CN104542270A - 一种药用石斛快速繁殖方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种药用石斛快速繁殖方法，包括如下步骤：选择药用石斛中成熟且未开裂蒴果的种子作为繁殖的目标种子；对药用石斛做杀菌消毒处理；将药用石斛的果实中目标种子均匀播撒在种子萌发诱导培养基上，待目标种子颜色逐渐变得鲜绿，种子由粉末状胀大成颗粒状；在第一培育周期内培育颗粒状的目标种子，待目标种子萌发出针状芽；在第二培育周期内继续培育待针状芽长成高1cm的小苗；将小苗接种于综合型培养基上，在第三培育周期内继续培育小苗待其成苗。本发明的方法，利用了具有快速繁殖能效的综合型培养基(主要化合物为三十烷醇)，其非常有助于药用石斛健壮的生长，不变异，周期短，可提高对组培车间的利用率，有利于大规模工业化生产应用。

Description

一种药用石斛快速繁殖方法

技术领域

本发明涉及无土栽培技术领域，具体涉及一种药用石斛快速繁殖方法。

背景技术

目前药用石斛的快速繁殖技术主要是以种子为材料进行无菌播种，由种子萌发形成原球茎，再经过原球茎增殖、分化，最终经过壮苗、生根形成药用石斛幼苗(如图1所示)。此外也有以茎段为外植体诱导丛生芽，之后进行增殖、壮苗、生根。药用石斛的快速繁殖周期大约是12个月(如图2所示)。在快速繁殖过程中主要采用MS、1／2MS和B5为基本培养基，配合使用的激素主要有6-BA、NAA、IBA和KT，以水解酪蛋白、香蕉泥、土豆泥等为天然添加物。

在现有技术中，目前药用石斛的快速繁殖技术尚存在生长缓慢，成苗周期长，生产成本高，经过多次转接，易造成激素积累，植株容易变异，品质差，影响了药用石斛的产业化发展。

发明内容

本发明提供了一种药用石斛快速繁殖方法，用以克服现有技术中传统培养基质培育药用石斛繁殖周期长，繁殖速度缓慢的技术缺陷。

为了达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种药用石斛快速繁殖方法，包括以下步骤：

选择药用石斛中成熟且未开裂蒴果的种子作为繁殖的目标种子；

对所述药用石斛做杀菌消毒处理；

将所述药用石斛的果实中目标种子均匀播撒在种子萌发诱导培养基上，待所述目标种子颜色逐渐变得鲜绿，且所述目标种子的原胚逐渐膨大，种子由粉末状胀大成颗粒状；

在第一培育周期内培育所述颗粒状的目标种子，待所述目标种子萌发出针状芽；在第二培育周期内继续培育待所述针状芽长成高1cm的小苗；

将小苗接种于综合型培养基上，在第三培育周期内继续培育所述小苗待其成苗；

所述综合型培养基用于所述小苗增殖、壮苗、生根；所述综合型培养基包括MS+三十烷醇0.1mg／L+6-BA1.0mg／L+NAA0.2mg／L+土豆泥70g／L+蔗糖20g／L+琼脂5.2g／L。

