CN104546997A

CN104546997A - 一种用于提取纯化花生壳有效部位的方法

Info

Publication number: CN104546997A
Application number: CN201310491385.1A
Authority: CN
Inventors: 吕圭源; 尹巧汕; 陈素红; 宓文佳; 雷婧
Original assignee: Zhejiang Chinese Medicine University ZCMU
Current assignee: Zhejiang Chinese Medicine University ZCMU
Priority date: 2013-10-16
Filing date: 2013-10-16
Publication date: 2015-04-29

Abstract

本发明提供一种用于提取纯化花生壳有效部位的方法，属于天然药物提取技术领域，提取得到的花生壳有效部位木犀草素纯度达到60％。具体步骤包括：(1)乙醇水溶液微压提取；(2)浓缩；(3)重结晶；(4)柱层析。本发明最大特征在于操作简单、经济，对仪器设备要求低，且生产周期较短适于工厂化生产；采用的试剂只有乙醇和水，安全可靠，得到的有效部位可以直接用于花生壳药效或药理的研究。

Description

一种用于提取纯化花生壳有效部位的方法

技术领域

本发明属于天然药物提取技术领域，具体涉及到一种用于提取纯化花生壳有效部位的方法。

背景技术

近几年来，大量文献中均指出花生壳提取物具有抗氧化、降血脂、抑制血小板聚集、降血压等作用。但很多花生壳的应用停留在粗提取物上，没有对其进行深加工及可控制质量的质控指标，技术含量和附加值都较低。

花生壳中的黄酮类物质是其主要生物活性物质，而在花生壳中含量较高的黄酮为木犀草素(Luteolin)。其结构如下：

根据文献报道木犀草素具有抗病毒、抗菌、抗肿瘤、降低血脂和胆固醇以及预防心血管疾病的作用，跟花生壳粗提取物的药效作用比较相似。根据中药中对有效部位的定义：有效部位是指当一味中药或复方中药提取物中的一类或几类化学成分的含量达到总提取物的50％以上，而且一类或几类已知化学成分被认为是有效成分。因此可以木犀草素作为质控指标来研究花生壳有效部位的药效与药理作用。

到目前为止以化学合成生产木犀草素的方法非常多，其中如公开号为CN1666987、公开号为CN1544427、公开号为CN1687054等中国专利，以化学成分或者天然提取物为原料，都达到了合成木犀草素的目的。但根据中药有效部位的定义，成分必须从中药里提取出来的一类或者几类化学成分，因此化学合成得到的木犀草素不能作为花生壳的有效部位进行研究。

公开号CN101712669的中国专利介绍了一种由超声波辅助提取木犀草素的方法，此方法因为超声波设备的限制，只能局限在小规模试验，不能工厂化生产。

公开号CN102040579的中国专利介绍了一种从花生根、花生茎、花生叶、花生壳中提取木犀草素的方法，根据其方法，需要经历多次大体积溶液溶解、浓缩过程，过程比较复杂，能耗较高。

综上所述，化学合成方法不能用于以木犀草素为质控指标的花生壳有效部位药效药理研究，公开号CN101712669中方法不能工厂化生产，而公开号CN102040579中的方法过程比较复杂，能耗较大，因此对于开发一种简便，经济且适于工厂化生产的花生壳有效部位提取纯化方法是极具意义的，可为花生壳药理药效研究提供稳定、可靠的物质基础。

发明内容

本发明提供了一种全新思路，能简单、经济且适于工厂化生产花生壳有效部位提取纯化的方法，具体的操作步骤包括以下几步：

(1)提取：用乙醇水溶液微压提取；

(2)浓缩：将提取液浓缩，静置收集沉淀；

(3)重结晶：用一定量的高浓度乙醇溶液溶解沉淀，过滤得上清液，往上清液中继续加入蒸馏水至乙醇浓度达到30％～50％，过滤得上清液，继续往上清液中加入蒸馏水至乙醇浓度达到10％～30％，过滤得沉淀，整个过程重复2～4次；

(4)柱洗脱：用40％-70％乙醇溶液溶解上一步骤得到的沉淀，溶液通过D-101大孔树脂直接收集洗脱液，浓缩至干即为成品，所得的沉淀中木犀草素含量约为60％。

具体实施方式：

实施例1

花生壳粉末2.5kg放入多功能提取罐，加入20L85％乙醇溶液，80℃微压提取1h，重复提取两次。合并溶液浓缩，静置收集沉淀，用2L80％乙醇溶液溶解沉淀，过滤得上清液；往上清液中加入2L蒸馏水，过滤得上清液；继续往得到的上清液中加入4L水，过滤得沉淀。对沉淀继续用100％乙醇溶液溶解，再重复上述结晶过程1次，得沉淀；对最终得到的沉淀用40％乙醇溶液溶解，通过D-101树脂吸附除杂，旋干收集得到的溶液即得花生壳有效部位，其木犀草素纯度为60％。

实施例2

花生壳粉末5kg放入多功能提取罐，加入40L90％乙醇溶液，100℃微压提取1h，重复提取两次。合并溶液浓缩至浸膏状，用5L60％乙醇溶液溶解浸膏，过滤得上清液；往上清液中加入2.5L蒸馏水，过滤得上清液，继续往得到的上清液中加入7.5L蒸馏水，过滤得沉淀。对沉淀继续用60％乙醇溶液溶解，再重复上述结晶过程1次，得沉淀；对最终得到的沉淀用70％乙醇溶液溶解，通过D-101树脂吸附除杂，旋干收集到的溶液即得花生壳有效部位，其木犀草素纯度为61％。

Claims

1.一种用于提取纯化花生壳有效部位的方法，包括如下步骤：

(1)提取：将花生壳放入多功能提取罐中，加入85％乙醇水溶液，微压提取，提取两次，得提取液；

(2)浓缩：对提取液旋蒸浓缩，静置收集沉淀；

(3)重结晶：加入适量高浓度乙醇，搅拌直至沉淀中的木犀草素完全溶解，过滤得上清液；上清液加水至乙醇浓度约为40％时，过滤得上清液；继续对上清液加水至乙醇浓度约为20％时，过滤得沉淀；重复上述步骤数次；

(4)柱洗脱：用一定浓度的乙醇溶液溶解上一步得到的沉淀，溶液通过D-101大孔树脂直接收集洗脱液，浓缩至干即得花生壳有效部位，其木犀草素纯度超过60％。

2.根据权利要求1所述，(1)步骤中提取温度80～100℃，微压0～0.25MPa。

3.根据权利要求1所述，(2)步骤中关键在于收集的是沉淀或者浸膏。

4.根据权利要求1所述，(3)步骤中，加入60％～100％乙醇水溶液搅拌直至完全溶解木犀草素；上清液第一次稀释至30％～50％的乙醇浓度；上清液第二次稀释至10％～30％的乙醇浓度；重结晶过程重复2～4次。

5.根据权利要求1所述，(4)步骤中样品溶解和洗脱乙醇溶液浓度相同，浓度为40％～70％。