CN104666332A - 腹膜透析液(乳酸盐)组合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种腹膜透析液（乳酸盐）（组合物）的制备方法，是通过浓液配制、碱液配制、混合灌封后得到。

Description

腹膜透析液(乳酸盐)组合物的制备方法

技术领域

本发明涉及一种弱碱性的腹膜透析液（乳酸盐）组合物的制备方法。

背景技术

腹膜透析(peritoneal dialysis，PD)是终末期肾衰竭患者重要的肾脏替代疗法(CRRT),由于与血液透析相比，具有适用范围广、透析效率高、残存肾功能保存好、患者生活质量高等优点，在慢性肾功能衰竭的替代疗法中占有愈来愈重要的地位。成功的腹膜透析的关键在于超滤功能良好的腹膜和腹膜透析液。由于腹膜透析治疗的长期性，在治疗过程中腹膜的超滤性能往往会受各种因素影响发生改变，而且这种改变是不可逆的，最终会造成患者腹膜超滤功能丧失，无法再进行腹透治疗。其中腹膜透析液(peritoneal dialysis fluid，PDF)的生物相容性差所致腹膜纤维化和超滤失败成为目前腹膜透析急需和必须解决的重要问题。腹腹透析液(peritoneal dialysis fluid，PDF)是PD中的核心环节，腹膜透析的基本原理，就是利用患者血清与腹膜腔内腹透液之间各成分的浓度不同所形成的电化学势能差，通过弥散与超滤作用来纠正尿毒症患者血液中的生理异常。腹透液各成分的设置与配伍主要基于这一原理。理想的腹透液不但能充分清除毒素、超滤水分，还能保护腹膜功能，减少超滤衰竭(UFF)的发生。传统的腹透液是以不同浓度的葡萄糖为渗透剂的乳酸盐透析液，多年来的临床实践表明，PD虽然在慢性肾衰的治疗中发挥了十分重要的作用,但从人体生理学角度看,目前常规使用的透析液仍突出存在以下问题:(1)透析液以葡萄糖为主要渗透剂,因其能被腹膜吸收,故其渗透作用维持时间很短,难以达到理想的液体及溶质清除;(2)透析液中某些成分(葡萄糖及碱基等)可以活化炎性细胞因子(生长因子、一氧化氮合成酶),长期使用可以引起腹膜慢性炎性改变,促进腹膜纤维化及增厚;(3)透析液中的葡萄糖在体内被分解后,可以产生大量的糖基化终未产物(AGEs),后者可广泛在体内沉积,尤其在血管壁及腹膜间质沉积后可引起间质增厚,导致超滤功能下降;(4)葡萄糖在高温消毒中可降解形成一系列葡萄糖降解产物(GDPs),GDPs可直接损伤腹膜细胞,并促进AGE形成;(5)透析液中缓冲碱大多采用乳酸盐,它们必须先经过肝脏的代谢转化为碳酸氢盐后,方能起到纠正酸中毒的作用,故对一部分合并有肝脏疾病的患者常有一定的局限性.

葡萄糖作为传统的腹膜透析液渗透剂，虽然其本身无直接的生物学毒性，但在高温灭菌和单袋长期储存的过程中会产生大量有毒性的葡萄糖降解产物(glucose degradationproducts．GDPs)，研究发现加热消毒过程中传统PDF所处的pH值条件(5．5～6．5)可显著增加乙醛、甲醛、丙酮醛、3-脱氧葡萄糖醛酮(3-deoxy-glucosone，3-DG)，3、4-双脱氧葡萄糖酮醛-3-烯(3，4-dideoxyglucosone-3-ene，3，4-DGE)、5-羟甲基糠醛等GDPs的产生。当GDPs进入腹腔时，将损伤腹膜间皮细胞功能，导致大量细胞因子如IL-6、TGF-β，VEGF等产生。因此如腹膜组织长期暴露于高GDPs的腹膜透析液中会诱导并加重腹膜间皮细胞转分化和新生血管形成；另外，GDPs还能将非酶类物质结合到蛋白和脂质，进而形成糖基化终末产物(advanced glycation end products，AGE)，AGE结合到含有AGE受体(RAGE)的腹膜间皮细胞层，加重腹膜损伤，并且AGE可进入血液循环，加重动脉粥样硬化和淀粉样变等，因此传统腹膜透析液的长期应用会导致腹膜超滤功能和PD技术的失败，由于普遍认为5-羟甲基糠醛（5-HMF）为葡萄糖降解产物(GDPs)的代表，所以在葡萄糖液体制剂中普遍5-羟甲基糠醛（5-HMF）作为评价指标。虽然葡萄糖具有上述不足，但是目前由于其他渗透剂还不成熟，文献《腹膜透析液的研制概况》（朱洪，中国医院药学杂志，2000，第5期）指出氨基酸、葡萄糖聚合体、小分子晶体甘油、山梨糖醇、木糖醇及果糖、大分子胶体明胶、多聚阳离子、右旋糖酐及多肽都可作为渗透剂，但到目前为止尚没有发现可替代葡萄糖的渗透剂。

