CN104520290A - 酰氨基螺环酰胺和磺酰胺衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及某些酰氨基螺环酰胺和磺酰胺化合物，包含此类化合物的药物组合物，以及使用此类化合物的治疗方法。

Description

酰氨基螺环酰胺和磺酰胺衍生物
发明领域
本发明涉及某些酰氨基螺环酰胺和磺酰胺化合物，包含此类化合物的药物组合物，以及使用此类化合物和药物组合物治疗癌症(包括白血病和实体瘤)、炎性疾病、骨质疏松、粥样硬化、肠易激综合征和其他疾病和医学病症的方法。本发明还涉及用于抑制烟酰胺磷酸核糖基转移酶(“NAMPT”)的某些酰氨基螺环酰胺和磺酰胺化合物。
发明背景
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)在细胞能量代谢和细胞信号传导中起重要作用。NAD在能量代谢中起重要作用是因为NAD分子中的吡啶环在由许多脱氢酶催化的氢转移反应中容易接受和给出电子。酶烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT、NMPRT、NMPRT酶或NAmPRT酶，国际命名法：E.C.2.4.2.12)促进烟酰胺与5-磷酸核糖-1-焦磷酸缩合生成烟酰胺单核苷酸，烟酰胺单核苷酸是NAD生物合成中的前体。
NAMPT参与许多功能，包括促进血管平滑肌细胞成熟、抑制中性粒细胞凋亡、活化胰岛素受体、发展T和B淋巴细胞和降低血糖。因此，小分子NAMPT抑制剂具有作为许多疾病或病症疗法的潜在用途，所述疾病或病症包括包含实体和液体肿瘤的癌症、非小细胞肺癌、白血病、淋巴瘤、卵巢癌、神经胶质瘤、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、子宫颈癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、rhino-gastric肿瘤、结肠直肠癌、CNS癌、膀胱癌、胰腺癌和霍奇金病。NAMPT抑制剂还具有作为诸如癌症、类风湿性关节炎、糖尿病、粥样硬化、败血症或衰老等疾病或病症的疗法的潜在用途。
Rongvaux等人已经证明NAMPT参与调解基因毒性或氧化应激期间的细胞存活，并且NAMPT抑制剂因此可用作炎症的治疗。Rongvaux,A.等人J.Immunol.2008，181，4685-4695。NAMPT还可以影响内皮细胞对高葡萄糖水平、氧化应激和衰老的反应。因此，NAMPT抑制剂可使增殖的内皮细胞能够抵抗衰老和高葡萄糖的氧化应激，并富有成效地利用过量葡萄糖支持复制型寿命和血管生成活性。
具体地，已经显示NAMPT抑制剂干扰NAD生物合成并诱导凋亡性细胞死亡而没有任何DNA损害作用或对细胞能量代谢的主要作用，因此具有重要的抗肿瘤作用。例如，NAMPT抑制剂FK866具有这些生化作用，并且也已经在小鼠乳腺癌模型中显示降低NAD水平，诱导肿瘤生长延迟，并增强肿瘤辐射敏感性。参见例如Hasmann M.和I.Schemainda，“FK866,a Highly Specific Noncompetitive Inhibitor of NicotinamidePhosphoribosyltransferase,Represents a Novel Mechanism for Induction of TumorCell Apoptosis,”Cancer Res.2003，63，7436-7442；Drevs,J.等人，“Antiangiogenicpotency of FK866/K22.175,a new inhibitor of intracellular NAD biosynthesis,in murine renal cell carcinoma,”Anticancer Res.2003，23，4853-4858。
最近，另一个NAMPT抑制剂CHS-828已经显示有效抑制宽范围肿瘤细胞系中的细胞生长。参见Olesen,U.H.等人，“Anticancer agent CHS-828 inhibits cellularsynthesis of NAD,”Biochem.Biophys.Res.Commun.2008，367，799-804；Ravaud,A.等人，“Phase I study and guanidine kinetics of CHS-828,a guanidine-containingcompound,administered orally as a single dose every 3 weeks in solid tumors:an ECSG/EORTC study,”Eur.J.Cancer2005，41，702-707。FK866和CHS-828目前都在临床试验中作为癌症治疗。
依然需要具有希望的药学性质的有效NAMPT抑制剂。在本发明上下文中已经发现某些酰氨基螺环酰胺和磺酰胺衍生物具有NAMPT调节活性。
发明概述
一方面，本发明涉及式I化合物：
其中：
R是(a)包含选自N、S和O的一个杂原子和1、2或3个额外N原子的8-、9-或10-元双环杂芳基，其中所述双环杂芳基未经取代或者经选自由氘、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基、卤代、氰基、卤代烷基、羟基、羟基烷基和烷氧基组成的组的一个或多个取代基取代，并且其中所述双环杂芳基的一个或多个N原子任选为N氧化物；或
(b)与苯基或单环的5-或6-元杂芳基稠合的5-或6-元氮连接的杂环烷基环，其中所述苯基或杂芳基未经取代或者经选自由氘、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基、卤代、氰基、卤代烷基、羟基、羟基烷基和烷氧基组成的组的一个或多个取代基取代；并且
R1是H、-(C1-4亚烷基)0-1C(O)Ra、-(C1-4亚烷基)0-1CO2Ra、-(C1-4亚烷基)0-1S(O)Ra、–(C1-4亚烷基)0-1SO2Ra、–C(O)NH(Ra)、–C(O)N(Ra)2或–C(O)C(O)NH(Ra)；
其中每个Ra独立为
(1)未经取代或者经一个或多个Rm取代基取代的烷基，
其中每个Rm独立选自氘、羟基、-NRbRc、烷氧基、氰基、卤代、-C(O)烷基、-CO2烷基、-CONRbRc、-S(O)烷基、-SO2烷基、-SO2NRbRc、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、苯氧基和-O-烷基-OH；
其中Rb是H或烷基；
Rc是H、烷基、烷氧基烷基、卤代烷基、-C(O)烷基、-CO2烷基、–SO2烷基、-C(O)NH2或C(O)H；并且
Rm内的每个芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基未经取代或者经独立选自以下的一个或多个取代基取代：烷基、卤代烷基、羟基、-NRbRc、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、卤代、氧代、-C(O)烷基、-CO2烷基、-C(O)-杂环烷基、-CONRbRc、-S(O)烷基、-SO2烷基、-SO2-卤代烷基、-SO2NRbRc、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基；或者两个取代基一起形成稠合的杂芳基、环烷基或杂环烷基环；
其中每个烷基或烷氧基未经取代或者经苯基、–NRbRc、杂环烷基、杂芳基或-C(O)烷基取代；和
每个芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基未经取代或者经烷基、卤代或–C(O)烷基取代；
(2)各自未经取代或者经一个或多个Rg取代基取代的苯基、环烷基、杂芳基或杂环烷基；
其中每个Rg独立选自烷基、卤代烷基、羟基、-NRbRc、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、卤代、氧代、-C(O)烷基、-CO2烷基、-C(O)-杂环烷基、-CONRbRc、-S(O)烷基、-SO2烷基、-SO2-卤代烷基、-SO2NRbRc、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基；或者两个Rg取代基一起形成稠合的苯基、杂芳基、环烷基或杂环烷基环；
其中每个烷基或烷氧基未经取代或者经–NRbRc、杂环烷基、杂芳基或-C(O)烷基取代；和
每个芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基未经取代或者经烷基、卤代、-CO2烷基或–C(O)烷基取代；或
(3)–NRxRy、
其中Rx是H或烷基；并且
Ry是H、烷基、烷氧基烷基、卤代烷基、-C(O)烷基、-CO2烷基或–SO2烷基；
R2和R3各自独立为H或氘；并且
n是1或2；
和其立体异构体，或这种化合物或立体异构体的药学可接受的盐。
在进一步的方面，本发明涉及药物组合物，各自包含有效量的至少一种式I化合物或式I化合物的药学可接受的盐。根据本发明的药物组合物可以进一步包含至少一种药学可接受的赋形剂。
在另一方面，本发明涉及一种治疗罹患NAMPT活性介导的疾病或医学病症的受试者的方法，包括给需要这种治疗的受试者施用有效量的至少一种式I化合物或式I化合物的药学可接受的盐，或者包括给需要这种治疗的受试者施用有效量的药物组合物，所述药物组合物包含有效量的至少一种式I化合物或式I化合物的药学可接受的盐。
本发明一个方面涉及式I化合物用于制备用于治疗、预防、抑制或消除癌症的药剂的用途。
本发明一个方面涉及式I化合物用于制备用于治疗、预防、抑制或消除癌症的药剂的用途，其中所述癌症可以选自白血病、淋巴瘤、卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、子宫颈癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、CNS癌、膀胱癌、胰腺癌和霍奇金病。
本发明一个方面涉及式I化合物用于制备用于治疗、预防、抑制或消除癌症的药剂的用途，其中所述癌症可以选自具有实体和液体肿瘤的癌症、非小细胞肺癌、白血病、淋巴瘤、卵巢癌、神经胶质瘤、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、子宫颈癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、rhino-gastric肿瘤、结肠直肠癌、CNS癌、膀胱癌、胰腺癌和霍奇金病。
另一方面，式I化合物及其药学可接受的盐用作NAMPT调节剂。因此，本发明涉及一种调节NAMPT活性的方法，包括当NAMPT在受试者中时，包括使NAMPT暴露于有效量的至少一种式I化合物或式I化合物的药学可接受的盐。
而在另一方面，本发明涉及制备式I化合物及其药学可接受的盐的方法。
在本发明化合物、药物组合物和方法的某些实施方案中，式I化合物是选自以下详述中描述或示例的那些种类的化合物，或者是这种化合物的药学可接受的盐。
根据以下详述并通过实施本发明，本发明的其他实施方案、特征和优势将是明显的。
详述和特定实施方案
为了简明，本说明书引用的出版物(包括专利和专利申请)的公开内容通过引用整体并入本文。
大多数化学名称使用这里的IUPAC命名法产生。一些化学名称使用本领域已知的不同命名法或可选或商品名称产生。当名称与结构冲突时，以结构为准。
一般定义
如上文和本公开通篇使用的，除非另有指明，应将以下术语理解为具有以下含义。如果缺少定义，则以本领域技术人员已知的常规定义为准。如果本文提供的定义与任何引用的出版物冲突或不同，则以本文提供的定义为准。
如本文使用的，术语“包括”、“含有”和“包含”以其开放的非限制性含义使用。
如本文使用的，除非上下文明确指出相反，单数形式“一”、“一”和“该”包括多个指示对象。
为了提供更简明的描述，本文给出的一些定量表达没有用术语“约”修饰。要理解，无论是否明确使用术语“约”，本文给出的每一个量指实际给出的值，并且它还表示指基于本领域普通技术合理推断的这种给定值的近似值，包括此类给定值的归因于实验和/或测量条件的等效值和近似值。当以百分比给出产率时，这种产率指给出该产率的实体相对于相同实体在特定化学计量条件下可获得的最大量的质量。除非有不同的指明，作为百分比给出的浓度指质量比。
定义
如本文使用的，“烷基”具有1至10个碳原子的饱和的直链或支链烃基。代表性饱和烷基包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-1-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-1-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基等，以及更长的烷基，例如庚基、辛基等。如本文使用的，“低级烷基”表示具有1至6个碳原子的烷基。
如本文使用的术语“烷氧基”包括-O-(烷基)，其中烷基如上定义。
如本文使用的，“烷氧基烷基”表示-(亚烷基)-O-(烷基)，其中每个“烷基”独立为上文定义的烷基。
如本文使用的术语“氨基”指–NH2基团。
如本文使用的术语“烷基氨基”指上文定义的氨基，其中氨基的一个氢原子被本文定义的烷基替代。氨基烷基可以由以下通式–NH-烷基定义。该通式包括以下通式的基团：-NH-C1-C10-烷基和-NH-C1-C6-烷基。氨基烷基的实例包括但不限于氨基甲基、氨基乙基、氨基丙基、氨基丁基。
如本文使用的术语“二烷基氨基”指上文定义的氨基，其中氨基的两个氢原子被本文定义的烷基替代。二氨基烷基可以由以下通式–N(烷基)2定义，其中烷基可以相同或者可以不同，并且可以选自本文定义的烷基，例如C1-C10-烷基或C1-C6-烷基。
“芳基”表示单、双或三环芳香族基团，其中所述基团的所有环都是芳香族的。对于双或三环系统，个体芳香环相互稠合。示例性芳基包括但不限于苯基、萘和蒽。
如本文使用的“芳基氧基”指–O-(芳基)基团，其中芳基如上文定义。
如本文使用的“芳基烷基”指–(亚烷基)-(芳基)基团，其中亚烷基和芳基如上文定义。芳基烷基的非限制性实例包括低级烷基。适当的芳基烷基的非限制性实例包括苄基、2-苯乙基和萘基甲基。
如本文使用的“芳基烷氧基”指–O-(亚烷基)-芳基基团，其中亚烷基和芳基如上文定义。
如本文使用的术语“氰基”表示碳原子通过三键与氮原子结合的取代基。
如本文使用的术语“氘”表示具有一个质子和一个中子的稳定的氢同位素。
如本文使用的术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。术语“卤代”代表氯代、氯代、溴代或碘代。卤代还可以指氯代、氯代或溴代。
术语“卤代烷基”指如上定义的烷基，其中所述烷基的一个或多个、例如1、2或3个氢原子被卤素原子替代，所述卤素原子例如氟代、溴代或氯代，特别是氟代。卤代烷基的实例包括但不限于一氟代-、二氟代-或三氟代-甲基、-乙基或-丙基，例如3,3,3-三氟丙基、2-氟代乙基、2,2,2-三氟乙基、氟代甲基、二氟代甲基或三氟甲基，或溴代乙基或氯代乙基。类似地，术语“氟代烷基”指经一个或多个、例如1、2或3个氟原子取代的上述烷基。
如本文使用的术语“卤代烷氧基”指–O-(卤代烷基)基团，其中卤代烷基如上定义。示例性的卤代烷氧基是溴代乙氧基、氯代乙氧基、三氟甲氧基和2,2,2-三氟乙氧基。
术语“羟基”表示-OH基团。
术语“羟基烷基”指经至少一个羟基、例如1、2或3个羟基取代的烷基。羟基烷基的烷基部分提供了分子其余部分的连接点。羟基烷基的实例包括但不限于、羟基甲基、羟基乙基、1-羟基丙基、2-羟基异丙基、1,4-二羟基丁基等。
术语“氧代”表示＝O基团，并且可以连接至碳原子或硫原子。术语“N氧化物”指氮原子的氧化形式。
如本文使用的，术语“环烷基”指具有3至15个环碳原子的饱和或部分饱和的单环、稠合多环、桥接多环或螺多环碳环。环烷基的非限制性类别是具有3至6个碳原子的饱和或部分饱和的单环碳环。环烷基的示例性实例包括但不限于以下部分：
术语“环烷氧基”指–O-(环烷基)基团。
如本文使用的“杂环烷基”指饱和或部分饱和的且具有选自碳原子的3至12个环原子以及选自氮、氧和硫的最多三个杂原子的单环或稠合、桥接或螺多环结构。所述环结构可以任选含有在碳或硫环成员上的最多两个氧代基团。杂环烷基还包括具有5至6个原子作为环成员的单环，其中1、2或3个环成员选自N、S或O，并且其余是碳原子。“氮连接的”杂环烷基通过氮环原子与母体部分连接。“碳连接的”杂环烷基通过碳环原子与母体部分连接。示例性的杂环烷基实体包括但不限于：
如本文使用的，术语“杂芳基”指具有选自碳、氧、氮和硫的3至15个环原子的单环的或稠合多环的芳香杂环。适合的杂芳基不包括必须荷电而成为芳香族的环系统，例如吡啶鎓。某些适合的5元杂芳基环(作为单环杂芳基或作为多环杂芳基的部分)具有一个氧、硫或氮原子，或者一个氮加一个氧或硫，或者2、3或4个氮原子。某些适合的6元杂芳基环(作为单环杂芳基或作为多环杂芳基的部分)具有1、2或3个氮原子。杂芳基的实例包括但不限于吡啶基、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基。
术语“双环杂芳基”指具有两个组成芳环的如上定义的杂芳基，其中两个环相互稠合并且至少一个环是如上定义的杂芳基。双环杂芳基包括包含1、2、3或4个杂原子环成员的双环杂芳基，并且是未经取代或者经选自由氨基和卤代组成的组的一个或多个取代基取代；并且其中所述杂芳基的一个或多个N原子任选为N氧化物。双环杂芳基还包括8-、9-或10-元双环杂芳基。双环杂芳基还包括具有1、2、3或4个杂原子环成员并且未经取代或者经选自由氨基和卤代组成的组的一个或多个取代基取代的8-、9-或10-元双环杂芳基；并且其中所述杂芳基的一个或多个N原子任选为N氧化物。双环杂芳基的示例性实例包括但不限于：
术语“与苯基或单环杂芳基稠合的5-或6-元氮连接的杂环烷基环，其中所述苯基或杂芳基未经取代或者经氨基取代”包括但不限于以下基团：
本领域技术人员会理解，上文所列或示例的杂芳基、环烷基和杂环烷基的种类不是穷尽的，并且也可以选择这些定义术语范围内的其他种类。
如本文使用的，术语“取代的”表示指定基团或部分携带一个或多个适当取代基。如本文使用的，术语“未经取代的”表示指定基团不携带取代基。如本文使用的，术语“任选取代的”表示指定基团未经取代或者经指定数目取代基取代。当术语“取代”用于描述结构系统时，表示取代发生在系统上任何化合价允许的位置。
如本文使用的，表述“一个或多个取代基”指可以发生在系统上任何化合价允许位置的一个至最大可能数目的取代。在某个实施方案中，一个或多个取代基表示1、2、3、4或5个取代基。在另一实施方案中，一个或多个取代基表示1、2或3个取代基。此类取代基相互之间可以相同或者不同。
假设本文用未满足的化合价表示的任何原子具有足够数目的氢原子以满足原子的化合价。
当任何变量(例如，烷基、亚烷基、杂芳基、R1、R2、Ra等)在本文提供的任何式或描述中出现超过一次时，该变量每次出现时的定义独立于其在每次其他出现时的定义。
如本文使用的，数值范围预期包括连续整数。例如，表示为“0至4”或“0-4”的范围包括0、1、2、3和4。
当显示多官能部分时，与核心的连接点由线或连字符指示。例如，芳基氧基-指其中氧原子是与核心分子的连接点而芳基与氧原子连接的部分。
如本文使用的，术语“受试者”涵盖哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物的实例包括但不限于哺乳动物纲的任何成员：人；非人灵长类，例如黑猩猩以及其他猿和猴种；农场动物，例如牛、马、绵羊、山羊、猪；家养动物，例如兔、狗和猫；和实验室动物，包括啮齿类，例如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳动物的实例包括但不限于鸟、鱼等。在本发明的一个实施方案中，哺乳动物为人。
“患者”包括人和动物。
术语“抑制剂”指阻断或以其他方式干扰特定生物活性的分子，例如化合物、药物、酶活化剂或激素。
术语“调节剂”指增加或减少或者以其他方式影响给定酶或蛋白的活性的分子，例如本发明化合物。
术语“有效量”或“治疗有效量”指足以提供希望的生物结果的药剂的量。所述结果可为疾病或医学病症的体征、症状或原因的减少和/或减轻，或生物系统的任何其他期望的变化。例如，治疗用途的“有效量”是提供疾病状态、症状或医学病症的临床相关变化所需的化合物或者包含该化合物的组合物的量。在任何个案中，适当的“有效”量可由本领域普通技术人员使用常规实验测定。因此，表述“有效量”通常指活性物质具有治疗效果的量。
如本文使用的，术语“治疗”或“治疗”涵盖“预防性”和“治病性”治疗。“预防性”治疗表示延缓疾病、疾病症状或医学病症的发展，抑制可能出现的症状，或者降低疾病或症状发展或复发的风险。“治病性”治疗包括降低现有疾病、症状或病症的严重度或者抑制现有疾病、症状或病症的恶化。因此，治疗包括缓解或预防现有疾病症状的恶化，防止额外症状发生，缓解或预防症状的潜在代谢原因，抑制疾患或疾病，例如，停止疾患或疾病的发展，减轻疾患或疾病，引起疾患或疾病退行，减轻疾病或疾患引起的病症，或者停止疾病或疾患的症状。
其他化学描述
预期本文给出的任何式代表具有由该结构式描绘的结构的化合物以及某些变体或形式。例如，本文给出的任何式的化合物可以具有不对称或手性中心，并因此以不同的立体异构体形式存在。认为通式化合物的所有立体异构体，包括旋光异构体、对映异构体和非对映异构体，及其混合物，都落入该式范围内。而且，某些结构可以作为几何异构体(即，顺式和反式异构体)、互变异构体或阻转异构体而存在。所有此类异构体形式及其混合物在本文都被考虑作为本发明的部分。因此，本文给出的任何式预期代表外消旋物、一种或多种对映异构体形式、一种或多种非对映异构体形式、一种或多种互变异构体或阻转异构体形式及其混合物。
通过本领域技术人员熟知的方法，诸如通过色谱法和/或分级结晶，可基于非对映异构体混合物的物理化学差异而将它们分成其单独的非对映异构体。对映异构体可如下分离：通过与适当的光学活性化合物(例如手性助剂，诸如手性醇或Mosher氏酰基氯，或者形成非对映异构体盐的混合物)反应，分离非对映异构体并将单独的非对映异构体转化(例如水解或脱盐)成相应的纯的对映异构体。也可使用手性HPLC柱来分离对映异构体。如IUPAC 1974推荐所定义的，本发明化合物的手性中心可以命名为“R”或“S”。
本发明化合物可以形成药学可接受的盐，其也在本发明范围内。“药学可接受的盐”指式I化合物的游离酸或碱的盐，其是非毒性的，生理上耐受的，与其配制的药物组合物相容的，并且在其他方面适合配制和/或施用给受试者。要理解，除非另外指明，对本文化合物的提及包括对所述化合物的药学可接受的盐的提及。
化合物盐包括与无机和/或有机酸形成的酸式盐，以及与无机和/或有机碱形成的碱式盐。另外，当给定化合物同时含有碱性部分(例如但不限于吡啶或咪唑)和酸性部分(例如但不限于羧酸)时，本领域技术人员会理解，该化合物可以作为两性离子(“内盐”)存在；此类盐包括在本文使用的术语“盐”中。本发明化合物的盐可例如通过以下方法制备：使化合物与一定量(例如等量)的适当酸或碱在诸如所述盐在其中沉淀的介质中或者在水性介质中反应，然后冻干。
示例性盐包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、糖二酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲烷磺酸盐(甲磺酸盐)、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和扑酸盐(即，1,1’-亚甲基-双(2-羟基-3-萘甲酸盐))盐。药学可接受的盐可涉及包含另一个分子，例如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其他抗衡离子。抗衡离子可为稳定母体化合物上的电荷的任何有机或无机部分。而且，药学可接受的盐可在其结构中具有超过一个带电原子。当多个带电原子是药学可接受的盐的部分的情况可具有多个抗衡离子。因此，药学可接受的盐可具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。
示例性酸加成盐包括乙酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、磷酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐(toluenesulfonates)(也称为甲苯磺酸盐(tosylates))等。
示例性碱盐包括铵盐，碱金属盐例如钠盐、锂盐和钾盐，碱土金属盐例如钙盐和镁盐，与有机碱(例如，有机胺)例如二环己胺、叔丁胺形成的盐，和与氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等形成的盐。可将碱性含氮基团用剂季铵化，所述剂诸如低级烷基卤化物(例如，甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如，硫酸二甲酯、硫酸二乙酯和硫酸二丁酯)、长链卤化物(例如，癸基、月桂基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤化物(例如，苄基和苯乙基的溴化物)和其他剂。
此外，一般认为适合从药物化合物形成药用盐的酸和碱讨论于例如P.Stahl等人，Camille G.(编辑)Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties,Selectionand Use.(2002)Zurich：Wiley-VCH；S.Berge等人，Journal of PharmaceuticalSciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson等人，The Practice of Medicinal Chemistry(1996)，AcademicPress，New York；和The Orange Book(Food & Drug Administration，MD，可获自FDA)。这些公开内容通过引用并入本文。
此外，本文描述的任何化合物预期还指该化合物的任何非溶剂化形式或水合物、溶剂化物或多晶型物，即使此类形式未明确列出。“溶剂化物”表示本发明的化合物与一个或多个溶剂分子的物理结合。这种物理结合涉及不同程度的离子和共价键合，包括氢键合。在一些情况下，溶剂化物能够分离，例如当一个或多个溶剂分子并入结晶固体的晶格中时。“溶剂化物”涵盖溶液相和可分离的溶剂化物。适合的溶剂化物包括与药学可接受的溶剂例如水、乙醇等形成的那些。在一些实施方案中，溶剂是水并且溶剂化物是水合物。
可任选地将一种或多种本发明的化合物转化成溶剂化物。溶剂化物的制备方法是公知的。因此，例如，M.Caira等人，J.Pharmaceutical Sci.，93(3)，601-611(2004)描述了在乙酸乙酯中以及从水中制备抗真菌剂氟康唑的溶剂化物。溶剂化物、半溶剂化物、水合物等的类似制备描述于E.C.van Tonder等人，AAPS PharmSciTech.，5(1)，article12(2004)；和A.L.Bingham等人，Chem.Commun.，603-604(2001)。典型的非限制性方法包括在高于环境温度的温度将本发明化合物溶于适量溶剂(有机溶剂或水或其混合物)，并以足以形成晶体的速率冷却溶液，接着通过标准方法分离晶体。分析技术例如红外光谱显示了在作为溶剂化物(或水合物)的晶体中存在溶剂(或水)。
本发明还涉及式I化合物的药学可接受的前药，以及采用此类药学可接受的前药的治疗方法。术语“前药”表示所示化合物的前体，其在施用给受试者之后通过化学或物理过程(例如溶剂分解或酶解)或者在生理条件下(例如，被带至生理pH的前药被转化为式I化合物)在体内转化为所述化合物。“药学可接受的前药”是无毒、生物可耐受且在其他方面适合配制和/或施用给受试者的前药。选择和制备适当前药衍生物的示例性程序描述于例如“Design of Prodrugs”，编辑.H.Bundgaard,Elsevier，1985。
前药的实例包括本发明化合物的药学可接受的酯，其也被认为是本发明的部分。本发明化合物的药学可接受的酯包括以下组：(1)通过羟基酯化获得的羧酸酯，其中所述酯的羧酸部分的非羰基部分选自直链或支链烷基(例如，乙酰基、正丙基、叔丁基或正丁基)、烷氧基烷基(例如，甲氧基甲基)、芳烷基(例如，苄基)、芳基氧基烷基(例如，苯氧基甲基)、芳基(例如，任选经例如卤素、C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，诸如烷基-或芳烷基磺酰基(例如，甲磺酰基)；(3)氨基酸酯(例如，L-缬氨酰或L-异亮氨酰基)；(4)膦酸酯，以及(5)磷酸单酯、磷酸二酯或磷酸三酯。磷酸酯可进一步被例如C1-20醇或其反应性衍生物酯化，或被2,3-二(C6-24)酰基甘油酯化。前药的其他讨论提供于T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugsas Novel Delivery Systems(1987)14 of the A.C.S.Symposium Series，和Bioreversible Carriers in Drug Design,(1987)Edward B.Roche编辑，AmericanPharmaceutical Association and Pergamon Press。
例如，如果式I化合物含有羧酸官能团，则前药可包含用例如以下基团替代酸基团的氢原子所形成的酯：例如，(C1-C8)烷基、(C2-C12)烷酰基氧基甲基、具有4至9个碳原子的1-(烷酰基氧基)乙基、具有5至10个碳原子的1-甲基-1-(烷酰基氧基)-乙基、具有3至6个碳原子的烷氧基羰基氧基甲基、具有4至7个碳原子的1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有5至8个碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有3至9个碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、具有4至10个碳原子的1-(N-(烷氧基擬基)氨基)乙基、3-酞基、4-巴豆酸内酯基、γ-丁酸内酯-4-基、二-N,N-(C1-C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(诸如β-二甲基氨基乙基)、氨甲酰基-(C1-C2)烷基、N,N-二(C1-C2)烷基氨甲酰基-(C1-C2)烷基以及哌啶-、吡咯烷-或吗啉(C2-C3)烷基等。
类似地，如果式I化合物含有醇官能团，则前药可用例如以下基团替代醇基团中的氢原子而形成：例如，(C1-C6)烷酰基氧基甲基、1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C1-C6)烷酰基、α-氨基(C1-C4)烷基、芳基酰基和α-氨基酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中每个α-氨基酰基独立地选自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(从半缩醛形式的碳水化合物除去羟基所获得的自由基)等。
