CN104667021B - 一种含竹叶黄酮的复方制品及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含竹叶黄酮的复方制品及其制备方法，主要原料为竹叶、葛根、酸枣仁、黄精、茯苓、玉竹和竹荪。先利用超声辅助酶解法，分解可溶性纤维素，溶解竹叶黄酮；然后将酶灭活，并先后采用乙醇、水提取竹叶黄酮等活性物质；经膜过滤，浓缩，超临界CO₂萃取，冷冻干燥等工艺制成各种剂型复方制品。本发明选用传统天然植物进行配伍，安全无毒副作用，竹叶黄酮具有良好的免疫调节作用，能显著增强人体对不良环境和疾病的抵抗力，清除多种类型的活性氧自由基，抑制脂质过氧化，清洗血管，具有良好的保护心脑血管作用。本发明集成应用酶解、醇提和水提等方法，比传统的单一溶剂提取方法，提取率更高，营养成分更全面，是一种高效环保的生产技术。

Description

一种含竹叶黄酮的复方制品及其制备方法

技术领域

本发明属于生物制药技术领域，具体涉及一种含竹叶黄酮的复方制品及其制备方法。

背景技术

近年来国内外对黄酮的药理和营养性的广泛深入的研究和临床试验，证实类黄酮既是药理因子，又是重要的营养因子为一种新发现的营养素，对人体具有重要的生理保健功效。目前，很多著名的抗氧化剂和自由基清除剂都是类黄酮，黄酮类化合物广泛存在于自然界中，属于植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物。其药理作用主要有降血脂、清除自由基、抗氧化、抗炎、调节免疫、镇痛、抗肿瘤等方面。

本发明是以竹叶、葛根、酸枣仁、黄精、茯苓、玉竹、竹荪为原料，其中多味原料中含有黄酮类化合物。

竹叶黄酮又名竹叶抗氧化剂，英文名称antioxidant of bamboo leaves, 简称AOB，是从竹叶中提取出来的具有生理活性的生物黄酮，它是一种高效的生物抗氧化剂，是人体必需的营养素。当人体缺乏时，容易导致大脑和心脏功能不全，血管硬化等疾病的产生。竹叶黄酮是一类多组分协同的生物抗氧化剂，其成分除了黄酮类化合物以外，还含有酚酸、蒽醌类化合物、生物活性多糖、香豆素类内酯、特种氨基酸、芳香成分和锰、锌、锡等微量元素，它们共同构成了竹叶黄酮广泛的生理和药理活性的基础。各种功能试验证明，竹叶黄酮具有独特的保健功能：能清除多种类型的活性氧自由基，抑制脂质过氧化，清洗血管，具有良好的保护心脑血管作用，对高血脂、冠心病、高血压、脑血栓等疾患所带来的头晕、头痛、失眠、胸闷、心悸心慌、肢体麻木等症均有较好的辅助治疗作用；降血甘油三酯和升高高密度脂蛋白；抗菌、消炎和抗病毒；镇咳祛痰、清热解毒；阻断亚硝化反应和清除N-亚硝胺；抗衰老、抗应激、抗疲劳。另外，竹叶黄酮还具有良好的免疫调节作用，能显著增强人体对不良环境和疾病的抵抗力。竹叶黄酮安全无毒副作用，且具有良好的工艺特性。淡竹叶是我国颁布的第三批既是食品又是药品的天然植物之一。竹叶黄酮不仅安全无毒，而且没有副作用，不含激素和抗营养因子，对肝肾功能、血尿常规、血糖均无不良影响。因此，可以参与人体代谢，并很快被排出体外，无体内蓄积，具有极大的食用安全性。与普通黄酮相比，竹叶黄酮具有结构稳定，不易被降解；能深入病灶部位，直接发挥功效；亲水性强，加工适应性好，有利于开发食品、保健食品和药品等突出优点。

葛根，研究表明：异黄酮类化合物是葛根的主要有效成分，且在葛根中含量较多。干燥野葛根中异黄酮含量高达5％到10％，葛根素是本属的特有成分。日本以葛根素、异黄酮、黄豆甙及黄豆甙元作为评价葛根质量的指标。葛根异黄酮可促进心脑血管、视网膜血流的作用；舒张平滑肌解痉作用；抗促癌及诱导癌细胞分化作用；抗氧化作用；降血糖、降血脂、降低血醇浓度解酒作用；解热和提高学习记忆功能及增加机体免疫力的作用。并对女性丰胸、美容，延缓衰老等具功效。临床上主要用于治疗冠心病、心绞痛、眼底病、突发性耳聋、偏头痛、颈椎病等。