较佳地，

所述种子萌发诱导培养基包括MS+NAA0.5mg／L+土豆泥100g／L+蔗糖20g／L+琼脂5.2g／L，PH=5.8，培养温度25℃。

较佳地，

所述种子萌发诱导培养基和所述综合型培养基培育环境相同；所述培育环境为PH=5.8，培养温度25℃。

较佳地，

所述第一培育周期为一个月，所述第二培育周期为两个月，所述第三培育周期为三个月。

较佳地，

对所述药用石斛做杀菌消毒处理，包括如下步骤：

用水将所述药用石斛冲洗10分钟；

在干净的工作台上，采用75％的酒精消毒30s，10％次氯酸钠浸泡10分钟，无菌水再次冲洗3-5次；

再利用用无菌滤纸吸干所述药用石斛上果实表面的水分。

较佳地，

将所述药用石斛的果实中目标种子均匀播撒在种子萌发诱导培养基上，包括如下步骤：

在所述药用石斛的果实的蒂端切开一个小口，用镊子夹住所述药用石斛的果实的顶端，将所述药用石斛的果实中目标种子均匀撒播在种子萌发诱导培养基上。

较佳地，

所述在第三培育周期内继续培育所述小苗待其成苗时，还包括如下步骤：

按照一定周期添加适量的营养液和水分。

与现有技术相比，本发明实施例的优点在于：

分析上述培养方法可知：由于综合型培养基内包括了三十烷醇，然而三十烷醇是一种天然的植物生长调节剂，是从蜜蜂蜡中纯化提取的天然生物产品。三十烷醇配制简便，其非常有助于药用石斛健壮的生长，不变异，周期短，可提高对组培车间的利用率，有利于大规模工业化生产应用。

因此，本发明所述技术方案选用了综合型培养基质作为栽培基质进行无土栽培，并在药用石斛快速繁殖过程中使用了有助于药用石斛生长的培养基配方，其帮助了药用石斛的生长培育。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例，下面将对实施例中所需要使用的附图作一简单地介绍。

图1为现有技术中涉及的一种药用石斛繁殖方法及繁殖周期示意图；

图2为现有技术中涉及的另一种药用石斛繁殖方法及繁殖周期示意图；

图3为本发明实施例提供的一种药用石斛快速繁殖方法流程图；

图4为本发明实施例提供的一种药用石斛快速繁殖方法及繁殖周期示意图。

具体实施方式

如图3所示，本发明实施例提供的一种药用石斛快速繁殖方法，包括如下步骤：

步骤100、选择药用石斛中成熟且未开裂蒴果的种子作为繁殖的目标种子；

步骤200、对药用石斛做杀菌消毒处理；

步骤300、将药用石斛的果实中目标种子均匀播撒在种子萌发诱导培养基上，待目标种子颜色逐渐变得鲜绿，且目标种子的原胚逐渐膨大，种子由粉末状胀大成颗粒状；

步骤400、在第一培育周期内培育颗粒状的目标种子，待目标种子萌发出针状芽；在第二培育周期内继续培育待针状芽长成高1cm的小苗；

步骤500、将小苗接种于综合型培养基上，在第三培育周期内继续培育小苗待其成苗；

所述综合型培养基用于所述小苗增殖、壮苗、生根；所述综合型培养基包括MS+三十烷醇0.1mg／L+6-BA1.0mg／L+NAA0.2mg／L+土豆泥70g／L+蔗糖20g／L+琼脂5.2g／L。

在本发明实施例中，由于综合型培养基内包括了三十烷醇，然而三十烷醇是一种天然的植物生长调节剂，是从蜜蜂蜡中纯化提取的天然生物产品。三十烷醇配制简便，其非常有助于药用石斛健壮的生长，不变异，周期短，可提高对组培车间的利用率，有利于大规模工业化生产应用。因此，本发明所述技术方案选用了综合型培养基质作为栽培基质进行无土栽培，并在药用石斛快速繁殖过程中使用了有助于药用石斛生长的培养基配方，其帮助了药用石斛的生长培育。