如果式I化合物结合胺官能团，则前药可用例如以下基团替代胺基团中的氢原子而形成：例如，R”-羰基R”O-羰基、NR”R'-羰基，其中R”和R’各自独立地为(C1-C10)烷基、(C3-C7)环烷基、苄基，或R”-羰基为天然的α-氨基酰基或天然α-氨基酰基，-C(OH)C(O)OY1(其中Y1为H、(C1-C6)烷基或苄基)、-C(OY2)Y3(其中Y2为(C1-C4)烷基并且Y3为(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基或单-N-或二-N,N-(C1-C6)烷基氨基烷基)、-C(Y4)Y5(其中Y4为H或甲基并且Y5为单-N-或二-N,N-(C1-C6)烷基氨基吗啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基、等。
本发明还涉及式I化合物的药学活性代谢物，以及此类代谢物在本发明方法中的用途。“药学活性代谢物”表示式I化合物或其盐在机体内代谢的药理学活性产物。可以使用本领域已知或可用的常规技术确定化合物的前药和代谢产物。参见例如，Bertolini等人，J.Med.Chem.1997，40，2011-2016；Shan等人，J.Pharm.Sci.1997，86(7)，765-767；Bagshawe，Drug Dev.Res.1995，34，220-230；Bodor，Adv.Drug Res.1984，13，255-331；Bundgaard，Design of Prodrugs(Elsevier Press，1985)；和Larsen，Design and Application of Prodrugs，Drug Design and Development(Krogsgaard-Larsen等人编辑，Harwood Academic Publishers，1991)。
本文给出的任何式还预期代表化合物的未标记形式以及同位素标记形式。同位素标记的化合物具有由本文给出的式描绘的结构，除了一个或多个原子被具有选定原子质量或质量数的原子替代。可以并入本发明化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，分别例如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F、36Cl和125I。此类同位素标记的化合物用于代谢研究(例如，用14C)、反应动力学研究(用例如2H或3H)、检测或成像技术[例如，正电子发射断层扫描术(PET)或单光子发射计算机断层扫描术(SPECT)]，包括药物或底物组织分布检定，或者用于患者的放射性治疗。具体地，18F或11C标记的化合物可能特别适合PET或SPECT研究。而且，用较重的同位素例如氘(即，2H)取代可以提供原子较高代谢稳定性的某些治疗优势，例如增加的体内半衰期或减少的剂量需求。同位素标记的本发明化合物及其前药一般可以通过进行以下描述的方案中或者实施例和制备中公开的程序来制备，通过用容易获得的同位素标记试剂取代非同位素标记的试剂。
有关本文描述的化合物的术语“盐”、“溶剂化物”、“多晶型物”、“前药”等的使用预期同样适用于本发明化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、阻转异构体和外消旋物的盐、溶剂化物、多晶型物和前药形式。
本发明化合物
在式I的一些实施方案中，本发明化合物具有下式I-a：
其中R、R1、R2和R3如本文针对式I所定义的。
在一些实施方案中，R是未经取代或如对式I定义取代的双环杂芳基。在一些实施方案中，双环杂芳基具有1、2或3个氮环原子。在其他实施方案中，双环杂芳基是未经取代或如针对式I描述取代的9-或10-元双环杂芳基。在其他实施方案中，双环杂芳基是未经取代或如针对式I描述取代的8-或9-元杂芳基。在其他实施方案中，R是选自由以下组成的组的双环杂芳基：
每一个未经取代或如针对式I描述取代。在其他实施方案中，R选自由以下组成的组：
每一个未经取代或如针对式I描述取代。在其他实施方案中，R选自由以下组成的组：
在其他实施方案中，R是
在其他实施方案中，如式I中定义的，R是与未取代或取代的苯基或单环杂芳基稠合的5-或6-元氮连接的杂环烷基环，例如6元杂芳基。在其他实施方案中，R是而在其他实施方案中，R是
在其他实施方案中，R是与取代或未取代的苯基或单环杂芳基、例如式I中定义的6元杂芳基稠合的5-或6-元氮连接的杂环烷基环。在其他实施方案中，R是在其他实施方案中，R是
在其他实施方案中，R经选自由氨基和卤代组成的组的一个或多个取代基取代。
在一些实施方案中，R1是H。在其他实施方案中，R1是-C(O)Ra、-CO2Ra、-S(O)Ra或–SO2Ra。在其他实施方案中，R1是-C(O)Ra、-CO2Ra或-SO2Ra。在其他实施方案中，R1是–C(O)NH(Ra)或–C(O)C(O)NH(Ra)。在其他实施方案中，Ra是如式I定义的未经取代或取代的烷基。在其他实施方案中，Ra是–NRxRy。在其他实施方案中，Ra是–CH2C(O)Ra或–CH2SO2Ra。
在一些实施方案中，Ra是甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、异丁基、异戊基、苯基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、吡咯基、呋喃基、苯硫基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、异吲哚啉基、氮杂环丁烷基、噁丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或四氢苯硫基，各自未经取代或如针对式I所述取代。在其他实施方案中，Ra是未经取代或经选自以下的一个或多个取代基取代的双环杂芳基：烷基、-CO2-叔丁基、氧代和卤代。在其他实施方案中，Ra是各自未经取代或如针对式I所述取代的烷基、苯基、苄基、环烷基或杂环烷基。在一些实施方案中，Ra是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、2,2-二甲基丙基、羟基乙基、氨基乙基、氰基乙基、乙氧基、叔丁氧基、苯基、苄基、环丁基、环戊基、环己基、噁丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、四氢呋喃基或四氢吡喃基，各自未经取代或如针对式I所述取代。在其他实施方案中，Ra是叔丁氧基、2,2-二甲基丙基、苄基、环己基、四氢吡喃基、苯基、甲基、乙基或异丙基。
在一些实施方案中，Ra是各自未经取代或如针对式I所述取代的苯基、环烷基、杂芳基或杂环烷基。在其他实施方案中，Ra是苯基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、吡咯基、呋喃基、苯硫基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、异吲哚啉基、氮杂环丁烷基、噁丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或四氢苯硫基，各自未经取代或如式I取代。在其他实施方案中，Ra是各自未经取代或经选自以下的一个或多个取代基取代的苯基、环烷基、杂芳基或杂环烷基：氟代、氧代、甲基、-CONH2、乙酰基、-SO2甲基、-C(O)-异丙基、哒嗪基、三唑基、二甲基氨基甲基、氰基、甲基-三唑基-甲氧基、三氟代甲氧基、吡咯烷基甲基、乙酰基氨基、四唑基甲基、甲基-四唑基-甲基、甲基-咪唑基-甲基、-NHSO2甲基、1,1-二氧代硫代吗啉基、4-甲基-哌嗪基甲基、-NHCONH2、-SO2CF3、吗啉基甲基、咪唑基、-SO2NH2、甲基哌啶基、甲基-哌嗪基、-C(O)(4-甲基-哌嗪基)、吗啉基、三氟代甲基、环丙基、乙基、异噁唑基、四唑基、异丙基、苯基、氟代-苯基、叔丁基、苄基、N-甲基吡咯烷基、N-乙酰基-吡咯烷基、异丁基、丙基、甲基吡唑基、三氟代乙基、嘧啶基、氧代、乙酰基、氰基、-CO2-叔丁基和氨基。
在其他实施方案中，R1是未经取代或经选自以下的一个或多个取代基取代的烷基：氟代、叔丁氧基、-C(O)NMe2、-NHCHO、甲氧基、苯氧基、氰基、乙酰基、羟基、-OCH2C(CH3)＝OH、-NH(乙酰基)和-N(Me)(乙酰基)。
在其他实施方案中，R1是–SO2Ra，其中Ra是甲基、乙基、苯基、苄基或2,2-二甲基丙基。
在其他实施方案中，R1是–C(O)NHRa，其中Ra是甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、环己基、-CH2-环己基、噁丁烷基或甲基噁丁烷基，或者Ra是苯基或苄基，各自任选地经选自氰基、甲基、氟代、甲氧基和氯代的一个或多个取代基取代。
在一些实施方案中，R2和R3之一是氘并且另一个是H。在其他实施方案中，R2和R3都是H。
在一些实施方案中，如上描述的每个烷基或亚烷基独立为C1-10烷基。在其他实施方案中，式I中的每个烷基或亚烷基独立为C1-6烷基。而在其他实施方案中，式I中的每个烷基或亚烷基独立为C1-4烷基。
在某些实施方案中，式I化合物选自下表：
或其药学可接受的盐或立体异构体，或者所述立体异构体的药学可接受的盐。
在某些实施方案中，式I化合物选自下表：
或其药学可接受的盐或立体异构体，或者所述立体异构体的药学可接受的盐。
药物描述
本发明的剂型可以含有一种或多种本发明化合物的混合物，并且可以包括本领域技术人员已知作为药物赋形剂的其他材料。“赋形剂”包括药剂学常用的任何赋形剂，并应基于相容性和希望的剂型的释放曲线性质来选择。示例性赋形剂包括例如，粘合剂、悬浮剂、崩解剂、填充剂、表面活性剂、增溶剂、稳定剂、润滑剂、湿润剂、稀释剂等。示例性赋形剂包括例如，阿拉伯胶、明胶、胶体二氧化硅、甘油磷酸钙、乳酸钙、麦芽糖糊精、甘油、硅酸镁、酪蛋白酸钠、大豆卵磷脂、氯化钠、磷酸三钙、磷酸氢二钾、硬脂酰乳酸钠、角叉菜胶、甘油一酯、甘油二酯、预胶化淀粉等。参见例如，Hoover，John E.，Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mack PublishingCo.，Easton，Pa.1975。
示例性赋形剂包括：稳定添加剂，例如阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、聚乙二醇、羧酸及其盐、和聚赖氨酸；酸化剂(乙酸、冰醋酸、柠檬酸、富马酸、盐酸、稀盐酸、苹果酸、硝酸、磷酸、稀磷酸、硫酸、酒石酸)；气雾剂抛射剂(丁烷、二氯二氟-甲烷、二氯四氟乙烷、异丁烷、丙烷、三氯一氟甲烷)；空气置换剂(二氧化碳、氮)；醇变性剂(苯甲地那铵、甲基异丁基酮、八乙酸蔗糖酯)；碱化剂(浓氨溶液、碳酸铵、二乙醇胺、二异丙醇胺、氢氧化钾、碳酸氢钠、硼酸钠、碳酸钠、氢氧化钠、三乙醇胺)；抗结块剂(参见下文“助流剂”)；消泡剂(二甲硅油、西甲硅油)；抗微生物防腐剂(苯扎氯铵、苯扎氯铵溶液、苄索氯铵、苯甲酸、苄醇、对羟基苯甲酸丁酯、西吡氯铵、三氯叔丁醇、氯甲酚、甲酚、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸甲酯钠(甲基paraben sodium)、苯酚、苯乙醇、乙酸苯基汞、硝酸苯基汞、苯甲酸钾、山梨酸钾、对羟苯甲酸丙酯、对羟苯甲酸丙酯钠、苯甲酸钠、脱水乙酸钠、丙酸钠、山梨酸、硫柳汞、麝香草酚)；抗氧化剂(抗坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、丁羟茴醚、丁羟甲苯、次磷酸、二羟基丙硫醇(monothioglycerol)、没食子酸丙酯、甲醛次硫酸钠、偏亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、二氧化硫、生育酚、生育酚赋形剂)；缓冲剂(乙酸、碳酸铵、磷酸铵、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸、柠檬酸钾、聚偏磷酸钾、磷酸二氢钾、乙酸钠、柠檬酸钠、乳酸钠溶液、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠)；胶囊剂润滑剂(参见下文“片剂和胶囊润滑剂”)；螯合剂(依地酸二钠、乙二胺四乙酸和盐、依地酸)；包衣剂(羧甲基纤维素钠、醋酸纤维素、醋酸邻苯二甲酸纤维素、乙基纤维素、明胶、药用釉料、羟丙纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、甲基丙烯酸共聚物、甲基纤维素、聚乙二醇、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、虫胶、蔗糖、二氧化钛、巴西棕榈蜡、微晶蜡、玉米醇溶蛋白)；着色剂(焦糖、红着色剂、黄着色剂、黑着色剂或共混物、氧化铁)；络合剂(乙二胺四乙酸和盐(EDTA)、依地酸、龙胆酸乙醇酰胺、硫酸羟喹啉)；干燥剂(氯化钙、硫酸钙、二氧化硅)；乳化和/或增溶剂(阿拉伯胶、胆固醇、二乙醇胺(助剂)、单硬脂酸甘油酯、羊毛脂醇、卵磷脂、单-和二-甘油酯、单乙醇胺(助剂)、油酸(助剂)、油醇(稳定剂)、泊洛沙姆、聚氧乙烯50硬脂酸酯、聚氧乙烯35蓖麻油、聚氧乙烯40氢化蓖麻油、polyoxyl10油醚、polyoxyl20十六烷基-十八烷基醚、polyoxyl40单硬脂酸酯、聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80、丙二醇二乙酸酯、丙二醇单硬脂酸酯、十二烷基硫酸钠、硬脂酸钠、脱水山梨醇单月桂酸酯、脱水山梨醇单油酸酯、脱水山梨醇单棕榈酸酯、脱水山梨醇单硬脂酸酯、硬脂酸、三乙醇胺、乳化蜡)；助滤剂(粉状纤维素、精制硅土)；矫味剂和香料(茴香脑、苯甲醛、乙基香草醛、薄荷醇、水杨酸甲酯、谷氨酸一钠、橙花油、薄荷、薄荷油、欧薄荷醑、玫瑰油、浓玫瑰水、麝香草酚、妥卢香脂酊、香草、香草酊、香草醛)；助流剂和/或抗结块剂(硅酸钙、硅酸镁、胶体二氧化硅、滑石)；致湿剂(丙三醇、己二醇、丙二醇、山梨醇)；增塑剂(蓖麻油、二乙酰单酸甘油酯、邻苯二甲酸二乙酯、丙三醇、单-和二-乙酰化甘油单酯、聚乙二醇、丙二醇、三醋汀、柠檬酸三乙酯)；聚合物(例如，醋酸纤维素、烷基纤维素、羟基烷基纤维素、丙烯酸类聚合物和共聚物)；溶剂(丙酮、醇、稀乙醇、水合戊烯、苯甲酸苄酯、丁醇、四氯化碳、氯仿、玉米油、棉籽油、乙酸乙酯、丙三醇、己二醇、异丙醇、甲醇、二氯甲烷、甲基异丁基酮、矿物油、花生油、聚乙二醇、碳酸丙烯酯、丙二醇、芝麻油、注射用水、灭菌注射用水、灭菌冲洗用水、净化水)；吸附剂(粉状纤维素、炭、精制硅土)；二氧化碳吸附剂(氢氧化钡石灰、碱石灰)；硬化剂(氢化蓖麻油、十八醇十六醇混合物、鲸蜡醇、十六烷基酯蜡、硬脂、石蜡、聚乙烯赋形剂、硬脂醇、乳化蜡、白蜡、黄蜡)；助悬和/或增粘剂(阿拉伯胶、琼脂、海藻酸、单硬脂酸铝、膨润土、精制皂土、岩浆膨润土、卡波姆934p、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钠12、角叉菜胶、微晶纤维素和羟甲基纤维素钠纤维素、糊精、明胶、瓜尔胶、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、硅酸镁铝、甲基纤维素、果胶、聚氧化乙烯、聚乙烯醇、聚维酮、藻酸丙二醇酯、二氧化硅、胶体二氧化硅、海藻酸钠、黄蓍胶、黄原酸胶)；增甜剂(阿司帕坦、葡聚糖结合剂(dextrates)、右旋糖、赋形剂右旋糖、果糖、甘露醇、糖精、糖精钙、糖精钠、山梨醇、溶液山梨醇、蔗糖、可压缩糖、糖果剂的糖、糖浆剂)；片剂粘合剂(阿拉伯胶、海藻酸、羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、糊精、乙基纤维素、明胶、液体葡萄糖、瓜尔胶、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、聚氧化乙烯、聚维酮、预胶化淀粉、糖浆剂)；片剂和/或胶囊剂稀释剂(碳酸钙、二碱式磷酸钙、磷酸三钙、硫酸钙、微晶纤维素、粉状纤维素、葡聚糖结合剂、糊精、右旋糖赋形剂、果糖、高岭土、乳糖、甘露醇、山梨醇、淀粉、预胶化淀粉、蔗糖、可压缩糖、糖果剂的糖)；片剂崩解剂(海藻酸、微晶纤维素、交联羧甲纤维素钠、交聚维酮、波拉克林钾、淀粉羟乙酸钠、淀粉、预胶化淀粉)；片剂和/或胶囊剂润滑剂(硬脂酸钙、二十二烷酸甘油酯、硬脂酸镁、轻质矿物油、聚乙二醇、硬脂酰富马酸钠、硬脂酸、纯化硬脂酸、滑石、氢化植物油、硬脂酸锌)；张度剂(右旋糖、丙三醇、甘露醇、氯化钾、氯化钠)；媒介物：矫味和/或增甜的(芳香酏剂、复方苯甲醛酏剂、等醇酏剂、薄荷水、山梨醇溶液、糖浆剂、吐鲁香脂糖浆)；媒介物：油脂性的(扁桃仁油、玉米油、棉籽油、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、矿物油、轻质矿物油、肉豆蔻醇、辛基十二烷醇、橄榄油、花生油、桃仁油、芝麻油、大豆油、角鲨烷)；媒介物：固体载体(糖球)；媒介物：无菌的(抑菌性注射用水、抑菌性氯化钠注射液)；增粘的(见下文“悬浮剂”)；防水剂(环甲硅油、二甲硅油、西甲硅油)；以及湿润和/或增溶剂(苯扎氯铵、苄索氯铵、西吡氯铵、多库酯钠、壬苯聚醇9、壬苯聚醇10、辛苯聚醇9、泊洛沙姆、polyoxyl35蓖麻油、polyoxyl40，氢化蓖麻油、polyoxyl50硬脂酸酯、polyoxyl10油醚、polyoxyl20十六烷基-十八烷基醚、polyoxyl40硬脂酸酯、聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80、十二烷基硫酸钠、单月桂酸脱水山梨醇酯、单油酸脱水山梨醇酯、单棕榈酸脱水山梨醇酯、单硬脂酸脱水山梨醇酯、泰洛沙泊(tyloxapol))。该列表不是排他性的，而相反仅是可用于本发明的剂型的赋形剂类别和具体赋形剂的代表。
在某些方面，本发明涉及治疗由升高水平的NAMPT介导的或者一般由NAMPT活性介导的疾病或病症的方法。此类疾病或病症可以是选自由以下组成的组的一种或多种：癌症、卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、子宫颈癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、膀胱癌、胰腺癌、白血病、淋巴瘤、霍奇金病、病毒感染、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、疱疹病毒、单纯疱疹、炎性疾患、肠易激综合征、炎性肠病、类风湿性关节炎、哮喘、慢性阻塞性肺疾病、骨关节炎、骨质疏松、皮炎、特应性皮炎、银屑病、全身性红斑狼疮、多发性硬化、银屑病关节炎、强直性脊柱炎、移植物抗宿主病、阿尔茨海默病、脑卒中综合征、粥样硬化、糖尿病、肾小球肾炎、代谢综合征、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、多发性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、鳞状细胞癌、肾癌、尿道和膀胱癌、头颈癌、以及脑和中枢神经系统(CNS)癌症。
本发明化合物可用于治疗增殖性疾病，例如但不限于癌症、自身免疫疾病、病毒疾病、真菌疾病、神经性/神经变性疾患、关节炎、炎症、抗增殖病(例如，眼视网膜病变)、神经元疾病、脱发和心血管疾病。
更具体地，化合物可用于治疗多种癌症，包括(但不限于)以下：癌，包括膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌)、头颈癌、食管癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌(包括鳞状细胞癌)；淋巴系造血系统肿瘤，包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、骨髓瘤和Burkett淋巴瘤；髓系造血系统肿瘤，包括急性和慢性髓性白血病、脊髓发育不良综合征和前髓细胞性白血病；间质来源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢和周围神经系统的肿瘤，包括星形细胞瘤、神经细胞瘤、神经胶质瘤和许旺细胞瘤；和其他肿瘤，包括黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、外生性色紫颈瘤(xenoderomapigmentosum)、角化棘皮瘤(keratoctanthoma)、甲状腺毛囊癌和卡波西肉瘤。
本发明化合物可诱导或者抑制细胞凋亡。
本发明化合物也可用于化学预防癌症。将化学预防定义为通过阻断开始突变事件，或者通过阻断已经受到损伤的恶变前细胞的进展或者抑制肿瘤复发，抑制浸润性癌症的发展。
本发明的另一方面是抑制受试者中的NAMPT途径的方法，所述方法包括向有相应需要的所述受试者施用药学可接受的量的本发明化合物。
本发明的另一实施方案包括本发明的药物制剂，其中所述药物制剂在施用给人后使肿瘤负荷降低。
本发明的又一实施方案是药物制剂，其包含至少一种式I化合物和药学可接受的赋形剂。此类制剂还可以包含一种或多种辅助活性剂。
本发明的药物制剂可包含治疗有效量的辅助活性剂。
本发明化合物还用于与至少一种辅助活性剂的组合疗法。此类方法包括其中本发明化合物和至少一种辅助活性剂同时或顺序施用的方案。还有用的是其中至少一种本发明化合物与至少一种辅助活性剂组合在单一制剂中的药物组合物。
表述“辅助活性剂”一般指与主要治疗剂靶向相同或不同疾病、症状或医学病症的药剂。辅助活性剂可以治疗、减轻、缓解或改善由于施用主要治疗剂而引起的副作用。辅助活性剂的实例包括但不限于抗肿瘤剂、非格司亭和促红细胞生成素。此类药剂包括调节血细胞生长和成熟的那些。辅助活性剂的实例包括但不限于非格司亭、培非格司亭(pegfilgrastim)和促红细胞生成素。其他的此类辅助活性剂包括抑制与化疗剂的施用相关的恶心的那些，例如5-HT3受体抑制剂(例如，多拉司琼、格拉司琼或昂丹司琼，包含或不含地塞米松。本发明还描述了本发明化合物与辅助活性剂例如TNF、GCSF或其他化疗剂的一种或多种用途。其他辅助活性剂包括介导NAMPT抑制剂细胞毒性的那些，例如烟酸拯救剂，或者在NAMPT途径中起作用的其他化合物，例如尼亚新(烟酸)、烟酰胺或相关化合物，或者此类化合物的修饰释放制剂，例如
术语“化疗剂”和“抗肿瘤剂”一般指治疗、预防、治愈、痊愈、减轻、缓解、改变、矫正、改进、改善或影响恶性肿瘤及其转移的药剂。这种药剂的实例包括但不限于泼尼松、氟尿嘧啶(例如，5-氟尿嘧啶(5-FU))、阿那曲唑、比卡鲁胺、卡铂、顺铂、苯丁酸氮芥、顺铂、卡铂、多西他赛、多柔比星、氟他胺、干扰素α、来曲唑、亮丙瑞林、甲地孕酮、丝裂霉素、奥沙利铂、帕利他赛、普卡霉素(MithracinTM)、他莫昔芬、噻替派、托泊替康、戍柔比星、长春碱、长春新碱和任何前述试剂的任何组合。
本发明还涉及治疗或者预防哺乳动物中的与细胞过度生长速度相关的疾患的方法，包括向哺乳动物施用有效量的本发明的药物制剂。疾患的非限制性实例包括癌症或者从恶性肿瘤的转移。
本发明的另一方面是在患有癌症或者与异常分裂细胞相关的其他疾患的哺乳动物中抑制肿瘤细胞生长和分裂速率的方法，包括向哺乳动物施用有效量的本发明的药物制剂。
本发明的另一实施方案是在有相应需要的哺乳动物中治疗肿瘤的过度生长或者向骨转移导致的骨痛的方法，包括向哺乳动物施用有效量的本发明的药物制剂。
本发明的又一实施方案是制备药物制剂的方法，包括将至少一种本发明化合物和任选的一种或者多种药学可接受的赋形剂混合。
本发明还涉及合成本发明化合物的方法。
本发明另一方面是提供用于治疗、预防、抑制或消除患者疾病或病症的方法，通过施用治疗有效量的至少一种本公开化合物而抑制所述患者中的NAMPT，其中所述疾病或病症选自由以下组成的组：癌症、卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、子宫颈癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、膀胱癌、胰腺癌、白血病、淋巴瘤、霍奇金病、病毒感染、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、疱疹病毒、单纯疱疹、炎性疾患、肠易激综合征、炎性肠病、类风湿性关节炎、哮喘、慢性阻塞性肺疾病、骨关节炎、骨质疏松、皮炎、特应性皮炎、银屑病、全身性红斑狼疮、多发性硬化、银屑病关节炎、强直性脊柱炎、移植物抗宿主病、阿尔茨海默病、脑卒中综合征、粥样硬化、糖尿病、肾小球肾炎、代谢综合征、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、多发性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、鳞状细胞癌、肾癌、尿道和膀胱癌、头颈癌、以及脑和中枢神经系统癌症。
在某个实施方案中，式I化合物可用于治疗实体和液体肿瘤、非小细胞肺癌、白血病、淋巴瘤、卵巢癌、神经胶质瘤、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、子宫颈癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、rhino-gastric肿瘤、结肠直肠癌、CNS癌、膀胱癌、胰腺癌和霍奇金病。
在某个实施方案中，式I化合物可用于治疗实体和液体肿瘤、非小细胞肺癌、白血病、淋巴瘤、卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、子宫颈癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、rhino-gastric肿瘤、结肠直肠癌、膀胱癌、胰腺癌和霍奇金病。
另一实施方案是包含药学可接受的本发明化合物的药物制剂，其在施用给受试者(例如，人)后提供了肿瘤负荷和/或转移酶的减少。药物制剂可以通过口服方式或者其他适当方式施用。
另一实施方案是治疗有相应需要的受试者(例如，人)的卵巢癌的方法，通过给受试者施用有效量的本发明化合物或药物制剂。
而另一实施方案是治疗有相应需要的受试者(例如，人)的非小细胞肺癌(NSCLC)的方法，通过给受试者施用有效量的本发明化合物或药物制剂。
而另一实施方案是治疗有相应需要的受试者(例如，人)的结肠癌的方法，通过给受试者施用有效量的本发明化合物或药物制剂。
而另一实施方案是治疗有相应需要的受试者(例如，人)的乳腺癌的方法，通过给受试者施用有效量的本发明药物制剂。
而另一实施方案是治疗有相应需要的受试者(例如，人)的白血病的方法，通过给受试者施用有效量的本发明化合物或药物制剂。
而另一实施方案是在手术切除和/或放射疗法之前或之后治疗有相应需要的受试者(例如，人)的结肠癌的方法，通过给受试者施用有效量的本发明化合物或药物制剂。
而另一实施方案是在手术切除和/或放射疗法之前或之后治疗有相应需要的受试者(例如，人)的癌症的方法，通过给受试者施用有效量的本发明化合物或药物制剂，包括辅助疗法以治疗恶心，包含或不含地塞米松。
而另一实施方案是在手术切除和或放射疗法之前或之后治疗有相应需要的受试者(例如，人)的癌症的方法，通过给受试者施用有效量的本发明化合物或药物制剂，包括用一种或多种额外治疗剂或其药学可接受的盐辅助疗法。此类额外治疗剂的非限制性实例包括细胞毒性剂(例如但不限于DNA相互作用剂(诸如顺铂或多柔比星))；紫杉烷类(例如泰索帝、泰素)；拓扑异构酶II抑制剂(诸如依托泊苷)；拓扑异构酶I抑制剂(诸如依立替康(或CPT-11)、camptostar或托泊替康)；微管蛋白相互作用剂(诸如帕利他赛、多西他赛或埃坡霉素)；激素剂(诸如他莫昔芬)；胸苷酸合成酶抑制剂(诸如5-氟尿嘧啶或5-FU)；抗代谢药(诸如甲氨蝶呤)；烷化剂(诸如替莫唑胺、环磷酰胺)；法呢基蛋白转移酶抑制剂(诸如，SARASARTM.(4-[2-[4-[(11R)-3,10-二溴-8-氯-6,11-二氢-5H-苯并[5,-6]环庚并[1,2-b]吡啶-11-基-]-l-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶-氨甲酰，或SCH66336)、替吡法尼(或R115777，来自Janssen Pharmaceuticals)、L778，123(法呢基蛋白转移酶抑制剂，来自Merck &Company，Whitehouse Station，N.J.)、BMS214662(法呢基蛋白转移酶抑制剂，来自Bristol-Myers Squibb Pharmaceuticals，Princeton，N.J.)；信号传导抑制剂(例如，(来自Astra Zeneca Pharmaceuticals，England)、(EGFR激酶抑制剂)、EGFR抗体(例如，C225)、(C-abl激酶抑制剂，来自NovartisPharmaceuticals，East Hanover，N.J.)；干扰素，例如(来自Merck &Company)、(来自Merck & Company)；激素治疗组合；芳香酶组合产品；ara-C、阿霉素、cytoxan和吉西他滨。
其它抗癌(也称为抗肿瘤)剂包括但不限于尿嘧啶芥、氮芥、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三亚乙基蜜胺、三亚乙基硫代磷酰胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巯嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、奥沙利铂、亚叶酸、奥沙利铂(来自Sanofi-SynthelaboPharmaceuticals，France)、喷司他丁、长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、放线菌素D、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、光辉霉素、脱氧考福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷、17α-炔雌醇、己烯雌酚、睾酮、泼尼松、氟甲睾酮、丙酸屈他雄酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、甲泼尼龙、甲睾酮、泼尼松龙、曲安西龙、氯烯雌醚、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙瑞林、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、顺铂、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、诺维本、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、雷洛昔芬、屈洛昔芬、六甲蜜胺、阿瓦斯丁、赫赛汀、百克沙、万珂、泽瓦林、三氧二砷、希罗达、长春瑞滨、卟菲尔钠、Erbitux、Liposomal、塞替哌、Altretamine、美法仑、曲司珠单抗、来曲唑、氟维司群、依西美坦、异环磷酰胺、利妥昔单抗、C225和Campath、5-氟尿嘧啶和亚叶酸，包含或不含5-HT3受体抑制剂(例如，多拉司琼、格拉司琼或昂丹司琼)，包含或不含地塞米松。