酸枣仁含酸枣仁皂苷A和B(Jujuboside A和B)，黄酮类(Sipinosine和Zivulgarin)、三萜类化合物白桦脂酸和白桦脂醇(Betulic acid和Betulin)生物碱和阿魏酸 (Lysicamine和juzirine)，还含脂肪、蛋白质、甾醇和多量维生素等，尚含微量强烈刺激性的挥发油。酸枣仁除了具有镇静、安神作用外，实验证明酸枣仁油可明显降低总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和甘油三脂(TG)水平，升高高密度脂蛋白与低密度脂蛋白比值(H／L)，还可明显抑制ADP诱导的大鼠血小板聚集反应。具有显著的降血脂和抗血小板聚集作用。

黄精，含天门冬氨酸、毛地黄糖甙、蒽醌类化合物、粘液质、糖类、烟酸、锌、铜、铁。有抗缺氧、抗疲劳、抗衰老作用；能增强免疫功能，增强新陈代谢；有降血糖和强心作用。治脾胃虚弱，体倦乏力，食欲不振，心悸，气短，肺虚燥咳，津伤口渴，消渴病，肾虚精亏，腰膝酸软。

茯苓，菌核含β-茯苓聚糖约占干重93%和三萜类化合物乙酰茯苓酸、茯苓酸、3β-羟基羊毛甾三烯酸。此外，尚含树胶、甲壳质、蛋白质、脂肪、甾醇、卵磷脂、葡萄糖、腺嘌呤、组氨酸、胆碱、β-茯苓聚糖分解酶、脂肪酶、蛋白酶等。功能主治渗湿利水，益脾和胃，宁心安神。治小便不利，水肿胀满，痰饮咳逆，呕哕，泄泻，遗精，淋浊，惊悸，健忘。

玉竹，是中药中的补益药，成分含多糖，玉竹果聚糖，铃兰甙，山奈酚，槲皮素，还有与铃兰甙相似的成分。富含维生素A类物质和粘液质。有增强心搏，使血压缓缓上升及呼吸暂时兴奋的作用。能增强子宫及肠管肌肉收缩。有降低血糖的作用。主要应用：润肺止咳，用于燥咳，肺胃阴伤，咽燥干渴，干咳痰少而粘，或发热。养胃生津：用于热病灼伤胃津，口燥烦渴。此外，还可治疗各种心脏病引起的轻度心衰。玉竹性寒，味甘。可养阴润燥，生津止渴。

竹荪，据测定干竹荪中含蛋白质19.4%、脂肪2.6%，碳水化合物总量60.4%，其中菌糖4.2%、粗纤维8.4%，灰分9.3%。其对高血压、神经衰弱、肠胃疾病等具有保健作用。补气养阴，润肺止咳，清热利湿；主治肺虚热咳、喉炎、痢疾、白带、高血压、高血脂等病症。竹荪富含多种氨基酸、维生素．无机盐等，具有滋补强壮、益气补脑、宁神健体的功效。保护肝脏减少腹壁脂肪的积存，有俗称“刮油”的作用，从而产生降血压、降血脂和减肥的效果。提高抵抗力竹荪可补充人体必需的营养物质，提高机体的免疫抗病能力。现代医学研究也证明，竹荪中含有能抑制肿瘤的成分。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含竹叶黄酮的复方制品及其制备方法，选用传统天然植物进行配伍，安全无毒副作用，竹叶黄酮具有良好的免疫调节作用，能显著增强人体对不良环境和疾病的抵抗力，清除多种类型的活性氧自由基，抑制脂质过氧化，清洗血管，具有良好的保护心脑血管作用。本发明集成应用酶解、醇提和水提等方法，比传统的单一溶剂提取方法，提取率更高，营养成分更全面，是一种高效环保的生产技术。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种含竹叶黄酮的复方制品，主要原料为竹叶、葛根、酸枣仁、黄精、茯苓、玉竹和竹荪。

主要原料和辅料按重量份数计：主要原料：竹叶3000-4000份、葛根1500-2000份、酸枣仁1000-1500份、黄精1000-1500份、茯苓1000-1500份、玉竹500-1000份、竹荪500-1000份；辅料：糊精500-1000份。

