CN104470922B - 药物活性化合物 - Google Patents

药物活性化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN104470922B
CN104470922B CN201380032901.2A CN201380032901A CN104470922B CN 104470922 B CN104470922 B CN 104470922B CN 201380032901 A CN201380032901 A CN 201380032901A CN 104470922 B CN104470922 B CN 104470922B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
present
pharmaceutically acceptable
flt3
acceptable salt
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201380032901.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104470922A (zh
Inventor
J·布拉格
V·巴韦特西亚斯
安德鲁·S·摩尔
史派瑞顿·李纳多普勒斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Cancer Research
Original Assignee
Cancer Research Technology Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cancer Research Technology Ltd filed Critical Cancer Research Technology Ltd
Publication of CN104470922A publication Critical patent/CN104470922A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104470922B publication Critical patent/CN104470922B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/06—Peri-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Abstract

本发明涉及式I的化合物：其中R1和R2如本文中所定义，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。式I的化合物是极光激酶和/或FLT3的抑制剂。本发明还涉及用于制备这些化合物的工艺、涉及包含它们的药物组合物并且涉及它们在治疗增殖性疾患诸如癌症以及极光激酶和/或FLT3活性牵涉其中的其它疾病或病症中的用途。

Description

药物活性化合物
引言
本发明涉及药物活性化合物。更具体而言，本发明涉及作为极光激酶的酶活性抑制剂的化合物。本发明的化合物也是FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)活性的抑制剂。本发明还涉及用于制备这些化合物的工艺、涉及包含它们的药物组合物并且涉及它们在治疗增殖性疾患诸如癌症以及极光激酶和/或FLT3活性牵涉其中的其它疾病或病症中的用途。
发明背景
增殖性疾病，例如癌症，以不受控制的且不规则的细胞增殖为特征。准确地说，近几十年来使细胞以不受控制的且不规则的方式增殖已成为深入研究的焦点。
极光激酶(Aurora kinase)，被指定为A、B和C的三种丝氨酸-苏氨酸激酶的家族，在有丝分裂的不同阶段起到关键且不同的作用。1-3在有丝分裂的初期，极光-A与用于Xklp2的靶向蛋白(TPX2)形成复合物，Xklp2的靶向蛋白(TPX2)调节中心体成熟和有丝分裂的纺锤体组装。4,5极光-B与内着丝粒蛋白(INCENP)、生存素(survivin)和borealin形成复合物，从而调节染色体凝聚、染色体列队、有丝分裂关卡和胞质分裂。6-9在大范围的包括乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、神经胶质瘤、甲状腺癌和精原细胞瘤的人类恶性肿瘤中已报道了极光-A和极光-B的过表达。10-16在有丝分裂期间极光-C的作用是了解较少的。然而，在睾丸中报道了极光-C的高表达。17,18
近年来，极光激酶的小分子靶向已变成用于发现新的癌症化学疗法的常见战略，而且已报道了许多结构不同的极光活性抑制剂18-20，包含1(VX-680(MK-0457))21、2(AZD1152)22、3(PHA-739358)23 , 24和4(AMG900)25(见下文)。
然而，仍然存在确定能够抑制极光激酶活性的另外的治疗剂的需求。
国际专利公开第WO2007/072017号和第WO2009/001021号二者皆公开了起极光激酶活性抑制剂作用的一系列咪唑并[4,5-b]吡啶衍生物，并且因此它们是用于治疗癌症的潜在有用的治疗剂。下文示出WO2009/001021中所公开的一个特定化合物。
该特定化合物(被称作CCT137690)是极光激酶的有效的且口服地生物可利用的抑制剂，该抑制剂抑制体内SW620人类结肠癌异种移植物的生长，使伴行的生物标志物调控与靶衔接一致26。然而，该化合物的临床前开发是受限制的，归因于其窄的针对hERG43的安全裕度(IC50＝3.0μM)26和其低的人类肝微粒体的稳定性(在孵育30分钟之后代谢了86％，未公开数据)。
因此，本发明的目的是提供适合于临床前评价和临床评价的口服地生物可利用的极光激酶的酶活性抑制剂。
因此，本发明的目的是提供口服地生物可利用的极光激酶的酶活性抑制剂，该抑制剂具备可接受的人类微粒体稳定性、细胞色素P450活性的减弱的抑制和在某些化合物的情况下针对hERG的较宽的治疗指数。
FLT3是属于类别III受体酪氨酸激酶(RTK)家族的跨膜激酶。FLT3-配体(FL)与其受体的结合引起下游信号传导通路的二聚、自身磷酸化和后续的活化37。在急性髓性白血病(AML)急性变(blasts)中已发现高水平的FLT3表达，并且在AML病人中已确定两种主要类别的突变，即内部串联重复(ITD)和酪氨酸激酶结构域(TKD)点突变37,38。在20-25％的AML病人中检测到内部串联重复，并且在5-10％的AML病人中检测到酪氨酸激酶结构域点突变37,38。在临床试验中已评价了FLT3的许多小分子抑制剂38,39。
因此，存在用于具有抑制极光激酶和FLT3二者的双重功能的化合物另外的需求。此类化合物对治疗极光和/或FLT3牵涉其中的疾病和/或病症、诸如例如AML而言将是有用的。
因此，本发明的又一个目的是提供具备该双重活性的化合物。
发明概述
在一方面，本发明提供如本文中所定义的一种化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一方面，本发明提供一种包含如本文中所定义的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物以及一种或更多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
在另一方面，本发明涉及如本文中所定义的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或者如本文中所定义的药物组合物，用于在治疗中使用。
在另一方面，本发明涉及如本文中所定义的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或者一种如本文中所定义的药物组合物，用于在治疗极光激酶和/或FLT3活性牵涉其中的疾病或病症中使用。
在另一方面，本发明涉及如本文中所定义的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制造用于在治疗极光激酶和/或FLT3活性牵涉其中的疾病或病症中使用的药剂时的用途。
在另一方面，本发明涉及一种治疗极光激酶和/或FLT3活性牵涉其中的疾病或病症的方法，所述方法包括向需要这种治疗的受治疗者给予治疗上有效量的如本文中所定义的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或者如本文中所定义的药物组合物。
在另一方面，本发明提供一种如本文中所定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或者药物组合物，用于在治疗增殖性疾患诸如癌症中使用。在特定的实施方式中，癌症是人类癌症。
在另一方面，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制造用于在治疗增殖性疾患诸如癌症中使用的药剂中的用途。在特定的实施方式中，癌症是人类癌症。
在另一方面，本发明提供一种治疗增殖性疾患诸如癌症的方法，所述方法包括向需要这种治疗的受治疗者给予治疗上有效量的如本文中所定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或者药物组合物。在特定的实施方式中，癌症是人类癌症。
在另一方面，本发明提供如本文中所定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或者药物组合物，用于在产生极光激酶和/或FLT3抑制效果中使用。
在另一方面，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制造用于在产生极光激酶和/或FLT3抑制效果中使用的药剂中的用途。
在另一方面，本发明提供一种在体外产生极光激酶和/或FLT3抑制效果的方法，所述方法包括给予有效量的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一方面，本发明提供一种在体内产生极光激酶和/或FLT3抑制效果的方法，所述方法包括给予有效量的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一方面，本发明提供一种在体外或在体内抑制细胞增殖的方法，所述方法包括使细胞与有效量的如本文中所定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物接触。
本发明还提供一种合成如本文中所定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的方法。
在另一方面，本发明提供一种由本文中所定义的合成方法可得到的、或得到的或直接得到的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一方面，本发明提供如本文中所定义的新的中间体，其适合于在本文中提出的合成方法的任一种中使用。
本发明的任一个特定方面的优选的、合适的和任选的特征也是任何其它方面的优选的、合适的和任选的特征。
发明详述
定义
除非另有说明，说明书和权利要求书中所使用的以下术语具有下文陈述的意义。
应认识到，提到“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”包括病症的确定症状的预防以及减轻。因此，状态、疾患或病症的“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”包括：(1)预防或延迟状态、疾患或病症的临床症状的表现在人类中发展，该人类可能受到状态、疾患或病症的折磨或易感染状态、疾患或病症但是还未经历或显示出状态、疾患或病症的临床症状或亚临床症状，(2)抑制状态、疾患或病症，即，阻滞、减弱或延迟疾病或其复发(在维持治疗的情况下)或其至少一种临床症状或亚临床症状的发展，或(3)缓解或减轻疾病，即，引起状态、疾患或病症或其至少一种其临床症状或亚临床症状的退化。
“治疗上有效量”意指当被给予哺乳动物用于治疗疾病时足以影响对于疾病的这种治疗的化合物的量。“治疗上有效量”将取决于待治疗的哺乳动物的化合物、疾病及其严重性和年龄、体重等等而变化。
短语“本发明的化合物”意指本文中一般地和具体地公开的那些化合物。
本发明的化合物
如前所述，国际专利第WO2007/072017号公开了起极光激酶活性抑制剂作用的一系列咪唑并[4,5-b]吡啶衍生物。WO2007/072017中公开的两个特定化合物是6-溴-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7-(4-(吡啶-3-基甲基)哌嗪-1-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(实施例56)和6-溴-7-(4-(吡啶-3-基甲基)哌嗪-1-基)-2-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(实施例57)。下面示出这些化合物的结构。