此外，根据本发明，本文描述的本发明化合物可以与辅助活性剂组合施用和/或配制。在某些实施方案中，辅助活性剂是尼亚新、烟酰胺、烟酸、烟酰胺单核苷酸(NMN)或其变化形式，包括尼亚新的修饰释放制剂，例如文献中也已经描述了作为“拯救剂”或“拯救剂”的尼亚新、烟酰胺、烟酸、烟酰胺单核苷酸(NMN)或其变化形式，并且这些术语已经在本文使用。烟酰胺和/或烟酸作为拯救剂或拯救剂的作用已经在例如Beauparlant等人，Anti-Cancer Drugs2009，20：346–354中以及Rongvaux等人，The Journal of Immunology，2008，181：4685–4695中描述。这两个参考文献描述了拯救剂或拯救剂在减轻NAMPT抑制剂的可能的毒性效应方面的作用。
如果配制为固定剂量，那么这种组合产品使用本文描述(或本领域技术人员已知)的剂量范围内的本发明化合物和在其剂量范围内的其他药学活性剂或者治疗。例如，已经发现，CDC2抑制剂奥罗莫星(olomucine)在诱导细胞凋亡方面与已知细胞毒性剂协同作用(J.Cell Sci.,(1995)108，2897)。当组合制剂不合适时，本发明化合物也可与已知抗癌剂或细胞毒性剂顺序施用。在任何联合治疗中，本发明不限制施用顺序；公开的式的化合物可在已知抗癌剂或细胞毒性剂的施用之前或者之后施用。例如，细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂夫拉平度(flavopiridol)的细胞毒活性受到与抗癌剂的施用顺序的影响。Cancer Research,(1997)57，3375。这种技术在本领域技术人员以及主治医师的技术范围内。
通过施用流体(诸如水)、髓袢利尿药、一种或多种辅助活性剂(例如化疗剂或抗肿瘤剂，诸如亚叶酸和氟尿嘧啶)或辅助化疗剂(诸如非格司亭和红细胞生成素)，或者前述的任何组合，可增强任何前述方法。
而另一实施方案是给有相应需要的受试者(例如，人)施用本发明化合物的方法，通过给受试者施用本发明药物制剂。
而另一实施方案是制备本发明药物制剂的方法，通过混合至少一种药学可接受的本发明化合物和任选地一种或多种药学可接受的添加剂或赋形剂。
为了从本发明描述的化合物制备药物组合物，惰性的药学可接受的载体可以是固体或液体。固体形式制剂包括粉末剂、片剂、分散颗粒、胶囊剂、扁囊剂和栓剂。粉末剂和片剂可包含约5至约95％的活性成分。适合的固体载体是本领域已知的，例如，碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖或者乳糖。片剂、粉末剂、扁囊剂和胶囊剂可作为适于口服施用的固体剂型使用。药学可接受的载体的实例和各种组合物的制备方法可参见A.Gennaro(编辑)，Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版(1990)，MackPublishing Co.，Easton，Pa。
本发明组合物和制剂可以作为无菌组合物和无菌制剂施用。无菌药物制剂根据本领域技术人员已知的药物级无菌标准混合或生产(例如，美国药典第797、1072和1211章；California Business & Professions Code4127.7；16California Code ofRegulations1751，21Code of Federal Regulations21，或在美国之外与此类法规的对应物)。
液体形式制剂包括溶液剂、混悬剂和乳剂。可作为实例提及的是用于肠胃外注射的水或者水-丙二醇溶液剂，或者对于口服溶液剂、混悬剂和乳剂添加增甜剂和遮光剂。液体形式制剂也可包括用于鼻内施用的溶液剂。
适于吸入的气雾剂可包括溶液和粉末形式的固体，其可与药学可接受的载体(例如惰性压缩气体，例如氮)组合。
还包括意图在即将使用之前转化成液体形式制剂以口服或者肠胃外施用的固体形式制剂。这种液体形式包括溶液剂、混悬剂和乳剂。
本发明化合物也可透皮递送。透皮组合物可采取乳霜、洗剂、气雾剂和/或乳剂的形式，并且可包含在本领域为此目的常用的基质或者贮库型透皮贴剂中。
本发明化合物也可皮下递送。
化合物可以口服或者静脉内施用。
药物制剂可以是单位剂量形式。以此形式，将所述制剂细分成适合尺寸的单位剂量，含有适量活性组分，例如，实现希望目的的有效量。
根据具体应用，在制剂的单位剂量中的活性化合物的量可改变或调整，从约1mg至约1000mg，例如从约1mg至约500mg，特别是从约1mg至约250mg，或者从约1mg至约25mg。
根据患者的需要和被治疗病症的严重度，可改变使用的实际剂量。对于具体情况确定适合的剂量方案在本领域的技术范围内。为方便起见，可按需要将总日剂量在日间分开并分份给药。
本发明化合物和/或其药学可接受的盐的施用量和频率将根据主治医师的判断来调节，考虑诸如患者的年龄、病症和大小以及被治疗症状的严重度等因素。对于口服施用，通常推荐的日剂量方案可以是范围从约1mg/日至约500mg/日，优选1mg/日至200mg/日，以2至4份分份剂量。
方案和实施例
现在参考下文其一般制备的示例说明的合成方案和随后具体实施例来描述用于制备本发明化合物的示例性非限制性化学实体和方法。本领域技术人员理解，其他合成途径可用于合成根据本发明的化合物。尽管在本文描绘和讨论了具体起始材料和试剂，其他起始材料和试剂可以容易地取代以提供许多衍生物和/或反应条件。此外，可以使用本领域技术人员公知的常规化学，根据本公开进一步修饰通过所述方法制备的许多示例性化合物。
技术人员会理解，为了获得本文各种化合物，可以适当选择起始材料以使最终想要的取代基在反应方案中被携带，视情况有或没有保护，以产生想要的产物。可选地，可能需要或希望采用替代最终想要的取代基的适当基团，该基团可以在反应方案中被携带并在适当时被想要的取代基替代。反应方案中描绘的每一个反应优选在约0℃至所用溶剂回流温度的温度下进行。除非另外规定，以下方案所示变量如上参考式I定义。
可以通过包括化学领域公知的那些类似的过程的合成途径来合成本发明化合物，特别是参考本文包含的描述，以及描述于以下的针对其他杂环的那些：ComprehensiveHeterocyclic Chemistry II，编辑Katritzky和Rees，Elsevier，1997，例如第3卷；Liebigs Annalen der Chemie,(9)：1910-16,(1985)；Helvetica Chimica Acta，41：1052-60,(1958)；Arzneimittel-Forschung，40(12)：1328-31,(1990)，其每一个明确通过引用并入本文。起始材料一般可获自商业来源，例如Sigma-AldrichChemicals(Milwaukee，WI)，或者使用本领域技术人员公知的方法容易地制备(例如，由以下文献中大体描述的方法来制备：Louis F.Fieser和Mary Fieser，Reagents forOrganic Synthesis，v.1-23，Wiley，N.Y.(1967-2006编辑)，或Beilsteins Handbuchder organischen Chemie，4，Aufl.编辑Springer-Verlag，Berlin，包括增刊(还可通过Beilstein在线数据库获得)。
用于合成根据本发明的化合物和必要试剂和中间体的合成性化学转化和保护基团方法学(保护和脱保护)是本领域已知的，包括例如以下中描述的那些：R.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wileyand Sons(1999)；和L.Paquette编辑，Encyclopedia of Reagents for OrganicSynthesis，John Wiley and Sons(1995)及其后续版本。此类保护的需要将根据远端官能性质和制备方法条件而变化。适当的氨基保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基(BOC)、苄基氧基羰基(CBz)和9-芴基亚甲基氧基羰基(Fmoc)。此类保护的需要容易由本领域技术人员确定。
在制备本发明化合物中其他特别有用的反应包括烷基化、还原性胺化、氧化、还原和水解反应。此类转化完全在本领域普通技术范围内。
可以单个制备根据本发明的化合物，或者可将根据本发明的化合物制备为化学物文库，包括至少2个或者5至1,000个化合物，或者10至100个化合物。式I化合物的文库可通过本领域技术人员已知的程序，由组合的“分离和混合”方法来制备，或者通过使用溶液相或固相化学的多平行合成来制备。因此，根据本发明的另一方面，提供了包括至少2个式I化合物或其药学可接受的盐的化合物文库。
在制备根据本发明的化合物的方法中，将反应产物彼此和/或与起始物质分离可能是有利的。可通过本领域常用的技术，将每个步骤或一系列步骤的期望产物分离和/或纯化至期望的均一性程度。通常，此类分离包括多相萃取、从溶剂或溶剂混合物结晶、蒸馏、升华或色谱。色谱可包括任何数目的方法，包括例如：反相和正相；尺寸排阻；离子交换；高压、中压和低压液相色谱法和装置；小规模分析型；模拟移动床(SMB)和制备薄层或厚层色谱，以及小规模薄层和快速色谱技术。
另一类分离方法包括用选择的试剂处理混合物，所述选择的试剂结合期望的产物、未反应的起始物质、反应副产物等或以其他方式使它们可分离。此类试剂包括吸收剂或吸附剂，例如活性炭、分子筛、离子交换介质等。可选地，所述试剂可以是酸(在碱性材料的情况)、碱(在酸性材料的情况下)、结合试剂例如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂例如冠醚、液/液离子萃取试剂(LIX)等。合适分离方法的选择取决于蒸馏和升华中所涉及材料的性质，例如沸点和分子量，色谱极性官能团的存在或缺乏，材料在多相萃取中酸性和碱性介质中的稳定性等。
单个立体异构体，例如对映异构体(基本上没有其立体异构体)可如下获得：使用例如用光学活性拆分剂形成非对映异构体的方法来拆分外消旋混合物(Eliel,E.和Wilen,S.“Stereochemistry of Organic Compounds,”John Wiley & Sons,Inc.，New York，1994；Lochmuller,C.H.,(1975)J.Chromatogr.，113(3)：283-302)。本发明手性化合物的外消旋混合物可通过任何合适的方法分离和分开，所述方法包括：(1)用手性化合物形成离子性的非对映异构体盐，以及通过分级结晶或其他方法分离；(2)用手性衍生试剂形成非对映异构体化合物，分离所述非对映异构体，并转化成纯立体异构体；以及(3)在手性条件下直接分离基本纯或富集的立体异构体。参见：“DrugStereochemistry,Analytical Methods and Pharmacology,”Irving W.Wainer编辑，Marcel Dekker,Inc.，New York(1993)。
在方法(1)中，非对映异构体盐可通过对映异构体纯的手性碱例如马钱子碱、奎宁、麻黄碱、番木鳖碱(strychnine)、a-甲基-b-苯基乙胺(安非他命)等与带有酸性官能团例如羧酸和磺酸的不对称化合物反应而形成。非对映异构体盐可通过分级结晶或离子色谱来诱导分离。为分离氨基化合物的光学异构体，加入手性羧酸或磺酸例如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸可导致形成所述非对映异构体盐。
可选地，通过方法(2)，使待拆分的底物与手性化合物的一个对映异构体反应，形成非对映异构体对(E.和Wilen,S.“Stereochemistry of Organic Compounds”，John Wiley & Sons,Inc.，1994，p.322)。非对映异构体化合物可如下形成：使不对称化合物与对映异构体纯的手性衍生试剂例如薄荷基衍生物反应，然后分离非对映异构体并水解得到纯的或富集的对映异构体。确定光学纯度的方法包括制备外消旋混合物的手性酯(例如薄荷酯，例如(-)氯甲酸薄荷酯(在碱的存在下)或者莫希尔酯，即a-甲氧基-a-(三氟甲基)苯基乙酸酯，以及分析1H NMR光谱以确定两种阻转异构体对映异构体或非对映异构体的存在(Jacob III.J.Org.Chem.(1982)47：4165)。阻转异构体化合物的稳定的非对映异构体可通过正相和反相色谱、然后用于分离阻转异构体萘基-异喹啉的方法(WO 96/15111)来分离和分开。通过方法(3)，两种对映异构体的外消旋混合物可通过使用手性固定相的色谱来分离(“Chiral LiquidChromatography”(1989)W.J.Lough编辑，Chapman and Hall，New York；Okamoto,J.Chromatogr.,(1990)513：375-378)。富集的或纯化的对映异构体可通过用于区分具有不对称碳原子的其他手性分子的方法鉴别，例如旋光性和圆二色性。
以下方案和本文其他地方使用的缩写和首字母缩写定义如下：
CDCl3                    氘代氯仿
CD3OD                    氘代甲醇
δ                       化学位移(ppm)
DCM                      二氯甲烷
DIPEA                    二异丙基乙胺
DMF                      N,N-二甲基甲酰胺
DMSO                     二甲基亚砜
EDCI                     1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
ELSD                     蒸发光散射检测器
equiv                    摩尔当量
ESI                      电喷雾电离(ES+或ES-)
h                        小时
H2                       氢气
                         O-(7-Aza苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基六氟磷酸
HATU                     脲
1H NMR                   质子核磁共振光谱
                         O-(7-Aza苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基六氟磷酸
HATU                     脲
HOBt                     1-羟基苯并三唑
HPLC                     高效液相色谱
LC/MS                    液相色谱–质谱
MeOH                     甲醇
MHz                      兆赫
min                      分钟
PDA                      光二极管阵列检测器
psi                      磅/平方英寸
rt                       室温
Raney-Ni                 阮内镍
Rf                       保留因子
TFA                      三氟乙酸
Tf2O                     三氟甲磺酸酐
THF                      四氢呋喃
TLC                      薄层色谱
下面描述用于制备本发明化合物的示例性一般反应方案。
一般方案A
可以如上方案A所示制备式I化合物。其中X是例如OH、氯代或溴代的式I化合物与胺B反应生成式I化合物。当X是OH时，偶联反应可以在偶联剂例如EDCI、HTU或HOBt以及碱(例如K2CO3、C2CO3、三烷基胺、醇钠或醇钾)存在下、在惰性溶剂例如二氯甲烷、N,N-二烷基甲酰胺、N,N-二烷基乙酰胺、二烷基醚、环醚、DMSO或N-甲基-2-吡咯烷酮或其混合物中、在范围从-78℃至200℃的温度下发生。胺和酸的这种偶联反应是本领域公知的。可选地，其中X是溴代或氯代的化合物A可以与胺B在适当的碱例如三乙胺、K2CO3或Cs2CO3存在下反应以形成式I化合物。
一般方案B
可以跟扭矩一般方案B制备某些式I化合物，其中R基团通过R基团内的氮原子连接至羰基碳(形成脲)。使用本领域技术人员已知的方法活化胺B，其中LG是适当的离去基团，例如烷氧基或卤代基团，然后活化的化合物C在原位或以单独反应步骤在碱例如三烷基胺存在下与适当取代的胺R20R21NH反应，以形成式I化合物。
一般方案C
可以根据一般方案C制备胺B。使用标准的保护基化学使胺D中的螺环氮脱保护以形成胺E，其中PG1和PG2是适当的氮保护基，例如Boc或CBz基团，或者PG1是R-C(O)-(在该例中，化合物D可以如方案A所示形成)。如方案A所述肽偶联条件下，在碱例如叔胺碱存在下用适当取代的酰氯或磺酰氯或者用适当取代的酸RaCO2H的酰化或磺酰化产生化合物F。当PG1是保护基时，该基团的去除产生了胺B。
本领域技术人员将发现，上述一般方案中描述的起始材料、试剂和条件可以变化，并且本发明涵盖用于产生化合物的额外步骤。此外，本领域技术人员理解，上述方案中存在的反应步骤可以不同顺序进行。
实施例化合物的化学分析方法
除非另外指示，使用以下机器之一在环境温度下记录1H NMR光谱：具有三重共振5mm探针的Varian Unity Inova(400MHz)光谱仪，具有三重共振5mm探针的BrukerAvance DRX400(400MHz)光谱仪，配有用于检测1H和13C的标准5mm双频探针的BrukerAvance DPX300(300MHz)，使用BBI Broad Band Inverse5mm探针的Bruker AVIII(400MHz)，或使用QNP(Quad Nucleus detect)5mm探针的Bruker AVIII(500MHz)。以相对于内部标准的ppm表示化学位移；四甲基硅烷(ppm＝0.00)。已经使用了以下缩写：br＝宽信号，s＝单峰，d＝双峰，dd＝双重双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰。
使用以下方法之一进行高效液相色谱–质谱(LC/MS)和超临界流体色谱(SFC)实验以确定保留时间(RT)和相关质量离子，例如，[M+H]+、[M+Na]+、[M-H]-：
方法A
仪器：SHIMADZU LCMS-2010EV
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，2.2um，3.0*50mm；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈；梯度：2.0min内5％至100％B，100％B持续1.1min，0.2min内100％至5％B，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.7kv。
方法B
仪器：SHIMADZU LCMS-2010EV
LC参数：柱：Waters XBridge C18，3.0×50mm，3.5μ；流动相A：水/5mM乙酸铵；流动相B：甲醇；梯度：1.8min内10％至100％B，100％B持续1.3min，0.1min内100％至10％B，然后停止；流速：0.9mL/min；柱温：40℃；检测器：PDA和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正&负)；接口电压：4.0kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.5kv。
方法C
仪器：SHIMADZU LCMS-2010EV
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，2.2um，3.0*50mm；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈/0.05％TFA；梯度：2.0min中5％至100％B，100％B持续1.1min，0.2min内100％至5％B，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.5kv。
方法D
仪器：SHIMADZU LC/MS-2010EV
LC参数：柱：Waters Xselect C18，3.0×50mm，3.5μm；流动相A：水/0.1％甲酸；流动相B：乙腈/0.05％甲酸；梯度：2.0min中5％至100％B，100％B持续1.2min，0.1min中100％至5％B，然后停止；流速：0.9mL/min；柱温：35℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正&负)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.5kv。
方法E
仪器：SHIMADZU LCMS-2010EV
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0×50mm，2.2μm；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈；梯度：2.0min内5％至100％B，100％B持续1min，0.3min内100％至5％B，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.3kv。
方法F
仪器：SHIMADZU LC/MS-2010EV
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0×50mm，2.2μm；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈；梯度：5％至100％B持续2.0min，100％B持续1.2min，0.1min内100％至5％B，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：70-900(m/z)；检测器电压：1.1kv。
方法G
仪器：SHIMADZU LC/MS-2020EV
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，50mm*3.0mm，2.2um；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈；梯度：2.1min内5％至100％B，100％B持续0.8min，0.1min内100％至5％B，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：乙腈中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.05kv。
方法H
仪器：SHIMADZU LCMS-2020
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，2.2um，3.0*50mm；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈/0.05％TFA；梯度：2.0min内5％至100％B，100％B持续1.2min，0.1min内100％至5％B，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.1kv。
方法I
仪器：SHIMADZU LCMS-2020
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，50*3.0nm，2.2um；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈/0.05％TFA；梯度：5％B至100％B持续2.0min，100％B持续1.2min，0.1min内100％B至5％，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：70-900(m/z)；检测器电压：1.05kv。
方法J
仪器：SHIMADZU LCMS-2020
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，3.0×50mm，2.2μ；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈；梯度：2.0min内5％至100％B，100％B持续1.2min，0.2min内100％至5％B，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：乙腈中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：200℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.05kv。
方法K
仪器：SHIMADZU LC/MS-2020
LC参数：柱：Gemini-NX3u C18 110A；流动相A：水/0.04％氨；流动相B：乙腈；梯度：2.0min内5％至100％B，100％B持续1.1min，0.1min内100％至5％B，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；检测器：254nm和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正&负)；接口电压：4.5kv；热块：200℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：0.75kv)。
方法L
仪器                 Waters mass-directed
流动相A              0.1％H 2 O w/NH 4 OH
流动相B              乙腈
                     Phenomenex Gemini N-X C18，10um，
柱                   21.5x100mm
柱温                 25℃
LC梯度               10min内5至85％
LC流速               35mL/min
UV波长               254nm
质谱仪               Waters3100
电离                 ES+
方法M
HPLC                 Waters mass-directed
流动相A              0.1％H2O w/NH4OH
流动相B              乙腈
                     Phenomenex Gemini N-X C18，10um，30x100
柱                   mm
柱温                 25℃
LC梯度               15min内5至50％
LC流速               60mL/min
UV波长               254nm
质谱仪               Waters3100
电离                 ES+
方法N
仪器：SHIMADZU LC/MS-2020
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，2.2um，3.0*50mm；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈；梯度：5％B至100％B持续2.0min，100％B持续1.2min，0.1min内100％B至5％，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：UV和ELSD；样品制备：甲醇中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：70-900(m/z)；检测器电压：1.1kv。
方法O
仪器：SHIMADZU UHPLCMS-2020EV(LC-30AD泵，二元溶剂管理器，SIL-30AC自动进样器，SPDM20A检测器，Alltech3300 ELSD检测器)
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，1.6um，2.0*50mm；流动相A：水/1％甲酸；流动相B：乙腈/0.1％甲酸；梯度：5％B至100％B持续2.0min，100％B持续1.1min，0.1min内100％B至5％，然后停止；流速：0.7mL/min；柱温：40℃；检测器：二极管阵列检测器(DAD)和ELSD；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.0kv；热块：200℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：0.9kv。
方法P
仪器：SHIMADZU LC/MS-2020
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，2.2um，3.0*50mm；流动相A：水/0.1％甲酸；流动相B：乙腈/0.05％甲酸；梯度：5％B至100％B持续2.0min，100％B持续1.1min，0.1min内100％B至5％，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：PDA和ELSD；样品制备：乙腈中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：调谐文件；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：0.9kv。
方法Q
仪器：SHIMADZU LC/MS-2020
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，2.2um，3.0*50mm；流动相A：水/0.1％甲酸；流动相B：乙腈/0.05％甲酸；梯度：5％B至100％B持续2.0min，100％B持续1.2min，0.2min内100％B至5％，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：UV和ELSD；样品制备：乙腈中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：4.5kv；热块：200℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：0.95kv。
方法R
仪器：SHIMADZU LC/MS-2020