主要原料经酶解、醇提、水提、浓缩和干燥，加入辅料，制成粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂中的一种。根据产品工艺和剂型的需要，添加适量的填充剂、粘合剂、甜味剂、被膜剂等。

制备方法：包括以下步骤：酶解、醇提、水提、膜过滤、浓缩、超临界CO₂萃取、冷冻干燥。

具体步骤如下：

（1）将合格原料称量、混合、粉碎、过5-20目筛；

（2）将过筛后的原料用饮用水浸泡半小时，料液比为1：10-20，然后加入原料重量0.8-1.0%的纤维素酶，用2～3mol/L的盐酸调节pH为5.0-6.0，同时在超声波频率为25kHz，温度为40-50℃下超声辅助酶解25～45min；酶解反应后将料液升温至100℃，灭酶3-5分钟，过滤，滤液备用；

（3）将步骤（2）所得滤渣用体积分数为75-95%的乙醇溶液提取，料液比为1：10-20，加热至微沸，回流提取1-2小时，然后过滤；滤渣按相同条件继续用乙醇溶液提取1-2小时，过滤，滤渣备用；合并两次滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.05-1.15（60℃）；

（4）将步骤（3）的滤渣用饮用水提取，料液比为1：10-20，加热至微沸，煎煮提取1-2小时，然后过滤；滤渣按相同条件继续用水煎煮1-2小时，过滤，合并两次滤液备用；

（5）将步骤（2）和（4）所得滤液合并，浓缩至相对密度为1.05-1.15（60℃）；

（6）将步骤（3）和（5）所得浓缩液采用超临界CO₂萃取，条件为：萃取釜压力10-12MPa，萃取温度35-45℃；分离温度40℃，I级分离釜压力8-10MPa，Ⅱ级分离釜压力6-8MPa，CO₂流速1.5-2L/min，萃取时间40-50 min，含竹叶黄酮活性物质的萃取液；

（7）将步骤（6）所得萃取液采用冷冻干燥至水分含量5%以下，得含竹叶黄酮活性物质的提取粉。

步骤（2）所述的纤维素酶的活力为20000U/g。

步骤（2）-（4）中过滤均采用膜分离过滤，膜孔径为200-300目，压力为0.1-0.2MPa。

本发明的显著优点在于：

传统的中草药炮制做法基本采用直接粉碎配伍、或采用溶剂进行简单提取等工艺。为克服原药材利用率低、有效活性成分提取得率不高等缺点，利用酶具有的特性，选择相应的酶，在中药提取分离中，分解、破坏细胞壁结构，有效成分溶解或助溶于溶剂中，从而达到加速有效成分释放，从而提高提取率，提高原料的利用价值。研究表明，纤维素酶具有分解纤维素、破坏细胞壁、增加植物细胞内容物溶出量的作用。

本发明利用纤维素酶将中草药进行酶解，同时利用超声波的空化作用、强化传质等作用，促进酶分子在体系中的扩散，加速酶解进行，也加速植物有效成份的浸出提取。该方法不但提高了提取得率，而且将纤维素转化为人体易吸收的糖类物质，使资源充分得到利用。

本发明是以天然植物中草药为原料，以超声辅助酶解、醇提、水提集成的制备方法。经超声辅助酶解后，采用醇提和水提，滤液膜过滤，经浓缩，超临界CO₂设备萃取，冷冻干燥等系列工艺制成颗粒剂片剂复方制品的集成工艺方法，比传统的提取方法提取率更高，比单一的水提或醇提所得竹叶黄酮等活性成分更全面，制成的含竹叶黄酮的复方制品营养更充分、是一种高效环保的生产技术。

具体实施方式

实施例1：含竹叶黄酮复方制品-颗粒剂

原料组成为：竹叶3000g、葛根1500g、酸枣仁1500g、黄精1500g、茯苓1000g、玉竹1000g、竹荪500g

辅料为：糊精1000g

制备方法包括如下步骤：

(1) 将合格原料按配方称量，然后混合，粉碎，过筛，目数为5目。

(2) 将过筛后的药材用饮用水浸泡半小时，料液比为1：20（即每1g药材用20mL的水），然后加入原料重量0.8%的纤维素酶，用2mol/L的盐酸调节pH为5.0，同时在超声波频率为25kHz，温度为40℃条件下超声辅助酶解25min。所述的纤维素酶活力为20000U/g。酶解反应后将料液升温至100℃，灭酶3分钟，然后将料液过滤，滤液备用。