目前普遍认为葡萄糖溶液在酸性条件下稳定，而且文献报道（pH值对五种大输液稳定性的影响，实用医技杂志，2007，8，3236）葡萄糖溶液半成品pH值越高，成品pH值下降幅度越大，含量下降的越大，5-羟甲基糠醛(5-HMF)产生的越多，药液变色越深，同时其他文献也有类似报道（PH值对葡萄糖注射液稳定性的影响，现代中西医结合杂志，1999,8,1221），中国药典（2010版）中对于葡萄糖注射液PH要求范围为3.2-6.5，对于葡萄糖氯化钠注射液PH要求范围为3.5-5.5，也说明了上述观点。正是由于腹膜透析液的PH值均≤7，腹膜透析液在使用中出现了一些问题，首先正常人的体液基本上处于弱碱性，例如血液pH值在7.35～7.45、组织液的pH值7.0～7.5、细胞液的pH值7.20～7.45，PH值均≤7的腹膜透析液与体液差距较大会造成较大的刺激性，对腹膜造成损伤，其次终末期肾衰竭患者往往均有酸中毒的问题，长期使用酸性的传统腹膜透析液无疑会加重这一点。

另外腹膜透析液中还含有大量的二价钙、镁离子作为缓冲盐，一般认为在碱性条件下透析液中的钙盐、镁盐会与碱基，如氢氧根、碳酸根发生反应造成沉淀。

正是由于葡萄糖、二价钙、镁离子的缓冲盐稳定性的要求，研究人员一直困惑于药物的效果、稳定性、刺激性、不良反应之间不可兼得，无法取舍，所以为了保证目前腹膜透析液还是以葡萄糖为促渗剂，以价钙、镁离子为缓冲盐，所以腹膜透析液PH值还是≤7。

所以目前腹膜透析液的PH值均≤7，即使是加入碱基也是通过双室袋系统的方法解决，即将碱基与其他二价钙、镁离子分别在双室袋中存放，在使用时将碱基与二价离子相混合，但该种方法成本较高，同时碳酸氢盐与二价钙、镁离子在混匀中易出现局部过饱和现象，增加不溶微粒产生的可能，而且还无法检测，增加了患者的风险。

发明内容

本发明中“腹膜透析液（乳酸盐）”名称为国家食品药品监督管理局为该类透析液统一规定的名称，具体见国家食品药品监督管理局标准YBH12272006，以下可以将腹膜透析液（乳酸盐）简称为腹膜透析液。

