CN104634963A - 一种基于聚乙二醇修饰的传感器及其检测凝血酶的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种基于聚乙二醇修饰的传感器及其检测凝血酶的方法，具体涉及一种基于聚乙二醇修饰的石墨烯氧化物—核酸适配体传感器及其检测凝血酶的方法，属于生物医学领域中的蛋白质检测方法；本发明的技术方案主要包括：1）制备具有石墨烯氧化物；2）把FAM标记的核酸适配体加入到聚乙二醇通过自组装修饰后的石墨烯氧化物上；3）加入不同浓度的凝血酶，通过石墨烯氧化物表面吸附的核酸适配体标记荧光的强度的变化，进行检测。本发明充分利用石墨烯氧化物淬灭荧光的特性，采用FAM标记的核酸适配体序列与凝血酶特异性结合，通过FAM荧光的淬灭与恢复，能高灵敏度、快速、低成本地实现凝血酶的微量检测，通过加入聚乙二醇，将石墨烯氧化物-核酸适配体传感器对凝血酶检测限提高至0.01nM。

Description

一种基于聚乙二醇修饰的传感器及其检测凝血酶的方法
技术领域
本发明涉及一种基于聚乙二醇修饰的传感器及其检测凝血酶（thrombin）的方法，具体涉及一种基于聚乙二醇（PEG）修饰的石墨烯氧化物（GO）—核酸适配体（aptamer）传感器及其检测凝血酶的方法，属于生物医学领域中的蛋白质检测方法。
背景技术
人的凝血酶是凝血连锁反应的主要效应蛋白酶。除了能够切割纤维蛋白原外，还发现能够特异性切割人类免疫缺陷病毒-1型（HIV-1）V3环保守的冠部并促进HIV-1介导的细胞融合；此外，thrombin及细胞表面thrombin受体表达的上调可能与HIV-1相关脑病的发生相关，thrombin在凝血系统的许多疾病中发挥着关键性作用。过量表达thrombin能够导致血栓形成，但是它若表达不足则可能导致血友病。因此，准确地监控thrombin对于确定给定病人的合适治疗方法是至关重要的( Liu S., Zhang X. Y., Luo W. X., Wang Z. X., Guo X. F., Steigerwald M. L., Fang X. H., Single-Molecule Detection of Proteins Using Aptamer-Functionalized Molecular Electronic Devices, Angewandate Chemie International Edition, 2011, 50 : 2496-2502.)。
GO制备简单，成本比较低，从而在生物检测中得到广泛的应用，而且GO在与DNA相互作用时，有一个重要的特点，单链DNA通过π－π效应，能吸附到GO表面(Qian, Z. S., Shan, X. Y., Chai, L. J., Ma, J. J., Chen, J. R., Feng, H., Nanoscale, 2014, 6: 5671–5674.；He, Y., Jiao, B. N., Tang, H. W., RSC Advances, 2014, 35, 8294–18300.)，aptamer 是一种单链DNA，能特异性地结合thrombin，当thrombin与aptamer特异结合后，aptamer会脱离GO表面，一些研究者基于这个特点，通过荧光标记的aptamer对thrombin进行特异性检测（Wang, L., Zhu, J. B., Han, L., Jin, L. H., Zhu, C. Z., Wang, E. K., Dong, S. J., ACS Nano, 2012, 6, 6659–6666.；Bai, Y. F., Feng, F., Zhao, L., Wang, C. Y., Wang, H. Y., Tian, M. Z., Qin, J., Duan, Y., L., He, X. X., Biosensors and Bioelectronics, 2013, 47, 265–270.），但这个方法存在一个缺点：被检测的thrombin能非特异性地吸附到GO表面，从而阻止检测灵敏性的提高。为发展高灵敏、快速地、低成本地检测thrombin的方法，我们利用PEG阻止GO表面非特异性吸附的thrombin，提高检测的灵敏度，发展一种灵敏度较高的thrombin的检测方法。 发明内容
本发明目的是提供一种基于PEG修饰的GO传感器及其对thrombin的检测方法，PEG能阻止GO表面对thrombin的非特异性吸附，从而高灵敏、快速、低成本对thrombin进行检测。
一种基于PEG修饰的传感器，按照以下方法制备：
（1）制备GO：通过改良的Hummers法大批量制备GO，将GO真空干燥备用，使用前，在水溶液中超声分散；
（2）PEG的修饰：加入PEG，PEG通过自组装与GO表面相结合，阻止thrombin非特异吸附，加入的PEG的浓度为50 nM；
（3）合成thrombin的aptamer：5’- GG TTG GTG TGG TTG G -3’，5’末端标记羧基荧光素（FAM）；
（4）荧光淬灭：将aptamer加入到GO水溶液中，即制备成为基于PEG修饰的检测aptamer的GO-aptamer传感器；GO能够淬灭aptamer末端标记的FAM的荧光；其中aptamer的浓度为5-40 nM；GO的浓度为6 -50 μg/mL；
（5）thrombin的检测：加入thrombin，aptamer结合thrombin后，FAM的荧光得到恢复，根据荧光强度的变化，从而对其进行检测。