(3) 将步骤2所得的滤渣用体积分数为75%的乙醇溶液提取，料液比为1：15，加热至微沸，回流提取1小时，然后过滤；滤渣按上法条件继续用乙醇溶液提取1小时，过滤，滤渣备用；合并两次滤液，回收乙醇，将其减压浓缩至相对密度为1.05（60℃）的浓缩液。

(4) 将步骤3的滤渣用饮用水提取，料液比为1：10，加热至微沸，煎煮提取1小时，然后过滤；滤渣按上法条件继续用水煎煮1小时，过滤，合并两次滤液备用，余下滤渣弃去。过滤均采用膜分离过滤，膜孔径为200目，压力为0.1MPa。

(5) 将步骤(2)和(4)所得的滤液合并，将其浓缩至相对密度为1.05（60℃）的浓缩液。

(6)将浓缩液采用超临界CO₂设备萃取，条件为：萃取釜压力10MPa，萃取温度35℃；分离温度40℃，I级分离釜压力8MPa，Ⅱ级分离釜压力6MPa，CO₂流速1.5L/min，萃取40min，收集含竹叶黄酮的萃取物混合液。

(7) 将步骤(6) 采用冷冻干燥，控制水分5%以下，收集得含竹叶黄酮等活性物质提取粉。

（8）将含竹叶黄酮等活性物质提取粉和糊精等辅料混合，按照制粒工艺，颗粒为20目，包装，制成含竹叶黄酮的复方制品颗粒剂。

实施例2：含竹叶黄酮复方制品—片剂

原料组成为：竹叶3500g、葛根2000g、酸枣仁1000g、黄精1000g、茯苓1000g、玉竹1000g、竹荪500g

辅料为：糊精800g

制备方法包括如下步骤：

(1) 将合格原料按配方称量，然后混合，粉碎，过筛，目数为20目。

(2) 将过筛后的药材用饮用水浸泡半小时，料液比为1：20，然后加入原料重量0.9%的纤维素酶，用3mol/L的盐酸调节pH为6.0，同时在超声波频率为25kHz，温度为50℃条件下超声辅助酶解45min。所述的纤维素酶活力为20000U/g。酶解反应后将料液升温至100℃，灭酶5分钟，然后将料液过滤，滤液备用。

(3) 将步骤2所得的滤渣用体积分数为95%的乙醇溶液提取，料液比为1：15，加热至微沸，回流提取2小时，然后过滤；滤渣按上法条件继续用乙醇溶液提取2小时，过滤，滤渣备用；合并两次滤液，回收乙醇，将其减压浓缩至相对密度为1.15（60℃）的浓缩液。

(4) 将步骤3的滤渣用饮用水提取，料液比为1：10，加热至微沸，煎煮提取2小时，然后过滤；滤渣按上法条件继续用水煎煮2小时，过滤，合并两次滤液备用，余下滤渣弃去。过滤均采用膜分离过滤，膜孔径为300目，压力为0.2MPa。

(5) 将步骤(2)和(4)所得的滤液合并，将其浓缩至相对密度为1.15（60℃）的浓缩液。

（6）将浓缩液采用超临界CO₂设备萃取，条件为：萃取釜压力12MPa，萃取温度45℃；分离温度40℃，I级分离釜压力10MPa，Ⅱ级分离釜压力8MPa，CO₂流速2L/min，萃取50 min，收集含竹叶黄酮的萃取物混合液。

(7) 将步骤(6) 采用冷冻干燥，控制水分5%以下，收集得含竹叶黄酮等活性物质提取粉。

（8）将含竹叶黄酮等活性物质提取粉和糊精等辅料混合，经制粒，压片成型，包装，制成含竹叶黄酮的复方制品片剂。

实施例3：含竹叶黄酮复方制品—胶囊剂

原料组成为：竹叶4000g、葛根2000g、酸枣仁1000g、黄精1000g、茯苓1000g、玉竹500g、竹荪500 g

辅料为：糊精600g

制备方法包括如下步骤：

(1) 将合格原料按配方称量，然后混合，粉碎，过筛，目数为5-20目。

(2) 将过筛后的药材用饮用水浸泡半小时，料液比为1：20，然后加入原料重量1.0%的纤维素酶，用2.5mol/L的盐酸调节pH为5.5，同时在超声波频率为25kHz，温度为45℃条件下超声辅助酶解35min。所述的纤维素酶活力为20000U/g。酶解反应后将料液升温至100℃，灭酶4分钟，然后将料液过滤，滤液备用。