在第一方面，本发明提供下面示出的式I的化合物：
其中：
R1是Br或Cl；
R2选自下面示出的式II或式III：
其中Ra是氢或甲基；
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在上面的R2基团的定义中，符号表示存在于式I的化合物中的R2基团与-CH2-部分的点连接。
本发明的化合物表明细胞色素P450活性相对于WO2007/072017中实施例56和57的化合物的减弱的抑制。本发明的某些化合物相对于WO2007/072017中实施例56和57的化合物还具备针对hERG的更宽的治疗指数。
本发明的特定化合物包含例如式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中，除非另有说明，R1和R2的每个具有上文中定义的或在下文中段(1)至(5)中任一段的任何意义：
(1)R1是Br；
(2)R1是Cl；
(3)R2具有式II；
(4)R2具有如本文中所定义的式III；
(5)R2具有如本文中所定义的式III和Ra是氢；
(6)R2具有如本文中所定义的式III和Ra是甲基；
合适地，R1是氯。
合适地，R2具有式II(即，对氯苄基)。因此，在本发明的化合物的特定基团中，该化合物具有下面示出的结构式Ia：
其中R1如上文中所定义，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在本发明的化合物的另外的基团中，R2具有式III，即，该化合物具有下面示出的结构式Ib：
其中R1和Ra二者皆如上所定义，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
本发明的特定化合物包含以下的任一种：
6-氯-7-(4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基)-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶；
3-((4-(6-氯-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-1,2,4-噁二唑；
3-((4-(6-氯-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-5-甲基-1,2,4-噁二唑；
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
本发明的化合物的合适的药学上可接受的盐是例如本发明的化合物的足够碱性的酸加成盐，例如利用例如无机酸或有机酸(例如，盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、甲酸、柠檬酸或马来酸)的酸加成盐。
本发明还涵盖如本文中所定义的本发明的含有一种或更多种同位素替代(isotopic substitutions)的化合物。例如，H可以是包含1H、2H(D)和3H(T)的任何同位素形式；C可以是包含12C、13C和14C的任何同位素形式；诸如此类。
还应理解，本发明的某些化合物可以以溶剂化形式以及非溶剂化形式存在，诸如例如水合形式。应理解，本发明涵盖具备极光激酶和/或FLT3抑制活性的所有此类溶剂化形式。
还应理解，本发明的某些化合物可以表现出多态性，并且本发明涵盖具备极光激酶和/或FLT3抑制活性的所有此类形式。
本发明的化合物可以以许多不同的互变异构形式存在，并且提到本发明的化合物包含所有此类形式。为避免疑义，若化合物可以以若干个互变异构形式之一存在，并且仅具体地描述或示出了一个形式，尽管如此所有其它形式也被本发明的化合物包含。本发明的化合物的互变异构形式的实例包含上面的式I示出的形式的化合物以及下面示出的式(IV)和(V)的互变异构体。
其中R1和R2如上文中所定义。
本发明的含有胺官能的化合物还可以形成N-氧化物。本文提到式I的含有胺官能的化合物也包含N-氧化物。若化合物含有若干个胺官能，则一个或多于一个氮原子可以被氧化以形成N-氧化物。N-氧化物的特定实例是含氮杂环的氮原子的N-氧化物。N-氧化物可以通过利用氧化剂诸如过氧化氢或过酸(例如，过氧羧酸)处理相应的胺来形成，参见例如Advanced Organic Chemistry,由Jerry March编,第4版,Wiley Interscience,页码。更具体而言，N-氧化物可以通过L.W.Deady(Syn.Comm.1977,7,509-514)的程序制成，其中胺化合物与间氯过氧苯甲酸(MCPBA)在例如惰性溶剂诸如二氯甲烷中反应。
本发明的化合物可以以前药的形式给予，其在人类或动物体内崩解以释放本发明的化合物。前药可以用于改变本发明的化合物的物理性能和/或药物代谢动力学性能。当本发明的化合物含有可以与性能-改变基团连接的合适基团或取代基时，可以形成前药。前药的实例包含可以在本发明的化合物的氨基处形成的体内可裂解的酰胺衍生物。
因此，当可通过有机合成使之可用时并且当可通过其前药的裂解在人类或动物体内使之可用时，本发明包含如上文中所定义的式I的那些化合物。因此，本发明包含通过有机合成手段生产的式I的那些化合物且还有通过前驱体化合物的代谢在人类或动物体内产生的此类化合物，即式I的化合物可以是合成产生的化合物或代谢产生的化合物。
式I的化合物的合适的药学上可接受的前药是当适合于给予人类或动物体而不具有不期望的药理活性和不具有过度的毒性时基于合理的医疗判断的药物。
例如在以下的文件中已描述了各种形式的前药：
a)Methods in Enzymology,Vol.42,p.309-396,由K.Widder,等人(AcademicPress,1985)编；
b)Design of Pro-drugs,由H.Bundgaard,(Elsevier,1985)编；
c)A Textbook of Drug Design and Development,由Krogsgaard-Lar sen和H.Bundgaard编,第5章“Design and Applicationof Pro-dr ugs”,由H.Bundgaard编113-191页(1991)；
d)H.Bundgaard,Advanced Drug Delivery Reviews,8,1-38(1992)；
e)H.Bundgaard,等人,Journal of Pharmaceutical Sciences,77,285(1988)；
f)N.Kakeya,等人,Chem.Pharm.Bull.,32,692(1984)；
g)T.Higuchi和V.Stella,“Pro-drugs as Novel Delivery Systems”,A.C.S.Symposium Series,第14卷；和
h)E.Roche(编者),“Bioreversible Carriers in Drug Design”,PergamonPress,1987。
式I的化合物的体内效果通过在给予式I的化合物之后在人类或动物体内形成的一种或更多种代谢物来部分地发挥。如上所述，式I的化合物的体内效果也可以通过前驱体化合物(前药)的代谢来发挥。
还应认识到，式I的化合物也可以被共价连接(在任何合适的位置处)至其它基团，诸如例如增溶部分(例如，PEG聚合物)、能够使其被键合至固体载体的部分(诸如例如含有生物素的部分)和靶向配体(诸如抗体或抗体片段)。
合成
在下面描述的合成方法的描述中以及在提到的用于制备起始原料的合成方法中，应理解，所有提出的反应条件包含溶剂、反应气氛、反应温度的选择、实验的持续时间和操作程序的选择可以由本领域技术人员来选定。
有机合成领域的技术人员应理解，存在于分子的各部分上的官能度必须与所利用的试剂和反应条件可相容。
必要的起始原料可以通过有机化学的标准程序来获得。结合下面代表性的工艺变型并且在随附的实施例内描述了此类起始原料的制备。可选择地必要起始原料通过与有机化学工作者的普通技能内所例证的那些类似的程序是可得到的。
应认识到，在下面所定义的工艺中的本发明的化合物的合成期间或在某些起始原料的合成期间，可以合意地保护某些取代基基团以防止它们进行不期望的反应。熟练化学工作者将认识到，当需要此种保护时，此类保护基可以如何被放在适当位置并且随后被除去。
对于保护基的例子，请参见关于该主题的许多一般文章之一，例如，TheodoraGreen的‘Protective Groups in Organic Synthesis’(出版商：John Wiley&Sons)。当适合于除去讨论中的保护基时，可以通过文献中描述的或熟练化学工作者已知的任何便利方法来除去保护基，选择此类方法以便在最小干扰分子中其它基团的情况下实现保护基的除去。
因此，若反应物包含例如诸如氨基、羧基或羟基之类的基团，则可以合意地保护本文中所提到的一些反应中的基团。
举例来说，用于氨基或烷基氨基的合适的保护基是，例如，酰基例如烷酰基(alkanoyl)诸如乙酰基，烷氧羰基例如甲氧羰基、乙氧羰基或叔丁氧羰基，芳基甲氧羰基例如苄基氧羰基，或芳酰基例如苯甲酰基。用于上面的保护基的脱保护条件必要地随着保护基的选择而变化。因此，例如，酰基诸如烷酰基或烷氧羰基或芳酰基可以通过例如利用合适的碱诸如碱金属氢氧化物例如氢氧化锂或氢氧化钠来除去。可选择地，酰基诸如叔丁氧羰基可以例如通过用合适的酸如盐酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸处理来除去，而芳基甲氧羰基诸如苄基氧羰基可以例如通过在钯碳催化剂诸如钯碳上氢化来除去，或者通过用路易斯酸例如BF3.OEt2处理来除去。用于伯氨基的合适的可选择的保护基是例如可以用烷基胺例如二甲基氨基丙胺或利用联氨处理来除去的邻苯二甲酰基。
本发明的化合物可以通过使用WO2007/072017和WO2009/001021中所描述的一般合成技术来制备，通过引用将其全部内容并入本文。
在特定方面，本发明提供一种合成式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的方法，该方法包括：
a)使式A的化合物：
其中R1和R2各自具有上文中陈述的任一种意义；
与1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛在合适的还原剂的存在下反应；和
b)其后任择地，且若必要时：
i)除去存在的任何保护基；
ii)将式I的化合物转化成式I的另一种化合物；和/或
iii)形成其药学上可接受的盐或溶剂化物。
式A的化合物与1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛之间的反应合适地在合适的溶剂的存在下进行。任何合适的溶剂或溶剂混合物皆可以用于该反应。合适的溶剂的实例包含DMSO、水、DMF和醇类，例如EtOH。
合适地，反应在合适的还原剂诸如Na2S2O4水溶液的存在下进行。26
本领域技术人员还将能够选择使用适当的反应条件以便促进该反应。
该反应还可以在升高的温度下进行，例如可以使用50至190℃范围内的温度(取决于溶剂的性质)。
可以使用本领域公知的技术分离并纯化生成的式I的化合物。
本文中所定义的工艺还可以包括步骤：使式I的化合物经历盐交换，特别是在式I的化合物被形成为不同盐形式的混合物的情况下。盐交换合适地包括使式I的化合物固定在合适的固体载体或树脂上，和利用适当的酸洗脱该化合物以得到式I的化合物的单盐。
式A的化合物可以通过本领域中已知的工艺来制备。
下面的方案1中示出了经由式A的中间体制备式I的化合物的合适程序的实例。
试剂和条件：上面的步骤(a)和(b)仅涉及1，2，4-噁二唑衍生物，因为1-(4-氯苄基)哌嗪和1-((5-甲基-1，2，4-噁二唑-3-基)甲基)哌嗪是可商购的：(a)对于1，2，4-噁二唑衍生物：CH2Cl2，3-(氯甲基)-1，2，4-噁二唑、Et3N，50℃；(b)对于1，2，4-噁二咐衍生物：TFA，CH2Cl2、室温；(c)对于4-氯苄基和1，2，4-噁二唑衍生物：2-氨基-4，5-二氯-3-硝基吡啶、iPrNEt，iPrOH，加热；(d)对于4-氯苄基和1，2，4-噁二唑衍生物：1，3-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛、EtOH、1M Na2S2O4水溶液，80℃。
方案1
2-氨基-4,5-二氯-3-硝基吡啶(4,5-二氯-3-硝基吡啶-2-胺)和2-氨基-5-溴-4-氯-3-硝基吡啶(5-溴-4-氯-3-硝基吡啶-2-胺)，是用于合成2-氨基-3-硝基吡啶衍生物A的前驱体，如之前描述的26来制备或者通过2-氨基-4-氯-3-硝基吡啶(4-氯-3-硝基吡啶-2-胺)的卤化来制备40。
药物组合物
根据本发明的又一个方面提供一种包括与药学上可接受的稀释剂或载体结合的如上文中所定义的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的药物组合物。