经过文献查阅和研究，我们发现实际上葡萄糖无论在酸性条件还是碱性条件存储一定时间后均会发生降解反应，在酸性条件（尤其是高温下）5-羟甲基糠醛降解反应相对较小，过去为了强调产品的稳定性，所以一直将葡萄糖类的腹膜透析液的PH控制在酸性条件下，但是酸性会对人体的腹膜、体液造成不良影响，同时影响腹膜的葡萄糖降解产物还包括甲醛、乙醛等毒性更高的物质，5-羟甲基糠醛只是葡萄糖降解产物中的一种，在葡萄糖降解产物中仅测定5-羟甲基糠醛并以该物质作为产品质量的指标存在一定的片面性，实际上甲醛、乙醛等物质的毒性远超5-羟甲基糠醛。通过稳定性实验可知4个月的加速试验中弱碱性腹膜透析液（乳酸盐）与酸性的相比5-羟甲基糠醛相对较多，但是毒性更大的甲醛、乙醛却更小，降解产物产生的毒性总体上差距不大，而经过12个月的常温稳定性试验后的弱碱性腹膜透析液（乳酸盐）与酸性的相比5-羟甲基糠醛、毒性更大的甲醛、乙醛增加的更少，降解产物产生的毒性总体上更少，所以我们通过在腹膜损害实验发现PH值在7.3-7.7的弱碱性腹膜透析液（乳酸盐）与同样处方的PH≤7的酸性腹膜透析液（乳酸盐）相比对腹膜的影响更小。而PH值在7.3-7.7的弱碱性腹膜透析液（乳酸盐）还可以提高长期使用酸性腹膜透析液（乳酸盐）造成的血液PH值下降的问题，有利于缓解体内酸性的蓄积。

同时在弱碱性条件下，碱基与其他二价钙、镁离子在低浓度条件下可以不形成沉淀。

同时在制备中，原有工艺是在腹膜透析液配置好后调节PH值为碱性情况下进行高温灭菌，造成碱性条件下降解产物较酸性条件更多，而本发明中则是将腹膜透析液配置好后，与碱性调节液分别高温灭菌，而后混合的方法从而避免了碱性条件下高温灭菌造成的降解产物增加的问题，而采用低浓度、缓慢加入的方法可以避免碱基与二价钙、镁离子形成沉淀。

一种含有1.5-4.25％的葡萄糖，0.4-0.7％的氯化钠，0.02-0.03％的氯化钙，0.01-0.02％的氯化镁，以及0.4-0.6％的乳酸钠和水的用无机碱调节PH值至7.3-7.7的腹膜透析液的制备方法，其特征在于制备方法为：

浓液配制：取处方量部分的水，加入处方量的其他成分搅拌至全部溶解后，经0.22μm终端过滤后灭菌，得到备用浓液。

碱液配制：配置含量≤0.05%无机碱溶液，经0.22μm终端过滤后，灭菌，得到碱液备用。

混合：将浓液、碱液匀速混合，通过碱液、水，调节溶液PH值至7.3-7.7和100%规定体积，后经0.22μm终端过滤后灌封。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是浓液配制中处方量部分注射用水的量小于等于处方量注射用水的15%。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是浓液配制、碱液配制中过滤前加入0.1-1%的药用炭搅拌均匀。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是制备过程中采用氮气保护。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是PH值调节为7.3-7.6。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是PH值调节为7.4。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是腹膜透析液中还含有0.001％～0.01％的焦亚硫酸钠、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是氯化钠的含量为0.56％，氯化钙的含量为0.026％，氯化镁的含量为0.015％，乳酸钠的含量为0.5%，焦亚硫酸钠的含量为0.005％，葡萄糖的含量为1.5%、2.5%或4.25％。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是碱液配制中的无机碱为钠盐。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是碱液配制中的无机碱为氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、醋酸钠中的一种或几种。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是碱液配制中的无机碱为氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠中的一种或几种。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是碱液配制中的无机碱为氢氧化钠、碳酸氢钠中的一种或几种。

如上述的腹膜透析液制备方法，其特征是碱液配制中的无机碱为碳酸氢钠。

如上述的腹膜透析液的制备方法，其特征在于浓液配制或碱液配制中的灭菌方法为高温或高温高压。

如上述的腹膜透析液的制备方法，其特征在于浓液配制或碱液配制中的灭菌方法为115℃蒸汽灭菌10-15分钟。

在没有特别说明的情况下，本发明中组合物的含量为重量体积比，例如0.4-0.7％的氯化钠是100ml水中有0.4-.07g的氯化钠。

本发明中的葡萄糖、氯化钙、氯化镁的含量分别以葡萄糖一水合物、氯化钙二水合物、氯化镁六水合物计算，例如1.5-4.25％的葡萄糖实际上是1.5-4.25％葡萄糖一水合物，例如1.5-4.25％的葡萄糖是100ml水含中有1.5-4.25g的葡萄糖一水合物，而不是100ml水含中有1.5-4.25g的葡萄糖。