基于PEG修饰的GO-aptamer传感器对thrombin检测方法为：
（1）制备GO：通过改良的Hummers法大批量制备GO，将GO真空干燥备用，使用前，在水溶液中超声分散。
（2）PEG的修饰：加入PEG，PEG通过自组装与GO表面相结合，阻止aptamer非特异吸附，加入的PEG的浓度为50 nM；
（3）合成thrombin的aptamer：5’- GG TTG GTG TGG TTG G -3’，5’末端标记FAM；
（4）荧光淬灭：将aptamer加入到含有PEG的GO水溶液中，即制备成为基于PEG修饰的检测thrombin的GO-aptamer传感器；GO能够淬灭aptamer末端标记的FAM的荧光；其中thrombin的浓度为5-40 nM；GO的浓度为6 -50 μg/mL；
（5）thrombin的检测：加入thrombin，aptamer结合thrombin后，FAM的荧光得到恢复，根据荧光强度的变化，从而对其进行检测。
本发明具有以下优点：
1. 本发明中GO易于获得，方法简单、成本低，充分利用GO能淬灭单链DNA末端标记的荧光，当蛋白质结合单链DNA后，荧光恢复的特点，能快速、特异性、高灵敏性对thrombin进行检测。
2.      本发明采用PEG阻止GO对thrombin的非特异性吸附，解决基于GO传
感器检测thrombin中的非特异吸附的问题，从而增加检测的特异性，进一步提高检测的灵敏性。
附图说明
图1：本发明的流程示意图；
 图2：基于GO传感器对thrombin灵敏性检测图；
    图3：基于GO传感器对thrombin选择性检测图；
    图4：PEG修饰GO传感器对thrombin检测的影响图；
    图5：PEG修饰GO传感器对0.03 nM thrombin检测图，图中曲线由上至下依次为aptamer、aptamer-GO-PEG-0.03nM thrombin、aptamer-GO-PEG检测结果曲线。
    图6：PEG修饰GO传感器对0.01 nM thrombin检测图，图中曲线由上至下依次为aptamer、aptamer-GO-PEG-0.01nM thrombin、aptamer-GO-PEG检测结果曲线。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明做进一步说明，实施例是用于说明本发明而不是用于限制本发明的范围。
实施例1：
    (1) 制备GO：通过改良的Hummers法大批量制备GO，在三口烧瓶中，加入3g鳞片石墨粉、1.5 g NaNO3与 69 mL浓硫酸后放入恒温水浴锅中搅拌。反应1h后加入1g KMnO4，35℃下反应5个小时后加入150 mL去离子水。在温度98℃下反应30 min后，再加入50 mL的去离子水、5 mL H2O2以及 250 mL的10%稀盐酸，将溶液倒入1000 mL的大烧杯中，洗涤至PH值为5-6。将氧化产物真空干燥备用，使用前，在水溶液中1000W超声30 min。
    （2）合成特异的aptamer序列：5’- GG TTG GTG TGG TTG G -3’，5’ 末端
标记荧光FAM，该序列在生工生物工程（上海）股份有限公司合成。
    其中图1为本发明的流程示意图，图中与thrombin结合的aptamer是G4结
构，当G4与GO吸附后，末端标记的FAM荧光淬灭，当结合thrombin后，
G4脱离GO表面而使FAM发光。
（3）荧光淬灭：向40 μg/mL GO溶液中加入20 nM的aptamer，随着时间的增加，大部分荧光被淬灭，30 min后荧光强度趋于稳定。
（4）基于GO传感器对thrombin进行检测：含40 μg/mL GO及20 nM aptamer混合物在室温下放置30 min后，（本实验中所用比色皿规格为3 mL，混合物总体积不小于2.5 mL即可，下面实施例相同）。加入不同浓度(0.1，0.15，0.2，10，20，60 nM) thrombin后，FAM荧光强度增加，30 min后对aptamer上标记的FAM进行扫描，如图2，图中FAM标记的aptamer的浓度为20 nM，GO 浓度为40 μg/mL，F/F0是加入目标检测物前与加入目标检测物后的比。检测发现，灵敏度可达到0.1 nM。
（5）选取其他与aptamer非特异作用的几个蛋白质lysozyme、BSA、IgG 进行选择性检测，在同一实验条件下，发现GO-aptamer能特异结合thrombin，并能明显区分出与其他几个蛋白的差别，如图3，实验证明该检测方法对thrombin具有良好地选择性。
（6）基于PEG（分子量为10000）修饰的GO传感器对thrombin进行检测：对40 μg/mL GO、 20 nM aptamer与不同浓度(0， 10，50，100，500，1000 nM) 的PEG混合后，室温下放置30 min后，发现在50 nM PEG下效果最好如图4，图中黑色是没有加入thrombin，白色为加入thrombin的。在此基础上对0.01 nM 的thrombin进行检测，通过Origin 8.0分析aptamer上标记的FAM强度发生变化，发现检测的灵敏度达到0.01 nM （10 pM） (图5)。
实施例2：
步骤（1）和（2）同实施例1中。
（3）荧光淬灭：向6 μg/mLGO溶液中加入5 nM的aptamer，随着时间的增加，大部分荧光被淬灭，30 min后荧光强度趋于稳定。
