CN104509440B

CN104509440B - 一种铁皮石斛组培苗培养基及其制备方法

Info

Publication number: CN104509440B
Application number: CN201410808292.1A
Authority: CN
Inventors: 李志山
Original assignee: GUANGXI NANNING GUIZHI TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: Wengyuan County Agricultural Science and Technology Co., Zeyu world
Priority date: 2014-12-22
Filing date: 2014-12-22
Publication date: 2016-10-05
Anticipated expiration: 2034-12-22
Also published as: CN104509440A

Abstract

本发明公开了一种铁皮石斛组培苗培养基及其制备方法，属于铁皮石斛种植技术领域，所述铁皮石斛组培苗培养基包括以下组分：土豆泥、苹果泥、香蕉泥、白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、氨基酸、维生素、IBA、GA、6‑BA、纯净水。本发明的铁皮石斛组培苗培养基，添加了生长激素IBA、GA、6‑BA，能够快速促根、芽、叶生长，加之培养基搭配合理，营养全面，能够缩短铁皮石斛培养周期，提高铁皮石斛移栽存活率，存活率达到98.75％；采用本发明的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，能够缩短消毒时间，提高灭菌效果可靠性和产业化生产效率，降低生产成本；本发明的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，操作简单，易于实现产业化、规范化和标准化生产。

Description

一种铁皮石斛组培苗培养基及其制备方法

【技术领域】

本发明属于铁皮石斛种植技术领域，具体涉及一种铁皮石斛组培苗培养基及其制备方法。

【背景技术】

铁皮石斛是兰科植物，石斛可分为黄草、金钗、马鞭等数十种，铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名，它生长在悬崖峭壁的背阴之处，根不入土，具有滋养阴津、增强体质、补益脾胃、护肝利胆、强筋降脂、降低血糖、抑制肿瘤、明亮眼目、滋养肌肤以及延年益寿等功效。《中国药学大词典》称铁皮石斛“专治肺胃之气液、气液冲旺、肾水自生”。善于滋阴生津，治疗阴虚津亏诸症。《神农本草经》记载：“石斛除痹下气、补五脏虚劳瀛瘦，强阴益精，久服，厚肠胃”，称其有“主伤中，除痹下气，补五脏虚劳”的功效。

目前，在铁皮石斛试管苗的繁殖体系中，生根培养基采用的多是固体培养基，如发明专利“铁皮石斛的人工大面积栽培方法(专利号：ZL200410084496.1)”公开了一种固体练苗培养基，是以刨木花、珍珠岩、草炭土按体积比1:1:1组成的，采用该培养基组培苗，移栽存活率90％以上；又如发明专利“铁皮石斛的快速繁殖方法(专利号：ZL201310156723.6)”公开了一种固体培养基，是以树皮粉、腐殖质、珍珠岩按体积比1:0.5:0.5组成的，采用该培养基组培苗，移栽存活率94.8％。以上现有技术中固体培养基的应用，存在着取苗时容易造成根部伤害，降低了移栽存活率，从而提高了生产成本。

在培养基制备方法中，现有技术对制备好的培养基多采用高压灭菌，如发明专利“一种应用铁皮石斛激素自养型茎尖培养生产药材的方法(专利号：ZL02136925.9)”公开了一种培养基高压灭菌的方法，是在压力为100-120KPa下进行的，灭菌时间为15-25min；又如发明专利“提高铁皮石斛原球茎增殖倍数的方法(专利号：ZL201110200498.2)”也公开了一种培养基高压灭菌的方法，是在压力为70-135KPa下进行的，灭菌时间为20-25min。以上现有技术由于灭菌压力普遍不高，存在着消毒时间长、灭菌效果可靠性差等问题，造成产业化生产效率低下，生产成本高。

【发明内容】

本发明要解决的技术问题是提供一种铁皮石斛组培苗培养基及其制备方法，以解决现有技术中铁皮石斛移栽存活率低，培养基消毒时间长，灭菌可靠性差等问题。本发明的铁皮石斛组培苗培养基，添加了生长激素IBA、GA、6-BA，能够快速促根、芽、叶生长，加之培养基搭配合理，营养全面，能够缩短铁皮石斛培养周期，提高铁皮石斛移栽存活率，存活率达到98.75％。

为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥150-250克、苹果泥150-250克、香蕉泥200-300克、白糖250-350克、硝酸铵25-35克、硝酸钾30-40克、磷酸二氢钾3-5克、硼酸3-5克、氨基酸3-5克、维生素3-6克、IBA0.5-1克、GA0.5-1克、6-BA0.5-1克、纯净水1200-1500毫升。

优选地，所述的铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥180-220克、苹果泥180-220克、香蕉泥220-280克、白糖280-320克、硝酸铵28-32克、硝酸钾32-38克、磷酸二氢钾4-5克、硼酸4-5克、氨基酸4-5克、维生素4-5克、IBA0.6-0.9克、GA0.6-0.9克、6-BA0.6-0.9克、纯净水1300-1400毫升。