本发明的组合物可以是以下形式：适合于口服应用(例如作为片剂、锭剂、硬胶囊或软胶囊、水性悬浮体或油状悬浮体、乳剂、可分散的粉末或颗粒、糖浆或酏剂)、适合于局部应用(例如作为乳膏、软膏、凝胶或水性或油性的溶液或悬浮体)、适合于通过吸入来给药(例如作为细碎的粉末或液态气雾剂)、适合于通过吹入来给药(例如作为细碎的粉末)或适合于肠胃外给药(例如作为用于静脉内给药、皮下给药、肌肉内给药、腹膜内给药或肌肉内给药的无菌的水溶液或油溶液或者作为用于直肠给药的栓剂)。
本发明的组合物可以使用常规的药物赋形剂通过本领域公知的常规程序来获得。因此，意图用于口服应用的组合物可以含有例如一种或更多种着色剂、甜味剂、调味剂和/或防腐剂。
用于在增殖性疾病的治疗中使用的本发明的化合物的有效量是足以对症缓解恒温动物、特别是人类的感染症状，以减缓感染的进度，或者以减轻具有感染症状的病人转坏的风险的量。
与一种或更多种赋形剂结合以生成单一剂型的活性成分的量将必要地取决于所治疗的主体和特定的给药途径而变化。例如，意图用于为人类口服给药的配方将一般地含有混合有适当且合宜的量的赋形剂(可以按总组合物的重量计约5％至约98％而变化)的例如从0.5mg至0.5g的活性剂(更合适地从0.5至100mg，例如从1至30mg)。
根据公知的医学原理，式I的化合物的用于治疗或预防目的的剂量大小将根据动物或病人的病症的性质和严重性、年龄和性别以及给药途径而自然地变化。
在使用出于治疗或预防目的的本发明的化合物时，鉴于如果需要给予分份剂量，本发明的化合物将通常被给予使得接受范围内的每日剂量，例如0.1mg/kg至30mg/kg体重。一般而言，当采用肠胃外途径时将给予低剂量。因此，例如，对静脉内给药或腹膜内给药而言，将通常使用例如0.1mg/kg至30mg/kg体重的范围内的剂量。类似地，对通过吸入给药而言，将使用例如0.05mg/kg至25mg/kg体重的范围内的剂量。口服给药也可以是合适的、特别是以片剂形式。通常，单位剂量形式将含有约0.5mg至0.5g的本发明的化合物。
治疗用途和应用
本发明的化合物是极光激酶和FLT3活性的抑制剂。
因此，在另一方面，本发明提供一种抑制细胞中的极光激酶活性和/或FLT3的方法，该方法包括为所述细胞给予如本文中所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在又一方面，本发明提供一种在体外或在体内抑制极光激酶活性和/或FLT3的方法，所述方法包括使细胞与如本文中所定义的有效量的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物接触。
在另一方面，本发明提供一种在有这种抑制需要的人类或动物受治疗者抑制极光激酶活性和/或FLT3的方法，该方法包括为所述受治疗者给予有效量的如本文中所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
极光激酶可以是极光激酶A、B或C。
在一方面，本发明提供一种用于在治疗中使用的如本文中所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或药物组合物。
在另一方面，本发明提供一种用于在治疗与极光激酶活性(和/或FLT3活性)相关的疾病或病症中的使用的、如本文中所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一方面，本发明提供如本文中所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制造在治疗与极光激酶活性(和/或FLT3活性)相关的疾病或病症中使用的药剂中的用途。
在又另一方面，本发明提供一种治疗人类或动物受治疗者的增殖性疾患的方法，该方法包括为所述受治疗者给予治疗上可接受的量的如本文中所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在又另一方面，本发明提供一种如本文中所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于在治疗增殖性疾患中使用。
在又另一方面，本发明提供如本文中所定义的式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制造在治疗增殖性疾患中使用的药剂中的用途。
在另一方面，本发明提供一种用于在治疗癌症中使用的如本文中所定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或药物组合物。
在另一方面，本发明提供如本文中所定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制造治疗癌症中使用的药剂中的用途。
在另一方面，本发明提供一种在有这种治疗需要的受治疗者中治疗癌症的方法，所述方法包括为所述病人给予治疗上有效量如本文中所定义的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物或药物组合物。
本发明的化合物可以是有用的，例如用于治疗结直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌或膀胱癌和肾癌或白血病或淋巴瘤。
特别地，本发明的化合物对治疗白血病而言是有用的。极光激酶的高表达已在白血病(细胞系和患者群组)中被证实30-33。另外，FLT3基因的内部串联重复(FLT3-ITD)导致组成型FLT3激酶激活34。明显地，FLT3-ITD在患有AML的成人的20-35％中发生并且在儿童的15％中发生，赋予两种年龄组不良预后。35
因此，在特定的实施方式中，该化合物对于治疗白血病诸如急性髓性白血病(AML)、骨髓发育异常综合征(MDS)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)和多发性骨髓瘤而言是有用的。本发明的化合物也被认为对于治疗成神经细胞瘤是有用的。
期望本发明的化合物在利用标准疗法治疗失败的病人中是特别有益的。据预测，本发明的化合物对治疗患有白血病(例如，AML)的老年病人(例如，超过60岁)而言也将是有价值的，因为期望此类病人得益于极光激酶抑制。
还期望本发明的化合物在治疗患有白血病(例如，新近诊断的FLT3-突变的AML和婴儿AML)以及成神经细胞瘤的儿童中是有价值的。
给药途径
本发明的化合物或包含活性化合物的药物组合物可以通过任何便利给药途径无论是全身地/外围地或是局部地(即，在期望作用的位置处)给予至受治疗者。
给药途径包括但不限于，口服(例如，通过摄食)；口腔含服；舌下；经皮(包括例如，通过贴剂、膏药等等)；跨黏膜(包括例如，通过贴剂、膏药等等)；鼻内(例如，通过鼻腔喷雾)；眼睛(例如，通过点眼液)；肺(例如，通过使用例如气雾剂例如穿过口或鼻的吸入或吹入疗法)；直肠(例如，通过栓剂或灌肠剂)；阴道(例如，通过阴道栓)；肠胃外，例如通过注射，包括皮下、皮肤内、肌肉内、静脉内、动脉内、心内、鞘内、椎管内、囊内、囊下、眶内、腹膜内、气管内、表皮下、关节内、蛛网膜下和胸骨内；通过例如皮下地或肌内地植入储库(depot)或储药器(reservoir)。
联合疗法
本发明的化合物可以作为单一疗法而单独给药或者可以与一种或更多种外加的治疗剂结合地给药。一种或更多种外加的治疗剂的选择将当然取决于待治疗的疾病或病症或其严重性而变化。
常见的是，使用联合疗法治疗增殖性疾患，诸如癌症。因此，上文中所定义的抗增殖治疗可以被用作唯一疗法或者可以包括除本发明的化合物之外的常规的手术或放射疗法或化学疗法。这种化学疗法可以包括下列种类的抗肿瘤剂的一种或更多种：
(i)其它的抗增殖/抗肿瘤的药物及其组合，如内科肿瘤学中所使用的，诸如烷化剂(例如顺铂、奥沙利铂、卡铂、环磷酰胺、氮芥、美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、替莫唑胺和亚硝基脲)；抗代谢物(例如吉西他滨和抗叶酸剂诸如氟嘧啶像5-氟尿嘧啶和喃氟啶、雷替曲塞、氨甲喋呤、阿糖胞苷和羟基脲)；抗肿瘤抗生素(例如蒽环类像亚德里亚霉素、博来霉素、阿霉素、道诺霉素、表阿霉素、伊达比星、丝裂霉素-C、更生霉素和光神霉素)；抗有丝分裂剂(例如长春花生物碱类像长春新碱、长春碱、长春地辛和长春瑞滨和紫杉烷类像紫杉酚和多西他赛和保罗激酶(polokinase)抑制剂)；和拓扑异构酶抑制剂(例如表鬼臼毒素类像依托泊苷和替尼泊苷、安吖啶、拓扑替康和喜树碱)之类；
(ii)细胞抑制剂，诸如抗雌激素(例如他莫昔芬、氟维司群、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬和艾多昔芬(iodoxyfene))、抗雄激素(例如比卡鲁胺、氟他胺、尼鲁米特和醋酸环丙孕酮)、LHRH拮抗剂或LHRH激动剂(例如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)、孕激素(例如醋酸甲地孕酮)、芳香酶抑制剂(例如作为阿那曲唑、来曲唑、伏氯唑和依西美坦)和5α-还原酶的抑制剂诸如非那雄胺；
(iii)抗入侵剂[例如c-Src激酶家族抑制剂像4-(6-氯-2,3-亚甲基二氧苯胺基)-7-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基]-5-四氢呋喃-4-基氧喹唑啉(AZD0530；国际专利申请WO01/94341)、N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-{6-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]-2-甲基嘧啶-4-基氨基}噻唑-5-甲酰胺(达沙替尼、BMS-354825；J.Med.Chem.,2004,47,6658-6661)和博舒替尼(SKI-606)和金属蛋白酶抑制剂像马立马司他、尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂受体功能的抑制剂或针对乙酰肝素酶的抗体]；
(iv)生长因子功能的抑制剂：例如此类抑制剂包含生长因子抗体和生长因子受体抗体(例如抗erbB2抗体曲妥珠单抗[HerceptinTM]、抗EGFR抗体帕尼单抗(panitumumab)抗erbB1抗体西妥昔单抗[C225]和Stern等人的Criticalreviews in oncology/haematology,2005,Vol.54,pp11-29所公开的任何生长因子或生长因子受体抗体)；此类抑制剂还包含酪氨酸激酶抑制剂，例如表皮生长因子家族的抑制剂(例如EGFR家族酪氨酸激酶抑制剂，例如N-(3-氯-4-氟苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉-4-胺(吉非替尼，ZD1839)、N-(3-乙炔基苯基)-6,7-双(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(埃罗替尼，OSI-774)和6-丙烯酰氨-N-(3-氯-4-氟苯基)-7-(3-吗啉代丙氧基)-喹唑啉-4-胺(CI 1033)、erbB2酪氨酸激酶抑制剂诸如拉帕替尼)；肝细胞生长因子家族的抑制剂；胰岛素生长因子家族的抑制剂；血小板衍生的生长因子家族的抑制剂，例如伊马替尼和/或尼洛替尼(AMN107)；丝氨酸/苏氨酸激酶的抑制剂(例如Ras/Raf信号传导抑制剂，例如法尼基转移酶抑制剂，例如索拉菲尼(BAY 43-9006)、替吡法尼(R115777)和洛那法尼(SCH66336))、通过MEK和/或AKT激酶的细胞信号传导的抑制剂、c-kit抑制剂、abl激酶抑制剂、PI3激酶抑制剂、Plt3激酶抑制剂、CSF-1R激酶抑制剂、IGF受体(胰岛素样生长因子)激酶抑制剂；极光激酶抑制剂(例如AZD1152、PH739358、VX-680、MLN8054、R763、MP235、MP529、VX-528和AX39459)和细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂，例如CDK2和/或CDK4抑制剂；
(v)抗血管生成剂，例如抑制血管内皮生长因子的作用的那些，[例如抗血管内皮细胞生长因子的抗体贝伐单抗(AvastinTM)和例如VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂，例如凡德他尼(ZD6474)、瓦他拉尼(PTK787)、舒尼替尼(SU11248)、阿西替尼(AG-013736)、帕唑帕尼(GW786034)和4-(4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧)-6-甲氧基-7-(3-吡咯烷-1-基丙氧基)喹唑啉(AZD2171；WO 00/47212内的实施例240)、诸如国际专利申请WO97/22596、WO97/30035、WO97/32856和WO 98/13354中公开的那些化合物和由其它机理起作用的化合物(例如利诺胺、整合素αvβ3功能的抑制剂和血管抑制素)]；
