CN104606265B

CN104606265B - 一种柞树叶提取物及其制备方法及应用

Info

Publication number: CN104606265B
Application number: CN201410852045.1A
Authority: CN
Inventors: 王林美; 岳冬梅; 夏兴宏; 李树英
Original assignee: DALIAN BIOTECHNOLOGY RESEARCH INSTITUTE OF LIAONING ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES
Current assignee: DALIAN BIOTECHNOLOGY RESEARCH INSTITUTE OF LIAONING ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES
Priority date: 2014-12-30
Filing date: 2014-12-30
Publication date: 2017-12-08
Anticipated expiration: 2034-12-30
Also published as: CN104606265A

Abstract

本发明涉及一种柞树叶提取物其制备方法及应用，属于提取工艺领域，所述制备方法包括如下步骤：①将柞树叶浸取，得到浸取液，浓缩浸取液；②将步骤①所得产品利用超滤得到分子量为500～5000Dr的柞树叶提取物，本发明有益效果为本发明制备的柞树叶提取物具有抑菌作用。

Description

一种柞树叶提取物及其制备方法及应用

技术领域

本发明涉及一种柞树叶提取物其制备方法及应用，属于提取工艺领域。

背景技术

柞树(Querus mongolica Fisch)为壳斗科(Fagaceae)栎属(Quercus)落叶乔木，有蒙古栎、辽东栎、麻栎、槲树等种类，叶缘有锯齿，少有全缘。雄花柔荑花序下垂，雌花单生于总苞内。坚果单生，果皮内壁无毛，不发育的胚珠位于种子基部之外侧。树干奇特苍劲，树形优美多姿，枝繁叶茂，耐修剪、易造型，经拉片造型后冠如华盖，千姿百态，神韵独具，是风景园林、庭院别墅区造型景观精品树种。全世界约有300余种，中国有60余种，柞林面积约有1亿多亩。具有耐寒、耐旱能力强，适应能力强等特点，我国主要分布在东北和华北地区，其中辽宁省柞树林有182万公顷，占林地面积的14.7％，资源极为丰富。研究发现，柞树叶除含有丰富的蛋白质、多糖、粗纤维、多种矿物质元素外，还含有单宁、黄酮类等一些生物活性物质。一直以来柞树叶主要作为柞蚕饲料被人们熟知，但实际上，很早以前就被应用于食品、药品或易于降解的食品包装材料。如辽宁、吉林、黑龙江、山东等地民间有传统著名小吃“波罗叶饼子”(柞树叶饼子)，近几年柞树叶已出口日本用于制作年糕，深受日本人欢迎，每片叶子收购价达0.6～0.7元钱。但利用柞树叶提取抑菌活性成分并用于食品防腐、外用治疗皮肤、粘膜由细菌引起的感染性疾病及果蔬保鲜防腐、化妆品外用消炎等方面未见报道。

发明内容

本发明通过对柞树叶中高效抑菌活性成分的提取，使本发明制备的柞树叶提取物可以应用于制药、卫生材料、化妆用品、洗涤用品、果蔬保鲜及食品防腐等领域。

本发明提供了一种柞树叶提取物的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

①将柞树叶浸取，得到浸取液，浓缩浸取液；

②将步骤①所得产品利用超滤得到分子量为500～5000Dr的柞树叶提取物。

本发明所述柞树叶优选为来源于麻栎、辽东栎、蒙古栎、槲树或锐齿槲栎。

本发明所述柞树叶浸取前优选为清洗、22～30℃阴干、粉碎至小于40目。

本发明所述浸取优选为将柞树叶与浸取剂按料液比为1：10～20g/mL，20～25℃浸取4～12h，浸取1～3次，过滤，离心。

本发明所述浸取剂优选为水或65～95％乙醇。

本发明所述65～95％乙醇优选为65～95％(V/V)乙醇水溶液。

本发明所述浓缩优选为当浸取剂为水时将浸取液55～65℃回流浓缩至浸取液体积的5～15％；或当浸取剂为65～95％乙醇时将浸取液55～65℃回流浓缩至浸取液体积的5～15％，得到第一次浓缩液，向第一次浓缩液中加入其5～10倍体积的水，55～65℃回流浓缩至第一次浓缩液的体积。

本发明所述超滤优选为先将步骤①所得产品利用截留分子量在5000Dr以下物质的超滤装置内，0.05～0.08MPa过滤，收取分子量在5000Dr以下的物质，再将分子量在5000Dr以下的物质利用截留分子量在500Dr以上物质的超滤装置内，0.05～0.08MPa过滤，收取分子量在500Dr以上的物质。

