CN104628876A - 一种余甘子多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种余甘子多糖的提取方法，将新鲜的余甘子清洗后破碎、超声浸提、减压抽滤、真空浓缩、乙醇分级沉淀、真空干燥，得到粗多糖；粗多糖加水溶解去除蛋白质、乙醇分级沉淀、减压抽滤、真空干燥，得到纯化的余甘子多糖。本发明操作过程简单，成本低，提取得到的多糖，纯度高，适用于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种多糖的提取方法，具体是一种余甘子多糖的提取方法。
背景技术
余甘子，果实含大量维生素C，提纯可得良好的抗菌活性物质。制药可化痰，生津，止咳，解毒。主治风虚热气，补益强气。合铁粉一斤用，耐老。取子压汁，和油涂头，生发去风痒，黑发；又主治汞、硫磺、金属物伤肺，气喘咳嗽。可研末点汤服，解金石毒，硫黄毒。久服轻身，延年长寿。余甘子中含有丰富的多糖，提取多糖进一步提高余甘子的附加值。经检索，已经发表的文章：攀枝花余甘子多糖的提取研究虽然是对余甘子的多糖进行提取，但其提取过程只是粗提，并未提高多糖的纯度。
发明内容
本发明的目的在于提供一种纯度高的余甘子多糖的提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种余甘子多糖的提取方法，具体步骤包括：
(1)将新鲜的余甘子清洗后破碎，并置于40-60℃的干燥箱中干燥16-24h；
(2)向步骤(1)中干燥的余甘子加入蒸馏水并在常温下进行超声浸提2-4次，每次30-40min，得到浸提液；
(3)将步骤(2)中浸提液进行减压抽滤，合并滤液，并对滤液进行真空浓缩，浓缩至滤液质量的1/3-1/2，得到浓缩液；
(4)向步骤(3)的浓缩液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的3-4倍，静置30-50min至沉淀完全；
(5)将步骤(4)中得到的溶液进行减压抽滤，并对滤液进行真空干燥，得到粗多糖；
(6)将步骤(5)中的粗多糖加水溶解，并利用sevag法去除蛋白质，重复三次，得到去除蛋白质的多糖液；
(7)去除蛋白质的多糖液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的3-4倍，静置30-50min至沉淀完全；
(8)将步骤(7)中得到的溶液进行减压抽滤，得到多糖滤液，并对沉淀物用乙醇、丙酮与乙醚的混合液洗涤3-5次，洗涤后的溶液与多糖滤液合并，每次使用乙醇、丙酮与乙醚的混合液的加入量是沉淀物质量的1-3倍；
(9)将步骤(8)中合并的洗涤后的溶液与多糖滤液进行真空干燥，得到纯化的余甘子多糖。
作为本发明进一步的方案：步骤(3)中真空浓缩的真空度为50-60KPa，浓缩温度为50-60℃。
作为本发明进一步的方案：步骤(5)中真空干燥的真空度为50-60KPa，干燥温度为40-50℃，干燥时间为2-3h。
作为本发明进一步的方案：步骤(6)中sevag法是指向粗多糖溶液中加入0.2倍粗多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离，直至氯仿与水的界面无沉淀为止。
作为本发明进一步的方案：步骤(9)中真空干燥的真空度为50-60KPa，干燥温度为40-50℃，干燥时间为2-3h。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明操作过程简单，成本低，提取得到的多糖，纯度高，适用于工业化生产。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明实施例中，一种余甘子多糖的提取方法，具体步骤包括：
(1)将新鲜的余甘子清洗后破碎，并置于40℃的干燥箱中干燥24h；
(2)向步骤(1)中干燥的余甘子加入蒸馏水并在常温下进行超声浸提2次，每次30min，得到浸提液；
(3)将步骤(2)中浸提液进行减压抽滤，合并滤液，并对滤液进行真空浓缩，真空度为50KPa，浓缩温度为50℃，浓缩至滤液质量的1/3，得到浓缩液；
(4)向步骤(3)的浓缩液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的3倍，静置30min至沉淀完全；
(5)将步骤(4)中得到的溶液进行减压抽滤，并对滤液进行真空干燥，得到粗多糖，真空干燥的真空度为50KPa，干燥温度为40℃，干燥时间为2h；
(6)将步骤(5)中的粗多糖加水溶解，并利用sevag法去除蛋白质，重复三次，得到去除蛋白质的多糖液；
(7)去除蛋白质的多糖液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的3倍，静置30min至沉淀完全；
(8)将步骤(7)中得到的溶液进行减压抽滤，得到多糖滤液，并对沉淀物用乙醇、丙酮与乙醚的混合液洗涤3次，洗涤后的溶液与多糖滤液合并，每次使用乙醇、丙酮与乙醚的混合液的加入量是沉淀物质量的1倍；
(9)将步骤(8)中合并的洗涤后的溶液与多糖滤液进行真空干燥，得到纯化的余甘子多糖，真空干燥的真空度为50KPa，干燥温度为40℃，干燥时间为2h。
实施例2
本发明实施例中，一种余甘子多糖的提取方法，具体步骤包括：
(1)将新鲜的余甘子清洗后破碎，并置于50℃的干燥箱中干燥20h；
(2)向步骤(1)中干燥的余甘子加入蒸馏水并在常温下进行超声浸提3次，每次35min，得到浸提液；
(3)将步骤(2)中浸提液进行减压抽滤，合并滤液，并对滤液进行真空浓缩，真空度为55KPa，浓缩温度为55℃，浓缩至滤液质量的2/5，得到浓缩液；
(4)向步骤(3)的浓缩液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的3.5倍，静置40min至沉淀完全；
(5)将步骤(4)中得到的溶液进行减压抽滤，并对滤液进行真空干燥，得到粗多糖，真空干燥的真空度为55KPa，干燥温度为45℃，干燥时间为2.5h；