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，2.2um，3.0*50mm；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈/0.05％TFA；梯度：5％B至100％B持续1.2min，100％B持续0.9min，0.2min内100％B至5％，然后停止；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测器：DAD和ELSD；样品制备：乙腈中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：调谐文件；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：1.1kv。
方法S
仪器：SHIMADZU LC/MS-2020
LC参数：柱：Shim-pack XR-ODS，1.6um，2.0*50mm；流动相A：水/0.1％甲酸；流动相B：乙腈/0.05％甲酸；梯度：5％B至100％B持续2.0min，100％B持续1.1min，0.1min内100％B至5％，然后停止；流速：0.7mL/min；柱温：40℃；检测器：PDA和ELSD；样品制备：乙腈中1mg/mL；注射体积：1μL。
MS参数：接口：ESI(正)；接口电压：调谐文件；热块：250℃；喷雾气体：1.50L/min；扫描范围：90-900(m/z)；检测器电压：0.85kv。
方法T
仪器：HPLC-Agilent1200
LC参数：柱：ZORBAX SB-C18，2.1*30mm，1.8um；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈；梯度：3％B持续0.3min，6.5min内3％B至95％B，95％B持续1.5min，0.1min内95％B至3％B，然后停止；流速：0.4mL/min；柱温：25℃；检测器：254nm。
MS参数：Agilent6140四级杆LC/MS；接口：ESI(正)；扫描范围：90-1300amu。
方法U
仪器：Waters Acquity UPLC
LC参数：柱：Acquity UPLC BEH C18，1.7mm，2.1*50mm；流动相A：水/0.05％TFA；流动相B：乙腈；梯度：17.5min内2％至98％B，98％B持续1.5min，平衡1.5min，然后停止；流速：0.6mL/min；柱温：40℃；检测器：254nm和220nm。
MS参数：Waters LCT Premier XE；接口：ESI(正)；扫描范围：80-1300amu；检测器：飞行时间。
以下实施例示例说明了本发明代表性化合物的制备。除非另外规定，所有试剂和溶剂都是标准商品级并且没有进一步纯化而使用。
I.中间体的制备
中间体1：呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酸
步骤1.3-羟基异烟酸乙酯。3-羟基异烟酸(495g，3.56mol)在乙醇(7L)和浓H2SO4(250mL)中的溶液在回流下加热72h，然后冷却至室温并减压浓缩以去除溶剂。残余物溶解于水(3L)并通过添加饱和异烟酸水溶液调节pH至4。通过过滤去除得到的沉淀并用DCM(2L×3)萃取滤液。盐水洗涤合并的有机相，经无水Na2SO4干燥，然后减压浓缩以提供作为黄色油的3-羟基异烟酸乙酯(414g，70％)。
步骤2.3-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)异烟酸乙酯。在-10℃下向三苯基膦(780g，2.97mol)在THF(6L)中的溶液滴加偶氮二羧酸二异丙酯(600mL，2.97mol)。在-10℃下搅拌反应混合物30min，然后滴加3-羟基异烟酸乙酯(414g，2.48mol)在THF(1L)中的溶液。室温搅拌得到的混合物16h，然后减压浓缩。残余物在乙酸乙酯(4L)和1N HCl(2L)之间分配。分离水层并通过1N HCl(1L×2)萃取有机相。通过添加固体NaHCO3缓慢调节合并水层至pH8，然后用乙酸乙酯(2L×2)萃取。合并的有机层经无水Na2SO4干燥，然后减压浓缩以提供作为棕色油的标题化合物(380g，61％)。
步骤3.3-羟基呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酸乙酯。在0℃、氩下向NaH(72g，1.8mol，矿物油中60％混悬液)在无水THF(2L)中的混悬液滴加3-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)异烟酸乙酯(380g，1.5mol)在THF(1L)中的溶液。室温搅拌反应混合物16h，然后用冰水(1L)小心猝灭。浓缩得到的混合物至1.2L体积，然后用饱和NaHCO3水溶液(2.5L)稀释，并搅拌另外30min。通过过滤收集沉淀的固体并用乙酸乙酯(1L)洗涤。用乙酸乙酯(1L×2)洗涤滤液并将水层与固体合并并用乙酸小心酸化至pH5。通过过滤收集得到的固体并真空干燥以提供作为黄色固体的标题化合物(210g，68％)。
步骤4.3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酸乙酯。0℃下向3-羟基呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酸乙酯(210g，1.01mol)和吡啶(107mL，1.3mol)在无水DCM(3L)中的溶液滴加酸酐(203g，1.2mol)。室温搅拌反应混合物16h，然后用冰水(1L)猝灭。用DCM(1L×2)萃取水层，合并的有机层经无水Na2SO4干燥，然后减压浓缩。通过硅胶柱色谱纯化残余物，用10％乙酸乙酯/石油醚洗脱以提供作为白色固体的标题化合物(298g，87％)。
步骤5.呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酸乙酯。向3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酸乙酯(298g，0.88mol)在乙醇(3L)中溶液添加10％Pd/C(30g)和三乙胺(281mL，2.02mol)。氢气氛下搅拌反应混合物16h，然后通过硅藻土垫过滤。减压浓缩滤液并通过硅胶柱色谱纯化残余物，用20％乙酸乙酯/石油醚洗脱以提供作为灰白色固体的标题化合物(158g，94％)。
步骤6.向呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酸乙酯(158g，0.83mol)在水：THF：MeOH(1：1：1，2.4L)中的溶液滴加KOH(139g，2.49mol)。室温搅拌反应混合物16h，然后浓缩至750mL的体积。向该残余物添加乙酸直至pH-4。通过过滤收集得到的固体并用水(300mL×2)洗涤，真空烘箱干燥过夜以提供作为淡黄色固体的标题化合物(101g，75％)。H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.07(s，1H)，8.47(d，J＝5.6Hz，1H)，7.80(d，J＝5.2Hz，1H)，7.61(s，1H)。MS(ESI+)m/z：164[M+H]+。
中间体2：咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
步骤1.咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸盐酸盐。加热2-氯乙醛(277g，40％)和6-氨基烟酸(150g)在乙醇(330mL)中的混合物至回流并搅拌8h。冷却后，沉淀固体并通过真空过滤分离，然后用乙醇洗涤并真空干燥以提供作为浅黄色固体的标题化合物(1.78g，82％)。
步骤2.咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸盐酸盐(170g)用水(600mL)稀释并加热直至获得澄清溶液，然后缓慢添加NaOH(2M)水溶液以调节pH＝5-6。使用冰水浴使反应混合物冷却至0℃。通过真空过滤收集得到的沉淀，然后用乙醇洗涤并真空干燥以提供作为淡黄色粉末的标题产物(107.2g，77％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.76–12.82(br，1H)，9.28(s，1H)，8.10(s，1H)，7.68(s，1H)，7.64–7.56(m，2H)。MS(ESI+)m/z：163[M+H]+。
中间体3：咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羧酸
步骤1.(Z)-2-(二甲氧基甲基)-3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-1-酸钠。将3,3-二甲氧基丙酸甲酯(100g，675mmol)和甲酸甲酯(81g，1350mmol)溶解于无水THF(450mL)。然后在0℃下分部分缓慢添加氢化钠(60％分散体；32.4g，810mmol，1.2eq.)。反应混合物在室温下搅拌1h，然后在50℃下加热3h。该期间，观察到H2放出。冷却至室温之后，然后减压去除溶剂以提供粗产物，其没有进一步纯化而直接用于下一步骤。
步骤2.2-氨基嘧啶-5-羧酸甲酯。将来自步骤1的粗烯醇式盐溶解于DMF(200mL)，并添加盐酸胍(64g，670mmol)。在100℃、N2下加热混合物3h。冷却至室温之后，添加水并用冰水浴冷却混合物。通过真空过滤收集得到的沉淀并真空干燥以提供希望的产物(63g，2步产率61％)。
步骤3.咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羧酸甲酯。向2-溴-1,1-二乙氧基乙烷(100.6g，0.51mol)和2-氨基嘧啶-5-羧酸甲酯(63g，0.41mol)在乙醇(300mL)中的混合物添加浓HBr(40％)(55g)。N2下加热反应混合物至回流3h。冷却至室温之后，用冰水浴进一步冷却混合物。得到的沉淀通过真空过滤收集并真空干燥过夜以提供希望的产物(92g，87％)。
步骤4.向含有咪唑并[1,2-a]嘧啶-6-羧酸甲酯(92g，356.5mmol)的圆底烧瓶添加水(200mL)。然后在室温搅拌下滴加NaOH(H2O中6N，2.5eq.)。室温搅拌那1h之后，用冰水浴冷却混合物并添加浓HCl(pH＝5-6)。减压浓缩得到的混合物至大约150mL(3/4体积)并用冰水浴冷却。得到的沉淀通过真空过滤收集，冷水(50mL)洗涤并干燥以提供为灰白色固体的标题化合物(46g，79％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.29(d，J＝2.0Hz，1H)，8.89(d，J＝2.0Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.70(s，1H)。MS(m/z，ES+)：164.1[M+H]+，186.1[M+Na]+。
中间体4：1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-羧酸
步骤1.1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-胺。0℃下向丙烯腈(30mL，455mmol)在THF(250mL)中的溶液逐滴添加NH2NH2·H2O(23.19mL，478mmol)。添加完成之后，室温搅拌混合物2h，然后逐滴添加4-甲氧基苯甲醛(55.4mL，455mmol)。混合物在室温搅拌过夜，然后回流2h。冷却至室温之后，通过添加300mL冰水而猝灭混合物。用乙酸乙酯(3×)萃取混合物，然后用1NHCl萃取合并的有机层。用10N NaOH水溶液中和水层，然后用乙酸乙酯萃取。用H2O和盐水洗涤有机层，然后经Na2SO4干燥。过滤，浓缩，并用Et2O重结晶提供为白色固体的目标化合物(50g，60％)。
步骤2.4-羟基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-羧酸乙酯。向200mL圆底烧瓶添加1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-5-胺(3.94g，19.39mmol)，随后添加2-(乙氧基亚甲基)丙二酸二乙酯(4mL，20mmol)，所述圆底烧瓶装配有蒸馏头以去除乙醇。混合物在130℃加热45min，然后添加10mL二苯醚，使温度升至240℃持续2h。然后冷却反应混合物至室温并添加二乙醚(100mL)。得到的沉淀通过真空过滤收集并真空干燥以提供为白色固体的目标化合物(4g，62％)。
步骤3.4-氯-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-羧酸乙酯。向4-羟基-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-羧酸乙酯(7.5g，19.39mmol)添加POCl3(10mL)。混合物在60℃下搅拌3h。将混合物倒入冰水，得到的沉淀通过真空过滤收集并真空干燥以提供为黄色固体的目标化合物(6.4g，80％)。
步骤4.1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-羧酸乙酯。向4-氯-1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-羧酸乙酯(5.9g，17mmol)在THF(50mL)中的溶液添加三乙胺(1.7g，17mmol)，随后添加Pd(OH)2/C(300mg)。混合物在室温、H2下搅拌3h。过滤并浓缩混合物。将残余物溶解于乙酸乙酯并用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，然后经Na2SO4干燥。过滤并浓缩提供为浅灰色固体的目标化合物(5.3g，100％)。
步骤5.将1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-羧酸乙酯(4.4g，14mmol)溶解于TFA(158mL)并加热至80℃。80℃下搅拌混合物4h，然后浓缩至干。将残余物倒入冰水，然后添加NaOH水溶液(2M)，直至pH为大约14。通过过滤去除形成的固体，用乙酸乙酯洗涤水层。向水层添加浓HCl，直至pH为大约7。得到的沉淀通过真空过滤收集并真空干燥以提供为白色固体的标题化合物(2.1g，80％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ14.38-13.62(br，1H)，9.07(d，J＝1.6Hz，1H)，8.81(d，J＝1.6Hz，1H)，8.32(s，1H)。MS(m/z，ESI+)：164[M+H]+。
中间体5：1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酸
步骤1.3-碘代吡啶-4-胺。向2L的3颈烧瓶添加38mL浓硫酸在200mL水中的溶液。用冰水浴冷却溶液，然后分批添加4-氨基吡啶(200g，2.12mol)和乙酸(700mL)。然后加热混合物至回流。将碘(189g，0.745mol)和高碘酸二水合物(97g，0.424mol)二者等分成四份。添加一批碘，然后在15min之后添加一批高碘酸二水合物。30min之后，以同样方式添加新一批碘和高碘酸二水合物。当添加全部四批碘和高碘酸二水合物时，混合物保持回流另外3h。冷却至室温之后，搅拌下将反应混合物倒入水中，然后添加40％NaOH水溶液，直至pH>9。添加Na2SO3以破坏未反应的碘。冷却至室温之后，进行过滤。通过在氯仿中重结晶以进一步纯化收集的固体以提供希望的产物(184g，39％)。
步骤2.向2L3颈烧瓶添加DMF(700mL)、三亚乙基二胺(168g，1.5mol)和4-氨基-3-碘代吡啶(24，110g，0.5mol)。用冰水浴冷却混合物并缓慢添加丙酮酸(132g，1.5mol)，随后添加乙酸钯(4.49g，0.02mol)。氮气氛下，加热混合物至115℃。反应产生泡腾。使反应混合物在115-120℃保持11h。减压浓缩反应混合物。将残余物倒入水(500mL)中并添加浓HCl以调节pH至<1。通过添加冰而冷却混合物，并进行过滤。由此获得的滤饼是棕黑色固体。
将上述滤饼添加至500mL水。添加浓HCl(以确保完全质子化)，随后添加活性炭。加热混合物至回流20min，然后进行热过滤。弃掉固体并将热滤液放入冰箱以允许希望产物的盐酸盐沉淀。冷却之后，进行过滤，提供了为希望产物的盐酸盐的湿重48g的黑棕色固体。
然后将固体添加至250mL水并加热混合物直至得到澄清溶液。缓慢添加固体NaOH以调节pH至5-6，然后添加活性炭和额外500mL水。加热混合物至回流30min，然后进行热过滤。将得到的滤饼添加至750mL水，加热至回流并再次过滤。弃掉由此获得的滤饼。合并两批滤液并在冰箱中冷却。得到的沉淀通过真空过滤收集，然后用乙醇洗涤以提供为淡黄色固体的标题化合物(25g，31％)。MS(m/z，ES-)：161.1[M-1]，323.1[2M-1]。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.20(br s，1H)，8.97(s，1H)，8.27(d，J＝5.6Hz，1H)，7.41(d，J＝6.0Hz，1H)，7.23(s，1H)。
中间体6：噻吩并[2,3-c]吡啶-2-羧酸
步骤1.3,5-二溴异烟醛。在-78℃、N2下向200mL无水THF添加二异丙基氨基锂(507mmol，1.2eq.)。然后经30min滴加3,5-二溴吡啶(100g，424mmol)在537mL无水THF中的溶液。在-78℃搅拌反应混合物1h。滴加甲酸乙酯(34.4g，465mmol)并在-78℃搅拌30min，然后将反应混合物倒入冰冷饱和NaHCO3水溶液。用3×500mL乙酸乙酯萃取混合物。浓缩有机层以提供棕色固体，其通过硅胶垫过滤(用二氯甲烷洗脱)以提供为黄色粉末的标题化合物(70g，63％)。
步骤2：4-溴代噻吩并[2,3-c]吡啶-2-羧酸甲酯。在N2下向含有THF(1.3L)的2L圆底烧瓶添加3,5-二溴异烟醛(80g，303mmol)，随后添加碳酸铯(98g，302mmol)。添加巯基乙酸甲酯(32g，302mmol)并在60℃加热混合物过夜。冷却至室温，添加乙酸乙酯并用水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤有机层，然后经Na2SO4干燥并过滤以提供白色固体。通过从乙酸乙酯重结晶纯化粗产物以提供希望的产物(60g，73％)。
步骤3.噻吩并[2,3-c]吡啶-2-羧酸甲酯。将4-溴代噻吩并[2,3-c]吡啶-2-羧酸甲酯(115g，423mmol)、三乙胺(42.7g，423mmol)、THF(1.5L)和MeOH(500mL)混合并脱气。氮气下，添加碳上钯(10％，14.7g，13.9mmol)。用Parr装置在45psi下氢化混合物3天。滤掉催化剂并浓缩滤液以提供为白色固体的希望化合物(65g，80％)。
步骤4.将配有顶置式搅拌器和热电偶的三颈2L圆底烧瓶装填噻吩并[2,3-c]吡啶-2-羧酸甲酯(130g，674mmol)和水(650mL)。20℃搅拌下添加氢氧化钠水溶液(10N)。接下来20min，温度升至25℃，固体溶解。1h之后，快速搅拌下向反应混合物缓慢添加浓HCl(1.5eq.)，产生粘稠浆体。搅拌1h之后，过滤浆体并真空干燥固体以提供为白色固体的标题化合物(105.5g，88％)。MS(m/z，ES-)：178.0[M-1]。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.24(br s，1H)，8.97(s，1H)，8.27(d，J＝6.0Hz，1H)，7.40(d，J＝5.6Hz，1H)，7.23(s，1H)。
中间体7：咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-羧酸
步骤1.6-氯-咪唑并[1,2-b]哒嗪。在90℃下搅拌6-氯-1,2-二嗪-3-胺(10g，73.75mmol，1.00equiv)、2-溴-1,1-二甲氧基乙烷(50g，295.83mmol，4.01equiv)和HBr(40％，45mL)在乙醇(100mL)中的溶液过滤。减压去除大部分乙醇，然后用5％碳酸钾水溶液调节溶液pH值至10。得到的混合物用6×500mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/2-1/1)洗脱以提供6.5g(57％)为黄色固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.95(s，1H)，7.91(s，1H)，7.80(s，1H)，7.05(d，J＝9.3Hz，1H)。
步骤2.咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-羧酸甲酯。在50-mL压力反应器中、一氧化碳(10atm)、110℃下搅拌6-氯-咪唑并[1,2-b]哒嗪(200mg，1.30mmol，1.00equiv)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(200mg，0.28mmol，0.22equiv)和三乙胺(0.5mL)在甲醇(4mL)中的混合物过夜。通过过滤去除固体材料。真空浓缩滤液并在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)洗脱以提供100mg(43％)为黄色固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.16(s，1H)，8.08(d，J＝9.6Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.77(d，J＝9.6Hz，1H)，4.09(s，3H)。
步骤3.咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-羧酸甲酯(900mg，5.08mmol，1.00equiv)和5％氢氧化钠水溶液(15mL，3.75equiv)在THF(3mL)中的混合物在室温搅拌过夜。用1M HCl调节溶液pH至2。真空浓缩得到的混合物以提供3g为黄色固体的粗标题产物。该粗产物没有进一步纯化而使用。LC/MS(方法A，ESI)：RT＝0.43min，m/z＝164.0[M+H]+。
中间体8：吡唑并[1,5-a]吡啶-5-羧酸
步骤1.1-氨基-4-甲氧基碘吡啶。在氮、90℃下搅拌氨基氧基磺酸(11.4g，100.80mmol，0.50equiv)和4-甲氧基吡啶(22g，201.60mmol，1.00equiv)在水(200mL)中的溶液0.5h。室温添加碳酸钾(14g，101.30mmol，0.50equiv)。真空浓缩得到的混合物，然后添加乙醇(150mL)以溶解残余物。过滤去除不溶性材料。冷却滤液至-20℃，然后添加盐酸(16g，40％)。-20℃下搅拌得到的溶液1h。过滤收集沉淀产物并用冷乙醇洗涤以提供9.3g(46％)为白色固体的标题化合物。TLC：1：5MeOH/DCM，Rf＝0.02。
步骤2.5-甲氧基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸甲酯。室温氮气下搅拌1-氨基-4-甲氧基碘吡啶(6g，23.80mmol，1.00equiv)、碳酸钾(5g，36.18mmol，1.50equiv)和丙炔酸甲酯(2g，23.79mmol，1.00equiv)在DMF(50mL)中的混合物4h。反应完成之后，真空浓缩混合物。将残余物溶解于150mL二氯甲烷，然后用1×20mL饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。真空浓缩有机层并在硅胶柱上纯化残余物，用乙酸乙酯/己烷(1：3)洗脱以提供1.5g(31％)为固体的标题产物。LC/MS(方法D，ESI)：RT＝1.30min，m/z＝207.0[M+H]+。
步骤3.吡唑并[1,5-a]吡啶-5-醇。在100℃搅拌5-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸甲酯(100mg，0.48mmol，1.00equiv)在40％HBr(5mL)中的混合物16。冷却反应混合物至室温并用5M氢氧化钾溶液调节溶液pH值至8。用2×50mL乙醚萃取得到的溶液。合并有机层并真空浓缩。硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：3至1：1)洗脱以产生20mg(31％)为白色固体的标题化合物。LC/MS(方法D，ESI)：RT＝0.41min，m/z＝135.0[M+H]+。
步骤4.三氟-甲烷磺酸吡唑并[1,5-a]吡啶-5-基酯。室温下搅拌吡唑并[1,5-a]吡啶-5-醇(300mg，2.24mmol，1.00equiv)和三氟甲磺酸酐(0.5mL)在吡啶(5mL)中的混合物10h。真空浓缩得到的混合物并将残余物溶解于100mL二氯甲烷。用1×10mL碳酸氢钠溶液洗涤混合物。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：3)洗脱以产生200mg(34％)为固体的标题化合物。LC/MS(方法B，ESI)：RT＝2.13min，m/z＝267.0[M+H]+。
步骤5.吡唑并[1,5-a]吡啶-5-羧酸甲酯。在一氧化碳(10atm)下、100℃下、50-mL压力反应器中搅拌三氟-甲烷磺酸吡唑并[1,5-a]吡啶-5-基酯(200mg，0.75mmol，1.00equiv)、三乙胺(227mg，2.24mmol，3.00equiv)、DMSO(98mg，1.25mmol，1.67equiv)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(53mg，0.08mmol，0.10equiv)在甲醇(20mL)中的混合物16h。反应完成之后，反应混合物冷却至室温并真空浓缩混合物。硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：3)洗脱以提供130mg为固体的标题化合物。LC/MS(方法H，ESI)：RT＝1.36min，m/z＝177.0[M+H]+。
步骤6.室温搅拌那吡唑并[1,5-a]吡啶-5-羧酸甲酯(130mg，0.74mmol，1.00equiv)和氢氧化钾(1g，17.82mmol，24.15equiv)在甲醇(2mL)、THF(2mL)和水(5mL)中的混合物12h。用洗涤2×50mL乙酸乙酯反应混合物。收集水层并使用1NHCl调节溶液pH值至6。用5×50mL乙酸乙酯萃取溶液。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供100mg(84％)为黄色固体的标题化合物。LC/MS(方法G，ESI)：RT＝1.32min，m/z＝163.0[M+H]+。
中间体9：1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-羧酸
步骤1.5-溴-2-甲基-吡啶-3-基胺。在90℃下向铁屑(5g，89.29mmol，3.88equiv)和氯化铵(1g，18.70mmol，0.81equiv)在乙醇(66mL)和水(33mL)中的搅拌混合物滴加5-溴-2-甲基-3-硝基吡啶(5g，23.04mmol，1.00equiv)在乙醇(50mL)中的溶液。90℃搅拌反应混合物10min，然后冷却至室温。过滤去除固体材料。真空浓缩滤液，用乙酸乙酯/石油醚(1：2)洗脱硅胶柱纯化残余物以产生1.6g(37％)为黄色固体的标题化合晋级之路LC/MS(方法I，ESI)：RT＝0.81min，m/z＝187.0；189.0[M+H]+。
步骤2.N-(5-溴-2-甲基-吡啶-3-基)-乙酰胺。室温搅拌5-溴-2-甲基-吡啶-3-基胺(3g，16.04mmol，1.00equiv)在乙酸酐(20mL)和乙酸(10mL)中的溶液过夜。真空浓缩得到的混合物以提供2.6g(71％)浅黄色固体的标题化合物。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.05min，m/z＝229.0；231.0[M+H]+。
步骤3.1-(6-溴-吡唑并[4,3-b]吡啶-1-基)-乙酮。氮气、90℃下搅拌N-(5-溴-2-甲基-吡啶-3-基)-乙酰胺(3.5g，15.28mmol，1.00equiv)、亚硝酸异戊酯(4g，34.73mmol，2.27equiv)、乙酸钾(20g)和乙酸酐(30mL)在甲苯(150mL)中混合物过夜。反应混合物冷却至室温并过滤去除固体材料。真空浓缩滤液，硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：5)洗脱以提供2g(55％)浅黄色固体的标题化合物。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.44min，m/z＝240.0；242.0[M+H]+。
步骤4.1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-羧酸甲酯。一氧化碳(10大气压)、100℃下、100mL压力反应器中搅拌1-(6-溴-吡唑并[4,3-b]吡啶-1-基)-乙酮(2g，8.33mmol，1.00equiv)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(1g，1.42mmol，0.17equiv)和三乙胺(2.5mL)在甲醇(70mL)中的混合物。反应混合物冷却至室温并过滤去除固体材料。真空浓缩滤液，硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：5)洗脱以提供0.8g(54％)浅黄色固体的标题化合物。TLC：1：1乙酸乙酯/石油醚，Rf＝0.2.
步骤5.室温搅拌1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-羧酸甲酯(200mg，1.13mmol，1.00equiv)和氢氧化钠(200mg，5.00mmol，4.43equiv)在水(10mL)中的溶液过夜。反应完成之后，用浓HCl调节溶液pH值至3。真空浓缩得到的混合物以提供1g浅黄色固体的粗标题产物。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝0.91min，m/z＝164.0；242.0[M+H]+。
中间体10：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-羧酸
步骤1.N'-(5-溴-吡啶-2-基)-N,N-二甲基-甲脒。氮气、130℃下搅拌5-溴代吡啶-2-胺(4g，23.12mmol，1.00equiv)和N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(9.6mL，3.00equiv)在DMF(30mL)中的溶液。反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩以提供4g(76％)为油的标题化合物。TLC：1：5MeOH/DCM，Rf＝0.6.