(3) 将步骤2所得的滤渣用体积分数为85%的乙醇溶液提取，料液比为1：15，加热至微沸，回流提取1.5小时，然后过滤；滤渣按上法条件继续用乙醇溶液提取1.5小时，过滤，滤渣备用；合并两次滤液，回收乙醇，将其减压浓缩至相对密度为1.10（60℃）的浓缩液。

(4) 将步骤3的滤渣用饮用水提取，料液比为1：10，加热至微沸，煎煮提取1.5小时，然后过滤；滤渣按上法条件继续用水煎煮1.5小时，过滤，合并两次滤液备用，余下滤渣弃去。过滤均采用膜分离过滤，膜孔径为250目，压力为0.15MPa。

(5) 将步骤(2)和(4)所得的滤液合并，将其浓缩至相对密度为1.10（60℃）的浓缩液。

（6）将浓缩液采用超临界CO₂设备萃取，条件为：萃取釜压力11MPa，萃取温度40℃；分离温度40℃，I级分离釜压力9MPa，Ⅱ级分离釜压力7MPa，CO₂流速1.8L/min，萃取45min，收集含竹叶黄酮的萃取物混合液。

(7) 将步骤(6) 采用冷冻干燥，控制水分5%以下，收集得含竹叶黄酮等活性物质提取粉。

（8）将含竹叶黄酮等活性物质提取粉和糊精等辅料混合，经制粒，经过60目筛，然后填充成胶囊剂，包装，制成含竹叶黄酮的复方制品胶囊剂剂。

表1 含竹叶黄酮复方制品主要成分及含量检测表

黄酮含量测定方法：采用高效液相色谱法测定，芦丁为标准品。

多糖含量测定方法：采用硫酸-苯酚法测定多糖含量。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (2)

1.一种含竹叶黄酮的复方制品，其特征在于：原料和辅料按重量份数计：

原料：竹叶3000-4000 份、葛根1500-2000 份、酸枣仁1000-1500 份、黄精1000-1500份、茯苓1000-1500 份、玉竹500-1000 份、竹荪500-1000 份；

辅料：糊精500-1000 份；

其制备方法具体步骤如下：

（1）将合格原料称量、混合、粉碎、过5-20 目筛；

（2）将过筛后的原料用饮用水浸泡半小时，料液比为1 ：10-20，然后加入原料重量0.8-1.0% 的纤维素酶，用2 ～ 3mol/L 的盐酸调节pH 为5.0-6.0，同时在超声波频率为25kHz，温度为40-50℃下超声辅助酶解25 ～ 45min ；酶解反应后将料液升温至100℃，灭酶3-5分钟，过滤，滤液备用；

（3）将步骤（2）所得滤渣用体积分数为75-95% 的乙醇溶液提取，料液比为1 ：10-20，加热至微沸，回流提取1-2 小时，然后过滤；滤渣按相同条件继续用乙醇溶液提取1-2 小时，过滤，滤渣备用；合并两次滤液，回收乙醇，减压浓缩至相对密度为1.05-1.15 ；

（4）将步骤（3）的滤渣用饮用水提取，料液比为1 ：10-20，加热至微沸，煎煮提取1-2 小时，然后过滤；滤渣按相同条件继续用水煎煮1-2 小时，过滤，合并两次滤液备用；

（5）将步骤（2）和（4）所得滤液合并，浓缩至相对密度为1.05-1.15 ；

（6）将步骤（3）和（5）所得浓缩液采用超临界CO₂萃取，条件为：萃取釜压力10-12MPa，萃取温度35-45℃ ；分离温度40℃，I 级分离釜压力8-10MPa，Ⅱ级分离釜压力6-8MPa，CO₂流速1.5-2L/min，萃取时间40-50 min，收集含竹叶黄酮活性物质的萃取液；

（7）将步骤（6）所得萃取液采用冷冻干燥至水分含量5% 以下，得含竹叶黄酮活性物质的提取粉；

步骤（2）-（4）中过滤均采用膜分离过滤，膜孔径为200-300 目，压力为0.1-0.2MPa。

2.根据权利要求1 所述的含竹叶黄酮的复方制品，其特征在于：步骤（2）所述的纤维素酶的活力为20000U/g。