实施例

在没有特别说明的情况下，实施例中的葡萄糖、氯化钙、氯化镁分别是指葡萄糖一水合物、氯化钙二水合物、氯化镁六水合物。

制剂实施例1

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	1-1	1-2	1-3
				葡萄糖(g)	15	15	15
氯化钠(g)	4	5.6	7
				氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2
				乳酸钠（g）	4	5	6
PH	7.7	7.4	7.3

1.浓液配制：取处方量10％的注射用水，加入处方量的其他成分搅拌至全部溶解后，然后加入药用炭0.1～1%搅拌均匀后，放置10～20分钟后经0.22μm终端过滤后115℃蒸汽灭菌15分钟，得到备用浓液。

2.碱液配制：配置含量低于0.05%碳酸氢钠溶液，然后加入药用炭0.1～1%搅拌均匀后，放置10～20分钟后经0.22μm终端过滤后，115℃蒸汽灭菌10分钟，得到碱液备用。

3、将浓液、碱液匀速混合，通过碱液、注射用水，调节溶液至1000ml，PH值为上表中的数值，后经0.22μm终端过滤后灌封（每袋1000ml或2000ml）。

在制备过程步骤3中注意混合速度，不得出现沉淀。

在配制和灌封时采用氮气保护。

4、灭菌：115℃恒温10分钟

在配制和灌封时采用氮气保护。

制剂实施例2

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	2-1	2-2	2-3
				葡萄糖(g)	15	15	15
氯化钠(g)	4	5.6	7
				氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2
				乳酸钠（g）	4	5	6
PH	7.7	7.4	7.3

制备方法同实施例1，但碱液为0.01%氢氧化钠。

制剂实施例3

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	3-1	3-2	3-3
				葡萄糖(g)	25	25	25
氯化钠(g)	4	5.6	7
				氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2
				乳酸钠（g）	4	5	6
PH	7.7	7.4	7.3

制备方法同实施例1。

制剂实施例4

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	4-1	4-2	4-3
				葡萄糖(g)	25	25	25
氯化钠(g)	4	5.6	7
				氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2
				乳酸钠（g）	4	5	6
PH	7.7	7.4	7.3

制备方法同实施例1，但碱液为0.01%氢氧化钠。

制剂实施例5

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号

5-1

5-2

5-3

葡萄糖(g)	42.5	42.5	42.5
				氯化钠(g)	4	5.6	7
氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3
				氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2
乳酸钠（g）	4	5	6
				PH	7.7	7.4	7.3

制备方法同实施例1。

制剂实施例6

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	6-1	6-2	6-3
				葡萄糖(g)	42.5	42.5	42.5
氯化钠(g)	4	5.6	7
				氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2
				乳酸钠（g）	4	5	6
PH	7.7	7.4	7.3

制备方法同实施例1，但碱液为0.01%氢氧化钠。

制剂实施例7

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	7-1	7-2	7-3
				葡萄糖(g)	15	15	15
氯化钠(g)	4	5.6	7
				氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2
				乳酸钠（g）	4	5	6
PH	7.7	7.4	7.3

制备方法：取处方量50％的注射用水，加入处方量的其他成分搅拌至全部溶解后，用含量低于0.05%调节碳酸氢钠溶液（碱液）、注射用水调节PH值为上表中的数值且体积定容为总量的100%，然后加入药用炭0.1～1%搅拌均匀后，放置10～20分钟后经0.22μm终端过滤后115℃蒸汽灭菌20分钟，灌封（每袋1000ml或2000ml）。

在制备过程步骤中碱液与含药液混合式注意混合速度，不得出现沉淀。

在配制和灌封时采用氮气保护。

制剂实施例8

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号

8-1

8-2

8-3

葡萄糖(g)	42.5	42.5	42.5
				氯化钠(g)	4	5.6	7
氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3
				氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2
乳酸钠（g）	4	5	6
				PH	7.7	7.4	7.3