步骤2.6-溴-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶。向在维持在氮气、0℃下的N'-(5-溴-吡啶-2-基)-N,N-二甲基-甲脒(4g，17.54mmol，1.00equiv)在甲醇(40mL)中的溶液添加吡啶(4mL，2.00equiv)和(氨基氧基)磺酸(3.6g，31.83mmol，1.30equiv)。室温搅拌得到的溶液12h。反应完成之后，真空浓缩混合物。用150mL乙酸乙酯稀释残余物，然后用1×50mL饱和碳酸钠水溶液和2×50mL水洗涤乙酸乙酯。有机层经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。硅胶柱纯化残余物用乙酸乙酯/己烷(1：1)稀释以提供2.5g(72％)为固体的标题化合物。LC/MS(方法D，ESI)：RT＝1.15min，m/z＝198.0[M+H]+。
步骤3.[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-羧酸甲酯。一氧化碳(10atm)、100℃下搅拌6-溴-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(2.4g，12.12mmol，1.00equiv)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(800mg，1.14mmol，0.10equiv)和三乙胺(4g，39.53mmol，3.00equiv)在DMSO(1.6g，20.48mmol，1.67equiv)和甲醇(50mL)中的混合物20h。反应混合物冷却至室温并用盐水(50mL)猝灭。用乙酸乙酯(3×40mL)萃取得到的溶液。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/己烷(1：1)洗脱以提供0.98g(46％)粗固体的标题化合物。LC/MS(方法C，ESI)：RT＝1.04min，m/z＝178.0[M+H]+。
步骤4.向氢氧化钾(1g，17.82mmol，15.79equiv)在水(10mL)中的溶液添加[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-羧酸甲酯(200mg，1.13mmol，1.00equiv)在THF(2mL)中的溶液。室温搅拌得到的混合物10h。反应完成之后，用1NHCl调节溶液pH值至5-6。用3×50mL乙酸乙酯萃取混合物。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供112mg(61％)为固体的标题化合物。LC/MS(方法C，ESI)：RT＝0.9min，m/z＝164.0[M+H]+。
中间体11：吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-羧酸
步骤1.4H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-酮。氮气、110℃下搅拌1H-吡唑-3-基胺(7g，84.24mmol，1.00equiv)和丙-2-炔酸乙酯(50mL)在二噁烷(10g，1.21equiv)中的溶液过夜。反应混合物冷却至室温并过滤收集沉淀的产物以提供4g(36％)浅棕色固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ12.04(s，1H)，8.41-8.44(m，1H)，7.71(d，J＝1.8Hz，1H)，5.88(d，J＝8.1Hz，1H)，5.76-5.79(m，1H)。
步骤2.5-氯-吡唑并[1,5-a]嘧啶。氮气、120℃搅拌4H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-酮(1g，7.40mmol，1.00equiv)在磷酰氯(15mL)中的溶液2h。反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：2)洗脱以提供0.6g(53％)浅黄色固体的标题化合物。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.21min，m/z＝154.0[M+H]+。
步骤3.吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-羧酸甲酯。10大气压的一氧化碳、100℃下、100-mL压力反应器中搅拌5-氯-吡唑并[1,5-a]嘧啶(2g，13.02mmol，1.00equiv)、三乙胺(4mL)、甲醇(80mL)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(1g，1.42mmol，0.11equiv)的混合物过夜。反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：5)洗脱以产生1.2g(52％)浅黄色固体的标题化合物。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.09min，m/z＝178.0[M+H]+。
步骤4.向吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-羧酸甲酯(100mg，0.56mmol，1.00equiv)在乙酸(5mL)中的溶液添加浓HCl(37％，5mL)。120℃搅拌得到的溶液3h，然后真空浓缩。将残余物溶解于3mL水，然后用饱和碳酸钠水溶液调节至pH5。过滤收集沉淀的产物，然后空气干燥以提供0.08g(87％)浅黄色固体的吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-羧酸。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝0.95min，m/z＝164.0[M+H]+。
中间体12：3-叔丁基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸
步骤1.3-叔丁基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯。向6-氨基吡啶-3-羧酸甲酯(3.8g，24.98mmol，1.00equiv)和2-氧代乙酸水合物(3.9g，42.39mmol，1.70equiv)在甲醇(120mL)中的溶液添加高氯酸(250mg，2.50mmol，0.10equiv)。搅拌反应混合物30min，然后添加2-异氰基-2-甲基丙烷(2.08g，25.02mmol，1.00equiv)。室温搅拌反应混合物12h，然后真空浓缩。硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/乙酸乙酯(2：1)洗脱以提供850mg(14％)黄色固体的标题化合物。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.97-8.96(dd，J＝0.9，1.5Hz，1H)，7.69-7.65(dd，J＝4.2，9.6Hz，1H)，7.53-7.50(dd，J＝4.2，9.6Hz，1H)，7.39(s，1H)，3.96(s，3H)，1.23(s，9H)。
步骤2.3-叔丁基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸钠。向3-叔丁基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(300mg，1.21mmol，1.00equiv)在甲醇(5mL)中的溶液添加氢氧化钠(97mg，2.42mmol，2.00equiv)在水(5mL)中的溶液。46℃下搅拌得到的溶液1.5h。反应混合物冷却至室温，然后通过添加0.15mL HCl而猝灭。真空浓缩得到的混合物以提供345.6mg(粗品)黄色固体的标题产物。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.02min，m/z＝234.0[M+H-22]+。
步骤3.3-叔丁基氨基-咪唑并[1,2-a]吡啶-6-羧酸钠(300mg，1.17mmol，1.00equiv)溶解于乙酸(10mL)，然后真空浓缩。硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(20：1)洗脱以提供150mg(54％)黄色固体的标题化合物。LC/MS(方法N，ESI)：RT＝0.94min，m/z＝234.0[M+H]+。
中间体13：2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶。
步骤1.N-(丙-2-炔-1-基)氨基甲酸乙酯。10℃搅拌下20min内向氮气下维持的丙-2-炔-1-胺(11.5g，208.79mmol，1.00equiv)和氢氧化钠(9.1g，227.50mmol，1.09equiv)在水(40mL)和甲苯(110mL)中的溶液滴加氯甲酸乙酯(23.9g，220.23mmol，1.05equiv)。得到的溶液在室温搅拌过夜，然后用3×100mL甲苯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩以提供15g(57％)为浅黄色油的N-(丙-2-炔-1-基)氨基甲酸乙酯。TLC：乙酸乙酯/石油醚(1：2)，Rf＝0.5.
步骤2.嘧啶-5-甲醛。在-78℃下向放入用惰性氮气氛吹扫并维持的50-mL3颈圆底烧瓶中的5-溴嘧啶(2g，12.58mmol，1.00equiv)在THF(20mL)中的溶液添加正丁基锂(1.1mL)。-78℃下搅拌反应混合物另外2h。然后添加甲酸乙酯(5.2mL)，在-78℃下搅拌得到的溶液2h。得到的混合物温至0℃，用50mL盐水洗涤。有机层用无水碳酸钠干燥并浓缩。硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：1)洗脱以提供11g为黄色油的粗嘧啶-5-甲醛。TLC：乙酸乙酯/石油醚(1/1)，Rf＝0.2.
步骤3.嘧啶-5-基甲醇。在0-10℃下搅拌嘧啶-5-甲醛(2g，18.50mmol，1.00equiv)和硼氢化钠(2g)在甲醇(100mL)中的混合物30min。真空浓缩反应混合物，硅胶柱纯化残余物，用二氯甲烷/甲醇(50：1)洗脱以产生1.2g(59％)浅黄色固体的嘧啶-5-基甲醇。LC/MS(方法N，ESI)：RT＝0.74min，m/z＝111.0[M+H]+。
步骤4.5-(氯甲基)嘧啶。在搅拌下向嘧啶-5-基甲醇(1.1g，10mmol，1.00equiv)在二氯甲烷(30mL)中的溶液滴加亚硫酰氯(2mL)。室温搅拌得到的溶液2h，然后真空浓缩以提供1.1g为黄色油的粗5-(氯甲基)嘧啶。TLC：乙酸乙酯/石油醚(1：1)，Rf＝0.4.
步骤5.N-(丙-2-炔-1-基)-N-(嘧啶-5-基甲基)氨基甲酸乙酯。室温氮气下搅拌乙基N-(丙-2-炔-1-基)氨基甲酸乙酯(1.27g，9.99mmol，1.00equiv)、苄基三乙基氯化铵(500mg，2.60mmol，0.26equiv)、5-(氯甲基)嘧啶(1.28g，9.96mmol，1.00equiv)和氢氧化钾(3g，53.47mmol，5.37equiv)在甲苯(30mL)中的混合物。真空浓缩得到的混合物，硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：1)洗脱以提供0.3g(14％)为浅黄色油的N-(丙-2-炔-1-基)-N-(嘧啶-5-基甲基)氨基甲酸乙酯。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.16(s，1H)，8.73(s，2H)，4.59(s，2H)，4.11-4.26(m，4H)，2.28(t，J＝2.4Hz，1H)，1.30(t，J＝7.2Hz，3H)。
步骤6.1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酸乙酯。氮气、150℃下搅拌N-(丙-2-炔-1-基)-N-(嘧啶-5-基甲基)氨基甲酸乙酯(1g，4.56mmol，1.00equiv)在二甲苯(30mL)中的混合物2天。真空浓缩得到的混合物，硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)洗脱以提供0.4g(46％)为淡棕色粗固体的1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酸乙酯。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.53-8.93(m,2H),7.24(d,J＝5.1Hz,1H),4.73-4.80(m,4H),4.22-4.33(m,2H),1.33-1.49(m,3H)。
步骤7.2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶。120℃下搅拌1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-羧酸乙酯(400mg，2.4mmol，1.00equiv)和氢氧化钡(0.8g)在水(100mL)中的混合物过夜。反应混合物冷却至室温，过滤收集固体材料。在热乙酸乙酯(150mL)中搅拌残余物，然后过滤去除固体材料。真空浓缩滤液以提供0.18g(72％)为淡黄色油的2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.51(s，1H)，8.41-8.45(t，J＝4.8Hz，1H)，7.13-7.20(m，1H)，4.25(s，2H)，4.22(s，2H)。
中间体14.2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑盐酸盐.
步骤1.2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羧酸叔丁酯.3-[(二甲基氨基)甲基idene]-4-氧代吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1g，4.16mmol，1.00equiv)和水合肼(340mg，6.79mmol，1.63equiv)在乙醇(10mL)中的溶液在室温搅拌那5h。得到的混合物在真空浓缩，硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(1：5至1：2)洗脱以提供250mg(29％)为黄色固体的2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法C，ESI)：RT＝1.30min，m/z＝210.0[M+H]+.
步骤2.2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羧酸叔丁酯(250mg，1.19mmol，1.00equiv)在DCM(5mL)和TFA(5mL)中的溶液在室温搅拌过夜。得到的混合物在真空浓缩，将残余物溶解于20mL浓HCl。真空浓缩得到的混合物以提供200mg为暗红色固体的粗2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑盐酸盐。LC/MS(方法C，ESI)：RT＝0.46min，m/z＝110.0[M+H]+.
中间体15.吡唑并[1,5-b]哒嗪-5-羧酸锂.
步骤1.4-甲氧基哒嗪.3,6-二氯代-4-甲氧基哒嗪(30g，167.59mmol，1.00equiv)、甲酸铵(31g，491.63mmol，2.93equiv)和10％碳载钯(3g)催化剂在MeOH(500mL)中的混合物在1大气压氢室温下搅拌过夜。过滤去除催化剂并真空浓缩滤液。将残余物溶解于500mL DCM/MeOH(10：1)。过滤去除固体材料。真空浓缩滤液，硅胶柱纯化残余物，用乙酸乙酯/石油醚(2：1至1：1)洗脱以提供15g(81％)为棕色油的4-甲氧基哒嗪。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf＝0.1。
步骤2.5-甲氧基吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-羧酸甲酯.向5℃、氮下维持的羟基胺-O-磺酸(30.8g，272.57mmol，1.50equiv)在水(100mL)中的搅拌溶液滴加碳酸氢钾(29.1g，290.67mmol，1.60equiv)在水(100mL)中的溶液。搅拌得到的混合物10min，然后添加4-甲氧基哒嗪(20g，181.63mmol，1.00equiv)在水(100mL)中的溶液。反应混合物在70℃搅拌5h，然后冷却回到室温。向反应混合物添加丙-2-烯酸甲酯(16.8g，199.83mmol，1.10equiv)在DCM(500mL)中的溶液，随后添加氢氧化钾(17.3g，308.32mmol，1.70equiv)在水(100mL)中的溶液。得到的溶液在室温搅拌过夜，然后用4000mL DCM萃取。有机层用3x500mL盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(6：1至2：1)洗脱以提供1g(3％)为棕色固体的5-甲氧基吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-羧酸甲酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf＝0.4.
步骤3.吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-醇.使5-甲氧基吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-羧酸甲酯(2g，9.65mmol，1.00equiv)在40％氢溴酸(50mL)中的溶液回流过夜。得到的混合物冷却至室温，然后真空浓缩。将残余物溶解于50mL H2O并用饱和KHCO3水溶液(50mL)调节溶液pH值至6-7。浓缩混合物，残余物经硅胶柱纯化，用DCM：MeOH(10：1)洗脱以提供500mg(38％)为棕色固体的吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-醇。LC/MS(方法D，ESI)：RT＝0.41min，m/z＝136.0[M+H]+.
步骤4.吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-基三氟代甲磺酸酯.在20min内伴随搅拌下向维持在-5℃、氮下的吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-醇(450mg，3.33mmol，1.00equiv)和吡啶(1.1g，13.91mmol，3.00equiv)在DCM(20mL)中的溶液滴加三氟代甲磺酸酐(1.9g，6.73mmol，2.02equiv)。得到的溶液在0℃搅拌另外60min，然后用200mLDCM稀释。混合物用3x100mL盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：10至1：5)洗脱以提供570mg(64％)为白色固体的吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-基三氟代甲磺酸酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf＝0.2.
步骤5.吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-羧酸甲酯.4aH,5H-吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-基三氟代甲磺酸酯(600mg，2.23mmol，1.00equiv)、Pd(PPh3)2Cl2(300mg，0.43mmol，0.19equiv)和吡啶(530mg，6.70mmol，3.01equiv)在DMF(20mL)和MeOH(5mL)中搞得混合物在50-mL压力罐反应器中80℃、10大气压CO下搅拌过夜。反应混合物冷至室温，然后用100mL H2O稀释。得到的溶液用3x100mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层用3x100mL盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：5)洗脱以产生200mg(51％)为黄色固体的吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-羧酸甲酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf＝0.4.
步骤6.向吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-羧酸甲酯(60mg，0.34mmol，1.00equiv)在THF(5mL)中的溶液添加LiOH(40mg，1.667mmol，1.7equiv)在水(1mL)中的溶液。反应混合物在50℃搅拌过夜，然后真空浓缩以提供150mg为暗红色固体的吡唑并[1,5-b]哒嗪-5-羧酸锂。
中间体16：2-(6-氨基吡啶-3-基)乙酸.
步骤1.2-(6-硝基吡啶-3-基)丙二酸1,3-二乙酯.5-溴-2-硝基吡啶(2g，9.85mmol，1.00equiv)、丙二酸1,3-二乙酯(8g，49.95mmol，5.07equiv)、氢化钠(1.2g，50.00mmol，5.07equiv)、L-脯氨酸(0.1g)和CuI(100mg，0.53mmol，0.05equiv)在DMF(100mL)中的混合物在100℃、氮下搅拌20h。冷却反应至室温，然后真空浓缩。混合物用乙酸乙酯稀释，然后用3x50mL H2O洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供2g为红色油的粗2-(6-硝基吡啶-3-基)丙二酸1,3-二乙酯。TLC：乙酸乙酯/石油醚＝1/1，Rf＝0.4.
步骤2.2-(6-氨基吡啶-3-基)丙二酸1,3-二乙酯.2-(6-硝基吡啶-3-基)丙二酸1,3-二乙酯(1.5g，5.31mmol，1.00equiv)和阮内镍(1g)在MeOH(30mL)中的混合物在1大气压H2、室温下搅拌2h。过滤去除催化剂并真空浓缩滤液。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(5：1)洗脱以提供1.3g为黄色油的粗2-(6-氨基吡啶-3-基)丙二酸1,3-二乙酯。TLC：二氯代m乙烷/MeOH＝5/1；Rf＝0.5.
步骤3.2-(6-氨基吡啶-3-基)乙酸乙酯.2-(6-氨基吡啶-3-基)丙二酸1,3-二乙酯(1.2g，4.76mmol，1.00equiv)和氯化锂(600mg，14.15mmol，2.98equiv)在DMSO(10mL)和水(1mL)中的混合物在130℃、氮下搅拌18h。冷却反应至室温，然后用200mL乙酸乙酯稀释。混合物用3x50mL H2O洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/己烷(1/1)洗脱以提供200mg(23％)为浅黄色油的2-(6-氨基吡啶-3-基)乙酸乙酯。TLC：DCM/MeOH＝5：1；Rf＝0.6.
步骤4.向2-(6-氨基吡啶-3-基)乙酸乙酯(200mg，1.11mmol，1.00equiv)在乙醇(5mL)中的溶液添加氢氧化钾(200mg，3.56mmol，3.21equiv)在水(5mL)中的溶液。反应混合物在室温、氮下搅拌11h。用2M HCl调节溶液pH值至6。得到的混合物在真空浓缩以提供0.5g为灰白色固体的粗2-(6-氨基吡啶-3-基)乙酸。TLC：DCM/MeOH＝5/1；Rf＝0.2.
中间体17.1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-胺.
步骤1.6-氯代吡啶-3-羰基氯.6-氯代吡啶-3-羧酸(20g，126.94mmol，1.00equiv)、DMF(1g，13.68mmol，0.11equiv)和亚硫酰氯(20mL)在甲苯(200mL)中的混合物在80℃、氮下搅拌3h。得到的溶液冷至室温并真空浓缩以提供25g为浅黄色固体的粗6-氯代吡啶-3-羰基氯。
步骤2.6-氯代-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺.搅拌下向保持在0℃、氮下的6-氯代吡啶-3-羰基氯(25g，142.05mmol，1.00equiv)在DCM(500mL)中的溶液滴加二异丙基胺(50g，494.12mmol，3.48equiv)。反应混合物在25℃搅拌50min，然后通过添加H2O(300mL)来猝灭。收集有机层，用2x300mL DCM萃取水层。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供25g(73％)为浅黄色固体的6-氯代-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺。TLC：乙酸乙酯：石油醚＝1：2，Rf＝0.4.
步骤3.6-氯代-4-甲酰基-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺.向维持在-50℃、氮下的二异丙基胺(1g，9.88mmol，4.76equiv)在乙醚(30mL)中的搅拌溶液滴加2.5Mn-BuLi(5mL)在己烷中的溶液。反应混合物在-50℃搅拌30min，然后一次性添加固体6-氯代-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺(500mg，2.08mmol，1.00equiv)。得到的溶液在-50℃搅拌30min。然后在搅拌下滴加DMF(1mL)。反应混合物在-50℃搅拌3h，然后温至室温并搅拌过夜。通过添加10％柠檬酸水溶液(30mL)猝灭反应，然后用2x50mL乙醚萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供0.5g为黄色固体的粗6-氯代-4-甲酰基-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺。LC/MS(方法G，ESI)：RT＝1.40min，m/z＝269.0[M+H]+.
步骤4.6-氯代-4-(羟基甲基)-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺.6-氯代-4-甲酰基-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺(500mg，1.86mmol，1.00equiv)和NaBH4(500mg，13.22mmol，7.10equiv)在乙醇(50mL)中的混合物在30℃搅拌50min。通过添加1M HCl而猝灭反应。过滤去除固体并浓缩滤液以提供0.5g为浅黄色固体的粗6-氯代-4-(羟基甲基)-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺。LC/MS(方法F，ESI)：RT＝1.25min，m/z＝271.0[M+H]+.
步骤5.6-氯代-1H,3H-呋喃并[3,4-c]吡啶-3-酮.6-氯代-4-(羟基甲基)-N,N-双(丙烷-2-基)吡啶-3-羧酰胺(2g，7.39mmol，1.00equiv)在6M HCl(40mL)中的混合物在100℃搅拌30min。反应混合物冷至室温并用碳酸钠调节溶液pH至8。混合物用200mL DCM萃取。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供1g为浅黄色固体的粗6-氯代-1H,3H-呋喃并[3,4-c]吡啶-3-酮。LC/MS(方法R，ESI)：RT＝1.13min，m/z＝170.0[M+H]+.
步骤6.[6-氯代-4-(羟基甲基)吡啶-3-基]甲醇.6-氯代-1H,3H-呋喃并[3,4-c]吡啶-3-酮(1g，5.90mmol，1.00equiv)和NaBH4(0.5g)在乙醇(50mL)中的混合物在25℃搅拌60min。用6M HCl调节溶液pH至1。过滤去除固体并真空浓缩滤液。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(20：1)洗脱以提供0.4g(39％)为浅黄色固体的[6-氯代-4-(羟基甲基)吡啶-3-基]甲醇。LCMS(方法R，ESI)：RT＝0.95min，m/z＝174.0[M+H]+.
步骤7.2-氯代-4,5-双(氯代甲基)吡啶盐酸盐.[6-氯代-4-(羟基甲基)吡啶-3-基]甲醇(100mg，0.58mmol，1.00equiv)和亚硫酰氯(2mL)在DCM(20mL)中的混合物在室温搅拌1h。得到的混合物在真空浓缩以提供0.1g为暗红色固体的粗2-氯代-4,5-双(氯代甲基)吡啶盐酸盐。
步骤8.6-氯代-2-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶.2-氯代-4,5-双(氯代甲基)吡啶盐酸盐(1g，4.05mmol，1.00equiv)、(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(1g，5.98mmol，1.48equiv)和DIPEA(1g，7.74mmol，1.91equiv)在DCM(60mL)中的混合物在室温、氮下搅拌过夜。得到的混合物在真空浓缩，残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(2：1)洗脱以提供0.9g为淡红色油的粗6-氯代-2-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶。LC/MS(方法R，ESI)：RT＝0.94min，m/z＝305.0[M+H]+.
步骤9.N,2-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6- 胺.6-氯代-2-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶(200mg，0.66mmol，1.00equiv)、Pd2(dba)3·CHCl3(0.1g)、t-BuONa(200mg，2.08mmol，3.17equiv)、BINAP(100mg，0.16mmol，0.24equiv)和(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(400mg，2.39mmol，3.65equiv)在甲苯(20mL)中的混合物在80℃、氮下搅拌过夜。得到的溶液用20mL H2O稀释，用2x50mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：1)洗脱以提供0.2g(70％)为暗红色固体的N,2-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-胺。LC/MS(方法R，ESI)：RT＝0.92min，m/z＝436.0[M+H]+.
步骤10.N,2-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-胺(300mg，0.69mmol，1.00equiv)在TFA(20mL)中的溶液在90℃、氮下搅拌过夜。得到的混合物在真空浓缩以去除大部分TFA。用饱和碳酸钠溶液调节残余物pH至8。混合物在真空浓缩并将残余物溶解于热乙酸乙酯并过滤。减压浓缩滤液以提供0.15g为红色油的粗1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-胺。LC/MS(方法R，ESI)：RT＝0.18min，m/z＝136.0[M+H]+.
中间体18.2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-d 4 盐酸盐.
步骤1.吡啶-3,4-二羧酸3,4-二甲酯.在室温、搅拌下向吡啶-3,4-二羧酸(35g，209.43mmol，1.00equiv)在MeOH(250mL)中的溶液滴加浓硫酸(55mL)。得到的溶液在100℃搅拌过夜。反应混合物冷至室温，然后真空浓缩。残余物用500mL H2O稀释并用2M碳酸钠水溶液调节溶液pH至8。得到的混合物用3x300mL DCM萃取。合并的有机层用3x500mL盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供30g(73％)为黄色油的吡啶-3,4-二羧酸3,4-二甲基酯。LC/MS(方法R，ESI)：RT＝1.23min，m/z＝195.0[M+H]+.
步骤2.3,4-双(羟基甲基)吡啶-d 4 盐酸盐.向维持在0℃、氮下的NaBD4(4.3g，102.38mmol，4.00equiv)在EtOD(15mL)中的搅拌溶液滴加吡啶-3,4-二羧酸3,4-二甲基酯(5.0g，25.62mmol，1.00equiv)在EtOD(10mL)中的溶液，随后在0℃滴加CaCl2(2.5g，22.73mmol，0.90equiv)在EtOD(20mL)中的溶液。搅拌反应混合物3h，同时通过冰/水浴保持反应温度在0至10℃。得到的混合物在真空浓缩并将残余物溶解于200mL乙醇。过滤去除固体材料。冷却滤液至0℃，将氯化氢气体鼓泡进入溶液，同时用冰/水浴保持反应温度低于5℃。得到的溶液在0-10℃搅2h。反应混合物在真空浓缩，残余物在100mLTHF中研磨。过滤收集固体并真空干燥以提供2.9g为白色固体得到粗3,4-双(羟基甲基)吡啶-d4盐酸盐。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ9.00(d,J＝2.1Hz,1H),8.70(s,1H),8.07(d,J＝6.0Hz,1H).
步骤3.2-(2,4-二甲氧基苄基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-d 4 .5min内向维持在-5℃、氮下的3,4-双(羟基甲基)吡啶-d4盐酸盐(3.0g，1.00equiv)在DCM(80mL)中的溶液滴加三乙胺(10mL，5.00equiv)，随后滴加甲磺酰氯(4.5mL，3.00equiv)。反应混合物在0℃搅拌1h。然后通过添加20mL水猝灭反应，得到的混合物用2x50mL DCM萃取。合并的有机层用1x200mL盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。滤液冷却至0℃，然后在内5min、0℃下滴加(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(3mL，1.10equiv)。得到的溶液在室温搅拌8h。然后通过添加20mL水猝灭反应。得到的混合物用1x200mL水和2x200mL盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(96/4)洗脱以提供1.4g为红色油的粗2-(2,4-二甲氧基苄基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-d4。
步骤4.2-(2,4-二甲氧基苄基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-d4(700mg，2.04mmol，1.00equiv，80％)在CF3COOD(5mL)中的溶液在70℃搅拌10h。得到的混合物在真空浓缩并将残余物溶解于50mL DCM。将氯化氢气体0℃下鼓泡进入搅拌的反应混合物，持续30min。过滤收集沉淀，并真空干燥以提供600mg为黄色固体的粗2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-d4盐酸盐。1H-NMR(400MHz,D2O,ppm)：δ8.77(s,1H),8.69(d,J＝6.0Hz,1H),8.00(d,J＝6.0Hz,1H)。
II.实施例化合物的制备
实施例1：2-[(1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羰基氨基)甲基]-8-氮杂螺[2.5] 辛烷-8-羧酸叔丁酯
步骤1.1-[[(4-硝基苯氧基羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸酯.4-硝基苯基氯代甲酸酯(42.5g，210.85mmol，1.00equiv)和1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(50mg，0.21mmol)在甲苯(5mL)中的溶液在120℃搅拌1h。得到的混合物在真空浓缩以提供50mg为黄色固体的1-[[(4-硝基苯氧基羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法K，ESI)：RT＝2.02min，m/z＝407.0[M+H]+.