(vi)血管损伤剂，例如康普瑞汀A4和国际专利申请WO 99/02166、WO 00/40529、WO00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434和WO 02/08213中所公开的化合物；
(vii)内皮素受体拮抗剂，例如齐泊腾坦(zibotentan)(ZD4054)或阿曲生坦；
(viii)反义疗法，例如针对上面列出的靶的那些，例如ISIS 2503，抗Ras反义；
(ix)基因治疗方法，包括例如，结合溶瘤腺病毒方法使用本发明的化合物以替代畸变的基因诸如畸变的p53或畸变的BRCA1或BRCA2、GDEPT(基因定向的酶前药治疗)方法诸如使用胞嘧啶脱氨酶、胸苷激酶或细菌硝基还原酶的那些和用以增加病人对化学疗法或放射疗法诸如多药抗性基因疗法的耐受性的方法；和
(x)免疫治疗方法，包含例如用以增加病人肿瘤细胞的免疫原性的离体和体内方法诸如用细胞因子(例如白细胞介素2、白细胞介素4或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)转染、减少T-细胞无反应性的方法、使用被转染的免疫细胞诸如细胞因子转染的树突细胞的方法、使用细胞因子转染的肿瘤细胞系的方法和使用抗独特型抗体的方法。
这种共同/联合治疗可以通过治疗的个体成分的同时给药、顺序给药或单独给药来实现。这种联合产品采用上文中所描述的剂量范围内的本发明的化合物和在其被认可的剂量范围内的其它药学的活性剂。
根据本发明的特定方面，提供适合于在治疗如本文中所定义的、牵涉蛋白激酶活性的疾病或病症(例如，癌症)中使用的联合，其包含如上文中所定义的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和另一种治疗剂(例如，抗肿瘤剂)。
根据本发明的这一方面，提供适合于在治疗癌症(例如包含实体肿瘤的癌症)中使用的联合，其包含如上文中所定义的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和基于上面的(i)-(ix)所列出的抗肿瘤剂的任一种。
本发明的又一方面提供与选自基于上文中(i)-(ix)之下所列出的一种的抗肿瘤剂联合的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
本文中，若使用术语“联合(combination)”，则应理解，其指的是同时的、单独的或顺序的给药。在本发明的一方面“联合”指的是同时给药。在本发明的另一方面“联合”指的是单独给药。在本发明的又一方面“联合”指的是顺序给药。若给药是顺序的或单独的，则给药第二成分的延迟不应当到以致损失该联合的有益效果的程度。
根据本发明的又一方面，提供包含与一种或更多种外加的治疗剂(例如，选自上文中(i)-(ix)之下所列出的一种的抗肿瘤剂)联合的、与药学上可接受的稀释剂或载体结合的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的药物组合物。
期望本发明的化合物作为与用于治疗老年病人(即，超过60岁的病人)的现有标准护理的联合疗法的一部分是特别有用的，病人本身可以非常得益于极光激酶抑制(无关它们的FLT3状态)。
还期望本发明的化合物作为与用于治疗患有白血病(例如，AML)或成神经细胞瘤的儿童的现有标准护理的联合疗法的一部分是特别有用的。
实施例
附图简述
图1示出实施例1的化合物针对无胸腺小鼠中的MV4-11人类肿瘤异种移植物的功效：(A)相对肿瘤体积±SEM。(B)小鼠体重。
图2示出：(A)在以50和100mg/kg给药之后在最终剂量之后2h得到的样品的全血浆药物浓度和肿瘤药物浓度和游离血浆药物浓度。(B)实施例1的化合物抑制MV4-11人类肿瘤异种移植物中在S10的组蛋白H-3磷酸化和在Y694的STAT5的磷酸化(4天的研究)。肿瘤样品在最终剂量之后的2h获得。总组蛋白H3、总STAT5和GAPDH用作装载对照。
化合物的合成
实施例1至3
通用的材料和方法
可商购的起始原料、试剂和干燥的溶剂按所供应的使用。使用Merck硅胶60(0.025-0.04mm)进行快速柱层析。柱层析也可以在使用isolute快速硅胶柱(isoluteFlash silica columns)的FlashMaster个体单元(personal unit)或使用Biotage快速硅胶盒(Biotage Flash silica cartridges)的Biotage SP1纯化系统上进行。制备TLC在Analtech或Merck板上进行。离子交换层析使用酸性Isolute Flash SCX-II盒来进行。基于Bruker Avance-500报告1H NMR光谱。将样品制备成氘化溶剂中的溶液并且参考适当的内部未氘化的溶剂峰或四甲基硅烷。在四甲基硅烷的ppm(δ)低磁场中记录化学位移。LC-MS分析基于耦合至具有ESI源的Waters/Micromass LCT飞行时间质谱仪的具有WatersAlliance 2795分离模块和Waters 2487双波长吸收检测器的WatersLCT来进行。分析分离在30℃下基于以下任一进行：以254nm检测的使用2mL/min的流速按3.5分钟梯度洗脱的Merck Chromolith SpeedROD柱(RP-18e,50x 4.6mm)或以254nm检测的使用1.5mL/min的流速按3.5分钟梯度洗脱的Merck Purospher STAR柱(RP-18e,30x 4mm)。流动相是都含有0.1％的甲酸的甲醇(溶剂A)和水(溶剂B)的混合物。滴度洗脱如下：1：9(A/B)至9：1(A/B)经2.25分钟、9：1(A/B)0.75分钟，然后返回至1：9(A/B)经0.3分钟、最终1：9(A/B)0.2分钟)。
LC-HRMS分析基于耦合至具有双多模式APCI/ESI源的6520Quadrupole飞行时间质谱仪的Agilent 1200系列HPLC和二极管阵列检测器来进行。分析分离在30℃下基于以254nm检测的使用1.5mL/min的流速按4分钟梯度洗脱的Merck Purospher STAR柱(RP-18e,30x 4mm)来进行。流动相是都含有0.1％的甲酸的甲醇(溶剂A)和水(溶剂B)的混合物。梯度洗脱如下：1：9(A/B)至9：1(A/B)经2.5分钟、9：1(A/B)1分钟，然后返回至1：9(A/B)经0.3分钟、最终1：9(A/B)0.2分钟)。以下参考质量用于HRMS分析：咖啡因[M+H]+195.087652；(六(1H,1H,3H-四氟戊氧基)磷腈[M+H]+922.009798)和六(2,2-二氟乙氧基)磷腈[M+H]+622.02896或利血平[M+H]+609.280657。
实施例1：6-氯-7-(4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基)-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)- 3H-咪唑并[4,5-b]吡啶的制备
4-氯-3-硝基吡啶-2-胺40
向100mL含有在冰浴中冷却的2-氨基-4-氯吡啶(0.480g，3.75mmol)的圆底烧瓶中加入浓硫酸(5.4g)。反应混合物搅拌5分钟，然后逐滴加入硝酸(70％；0.36g)。反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后加热至55℃并在该温度下搅拌1h。使其冷却至室温并用冰水稀释。用10％的NaOH水溶液将pH仔细地调节至～7.5，其上形成黄色沉淀。将该沉淀过滤掉，用水洗涤并在P2O5上真空干燥。通过硅胶柱层析(用二氯甲烷洗脱)来纯化产物以提供按洗脱次序：作为黄色固体的4-氯-3-硝基吡啶-2-胺(0.210g，32％)，1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)6.87(d，J＝5.2Hz，1H，吡啶C-H)，7.21(s，2H，NH2)，8.11(d，J＝5.2Hz，1H，吡啶C-H)。
4-氯-5-硝基吡啶-2-胺(0.080g，12％)：1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)6.58(s，1H，吡啶C-H)7.58(s，2H，NH2)，8.79(s，1H，吡啶C-H)。
4,5-二氯-3-硝基吡啶-2-胺
将4-氯-3-硝基吡啶-2-胺(0.10g,0.58mmol)溶解于干燥的乙腈(20mL)中。然后向该经搅拌的溶液加入N-氯琥珀酰亚胺(0.094g，0.70mmol)，并且在80℃下加热反应混合物1h。真空除去挥发物和通过硅胶柱层析(用二氯甲烷洗脱)纯化残渣以提供作为浅褐色粉末的标题化合物(0.125g，85％)。1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)7.35(s，2H，NH2)，8.36(s，1H，6-H)。
5-氯-4-(4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基)-3-硝基吡啶-2-胺
向2-氨基-4,5-二氯-3-硝基吡啶(0.152g，0.73mmol)和异丙醇(22mL)的混合物加入1-(4-氯苄基)哌嗪(0.165g，0.78mmol)，接下来加入二异丙基乙胺(0.17mL，0.97mmol)。在45℃下加热反应混合物18h，然后允许冷却至室温，并用异丙醇(5mL)稀释。通过过滤收集沉淀，用异丙醇和二乙醚洗涤。因此得到作为黄色固体的标题化合物(0.215g，77％)；1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)2.48(br s，被DMSO峰掩盖，4H，哌嗪C-H)，3.06(br t，J＝4.3Hz，4H，哌嗪C-H)，3.52(s，2H，NCH2C6H4Cl)，6.95(s，2H，NH2)，7.35(d，J＝8.5Hz，2H)和7.38(d，J＝8.5Hz，2H)(3,5-ArH和2,6-ArH)，8.06(s，1H，6-H)；LC-MS(ESI，m/z)：Rt＝1.70分钟-382，384，386[(M+H)+，Cl2同位素模式]。
6-氯-7-(4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基)-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶
向5-氯-4-(4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基)-3-硝基吡啶-2-胺(0.076g，0.20mmol)和EtOH(4.0mL)的混合物加入1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(0.027g，0.22mmol)，接下来加入新制备的Na2S2O4水溶液(1M；0.85mL，0.85mmol)。在80℃下搅拌反应混合物24h，然后允许其冷却至室温，真空浓缩，并且残渣被硅胶吸收并将其放在10g Isolute硅胶柱上。用乙酸乙酯/二氯甲烷(v/v；1：1)洗脱，然后用乙酸乙酯/二氯甲烷(v/v；1：1)的4％甲醇溶液洗脱提供作为用二乙醚研碎之后的白色固体的标题化合物(0.023g，25％)。
1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)2.51(s，被溶剂峰掩盖，吡唑3-CH3)，2.57(br s，4H，哌嗪C-H)，3.54(s，2H，N-CH2C6H4Cl)，3.68(br s，4H，哌嗪C-H)，3.84(s，3H，吡唑N-Me)，7.37(d，J＝8.5Hz，2H)和7.40(d，J＝8.5Hz，2H)(C6H4Cl)，8.02(s，1H),和8.18(s，1H)(吡唑5-H和咪唑并[4,5-b]吡啶5-H)，12.95(br s，1H，咪唑并[4,5-b]吡啶N-H)；LC-MS(ESI，m/z)：Rt＝1.97分钟-456，458，460[(M+H)+，Cl2同位素模式]。
HRMS：测试值(Found)：456.1457，C22H24Cl2N7(M+H)+计算值：456.1465.
该化合物也可以按范围从0.80g至1.80g的大量且按范围从54％至70％的产率来生产。使用如上所述的相同的方法，但在操作过程中，反应混合物在水和氯仿之间被分开。水层用氯仿和乙酸乙酯萃取，并且干燥合并后的有机物并真空浓缩。DMSO也可以用作替代EtOH的溶剂，并且在这种情况下在120℃下搅拌反应混合物3h。
实施例2：3-((4-(6-氯-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶- 7-基)哌嗪-1-基)甲基)-1,2,4-噁二唑的制备