(6)将步骤(5)中的粗多糖加水溶解，并利用sevag法去除蛋白质，重复三次，得到去除蛋白质的多糖液；
(7)去除蛋白质的多糖液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的3.5倍，静置40min至沉淀完全；
(8)将步骤(7)中得到的溶液进行减压抽滤，得到多糖滤液，并对沉淀物用乙醇、丙酮与乙醚的混合液洗涤4次，洗涤后的溶液与多糖滤液合并，每次使用乙醇、丙酮与乙醚的混合液的加入量是沉淀物质量的2倍；
(9)将步骤(8)中合并的洗涤后的溶液与多糖滤液进行真空干燥，得到纯化的余甘子多糖，真空干燥的真空度为55KPa，干燥温度为45℃，干燥时间为2.5h。
实施例3
本发明实施例中，一种余甘子多糖的提取方法，具体步骤包括：
(1)将新鲜的余甘子清洗后破碎，并置于60℃的干燥箱中干燥16h；
(2)向步骤(1)中干燥的余甘子加入蒸馏水并在常温下进行超声浸提4次，每次40min，得到浸提液；
(3)将步骤(2)中浸提液进行减压抽滤，合并滤液，并对滤液进行真空浓缩，真空度为60KPa，浓缩温度为60℃，浓缩至滤液质量的1/2，得到浓缩液；
(4)向步骤(3)的浓缩液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的4倍，静置50min至沉淀完全；
(5)将步骤(4)中得到的溶液进行减压抽滤，并对滤液进行真空干燥，得到粗多糖，真空干燥的真空度为60KPa，干燥温度为50℃，干燥时间为3h；
(6)将步骤(5)中的粗多糖加水溶解，并利用sevag法去除蛋白质，重复三次，得到去除蛋白质的多糖液；
(7)去除蛋白质的多糖液中中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的4倍，静置50min至沉淀完全；
(8)将步骤(7)中得到的溶液进行减压抽滤，得到多糖滤液，并对沉淀物用乙醇、丙酮与乙醚的混合液洗涤5次，洗涤后的溶液与多糖滤液合并，每次使用乙醇、丙酮与乙醚的混合液的加入量是沉淀物质量的3倍；
(9)将步骤(8)中合并的洗涤后的溶液与多糖滤液进行真空干燥，得到纯化的余甘子多糖，真空干燥的真空度为60KPa，干燥温度为50℃，干燥时间为3h。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (5)
1.一种余甘子多糖的提取方法，其特征在于，具体步骤包括：
(1)将新鲜的余甘子清洗后破碎，并置于40-60℃的干燥箱中干燥16-24h；
(2)向步骤(1)中干燥的余甘子加入蒸馏水并在常温下进行超声浸提2-4次，每次30-40min，得到浸提液；
(3)将步骤(2)中浸提液进行减压抽滤，合并滤液，并对滤液进行真空浓缩，浓缩至滤液质量的1/3-1/2，得到浓缩液；
(4)向步骤(3)的浓缩液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的3-4倍，静置30-50min至沉淀完全；
(5)将步骤(4)中得到的溶液进行减压抽滤，并对滤液进行真空干燥，得到粗多糖；
(6)将步骤(5)中的粗多糖加水溶解，并利用sevag法去除蛋白质，重复三次，得到去除蛋白质的多糖液；
(7)去除蛋白质的多糖液中加入95％乙醇，95％乙醇的加入量是浓缩液质量的3-4倍，静置30-50min至沉淀完全；
(8)将步骤(7)中得到的溶液进行减压抽滤，得到多糖滤液，并对沉淀物用乙醇、丙酮与乙醚的混合液洗涤3-5次，洗涤后的溶液与多糖滤液合并，每次使用乙醇、丙酮与乙醚的混合液的加入量是沉淀物质量的1-3倍；
(9)将步骤(8)中合并的洗涤后的溶液与多糖滤液进行真空干燥，得到纯化的余甘子多糖。
2.根据权利要求1所述的余甘子多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤(3)中真空浓缩的真空度为50-60KPa，浓缩温度为50-60℃。
3.根据权利要求1所述的余甘子多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤(5)中真空干燥的真空度为50-60KPa，干燥温度为40-50℃，干燥时间为2-3h。
4.根据权利要求1所述的余甘子多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤(6)中sevag法是指向粗多糖溶液中加入0.2倍粗多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离，直至氯仿与水的界面无沉淀为止。
5.根据权利要求1所述的余甘子多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤(9)中真空干燥的真空度为50-60KPa，干燥温度为40-50℃，干燥时间为2-3h。
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| CN110698570A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-01-17 | 北京中医药大学 | 一种余甘子多糖的制备方法 |
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|---|---|---|---|---|
| CN102584968A (zh) * | 2011-12-31 | 2012-07-18 | 上海善力健生物科技有限公司 | 一种提取纯化植物大分子活性成分的方法 |
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| 高路等: "余甘子多糖提取物抗氧化活性研究", 《中国农学通报》 * |
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