步骤2.2-[(1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羰基氨基)甲基]-8-氮杂螺[2.5] 辛烷-8-羧酸叔丁酯.1-[[(4-硝基苯氧基羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(81mg，0.20mmol，1.00equiv)和2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶(25mg，0.21mmol，1.04equiv)在乙醇(5mL)中的溶液在80℃搅拌1h。得到的混合物在真空浓缩，残余物经硅胶柱纯化，用二氯代甲烷/甲醇(10/1)洗脱以提供8.9mg(12％)为灰白色固体的标题化合物。LC/MS(方法H，ESI)：RT＝1.40min，m/z＝387.0[M+H]+.1H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.55(s,1H),8.47-8.46(d,J＝5.1Hz,1H),7.46-7.44(d,J＝5.1Hz,1H),4.76(s,2H),3.64-3.54(m,2H),3.37(s,2H),3.27-3.20(m,2H),1.70-1.63(m,1H),1.46(s,11H),1.25-1.19(m,1H),1.07-1.05(m,1H),0.62-0.53(m,1H),0.32-0.21(m,1H).
实施例6：N-[[8-(3,3-二甲基丁酰基)-8-氮杂螺[2.5]辛烷-2-基]甲基]-1H- 吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酰胺
步骤1.2-[(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羰基氨基)甲基]-8-氮杂螺[2.5]辛烷-8- 羧酸叔丁酯.1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(1750mg，7.28mmol，1.00equiv)、1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酸(1299mg，8.01mmol，1.10equiv)、EDCI(2786mg，14.53mmol，2.00equiv)、三乙胺(2946mg，29.11mmol，4.00equiv)和HOBt(1181mg，8.74mmol，1.20equiv)在DMF(30mL)中的溶液在室温搅拌过夜。得到的溶液用100mL水稀释并用3x100mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层用3x200mL盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供2.3g(82％)为红色油的标题化合物。LC/MS(方法C，ESI)：RT＝1.29min，m/z＝385.0[M+H]+.
步骤2.N-(8-氮杂螺[2.5]辛烷-2-基甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酰胺 三氟代乙酸盐。2-[(1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羰基氨基)甲基]-8-氮杂螺[2.5]辛烷-8-羧酸叔丁酯(3.2g，8.32mmol，1.00equiv)在TFA(10mL)和二氯代甲烷(10mL)中的溶液在室温搅拌3h。得到的混合物在真空浓缩以提供4g为棕色油的粗标题产物。LC/MS(方法E，ESI)：RT＝0.96min，m/z＝285.0[M+H]+.
步骤3.在0℃、搅拌下向N-(8-氮杂螺[2.5]辛烷-2-基甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酰胺三氟乙酸盐(179mg，0.44mmol，1.00equiv)和三乙胺(136mg，1.32mmol，3.01equiv)在二氯代甲烷(5mL)中的溶液滴加3,3-二甲基丁酰氯(60mg，0.44mmol，1.00equiv)。得到的溶液在室温搅拌1h。反应混合物用20mL二氯代甲烷稀释，用2x10mL盐水洗涤，然后经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物(110mg)通过制备型HPLC(Instrument，Waters2767-2；柱，sunfire-C18；流动相，水，含有NH4HCO3(1g/L)和CH3CN(25％CH3CN，10min内升至57％)；检测器，UV254nm)以提供2.3mg(1％)为白色固体的标题化合物。LC/MS(方法H，ESI)：RT＝1.95min，m/z＝383.0[M+H]+.1H NMR(400Hz,CDCl3)δ9.02(s,1H),8.42-8.41(d,J＝4.8Hz,1H),7.54(m,1H),7.01(s,1H),6.48(m,1H),4.10-4.09(m,1H),3.67-3.32(m,5H),2.35-2.25(m,2H),1.63-1.50(m,2H),1.28-1.22(m,1H),1.07(s,11H),0.71(s,1H),0.39(s,1H).
实施例150.N-([6-[2-(3-甲基噁丁烷-3-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1- 基]甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酰胺.
步骤1.2-(噁丁烷-3-亚基)乙酸乙酯.噁丁烷-3-酮(2.0g，27.75mmol，1.00equiv)和(乙氧基羰基亚甲基)三苯基正膦(10.2g，29.28mmol，1.10equiv)在DCM(40mL)中的溶液在0℃搅拌30min。反应混合物在真空浓缩，残余物在200mL石油醚中研磨。过滤去除固体材料。滤液在真空浓缩以提供3.3g为无色液体的粗2-(噁丁烷-3-亚基)乙酸乙酯。LC/MS(方法A，ESI)：RT＝1.32min，m/z＝143.0[M+H]+.
步骤2.2-(3-甲基噁丁烷-3-基)乙酸乙酯.向维持在氮下的2-(噁丁烷-3-亚基)乙酸乙酯(1.5g，8.55mmol，1.00equiv，81％)和CuI(163mg，0.86mmol，0.10equiv)在THF(10mL)中的溶液添加氯代三甲基硅烷(1.85g，17.03mmol，2.00equiv)在THF(30mL)中的溶液。反应混合物在室温搅拌15min，然后冷却至-15℃。10min内、搅拌下滴加1.4N甲基氯化镁(24.5mL，4.00equiv)在THF中的溶液。得到的溶液在25℃搅拌1h，然后通过添加20mL饱和NH4Cl水溶液而猝灭。残余物溶解于100mL DCM，然后用1x100mL水和2x100mL盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供为600mg为红色油的粗2-(3-甲基噁丁烷-3-基)乙酸乙酯。
步骤3.2-(3-甲基噁丁烷-3-基)乙酸.向2-(3-甲基噁丁烷-3-基)乙酸乙酯(500mg，3.16mmol，1.00equiv)在MeOH(15mL)中的溶液添加2M氢氧化钠水溶液(5mL)。混合物在40℃搅拌12h，然后冷却至室温。反应混合物在真空浓缩。将残余物溶解于50mL水，然后用3x50mL DCM洗涤。收集水层，用1M HCl调节溶液pH至5。得到的混合物在真空浓缩，残余物用50mLMeOH溶解。过滤去除固体材料。滤液在真空浓缩以提供260mg为红色固体的粗2-(3-甲基噁丁烷-3-基)乙酸。1H NMR(400MHz,D2O-d6,ppm)：δ4.63(s,2H),4.33(s,2H),2.19(s,2H),1.27(s,3H).
步骤4.2-(3-甲基噁丁烷-3-基)乙酸(66mg，0.51mmol，2.00equiv)、EDCI(72mg，0.38mmol，1.50equiv)、HOBt(51mg，0.38mmol，1.50equiv)和DIPEA(162mg，1.25mmol，5.00equiv)在DMF(10mL)中的溶液在室温搅拌1h。然后添加N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酰胺二盐酸盐(90mg，0.25mmol，1.00equiv)，得到的溶液在25℃搅拌12h。反应混合物在真空浓缩。将残余物溶解于100mL DCM，然后用2x100mL盐水洗涤。有机层在真空浓缩，残余物通过Prep-HPLC(SHIMADZU-PDA(LC-08)：柱，XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5um，19*150mm，流动相，水，含有0.025％碳酸铵和CH3CN(8％CH3CN，12min内升至22.0％，1min内升至95.0％，1min内维持95.0％，2min降至8.0％)；检测器，UV254/220nm)纯化以提供13.5mg(13％)白色固体的N-([6-[2-(3-甲基噁丁烷-3-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基]甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酰胺。LC/MS(方法K，ESI)：RT＝1.88min，m/z＝397.1[M+H]+.1H-NMR(400MHz,CDCl3,ppm)：δ9.03(s,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,1H),7.39(d,J＝6.0Hz,1H),6.98(s,1H),6.40(s,1H),4.60-4.59(m,2H),4.48-4.46(m,2H),3.99-3.97(m,1H),3.65-3.60(m,2H),3.46-3.31(m,3H),2.73(s,2H),1.76-1.63(m,4H),1.47(s,3H),1.28-1.23(m,1H),1.10-1.08(m,1H),0.74-.72(m,1H),0.42-0.39(m,1H).
实施例159.N-[[6-(p-甲苯基氨甲酰基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-2-基]甲基]呋 喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺.
N-(6-氮杂螺[2.5]辛烷-2-基甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺；2,2,2-三氟代乙酸(60mg，0.15mmol，1.00equiv)、1-异氰酸基-4-甲基-苯(20mg，0.15mmol，1.00equiv)和三乙胺(65uL，0.45mmol，3.00equiv)在10％DMF的DCM(2.0mL)溶液中的溶液在50℃搅拌2h。反应混合物在真空浓缩，粗产物通过Prep-HPLC(柱，Sunfire C18 19x150；流动相，CH3CN：NH4CO3/H2O(10mmol/L)＝5％-85％，10min；检测器，UV254nm)纯化以提供16mg(25％)为灰白色固体的N-[[6-(p-甲苯基氨甲酰基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-2-基]甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05(s,1H),9.05-9.00(m,1H),8.47(d,J＝5.3Hz,1H),8.33(s,1H),7.82(d,J＝5.2,1.0Hz,1H),7.61(s,1H),7.31(d,2H),7.01(d,J＝8.2Hz,2H),3.67-3.53(m,2H),3.46-3.25(m,2H),2.21(s,3H),1.70-1.58(m,1H),1.50-1.37(m,2H),1.24-1.14(m,1H),1.12-0.98(m,1H),0.60-0.52(m,1H),0.31(t,J＝4.8Hz,1H).
实施例174.N-([6-[2-(3-羟基-3-甲基环丁基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷 -1-基]甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺.
步骤1.2-(2,2-二氯代-3-氧代环丁基)乙酸叔丁酯.乙醚(250mL)中丁-3-烯酸叔丁酯(10g，70.33mmol，1.00equiv)、三氯代乙酰氯(34g，186.98mmol，2.66equiv)和Zn-Cu(13g)在乙二醇二甲醚(40mL)中的混合物在室温、氮下搅拌48h。过滤反应混合物以去除固体材料。滤液在真空浓缩，残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：10)洗脱以提供21g为棕色液体的2-(2,2-二氯代-3-氧代环丁基)乙酸叔丁酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf＝0.6.
步骤2.2-(3-氧代环丁基)乙酸叔丁酯.2-(2,2-二氯代-3-氧代环丁基)乙酸叔丁酯(500mg，1.98mmol，1.00equiv)和锌(635mg，9.71mmol，4.91equiv)在饱和NH4Cl的MeOH溶液(20mL)中的混合物在室温搅拌过夜。过滤混合物以去除固体材料。滤液在真空浓缩以提供300mg(82％)为浅黄色油的2-(3-氧代环丁基)乙酸叔丁酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf＝0.5.
步骤3.2-(3-羟基-3-甲基环丁基)乙酸叔丁酯.向维持在0℃、氮下的2-(3-氧代环丁基)乙酸叔丁酯(300mg，1.63mmol，1.00equiv)在THF(50mL)中的搅拌溶液滴加3M CH3MgBr(0.8mL)在THF中的溶液。反应混合物在室温搅拌1h，然后通过添加20mL饱和NH4Cl溶液而猝灭。收集有机层，用50mL DCM萃取水层。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩以提供270mg(83％)为浅黄色油的2-(3-羟基-3-甲基环丁基)乙酸叔丁酯。
步骤4.2-(3-羟基-3-甲基环丁基)乙酸.向2-(3-羟基-3-甲基环丁基)乙酸叔丁酯(270mg，1.35mmol，1.00equiv)在DCM(50mL)中的溶液添加TFA(1mL)。得到的溶液在室温搅拌过夜，然后真空浓缩以提供为棕色油的240mg粗2-(3-羟基-3-甲基环丁基)乙酸。
步骤5.2-(3-羟基-3-甲基环丁基)乙酸(200mg，1.39mmol，5.58equiv)、EDCI(265mg，1.38mmol，5.56equiv)、HOBt(187mg，1.38mmol，5.57equiv)和DIPEA(1mL)在DMF(10mL)中的溶液在室温搅拌10min。然后添加N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺盐酸盐(80mg，0.25mmol，1.00equiv)。反应混合物在室温搅拌过夜，然后真空浓缩。将残余物溶解于100mL DCM，得到的溶液用50mL H2O洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(20：1)洗脱。部分纯化的产物(110mg)通过Prep-HPLC(柱，Xbridge RP18 19*150；流动相，CH3CN：NH4CO3/H2O(10mmol/L)，15min内5％-19％；检测器，UV254nm)纯化以提供19.6mg(19％)为白色固体的N-([6-[2-(3-羟基-3-甲基环丁基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基]甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.66min，m/z＝412.0[M+H]+.1H-NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ9.06(t,2H),8.48(d,J＝5.2Hz,2H),7.81(d,J＝4.4Hz,1H),7.61(s,1H),4.75(s,1H),3.73-3.53(m,1H),3.49-3.32(m,1H),2.50-2.21(m,3H),2.03-2.02(m,3H),1.64(s,3H),1.44-1.33(m,2H),1.19-1.13(m,3H),1.10-1.03(m,1H),0.56-0.53(m,1H),0.32-0.29(m,1H).
实施例274.2-[(4,6-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基氨基)甲基]-6-氮杂 螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯.
步骤1.1-[[(4-硝基苯氧基羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁 酯.在0-5℃下向1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯草酸盐(200mg，0.61mmol，1.00equiv)和4-硝基苯基氯代甲酸酯(122mg，0.61mmol，1.00equiv)在DCM(10mL)中的搅拌混合物滴加三乙胺(184mg，1.82mmol，3.00equiv)。得到的溶液在0-5℃搅拌另外2h。得到的混合物在真空浓缩以提供400mg为黄色固体的粗1-[[(4-硝基苯氧基羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf＝0.3.
步骤2.1-[[(4-硝基苯氧基羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(250mg，0.62mmol，1.00equiv)、1H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑盐酸盐(90mg，0.62mmol，1.00equiv)和三乙胺(187mg，1.85mmol，3.00equiv)在乙醇(5mL)中的溶液在78℃搅拌2h。得到的混合物温至室温并真空浓缩。将残余物溶解于50mL DCM，得到的混合物用3x50mL盐水洗涤。有机层在真空浓缩，残余物通过Prep-HPLC(Waters-1；柱，Sunfire C18 19*150；流动相A：0.2％NH4HCO3水溶液，相B：CH3CN，梯度：10min内10％至43％B，13min内升至100％B；检测器，UV254nm)纯化以提供33.7mg(15％)为白色固体的1-[[([1H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法Q，ESI)：RT＝1.49min,m/z＝376.2[M+H]+.1H-NMR(300MHz,CDCl3,ppm)：δ7.36(s,1H),4.51(s,4H),4.31(s,1H),3.61(br s,2H),3.34-3.22(m,4H),1.67-1.60(m,1H),1.49(s,1H),1.46(s,9H),1.39(s,1H),1.18-1.14(m,1H),0.97-0.92(m,1H),0.60-0.57(m,1H),0.29-0.21(m,1H).
实施例275.N-([6-[2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷 -1-基]甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺.
步骤1.2-(1-甲基哌啶-4-亚基)乙酸乙酯.1-甲基哌啶-4-酮(5g，44.19mmol，1.00equiv)和(乙氧基羰基亚甲基)三苯基正膦(17g，48.80mmol，1.00equiv)在DCM(200mL)中你的混合物在0-5℃搅拌3h。得到的混合物在真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：10)洗脱以提供1g(12％)为无色油的2-(1-甲基哌啶-4-亚基)乙酸乙酯。LC/MS(方法Q，ESI)：RT＝0.35min，m/z＝184.0[M+H]+.
步骤2.2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)乙酸乙酯.2-(1-甲基哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(1g，5.46mmol，1.00equiv)、CuI(1.2g，6.30mmol，1.15equiv)和(CH3)3SiCl(2.3g，21.3mmol，3.90equiv)在THF(50mL)中的溶液在室温、氮下搅拌2h。反应混合物冷却至-30℃，搅拌下滴加3M MeMgBr(11mL，33.0mmol，6.04equiv)在THF中的溶液。反应混合物在-30℃搅拌30min，然后缓慢温至室温，然后搅拌过夜。通过添加50mL水而猝灭反应，得到的溶液用4x50mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩以提供800mg为浅黄色油的粗2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)乙酸乙酯。LC/MS(方法Q，ESI)：RT＝0.26min，m/z＝200.0[M+H]+.
步骤3.2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)乙酸.向2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)乙酸乙酯(800mg，4.01mmol，1.00equiv)在THF(10mL)中的溶液添加10％氢氧化钠水溶液(6mL)。得到的溶液在65℃搅拌过夜。反应混合物冷却至室温，并用5％HCl调节溶液pH值至7。得到的混合物用3x50mL DCM萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供1.6g为浅黄色固体的粗2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)乙酸。LC/MS(方法R，ESI)：RT＝0.26min，m/z＝172.0[M+H]+.
步骤4.1-([呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基甲酰胺基]甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷 -6-羧酸叔丁酯.呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酸(510mg，3.13mmol，1.50equiv)、EDCI(517mg，2.70mmol，1.30equiv)、HOBt(365mg，2.70mmol，1.30equiv)和DIPEA(2mL)in DMF(20mL)的溶液在室温搅拌10min。然后添加1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(500mg，2.08mmol，1.00equiv)，得到的溶液在室温搅拌过夜。反应混合物用200mL乙酸乙酯稀释并用100mL H2O洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：1)洗脱以提供600mg(75％)为浅黄色油的1-([呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基甲酰胺基]甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法J，ESI)：RT＝1.23min，m/z＝386.0[M+H]+.
步骤5.N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺盐酸 盐.1-([呋喃并[2,3-c]吡啶-2-基甲酰胺基]甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(1g，2.59mmol，1.00equiv)在1M氯化氢的MeOH(100mL)溶液中的溶液在室温搅拌3h。反应混合物在真空浓缩以提供0.8g(96％)为白色固体的N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺盐酸盐。LC/MS(方法Q，ESI)：RT＝0.38min，m/z＝286.0[M+H]+.
步骤6.2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)乙酸(1.6g(粗固体)，9.34mmol，11.16equiv)、EDCI(300mg,1.56mmol,1.87equiv)、HOBt(250mg,1.85mmol,2.21equiv)和DIPEA(2mL)在DMF(30mL)中的溶液在室温搅拌10min。然后添加N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺二盐酸盐(300mg，0.84mmol，1.00equiv)，得到的溶液在室温搅拌过夜。过滤去除固体材料。滤液减压浓缩，残余物通过Prep-HPLC(柱：Sunfire C18 19*150；流动相，CH3CN：NH4CO3/H2O(10mmol/L)，15％-60％，10min；检测器，UV 254nm)纯化以提供43mg(12％)为浅黄色固体的N-([6-[2-(1,4-二甲基哌啶-4-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基]甲基)呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺。LC/MS(方法A，ESI)：RT＝1.70min，m/z＝439.0[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ9.04(s,2H),8.48(d,J＝5.1Hz,1H),7.80(d,J＝5.4Hz,1H),7.60(s,1H),3.67-3.56(m,2H),3.39-3.32(m,2H),2.29-2.24(m,5H),2.11-2.09(m,6H),1.59-1.52(m,3H),1.50-1.22(m,4H),1.21-1.16(m,1H),1.06-1.01(m,1H),0.94(d,J＝5.4Hz,3H),0.60-0.50(m,1H),0.31-0.29(m,1H).
实施例339.N-[[6-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-2- 基]甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺.
步骤1.4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯.4-氟代苯甲酸乙酯(2g，11.89mmol，1.00equiv)、1-甲基哌嗪(1.6g，15.97mmol，1.34equiv)和碳酸钾(2.2g，15.92mmol，1.34equiv)在DMF(30mL)中的溶液在80℃搅拌2天。得到的溶液用150mLH2O稀释，用10％HCl调节溶液pH值至1。得到的溶液用100mL乙酸乙酯洗涤。收集水层并用碳酸钠调节溶液pH值至10。得到的溶液用2x100mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩以提供1.3g(44％)为白色固体的4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯。TLC：DCM：MeOH＝10：1，Rf＝0.5.
步骤2.4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酸.向4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酸乙酯(1.3g，5.24mmol，1.00equiv)在THF(10mL)中的溶液添加10％氢氧化钠水溶液(8mL)。得到的溶液在70℃搅拌过夜。冷却至室温之后，用5％HCl调节溶液pH值至5。得到的溶液用3x100mL DCM萃取。合并的有机层在真空浓缩以提供2.2g为白色固体的粗4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酸。LC/MS(方法C，ESI)：RT＝0.54min，m/z＝221[M+H]+.
步骤3.N-[(6-[[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1- 基)甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺.4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酸(200mg，0.91mmol，1.00equiv)、EDCI(200mg，1.04mmol，1.15equiv)、HOBt(150mg，1.11mmol，1.22equiv)和DIPEA(2mL)在DMF(10mL)中的溶液在室温搅拌10min。然后添加N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺二盐酸盐(100mg，0.28mmol，0.31equiv)，得到的溶液在室温搅拌过夜。反应混合物在真空浓缩，粗产物通过Prep-HPLC(柱，Sunfire C18 19x150；流动相，CH3CN：NH4CO3/H2O(10mmol/L)＝15％-60％，10min；检测器，UV254nm)纯化以提供40mg(9％)为灰白色固体的N-[(6-[[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基)甲基]呋喃并[2,3-c]吡啶-2-羧酰胺。LC/MS(方法F，ESI)：RT＝1.12min，m/z＝488.3[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ9.07-9.05(m,2H),8.48(d,J＝5.4Hz,1H),7.82-7.80(m,1H),7.61(s,1H),7.26(d,J＝8.7Hz,2H),6.94(d,J＝8.7Hz,2H),3.62-3.58(m,2H),3.39-3.25(m,3H),3.25-3.17(m,4H),2.49-2.41(m,4H),2.21(s,3H),1.68-1.62(m,1H),1.46-1.43(m,2H),1.23-1.18(m,1H),1.04-1.00(m,1H),0.58-0.56(m,1H),0.35-0.29(m,1H).
实施例383.2-[(吡唑并[1,5-b]哒嗪-5-羰基氨基)甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷 -6-羧酸叔丁酯.
吡唑并[1,5-b]哒嗪-5-羧酸锂(90mg，0.53mmol，1.00equiv)、1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯三氟代乙酸盐(193mg，0.54mmol，1.01equiv)、EDCI(372mg，1.94mmol，3.66equiv)、HOBt(99mg，0.73mmol，1.38equiv)和三乙胺(246mg，2.43mmol，4.6equiv)在DMF(5mL)中的溶液在室温搅拌3h。然后通过添加100mL H2O猝灭反应，得到的溶液用3x100mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层用3x100mL盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并真空浓缩。残余物首先在硅胶柱上纯化，用DCM：MeOH(30：1)洗脱。部分纯化的产物通过Prep-HPLC(Waters-1；柱，XBridgeC18 19*150；流动相A：0.2％NH4HCO3水溶液；流动相B：CH3CN；梯度，10min内10至43％，13min内升至100％；检测器，UV254nm)纯化以提供17.2mg(9％)为白色固体的1-([吡唑并[1,5-b]哒嗪-3-基甲酰胺基]甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法S，ESI)：RT＝1.48min，m/z＝386.0[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ8.77(t,J＝2.4Hz,1H),8.74(s,1H),8.73(s,1H),8.18(d,J＝2.4Hz,1H),7.05(d,J＝2.7Hz,1H),3.59-3.43(m,2H),3.41-3.35(m,2H),3.25-3.17(m,2H),1.67-1.54(m,1H),1.46-1.31(m,11H),1.19-1.09(m,1H),1.05-0.95(m,1H),0.59-0.50(m,1H),0.31-0.25(m,1H).
实施例394.N-[[6-[2-(6-氨基-3-吡啶基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-2- 基]甲基]-1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺.
2-(6-氨基吡啶-3-基)乙酸(150mg，0.99mmol，1.00equiv)、N-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺(350mg，1.22mmol，1.20equiv)、IPEA(400mg，3.00equiv)、EDCI(230g，1.20mol，1.20equiv)和HOBt(170mg，1.26mmol，1.20equiv)在DMF(20mL)中的溶液在室温搅拌20h。得到的混合物在真空浓缩，残余物首先在硅胶柱上纯化，用DCM/MeOH(5：1)洗脱。部分纯化的产物(300mg)通过Flash-Prep-HPLC(IntelFlash-1：柱，硅胶；流动相，30min内15至45％CH3CN；检测器，UV 254nm)纯化以提供93mg(22％)为灰白色固体的N-([6-[2-(6-氨基吡啶-3-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基]甲基)-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺。LC/MS(方法C，ESI)：RT＝1.01min，m/z＝421.1[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ8.57(s,1H),8.47(d,J＝4.8Hz,1H),7.74(s,1H),7.39(d,J＝4.8Hz,1H),7.21(dd,J＝6.0Hz,2.4Hz,1H),6.44-6.36(m,2H),5.72(s,2H),4.62(d,J＝2.7Hz,4H),3.65-3.54(m,4H),3.40-3.33(m,1H),3.18-3.09(m,3H),1.54-1.48(m,1H),1.32-0.95(m,4H),0.55-0.45(m,1H),0.25-0.15(m,1H).
实施例399.N-[[6-[2-(4-甲基四氢吡喃-4-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷 -2-基]甲基]-1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺.
步骤1.2-(噁烷-4-亚基)乙酸乙酯.噁烷-4-酮(2g，19.98mmol，1.00equiv)和(乙氧基羰基亚甲基)三苯基正膦(8g，22.96mmol，1.15equiv)在乙腈(50mL)中的溶液在70℃搅拌16h。得到的混合物冷却至室温并浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：5)洗脱以提供1.9g(56％)为无色固体的2-(噁烷-4-亚基)乙酸乙酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝1：2，Rf＝0.5.
步骤2.2-(4-甲基噁烷-4-基)乙酸乙酯.向维持在0℃、氮下的CuI(2.9g，15.23mmol，3.24equiv)在乙醚(50mL)中的搅拌溶液滴加1.6M甲基锂(20mL，32mmol，6.8equiv)的乙醚溶液。得到的溶液在0℃搅拌10min，0℃下从反应容器真空去除乙醚溶剂。然后向残余物添加DCM(50mL)，反应冷却至-78℃。然后在-78℃向反应混合物滴加氯代三甲基硅烷(1.9g，17.6mmol，3.7equiv)，随后滴加2-(噁烷-4-亚基)乙酸乙酯(800mg，4.70mmol，1.00equiv)在DCM(20mL)中的溶液。得到的溶液在-78℃搅拌另外30min，然后在0℃搅拌2h。通过添加50mL水猝灭反应。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供750mg(86％)为无色油的2-(4-甲基噁烷-4-基)乙酸乙酯。
步骤3.2-(4-甲基噁烷-4-基)乙酸.在0℃、搅拌下向2-(4-甲基噁烷-4-基)乙酸乙酯(750mg，4.03mmol，1.00equiv)在乙醇(20mL)中的溶液滴加氢氧化钠(817mg，5.00equiv)的水(4mL)溶液。得到的溶液在室温搅拌过夜，然后浓缩以去除乙醇。得到的溶液用10mL H2O稀释并用3x20mL乙醚洗涤。收集水层，用2N HCl调节溶液pH值至4-5。水层用4x15mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供600mg(94％)为黄色油的2-(4-甲基噁烷-4-基)乙酸。LC/MS(方法S，ESI)：RT＝0.5min，m/z＝159[M+H]+.