制备方法同实施例7，但碱液为0.01%氢氧化钠。

制剂实施例9

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	9-1	9-2	9-3	9-4	9-5
						葡萄糖(g)	42.5	42.5	42.5	42.5	42.5
氯化钠(g)	4	5.6	7	5.6	5.6
						氯化钙（g）	0.2	0.25	0.3	0.25	0.25
氯化镁（g）	0.1	0.15	0.2	0.15	0.15
						乳酸钠（g）	4	5	6	5	5
焦亚硫酸钠（g）	0.01	0.05	0.1
						亚硫酸钠（g）				0.05
亚硫酸氢钠（g）					0.05
						PH	7.7	7.4	7.3	7.4	7.4

制备方法同实施例1。

对照实施例1

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	1-1	1-3
			葡萄糖(g)	15	15
氯化钠(g)	4	7
			氯化钙（g）	0.2	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.2
			乳酸钠（g）	4	6
PH	3.5	6.5

1.浓液配制：取20%注射用水，放入称好的葡萄糖、氯化钠、氯化钙、氯化镁、乳酸钠搅拌使溶解，加热至全部溶解后，用5%HCl溶液、注射用水调节PH值如上表并定容至全量。然后加入药用炭0.1～1%（g/ml）搅拌均匀后，药液经0.22μm终端过滤器过滤至可见异物合格后灌封（每袋1000ml或2000ml）

2.灭菌：115℃恒温20分钟

在配制和灌封时采用氮气保护。

对照实施例3

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	3-1	3-3
			葡萄糖(g)	25	25
氯化钠(g)	4	7
			氯化钙（g）	0.2	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.2
			乳酸钠（g）	4	6
PH	3.5	6.5

制备方法同对照实施例1。

对照实施例5

配方如下表，分装规格为1000ml/袋，表中数据为折合每袋透析液的配方

实施例编号	5-1	5-3
			葡萄糖(g)	42.5	42.5
氯化钠(g)	4	7
			氯化钙（g）	0.2	0.3
氯化镁（g）	0.1	0.2
			乳酸钠（g）	4	6
PH	3.5	6.5

制备方法同对照实施例1。

稳定性试验1

将实施例、对照实施例得到的腹膜透析液（使用同一批次的原料药、辅料、注射用水）按照组号分组，每组10袋，每袋100ml，在恒温加速试验、常温长期试验条件下分别存储，在规定时间进行检测。

1、测定5-羟甲基糠醛、乙醛、甲醛的量。

恒温加速试验条件:按市售包装，在温度40℃±2℃，相对湿度75%±5%的条件下放置。

常温长期试验条件:市售包装，在温度25℃±2℃，相对湿度60%±10%的条件下放置。

乙醛、甲醛的含量采用外标法气相法测定，具体条件如下：

色谱仪：惠普公司5890型气相色谱仪，FID检测器。

色谱柱：色谱柱内径2mm，长1.5mm玻璃柱，担体：硅烷化102白色单体（60-80目），固定液：SE-30

操作条件：柱温190℃、检测器：250℃，汽化室：200℃

进样量：1μl

乙醛和甲醛（两者相加）在实施例、对照实施例腹膜透析液中的含量平均值（n＝10）:

5-羟甲基糠醛含量测定方法按照国家药品标准WS₁-XG-002-2007的方法测定，测定结果为吸光度值，吸光度值越高，5-羟甲基糠醛含量越高。

5-羟甲基糠醛测定吸光度值（n＝10，mean±SD）

组号	恒温加速试验120天测定值	常温长期试验365天测定值
			实施例1-1	0.243±0.022	0.238±0.024
实施例1-2	0.230±0.024	0.227±0.025
			实施例1-3	0.239±0.025	0.234±0.023
实施例2-1	0.248±0.023	0.241±0.024
			实施例2-2	0.238±0.025	0.233±0.024
实施例2-3	0.243±0.025	0.238±0.025
			实施例3-1	0.257±0.024	0.251±0.026
实施例3-2	0.240±0.026	0.235±0.028
			实施例3-3	0.248±0.025	0.244±0.024
实施例4-1	0.268±0.025	0.260±0.025
			实施例4-2	0.249±0.027	0.243±0.025
实施例4-3	0.260±0.025	0.252±0.024
			实施例5-1	0.265±0.023	0.259±0.026
实施例5-2	0.248±0.023	0.241±0.022
			实施例5-3	0.255±0.024	0.252±0.023
实施例6-1	0.270±0.026	0.267±0.025
			实施例6-2	0.249±0.025	0.246±0.024
实施例6-3	0.264±0.023	0.260±0.025
			实施例7-2	0.292±0.023	0.284±0.025
实施例8-2	0.298±0.023	0.290±0.023
			实施例9-1	0.256±0.020	0.252±0.025
实施例9-2	0.239±0.022	0.232±0.024
			实施例9-3	0.249±0.023	0.245±0.022
实施例9-4	0.246±0.023	0.241±0.023
			实施例9-5	0.249±0.021	0.242±0.024
对照实施例1-1	0.214±0.018	0.217±0.019
			对照实施例1-3	0.221±0.020	0.220±0.018
对照实施例3-1	0.217±0.022	0.219±0.021
			对照实施例3-3	0.222±0.019	0.225±0.020
对照实施例5-1	0.220±0.021	0.222±0.020
			对照实施例5-3	0.225±0.023	0.228±0.022

通过上述检验可知，4个月的加速试验中弱碱性腹膜透析液（乳酸盐）与酸性的相比5-羟甲基糠醛相对较多，但是毒性更大的甲醛、乙醛却更小，降解产物产生的毒性总体上差距不大，而经过12个月的常温稳定性试验后的弱碱性腹膜透析液（乳酸盐）与酸性的相比5-羟甲基糠醛、毒性更大的甲醛、乙醛增加的更少，降解产物产生的毒性总体上可能更少。

同时加入焦亚硫酸钠等物质对于腹膜透析液的稳定性具有一定的作用，其中加入焦亚硫酸钠效果最好。

用国家药品标准WS₁-XG-002-2007中的分析方法测定制剂实施例1-1至8-3中的氯化钙、氯化镁含量，氯化钙、氯化镁的含量均在处方量的90-110%之间。

效果实施例中使用的实施例、对照实施例的腹膜透析液，均是在温度25℃±2℃，相对湿度60%±10%的条件下放置12个月的产品。

效果实施例1腹膜影响试验

实验动物：SD大鼠，雄性，体重200±10g

试验方法：将大鼠随机分组，每组10只，空白组每天接受生理盐水2O ml腹腔注射，实施例1-1至8-3组对大鼠给予实施例组相应组号的腹膜透析液腹腔注射，每天100ml/Kg，对照组1-1至5-3组对大鼠给予对照实施例组相应组号中的腹膜透析液腹腔注射，每天100ml/Kg，连续注射28天。第29、30天停止注射，第31天测定动物腹膜功能，每只大鼠用10％水合氯醛麻醉后腹腔注射4.25％葡萄糖腹膜透析液25ml，4h后沿腹白线剪开腹壁，准确量取腹腔内液体，同时留取0和4h腹透液及血液标本。血液标本以5000转／分离心10分钟，腹透液标本以1500转／分离心5分钟，用全自动生化分析仪测定葡萄糖浓度。

超滤量(ultrafiltration，UF)=(最后出水量-25)；

葡萄糖转运量(mass transfer of glucose，MTG)=(透析液初始葡萄糖浓度×注入透析液量)-(透析末葡萄糖浓度×终末透析液出量)。

之后处死动物，对壁层腹膜组织进行HE（苏木精-伊红染色法）、Masson染色，测定腹膜厚度。Masson染色步骤：石蜡包埋组织切成3m切片，脱蜡至水，天青石兰染液染6～10min，流水冲洗，Weiger氏铁苏木素液染5～10min，流水冲洗，丽春红酸性品红液(2：1)染l5～20min，1％磷钼酸水溶液及1％冰醋酸快速分化，亮绿溶液染色2～10min，再次用磷钼酸水溶液以及冰醋酸快速分化，95％酒精脱水，烤干，二甲苯透明，中性树胶封片。取12个高倍视野测定腹膜厚度，取平均值作为判定腹膜厚度的标准。