下面对本发明实施例中药用石斛快速繁殖方法的具体操作步骤做进一步的详细说明：

较佳地，作为一种优选的可实施方式，

所述种子萌发诱导培养基包括MS+NAA0.5mg／L+土豆泥100g／L+蔗糖20g／L+琼脂5.2g／L，PH＝5.8，培养温度25℃。

较佳地，作为一种优选的可实施方式，

所述种子萌发诱导培养基和所述综合型培养基培育环境相同；所述培育环境为PH=5.8，培养温度25℃。

较佳地，作为一种优选的可实施方式，

所述第一培育周期为一个月，所述第二培育周期为两个月，所述第三培育周期为三个月。

较佳地，作为一种优选的可实施方式，

在步骤300中，对所述药用石斛做杀菌消毒处理，包括如下步骤：

步骤310、用水将所述药用石斛冲洗10分钟；

步骤320、在干净的工作台上，采用75％的酒精消毒30s，10％次氯酸钠浸泡10分钟，无菌水再次冲洗3-5次；

步骤330、再利用用无菌滤纸吸干所述药用石斛上果实表面的水分。

较佳地，作为一种优选的可实施方式，

在步骤400中，将所述药用石斛的果实中目标种子均匀播撒在种子萌发诱导培养基上，包括如下步骤：

在所述药用石斛的果实的蒂端切开一个小口，用镊子夹住所述药用石斛的果实的顶端，将所述药用石斛的果实中目标种子均匀撒播在种子萌发诱导培养基上。

在所述步骤600中，在所述在第三培育周期内继续培育所述小苗待其成苗时，还包括如下步骤：

按照一定周期添加适量的营养液和水分。

需要说明的是，将小苗接种于(增殖、壮苗、生根)综合型培养基上，且在PH=5.8，培养温度25℃环境下，培养三个月左右可观察到药用石斛生长整齐，叶色浓绿，每株分蘖3～5个芽，株高可达3～6cm，每株苗有2条以上健壮发达的根系。

需要说明的本发明实施例涉及的药用石斛快速繁殖方法的关键点和欲保护点如下：

1、在药用石斛快速繁殖过程中使用了三十烷醇。

2、在药用石斛快速繁殖过程中使用的培养基配方。

另参见图4，经研究发现，本发明实施例提供的药用石斛快速繁殖方法可以缩短药用石斛的培育时间，与传统的石斛繁殖相比，周期缩短了6个月，在药用石斛工厂化育苗中，可以大量的节约培养基、人工、电费等生产成本。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (7)

1.一种药用石斛快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

选择药用石斛中成熟且未开裂蒴果的种子作为繁殖的目标种子；

对所述药用石斛做杀菌消毒处理；

将所述药用石斛的果实中目标种子均匀播撒在种子萌发诱导培养基上，待所述目标种子颜色逐渐变得鲜绿，且所述目标种子的原胚逐渐膨大，种子由粉末状胀大成颗粒状；

在第一培育周期内培育所述颗粒状的目标种子，待所述目标种子萌发出针状芽；在第二培育周期内继续培育待所述针状芽长成高1cm的小苗；

将小苗接种于综合型培养基上，在第三培育周期内继续培育所述小苗待其成苗；

所述综合型培养基用于所述小苗增殖、壮苗、生根；所述综合型培养基包括MS+三十烷醇0.1mg／L+6-BA1.0mg／L+NAA0.2mg／L+土豆泥70g／L+蔗糖20g／L+琼脂5.2g／L。

2.如权利要求1所述的药用石斛快速繁殖方法，其特征在于，

所述种子萌发诱导培养基包括MS+NAA0.5mg／L+土豆泥100g／L+蔗糖20g／L+琼脂5.2g／L，PH=5.8，培养温度25℃。

3.如权利要求2所述的药用石斛快速繁殖方法，其特征在于，

所述种子萌发诱导培养基和所述综合型培养基培育环境相同；所述培育环境为PH=5.8，培养温度25℃。

4.如权利要求1所述的药用石斛快速繁殖方法，其特征在于，

所述第一培育周期为一个月，所述第二培育周期为两个月，所述第三培育周期为三个月。

5.如权利要求1所述的药用石斛快速繁殖方法，其特征在于，

对所述药用石斛做杀菌消毒处理，包括如下步骤：

用水将所述药用石斛冲洗10分钟；

在干净的工作台上，采用75％的酒精消毒30s，10％次氯酸钠浸泡10分钟，无菌水再次冲洗3-5次；

再利用用无菌滤纸吸干所述药用石斛上果实表面的水分。

6.如权利要求1所述的药用石斛快速繁殖方法，其特征在于，

将所述药用石斛的果实中目标种子均匀播撒在种子萌发诱导培养基上，包括如下步骤：

在所述药用石斛的果实的蒂端切开一个小口，用镊子夹住所述药用石斛的果实的顶端，将所述药用石斛的果实中目标种子均匀撒播在种子萌发诱导培养基上。

7.如权利要求1-6任一项所述的药用石斛快速繁殖方法，其特征在于，

所述在第三培育周期内继续培育所述小苗待其成苗时，还包括如下步骤：

按照一定周期添加适量的营养液和水分。