步骤4.2-(4-甲基噁烷-4-基)乙酸(100mg，0.63mmol，1.26equiv)、DIPEA(1mL)、HOBt(85mg，0.63mmol，1.26equiv)和EDCI(120mg，0.63mmol，1.25equiv)在DMF(4mL)中的溶液在室温搅拌10min。然后添加N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺二盐酸盐(180mg，0.50mmol，1.00equiv)，反应混合物在室温搅拌过夜。得到的溶液用100mL DCM稀释，然后用60mL H2O洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(20：1)洗脱以提供110mg(51％)为浅黄色固体的N-([6-[2-(4-甲基噁烷-4-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基]甲基)-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺。LC/MS(方法F，ESI)：RT＝1.19min，m/z＝428.0[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ8.55(s,1H),8.46(d,J＝5.1Hz,1H),7.38(d,J＝5.1Hz,1H),6.42(t,J＝4.9Hz,1H),4.61(d,4H),3.69-3.31(m,8H),3.15-3.08(m,2H),2.31(s,2H),1.62-1.49(m,3H),1.45-1.25(m,4H),1.21-1.05(m,1H),1.04-0.89(m,4H),0.55-0.51(m,1H),0.25-0.15(m,1H).
实施例403.N-[[6-[2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟代乙基)-4-哌啶基]乙酰基]-6- 氮杂螺[2.5]辛烷-2-基]甲基]-1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺.
步骤1.4-甲基-4-[2-氧代-2-(1-[[([1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]羰 基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-基)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯。2-[1-[(叔丁氧基)羰基]-4-甲基哌啶-4-基]乙酸(450mg，1.75mmol，2.09equiv)、EDCI(340mg)、HOBt(250mg，1.85mmol，2.22equiv)和DIPEA(2mL)inDMF(15mL)的溶液在室温搅拌10min。然后添加N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺二盐酸盐(300mg，0.83mmol，1.00equiv)，反应混合物在室温搅拌过夜。得到的溶液用200mL乙酸乙酯稀释并用100mL H2O洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(20：1)洗脱以产生210mg(48％)为浅黄色油的4-甲基-4-[2-氧代-2-(1-[[([1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-基)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯。TLC：DCM：MeOH＝10：1，Rf＝0.5.
步骤2.N-([6-[2-(4-甲基哌啶-4-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基] 甲基)-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺盐酸盐.0℃下将氯化氢气体鼓泡进入4-甲基-4-[2-氧代-2-(1-[[([1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-基)乙基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(210mg，0.40mmol，1.00equiv)在1,4-二噁烷(20mL)中的溶液，持续20min。得到的溶液在室温搅拌1h，然后真空浓缩以提供220mg为浅黄色固体的粗N-([6-[2-(4-甲基哌啶-4-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基]甲基)-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺盐酸盐。LC/MS(方法F，ESI)：RT＝0.89min，m/z＝426.0[M+H]+
步骤3.室温下向N-([6-[2-(4-甲基哌啶-4-基)乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基]甲基)-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺二盐酸盐(220mg，0.44mmol，1.00equiv)在DMF(10mL)中的溶液添加2,2,2-三氟代乙基三氟代甲磺酸酯(140mg，0.60mmol，1.37equiv)，随后添加DIPEA(2mL)。反应混合物在室温搅拌2h，然后用200mL乙酸乙酯稀释。得到的混合物用100mL H2O洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用二氯代甲烷/甲醇(20：1)洗脱以提供35.2mg(16％)为白色固体的N-[(6-[2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟代乙基)哌啶-4-基]乙酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基)甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.15min，m/z＝508.0[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ8.56(s,1H),8.46(d,J＝4.5Hz,1H),7.39(d,J＝4.8Hz,1H),6.43(s,1H),4.62(s,4H),3.65-3.58(m,2H),3.48-3.33(m,3H),3.20-3.01(m,4H),2.59-2.50(m,3H),2.27(s,2H),1.59-1.56(m,3H),1.39-1.30(m,3H),1.01-0.96(m,4H),0.49-0.45(m,1H),0.25-0.23(m,1H).
实施例405.N-[[6-[4-(1-甲基-4-哌啶基)苯甲酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-2- 基]甲基]-1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺.
步骤1.4-[4-(乙氧基羰基)苯基]-1,2,3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯.4-溴代苯甲酸乙酯(1g，4.37mmol，1.00equiv、)4-(四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.4g，4.53mmol，1.04equiv)、Pd(PPh3)4(0.2g)和碳酸钾(800mg，5.79mmol，1.33equiv)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物在20-mL密封管中在100℃、氮下搅拌过夜。反应混合物冷却至室温，然后用120mL乙酸乙酯稀释。过滤去除固体材料，滤液用100mL水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：20)洗脱以提供1g(69％)为白色固体的4-[4-(乙氧基羰基)苯基]-1,2,3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝5：1，Rf＝0.3.
步骤2.4-[4-(乙氧基羰基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯.4-[4-(乙氧基羰基)苯基]-1,2,3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(1g，3.02mmol，1.00equiv)和10％碳载钯(0.5g)催化剂在乙醇(50mL)中的混合物在室温、1大气压H2下搅拌2h。过滤去除催化剂。滤液在真空浓缩以提供1.2g为灰色油的粗4-[4-(乙氧基羰基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝5：1，Rf＝0.4.
步骤3.4-(哌啶-4-基)苯甲酸乙酯盐酸盐.室温搅拌下向乙醇(50mL)滴加亚硫酰氯(2mL)。然后向反应混合物添加4-[4-(乙氧基羰基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(1g，3.00mmol，1.00equiv)，得到的溶液在室温搅拌1h。反应混合物在真空浓缩以提供0.8g(99％)为灰白色固体的4-(哌啶-4-基)苯甲酸乙酯盐酸盐。LC/MS(方法Q，ESI)：RT＝1.03min，m/z＝233[M+H]+.
步骤4.4-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酸甲酯.4-(哌啶-4-基)苯甲酸甲酯盐酸盐(800mg，3.13mmol，1.00equiv)和低聚甲醛(180mg)在乙醇(50mL)和水(10mL)中的溶液在60℃搅拌1h。然后添加氰基硼氢化钠(400mg)和乙酸(0.1mL)。得到的溶液在60℃搅拌过夜。反应混合物冷至室温并真空浓缩。得到的溶液用50mL H2O稀释并用3x50mL DCM萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(10：1)洗脱以提供700mg(96％)为无色油的4-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酸甲酯。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.12min，m/z＝247[M+H]+.
步骤5.4-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酸.向4-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酸乙酯(700mg，2.83mmol，1.00equiv)在乙醇(30mL)中的溶液添加氢氧化钠(340mg，8.50mmol，3.00equiv)的水(5mL)溶液。反应混合物在60℃搅拌过夜，然后冷却至室温。用5％HCl调节溶液pH至7，然后用3x50mL DCM萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩以提供1g为白色固体的粗4-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酸。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝0.93min，m/z＝220[M+H]+.
步骤6.4-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酸(131mg，0.60mmol，2.15equiv)、EDCI(80mg，0.42mmol，1.50equiv)、HOBt(57mg，0.42mmol，1.52equiv)和DIPEA(1mL)在DMF(6mL)中的溶液在室温搅拌10min。然后添加N-[6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺二盐酸盐(100mg，0.28mmol，1.00equiv)，反应混合物在室温搅拌过夜。得到的溶液用30mL H2O稀释，然后用3x50mL DCM萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物通过Prep-HPLC(柱，Sunfire C18 19*150；流动相，CH3CN：NH3/H2O(5mL/10L)，15％-70％，10min；检测器，UV 254nm)纯化以提供23.7mg(17％)为白色固体的N-[(6-[[4-(1-甲基哌啶-4-基)苯基]羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基)甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.25min，m/z＝488.0[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ8.56(s,1H),8.46(d,J＝4.5Hz,1H),7.38(d,J＝3.6Hz,1H),7.29(s,4H),6.43(s,1H),4.63(s,4H),3.76-3.74(m,1H),3.51-3.33(m,3H),3.20-3.12(m,2H),2.83(d,J＝5.1Hz,2H),2.44-2.39(m,1H),2.18(s,3H),1.98-1.91(m,2H),1.70-1.62(m,5H),1.54-1.24(m,3H),1.01-0.96(m,1H),0.54-0.49(m,1H),0.24-0.21(m,1H).
实施例406.2-[[(6-氨基-1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羰基)氨基]甲基]-6- 氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯.
1-[[(4-硝基苯氧基羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(200mg，0.49mmol，1.00equiv)、1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-胺(80mg，0.59mmol，1.20equiv)和DIPEA(200mg，1.55mmol，3.14equiv)在DCM(50mL)中的溶液在室温搅拌2h。反应混合物在真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(5：1)洗脱以提供0.113g(57％)为浅黄色固体的1-[[([6-氨基-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法K，ESI)：RT＝1.65min，m/z＝402.2[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ7.94(s,1H),6.59(s,1H),5.25(s,2H),4.64-4.52(m,6H),3.61(s,2H),3.27(d,J＝8.1Hz,5H),1.65(d,J＝8.4Hz,1H),7.94(s,9H),1.14-1.09(m,1H),0.95-0.83(m,1H),0.59-0.55(m,1H),0.26-0.24(m,1H).
实施例409.(3-甲基噁丁烷-3-基)2-[[(1,1,3,3-四氘吡咯并[3,4-c]吡啶-2- 羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸酯.
步骤1.1-[({1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基}羰基氨基)甲基]-6-氮杂螺 [2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯-d 4 .0℃下向1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(1.0g，4.16mmol，1.00equiv)在DCM(20mL)中的溶液添加4-硝基苯基氯甲酸酯(830mg，4.12mmol，1.00equiv)和三乙胺(0.6mL，4.6mmol，1.10equiv)。得到的溶液在室温搅拌2h。添加三乙胺(1.5mL)在DCM(80mL)中的溶液，随后添加2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-d4盐酸盐(700mg，粗品)。反应混合物在25℃搅拌3h，然后用1x100mL碳酸氢钠、1x100mL水和1x100mL盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(95/5)洗脱以提供500mg为黄色固体的1-[({1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基}羰基氨基)甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.17min，m/z＝391.0[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ8.47(s,1H),8.46(d,J＝4.5Hz,1H),7.38(d,J＝4.2Hz,1H),6.34(s,1H),3.51-3.41(m,2H),3.22-3.02(m,4H),1.62-1.55(m,1H),1.42-1.35(m,11H),1.22-1.08(m,1H),0.99-0.92(m,1H),0.51-0.39(m,1H),0.22-0.17(m,1H).
步骤2.N-{6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基}-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2- 羧酰胺-d 4 .室温下向1-[({1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基}羰基氨基)甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯-d4(500mg，1.00equiv)在DCM(15mL)中的溶液滴加CF3COOD(2mL)。得到的溶液在室温搅拌1h，然后真空浓缩。将残余物溶解于10mL MeOH。用饱和碳酸钠水溶液调节溶液pH至8。得到的混合物在真空浓缩以提供1.5g为黄色固体的粗N-{6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基}-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺-d4。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝0.82min，m/z＝291.0[M+H]+.
步骤3.N-{6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基}-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺-d4(500mg，粗品)、3-甲基噁丁烷-3-基4-硝基苯基碳酸酯(136mg，0.54mmol，1.2equiv)和三乙胺(91mg，0.90mmol，2.0equiv)在DCM(15mL)中的溶液在室温搅拌5h。反应混合物用50mL DCM稀释，然后用1x50mL碳酸氢钠、1x50mL水和1x50mL盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物首先在硅胶柱上纯化，用DCM/MeOH(95/5)洗脱。部分纯化产物(80mg)通过Prep-HPLC(1#-Pre-HPLC-005(Waters)：柱，SunFire Prep C18 OBD柱，5um，19*150mm；流动相，水，含有10mmolNH4HCO3和CH3CN(15.0％CH3CN，10min内升至34.0％，2min内升至95.0％，2min内降至15.0％)；检测器，UV 254/220nm)纯化以提供47mg为白色固体的3-甲基噁丁烷-3-基1-[({1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基}羰基氨基)甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸酯-d4。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.39min，m/z＝405.0[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ8.57(s,1H),8.46(d,J＝5.1Hz,1H),7.38(d,J＝5.1Hz,1H),6.42(t,J＝5.1Hz,1H),4.64-4.58(m,2H),4.42-4.36(m,2H),3.50-3.47(m,2H),3.31-3.28(m,2H),3.16-3.06(m,2H),1.62(s,3H),1.64-1.56(m,1H),1.40-1.36(m,2H),1.20-1.17(m,1H),1.00-0.96(m,1H),0.49-0.47(m,1H),0.24-0.20(m,1H).
实施例419.(3-甲基噁丁烷-3-基)(2S)-2-[(1,3-二氢吡咯并[3,4-c]吡啶-2- 羰基氨基)甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸酯.
步骤1.4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯.4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(300g，1.51mol，1.00equiv)、2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(405g，1.81mol，1.20equiv)和碳酸钾(314g，2.26mol，1.50equiv)在DMF(4.5L)中的混合物在80℃搅拌过夜。反应冷至室温，然后通过添加5L水/冰而猝灭。过滤收集沉淀并空气干燥以提供252g(62％)为白色固体的4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。TLC：乙酸乙酯/石油醚＝1：2，Rf＝0.6.
步骤2.6-叔丁基1-乙基6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸酯.三甲基碘化亚砜(618g，2.81mol，3.00equiv)和t-BuOK(315g，2.81mol，3.00equiv)在DMSO(5L)中的溶液在室温搅拌1h。然后分几部分添加4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(252g，935.63mmol，1.00equiv)。反应混合物在室温搅拌过夜，然后通过添加10L饱和NH4Cl溶液猝灭。得到的混合物用3x3L乙酸乙酯萃取。合并的有机层用2x1.5L盐水洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1/10)洗脱以提供147g为黄色油的6-叔丁基1-乙基6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸酯。TLC：乙酸乙酯/石油醚＝1：2，Rf＝0.5.
步骤3.6-[(叔丁氧基)羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸.0℃下向6-叔丁基1-乙基6-氮杂螺[2.5]辛烷-1,6-二羧酸酯(147g，1.00equiv)在乙醇(1L)中的搅拌溶液滴加氢氧化钠(104g，2.60mol，5.00equiv)在水(200mL)中的溶液。得到的溶液在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物以去除过量乙醇。添加水(2L)并用3x500mL乙酸乙酯洗涤混合物。收集水层，用1M HCl调节溶液pH至5-6。得到的混合物用4x600mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供129g为白色固体的粗6-[(叔丁氧基)羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸。TLC：DCM/MeOH＝5：1，Rf＝0.1.
步骤4.(1S)-1-[[(1S)-1-苯基乙基]氨甲酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸 叔丁酯.
0℃下向6-[(叔丁氧基)羰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酸(129g，505.27mmol，1.00equiv)、DIPEA(196g，1.52mol，6.02equiv)和(S)-(-)-1-苯基乙胺(87g，717.94mmol，1.10equiv)在DMF(2L)中的搅拌溶液分几部分添加O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基六氟磷酸脲(231g，607.89mmol，1.20equiv)。得到的溶液在室温搅拌过夜，然后通过添加4.5L水/冰猝灭。得到的混合物用3x2L乙酸乙酯萃取。合并的有机层用2x800mL盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1/4)洗脱以提供83.15g(46％)为白色固体的非对映异构体的混合物的1-[[(1S)-1-苯基乙基]氨甲酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法I，ESI：)RT1＝4.63min，RT2＝4.73min，m/z＝359.1[M+H]+.得到的非对映异构体混合物通过手性超临界流体色谱(柱：3x25cm，5um ChiralpakAD；流动相A：CO2；流动相B：MeOH中0.1％NH4OH；等梯度条件：87：13 A：B；流速：200g/min；UV：220nm；被压：100巴；柱温：40℃)分离。第一洗脱的非对映异构体被运向下一步骤。
步骤5.(1S)-N-[(1S)-1-苯基乙基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酰胺.0℃下将氯化氢气体鼓泡进入(1S)-1-[[(1S)-1-苯基乙基]氨甲酰基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(20g，55.79mmol，1.00equiv)在MeOH(200mL)中的溶液，持续30min。得到的溶液在室温搅拌过夜，然后真空浓缩。残余物用100mL H2O洗脱，并用2N氢氧化钠溶液调节溶液pH至12。得到的混合物用3x100mL DCM萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以提供15g为浅黄色固体的(1S)-N-[(1S)-1-苯基乙基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酰胺。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.03min，m/z＝259.0[M+H]+.
步骤6.(1S)-1-([[(1S)-1-苯基乙基]氨基]甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6- 羧酸叔丁酯.向维持在室温、氮下(1S)-N-[(1S)-1-苯基乙基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-羧酰胺(8g，30.96mmol，1.00equiv)在THF(800mL)中的搅拌溶液滴加1M硼烷在THF(100mL，100mmol，3.3equiv)中的溶液。得到的溶液被回流过夜。得到的混合物在真空浓缩，然后向残余物添加水(50mL)。用5％HCl(5％)调节溶液pH至1。得到的溶液回流搅拌4h。反应混合物冷却至室温，用10％氢氧化钠溶液调节溶液pH至12。溶液冷却至0℃，然后在搅拌下滴加二羧酸二叔丁酯(6.7g，30.70mmol，0.68equiv)在20mL THF中的溶液。反应混合物在室温搅拌过夜。得到的混合物用2x200mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：3)洗脱以提供2.9g(19％)为浅棕色油的(1S)-1-([[(1S)-1-苯基乙基]氨基]甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。TLC：DCM：MeOH＝10：1，Rf＝0.3.
步骤7.(1S)-1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸酯.(1S)-1-([[(1S)-1-苯基乙基]氨基]甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(700mg，2.03mmol，1.00equiv)和Pd(OH)2(100mg)在MeOH(30mL)中的混合物在50-mL压力反应器中室温、5大气压H2下搅拌过夜。过滤去除催化剂。滤液在真空浓缩以提供400mg(82％)为浅黄色油的(1S)-1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。LC/MS(方法F，ESI)：RT＝1.25min，m/z＝241.0[M+H]+.
步骤8.(1S)-1-[[([1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]羰基)氨基]甲基]-6- 氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯.(1S)-1-(氨基甲基)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5g，20.80mmol，1.00equiv)、4-硝基苯基氯代甲酸酯(4.4g，21.83mmol，1.05equiv)和DIPEA(10mL)在THF(200mL)中的溶液在室温搅拌过夜。然后添加1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶二盐酸盐(4.4g，22.79mmol，9.24equiv)，室温搅拌反应混合物过夜。得到的混合物在真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱以提供2.3g为浅黄色固体的(1S)-1-[[([1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯。TLC：DCM：MeOH＝10：1，Rf＝0.4.
步骤9.N-[(1S)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c] 吡啶-2-羧酰胺盐酸盐.(1S)-1-[[([1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸叔丁酯(2.3g，5.95mmol，1.00equiv)在饱和氯化氢的MeOH溶液(100mL)中的溶液在室温搅拌2h。得到的混合物在真空浓缩以提供1.7g棕色固体的粗N-[(1S)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺盐酸盐。
步骤10.3-甲基噁丁烷-3-基4-硝基苯基碳酸酯.向维持在-50℃、氮下噁丁烷-3-酮(9g，124.89mmol，1.00equiv)在THF(200mL)中的搅拌溶液滴加1.6M甲基锂的乙醚溶液(150mL，240mmol，1.9equiv)。反应混合物温至0℃并搅拌2h。然后在0℃下滴加4-硝基苯基氯代甲酸酯(26g，128.99mmol，1.03equiv)在THF(100mL)中的溶液。添加完成之后，得到的溶液在室温搅拌另外2h。然后通过添加200mL水来猝灭反应。得到的混合物用2x200mL乙酸乙酯萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1：5)洗脱以提供4.5g(14％)为白色固体的3-甲基噁丁烷-3-基4-硝基苯基碳酸酯。TLC：石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf＝0.6.
步骤11.N-[(1S)-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-基甲基]-1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-羧酰胺盐酸盐(1.7g，5.27mmol，1.00equiv)、3-甲基噁丁烷-3-基4-硝基苯基碳酸酯(1.7g，6.71mmol，1.27equiv)和DIPEA(2mL)在乙醇(50mL)中的溶液在室温搅拌过夜。得到的混合物在真空浓缩。将残余物溶解于150mL DCM，然后用100mL H2O洗涤。有机层经无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残余物经硅胶柱纯化，用DCM/MeOH(20/1)洗脱以提供1.43g(68％)为白色固体的3-甲基噁丁烷-3-基(1S)-1-[[([1H,2H,3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2-基]羰基)氨基]甲基]-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-羧酸酯。LC/MS(方法I，ESI)：RT＝1.24min，m/z＝401.1[M+H]+.1H-NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)：δ8.56(s,1H),8.47(d,J＝5.1Hz,1H),7.39(d,J＝5.1Hz,2H),6.42(t,J＝5.2Hz,1H),4.63-4.59(m,6H),4.38(d,J＝7.5Hz,2H),3.48(s,2H),3.31(s,2H),3.12(t,J＝6.0Hz,2H),1.62(s,3H),1.59-1.55(m,1H),1.42-1.39(m,2H),1.37-1.34(m,1H),1.21-1.17(m,1H),1.01-0.96(m,1H),0.54-0.48(m,1H),0.27-0.21(m,1H).