优选地，所述的铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥190-210克、苹果泥190-210克、香蕉泥240-260克、白糖290-310克、硝酸铵29-31克、硝酸钾34-36克、磷酸二氢钾4-5克、硼酸4-5克、氨基酸4-5克、维生素4-5克、IBA0.7-0.8克、GA0.7-0.8克、6-BA0.7-0.8克、纯净水1320-1380毫升。

优选地，所述的铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥200克、苹果泥200克、香蕉泥250克、白糖300克、硝酸铵30克、硝酸钾35克、磷酸二氢钾4克、硼酸4克、氨基酸4克、维生素5克、IBA0.7克、GA0.7克、6-BA0.7克、纯净水1350毫升。

所述的氨基酸包括丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸中的一种或多种。

所述的维生素包括维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆中的一种或多种。

本发明还提出一种铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S1：将土豆、苹果、香蕉剥皮后，按上述配比称取重量，然后用搅碎机将三种物质搅碎成泥浆后倒入到5L容器中；

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、氨基酸、维生素、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并搅拌至混匀；

S3：将上述铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至5.2～6.0，然后分装于组培瓶中，采用高压蒸汽灭菌，灭菌时间为6-10min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。

优选地，所述铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，步骤S1中搅碎机搅碎土豆、苹果、香蕉的转速为500-600r/min，时间为2-3min。

优选地，所述铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，步骤S2中搅拌培养基的转速为300-400r/min，时间为2-3min。

优选地，所述铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，步骤S3中高压蒸汽灭菌的仪器采用的是脉动真空压力蒸气灭菌器，灭菌压力为210-230KPa。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明的铁皮石斛组培苗培养基，添加了生长激素IBA、GA、6-BA，能够快速促根、芽、叶生长，加之培养基搭配合理，营养全面，能够缩短铁皮石斛培养周期，提高铁皮石斛移栽存活率，存活率达到98.75％；

2、采用本发明的铁皮石斛组培苗培养基制备方法，能够缩短消毒时间，提高灭菌效果可靠性和产业化生产效率，降低生产成本；

3、本发明的铁皮石斛组培苗培养基制备方法，操作简单，易于实现产业化、规范化和标准化生产。

【具体实施方式】

实施例1

一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥150克、苹果泥150克、香蕉泥200克、白糖250克、硝酸铵30克、硝酸钾30克、磷酸二氢钾3克、硼酸3克、丙氨酸3克、维生素B₁3克、IBA0.5克、GA0.5克、6-BA0.5克、纯净水1200毫升。

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S1：将土豆、苹果、香蕉剥皮后，按上述配比称取重量，然后用搅碎机在转速为500r/min下，时间为3min，搅碎均匀后将三种泥浆倒入到5L容器中；

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、丙氨酸、维生素B₁、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为300r/min下，搅拌时间为3min直至混匀；

S3：将上述铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至5.2，然后分装于组培瓶中，采用脉动真空压力蒸气灭菌器高压蒸汽灭菌，灭菌压力为210KPa，灭菌时间为10min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。

实施例2

一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥200克、苹果泥200克、香蕉泥250克、白糖300克、硝酸铵30克、硝酸钾35克、磷酸二氢钾4克、硼酸4克、丝氨酸4克、维生素B₂5克、IBA0.5克、GA0.5克、6-BA1克、纯净水1350毫升。

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S1：将土豆、苹果、香蕉剥皮后，按上述配比称取重量，然后用搅碎机在转速为550r/min下，时间为2.5min，搅碎均匀后将三种泥浆倒入到5L容器中；

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、丝氨酸、维生素B₂、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为350r/min下，搅拌时间为2.5min直至混匀；

S3：将上述铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至5.6，然后分装于组培瓶中，采用脉动真空压力蒸气灭菌器高压蒸汽灭菌，灭菌压力为220KPa，灭菌时间为8min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。

实施例3

一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥250克、苹果泥250克、香蕉泥300克、白糖300克、硝酸铵35克、硝酸钾40克、磷酸二氢钾5克、硼酸4克、甘氨酸5克、维生素B₆5克、IBA1克、GA0.5克、6-BA1克、纯净水1500毫升。

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S1：将土豆、苹果、香蕉剥皮后，按上述配比称取重量，然后用搅碎机在转速为600r/min下，时间为2min，搅碎均匀后将三种泥浆倒入到5L容器中；

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、甘氨酸、维生素B₆、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为400r/min下，搅拌时间为2min直至混匀；

S3：将上述铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至6.0，然后分装于组培瓶中，采用脉动真空压力蒸气灭菌器高压蒸汽灭菌，灭菌压力为230KPa，灭菌时间为6min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。