本发明另一方面的目的在于提供上述本发明所述制备方法得到的柞树叶提取物。

本发明所述柞树叶提取物主要成分为单宁、黄酮、多糖和叶蛋白类等活性物质。

本发明又一方面的目的在于提供上述本发明所述柞树叶提取物在抑菌上的应用。

本发明有益效果为：

①本发明有利于提高柞树资源的利用率；

②本发明浸取剂为水或65～95％乙醇，有利于降低成本，避免溶剂残留，又可重复利用溶剂；

③本发明利用超滤得到分子量为500～5000Dr的柞树叶提取物，制备方法简单易行，设备投入少，易于工业化生产；

④本发明制备的柞树叶提取物具有广谱抑菌作用；

⑤将本发明制备的柞树叶提取物加入到化妆品中，对化妆品中的易滋生菌有显著的抑制和杀灭作用，可延长化妆品的保质期；将本发明制备的柞树叶提取物加入到食品中，可作为食品防腐剂使用；本发明制备的柞树叶提取物可作为外用抑菌剂治疗皮肤、粘膜等由细菌引起的感染性疾病；将果蔬浸泡在本发明制备的柞树叶提取物中可作为保鲜防腐剂使用。

具体实施方式

下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

一种麻栎柞树叶提取物的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

①将柞树叶清洗、25℃阴干、粉碎至40目后与去离子水按料液比为1g/15mL，20℃浸取12h，浸取3次，合并，过滤，3000rpm离心10min，得到浸取液，将浸取液65℃水浴回流浓缩至浸取液体积的6.67％，得到1g/mL浓缩液；

②将步骤①所得1g/mL浓缩液用去离子水稀释成1g/10mL，过滤，将滤液利用截留分子量在5000Dr以下物质的超滤膜装置内，0.05～0.08MPa过滤收取分子量在5000Dr以下的物质，再将分子量在5000Dr以下的物质利用截留分子量在500Dr以上物质的超滤膜装置内，0.05～0.08MPa过滤收取分子量在500Dr以上的物质，得到分子量为500Dr～5000Dr的柞树叶提取物。

实施例2

一种麻栎柞树叶提取物的制备方法，与实施例1的区别为：将柞树叶清洗、25℃阴干、粉碎至40目后与65％乙醇按料液比为1g/15mL，20℃浸取12h，浸取3次，合并，过滤，3000rpm离心10min，得到浸取液，将浸取液60℃回流浓缩至浸取液体积的6.67％，得到第一次浓缩液，向第一次浓缩液中加入其10倍体积的去离子水，60℃回流浓缩至第一次浓缩液的体积，得到1g/mL浓缩液。

实施例3

一种麻栎柞树叶提取物的制备方法，与实施例1的区别为：将柞树叶清洗、25℃阴干、粉碎至40目后与75％乙醇按料液比为1g/15mL，20℃浸取12h，浸取3次，合并，过滤，3000rpm离心10min，得到浸取液，将浸取液60℃回流浓缩至浸取液体积的6.67％，得到第一次浓缩液，向第一次浓缩液中加入其10倍体积的去离子水，60℃回流浓缩至第一次浓缩液的体积，得到1g/mL浓缩液。

实施例4

一种麻栎柞树叶提取物的制备方法，与实施例1的区别为：将柞树叶清洗、25℃阴干、粉碎至40目后与85％乙醇按料液比为1g/15mL，20℃浸取12h，浸取3次，合并，过滤，3000rpm离心10min，得到浸取液，将浸取液60℃回流浓缩至浸取液体积的6.67％，得到第一次浓缩液，向第一次浓缩液中加入其10倍体积的去离子水，60℃回流浓缩至第一次浓缩液的体积，得到1g/mL浓缩液。

实施例5

一种麻栎柞树叶提取物的制备方法，与实施例1的区别为：将柞树叶清洗、25℃阴干、粉碎至40目后与95％乙醇按料液比为1g/15mL，20℃浸取12h，浸取3次，合并，过滤，3000rpm离心10min，得到浸取液，将浸取液60℃回流浓缩至浸取液体积的6.67％，得到第一次浓缩液，向第一次浓缩液中加入其10倍体积的去离子水，60℃ 回流浓缩至第一次浓缩液的体积，得到1g/mL浓缩液。