使用类似于上述那些方法制备额外的实施例化合物。使用类似于下列实施例编号所示的那些类似方法制备特定实施例化合物：
实施例 实施例编号的方法
22 6
23 6
24 6
25 1
26 339
27 339
28 339
29 339
30 339
31 339
32 339
33 339
34 339
35 339
36 339
37 339
38 339
39 339
40 6
41 383
42 383
43 339
44 339
45 1和6
46 6
47 1和6
48 1
49 1
50 339
51 339
52 339
53 339
54 339
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56 339
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65 339
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67 339
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70 339
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108 339
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143 339
144 339
145 339
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148 6
149 6
151 1
152 339
153 339
154 339
155 339
156 339
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158 159
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163 159
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168 159
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170 159
171 159
172 159
173 159
175 150
176 1和6
177 1和6
178 1和6
179 339
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186 159
187 159
188 1和6
189 1和6
190 1和6
191 6
192 6
193 1
194 1
195 150
196 6
197 6
198 6
199 6
200 1
201 1和6
202 1和6
203 6
204 419
205 419
206 6
207 1和6
208 6
209 6
210 6
211 6
212 1
213 6
214 6
215 419
216 6
218 1
219 150
220 150
221 150
222 339
223 339
228 1
229 6
230 1和6
231 339
232 339
233 339
234 339
235 339
236 339
237 339
238 339
239 339
240 339
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243 339
244 339
245 339
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251 339
252 339
253 339
254 339
255 339
256 339
257 339
258 339
259 339
260 339
261 339
262 339
263 339
264 339
265 339
266 339
267 339
268 339
269 339
270 339
271 339
272 339
273 339
275 6
276 174
277 6
278 6
279 1和6
280 339
281 339
282 339
283 339
284 339
285 6
286 6
287 6
288 6
289 6
290 6
291 6
292 1和6
293 6
294 339
295 339
296 339
297 339
298 339
299 339
300 339
301 339
302 339
303 339
304 339
305 339
306 339
307 339
308 339
309 339
310 339
311 339
312 339
313 339
314 339
315 339
316 339
317 339
318 339
319 339
320 339
321 339
322 339
323 339
324 339
325 339
326 339
327 339
328 339
329 339
330 339
331 339
332 339
333 339
334 339
335 339
336 339
337 339
338 339
340 339
341 339
343 6
344 6
345 6
346 1和6
347 1和6
348 6
350 1
351 1
352 1和6
353 1和6
354 1和6
355 1和6
356 6
357 1和6
358 6
359 6
360 1和6
361 1
362 339
363 339
364 6
365 1和6
366 1和6
367 409
368 6
369 6
370 6
371 6
372 6
373 6
375 1
376 1和6
377 6
378 6
379 6
381 6
382 1
384 339
385 339
387 6
388 1
389 6
392 1
393 1和6
395 1
396 1和6
397 6
398 1和6
399 6
400 174
401 6
402 6
404 1和6
407 1和6
408 409
410 409
411 6
413 419
414 419
415 1和6
416 1和6
417 1和6
418 1和6
使用类似于上述那些方法制备额外实施例。
分析表征：
使用类似于上述那些方法制备了本文描述的具体示例的化合物的每一个，并且通过LC/MS分析。每个化合物的数据，连同用于产生所述数据的LC/MS方法，提供于表1(NA＝不可用)。
表1.实施例化合物的LC/MS数据。
实施例 保留时间(min) m/z 方法
2 1.63 402.0 E
3 3.43 386.1 B
4 1.60 386.0 E
5 3.60 385.1 B
7 3.44 403.0 C
8 3.19 385.2 L
9 1.40 395.0 H
10 1.16 397.0 H
11 1.43 398.2 C
12 1.24 355.0 H
13 2.45 425.2 C
14 1.21 377.0 C
15 4.25 386.0 L
16 2.39 327.3 J
17 1.27 363.0 A
18 2.23 285.1 M
19 2.41 286.1 M
20 1.71 341.2 C
21 2.62 399.0 A
22 3.59 385.1 B
23 2.63 386.1 I
24 1.37 383.2 C
25 1.07 387.3 O
26 2.59 394.2 T
27 3.60 410.2 T
28 3.80 482.2 T
29 4.19 384.3 T
30 2.83 426.3 T
31 4.06 429.2 T
32 3.79 368.2 T
33 2.99 397.2 T
34 3.66 409.2 T
35 3.18 411.3 T
36 3.66 412.3 T
37 3.61 398.2 T
38 3.93 400.2 T
39 3.02 405.2 T
40 1.04 482.3 Q
41 4.46 385.2 T
42 4.45 385.3 T
43 4.50 386.2 T
44 4.49 386.2 T
45 1.35 385 I
46 1.95 369 B
47 1.31 405 I
48 4.36 387.3 T
49 4.35 387.3 T
50 3.48 406.2 T
51 3.57 413.3 T
52 3.94 412.3 T
53 3.15 411.3 T
54 3.85 413.2 T
55 3.48 413.2 T
56 3.39 411.2 T
57 3.45 411.2 T
58 3.91 390.2 T
59 3.54 384.2 T
60 3.63 398.2 T
61 3.58 384.2 T
62 3.18 371.2 T
63 3.64 436.3 T
64 3.34 426.3 T
65 3.04 427.3 T
66 3.41 432.2 T
67 3.53 422.3 T
68 3.44 425.3 T
69 3.87 468.2 T
70 3.60 457.2 T
71 3.79 475.2 T
72 3.70 447.2 T
73 3.79 475.2 T
74 3.65 475.2 T
75 2.95 427.3 T
76 3.54 461.2 T
77 3.88 459.2 T
78 3.36 440.3 T
79 3.36 440.3 T
80 3.46 446.2 T
81 3.81 472.2 T
82 3.52 439.3 T
83 3.81 472.2 T
84 3.79 483.2 T
85 3.87 523.2 T
86 3.29 502.3 T
87 3.41 502.3 T
88 3.54 502.3 T
89 2.91 440.3 T
90 3.70 439.3 T
91 2.79 426.3 T
92 3.81 468.2 T
93 3.85 468.2 T
94 3.52 448.2 T
95 2.91 454.3 T
96 3.84 486.3 T
97 3.12 391.2 T
98 3.56 391.2 T
99 3.49 381.2 T
100 3.19 381.2 T
101 2.97 380.2 T
102 3.41 392.2 T
103 3.21 391.2 T
104 3.44 380.2 T
105 2.98 394.2 T
106 3.43 394.2 T
107 3.43 394.2 T
108 3.62 394.2 T
109 3.59 394.2 T
110 3.33 392.2 T
111 3.39 392.2 T
112 3.46 392.2 T
113 3.32 392.2 T
114 3.49 394.2 T
115 3.58 408.2 T
116 3.76 408.2 T
117 3.72 395.2 T
118 4.09 396.2 T
119 3.12 405.2 T
120 3.10 405.2 T
121 3.15 405.2 T
122 3.65 406.2 T
123 3.85 420.2 T
124 3.74 422.2 T
125 3.72 409.2 T
126 3.65 408.2 T
127 3.77 416.2 T
128 3.70 409.2 T
129 3.37 476.3 T
130 3.73 354.2 T
131 4.30 462.2 T
132 3.75 461.2 T
133 3.51 448.2 T
134 3.42 448.2 T
135 3.70 448.2 T
136 3.91 423.2 T
137 3.88 422.2 T
138 3.73 422.2 T
139 3.65 395.2 T
140 3.80 436.3 T
141 3.37 380.2 T
142 3.82 489.3 T
143 2.95 413.3 T
144 3.73 439.3 T
145 3.37 411.2 T
146 3.27 461.3 T
147 3.74 489.3 T
148 1.29 453 I
149 1.74 425 I
150 1.88 397.1 K
151 0.97 373.2 S
152 4.10 429.2 T
153 3.44 372.2 T
154 4.64 536.2 T
155 3.38 413.3 T
156 2.97 405.1 T
157 4.07 430.2 T
158 4.24 433.3 T
159 4.20 419.2 T
160 4.03 419.2 T
161 4.08 437.2 T
162 4.24 433.3 T
163 4.09 437.2 T
164 4.13 449.2 T
165 4.05 449.2 T
166 4.09 437.2 T
167 4.03 449.2 T
168 4.51 489.2 T
169 4.71 463.3 T
170 4.31 453.2 T
171 4.25 453.2 T
172 3.47 357.2 T
173 4.53 489.2 T
174 1.66 412 I
175 2.58 399 B
176 1.67 406.1 B
177 2.32 406.2 K
178 2.1 429.9 C
179 3.71 457.2 T
180 3.13 408.2 T
181 3.48 422.2 T
182 3.83 385.3 T
183 3.59 371.2 T
184 4.35 425.3 T
185 3.63 371.2 T
186 4.12 411.3 T
187 3.98 405.2 T
188 1.09 454.1 C
189 1.9 371.1 B
190 1.61 406.1 B
191 1.52 340.1 K
192 1.21 359.2 F
193 1.55 399.2 G
194 1.57 344.1 G
195 1.39 398.1 K
196 2.05 411.3 F
197 1.6 425 C
198 0.87 414.2 F
199 1.43 418.9 C
200 1.49 401.2 I
201 1.33 441.3 F
202 3.49 473.1 B
203 1.31 384.2 I
204 3.10 396.6 T
205 4.13 430.2 T
206 1.33 428 I
207 1.88 430 I
208 1.92 406.2 F
209 1.04 441.9 C
210 1.29 420 I
211 1.98 440.9 C
212 2.04 386.3 F
213 4.11 383.3 T
214 4.12 383.3 T
215 3.83 402.2 T
216 1.32 428 I
218 2.12 439.2 C
219 1.27 413.2 L
220 1.06 423.3 F
221 1.21 395.2 R
222 3.74 450.3 T
223 4.12 502.3 T
228 1.41 399.2 Q
229 3.24 428.2 B
230 2.24 441 I
231 3.42 405.2 T
232 3.10 405.2 T
233 2.98 405.2 T
234 3.35 405.2 T
235 3.42 405.2 T
236 3.18 430.2 T
237 3.75 430.2 T
238 3.43 431.2 T
239 3.32 430.2 T
240 3.59 430.2 T
241 2.93 430.2 T
242 3.78 415.2 T
243 3.76 415.2 T
244 3.90 502.2 T
245 3.12 489.3 T
246 3.24 484.3 T
247 4.36 474.2 T
248 3.26 473.3 T
249 3.56 471.2 T
250 3.59 471.2 T
251 3.52 471.3 T
252 3.21 470.3 T
253 3.09 456.2 T
254 3.47 458.2 T
255 3.14 458.2 T
256 3.96 459.2 T
257 3.96 459.2 T
258 3.64 461.2 T
259 3.41 469.2 T
260 3.36 470.2 T
261 3.61 442.2 T
262 3.21 442.2 T
263 3.07 444.2 T
264 3.55 447.2 T
265 3.00 448.1 T
266 3.94 432.2 T
267 3.28 442.2 T
268 3.00 442.2 T
269 3.88 442.2 T
270 3.50 442.2 T
271 3.36 442.2 T
272 3.44 381.2 T
273 3.85 370.2 T
274 1.49 376.2 Q
275 1.7 439 A
276 1.28 413.2 R
277 1.34 404.2 J
278 2.56 404.1 B
279 1.62 409.2 B
280 3.89 472.2 T
281 3.09 419.2 T
282 3.36 384.2 T
283 3.43 400.2 T
284 3.39 386.2 T
285 1.71 404.1 B
286 0.92 407.1 R
287 1.42 407.2 R
288 1.02 426.1 R
289 1.78 421.2 R
290 1.15 427.3 C
291 0.9 404.2 R
292 1.6 409.1 B
293 0.98 421.2 R
294 3.91 464.3 T
295 4.04 498.3 T
296 4.15 450.3 T
297 3.58 408.2 T
298 3.94 450.3 T
299 3.59 408.2 T
300 3.43 422.2 T
301 3.43 422.2 T
302 3.77 430.2 T
303 3.22 491.3 T
304 3.35 491.3 T
305 3.82 475.2 T
306 4.03 521.3 T
307 3.04 463.2 T
308 3.88 450.3 T
309 3.14 444.2 T
310 3.83 444.2 T
311 3.19 444.2 T
312 3.88 448.2 T
313 3.34 431.2 T
314 3.47 436.3 T
315 3.39 444.2 T
316 3.62 430.2 T
317 3.00 430.2 T
318 4.53 423.2 T
319 4.13 436.3 T
320 3.19 431.2 T
321 3.42 431.2 T
322 3.92 436.3 T
323 3.76 422.2 T
324 3.49 422.2 T
325 3.67 422.2 T
326 3.73 422.2 T
327 3.94 421.2 T
328 4.41 421.1 T
329 3.15 408.2 T
330 3.29 408.2 T
331 3.39 395.2 T
332 3.41 420.2 T
333 3.65 420.2 T
334 3.57 409.2 T
335 3.35 408.2 T
336 3.23 381.2 T
337 3.39 381.2 T
338 2.63 380.2 T
339 1.12 488.3 F
340 3.12 431.2 T
341 3.49 305.2 T
343 0.99 501.3 C
344 1.4 501.3 C
345 1.02 446.3 C
346 1.42 503.4 F
347 2.51 409.2 B
348 1.37 381 I
350 2.11 401.2 F
351 1.16 403.3 F
352 0.94 406.3 F
353 1.87 421.3 F
354 1.11 462.3 F
355 1.14 410.2 F
356 1.37 440.4 C
357 1.99 430.3 F
358 1.24 466 C
359 0.76 412.2 O
360 2.85 401.2 B
361 2.38 400.2 O
362 2.02 489.4 F
363 1.03 487.3 F
364 2.24 381.2 F
365 1.06 423.3 F
366 1.06 423.3 F
367 2 391.2 K
368 1.29 419 I
369 1.35 460.2 O
370 0.74 408.3 S
371 1.76 423.2 O
372 1.2 517.4 F
373 1.75 382.2 O
375 1.23 415.3 F
376 1.78 403.3 F
377 2.03 383.3 O
378 1.78 420.1 K
379 1.64 419 I
381 2.43 421.2 K
382 0.9 411.2 O
383 1.48 386.0 S
384 4.65 409.2 U
385 4.76 409.2 U
387 1.3 415.2 K
388 2.68 502.4 C
389 1.24 405.3 C
392 1.42 414.2 F
393 1.68 417.3 F
394 1.01 421.1 C
395 1.09 400.2 F
396 1.3 449.3 F
397 1.85 399.3 F
398 1.44 460.2 O
399 1.19 428 F
400 1.76 411 I
401 1.41 401 I
402 1.71 386.3 P
403 1.15 508 I
404 1.16 426 I
405 1.25 488 I
406 1.65 402.2 K
407 1.6 407 I
408 1.27 375 I
409 1.39 405 I
410 1.15 414 I
411 2.19 390 I
413 1.26 371.2 I
414 1.3 371.2 I
415 1.25 396.2 F
416 1.58 372.2 F
417 1.33 400.1 I
418 1.43 391.1 I
419 1.24 401.1 I
要理解，本领域技术人员能够使用本领域已知方法以及本文描述的一般合成方法制备本发明化合物。
测定1：生化抑制测定
NAMPT蛋白纯化。重组的His-标记NAMPT在大肠杆菌细胞中生成，经Ni柱纯化，并经尺寸排阻柱通过XTAL Biostructures进一步纯化。
NAMPT酶反应。NAMPT酶反应在96孔V型底板中在缓冲液A(50mM Hepes pH7.5，50mM NaCl，5mM MgCl2，和1mM THP)中进行。化合物滴定在单独的稀释板中通过在DMSO中进行，通过连续稀释化合物以制备100×储液。将含有33nM NAMPT蛋白的缓冲液A缓冲剂添加至含有对照(例如，DMSO或者空白)的1μL100×化合物板。将化合物和酶混合物在室温孵育15分钟，然后将在缓冲液A中的10μL10×底物和辅助因子添加至测试孔，得到以下最终浓度：1μM NAM、100μM-磷酸-D-核糖1-二磷酸(PRPP)和2.5mM腺苷5'-三磷酸(ATP)。使反应在室温进行30分钟，然后通过添加甲酸和L-胱硫醚的11μL溶液淬灭，得到以下最终浓度：1％甲酸和10μM L-胱硫醚。通过将NMN的连续稀释液添加(或不添加)至预先淬灭的酶和辅助因子混合物，测定背景和信号强度。
量化NMN。使用基于质谱的测定来测量NAMPT反应产物、β-烟酰胺单核苷酸(NMN)和内部对照(L-胱硫醚)。使用Biocius Lifesciences的服务，用RapidFire系统检测NMN和L-胱硫醚。简言之，将NMN和L-胱硫醚结合至0.1％甲酸中的石墨碳柱，在30％乙腈缓冲液中洗脱，并注射至Sciex4000质谱仪。将样品组分用电喷雾电离离子化并检测正离子。NMN的Q1(母离子)和Q3(片段离子)质量分别为334.2和123.2。L-胱硫醚的Q1和Q3分别为223.1和134.1。通过以下方法量化和分析片段。
IC 50 值的测定。首先，通过用每孔的NMN信号除以L-胱硫醚信号，将NMN信号标准化为L-胱硫醚信号。将背景孔的信号取平均并从试验板减去。然后通过使用下式测定经化合物处理的细胞的百分比抑制。
％抑制＝100-100*x/y
其中x表示经化合物处理的孔的平均信号，并且y表示经DMSO处理的孔的平均信号。
然后使用下式测定IC50值：
IC50＝10^(LOG10(X)+(((50-化合物浓度1时的％抑制)/(XX-YY)*(LOG10(X)-LOG10(Y))))
其中X表示化合物浓度1，Y表示化合物浓度2，XX表示在化合物浓度1(X)时的％抑制，以及YY表示在化合物浓度2(Y)时的％抑制。
本发明的化合物的IC50值优选低于1μM，更优选低于0.1μM，并且最优选低于0.01μM。该测定中测试的化合物的结果在下表2中提供。
测定2：体外细胞增殖测定
测定方法。在添加和未添加NMN或烟酰胺(NAM)的180μL培养基10％FBS，1％Pen/Strep Amphotecricin B，RPMI-1640)中，将A2780细胞以1×103细胞/孔接种在96孔板中。在37℃和5％CO2孵育过夜后，在单独的稀释板中进行化合物滴定，通过在DMSO中连续稀释化合物以制备1000×储液。然后将化合物在培养基中进一步稀释至10×最终浓度，接着，将20μL每一稀释液与对照(例如，DMSO和空白)一起添加至板孔，得到200μL的最终体积。在每孔中的最终DMSO浓度为0.1％。然后将板在5％CO2孵育器中于37℃孵育72小时。然后使用磺酰罗丹明B(SRB)测定存活细胞的数目。将细胞在4℃固定1小时，添加50μL30％三氯乙酸(TCA)，得到6％TCA的最终浓度。将板用H2O洗涤四次，并干燥至少1小时，接着，将4％SRB在1％乙酸中的100μL溶液添加至每孔并在室温孵育至少30分钟。然后将板用1％乙酸洗涤三次，干燥，并用100μL的10mM Tris碱溶液处理。然后在微板读数器读取板在570nm的吸光度。在单独的板上仅用培养基产生背景。
IC 50 值的测定。首先，将背景板的信号取平均，然后将背景从测试板减去。然后通过使用下式测定经化合物处理的细胞的％抑制：
％抑制＝100-100*x/y
其中x表示经化合物处理的细胞的平均信号，以及y表示经DMSO处理的细胞的平均信号。
然后使用下式测定IC50值：
IC50＝10^(LOG10(X)+(((50-化合物浓度1时的％抑制)/(XX-YY)*(LOG10(X)-LOG10(Y))))
其中X表示化合物浓度1，Y表示化合物浓度2，XX表示在化合物浓度1(X)时的％抑制，以及YY表示在化合物浓度2(Y)时的％抑制。
细胞毒性的特异性。NAMPT的抑制可通过添加NAM或者NMN逆转。化合物的特异性通过细胞存活测定在化合物和NAM或者NMN存在下测定。使用上面给出的方法测定百分比抑制。
本发明的化合物的IC50值优选低于1μM，更优选低于0.1μM，并且最优选低于0.01μM。本发明最优选的化合物是酶测定中和细胞增殖测定中的IC50值都低于1μM的化合物，更优选两个值都低于0.1μM，和最优选两个值都低于0.01μM。该测定中测试的化合物的结果在下表2中提供(NT＝未测试)。
表2.生化和细胞增殖测定结果。
虽然已经结合上述具体实施方案描述了本发明，但是其许多可选方案、调整和其他变化形式对于本领域普通技术人员而言是明显的。所有这样的可选方案、调整和变化形式预期落入本发明精神和范围内。

Claims (26)

1.一种式I化合物：
其中：
R是(a)包含选自N、S和O的一个杂原子和1、2或3个额外N原子的8-、9-或10-元双环杂芳基，其中所述双环杂芳基未经取代或者经选自由氘、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基、卤代、氰基、卤代烷基、羟基、羟基烷基和烷氧基组成的组的一个或多个取代基取代，并且其中所述双环杂芳基的一个或多个N原子任选为N氧化物；或
(b)与苯基或单环的5-或6-元杂芳基稠合的5-或6-元氮连接的杂环烷基环，其中所述苯基或杂芳基未经取代或者经选自由氘、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基、卤代、氰基、卤代烷基、羟基、羟基烷基和烷氧基组成的组的一个或多个取代基取代；并且
R1是H、-(C1-4亚烷基)0-1C(O)Ra、-(C1-4亚烷基)0-1CO2Ra、-(C1-4亚烷基)0-1S(O)Ra、–(C1-4亚烷基)0-1SO2Ra、–C(O)NH(Ra)、–C(O)N(Ra)2或–C(O)C(O)NH(Ra)；
其中每个Ra独立为
(1)未经取代或者经一个或多个Rm取代基取代的烷基，
其中每个Rm独立选自氘、羟基、-NRbRc、烷氧基、氰基、卤代、-C(O)烷基、-CO2烷基、-CONRbRc、-S(O)烷基、-SO2烷基、-SO2NRbRc、芳基、杂芳基、环烷基、杂环烷基、苯氧基和-O-烷基-OH；
其中Rb是H或烷基；
Rc是H、烷基、烷氧基烷基、卤代烷基、-C(O)烷基、-CO2烷基、–SO2烷基、-C(O)NH2或C(O)H；并且
Rm内的每个芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基未经取代或者经独立选自以下的一个或多个取代基取代：烷基、卤代烷基、羟基、-NRbRc、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、卤代、氧代、-C(O)烷基、-CO2烷基、-C(O)-杂环烷基、-CONRbRc、-S(O)烷基、-SO2烷基、-SO2-卤代烷基、-SO2NRbRc、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基；或者两个取代基一起形成稠合的杂芳基、环烷基或杂环烷基环；
其中每个烷基或烷氧基未经取代或者经苯基、–NRbRc、杂环烷基、杂芳基或-C(O)烷基取代；和
每个芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基未经取代或者经烷基、卤代或–C(O)烷基取代；
(2)各自未经取代或者经一个或多个Rg取代基取代的苯基、环烷基、杂芳基或杂环烷基；
其中每个Rg独立选自烷基、卤代烷基、羟基、-NRbRc、烷氧基、卤代烷氧基、氰基、卤代、氧代、-C(O)烷基、-CO2烷基、-C(O)-杂环烷基、-CONRbRc、-S(O)烷基、-SO2烷基、-SO2-卤代烷基、-SO2NRbRc、芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基；或者两个Rg取代基一起形成稠合的苯基、杂芳基、环烷基或杂环烷基环；
其中每个烷基或烷氧基未经取代或者经–NRbRc、杂环烷基、杂芳基或-C(O)烷基取代；和
每个芳基、杂芳基、环烷基和杂环烷基未经取代或者经烷基、卤代、-CO2烷基或–C(O)烷基取代；或
(3)–NRxRy，
其中Rx是H或烷基；并且
Ry是H、烷基、烷氧基烷基、卤代烷基、-C(O)烷基、-CO2烷基或–SO2烷基；
R2和R3各自独立为H或氘；并且
n是1或2；
或其立体异构体，或这种化合物或立体异构体的药学可接受的盐。
2.权利要求1所述的化合物，其中R是如权利要求1所述未经取代或取代的8-或9-元杂芳基。
3.权利要求1所述的化合物，其中R是：
各自未经取代或者如权利要求1所述取代。
4.权利要求1所述的化合物，其中，R是如权利要求1所定义的与未经取代或取代的苯基或单环杂芳基稠合的5-或6-元氮连接的杂环烷基环。
5.权利要求1所述的化合物，其中R是
6.权利要求1所述的化合物，其中R1是H。
7.权利要求1所述的化合物，其中R1是-C(O)Ra、-CO2Ra、-S(O)Ra或–SO2Ra。
8.权利要求1所述的化合物，其中Ra是如权利要求1所述未经取代或取代的烷基。
9.权利要求1所述的化合物，其中Ra是未经取代或取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、异丁基、异戊基、苯基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、吡咯基、呋喃基、苯硫基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、异吲哚啉基、氮杂环丁烷基、噁丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或四氢苯硫基。
10.权利要求1所述的化合物，其中Ra是各自未经取代或经选自以下的一个或多个取代基取代的苯基、环烷基、杂芳基或杂环烷基：氟代、氧代、甲基、-CONH2、乙酰基、-SO2甲基、-C(O)-异丙基、哒嗪基、三唑基、二甲基氨基甲基、氰基、甲基-三唑基-甲氧基、三氟代甲氧基、吡咯烷基甲基、乙酰基氨基、四唑基甲基、甲基-四唑基-甲基、甲基-咪唑基-甲基、-NHSO2甲基、1,1-二氧代硫代吗啉基、4-甲基-哌嗪基甲基、-NHCONH2、-SO2CF3、吗啉基甲基、咪唑基、-SO2NH2、甲基哌啶基、甲基-哌嗪基、-C(O)(4-甲基-哌嗪基)、吗啉基、三氟代甲基、环丙基、乙基、异噁唑基、四唑基、异丙基、苯基、氟代-苯基、叔丁基、苄基、N-甲基吡咯烷基、N-乙酰基-吡咯烷基、异丁基、丙基、甲基吡唑基、三氟代乙基、嘧啶基、氧代、乙酰基、氰基、-CO2-叔丁基和氨基。
11.权利要求1所述的化合物，其中Ra是未经取代或者经选自以下的一个或多个取代基取代的烷基：氟代、叔丁氧基、-C(O)NMe2、-NHCHO、甲氧基、苯氧基、氰基、乙酰基、羟基、-OCH2C(CH3)＝OH、-NH(乙酰基)和-N(Me)(乙酰基)。
12.权利要求1所述的化合物，其中R1是–SO2Ra，其中Ra是甲基、乙基、苯基、苄基或2,2-二甲基丙基。
13.权利要求1所述的化合物，其中R1是–C(O)NHRa，其中Ra是甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、环己基、-CH2-环己基、噁丁烷基或甲基噁丁烷基，或者Ra是各自任选经选自以下的一个或多个取代基取代的苯基或苄基：氰基、甲基、氟代、甲氧基和氯代。
14.权利要求1所述的化合物，其中R2和R3都是H。
15.权利要求1所述的化合物，其是式I-a化合物：
其中R、R1、R2和R3如针对式I所定义；
或其立体异构体，或这种化合物或立体异构体的药学可接受的盐。
16.一种化合物，选自：
及其立体异构体，和此类化合物和立体异构体的药学可接受的盐。
17.一种药物组合物，包含：(a)有效量的至少一种权利要求1的化合物；和(b)药学可接受的载体。
18.权利要求17所述的药物组合物，还包含治疗有效量的一种或多种额外的辅助活性剂。
19.权利要求18所述的药物组合物，其中所述一种或多种额外的辅助活性剂选自由以下组成的组：细胞毒性剂、顺铂、多柔比星、泰索帝、泰素、依托泊苷、依立替康、camptostar、托泊替康、帕利他赛、多西他赛、埃坡霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、替莫唑胺、环磷酰胺、SCH66336、替吡法尼R115777、L778,123、BMS 214662、C225、芳香酶组合产品、ara-C、阿霉素、cytoxan、吉西他滨、尿嘧啶芥、氮芥、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三亚乙基蜜胺、三亚乙基硫代磷酰胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巯嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、奥沙利铂、亚叶酸、奥沙利铂喷司他丁、长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、放线菌素D、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、光辉霉素TM、脱氧考福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷、17α-炔雌醇、己烯雌酚、睾酮、泼尼松、氟甲睾酮、丙酸屈他雄酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、甲泼尼龙、甲睾酮、泼尼松龙、曲安西龙、氯烯雌醚、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙瑞林、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、诺维本、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、雷洛昔芬、屈洛昔芬、六甲蜜胺、阿瓦斯丁、赫赛汀、百克沙、万珂、泽瓦林、三氧二砷、希罗达、长春瑞滨、卟菲尔钠、Erbitux、Liposomal、塞替哌、Altretamine、美法仑、曲司珠单抗、来曲唑、氟维司群、依西美坦、异环磷酰胺、利妥昔单抗、C225、Campath、亚叶酸和地塞米松、比卡鲁胺、卡铂、苯丁酸氮芥、顺铂、来曲唑、甲地孕酮、戊柔比星和长春碱和
20.权利要求17所述的药物组合物，还包含拯救剂。
21.权利要求20所述的药物组合物，其中所述拯救剂选自由烟酰胺、烟酸和烟酰胺单核苷酸(NMN)组成的组。
22.一种治疗罹患或诊断具有NAMPT活性介导的疾病或医学病症的受试者的方法，包括给需要这种治疗的受试者施用有效量的至少一种权利要求1的化合物。
23.权利要求22所述的方法，其中所述疾病或医学病症是实体或液体肿瘤、非小细胞肺癌、白血病、淋巴瘤、卵巢癌、神经胶质瘤、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、子宫颈癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、rhino-gastric肿瘤、结肠直肠癌、CNS癌、膀胱癌、胰腺癌、霍奇金病、类风湿性关节炎、糖尿病、粥样硬化、败血症、衰老或炎症。
24.权利要求22所述的方法，还包括给所述受试者施用有效量的选自由以下组成的组的至少一种化合物：细胞毒性剂、顺铂、多柔比星、泰索帝、泰素、依托泊苷、依立替康、camptos tar、托泊替康、帕利他赛、多西他赛、埃坡霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、替莫唑胺、环磷酰胺、SCH66336、替吡法尼R115777、L778,123、BMS 214662、C225、芳香酶组合产品、ara-C、阿霉素、cytoxan、吉西他滨、尿嘧啶芥、氮芥、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、三亚乙基蜜胺、三亚乙基硫代磷酰胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巯嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、奥沙利铂、亚叶酸、奥沙利铂喷司他丁、长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、放线菌素D、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、光辉霉素TM、脱氧考福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷、17α-炔雌醇、己烯雌酚、睾酮、泼尼松、氟甲睾酮、丙酸屈他雄酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、甲泼尼龙、甲睾酮、泼尼松龙、曲安西龙、氯烯雌醚、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙瑞林、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、诺维本、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、雷洛昔芬、屈洛昔芬、六甲蜜胺、阿瓦斯丁、赫赛汀、百克沙、万珂、泽瓦林、三氧二砷、希罗达、长春瑞滨、卟菲尔钠、Erbitux、Liposomal、塞替哌、Altretamine、美法仑、曲司珠单抗、来曲唑、氟维司群、依西美坦、异环磷酰胺、利妥昔单抗、C225、Campath、亚叶酸和地塞米松、比卡鲁胺、卡铂、苯丁酸氮芥、顺铂、来曲唑、甲地孕酮、戊柔比星和长春碱和
25.权利要求22所述的方法，还包括施用有效量的拯救剂。
26.权利要求25所述的药物组合物，其中所述拯救剂选自由烟酰胺、烟酸和烟酰胺单核苷酸(NMN)组成的组。
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