结果：

各组大鼠4周后腹膜厚度、葡萄糖转运量、超滤量比较（n＝10，mean±SD）

组号	腹膜厚度（μm）	超滤量（ml）	葡萄糖转运量（mmol/kg）
				空白组	13.71±1.45	7.97±0.89	12.98±0.42
实施例1-1	20.84±1.53	4.59±0.38	14.51±0.48
				实施例1-2	20.02±1.49	4.90±0.42	14.15±0.49
实施例1-3	20.31±1.42	4.72±0.43	14.32±0.47
				实施例2-1	21.48±1.38	4.31±0.46	14.82±0.45
实施例2-2	21.16±1.40	4.52±0.41	14.53±0.41

实施例2-3	21.37±1.37	4.45±0.39	14.63±0.52
				实施例3-1	23.05±1.52	4.08±0.43	14.79±0.51
实施例3-2	22.22±1.45	4.21±0.40	14.49±0.42
				实施例3-3	22.69±1.39	4.15±0.44	14.68±0.45
实施例4-1	23.98±1.53	3.92±0.35	14.90±0.48
				实施例4-2	23.01±1.51	4.09±0.37	14.77±0.45
实施例4-3	23.38±1.46	4.04±0.38	14.84±0.47
				实施例5-1	25.35±1.48	3.70±0.34	15.41±0.47
实施例5-2	24.86±1.50	3.91±0.36	15.18±0.46
				实施例5-3	24.99±1.41	3.86±0.37	15.21±0.52
实施例6-1	26.09±1.62	3.55±0.33	15.76±0.46
				实施例6-2	25.27±1.59	3.69±0.35	15.30±0.42
实施例6-3	25.86±1.51	3.67±0.35	15.51±0.50
				实施例7-1	22.83±1.43	3.82±0.39	14.83±0.49
实施例7-2	21.92±1.31	4.07±0.40	14.41±0.51
				实施例7-3	22.18±1.40	3.94±0.38	14.62±0.48
实施例8-1	28.17±1.38	3.32±0.31	16.53±0.55
				实施例8-2	27.22±1.31	3.53±0.31	15.91±0.54
实施例8-3	27.53±1.40	3.47±0.33	16.03±0.56
				对照实施例1-1	25.48±1.36	3.55±0.39	15.43±0.59
对照实施例1-3	24.76±1.43	3.81±0.42	15.16±0.51
				对照实施例3-1	28.91±1.50	3.13±0.38	16.68±0.52
对照实施例3-3	27.68±1.41	3.28±0.41	16.24±0.48
				对照实施例5-1	31.88±1.59	2.75±0.37	17.52±0.61
对照实施例5-3	30.79±1.51	2.87±0.32	17.10±0.63

通过上述实验证明，碱性腹膜透析液与酸性的相比对腹膜增厚的影响更小，同时超滤量、葡萄糖转运量更接近于正常生理状况，同时PH在7.4左右较7.7、7.3效果更好。另外本实验结果可以推断5-羟甲基糠醛指标不是造成腹膜影响的关键指标，而PH值、甲醛、乙醛等其他高毒性葡萄糖降解产物具有更大的影响力。

效果实施例2血液PH恢复试验

实验动物：SD大鼠，雄性，体重200±10g

腹膜透析造成腹膜受损大鼠模型制备方法：对大鼠腹腔注射对照制剂实施例5-1组腹膜透析液，每天100ml/Kg，连续注射28天，第29、30天停止注射，第31天存活大鼠视为造模成功。