4-((1,2,4-噁二唑-3-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向叔丁氧羰基-哌嗪(571mg，3.07mmol)和3-(氯甲基)-1,2,4-噁二唑(400mg，3.37mmol)的CH2Cl2(30mL)溶液中加入三乙胺(1.70mL，12.3mmol)。在50℃下搅拌反应22h之后在真空浓缩以得到粗制的油状白色固体。纯化通过用MeOH/CH2Cl2(5％)洗脱的基于硅胶(4x 12)的快速层析来实现，以得到作为白色固体的标题化合物(555mg，67％)。1H-NMR(500MHz，CDCl3)1.43(s，9H，C(CH3)3)，2.52(app t，J＝4.9Hz，4H，CH2)，3.45(appt，J＝4.9Hz，4H，CH2)，3.78(s，2H，CH2C-)，8.71(s，1H，CHar)；LC-MS(ESI，m/z)：Rt＝1.67分钟-213(M-tBu)+，169(M-Boc)+。
4-(4-((1,2,4-噁二唑-3-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氯-3-硝基吡啶-2-胺
向4-((1,2,4-噁二唑-3-基)甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(213mg，0.790mmol)的CH2Cl2(18mL)溶液加入TFA(1.8mL，23.8mmol)，并且在室温下搅拌该溶液11/2h。真空浓缩反应，与甲苯共沸(x2)并在真空干燥器(含有KOH)中干燥过夜以得到黄色的油。将粗制的油溶解于iPrOH(4.4mL)中，并加入2-氨基-3-硝基-4,5-二氯吡啶(190mg，0.752mmol)和DIPEA(520μl，3.00mmol)。在50℃下搅拌该溶液4h。冷却期间，过滤沉落的黄色沉淀，用Et2O洗涤，真空干燥，以得到作为黄色固体的标题化合物(165mg，0.486，65％)。真空浓缩滤液以得到715mg油状黄色固体。纯化通过基于硅胶(4x11)的用EtOAc/己烷(40-50％)洗脱的快速层析来实现，以得到作为黄色固体的标题化合物(42mg，16％)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)2.74(app t，J＝4.1Hz，4H，-CH2-)，3.25(t，J＝4.8Hz，4H，-CH2-)，3.85(s，2H，-CH2C-)，5.77(s，2H，NH2)，7.99(s，1H，CHar)，8.72(s，1H，-C(Cl)CH-)。
LC-MS(ESI，m/z)：Rt＝1.56分钟-340，342[(M+H)+，Cl同位素模式]。
3-((4-(6-氯-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-1,2,4-噁二唑
向4-(4-((1,2,4-噁二唑-3-基)甲基)哌嗪-1-基)-5-氯-3-硝基吡啶-2-胺(50.0mg，0.147mmol)和1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(19.2mg，0.155mmol)的EtOH(3.4mL)溶液加入1M Na2S2O4(0.588mL，0.588mmol，新制备的)，并且将该溶液加热至80℃并搅拌15h同时对空气开放。一旦冷却，就真空蒸发反应，并装载到硅胶上干燥残渣。纯化通过基于的硅胶(2x 14)的用MeOH/CH2Cl2(5-7.5％)洗脱的快速层析来实现，以得到作为浅黄色固体的标题化合物(26mg，43％)。
1H-NMR(500MHz，CDCl3)2.58(s，3H，CH3)，2.81(app t，J＝4.4Hz，4H，CH2)，3.82(app s，4H，CH2)，3.85(s，3H，NCH3)，3.88(s，2H，-CH2-)，7.62(br s，1H，CHar)，7.87(br s，1H，CHar)，8.74(s，1H，CHar)，13.04(s，1H，NH)；
LC-MS(ESI，m/z)：Rt＝1.91分钟-414，416[(M+H)+，Cl同位素模式]；
HRMS：测试值：436.1374，C18H20N9OClNa(M+Na)+计算值：436.1372。
实施例3：3-((4-(6-氯-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶- 7-基)哌嗪-1-基)甲基)-5-甲基-1,2,4-噁二唑的制备
2-氨基-5-氯-4-(4-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲基哌嗪-1-基)-3-硝基吡啶
使1-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲基]哌嗪盐酸盐(217mg，0.99mmol)和2-氨基-4,5-二氯-3-硝基吡啶(208mg，1.0mmol)在2-丙醇(5mL)中搅拌，并加入二异丙基乙胺(523μL，387mg，3.0mmol)。搅拌该混合物并在45℃下加热23h。冷却反应，并且滤除产物并用2-丙醇洗涤。真空干燥得到产物(246mg，69％)。1H-NMR(500MHz，CDCl3，)2.63(s，3H，CH3)，2.77(br m，4H，哌嗪C-H)，3.29(m，4H，哌嗪C-H)，3.76(s，2H，CH2)，5.27(s，2H，NH2)，8.02(s，1H，吡啶6-H)。
LC-MS(ESI，m/z)：Rt＝1.66分钟-354(M+H)+，35Cl同位素。
3-((4-(6-氯-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-5-甲基-1,2,4-噁二唑
向5-氯-4-(4-((5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲基)哌嗪-1-基)-3-硝基吡啶-2-胺(60.0mg，0.170mmol)和1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(22.2mg，0.179mmol)的EtOH(3.8mL)溶液加入1M Na2S2O4(0.678mL，0.678mmol，新制备的)，并且将该溶液加热至80℃并搅拌16h同时对空气开放。一旦冷却，就真空蒸发反应，并装载到硅胶上干燥残渣。纯化通过基于硅胶(3x 14)的用MeOH/CH2Cl2(5-7.5％)洗脱的快速层析来实现，以得到作为浅黄色固体的标题化合物。在EtOAc/Et2O中重结晶得到作为类白色固体的标题化合物(20mg，27％)。真空浓缩滤液，得到额外量的作为浅黄色固体的标题化合物(12mg，16％)。1H-NMR(500MHz，CDCl3)2.60(s，3H，CH3)，2.62(s，3H，CH3)，2.81(app t，J＝4.5Hz，4H，CH2)，3.76(s，2H，-CH2-)，3.87(app s，4H，CH2)，3.90(s，3H，NCH3)，7.77(br s，1H，CHar)，7.96(br s，1H，CHar)，12.18(s，1H，NH)；
LC-MS(ESI，m/z)：Rt＝1.95分钟-428，430[(M+H)+，Cl同位素模式]；
HRMS：测试值：450.1527，C19H22N9OClNa(M+Na)+计算值：450.1528。
实施例1至3的化合物的评价
通用的材料和方法
极光激酶分析：极光激酶IC50值如前述来测定。26,36
细胞活力试验：GI50值(50％细胞生长抑制浓度)如前述来测定。26,36
实施例1对于极光A和极光B抑制的细胞IC50值的测定：
使用Lipofectamine LTX在24孔板的Hela细胞中转染Myc-标签的极光A，并且在转染后24小时，用不同浓度的实施例1处理细胞2小时。然后使细胞溶解于2X LDS样品缓冲液中。来自不同样品的蛋白通过4-12％Bis-Tris NuPage(Invitrogen)凝胶分辨并且通过使用P-组蛋白H3(S10)和P-极光A(T288)抗体的蛋白质印迹来分析。使用Image J软件定量用于P-组蛋白H3和P-极光A的带并且使用Graphpad Prism计算IC50值。
小鼠肝微粒体稳定性：
在37℃下于磷酸盐缓冲盐水(10mM)中在NADPH(1mM)、UDPGA(2.5mM)和MgCl2(3mM)的存在下将化合物(10μM)与雄性CD1小鼠肝微粒体(1mg.mL-1)蛋白一起孵育。孵育进行0和30分钟。对照孵育通过从孵育反应省略NADPH和UDPGA来进行。剩余的百分比化合物在用LCMS分析之后被测定。
人类肝微粒体稳定性：
在37℃下与磷酸盐缓冲盐水(10mM)中在NADPH(1mM)、UDPGA(2.5mM)和MgCl2(3mM)的存在下将化合物(10μM)与集合混合性别的人类肝微粒体(1mg.mL-1)蛋白一起孵育。孵育进行0和30分钟。对照孵育通过从孵育反应省略NADPH和UDPGA来进行。剩余的百分比化合物在用LCMS分析之后被测定。
hERG抑制：在用于抑制hERG尾电流的高通量的基于细胞的电生理学试验中由Millipore测量以10μM化合物浓度的所有的hERG百分比抑制41，并且将值报告为多次测定的平均值。0.3％DMSO含水媒介物(aqueous vehicle)阴性对照给出了7-16％的抑制。西沙比利(1μM)阳性对照给出了96-104％的抑制。所有的hERG IC50值皆由Millipore来测定，41并且用于实施例1的hERG IC50也通过由全细胞电压钳制(whole-cell voltage-clamping)测量hERG尾电流的Cyprotex plc来测定。42
物理化学性质：LogD和pKa测量由英国剑桥的Sigma-Aldrich集团的成员Solid State Services来进行。
激酶选择性剖析：使用KINOMEScanTM技术的激酶剖析和Kd测定由美国加利福尼亚圣地亚哥的DiscoveRx公司的部门KINOMEscanwww.kinomescan.com.来进行；
体内完全PK(实施例1的化合物)：利用在10％DMSO、5％Tween 20的盐水中的实施例1的化合物(5mg kg-1)口服给药或静脉内给药小鼠(雌性Balb/C)。给药之后，将小鼠在5、15和30分钟和1、2、4、6和24h时处死。血液通过心脏穿刺被取出并离心以得到血浆样品。将血浆样品(100μL)加至分析的内部标准物(奥罗莫星；IS)，然后用300μL甲醇沉淀蛋白。然后离心(1,200×g，30分钟，4℃)，使用在耦合至6410三重四级质谱仪(Agilent Ltd.)的Agilent 1200液相色谱系统上的反相Acquity UPLC C18(Waters，50×2.1mm)分析柱和正离子模式ESI MRM通过LCMS分析所得到的上清液中实施例1的化合物水平。
人类肿瘤异种移植物功效研究：涉及动物的程序在由癌症研究的动物伦理委员会的研究所(The Institute of Cancer Research’s Animal Ethics Committee)陈述的指南内且按照国家指南进行：Workman P,Aboagye EO,Balkwill F,Balmain A,Bruder G,Chaplin DJ,Double JA,Everitt J,Farningham D,Glennie MJ,Kelland LR,Robinson V,Stratford IJ,Tozer GM,Watson S,Wedge SR,Eccles SA.Guidelines for the welfareand use of animals in cancer research.Brit J Cancer 102：1555-1577,2010。
用107FLT3-ITD MV4-11白血病细胞皮下植入雌性CrTacNCr-Fox1(nu)无胸腺小鼠。当异种植入物被完全确定时(植入后10天，至少100mm3的平均肿瘤体积)，利用媒介物(10％DMSO，20％PEG 400，5％Tween 80和65％水)或实施例1的化合物二者任一以两剂量(50mg/kg和100mg/kg)口服给药治疗动物(n＝5每组)。药量是每天两次持续7天，和每天一次持续另外的4天。
PK/PD研究：在含有完全确定的MV4-11异种移植物(植入后17天)的无胸腺小鼠中通过每日两次口服给药如上媒介物或50mg/kg和100mg/kg的实施例1的化合物来进行4-天PK/PD研究。在最终剂量后2h和6h收集血浆和肿瘤样品。
结果
极光激酶活性、细胞活性、微粒体稳定性、hERG抑制和物理化学性质
下表1中示出了示例性化合物针对极光A(生物化学试验)的活性、SW620细胞中基于细胞的GI50和hERG以及与这些化合物的微粒体稳定性相关的数据及其相应的clogP值。
表1
对极光-A IC50和SW620GI50测定而言，除非另有说明，结果是两个独立的测定的平均值或对于n>2而言平均值(±SD)。