（4）基于PEG（分子量为10000）修饰的GO传感器对thrombin进行检测：含6 μg/mL GO、5 nM aptamer与不同浓度(0， 10，50，100，500，1000 nM) 的PEG混合后，室温下放置30 min，发现在50 nM PEG下效果最好，在此基础上对0.2 nM的thrombin进行检测，通过Origin 8.0分析aptamer上标记的FAM强度发生变化，发现检测的灵敏度达到0.2 nM （20 pM）。
实施例3：
步骤（1）和（2）同实施例1中。
（3）荧光淬灭：向50 μg/mLGO溶液中加入40 nM的aptamer，随着时间的增加，荧光被淬灭，30 min后荧光强度趋于稳定。
    （4）基于PEG（分子量为10000）修饰的GO传感器对thrombin进行检测：含50 μg/mL GO、40 nM aptamer与不同浓度(0， 10，50，100，500，1000 nM) 的PEG混合后，室温下放置30 min，发现在50 nM PEG下效果最好，在此基础上对0.15 nM的thrombin进行检测，通过Origin 8.0分析aptamer上标记的FAM强度发生变化，发现检测的灵敏度达到0.15 nM （15 pM）。

Claims (7)

1.一种基于聚乙二醇修饰的传感器，所述传感器为石墨烯氧化物—核酸适配体传感器，其特征在于，所述传感器是经过聚乙二醇修饰。
2. 一种基于聚乙二醇修饰的传感器，其特征在于，按照以下方法制备：
（1）制备石墨烯氧化物：通过改良的Hummers法大批量制备石墨烯氧化物，将石墨烯氧化物真空干燥备用，使用前，在水溶液中超声分散；
（2）聚乙二醇的修饰：加入聚乙二醇，聚乙二醇通过自组装与石墨烯氧化物表面相结合，阻止凝血酶非特异吸附；
（3）合成凝血酶的核酸适配体：5’- GG TTG GTG TGG TTG G -3’，5’末端标记羧基荧光素（FAM）；
（4）荧光淬灭：将的核酸适配体加入到石墨烯氧化物水溶液中，即制备成为基于聚乙二醇修饰的检测凝血酶的石墨烯氧化物—核酸适配体传感器；石墨烯氧化物能够淬灭核酸适配体末端标记的FAM的荧光。
3. 根据权利要求2所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器，其特征在于，步骤（2）中所述加入的聚乙二醇的浓度为50 nM。
4. 根据权利要求2所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器，其特征在于，步骤（3）中所述核酸适配体的浓度为5-40 nM；石墨烯氧化物的浓度为6 -50 μg/mL。
5. 如权利要求1所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器检测凝血酶的方法，其特征在于，按照以下步骤进行：
（1）制备石墨烯氧化物：通过改良的Hummers法大批量制备石墨烯氧化物，将石墨烯氧化物真空干燥备用，使用前，在水溶液中超声分散；
（2）聚乙二醇的修饰：加入聚乙二醇，聚乙二醇通过自组装与石墨烯氧化物表面相结合，阻止凝血酶非特异吸附；
（3）合成凝血酶的核酸适配体：5’- GG TTG GTG TGG TTG G -3’，5’末端标记羧基荧光素（FAM）；
（4）荧光淬灭：将核酸适配体加入到石墨烯氧化物水溶液中，即制备成为基于聚乙二醇修饰的检测凝血酶的石墨烯氧化物—核酸适配体传感器；石墨烯氧化物能够淬灭核酸适配体末端标记的FAM的荧光；
（5）凝血酶的检测：加入凝血酶，核酸适配体结合凝血酶后，FAM的荧光得到恢复，根据荧光强度的变化，从而对其进行检测。
6. 根据权利要求5所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器检测凝血酶的方法，其特征在于，步骤（2）中所述加入的聚乙二醇的浓度为50 nM。
7. 根据权利要求5所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器检测凝血酶的方法，其特征在于，步骤（3）中所述核酸适配体的浓度为5-40 nM；石墨烯氧化物的浓度为6 -50 μg/mL。
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Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105200119A (zh) * 2015-10-22 2015-12-30 江苏大学 一种基于石墨烯氧化物传感器及其制备方法和应用
CN105891174A (zh) * 2016-03-31 2016-08-24 广东工业大学 一种检测奶制品中β-内酰胺酶核酸适配体传感器及其制备方法和应用
CN106290831A (zh) * 2016-08-02 2017-01-04 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 一种基于抗原‑适配体的竞争法检测试纸条及其应用
CN106520913A (zh) * 2016-09-22 2017-03-22 江苏大学 基于酶切循环放大的石墨烯氧化物‑dna传感器的制备方法和在检测凝血酶上的应用
CN107764790A (zh) * 2017-10-10 2018-03-06 广西师范学院 基于酶与氧化石墨烯适配体传感器检测凝血酶的方法