应用例1

实施例1～5制备得到的柞树叶提取物抑菌作用实验：

实验材料：样品为实施例1～5制备得到的柞树叶提取物，受试菌为金黄色葡萄球菌金黄亚种ATCC1.2465、大肠埃希氏菌ATCC1.90、普通变形杆菌ATCC1.491、痢疾志贺氏菌ATCC1.1869和肠道沙门氏菌亚种ATCC1.1190，细菌用营养肉汤和营养琼脂培养基。

实验方法：

①菌悬液的制备将金黄色葡萄球菌金黄亚种、大肠埃希氏菌、普通变形杆菌、痢疾志贺氏菌和肠道沙门氏菌亚种用相应斜面培养基活化2次，用无菌生理盐水配成菌体或孢子浓度为10⁶～10⁷cfu/mL的菌悬液；

②抑菌作用的测定选取直径为9cm的培养皿，每个培养皿加15mL培养基，移取上述各个菌悬液0.5mL分别加入各个平板上，涂布均匀，凝固后，每个培养皿等距离放置5个灭菌牛津杯，于其中分别滴加0.2mL实施例1～5制备得到的柞树叶提取物，对照加无菌生理盐水，每个菌重复实验5次，普通变形杆菌置于30℃，其余菌置于37℃培养24h，移去牛津杯，量取各个抑菌圈直径。

实施例1～5制备得到的柞树叶提取物抑菌情况见表1(抑菌圈直径为5次实验平均值)。

表1实施例1～5制备得到的柞树叶提取物抑菌情况

结论：柞树叶提取物对受试菌具有抑菌效果，尤其是75％乙醇柞树叶提取物抑菌效果最佳，75％乙醇柞树叶提取物抑菌效果的强弱顺序为：痢疾志贺氏菌﹥金黄色葡萄球菌金黄亚种﹥普通变形杆菌﹥大肠埃希氏菌﹥肠道沙门氏菌亚种。

应用例2

实施例3得到的柞树叶提取物果蔬保鲜防腐作用实验：

实验材料：供试果蔬为新鲜、色泽均匀、表面无破损的青椒、番茄、黄瓜、樱桃和葡萄。

样品处理：将供试青椒、番茄、黄瓜、樱桃和葡萄洗净、沥干后放入20倍稀释的柞树叶提取物中浸泡5min，取出晾干，装入无菌、干燥的托盘中，每个处理重复5次，28℃阴凉处存放7d。

柞树叶提取物对果蔬保鲜防腐情况见表2。

表2柞树叶提取物对果蔬保鲜防腐情况

结论：经过柞树叶提取物处理的果蔬贮藏效果明显好于未经处理的，未经处理的青椒、番茄、黄瓜、樱桃和葡萄已经出现严重失水、变软、腐烂和果枝分离现象，而经过柞树叶提取物处理的果蔬仅失水和松软，尚未出现变软和腐烂，柞树叶提取物对果蔬的初步保鲜效果明显，可延长果蔬的贮藏期。

应用例3

实施例3得到的柞树叶提取物消炎抗感染作用实验：

选取10例额头和面部长有暗疮和青春痘的患者，清洗干净额头和面部后，直接涂抹柞树叶提取物，每日3次。

结论：2～3天后痘疮收敛缩小，7天左右基本痊愈，同时采用柞树叶提取物与珍珠霜调制成膏，每天2次洗脸后涂敷整个面部，获得同样效果，并且未发现任何皮肤过敏等不良反应。

Claims

1.一种柞树叶提取物的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括如下步骤：

①将柞树叶浸取，得到浸取液，浓缩浸取液；

所述浸取为将柞树叶与浸取剂按料液比为1：10～20g/mL，20～25℃浸取4～12h，浸取1～3次；

所述浸取剂为水或65～95％乙醇；

所述浓缩为当浸取剂为水时将浸取液55～65℃回流浓缩至浸取液体积的5～15％；或当浸取剂为65～95％乙醇时将浸取液55～65℃回流浓缩至浸取液体积的5～15％，得到第一次浓缩液，向第一次浓缩液中加入其5～10倍体积的水，55～65℃回流浓缩至第一次浓缩液的体积；

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述柞树叶浸取前清洗、阴干、粉碎。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述超滤为先将步骤①所得产品利用截留分子量在5000Dr以下物质的超滤装置内，0.05～0.08MPa过滤，收取分子量在5000Dr以下的物质，再将分子量在5000Dr以下的物质利用截留分子量在500Dr以上物质的超滤装置内，0.05～0.08MPa过滤，收取分子量在500Dr以上的物质。

4.权利要求1所述制备方法得到的柞树叶提取物。

5.权利要求4所述的柞树叶提取物在制备抑菌药物上的应用。