a结果是一式三份进行的样品的平均值。
bMLM/HLM：30分钟孵育之后代谢的母体化合物的百分比。
cLogD7.4＝3.84(实验测定值)。
n.d.＝未测定。
当与WO2007/072017的实施例56和57的化合物相比，实施例1的化合物示出针对hERG的更低抑制活性。
基于这些结果，选择实施例1的化合物用于进一步的体外和体内表征。
激酶选择性
通过使用KINOMEScanTM技术在以1μM的浓度的442-激酶组(386种非突变激酶)中剖析实施例来1评估激酶选择性。28通过使试验中观察到>90％竞争(competition)(这被测量为<10％的对照)的非突变激酶的数量除以测试的非突变激酶的总数量来计算的S(10)选择性评分被测定为0.057，即，来自测试的386种非突变激酶中的22种击中(hits)。极光-A、-B和-C被有效地抑制，具有分别被测定为3.4％、1％和16％的％对照值。对FLT3激酶和包含FLT3-ITD、FLT3(D835Y)和FLT3(D835H)的FLT3突变体而言，这种初步筛选还揭示出大于94％的竞争。
随后通过如表2所示的Kd值测定(KINOMEScanTM技术)确认实施例1的化合物的FLT3和极光抑制活性。
表2：实施例1的化合物的Kd值
激酶 Kd(nM)
极光-A 7.5
极光-B 48
FLT3 6.2
FLT3(D835H) 11
FLT3(D835Y) 14
FLT3-ITD 38
FLT3(K663Q) 5.1
FLT3(N841I) 16
FLT3(R834Q) 110
实施例2和3还是FLT3和FLT3-ITD的有效抑制剂。实施例2针对FLT3和FLT3-ITD的Kd值分别被测定为4.4nM和14nM。同样地，实施例3针对FLT3和FLT3-ITD的Kd值分别被测定为5.6nM和26nM。
总之，该数据指出实施例1的化合物是遍及蛋白激酶组(kinome)少有脱靶激酶活性的FLT3和极光激酶的有效的双重抑制剂。
细胞试验评价
与双重FLT3/极光抑制活性一致，实施例1的化合物显示出包含HCT116人类结肠癌(GI50＝0.300μM)和人类FLT3-ITD阳性AML细胞系MOLM-13(GI50＝0.104μM)和MV4-11(GI50＝0.291μM)的人类肿瘤细胞系的范围内的抗增殖活性。在Hela细胞中，实施例1的化合物抑制细胞的极光-A和极光-B二者，IC50值分别为0.030μM和0.148μM。在这些基于细胞的试验中，在S10的H3磷酸化的减少被用作用于极光-B抑制的生物标记物，而极光-A在T288上的自身磷酸化被用作极光-A抑制的生物标记物。29
体内PK
表3中示出实施例1的化合物在小鼠中的体内PK结果。它是高度口服生物可利用的化合物(F＝100％)，清除率测定为0.058L/h(～48mL/min/kg)且Vd为0.066L(～3.3L/kg)。
表3：实施例1的化合物：小鼠血浆蛋白结合和PK参数(静脉内剂量：5mg/kg，口服剂 量：5mg/kg)
AML异种移植物模型
图1中示出了人类AML异种移植物模型中实施例1的化合物的活性。
参照图1，可以看到实施例1的化合物以剂量依赖方式强力抑制了MV4-11人类肿瘤异种移植物的生长而没有观察到由体重减轻所确定的毒性。当在11天后中断治疗时，在利用实施例1的化合物的100mg/kg剂量时间表治疗的小鼠中肿瘤是不可检测到的并且在利用50mg/kg剂量时间表治疗的小鼠中已降低至初始体积的42％。在平均肿瘤体积已增加了超过500％时从开始治疗的第18天淘汰对照小鼠。相比之下，当肿瘤发展至如下阶段时淘汰单一小鼠：第28天和第31天以50mg/kg和第46天和第56天以100mg/kg。在第60天终止该研究时每个治疗组中5分之三的小鼠(60％)不能逐渐发展生长着的肿瘤。
作为该有效的体内抑制效果的结果，经治疗的肿瘤太小以致不能为药物代谢动力学分析/药效分析提供材料。随后，重复的4-天PK/PD研究通过每日两次口服给药实施例1的50mg/kg和100mg/kg来进行。药效分析示出组蛋白H-3磷酸化的明显抑制和作为FLT3的下游靶的STAT5磷酸化的抑制(图2)。另外，在最终剂量之后2h得到的样品中的游离血浆的药物浓度被测定为分别针对50mg/kg和100mg/kg剂量时间表的222nM和488nM(图2)。游离血浆药物浓度明显高于实施例1的化合物针对相关的激酶的Kd值，即极光-A(Kd＝7.5nM)、极光-B(Kd＝48nM)、FLT3(Kd＝6.2nM)、FLT3-ITD(Kd＝38nM)。这些发现表明实施例1的化合物显著抑制了体内FLT3-ITD阳性AML人类异种移植物模型的生长，生物标志物调控和游离药物暴露与双重FLT3和极光激酶靶衔接一致。
细胞色素P450异构体的抑制
材料和方法
在该研究中使用两种比较例化合物，即6-溴-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-7-(4-(吡啶-3-基甲基)哌嗪-1-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(比较例1，实施例56，WO2007/072017)和6-溴-7-(4-(吡啶-3-基甲基)哌嗪-1-基)-2-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(比较例2，实施例57，WO2007/072017)。
比较例化合物和上面的实施例1至3的化合物以1μM、10μM和50μM与人类肝微粒体(0.5mg.ml-1)一起孵育。
使用探针底物的混合物来测定CYP同工酶的抑制(表4)。孵育样品10分钟，接着利用甲醇进行蛋白沉淀。使用反相液相色谱和具备多反应监测(MRM)的阳离子模式ESI测量每个样品中的底物代谢物。
表4：CYP同工酶探针底物浓度和检测到的代谢物
酶 探针底物 底物浓度(μM) 文献Km(μM) 代谢物
CYP1A2 非那西汀 10 10-50 对乙酰氨基酚
CYP2A6 香豆素 5 0.5-2 7-羟基香豆素
CYP2C9 甲苯磺丁脲 60 100-200 4-羟基甲苯磺丁脲
CYP2C19 美芬妥因 40 30-50 (+/-)-羟基美芬妥因
CYP2D6 丁呋洛尔 5 4-10 1-羟基丁呋洛尔
CYP3A4 咪达唑仑 3 3-5 1-羟基咪达唑仑
结果
表5：用于通过测试化合物抑制人类CYP同工酶的估计的IC 50值
CYP1A2 CYP2A6 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 CYP3A4
比较例1 10-50μM >50μM 10-50μM 10-50μM 1-10μM <1μM
比较例2 >50μM >50μM 10-50μM 10-50μM 10-50μM <1μM
实施例1 >50μM >50μM 10-50μM 10-50μM 10-50μM >50μM
实施例2 >50μM >50μM 10-50μM 10-51μM 10-50μM >50μM
实施例3 >50μM >50μM 10-50μM >50μM 10-50μM >50μM
实施例1-3未示出CYP同工酶的任何显示抑制(表5)，估计的IC50值高于10μM。
无化合物示出CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9或CYP2C19的显著抑制。两种比较例化合物示出CYP3A4的显著抑制，近似的IC50低于1μM，比较例1还抑制CYP2D6。因此，本发明的化合物相对于两种比较例化合物具备显著降低的CYP3A4抑制。
参考文献
1.Carmena,M et al.；Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2003,4,842-854.
2.Ducat D.et al.；Exp.Cell Res.2004,301,60-67.
3.Marumoto,T.et al.；Nat.Rev.Cancer 2005,5,42-50.
4.Barr,A.R.et al.J.Cell Sci.2007,120,2987-2996.
5.Bayliss,R et al.；Mol.Cell.2003,12,851-862.
6.Giet,R.et al.；J.Cell Biol.2001,152,669-681.
7.Gassmann,R.et al.；J.Cell Biol.2004,166,179-191.
8.Sessa,F.et al.；Mol.Cell,2005,18,379-391.
9.Bishop,J.D.et al.；J.Biol.Chem.2002,277,27577-27580.
10.Tanaka,T.et al.；Cancer Res.1999,59,2041-2044.
11.Bischoff,J.R.et al.；EMBO J.1998,17,3052-3065.
12.Gritsko,T.M.et al.；Clin.Cancer.Res.2003,9,1420-1426.
13.Reichardt,W.et al.；Oncol.Rep.2003,10,1275-1279.
14.Chieffi,P.et al.；J.Endocrinol.2004,181,263-270.
15.Araki,K.et al.；J Neurooncol.2004,67,53-64.
16.Sorrentino,R.et al.；J Clin Endocrinol Metab.2005,90,928-935.
17.Kimura,M.et al.；J.Biol.Chem.1999,274,7334-7340.
18.Pollard,J.R.et al.；J.Med.Chem.2009,52,2629-2651.
19.Green,M.R.et al.；Expert Opin.Drug Discov.2011,6,291-307.
20.Cheung,C.H.A.et al.；Expert Opin.Ther.Patents 2011,21,857-884.
21.Harrington,E.A.et al.；Nat.Med.2004,10,262-267.
22.Mortlock,A.A.et al.；J.Med.Chem.2007,50,2213-2224.
23.Fancelli,D.et al.；J.Med.Chem.2006,49,7247-7251.
24.Caprinelli.P.et al.；Mol.Cancer Ther.2007,6,3158-3168.
25.Payton,M.et al.；Cancer Res 2010,70,9846-9854.
26.Bavetsias,V.et al.；J.Med Chem.2010,53,5213-5228.
27.使用ChemBioDraw Ultra 12通过CambridgeSoft(www.cambridgesoft.com)计算CLogP.
28.使用KINOMEScanTM technology:www.kinomescan.com的激酶剖析.
29.Manfredi,M.G.et al.；Proc.Natl.Acad.Sci.USA 2007,104,4106-4111.
30.Ikezoe,T.et al.；Mol Cancer Ther 2007,6,1851-1857.
31.Ochi,T.et al.；Blood 2009,113,66-74.
32.Huang,X.-F.et al.；Blood 2008,111,2854-2865.
33.Walsby,E.et al.；Haematologica 2008,93,662-669.
34.Meshinchi,S.et al；Clin Cancer Res 2009,15,4263-4269.
35.Meshinchi,S.et al.；Blood 2006,108,3654-3661.
36.Chan,F.et al.；Mol Cancer Ther,2007,6,3147-3157.
37.Stirewalt,D.L.et al.；Nat Rev Cancer 2003,3,650-665.
38.Kindler,T.et al.；Blood 2010,116,5089–5102.
39.Levis,M.J.；Best Practice&Research Clinical Haematology 2010,23,489-494.
40.Bavetsias,V.et al,Bioorg.Med.Chem.Lett.2007,17,6567-6571.
41.Ion Channel Cardiac Profiler；Millipore:Billerica,MA:http:// www.millipore.com/life_sciences/flx4/ld_ion
42.hERG安全性试验；Cyprotex plc,Cheshire,UK；www.cyprotex.com
43.Roden,D.M.N.Engl.J.Med.2004,350,1013-1022.