实施例4

一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥160克、苹果泥160克、香蕉泥300克、白糖270克、硝酸铵27克、硝酸钾32克、磷酸二氢钾4克、硼酸4克、丙氨酸1克、丝氨酸3克、维生素B₁4克、IBA0.5克、GA1克、6-BA0.6克、纯净水1250毫升。

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、丙氨酸、丝氨酸、维生素B₁、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为300r/min下，搅拌时间为3min直至混匀；

S3：将上述铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至5.3，然后分装于组培瓶中，采用脉动真空压力蒸气灭菌器高压蒸汽灭菌，灭菌压力为215KPa，灭菌时间为9min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。

实施例5

一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥170克、苹果泥180克、香蕉泥260克、白糖280克、硝酸铵28克、硝酸钾32克、磷酸二氢钾5克、硼酸5克、丙氨酸2克、甘氨酸3克、维生素B₂6克、IBA0.7克、GA0.7克、6-BA0.7克、纯净水1300毫升。

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、丙氨酸、甘氨酸、维生素B₂、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为400r/min下，搅拌时间为2min直至混匀；

S3：将上述铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至5.4，然后分装于组培瓶中，采用脉动真空压力蒸气灭菌器高压蒸汽灭菌，灭菌压力为220KPa，灭菌时间为8min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。

实施例6

一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥190克、苹果泥190克、香蕉泥240克、白糖270克、硝酸铵28克、硝酸钾35克、磷酸二氢钾3克、硼酸5克、丝氨酸2克、甘氨酸3克、维生素B₂3克、维生素B₆2克、IBA0.8克、GA0.8克、6-BA0.8克、纯净水1400毫升。

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、丝氨酸、甘氨酸、维生素B₂、维生素B₆、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为350r/min下，搅拌时间为2.5min直至混匀；

S3：将上述铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至5.5，然后分装于组培瓶中，采用脉动真空压力蒸气灭菌器高压蒸汽灭菌，灭菌压力为230KPa，灭菌时间为6min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。

实施例7

一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥210克、苹果泥200克、香蕉泥200克、白糖250克、硝酸铵25克、硝酸钾30克、磷酸二氢钾5克、硼酸5克、丙氨酸1克、丝氨酸2克、甘氨酸3克、维生素B₁2克、维生素B₆3克、IBA0.5克、GA0.6克、6-BA0.8克、纯净水1300毫升。

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸、维生素B₁、维生素B₆、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为400r/min下，搅拌时间为2min直至混匀；

S3：将上述铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至5.8，然后分装于组培瓶中，采用脉动真空压力蒸气灭菌器高压蒸汽灭菌，灭菌压力为230KPa，灭菌时间为6min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。

实施例8

一种铁皮石斛组培苗培养基，包括土豆泥230克、苹果泥230克、香蕉泥300克、白糖350克、硝酸铵35克、硝酸钾40克、磷酸二氢钾5克、硼酸5克、丙氨酸2克、丝氨酸2克、甘氨酸1克、维生素B₁2克、维生素B₂2克、维生素B₆2克、IBA0.5克、GA0.5克、6-BA1克、纯净水1450毫升。

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S2：按上述比重将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸、维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、IBA、GA、6-BA、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为400r/min下，搅拌时间为2min直至混匀；

以上内容不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明，对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。

下表是实施例培养基组培苗移栽存活情况。

实施例	实验组培苗数	组培苗移栽存活数	移栽存活率(％)
				1	100	98	98
2	100	99	99
				3	100	99	99
4	100	99	99
				5	100	99	99
6	100	98	98
				7	100	99	99
8	100	99	99

由上表可以知道，以本发明的培养基组培苗的移栽存活率为98.75％。

Claims

1.一种铁皮石斛组培苗培养基，其特征在于，由以下成分制成：土豆泥230克、苹果泥230克、香蕉泥300克、白糖350克、硝酸铵35克、硝酸钾40克、磷酸二氢钾5克、硼酸5克、丙氨酸2克、丝氨酸2克、甘氨酸1克、维生素B1 2克、维生素B2 2克、维生素B6 2克、吲哚丁酸0.5克、赤霉素0.5克、6-苄基腺膘呤1克、纯净水1450毫升；

所述的铁皮石斛组培苗培养基的制备方法，包括以下步骤：

S1：将土豆、苹果、香蕉剥皮后，按配比称取重量，然后用搅碎机在转速为600r/min下，时间为2min，搅碎均匀后将三种泥浆倒入到5L容器中；

S2：按配比将白糖、硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硼酸、丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸、维生素B1、维生素B2、维生素B6、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、纯净水放入到步骤S1的5L容器中并在转速为400r/min下，搅拌时间为2min直至混匀；

S3：S2制得的铁皮石斛组培苗培养基pH值调节至5.6，然后分装于组培瓶中，采用脉动真空压力蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌，灭菌压力为220KPa，灭菌时间为8min，灭菌完毕后将各组培瓶密封。