CN108139391A (zh) * 2015-10-02 2018-06-08 雷莫内克斯生物制药有限公司 含有水溶性聚合物缀合的纳米材料的猝灭剂和其用途
CN109725165A (zh) * 2018-12-20 2019-05-07 江苏大学 一种基于多胞嘧啶的核酸适配体检测可卡因的方法
CN113252631A (zh) * 2021-05-13 2021-08-13 青岛农业大学 双重检测丙溴磷农药的荧光比色核酸适配体传感器、其制备方法与应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102274521A (zh) * 2011-08-25 2011-12-14 天津医科大学 基于氧化石墨烯的靶向性基因载体材料及制备和应用
CN102530935A (zh) * 2012-01-09 2012-07-04 苏州大学 聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰的氧化石墨烯及其制备方法
CN103784407A (zh) * 2014-02-26 2014-05-14 哈尔滨医科大学 一种叶酸介导的peg-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒及其制备方法
CN103861118A (zh) * 2014-03-24 2014-06-18 吉林大学 石墨烯－CpG制备方法及应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102274521A (zh) * 2011-08-25 2011-12-14 天津医科大学 基于氧化石墨烯的靶向性基因载体材料及制备和应用
CN102530935A (zh) * 2012-01-09 2012-07-04 苏州大学 聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰的氧化石墨烯及其制备方法
CN103784407A (zh) * 2014-02-26 2014-05-14 哈尔滨医科大学 一种叶酸介导的peg-氧化石墨烯负载阿霉素纳米粒及其制备方法
CN103861118A (zh) * 2014-03-24 2014-06-18 吉林大学 石墨烯－CpG制备方法及应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HAIXIN CHANG, ET AL.: "Graphene Fluorescence Resonance Energy Transfer Aptasensor for the Thrombin Detection", 《ANAL. CHEM.》 *
谢亚莉: "功能化氧化石墨烯的制备及其应用于多肽和蛋白质的检测研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）工程科技I辑》 *

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108139391A (zh) * 2015-10-02 2018-06-08 雷莫内克斯生物制药有限公司 含有水溶性聚合物缀合的纳米材料的猝灭剂和其用途
CN105200119A (zh) * 2015-10-22 2015-12-30 江苏大学 一种基于石墨烯氧化物传感器及其制备方法和应用
CN105200119B (zh) * 2015-10-22 2019-04-02 江苏大学 一种基于石墨烯氧化物传感器及其制备方法和应用
CN105891174A (zh) * 2016-03-31 2016-08-24 广东工业大学 一种检测奶制品中β-内酰胺酶核酸适配体传感器及其制备方法和应用
CN106290831A (zh) * 2016-08-02 2017-01-04 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 一种基于抗原‑适配体的竞争法检测试纸条及其应用
CN106520913A (zh) * 2016-09-22 2017-03-22 江苏大学 基于酶切循环放大的石墨烯氧化物‑dna传感器的制备方法和在检测凝血酶上的应用
CN107764790A (zh) * 2017-10-10 2018-03-06 广西师范学院 基于酶与氧化石墨烯适配体传感器检测凝血酶的方法
CN107764790B (zh) * 2017-10-10 2020-01-10 广西师范学院 基于酶与氧化石墨烯适配体传感器检测凝血酶的方法
CN109725165A (zh) * 2018-12-20 2019-05-07 江苏大学 一种基于多胞嘧啶的核酸适配体检测可卡因的方法
CN109725165B (zh) * 2018-12-20 2022-03-22 江苏大学 一种基于多胞嘧啶的核酸适配体检测可卡因的方法
CN113252631A (zh) * 2021-05-13 2021-08-13 青岛农业大学 双重检测丙溴磷农药的荧光比色核酸适配体传感器、其制备方法与应用
CN113252631B (zh) * 2021-05-13 2022-04-22 青岛农业大学 双重检测丙溴磷农药的荧光比色核酸适配体传感器、其制备方法与应用

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