Claims (10)

1.一种下面示出的式I的化合物：
其中：
R1是Br或Cl；
R2选自下面示出的式II或式III：
其中Ra是氢或甲基；
或其药学上可接受的盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R1是Cl。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中R1是Br。
4.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中R2具有式II。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中R2具有式III。
6.根据权利要求1和2中任一项所述的化合物，所述化合物选自以下任一种：
6-氯-7-(4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基)-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶；
3-((4-(6-氯-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-1,2,4-噁二唑；
3-((4-(6-氯-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-7-基)哌嗪-1-基)甲基)-5-甲基-1,2,4-噁二唑；
或其药学上可接受的盐。
7.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或更多种药学上可接受的赋形剂。
8.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐在制备用于治疗增殖性疾患的药剂中的用途。
9.根据权利要求8所述的用途，其中所述增殖性疾患是癌症。
10.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗急性髓性白血病的药剂中的用途。
CN201380032901.2A 2012-06-21 2013-06-21 药物活性化合物 Active CN104470922B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1211021.9A GB201211021D0 (en) 2012-06-21 2012-06-21 Pharmaceutically active compounds
GB1211021.9 2012-06-21
PCT/GB2013/051633 WO2013190319A1 (en) 2012-06-21 2013-06-21 Pharmaceutically active compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104470922A CN104470922A (zh) 2015-03-25
CN104470922B true CN104470922B (zh) 2016-08-24