试验方法：将腹膜透析造成腹膜受损造模成功大鼠随机分组，每组10只，基础组直接测定一组大鼠左侧劲动脉血的PH值，空白组每天接受生理盐水2O ml腹腔注射，实施例1-1至8-3组对大鼠腹腔注射实施例组相应组号的腹膜透析液，每天100ml/Kg，对照组1-1至5-3组对大鼠给予对照实施例组相应组号中的腹膜透析液腹腔注射，每天100ml/Kg，连续注射14天，停止注射1天后测定各组大鼠左侧劲动脉血的PH值。取造模前的健康大鼠10只设为健康组，测定大鼠左侧劲动脉血的PH值。

大鼠左侧劲动脉血的PH值使用血气分析仪分析。

实验结果（n＝10，mean±SD）

组号	PH
		健康组	7.40±0.09
基础组	7.27±0.10
		空白组	7.28±0.08
实施例1-1	7.36±0.06
		实施例1-2	7.35±0.07
实施例1-3	7.34±0.09
		实施例2-1	7.37±0.07
实施例2-2	7.36±0.09
		实施例2-3	7.35±0.08
实施例3-1	7.35±0.10
		实施例3-2	7.35±0.08
实施例3-3	7.33±0.09
		实施例4-1	7.36±0.07
实施例4-2	7.36±0.07
		实施例4-3	7.35±0.10
实施例5-1	7.34±0.08
		实施例5-2	7.34±0.11
实施例5-3	7.31±0.10
		实施例6-1	7.35±0.08
实施例6-2	7.34±0.07
		实施例6-3	7.32±0.09
实施例7-1	7.35±0.09
		实施例7-2	7.34±0.08
实施例7-3	7.33±0.10
		实施例8-1	7.36±0.08
实施例8-2	7.36±0.07
		实施例8-3	7.35±0.09

对照实施例1-1	7.20±0.08
		对照实施例1-3	7.23±0.09
对照实施例3-1	7.19±0.09
		对照实施例3-3	7.23±0.10
对照实施例5-1	7.18±0.08
		对照实施例5-3	7.21±0.09

Claims (10)

1.一种含有1.5-4.25％的葡萄糖，0.4-0.7％的氯化钠，0.02-0.03％的氯化钙，0.01-0.02％的氯化镁，以及0.4-0.6％的乳酸钠和水的用无机碱调节PH值至7.3-7.7的腹膜透析液（乳酸盐）（组合物）的制备方法，其特征在于制备方法为：

浓液配制：取处方量部分的水，加入处方量的其他成分搅拌至全部溶解后，经0.22μm终端过滤后灭菌，得到备用浓液。

碱液配制：配置含量≤0.05%无机碱溶液，经0.22μm终端过滤后，灭菌，得到碱液备用。

混合：将浓液、碱液匀速混合，通过碱液、水，调节溶液PH值至7.3-7.7和100%规定体积，后经0.22μm终端过滤后灌封。

2.如权利要求1所述的腹膜透析液制备方法，其特征是浓液配制中处方量部分注射用水的量小于等于处方量注射用水的15%。

3.如权利要求1所述的腹膜透析液制备方法，其特征是浓液配制、碱液配制中过滤前加入0.1-1%的药用炭搅拌均匀。

4.如权利要求1所述的腹膜透析液制备方法，其特征是制备过程中采用氮气保护。

5.如权利要求1所述的腹膜透析液制备方法，其特征是PH值调节为7.3-7.6。

6.如权利要求1所述的腹膜透析液制备方法，其特征是PH值调节为7.4。

7.如权利要求1所述的腹膜透析液制备方法，其特征是腹膜透析液中还含有0.001％～0.01％的焦亚硫酸钠、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠。

8.如权利要求1所述的腹膜透析液制备方法，其特征是氯化钠的含量为0.56％，氯化钙的含量为0.026％，氯化镁的含量为0.015％，乳酸钠的含量为0.5%，焦亚硫酸钠的含量为0.005％，葡萄糖的含量为1.5%、2.5%或4.25％。

9.如权利要求1所述的腹膜透析液制备方法，其特征是碱液配制中的无机碱为氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、醋酸钠中的一种或几种。

10.如权利要求1所述的腹膜透析液的制备方法，其特征在于浓液配制或碱液配制中的灭菌方法为高温或高温高压。