

S2、按1∶12的比例加入蒸馏水后，用柠檬酸和乳酸调节PH值至4.8；

S3、将步骤S1所得的人参浆置于45℃的温度下，低温处理15分钟；

S5、将步骤S4所得的人参浆倒入酶解罐中，加入活性为55～85U/mL木质素降解酶，60℃酶解1.8h；

S6、350.0克/吨的比例加入复合酶解液，35℃，酶解72小时，每4小时搅拌、充氧一次，控制PH值在6.2之间；

S7、酶解结束后，过滤，残渣加入80％乙醇浸提3次，滤过，合并滤液，进行喷雾干燥，干燥温度不超过65℃，水分控制在7％以下，得粉体。

实施例3

S1、取干净人参切成5毫米厚度的片状后，进行超微粉碎，过250目药筛；

S2、按1∶10的比例加入蒸馏水后，用柠檬酸和乳酸调节PH值至4.2；

S3、将步骤S1所得的人参浆置于40℃的温度下，低温处理12.5分钟；

S5、将步骤S4所得的人参浆倒入酶解罐中，加入活性为55～85U/mL木质素降解酶，55℃酶解1.25h；

S6、375克/吨的比例加入复合酶解液，35℃，酶解72小时，每4小时搅拌、充氧一次，控制PH值在4.85之间；

S7、酶解结束后，过滤，残渣加入72.5％乙醇浸提2.5次，滤过，合并滤液，进行喷雾干燥，干燥温度不超过65℃，水分控制在7％以下，得粉体。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.多酶酶解制作人参提取成份的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、取干净人参切成5毫米厚度的片状后，进行超微粉碎，过100～400目药筛；

S7、酶解结束后，过滤，残渣加入65～80％乙醇浸提2～3次，滤过，合并滤液，进行喷雾干燥，干燥温度不超过65℃，水分控制在7％以下，得粉体。

2.根据权利要求1所述的多酶酶解制作人参提取成份的方法，其特征在于，所述复合酶解液由超滤酶、蛋白酶、果胶酶、葡萄糖异构酶、纤维素酶按3∶1∶1∶2∶3的比例混合所得。

3.根据权利要求1所述的多酶酶解制作人参提取成份的方法，其特征在于，所述木质素降解酶为过氧化物酶和真菌漆酶的混合物。

4.根据权利要求3所述的多酶酶解制作人参提取成份的方法，其特征在于，所述过氧化物酶和真菌漆酶的比例为1∶1。

5.根据权利要求1所述的多酶酶解制作人参提取成份的方法，其特征在于，所述人参浆与木质素降解酶重量体积比(kg/L)为1∶13～27。

6.根据权利要求1所述的多酶酶解制作人参提取成份的方法，其特征在于，所述步骤S7中乙醇浸提温度为80～90℃，时间为0.5～1.5小时。

7.根据权利要求1所述的多酶酶解制作人参提取成份的方法，其特征在于所述步骤S4中的温度为35～50℃。