Family

ID=46641296

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380032901.2A Active CN104470922B (zh) 2012-06-21 2013-06-21 药物活性化合物

Country Status (22)

Country Link
US (1) US9447092B2 (zh)
EP (1) EP2864328B8 (zh)
JP (1) JP6159397B2 (zh)
CN (1) CN104470922B (zh)
AU (1) AU2013279040B2 (zh)
BR (1) BR112014032142B1 (zh)
CA (1) CA2876357C (zh)
CY (1) CY1120608T1 (zh)
DK (1) DK2864328T3 (zh)
ES (1) ES2660159T3 (zh)
GB (1) GB201211021D0 (zh)
HR (1) HRP20180386T1 (zh)
HU (1) HUE036048T2 (zh)
IN (1) IN2015MN00045A (zh)
LT (1) LT2864328T (zh)
NO (1) NO2864328T3 (zh)
PL (1) PL2864328T3 (zh)
PT (1) PT2864328T (zh)
RS (1) RS56996B1 (zh)
RU (1) RU2654942C2 (zh)
SI (1) SI2864328T1 (zh)
WO (1) WO2013190319A1 (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201522532D0 (en) * 2015-12-21 2016-02-03 Cancer Rec Tech Ltd Novel pyrrolo[3,2-c]pyridine-6-amino derivatives
WO2017146253A1 (ja) 2016-02-26 2017-08-31 公益財団法人がん研究会 Ｈｐ１の機能に着目した抗癌剤のスクリーニング方法及び評価系
GB2596038B (en) * 2020-03-04 2022-12-14 Ellipses Pharma Ltd Salts and polymorphic forms of (6-chloro-7-(4-(4-chlorobenzyl)piperazin-1-yl)-2-(1,3-dimethyl-1H-pyrazol-4-yl)-3H-imidazo[4,5-B]pyridine)
GB2592622B (en) * 2020-03-04 2022-08-03 Ellipses Pharma Ltd Formulations of a dual aurora kinase/FLT3 inhibitor

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007072017A2 (en) * 2005-12-22 2007-06-28 The Institute Of Cancer Research Enzyme inhibitors
WO2009001021A1 (en) * 2007-06-26 2008-12-31 Chroma Therapeutics Ltd. Imidazopyridine derivatives useful as enzyme inhibitors for the treatment of cell proliferative and autoimmune diseases
CN101616920A (zh) * 2007-01-30 2009-12-30 比奥根艾迪克Ma公司 1-H-吡唑并(3,4b)嘧啶衍生物及其作为有丝分裂激酶调节剂的用途

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
IL125686A (en) 1996-02-13 2002-11-10 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives, processes for their preparation, pharmaceutical preparations containing them and their use in the manufacture of a drug with an anti-angiogenic effect and / or an effect of reducing vascular permeability
DE69709319T2 (de) 1996-03-05 2002-08-14 Astrazeneca Ab 4-anilinochinazolin derivate
GB9718972D0 (en) 1996-09-25 1997-11-12 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9714249D0 (en) 1997-07-08 1997-09-10 Angiogene Pharm Ltd Vascular damaging agents
GB9900334D0 (en) 1999-01-07 1999-02-24 Angiogene Pharm Ltd Tricylic vascular damaging agents
GB9900752D0 (en) 1999-01-15 1999-03-03 Angiogene Pharm Ltd Benzimidazole vascular damaging agents
CN1431999A (zh) 2000-05-31 2003-07-23 阿斯特拉曾尼卡有限公司 具有血管损伤活性的吲哚衍生物
UA73993C2 (uk) 2000-06-06 2005-10-17 Астразенека Аб Хіназолінові похідні для лікування пухлин та фармацевтична композиція
CN1255391C (zh) 2000-07-07 2006-05-10 安吉奥金尼药品有限公司 作为血管破坏剂的colchinol衍生物
MXPA02012903A (es) 2000-07-07 2004-07-30 Angiogene Pharm Ltd Derivados de colquinol como inhibidores de angiogenesis.
US7064215B2 (en) * 2001-07-03 2006-06-20 Chiron Corporation Indazole benzimidazole compounds
TWI372050B (en) * 2003-07-03 2012-09-11 Astex Therapeutics Ltd (morpholin-4-ylmethyl-1h-benzimidazol-2-yl)-1h-pyrazoles
EP2251341A1 (en) * 2005-07-14 2010-11-17 Astellas Pharma Inc. Heterocyclic Janus kinase 3 inhibitors
AU2009266806A1 (en) * 2008-07-03 2010-01-07 Exelixis Inc. CDK modulators
TWI617560B (zh) * 2010-09-14 2018-03-11 伊塞利克斯公司 PI3Kδ 抑制劑以及其應用和生產方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007072017A2 (en) * 2005-12-22 2007-06-28 The Institute Of Cancer Research Enzyme inhibitors
CN101616920A (zh) * 2007-01-30 2009-12-30 比奥根艾迪克Ma公司 1-H-吡唑并(3,4b)嘧啶衍生物及其作为有丝分裂激酶调节剂的用途
WO2009001021A1 (en) * 2007-06-26 2008-12-31 Chroma Therapeutics Ltd. Imidazopyridine derivatives useful as enzyme inhibitors for the treatment of cell proliferative and autoimmune diseases

Also Published As

Publication number Publication date
CN104470922A (zh) 2015-03-25
US20150266868A1 (en) 2015-09-24
JP2015520222A (ja) 2015-07-16
RU2015101702A (ru) 2016-08-10
CA2876357C (en) 2020-07-14
RU2654942C2 (ru) 2018-05-25
IN2015MN00045A (zh) 2015-10-16
CY1120608T1 (el) 2019-12-11
EP2864328B8 (en) 2018-01-24
EP2864328A1 (en) 2015-04-29
JP6159397B2 (ja) 2017-07-05
HUE036048T2 (hu) 2018-06-28
BR112014032142B1 (pt) 2022-03-03
AU2013279040B2 (en) 2017-11-16
PL2864328T3 (pl) 2018-06-29
ES2660159T3 (es) 2018-03-21
GB201211021D0 (en) 2012-08-01
LT2864328T (lt) 2018-04-10
PT2864328T (pt) 2018-03-12
HRP20180386T1 (hr) 2018-04-20
EP2864328B1 (en) 2017-12-06
RS56996B1 (sr) 2018-05-31
NO2864328T3 (zh) 2018-05-05
WO2013190319A1 (en) 2013-12-27
DK2864328T3 (en) 2018-03-12
US9447092B2 (en) 2016-09-20
CA2876357A1 (en) 2013-12-27
SI2864328T1 (en) 2018-04-30
AU2013279040A1 (en) 2015-01-29
BR112014032142A2 (pt) 2017-06-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2958898B1 (en) 2-(hetero)aryl-benzimidazole and imidazopyridine derivatives as inhibitors of asparagime emethyl transferase
JP5889795B2 (ja) 新規キナーゼモジュレーター
JP5001179B2 (ja) 化学物質
JP2022513967A (ja) Ｋｉｆ１８ａ阻害剤として有用なヘテロアリールアミド
JP5415403B2 (ja) ９−（ピラゾール−３−イル）−９ｈ−プリン−２−アミンおよび３−（ピラゾール−３−イル）−３ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−５−アミン誘導体および癌の処置のためのそれらの使用
CA2981530A1 (en) Substituted quinazoline compounds and methods of use thereof
CA2926328A1 (en) Substituted quinazolinyl and quinolinyl derivatives and pharmaceutical compositions thereof useful as inhibitors of kras g12c
JP2008540391A (ja) ピラゾリルアミノ置換ピリミジン、および癌の処置におけるそれらの使用
JP2019518059A (ja) ＰＩ３Ｋβ阻害剤としてのアザベンゾイミダゾール誘導体
JP2020502065A (ja) ８，９−ジヒドロイミダゾール［１，２−ａ］ピリミド［５，４−ｅ］ピリミジン−５（６Ｈ）−ケトン類化合物
EP2531502A1 (en) 1-(5-tert-butyl-2-phenyl-2h-pyrazol-3-yl)-3-[2-fluoro-4-(1-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1h-imidazo[4,5-b]pyridin-7-yloxy)-phenyl]-urea and related compounds and their use in therapy
CN114728945B (zh) 3,5-二取代吡唑化合物作为激酶抑制剂及其应用
CN104470922B (zh) 药物活性化合物
CN101208332A (zh) 作为egf和/或erbb2受体酪氨酸激酶抑制剂的喹唑啉衍生物
US20090312336A1 (en) Dihydropteridine compounds as anti proliferative agents
JP2018538324A (ja) 新規ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−６−アミノ誘導体
WO2013190320A1 (en) Imidazopyridines as inhibitors of aurora kinase and/or flt3
CN114026097B (zh) 取代的吡唑并喹唑啉酮化合物及其应用
JP2022548055A (ja) 置換イミダゾキノキサリン化合物およびその応用
EP2017277A1 (en) Thiophene-imidazopyridines

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20200313

Address after: England Atsushi

Patentee after: Cancer Research Institute

Patentee after: Royal Cancer Hospital

Address before: England Atsushi

Patentee before: CANCER RESEARCH TECHNOLOGY Ltd.

TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20200424

Address after: England Atsushi

Patentee after: Cancer Research Institute:Royal Cancer Hospital

Address before: England Atsushi

Patentee before: CANCER RESEARCH TECHNOLOGY Ltd.

TR01 Transfer of patent right